JPS6399023A - 走化性ペプチドを含有する医薬投与系 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、走化性ペプチドおよび脂質から成る医薬投与
系、その調製方法並びにその使用方法に関する。

略号の一覧 ＦＭＬＰ　　　　　：Ｎ−ホルミル−し−メチオニル−
し−ロイシル−し−フェニル アラニン υＬｖ：単ラメラリポソーム（小胞） ＭＬＶ　　　　　　、多重ラメラリポソームＰＣ：ホス
ホチジルコリン ＰＳ：ホスホチジルセリン Ｓ、Ｄ、　　　　　：標準偏差 ＣＭＥＭ　　　　　：完全最少必須媒体〔言”Ｉ）Ｉｄ
Ｕｒｄ　：　（＋２’Ｉ　）ヨードデオキシウリジン ＨＢＳＳ　　　　　：ハンクスの平衡塩類溶液ｃｐｒｓ
：毎分当た毎分数 ｄ、涌　　　　　：毎分当たりの崩壊 ＮＥＮ　　　　　　：ニューイングランドニュレアーＦ
ＣＳ　　　　　：ウシ胎児血清 〔従来技術および発明が解決しようとする問題点〕近時
、原核細胞（すなわち、細菌、ビールス、およびマイコ
バクテリア）によって生産されるオリゴペプチドに類似
の合成オリゴペプチドが、マクロファージおよび好中菌
の機能の強力な刺激体であることが示された（Ｒｏｓｓ
ｍａｎ等、Δｍ、　Ｒｅｖ。

Ｒｅ５ｐｉｒ、　Ｄｉｓ、　１２６（１９８２）１３６
）。試験管内の研究では、合成ホルミルペプチド、特に
ＦＭＬＰが細胞集合、走化性、リポソーム酵素分泌およ
びこれらの細胞タイプの酸素ラジカルの細胞外放出を刺
激することを示している。加えて、運動性に関する他の
細胞の機能（例えば、付着および拡散）が、細胞がこれ
らのＮ−ホルミルペプチドとインキュベートされると刺
激される。リポソームは多くの刊行物中の文献において
記載されている。これらの構造および使用は、集中的な
研究主題となっている。それらの殻構造に応じて、基ラ
メラリポソーム又は小胞（ＵＬＶ）および、多重ラメラ
リポソーム又は小胞（ＭＬＶ）との間で決定がなされる
。ある刊行物では、語句「小胞」は厳密に基ラメラリポ
ソームに現われる。ＵＬＶは脂質、特にリン脂質から成
る１個の二重層から成る球状殻を有し、一方、ＭＬＶは
たまねぎ外皮様のパターンに配列した幾個の二重層から
成る球状外皮を有する。

球状殻はリン脂質例えばホスファチジルコリン、ホスフ
ァチジルエタノールアミン、又はホスファチジン酸およ
び所望により「中性」脂質例えばコレステロールから成
る。この殻は水相および薬理活性化合物を含有する内部
容積を保持する。

親油性および他のパラメーター、例えば温度又は濃度の
程度に応じて、被包された化合物は閉じられた水相およ
び／又は二重層の中に存在する。

多種多様の有効成分の担体として、リポソームの治療的
又は診断的使用に関し多大の興味が存する。従って、リ
ポソームがタンパク、例えば抗体、又は酵素、ホルモン
、免疫調節剤、ビタミン、に対し、担体として、又は分
析の目的に対し、放射性同位体によってラベルした化合
物に対する担体として提案されてきている０例えば、米
国特許３．９９３，７５４には、担体と“してリポソー
ムを用いて腫瘍細胞の治療用に有効であることが開示さ
れている。リポソームに基づく医薬投与系がＧ、　Ｇｒ
ｅｇ−ｏｒｉａｄｉｓにより発行されたジェネラルレビ
ュー（リポソーム　テクノロジー■巻、インコーボレイ
ション　オブ　ドラッグ、プロティン　アンドジョネテ
イク　マテリアル、ＣＲＣプレス１９８４年）中に開示
されている。このような系は以下の利点を有する。すな
わち、生物学的に活性な物質が食作用により組織内に、
特に細胞内皮系統の組織内に導入され得る０例えば、輸
送機構は、公知であり、これによれば抗生物質が食作用
により感染組織に導入され、これにより感染微生物の除
去又は破壊の促−進をもたらす０食作用は又、炎消中心
の戦いにおいて有効な機構である。リポソーム内に被包
された抗リューマチ製剤が感染された組織内に好ましく
導入される。更に、制菌剤が細胞内皮系統（肝臓、肺臓
又は骨髄）の特定器官に導入できる。更に、肺の毛細管
内のが過並びに単球移動によるその後の移送のため、生
物活性物質、例えば免疫調節特性を有する化合物は、肺
胞大食細胞内で濃縮され得る。これは、転位性肺腫瘍に
対する改善された作用並びに毒性の同時減少をもたらす
。

腫瘍のマクロファージ介在破壊は、腫瘍部位でこれらの
エフェクター細胞の開存化により増強され得る。マクロ
ファージによる腫瘍の侵入増加は、もしυ走化性因子が
腫瘍付近で濃縮される場合達成されるであろう。このこ
とは、走化性ファクターとＩＩ癌衣表面抗原の反応する
抗体との共有結合共役体（Ｏｂｒｉｓｔ、　Ｒ，ａｎｄ
　Ｓａｎｄｂｅｒｇ、　Ｒ，、Ｃｅ１ｌ。

［ｍｍｕｎｏｌ、　８１（１９６３）１６９）を投与す
ることにより、又はエフェクター細胞内の走化性ファク
ターを放出することのいずれにより達成でき、該細胞は
腫瘍部位に設定すると培地にファクターを放出するであ
ろう。

〔問題点を解決するための手段、発明の作用および効果〕

本発明の目的は医薬投与系を提供することにあり、この
成分は、リポソームの形態で投与されると、肺および／
又は肝臓内に富化又は濃縮され、引き続きマクロファー
ジのエンドサイト−シスが続き、従って、血液中の単球
を活性化しさらにこれによりマクロファージ、例えば肺
胞の又は腹膜のマクロファージを活性化する０次の内容
が見出された。すなわち、リン脂質および被包走化性ペ
プチドから成るリポソーム含有水性分散液が未被包走化
性ペプチド含有水性溶液に比較してマクロファージの活
性化を改良する。

本発明は、ａ）次式■： （式中、ηは１，２又は３であり、Ｒ８およびＲ２は独
立に互いに０１゜〜２０アルキル、Ｃ６゜〜２０アルケ
ニルもしくはＣ１０〜２０アシルを表わし、さらにＹｏ
は医薬として許容され得る塩基である）で表わされるリ
ン脂質、 ｂ）次式■： （式中、ηは２，３、又は４であり、Ｒ１およびＲ２は
式Ｉで定義した意味と同じであり、さらにＲ，、Ｒ，お
よびＲ６は水素もしくはＣ１〜４アルキルである） で表わされるリン脂質、　　　　′ Ｃ）　走化性ペプチド、又は消炎剤、抗生物置、抗リー
シュマニア剤、抗カビ剤、抗腫瘍剤および免疫調節剤か
ら成る群から選ばれる医薬と一緒にした走化性ペプチド
、および所望により、ｐＨ７，０〜７．８に緩衝した医
薬として許容され得る担体溶液、および／又は医薬とし
て許容され得る添加剤から成る医薬投与系に関する。

本発明の記載内容において、既に用いられ更に今後用い
られる一般的語句は、次の意味を有する：有機基に関し
て用いられる語句「低級Ｊ、例えば低級アルキル、低級
アルキレン、低級アルコキシ、低級アルカノイル等は、
特に他に定義しない限り、７個、好ましくは４個までの
炭素原子を有するそのような有機基を意味する。

