JPS6365075B2

JPS6365075B2 -

Info

Publication number: JPS6365075B2
Application number: JP19521681A
Authority: JP
Priority date: 1981-12-04
Filing date: 1981-12-04
Publication date: 1988-12-14
Also published as: JPS5899498A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は式で表わされるフラボン誘導体に関するものであ
る。ただし、R₁はソホロシル基、グルコシル基
または水素を意味し、R₂およびR₃は一方が水素
を、他方がフエルロイル基を意味する。さらに詳しくは、本発明はＯ−フエルロイルグ
ルコシルケンフエロールおよびその３−Ｏ−グル
コシルもしくはソホロシル誘導体に関するもので
ある。これらの化合物はニラの抽出物から得られ、あ
るいはこれを原料として加熱、酵素処理、酸処理
等の処理手段により得ることができ、線溶誘導活
性および／または抗アレルギー作用を有し医薬と
して期待される。ニラ（Allium tuberosum Rottl）は、広く食
用に供されているが、その薬理作用については殆
んど知られていない。漢方ではその種子が白色帯
下、頻尿らに用いられることもあるが、その葉茎
部は全く用いられていない。またニラの成分研究
も少なく、含硫黄揮発性物質が数種知られている
が、その他の成分に関してはこれまでに殆んど報
告が見られない。本発明者らは、ニラの葉茎部の抽出エキスから
線溶誘導作用および／または抗アレルギー作用を
もつ新規フラポノイドを単離し、フラボノイドＡ
と命名しした。フラボノイドＡの構造は、ケンフ
エロール（kaemferol）骨格を有し、その３位に
ソホロール（sophorose）、また７位に２−フエ
ルロイルグルコース（２−feruloylglu−cose）
の結合したものである。フラボノイドＡ水溶液を加熱することによりフ
エルロイル基が２位から６位に転位したフラボノ
イドＢが得られ、またこのフラボノイドＢを希酸
で加水分解すると３位ソホロースの脱離したフラ
ボノイドＣが得られた。また、フラボノイドＡを
希酸で加水分解すれば、３位ソホロースの脱離し
たフラボノイドＤが得られ、さらに、フラボノイ
ドＡをヘスペリジナーゼで酵素分解することによ
り、３位ソホロースから１個のグルコースの脱離
したフラボノイドＥが得られた。これらの化合物
は、いずれも薬理活性を有し、かつ新規物質であ
る。フラボノイドＡを得るには、ニラの葉茎部を新
鮮のまゝあるいは乾燥したのち、水または含水有
機溶媒で抽出する。葉茎部はそのまま抽出しても
よいが、抽出効率を高めるために切断または粉砕
して用いる方が望ましい。抽出溶媒は水のみより
も、それに適量の有機溶媒、例えばメタノール、
エタノール、プロパノールなどのアルコール、ア
セトン、ジオキサンなどを添加した混合溶媒の方
が抽出効率が良い。またベンゼン、ヘキサンなど
でクロロフイルなどの色素を除去したのち、水で
抽出する方法でも良い。ただし、いづれの溶媒を
用いる場合でも、フラボノイドＡが熱に対して不
安定であるため、抽出温度は室温以下であること
が望ましい。例えば、新鮮ニラ葉茎部を３乃至５
倍量の80％メタノールと室温３〜６日冷浸したの
ち、濾過して抽出液を得る。抽出液からフラボノイドＡを分離精製するには
一般の天燃物の単離に用いられる公知の手段を適
宜組合せて行うことができる。すなわち、非極性
多孔性ポリマー、デキストランゲル類、活性炭、
ポリアミド類やシリカゲル類を用いた吸着クロマ
トグラフイーや分配クロマトグラフイーが適用で
きる。また、これらのクロマトグラフイーを高速
