JPWO2020076987A5

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Publication number: JPWO2020076987A5
Application number: JP2021531422A
Authority: JP
Publication date: 2022-10-12

Claims

アミノ酸置換、アミノ酸欠失、アミノ酸付加、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのメンバーを含む、ヒト線維芽細胞増殖因子１（ＦＧＦ１）の多様体であって、得られたＦＧＦ１多様体が、配列番号１の野生型ＦＧＦ１と比較して、増加したタンパク質分解安定性を示す、前記多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、βループ内またはＣ末端付近にアミノ酸置換、アミノ酸欠失、アミノ酸付加、及びそれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）アンタゴニストである、請求項１～２に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、２８位、４０位、４７位、９３位、または１３１位に少なくとも１つのアミノ酸置換を含む、請求項１～３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、Ｄ２８Ｎ、Ｑ４０Ｐ、Ｓ４７Ｉ、Ｈ９３Ｇ、Ｌ１３１Ｒ、及びＬ１３１Ｋからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を含む、請求項３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、アミノ酸置換Ｌ１３１Ｒを含む、請求項３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、アミノ酸置換Ｌ１３１Ｋを含む、請求項３に記載の多様体。
前記多様体が、アミノ酸置換Ｄ２８Ｎ及びＬ１３１Ｒを含む、請求項３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、アミノ酸置換Ｄ２８Ｎ及びＬ１３１Ｋを含む、請求項３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、アミノ酸置換Ｑ４０Ｐ、Ｓ４７Ｉ、Ｈ９３Ｇ、及びＬ１３１Ｒを含む、請求項３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、アミノ酸置換Ｑ４０Ｐ、Ｓ４７Ｉ、Ｈ９３Ｇ、及びＬ１３１Ｋを含む、請求項３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、アミノ酸置換Ｄ２８Ｎ、Ｑ４０Ｐ、Ｓ４７Ｉ、Ｈ９３Ｇ、及びＬ１３１Ｒを含む、請求項３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、アミノ酸置換Ｄ２８Ｎ、Ｑ４０Ｐ、Ｓ４７Ｉ、Ｈ９３Ｇ、及びＬ１３１Ｋを含む、請求項３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、アミノ酸置換Ｌ１３１Ａを含まない、請求項３に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、検出可能部分、水溶性ポリマー、水不溶性ポリマー、治療部分、標的化部分、及びそれらの組み合わせから選択されるメンバーにコンジュゲートされている、請求項１に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、放射性同位体、パラマグネット、フルオロフォア、及びそれらの組み合わせから選択される検出可能部分にコンジュゲートされている、請求項１４に記載の多様体。
前記ＦＧＦ１多様体が、診断造影剤である、請求項１５に記載の多様体。
前記多様体が、薬学的に許容される担体と組み合わせてある、請求項１に記載のＦＧＦ１多様体を含む薬学的製剤。
血管新生の阻害または予防を必要とする対象における前記血管新生を阻害または予防する方法であって、請求項１～１７に記載の多様体を、それを必要とする前記対象に投与し、それによって血管新生を予防または阻害することを含む、前記方法。
前記対象が、がんを有する、請求項１９に記載の方法。
前記対象が、眼の新生血管を予防するために処置される、請求項１９に記載の方法。
処置を必要とする対象におけるがんを処置するための医薬組成物であって、治療有効量の請求項１に記載の多様体を含む、医薬組成物。
対象における腫瘍進行、血管新生、転移、及びそれらの組み合わせから選択されるメンバーであるプロセスを低下させるための医薬組成物であって、前記プロセスを低下させるのに十分な量の請求項１に記載のＦＧＦ１多様体を含む、医薬組成物。
前記がんが、大腸、口腔、肝細胞、腎臓、乳房、肺、卵巣、胃、脳、前立腺、及びそれらの組み合わせから選択されるメンバーである、請求項２３に記載の医薬組成物。
請求項１～１７に記載のＦＧＦ１多様体ポリペプチドをコードする、核酸。
請求項２５に記載の前記核酸が、発現される、単離細胞。
タンパク質分解的に安定な増殖因子多様体をスクリーニングする方法であって、
ｉ．酵母ディスプレイシステムにおいて増殖因子多様体のライブラリを発現させることと、
ｉｉ．関連する増殖因子受容体への酵母ディスプレイ増殖因子多様体の結合活性を測定することによって、ｉ）からの前記酵母ディスプレイ増殖因子多様体を、適切な折り畳みについて試験することと、
ｉｉｉ．ｉｉ）からの前記酵母ディスプレイ増殖因子多様体を、少なくとも１つのプロテアーゼと共にインキュベートすることと、
ｉｖ．野生型増殖因子のプロテアーゼ切断と比較して、ｉｉｉ）からの前記酵母ディスプレイ増殖因子多様体のプロテアーゼ切断を決定することと、
ｖ．少なくとも１つのプロテアーゼによる前記野生型増殖因子のプロテアーゼ切断と比較して、同じプロテアーゼによる減少したプロテアーゼ切断及び／またはそれに対する増加したタンパク質分解安定性を示すｉｖ）からの前記多様体を選択することであって、前記選択された増殖因子多様体が、タンパク質分解的に安定な増殖因子多様体である、前記選択することと、を含む、前記方法。
前記少なくとも１つのプロテアーゼが、前記野生型増殖因子を切断することができるプロテアーゼである、請求項２７に記載の方法。
前記少なくとも１つのプロテアーゼが、前記増殖因子を選択的に切断することができ、酵母ディスプレイタンパク質の最小の非特異的切断を示し、及び／または非特異的切断を示さない、請求項２７に記載の方法。
前記少なくとも１つのプロテアーゼが、血清、トリプシン、キモトリプシン、及びプラスミンからなる群から選択される、請求項２７に記載の方法。
前記少なくとも１つのプロテアーゼが、血清である、請求項３０に記載の方法。
前記少なくとも１つのプロテアーゼが、トリプシンである、請求項３０に記載の方法。
前記少なくとも１つのプロテアーゼが、キモトリプシンである、請求項３０に記載の方法。
前記少なくとも１つのプロテアーゼが、プラスミンである、請求項３０に記載の方法。