式■及びＨのリン脂質の命名は、Ｅｕｒ、　Ｊ、　ｏｆ
Ｂｉｏｃｈｅｍ、　７９．１１〜２１（１９７７年）「
リン脂質の命名」（ｓｎ−命名、立体特異的命名）に従
って、ＩＵｒ’ＡＣアンドＩＵＢコミッションオンバイ
オケミカルノーメンクラーチャ−（ＣＢＮ）の推奨に一
致している。

式Ｉのリン脂質（成分ａ））において、基−（Ｃ，Ｉ＋
２．）−は直鎖又は分枝鎖アルキレン、例えば１，１−
又は１．２−エチレン、１，１−５１゜２−又は１．３
−プロピレン又は、好ましくはメチレン（η＝１）であ
る。

アルキルＲ１及びＲ２は好ましくは１０〜２０個の炭素
原子のうち偶数個を有する直鎖であり、例えばｎ−デシ
ル、η−ドデシル、η−テトラデシル、ｎ−ヘキサデシ
ル、η−オクタデシル又はη−アイコシルである。

アルケニルＲ１及びＲ２は好ましくは１２〜２０個の炭
素原子のうち偶数個を有する直鎖でありかつ一個の二重
結合を有し、例えば９−シス−ドデセニル、９−シス−
テトラデセニル、９−シス−ヘキサデセニル、６−シス
−１６−トランス−１９−シス−もしくは９−トランス
オクタデセニルもしくは９−シス−ドデセニルである。

アシルＲ１及びＲ２は好ましくは１０〜２０個の炭素原
子の偶数個を有する直鎖、例えば−個の二重結合を有す
るＣ１゜〜Ｃ２０アルカノイル又はＣ１０〜Ｃ２０アル
ケノイルである。

アルカノイルＲ１及びＲ２は、好ましくはη−デカノイ
ル、η−ドデカノイル、η−テトラデカノイル、ｎ−ヘ
キサデカノイル、η−オクタデカノイル及びη−アイコ
サノイルである。

アルケノイルＲ１及びＲ２は好ましくは９−シス−ドデ
セニル、９−シス−テトラデセノイル、９−シス−ヘキ
サデセノイル、６−シス−１６−トランス−１９−シス
−もしくは９−トランス−オクタデセノイル、１１−シ
ス−オクタデセノイル及び９−シスーアイコセノイルで
ある。

医薬として許容され得る塩基のカチオンＹ０は、例えば
アルカリ金属イオン、例えばリチウム、ナトリウム又は
カリウムイオン、アンモニウムイオン、モノ−、ジーも
しくはトリーＣＩ〜Ｃ，アルキルアンモニウムイオン、
例えばトリメチル−、エチル−、ジエチル−１又はトリ
エチルアンモニウムイオン、２−ヒドロキシエチル−ト
リーＣ３〜Ｃ４アルキルアンモニウムイオン、例えばコ
リニル又は２−ヒドロキシエチルアンモニウムイオン、
又は塩基性アミノ酸、例えばリシン又はアルギニンのカ
チオンである。

天然起源から単離された式■　（式中Ｒ１及びＲ２は異
なっても又は同一でもよいＣ１゜ＮＣ７゜アルカノイル
もしくはＣｌ０−’−Ｃ２０アルケノイル基、例えばｎ
−ドデカノイル、η−テトラデカノイル、η−ヘキサデ
カノイル、又はη−オクタデカノイル、又は９−シスー
ドデセノイル、９−シス−テトラデセノイル、９−シス
−ヘキサデセノイル、６−シス−１６−トランス−１９
−シス−１９−トランス−又は１１−シス−オクタデセ
ノイル又は９−シスーアイコセノイルである）のリン脂
質、例えばウシの能からのホスファチジルセリンが好ま
しく、更に式Ｉ　（式中Ｒ＋及びＲ２は同一のＣ１゜Ｎ
Ｃ７゜アルケノイル基、例えば９−シス−ヘキサデセノ
イル、６−シス−１９−シス−１９−トランス−もしく
は１１−シス−オクタデセノイルである）の合成リン脂
質、例えばナトリウム−１，２−ジ−（９−シス−オク
タデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジル−（Ｓ）−
セリンが好ましい。

式■のリン脂質（成分ｂ））において、基−（ＣｎＨ２
ｎ）−は直鎖もしくは分枝鎖アルキレンであり、例えば
１．１−１１，２−もしくは１，３−プロピレンもしく
は１．２−１１．３−もしくは１．４−ブチレン又は、
好ましくは１．２−エチレン（η＝２）である。

式■のリン脂質において、基Ｒ１及びＲ２は式■のリン
脂質中のＲ１及びＲ２と同じ定義を有する。

基Ｒ３，Ｒ４及びＲｓは好ま°しくは水素（セファリン
）又はメチル（レシチン）である。

植物又は動物の天然起源から単離した式■　（式中Ｒ４
、Ｒｓ及びＲ６は水素又はメチルであり更にＲ１及びＲ
２は同一の又は異なったＣ１゜ＮＣ２０アルカノイルも
しくはＣ１゜ＮＣ２０アルケノイル基、例えばｎ−ドデ
カノイル、η−テトラデカノイル、η−ヘキサデカノイ
ル、又はη−オクタデカノイル、又は９−シスードデセ
ノイル、９−シス−テトラデセノイル、９−シス−ヘキ
サデセノイル、６−シス−１６−トランス−１９−シス
−１９−トランス−もしくは１１−シス−オクタデセノ
イル、又は９−シスーアイコセノイルである）のリン脂
質、例えば鶏卵からのレシチン又はセファリン又は大豆
レシチンが好ましく、合成リン脂質（■）（式中Ｒ，及
びＲ２は先に説明した同一のＣ１゜ＮＣ２０アルカノイ
ル基である）、及び合成リン脂質（■）（式中Ｒ，はＣ
１０ＮＣ１０アルカノイルであり、例えばη−ドデカノ
イル、η−テトラデカノイル、η−ヘキサデカノイル、
又はη−オクタデカノイルであり、更にＲ２はＣ１０Ｎ
Ｃ２０−アルケノイルであり、例えば９−シス−ヘキサ
デセノイル、６−シス−１６−トランス−１９−シス−
１９−トランス−もしくは１１−シス−オクタデセノイ
ル、特に１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９−シス−
オクタデセノイル）３ｓｎ−ホスファチジルコリンであ
る）が好ましい。

