JPS6387985A - エタノ−ルの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 −＋＋す るものである。エタノールは溶剤、燃料、種々の積する
微生物は多く知られている。嫌気性菌では、クロストリ
ジウム・パイファーメンタンス（Ｃ１ｏ−ｓｔｒｉｄｉ
ｕｍ　ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ　）　、クロストリジ
ウムーソルデリ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　５ｏｒｄｅ
ｌｌｉｉ　）　、、りＣ１−２トリジウム・スフェノイ
デス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　５ｐｈｅｎｏｉ−ｄｅ
ｓ　）などがある。

（発明が解決しようとする問題点） これまでに、エタノールを製造する微生物として、前記
のような菌が知られているものの、解決すべき課題は、
まだ多く、そのためては、エタノールを製造しうる新菌
種の創製がきわめて重要な手段となる。本発明は、この
ような意図のもとに炭素源を資化して、培地中にエタノ
ールを蓄積する新規微生物を得、これを用いたエタノー
ルの新製法を提供することを目的とする。

（問題点を解決するための手段） 本発明はクロストリジウム・エスピー（（’１ｏｓ−本
発明で用いられる微生物はクロストリジウム本国は、偏
性嫌気性有胞子桿菌である点でクロストリジウム属に属
する菌と考えられるが、グラ７．ム染色性、炭素源の資
化性など後で詳しく記す諸性質において公知の同属菌と
相違しており、新菌種であると考えられる。正式の種名
はまだ付されていないので、本発明ではクロストリジウ
ム・エスピーＡＳＩと表示する。次に本国の創製法およ
び菌学的性質を示す。

（創製法） 本国は下記の方法により分離した。すなわち第１表に示
す液体培地にソルボース１２／ｌを加えた培地５　ｍｌ
を試験管へ分注し滅菌後、嫌気グローブボックス中で給
源を添加し、ブチルゴム栓で密栓後、気相を嫌気ガスに
置換し、３０℃で静置培養し、約１０日毎に植え継ぎを
行った。１回液体培地で植え継いだのち、第１表の培地
に寒天３チ、を得た。

１Ｊｎｉｖ＠ｒｓｉｔｙ　、　Ｂｌａｃｋｓｂｕｒｇ（
１９７２）　）および「バーシーズ・マニュアル・オプ
・デターミネイティブ会バクテリオロジ−（Ｂｅｒｇｅ
ｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｂ　Ｄｅｔｅ−ｒｍｉｎａｔ
ｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｇ）第８版、「微生物
の分類と同定」（長谷用武治著、学会出版センター）に
記載されている方法、培地組成を用いた。

（顕微鏡的所見） １、細胞の形および大きさ：単独もしくは３〜４連の直
桿菌。幅０．４〜０．８μｍ、長さ３〜８μｍ ２、鞭毛：周鞭毛を有する ３、胞子：あり、ターミナル ４、ダラム染色：陰性 （培地組成） 第１表に例示する。

第１表 第１表の組成に３チ寒天１１／ｌノルボースを加えた寒
天培地での生育は次のとおりである。

形状二円形 周縁−円滑 隆起：わずかに盛上る 表面二円滑 色調：白 （生理的性質） ■　酸素に対する態度：偏性嫌気性 ■　インドールの生産性ニー ■　ゼラチンの液化−一 培地を作成し本国を８０μｌ植菌し、気相を窒素（６７
％）と二酸化炭素（３３％）を含む除菌ガスに置換し、
３０℃で１４日間靜静置養した。生育は６００　ｎｍの
濁度を分光計（スペクトロニック２０．高滓製作所製）
で測定した。６００　ｎｍの濁度が炭素源を含まないコ
ントロールとの差が０．１未満のものを「資化しないＪ
、０．１以上０．２未満のものを「わずかに資化する」
０．２以上のものを「資化する」とした。