本発明の医薬投与系に含まれるリン脂質はリポソームの
形で水性相中に分散される。

走化性ペプチドは、例えばトリーないしデカペプチドで
あり、こ−において末端アミノ基は第三ブトキシカルボ
ニル（ＢＯＣ）基で置換されており、例えばＢＯＣ−Ｎ
ｅｔ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨ，ＢＯＣ−Ｎｌｅｕ−Ｐｈ
ｅ−ＯＦｉ、又はＢＯＣ−Ｐｈｅ　−Ｌｅｕ　−Ｐｈｅ
　−Ｌｅｕ　−Ｐｈｅ　−ＯＨでありあるいは又ジーな
いしデカペプチドであり、こ１においてＮ末端基はホル
ミル基で置換されており、例えばＣＨＯ−＾１ａ−Ｇｌ
ｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−ＯＨ，Ｃ）１０−ＭｅＬ−３１ｍ
−０１１、ＣＨＯ−Ｎｅｔ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−ＯＦＩ、
　ＣＩＩＯ−Ｍｅｔ　−Ｍｅｔ−Ｎｅｔ−ＯＲ，ＣＨＯ
−Ｎｅｔ−Ｐｈｅ−ＯＨ，ＣＨＯ−Ｎｅｔ−Ｐｈｅ−Ｎ
ｅｔ−ＯＲ，Ｃｌ０−Ｎｅｔ−Ｔｙｒ−０１１、Ｃ１１
Ｏ−Ｎｅｔ−Ｖａｌ−ＯＨ，ＣＨＯ−Ｎｌｅｕ−Ｌｅｕ
−Ｐｈｅ−ＯＨ（Ｎｌｅｕ＝ノルロイシン）、Ｃｌｌ０
−Ｎｌｅｕ　−１ｅｕ−Ｎｌｅｕ−Ｔｙｒ　−Ｌｙｓ−
ＯＲ，ＣＨＯ−Ｎｌｅｕ　−１ｅｕ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−
Ｏｔｌ、　Ｃｌｌ０−Ｎｌｅｕ−１ｅｕ−Ｐｈｅ　　（
ヨード）Ｔｙｒ−Ｏｌｌ、ＣＯＯ−＾１ａ−Ｌｅｕ−Ｐ
ｈｅＯＨ，ＣＨＯ−Ｖａｌ　　Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨも
しくはＣＨＯ−Ｃｙｌ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−０１１（Ｃｙ
ｌ＝シクロロイシン）、ＣＨＯ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｐｈ
ｅ−ＯＨ，ＣＨＯ−Ｎｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｎｌｅ
ｕ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓｏｌｌ、又はＣＩＩＣｌｌｏ−Ｎｅ
ｔ−Ｐｈｅ−０１（（Ｆである。

Ｃｌｌ０−Ｎｅｔ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−メチルエステル、
ＣＩＩＯ−Ｍｅｔ　−−Ｌｅｕ　−Ｐｈｅ−ベンズアミ
ド、Ｃｌｌ０−　Ｎｅｔ　−Ｌｅｕ　−Ｐｈｅ−ベンジ
ルエステル、ＣＨＯ−Ｎｅｔ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ　−Ｐｈ
ｅ　−ＯＨ１又はＣＨＯ−Ｎｅｔ−Ｌｃｕ−Ｐｈｅ−Ｌ
ｙｓ−Ｏｌｌのような、末端アミノ基がホルミル基で置
換されており更に主配列がＮｅｔ　−Ｌｅｕ　−Ｐｈｅ
である、走化性トリーないしデカペプチドが好ましい。

最も好ましくはＣＨＯ−Ｎｅｔ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−ＯＨ
（ＦＭＬＰ）である。

走化性ペプチドをリポソームの形態で投与する。

リポソームはこれ等のペプチドを被包するか又は消炎剤
、抗生物質、抗リーシュマニア剤、抗カビ剤、抗腫瘍剤
及び免疫調節剤から成る群から選ばれた医薬と一緒にし
た走化性ペプチドを被包する。

消炎剤を含んで成る群からの医薬は、例えばグルココル
チコイド、例えばコルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレ
ドニゾン、プレドニゾロン、フルオロコルトロン、トリ
アムシノロン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン
、バラメタシン、デキサメタシン、ベータメタシン、ベ
クロメタゾン、フルプレジニリデン、デシキシメタシン
、フルオシノロン、フルメタシン、ジフルコルトロン、
クロコルトロン、クロベタゾールもしくはフルオコルチ
ンブチルエステルであり、あるいは置換フェニル酢酸塩
又は２−フェニルプロピオン酸塩から成る群からの非ス
テロイド炎症抑制剤（ＮＳ式ＩＤ）、例えばアルクロフ
ェナック、イブフェナック、イブプロフェン、クリダナ
ク、フェンクロラック、ケトプロフェン、フェノプロフ
ェン、インドプロフェン、フェンクロフェナック、ディ
クロフェナック、フルルビクロフェン、ピルプロフェン
、ナプロキフェン、ベノキサプロフエン、カルプロフェ
ンスはシクロプロフェン、アントラニル酸誘導体、例え
ば次式■ 以下余白 ＼、／＼５３ （式中Ｒ１，Ｒ２及びＲ１は互いに独立に、水素、メチ
ル、塩素又はトリフルオロメチルを表わす）で表わされ
る誘導体であり、例えばメフェナム酸、フルフェナム酸
、トルフェナム酸又はメクロフェナム酸、アニリノ−置
換ニコチン酸誘導体、例えばミフルミン酸、クロニキシ
ンもしくはフルメタシン、ヘテロアリール酢酸（こ−で
ヘテロアリールは２−インドール−３−イルもしくはビ
ルロルー２−イル基である）、例えばインメタシン、オ
キシメタシン、イントラゾール、アセメタシン、シンメ
タシン、ゾメビラック、トルメタチン、コルピラツク酸
又はチアプロフェニック酸、スリンタックタイプのイン
デニル酢酸及び鎮痛作用を有するヘテロアリールオキシ
酢酸、例えばベンザダックである。

抗生物質を含んで成る群の医薬は、例えば次式（式中、
Ｒ１は水素又はピロリジン−１−イル−メチルを表わし
、Ｒ２は水素又はヒドロキシを表わし、Ｒ３は水素、ヒ
ドロキシ又はメチルを表わし、Ｒ４は水素又はメチルを
表わし更にＲ１は水素、塩素又はジメチルアミノを表わ
す）のテトラサイクリン抗生物質であり、例えばクロロ
テトラサイクリン、オキシテトラサイクリン、テトラサ
イクリン、ジメチルクロロテトラサイクリン、メタサイ
クリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン又はクリテ
トラサイクリン、アミノグリコシド、例えばカナマイシ
ン、アミカシン、ゲタミシンＣ＋ａ＋Ｃｔ＋Ｃｔｂ又は
Ｃ５、シソミシン、ネチルミシン、スペクチノマイシン
、ストレプトマイシン、トブラマイシン、ネオマイシン
Ｂ、ジベカシン又はカネンドマイシン、マクロリド、例
えばマリドマイシン又はエリセロマイシン、リンコマイ
シン、例えばクリンダマイシン又はリンコマイシン、そ
れぞれ６β−もしくは７β−アシルアミノ基を有するペ
ンシラン酸（６−八Ｐ＾）及びセファロスポラン酸（ツ
ー＾Ｃ＾）−誘導体、これ等は発酵によって得られる、
半合成又は全合成的に得ることのできる６β−アシルア
ミノペニシラン酸又は７β−アシルアミノセファロスポ
ラン酸誘導体及び／又は３位が修正されている７β−ア
シルアミノセファロスポラン酸誘導体、例えばペニシリ
ンＧ又はＶの名前で知られているペニシラン酸誘導体、
例えばペネチシリン、プロピシリン、ナフチリン、オキ
シリン、クロロメチン、ジクロキサチリン、フルクロキ
サチリン、サイクラチリン、エビチリン、メチリナム、
メチチリン、アズロチリン、スルペニシリン、ティカル
シリン、メズロシリン、ピペラジリン、カリンダシリン
、アジドシリン又はシクラシリン、又はセファクロール
、セフオニシト、セフアズロア、セフアセドリル、セフ
ァゾリン、セファレキシン、セファドロキシル、セファ
ログリシン、セフオキシチン、セファロリジン、セファ
ロチン、セフオニシト、セフタジジン、セフオニシト、
セファレキシン、セフメノキム、セファレキシン、セフ
ァロチン、セフラジン、セファマンドール、セファノン
、セファピリン、セフロキサジン、セファトリジン、セ
フアゼトン、セフトリキソンもしくはセフオニシトル いるセファロスポリン誘導体、及び他のカルヴアム、ペ
ネムもしくはカルバペネムタイプのβ−ラクタム抗生物
質、例えばモキサラクタム、クラヴラニン酸、ノカルデ
ィシンＡ、スルバクタム、アズトレオナム又はチェナマ
イシン、及びとコザマイシン、ノヴオビオシン、クロラ
ムフェニコールもしくはチアフェニコール、リフアビジ
ン、ホスホマイシン、コリシチンもしくはバンコマイシ
ンタイプの抗生物質である。

抗リーシュマニア剤を含んで成る群からの医薬は、例え
ばアンチモニイ化合物、例えば酒石吐剤（カリウムアン
チモニイタートレート）、スチボフェン、ナトリウムス
チボカプテート及びナトリウムスチボグルコナートであ
る。

抗力と剤を含んで成る群からの医薬は、例えばチオカル
ボン酸誘導体、例えばジベンズチオン、トルナフテート
、又はトルシフレート、イミダゾール誘導体、例えばク
ロトリマゾール、マイコナゾール、エコナゾール、イソ
コナゾール又はケトコナゾール又はポリエン抗生物質、
例えばナイスクチン、ナタマイシン又はアムフオテリシ
ンＢである。

抗腫瘍剤を含んで成る群からの医薬は、例えばビス−（
２−クロロエチル）−アミン基を有するアルキル化剤、
例えばクロロメチン、クロラムブシル、メルフアラン、
ウラマスチン、マンノマスチン、エストラマスチンホス
フェート、メクロレタミンオキシド、サイクロホスファ
ミド、イホスファミドもしくはトリホスファミド、アジ
リジン構造を有するアルキル化剤、例えばトレタミン、
チオテパ、トリアジクオンもしくはミドマイシン、アル
キル化メタンスルホン酸エステル、例えばブスルファン
、アルキル化Ｎ−アルキル−Ｎ−ニトロソ尿素誘導体、
例えばカルムスチン、ロムスチン、セムスチンもしくは
ストレプトシトシン、及びミトブロニトール、ダカルバ
ジンもしくはプロカルバジンタイプのアルキル化剤、葉
酸タイプの抗代謝物、例えばメトトレゼート、プリン誘
導体、例えばメルカプトプリン、チオグアニン、アザチ
オビリン、チアミピリン、ヴイダラビンもしくはプロマ
イシン、ピリミジン誘導体、例えばフルオロウラシル、
フロクリジン、テガフール、シタラビン、イドクリジン
、フルシトシン、ガン治療に用いられる抗生物質、例え
ばダクテイノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシ
ン、ミドマイシン、プレオマイシンＡ２もしくはＢ、又
はエトボシト、及びヴインカアルカロイド、例えばヴイ
ンクリスチン、所望によりクロロメタミン、プレドニソ
ロンもしくはプレドニゾン及びプロカルバジンと組み合
わせて成る。

免疫調節剤は、例えばムラミルペプチド、例えばムラミ
ルジペプチドもしくはムラミルトリペプチド、特に次式
■： Ｒ，１０ （式中、Ｘは基−Ｃ（＝Ｏ）−又は−Ｃ（＝Ｏ）−〇−
を表わし、Ｒ５はＬ−＾１ａ−Ｄ　−１ｓｏＧｌｎ−Ｌ
　−＾１ａ−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グ
リセロ−３−ヒドロキシ−ホスホリルオキシ）−エチル
アミド基、Ｌ−＾１ａ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｃｙ−Ｌ−＾１ａ
−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３
−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミド）基、
Ｌ−＾１ａ−Ｄ　−１ｓｏＧＩｎＯＨ基、Ｌ−Ａｌａ　
　Ｄ　　ＧＩＩＩＮＨ２ａ−η−ブチルエステル基、Ｌ
−＾１ａ−Ｄ−ｉｓｏＧｌｎ　　Ｌ−（ステアロイル）
−Ｌｙｓ基、Ｌ−Ｖａｌ−Ｄ−Ｇｌｎ−ＮＯ３−α−η
−メチルエステル基、し−＾１ａ−Ｄ　−１ｓｏＧＩｎ
−Ｌ−Ａｌａ　−１、２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリ
セリンエステル基又はＬ−＾１ａ−Ｄ　−１ｓｏＧｌｎ
−Ｌ−＾１ａ−コレステロールエステル基を表わし、Ｒ
２は水素、メチル又はＮ−プロピルを表わし、Ｒ１は水
素、η−ステアロイル、１Ｏ−（２，３−ジメトキシ−
１，４−ジオキソ−５−メチル）−２，５−シクロへキ
サジェノイル、２−ベヘンイルオキシ−２−メチルプロ
パノイル又はη−オクタノイル基を表わし、Ｒ１は水素
もしくはη−オクタノイルを表わし、Ｒ６はＣＩ〜Ｃ４
アルキルを表わし更にＲ６は水素又はＣ＋〜Ｃ，アルキ
ル及びそれ等の対応する２−バルミトイルチオ誘導体を
表わす）のムラミルペプチド、η−ラウロイルーＬ−＾
Ｉａ−Ｄ−ｉｓｏＧＩｎ　−（ｍ　−ＤＡＰ−Ｇｌｙ）
　　ＮＯ３、ＴＩ−ラウロイル−Ｌ−Ａｌａ　−Ｄ　−
１ｓｏＧＩｎ　−（Ｌ　−ＤＡＰ　−Ｇｌｙ）　−Ｎｌ
１２　、η−ラウロイルーＬ−＾１ａ−Ｄ　−１ｓｏＧ
Ｉｎ−（Ｌ−Ｌｙｓ　−Ｄ−Ａｌａ）　　ＭＨｚ、η−
オクタノイルーＬ−＾１ａ−Ｄ−ｉｓｏＧＩｎ　−（Ｌ
−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｌａ）　　ＮＨｚ又はバルミトイル−
Ｃｙｓ　−（（２Ｒ）　　２．３−ジラウロイルオキシ
−プロピル）−＾Ｉａ−Ｄ−Ｇｌｎ−（Ｇｌｙ−タウリ
ン−Ｎａ）−Ｎ１１２タイプの免疫調節作用を有するリ
ボペプチドであるか、又はそれ等は抗原もしくは分裂促
進剤又はそれ等と類似のものにより刺激された場合リン
パ球、単球又はマクロファーゼにより分泌されるリンフ
才力インである。

リンフ才力インを含んで成る基は、例えば公知のタイプ
のインターフェロン、特に天然もしくは組み換えヒトガ
ンマー−インターフェロン、例えばヒトガンマー−イン
ターフェロンを含みこれはヨーロッパ特許出願６３，４
８２．７７．６７０．８３，７７７．８８．５４０．８
９，６７６．９５，３５０．９９，０８４．１１０，０
４４及び１１２．９６７更に国際比Ｈ＜ＰＣＴ＞＆４０
８３１０４，０５ｇ及びＷＯ３４１０２，１２９に従っ
て得ることができる。

次のアミノ酸配列を有するヨーロッパ特許出願１２１．
１５７による組み換えヒトガンマー−インターフェロン
が好ましい： ＨｚＮ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−＾５ｐ−Ｐ
ｒｏ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−１１：Ｉｎ−Ｇｌｕ−＾１ａ−
Ｇｌｕ−＾ｓｎ　−Ｌｅｕ　−Ｌｙｓ　−Ｌｙｓ　−Ｔ
ｙｒ−Ｐｈｅ−＾ｓｎ−＾１ａ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−３ｅ
ｒ−＾ｓｐ−Ｖａｌ−＾１ａ−＾ｓｐ−＾ａｎ−Ｇｌｙ
−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ　−１ｉｅ
−Ｌｅｕ　−Ｌｙｓ−＾ｓｎ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ
−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−＾ｓｐ−＾ｒＨ−Ｌｙｓ　−１１ｅ
−Ｎｅｔ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｇｉｎ　−１ｉｅ−Ｖａｔ
−Ｓｅｒ　−Ｐｈｅ　−Ｔｙｒ　−Ｐｈｅ　−Ｌｙｓ　
−Ｌｅｕ　−Ｐｈｅ　−Ｌｙｓ−＾ｓｎ−Ｐｈｅ　−Ｌ
ｙｓ−＾ｓｐ−＾５ｐ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ　−１１ｅ−（
：１ｎ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ　−
１１ｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−＾５ｐ−Ｎｅｔ−＾ｓｎ−Ｖ
ａｌ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−＾ｓｎ　−５ｅｒ−＾
ｓｎ　−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ　−Ｌｙｓ−＾「ｇ−＾ｓｐ−
＾５ｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−＾
ｓｎ−Ｔｙｒ−５ｅｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−＾５ｐ−Ｌｅ
ｕ−＾ｓｎ−Ｖａｌ−Ｇｉｎ−＾ｒｇ−Ｌｙｓ−＾１ｇ
−１１ｅ−旧５−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−ｌ１ｅ−Ｇｌｎ−Ｖ
ａｌ−Ｎｅｔ−＾１ａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｐｒ
。