資化するもの：ラフィノース、ガラクトース。

ラムノース、グリコーゲン、トレハロース、マンノース
、グルコース、アミグダリン、ソルボース資化しないも
の：フルクトース、キシロース。

リボース、アラビノース、マルトース、シエクローズ、
ラクトース、メリビオース、セロビオース。

メレジトース、マ／ニトール、テンプン、アドニ源にお
いて培地中には、主生産物として酢酸、エタノールが生
産された。

（従来の類似種との比較） 上記の菌学的性質から、このクロストリジウム・エスピ
ーＡｓ　　１は、偏性嫌気性のダラム陰性有胞子桿菌で
、その主要発酵代謝産物が酢酸、エタノールである菌株
である。また、硫化物の還元性もない。このようなこと
から、本国はクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕ
ｍ　）に属する菌株であると考えられる。ダラム陰性の
クロストリジウムにはクロストリジウム・セロビオパル
ム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｃｅｌｌｏｂｉｏｐａｒｕ
ｍ　）　、クロストリジウム・サーモサツカロリテイカ
ム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｔｈｅｒｍｏｓａｃｃｈ
ａｌｏｌｙ−ｔｉｃｕｍ　）　＋　クロストリジウム・
プレビファシエンスム、クロストリジウム・サーモセラ
ムは高温菌とそして、クロストリジウム・セロビオパル
ム、クロストリジウム・クイペリは生産物が、酢酸、カ
プロン酸という点で区別できる。

以上のことから、本菌株はクロストリジウム属知属する
新菌種であると考えられるので、クロストリジウム・エ
スピーＡＳ　　１と命名した。さら疋この菌株は工業技
術院微生物工業技術研究所に「微工研菌寄第８８５２号
（Ｆ　ＥＲＭ　Ｐ−８８５２）として寄託した。

（培養方法） 培養方法は原則的には、一般の微生物の場合と同様であ
るが、酸素の混入を防ぐことが必要であり、実験室的に
は、ゴム栓等で密栓した培養器中で、静置あるいは振盪
する方法が用いられる。やや大きい規模では、通常用い
られる醗酵槽がそのまま利用でき、装置内の酸素は、窒
素などの不活性気体などで置換することにより嫌気的な
雰囲気型の醗酵槽も利用できる。

通常の醗酵に用いうる各種の窒素化合物を用いることが
できる。

その他必要に応じ、リン酸二水素カリ、硫酸マグネシウ
ム、硫酸マンガン、塩化ナトリウム、硫酸鉄、塩化コバ
ルト、塩化カルシウム、硫酸亜鉛、硫酸銅、明ばん、モ
リブデン酸ソーダ、硼酸などの無機化合物、あるいはビ
オチ／や酵母エキスナどのビタミン類を添加することは
、通常行なわれる通りである。

培地中に蓄積されたエタノールは公知の技術により回収
することができる。

（発明の効果） 本発明より嫌気的に醗酵によりエタノールを生産するこ
とが出来る。以下具体例てより本発明を説明する。

実施例１ ３０℃で１０日間靜１培養を行なったところ、培養液中
にエタノールｃ）、Ｂ４ｙ／ｌｆｔｍだ。エタノールは
ガスクロマトグラフ−買置分析計により標品と一致する
ことを確認した。（同時て酢酸を生成物として得た。） 実施例２ 第１表の基本培地ＫＬＯｆ／ｌのアミグダリ／を加え、
実施例１と同様に培養を行なった。静置培養１４日間で
０．９２ｆ／ｌのエタノールを生産した。（同時に酢酸
を生成物として得た。）実施例３ 第１表の基本培地に１０ｆ／Ｊのグルコースを加え、実
施例１と同様に培養を行なった。静置培養１４日間で１
．１ｆ／Ａ！のエタノールを生産した。

（同時に酢酸を生成物として得た。） 実施例４ 第１表の基本培地に１０ｔ／ｌのフルクトースを加え、
実施例１と同様に培養を行なった。静置培養１４日間で
１．２ｆ／ｌのエタノールを生産した。（同時に酢酸を
生成物として得た。）実施例５ 第１表の基本培地に１０ｆ／ｌのラムノースを〜加え、
実施例１と同様に培養を行なった。靜置培パ°た。（同
時に酢酸を生成物として得た。）′　実施例６ 第１表の基本培地に１Ｏｆ／Ａ！のガラクトースを加え
、実施例１と同様に培養を行なった。静置培養１４日間
で０．９６ｆ／Ｊのエタノールを生産を加え、実施例１
と同様に培養を行なった。静置培養１４日間で０．８１
４／ｌのエタノールを生産した。（同時に酢酸を生成物
として得た。）実施例　１３

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. クロストリウム・エスピーＮｏ．Ｓ−１を培養し、生成
   蓄積されたエタノールを回収することを特徴とするエタ
   ノールの製造方法