−＾１ａ−＾１ａ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−
＾ｒｇ−Ｌｙｓ−＾ｒｇ−Ｓｅｒ−ＧＩｎ−Ｎｅｔ−Ｌ
ｅｕ−Ｐｈｅ−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−＾ｒｇ−＾ｒｇ−＾１
ａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−ＯＨ。

更に、次のアミノ酸配列を有する、英国特許出願２，１
０７，７１８による組み換えヒトガンマー−インターフ
ェロンが好ましい： Ｈ２Ｎ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｇｉｎ−＾５ｐ−Ｐ
ｒｏ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−ＬＦＳ−にＩｌ＋−＾１ａ−Ｇ
ｌｕ−＾ｓｎ　−Ｌｅｕ　−Ｌｙｓ　−Ｌｙｓ　−Ｔｙ
ｒ−Ｐｈｅ−＾ｓｎ−＾１ａ−Ｇｌｙ−１１ｉｓ−Ｓｅ
ｒ−＾５ｐ−Ｖａｌ−＾ｌａ−＾Ｂ−＾ｓｎ−Ｇｌｙ−
Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−にＩＦ　−１１ｅ−
Ｌｅｕ　−Ｌｙｓ−＾ｓｎ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−
Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−＾３ｐ−＾ｒｇ−Ｌｙｓ　−１１ｅ−
Ｎｅｔ−Ｇｌｎ−５ｅｔ−（：Ｉｎ　−１１ｅ−Ｖａｌ
−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−
Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−＾ｓｎ−Ｐｈｅ　−Ｌｙｓ−＾ｓｐ−
＾５ｐ−Ｇｉｎ−Ｓｅｒ　−１１ｅ−Ｃ１ｎ−Ｌｙｓ−
Ｓｅｒ　−Ｖａｌ　−Ｇｌｕ　−Ｔｈｒ−１１ｅ　−Ｌ
ｙｓ　−Ｇｌｕ−＾ｓｐ−Ｍｅｔ−＾ｓｎ　−Ｖａ　Ｉ
−Ｌｙｓ　−Ｐｈｅ　−Ｐｈｅ−＾ｓｎ　−５ｅｒ−＾
ｓｎ　−ＬＦＳ−Ｌｙｓ　−Ｌｙｓ−＾ｒｇ−＾ｓｐ−
＾５ｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−＾
ｓｎ−Ｔｙｒ−５ｅｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−＾５ｐ−Ｌｅ
ｕ−＾ａｎ−Ｖａｔ−Ｇｌｎ−＾ｒｇ−Ｌｙｓ−＾１ａ
−１１ｅ−旧５−Ｇｌｕ−Ｌｅｕｌｌｅ−Ｇｌｎ−Ｖａ
ｌ−Ｎｅｔ−＾１ａ−Ｇｌｕ　　Ｌｅｕ−３ｅｒ　−Ｐ
ｒ。

−＾１ａ−＾１ａ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−
＾ｒｇ−Ｌｙｓ−＾ｒｇ−５ｅｒ−Ｇｉｎ−Ｎｅｔ−Ｌ
ｅｕ−Ｐｈｅ−＾ｒｇ−Ｇｌｙ−＾ｒｇ−＾ｒｇ−＾１
ａ−３ｅｒ−Ｇｉｎ−ＯＨ。

リンフ才力インを含む群には、又純粋な形のヒトインタ
ーロイキン２、例えばヒト悪性白血病もしくはリンパ腫
細胞をＴ−細胞マイトジョンにより活性化後培養口液中
で得られ、さらに逆相ＨＰＬＣにより精製されるインタ
ーロイキン２、抗原もしくはマイトゲン、例えばヒトＴ
−細胞一白血病一リンパ腫ウィルス（ＨＴＬＶ−１）、
ホトヘマグルティニンもしくはコンカナバリンＡ、によ
り刺激後肺臓もしくは末梢の血液からヒトＴ−リンフオ
サイドを有する培養物から得られる培養０液、並びに語
句マクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）、白血球遊走
因子、白血球遊走促進因子、マクロファージ−活性化因
子（ＭＡＦ）、コロニー刺激因子、インターロイキン１
および２並びにガンマ−インターフェロンの名で公知の
成分を有する混合物を含有するもの、特にマクロファー
ジ活性剤因子（ＭＡＦ）の高含量を有するそれらの培養
０液又は単離物が含まれる。

本発明に係る医薬投与系は、リポソームの形で投与した
場合、それらの秀れたマクロファージ刺激活性により更
に一般にそれらの秀れた薬力学プロフィールにより特徴
づけられる。

かくして、非常に急速なエンドサイト−シスが、特に単
球系の細胞を介して生起する。内包化合物として上記走
化性ペプチドを被包するリポソームは、肺および肝臓内
に特に良好に富化されることができ、更にマクロファー
ジにより急速なエンドサイト−シスに委ねられる。特に
、胞状マクロファージが刺激され更に生理学的に異常な
物質、例えばウィルス′もしくは増殖腫瘍細胞が除去さ
れる。

本発明に係る医薬組成物は、リポソームの形で投与され
ると、Ｒ瘍転位と戦うガン治療に特に適している。

抗炎症剤、抗生物質、抗リーシュマニア剤、杭カビ剤も
しくは抗腫瘍剤と組み合わせた走化性へプチドを含有す
るリポソームは又、これ等の薬剤を特に炎症、感染もし
くは腫瘍細胞の類に供給し、従って被包していない薬剤
に比較してこれ等の薬剤の治療的効果を増強する。

式■及び式■のリン脂質が被包物質であり更に所望によ
りリポソームを例えば超遠心機内で濃縮又は単離後、他
の薬剤と共に組み合わせた走化性ペプチドが被包されて
いる水性リポソーム分散液が、経口（ｐ、ｏ、）又は特
に非経口（頬、舌、舌下、ｉ、ｖ、　、　ｉ、ｅ、、エ
ビキュティン、ｓ、ｃ、　、　ｉ、輪、又は鼻）投与に
対し好ましい。

経口投与に対し、リポソーム含有水性分散液は、医薬と
して許容され得る希釈剤もしくは担体と共に、あるいは
又通常の添加剤、例えば着色剤又は芳香剤と共に混合で
き、あるいはシロップの形態で又はカプセル剤の形態で
使用できる。

非経口投与（エビキュティン）に対し、リポソーム含有
水性分散液を、通常のシックナー、例えばヒドロキシプ
ロピルセルロース、適当な保存剤、抗酸化剤及び所望に
より香料と共に混合でき、更に皮膚又は粘膜の適用に対
しローション又はゲル剤の形態で使用できる。

非経口投与（ｉ、ｖ、　、　ｓ、ｊ＝）に対し、リポソ
ームの多い水性分散液を適当な担体液体、例えば殺菌し
た、カルシュームを有しない、等張塩化ナトリウムもし
くはグルコース溶液（所望によりｐＨ７，２〜７．４に
緩衝）中に懸濁する。

本発明の実験結果に基づけば、以下の如く推定される。

即ち約体重７０ｋｇのヒトに投与すべき最高の用量は約
２０００マイクログラムの走化性ペプチドを有する約１
ｇのリポソームであり、最低用量は、１００マイクログ
ラムの走化性ペプチドを有する約１００ａ＋Ｈのリポソ
ームである。被包物質の最高及び最低用量、水性相内の
リン脂質の濃度並びに脂質成分（１）及び（■）の割合
は、臨床実験で実験的に確立された結果に従って変化し
得る。

本発明に係る医薬投与系は又、被包ずべき医薬成分及び
リン脂質（１）及び（ＩＩ）の含有するバイアル又はビ
ンから成る「キットオブバート］セットから成ることも
できる。

本発明は好ましくは次のａ）〜Ｃ）から成る医薬投与系
に関する： ａ）前記式１　（式中ｎ、Ｒ，，Ｒ２及びＹｏは先に定
義した意味と同じである）のリン脂質、ｂ）前記式■　
（式中、η及びＲ１−Ｒ１は先に定義した意味と同じで
ある）のリン脂質、ｃ）　　Ｎ−ホルミル−し−メチオ
ニル−し−ロイシル−し−フェニルアラニン（ＦＭＬＰ
）又はＮ−ホルミル−し−メチオニル−し−フェニルア
ラニン（ＦＭＰ）、所望により抗炎症剤、抗生物質、抗
リーシュマニア剤、抗カビ剤又は抗腫瘍剤と組み合わせ
る、更に所望により、ｐＨ７，２〜７．４にＩｌｌ？し
た医薬的に許容し得る担体溶液。

本発明は、特に次のａ）〜Ｃ）から成る医薬投与系に関
する： ａ）前記式■　（式中ηは１であり、Ｒ１及びＲ２は各
々Ｃ４゜〜２０アシルであり、更にＹｏはナトリウムイ
オンである。

ｂ）前記式■　（式中ｎは２であり、Ｒ３及びＲ２は各
々Ｃ１゜〜２０アシルであり、更にＲ３〜Ｒ５は水素又
はメチルを表わす）のリン脂質、 ｃ）　　ＦＭＬＰ又はＦＭＰ、所望により、Ｎ−アセチ
ルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イングルタミニルーム
−アラニン−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グ
リセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルア
ミド、Ｎ−アセチル−デスメチルムラミル−し−アラニ
ル−Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩もしくはＮ−ア
セチル−Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタ
ミンのナトリウム塩及び所望によりｐ１１７．２〜７．
４に［１！した医薬として許容され得る担体溶液。

本発明は更に次のａ）〜Ｃ）から成る医薬投与系に関す
る： ａ）合成した、本質的に純粋なナトリウム塩１゜２−ジ
−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスフ
ァチジル−（Ｓ）−セリン（Ｉ）、ｂ）合成の、本質的
に純粋な１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９−シス−
オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン
（ＩＩ）、ｃ）　　ＦＭＬＰ又はＦＭＰ、所望によりＮ
−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミ
ニルーし一アラニンー２−（１，２−ジパルミトイル−
ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−
エチルアミド、Ｎ−アセチル−デスメチルムラミル−Ｌ
−アラニル−Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩もしく
はＮ−アセチル−Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イ
ソグルタミンのナトリウム塩及び所望によりｐＨ７，２
〜７．４に緩衝した医薬として許容され得る担体溶液。

リポソームの形態で適用する為に適した医薬投与系は、
標準方法により、例えば前記式■及び式■のリン脂質及
び成分Ｃ）の均質混合物を調製し次いで水相で得られた
均質混合物を分散し更に、所望により、水性分散液をｐ
Ｈ７、ｏ〜７．８にＭ街し更に、所望により得られたリ
ポソームを濃縮し更に／又は分離することによって製造
される。

均質混合物を、リン脂質及び成分Ｃ）のフィルム又は凍
結乾燥物を形成することにより調製する。

フィルムは、リン脂質（Ｉ）及び（ＩＩ）及び成分Ｃ）
を有機溶剤に溶解し次いで溶剤を除去することによって
調製される。

適当な有機溶剤は、例えば未置換もしくは置換した、例
えばハロゲン化、脂肪族もしくは脂環式炭化水素、例え
ばＮ−ヘキサン、シクロヘキサン、メチレンクロリド、
又はクロロホルム、アルコール、例えばメタノールもし
くはエタノール、低級アルカンカルボン酸エステルもし
くはアミド、例えば酢酸エチルエステルもしくはジメチ
ルホルムアミド、又はエーテル、例えばジエチルエーテ
ル、テトラヒドロフランもしくはジオキサン、又はこれ
等の溶剤混合物である。

有機溶剤は、引き続き減圧することによりあるいは不活
性ガス、例えば乾燥窒素と共に吹き出すことにより除去
される。凍結乾燥物は、米国特許４．３１１，７１２に
記載した方法に従って有機溶剤中に溶解したリン脂質（
１）及び（ＩＩ）及び成分Ｃ）の溶液を常法により凍結
乾燥することによって得られる。

凍結乾燥物の調製用の適当な溶剤は、凍結乾燥プロセス
の温度でリン脂質（１）及び（ＩＩ）と共に固体状態に
あり更に０℃を超える融点を有し、例えば氷酢酸、ベン
ゼンもしくはジオキサン、特に第三ブタノールである。

均質混合物は又、クロロホルムの如き低沸点を有する有
機溶剤に溶解したリン脂質（１）及び（■）の溶液を噴
霧乾燥することによっても調製できる。

粉末はこの方法によって得られる。

均質混合物において、リン脂質成分（■）に対するリン
脂質成分（１）の割合は、約１０　：　９０．５０　：
　５０モルパーセントまでである。好ましくは３０　：
　７０モルパーセントの割合である。リン脂質（Ｉ）及
び（■）の全量で割った被包物質のモル量のお−よその
割合は、約０．０００１〜０．１　：　１．０、好まし
くは０．００５〜０．０１　：　０．１である。

分散方法は、リン脂質（１）及び（ＩＩ）及び成分Ｃ）
の均質混合物を、水性相に添加し次いで水相を撹拌（激
しく振とう−ヴオルテックスミキサー又は高速度で撹拌
）により行われる。小さな、大きな、単ラメラもしくは
多重リポソームの混合物が、外部エネルギーを適用する
ことなく高速度で自発的に形成される。水性分散液の全
重量に対する約０．１〜４０重量パーセント、好ましく
は２〜２０重量パーセントの均質混合物を、水性相に分
散することができる。好ましくは、このような分散液は
更に１ｍ１当り約１マイクロモルの脂質に希釈される。

この濃度のリポソーム分散液は、脂Ｍ１マイクロモル当
り約２．５マイクロリツトルの水性相にまでとなる。

リポソームの形態にある本発明に係る医薬組成物の調製
は、又リポソーム調製に対する技術における他の公知の
方法により、例えば超音波を用いた音波処理により、浸
出法によりあるいは逆相蒸発により行うことができる。

分散工程は、６０℃未満の温度で、好ましくは室温で行
われる。被包された物質の強力な熱的感受性を考慮する
と、分散は冷却しながら更に、所望により不活性ガス、
例えば贋素又はアルゴン雰囲気下で行うことができる。

得られたリポソームは、安定剤、例えばマニトールもし
くはラクトースを添加した後水性相中数週間あるいは数
ケ月まで貯蔵安定なものとし得る。

前記式■及び式■のリン脂質は公知である。それ等の幾
つかは商業的に入手可能である（八Ｖａｎｔ！＋Ｓｉｇ
ｅｍａ　、　Ｆｌｕｋａ　、　５ｅｒｖａ）、　１　、
２−ジ−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−
ホスファチジル−（Ｓ）−セリン及びその同族体の脂質
の調製は、ブラウニングＪ、及びシーリッヒＪ、により
記述されている（Ｃｈｅｗ、　ａｎｄ　Ｐｈｙｓ、　ｏ
ｆ　Ｌｉｐｉｄｓ　２４（１９７９）１０３−緩衝）。

前述の走化性ペプチドは又知られており更にそれ等の多
くは商業的に入手可能である０例えばシグマ−カタログ
参照。

次の実施例は本発明の精神を限定することなく本発明を
説明するものである。温度は℃（摂氏）で示される。

〔実施例〕

例１ ０．１翰ｇのＮ−ホルミル−し−メチオニル−し−ロイ
シル−し−フェニルアラニン、７５ｍｇの（少なくとも
９５％純度）ナトリウム１．２−ジ−（９−シス−オク
タデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジル−（Ｓ）−
セリン（ブラウニングＪ、及びシーリッヒＪ、に従って
製造、Ｃｈｅｗ、　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓｏｆ　Ｌｉ
ｐｉｄｓ　２４（１９７９）１０３−緩衝）及び１７５
ｍｇの（少なくとも９５％純度）１−ｎ−ヘキサデカノ
イル−２−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ
−ホスファチジルコリン（アヴエンテイ、Ｐｏ１ａｒ　
Ｌｉｐｉｄｓ）を、丸底フラスコ中の７８６Ｂの滅菌第
三ブタノールに溶解する。溶液を＾ｃｒｏｄｉｓｃｏフ
ィルター（２，０ＸＩＯ−１−）により滅菌濾過し、滅
菌バイアルに導入し次いで一４５°で凍結させる。バイ
アルを、温度が２５°に達するまで真空乾燥し、次いで
アルゴン雰囲気下で封止する。

使用前に、２．５ｒａ１の滅菌した、カルシウムを含有
しない、ホスフェート緩１％（ｐＦＩ７．２〜７．４）
食塩溶液（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ）を、滅菌注射器を用い室
温でこの乾燥調製品（凍結乾燥物）に添加し、次いでバ
イアルを標準実験振とう装’；ｆｌ　（Ｖｏｒｔｅｘ、
ダイアルセット６）中１分間振とうする。得られたリポ
ソーム分散液は、４°で貯蔵可能であり、かつ非経口（
ｉ、ｖ、）投与に対し適している。

例２ ７５ｍｇ　（０，０９１ミリモル）のナトリウム１．２
−ジ−（９−シス−オクタデセノイル）　　３−ｓｎ−
ホスファチジル−（Ｓ）−セリン、１７５ｍｇ　（Ｑ、
２３１ミリモル）の１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（
９−シスオクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジ
ルコリン及び０　、１ｍｇから１０ｍｇまでのＮ−ホル
ミル−し−メチオニル−し−ロイシル−し−７エニルア
ラニンから成るリポソーム含有水性分散液を、例１で記
載したと同様の方法で製造できる。

例３ ７５ｍｇ　（０，０９１ミリモル）のナトリウム１，２
−ジ−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホ
スファチジル−（Ｓ）−セリン、１７ｓｎｇ　（０，２
３１ミリモル）の１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９
−シスオクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジル
コリン、０．１ｍｇのＮ−ホルミル−し−メチオニル−
Ｌ−ロイシル−し−フェニルアラニン及び０．１ｍｇの
Ｎ−アセチルムラミル−し−アラニル−Ｄ−イソグルタ
ミニルーし一アラニンー２−（１，２−ジパルミトイル
−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）
−エチルアミド（ヨーロッパ特許２５４９５に従って調
製）は、例１で記載したと同様に製造することができる
。

以下余白 例４ ０．１ｍｇのＮ−ホルミル−し−メチオニル−Ｌ−口イ
シル−Ｌ−フェニルアラニン、７５闘（少なくとも９５
％の純度）のナトリウム１，２−ジ−（９−シス−オク
タデセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジル−（Ｓ）−
セリン（ブラウニングＪ、及びシーリッヒＪ、に従って
調製、Ｃｈｅｗ　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓｏｆ　Ｌｉｐ
ｉｄｓ　２４（１９７９）１０３−緩衝）及び１７５ｍ
ｇの（少なくとも９５％純度）１−ｎ−ヘキサデカノイ
ル−２−（９−シス−オクタデセノイル）　　３　　ｓ
ｎ−ホスファチジルコリン（＾ｖａｎｔｉ、　Ｐｏ１ａ
ｒ　Ｌｉｐｉｄｓ）を、丸底フラスコ中７８６ｗａｇの
滅菌第三ブタノールに溶解する。溶液を＾ＣＲＯディス
クフィルター（２，０ｘ１０−’Ｍ）で滅菌１１遇し、
滅菌バイアルに導入し、−４５°で凍結する。バイアル
、を、２５°の温度に達するまで真空下で乾燥し、次い
でアルゴン雰囲気下で封止する。

使用前に、滅菌したカルシウムを含有しないホスフｘ−
１１１Ｕｍ食塩水（ａｌ１７．２〜７．４）　（Ｄｕｌ
ｂｅｃｃｏ）に溶解した丁度２Ｘ１０５Ｕ／社に希釈し
た滅菌組み換えヒトガンマ−インターフェロン溶液２．
５ａｒを、滅菌注射器を用い室温で該乾燥調製品（凍結
乾燥物）に添加し、次いでバイアルを標準実験振とう装
置（Ｖｏｒｔｅｘ、ダイアルセット７）中１分間振とう
する。得られたリポソーム分散液は、非経口（ｉ　、ｖ
、）投与に対し適当である。

例５　試験報告 ■、材料及び方法 Ａ、フリーのＦＭＬＰ保存溶液の調製 ＦＭＬＰをシグマ−化学社から購入した。保存溶液（１
０ｍＭ）をメタノールに溶解し次いで使用前に一７０°
で保存しな、フリー形態の使用に対し、保存溶液をＣＮ
ＥＭ含有５％ＦＢＳで１０−’Ｍ〜１０−　’　Ｍの濃
度に希釈した。

Ｂ、ＦＭＬＰ−リポソームの調製 ＦＭＬＰをリポソームに被包させる為、メタノール保存
溶液からのＦＭＬＰを、クロロホルム中側１のリン脂質
ＰＣ／ＰＳ、７：３モル比と共に混合した。溶剤及び残
留溶剤を窒素雰囲気下少なくとも１時間蒸発させた。多
重ラメラ小胞（ＭＬＶ）を、ＣＭＥＭを乾燥フィルムに
添加し、次いでリポソームの均質懸濁液が得られるまで
うす巻き混合することにより調製した。フリーの非被包
ＦＭＬＰを、１５分間１２．０００．でＭＬＶをベレッ
ト化することにより除去した。

１０−３Ｍ　ＦＭＬＰ＝リン脂質：　ＦＭＬＰモル比　
　１：１１０−４Ｍ　ＦＭＬＰ＝リン脂質：　ＦＭＬＰ
モル比　　１０：１１０−’Ｍ　ＦＮＬＰ＝リン脂質：
　ＦＩ４ＬＰモル比　１００：１１０−’Ｍ　ＰＮＬＰ
＝リン脂質：　ＦＭＬＰモル比　１０００　：　１１０
−４Ｍ　ＦＭＬＰ＝リン脂質：　ＦＭＬＰモル比１００
００　：　１■、マクロファージ介在細胞毒性の試験管
内試験マクロファージ介在細胞毒性を、ソーンＳ、およ
びフィドラ−１，Ｊ、（Ｃｅｌｌ　Ｉ＋＊ｍｕｎｏｌｏ
ｇｙ　５）、４２（１９８１））によって記載された如
き放射活性放出分析によって評価した。指数関数的増殖
相の標的細胞をＣＩ２’Ｉ）　ＩｄＵｒｄ（０，２μｃ
ｉ／ｍＺ　；特異活性、２００ｍｃｉ／ｍ輪ｏ１；ニュ
ーイングランド　ニューフレア、ボストン、ＭＡ）で補
足した媒質中２４時間インキュベートした。次いで、細
胞を温＋１８ｓｓで３回洗い未結合の放射ラベルを除去
し、短時間のトリプシン処理（０，２５％Ｄｉｒｃｏ）
リプシンおよび０．０２％ＥＤＴ＾、３７℃で１分間）
により細胞を集め、次いでＣＭＥＭ含有５％ＦＢＳに再
懸濁させた。生存細胞を、マクロファージを含むウェル
に入れ１１平方当たり２５００個のマクロファージおよ
び２５０個の腫瘍細胞（又は最初のマクロファージ：標
的細胞割合１０／　１　）の集団密度を得た。この集団
密度で、正常（未処理）マクロファージは、１！１ｉ瘍
細胞に対しては細胞毒性でない、対照又はリポソーム−
処理マクロファージ集団に対する、（”’Ｉ）　ＩｄＵ
ｒｄ標的細胞のコロニー形成率（結合）において著るし
い差異は検出されなかった。放射ラベルした標的細胞を
、別の対照群として単独でプレートした。マクロファー
ジ−標的細胞培養物を、標的細胞の添加２４時間後培地
に再び供給し、全ての非プレート細胞を除去し次いで３
７°で３日間までインキュベートした。この時、培養物
をＨＢＳＳで２回洗い付着細胞を除き、次いで残存の生
存、付着細胞を０．１社の０．ＩＮ　　Ｎａ０１１を用
いて分離した。分Ｍ物を綿モツプに吸着させ次いで１０
　Ｘ　７５ｍｍの管に直接に入れ、ガンマ−測定器で放
射能を測定した。この分析により最大のインビトロマク
ロファージ介在細胞毒性を、標的細胞と共に３日間イン
キュベーションした役得、更にマクロファージは孔んだ
標的細胞から放出された（　１２’ｊ）　ＩｄＵｒｄと
は再合体しなかった。マクロファージの細胞活性度は次
のように計算した： 実験結果を、スチューデントの２−テールドｔテストに
よりそれらの統計的意義に対し分析した。

表から明うカなように、ＰＣ／ＰＳ−ＦＭＬＰＭ　　Ｍ
ＬＶトりわけＦＭＬＰ濃度（１０−口〜１０−４Ｍ）は
、７２時間の共培養中標的Ｂｍ細胞を分離するためマウ
スのマクロファージを効果的に活性化した。一方、全て
の濃度で遊離形のＦＭＬＰは、マクロファージ殺腫瘍性
において無効であった。結局、これらの結果は、リポソ
ーム内に被包されたＦＭＬＰがマクロファージ活性化剤
として作用していることを示す。

表：マウスの腹膜マクロファージの細胞毒性活性に対す
る、ＰＣ／ＰＳ−ＦＭＬＰ内に被包されたＦＭＬＰの効
果

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ａ）次式 I ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、ｎは１、２又は３であり、Ｒ＿１およびＲ＿２
   は独立に互いにＣ＿１＿０＿〜＿２＿０アルキル、Ｃ＿
   １＿０＿〜＿２＿０アルケニルもしくはＣ＿１＿０＿〜
   ＿２＿０アシルを表わし、さらにＹ＾■は医薬として許
   容され得る塩基である）で表わされるリン脂質、 ｂ）次式II： ▲数式、化学式、表等があります▼（II） （式中、ｎは２、３、又は４であり、Ｒ＿１およびＲ＿
   ２は式 I で定義した意味と同じであり、さらにＲ＿３
   、Ｒ＿４およびＲ＿５は水素もしくはＣ＿１＿〜＿４ア
   ルキルである） で表わされるリン脂質、 ｃ）走化性ペプチド、又は消炎剤、抗生物質、抗リーシ
   ュマニア剤、抗カビ剤、抗腫瘍剤および免疫調節剤から
   成る群から選ばれる医薬と一緒にした走化性ペプチド、
   および所望により、ｐＨ７．０〜７．８に緩衝した医薬
   として許容され得る担体溶液、および／又は医薬として
   許容され得る添加剤から成る医薬投与系。 ２、ａ）式 I （式中、ｎ、Ｒ＿１、Ｒ＿２、およびＹ
   ＾■は先に定義した意味である）のリン脂質、 ｂ）式II（式中、ｎ、およびＲ＿１〜Ｒ＿５は先に定義
   した意味である）のリン脂質、 ｃ）Ｎ−ホルミル−Ｌ−メチオニル−Ｌ−ロイシル−Ｌ
   −フェニルアラニン（ＦＭＬＰ）又はＮ−ホルミル−Ｌ
   −メチオニル−Ｌ−フェニルアラニン（ＦＭＰ）、およ
   び所望により抗炎消剤、抗生物質、もしくは抗腫瘍剤さ
   らに所望により、ｐＨ７．２〜７．４に緩衝した医薬と
   して許容され得る担体溶液と組合せてなる、特許請求の
   範囲第１項記載の医薬投与系。 ３、ａ）式 I （式中、ｎは１であり、Ｒ＿２およびＲ
   ＿２は各々Ｃ＿１＿０＿〜＿２＿０アシルであり、Ｙ＾
   ■はナトリウムイオンである）のリン脂質、 ｂ）式II（式中、ｎは２であり、Ｒ＿１およびＲ＿２は
   各々Ｃ＿１＿０＿〜＿２＿０アシルであり、Ｒ＿３〜Ｒ
   ＿５は水素、又はメチルである）のリン脂質、 ｃ）ＦＭＬＰ、又はＦＭＰ、所望によりＮ−アセチルム
   ラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−ア
   ラニル−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセ
   ロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミド
   、Ｎ−アセチル−デスメチルムラミル−Ｌ−アラニル−
   Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩又はＮ−アセチル−
   Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミンのナ
   トリウム塩と組合わせ、さらに所望によりｐＨ７．２〜
   ７．４に緩衝した医薬として許容し得る担体溶液から成
   る、特許請求の範囲第１項記載の医薬投与系。 ４、ａ）合成の、本質的に純粋なナトリウム−１，２−
   ジ−（９−シス−オクタデセノイル）−３−ｓｎ−ホス
   ファチジル−（Ｓ）−セリン（ I ）、ｂ）合成の、本
   質的に純粋な１−ｎ−ヘキサデカノイル−２−（９−シ
   ス−オクダセノイル）−３−ｓｎ−ホスファチジルコリ
   ン（II）、 ｃ）ＦＭＬＰ、又はＦＭＰ、所望によりＮ−アセチルム
   ラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−ア
   ラニル−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセ
   ロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミド
   、Ｎ−アセチル−デスメチルムラミル−Ｌ−アラニル−
   Ｄ−イソグルタミンのナトリウム塩又はＮ−アセチル−
   Ｄ−ムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミンのナ
   トリウム塩を組合わせ、さらに所望によりｐＨ７．２〜
   ７．４に緩衝した医薬として許容し得る担体溶液から成
   る、特許請求の範囲第１項記載の医薬投与系。 ５、特許請求の範囲第１項記載の医薬投与系をそのよう
   な投与が必要であるホストに投与することを含んで成る
   、動物（人を除く）の病気の治療方法。