液体クロマトグラフイー装置を用いて行うことも
できる。さらに必要によりブタノールなど適当な
溶媒を用いて再結晶することもできる。フラボノイドＡは新規物質であり、次の理化学
的性質を有する。 (イ) 性状：ｎ−ブタノール−エタノールから再結
晶したとき、融点209〜212℃の淡黄褐色粉末晶
を与える。 (ロ) 元素分析計算値（C₄₃H₄₈O₂₄・H₂O）Ｃ 53.42％、Ｈ 5.21％実測値Ｃ 53.27％、Ｈ 4.98％ (ハ) 呈色反応塩酸マグネシウム反応、塩化第二鉄反応に陽
性、ニンヒドリン反応、ドラーゲンドルフ反応
に陰性。 (ニ) 紫外部吸収スペクトル λ^EtOH _nax（1ogε）：233（4.36）、246（4.27）、26
9
（4.31）、333（4.42） λ^EtOH-AlCl3 _naxｎｍ（1ogε）：234（4.35）、278
（4.35）、302（4.23）、339（4.31）、399（4.08） λ^EtOH-NaOEt _naxｎｍ（1ogε）：248（4.53）、268
（4.50）、388（４、60） λ^EtOH-NaOAc _naxｎｍ（1ogε）：233（4.36）、247
（4.26）、268（4.29）、333（4.41） (ホ) 赤外部吸収スペクトル ν^KBr _naxcm^-：3390、1650、1600、1070 (ヘ) マススペクトル FD−MSm／ｚ：1133、1119、9887（M⁺＋
Ｋ）、9771（M⁺＋Na）、957、809、795、663、
647、633、487、471。 (ト) 溶解性水に易溶、ジメチルホルムアミド、ジメチル
スルホキサイドに可溶、エタノール、メタノー
ル、クロロホルム、アセトン、ベンゼン、エー
テル、酢酸エチルに難溶。 (チ) 核磁気共嗚スペクトル（200MHz、DMSO−d₆−D₂O）δppm（ＪHz）： 3.80（3H、ｓ） 4.65（1H、ｄ、Ｊ＝８） 4.97（1H、ｔ、Ｊ＝８） 5.46（1H、ｄ、Ｊ
＝８） 5.69（1H、brd、Ｊ＝８） 6.41（1H、ｓ） 6.50（1H、ｄ、Ｊ＝16） 6.80（1H、ｓ） 6.83（1H、ｄ、Ｊ＝８） 6.95（2H、ｄ、Ｊ
＝８） 7.16（1H、ｄ、Ｊ＝８） 7.31（1H、ｓ） 7.64（1H、ｄ、Ｊ＝16） 8.11（2H、ｄ、Ｊ
＝８） (リ) 酸分解物 1N−塩酸中、100℃、５時間加水分解したと
き、ケンフエロールおよびグルコースを生成す
る。 (ヌ) アルカリ分解物１％カセイカリ水溶液中、室温、15時間加水
分解したとき、フエルラ酸を生成する。 (ル) 糖のメチル化分析アルジトールアセテート法により、３，４，
６−トルメチルグルコース1.00モルに対し、
２，３，４，６−テトラメチルグルコースを
1.97モル検出した。上記の理化学的性質から、フラボノイドＡの構
造式は、下記のごとく推定された。すなわちフラ
ボノイドＡはは３−Ｏ−β−Ｄ−ソホロシル−７
−Ｏ−β−Ｄ−（2″−Ｏ−フエルロイル）グルコ
シルケンフエロールである。フラボノイドＢを得るためには、フラボノイド
Ａ水溶液を加熱すればよい。水溶液のPHは中性附
近もしくはアルカリ性であることが必要で、酸性
側のPHでは転位反応が起り難い。ただし、アルカ
リ側のPHでは、フエルロイル基の脱離などの副反
応を助長するので好ましくない。また反応温度は
室温乃至100℃の間のいづれを選んでもよいが、
低温では、反応の進行が遅いため、80乃至100℃
の範囲が望ましい。フラボノイドＢの生成は、反
応時間に比例して増加するが、10時間以上の長時
間では副反応が起るので、好ましくは２乃至５時
間の反応時間が適当である。反応液からフラボノ
イドＢを得るには反応液を氷冷し、生ずる沈でん
を集め、含水アルコールなどの溶媒から再結晶す
ればよい。フラボノイドＢは以下の理化学的性質を有する
ことから、フラボノイドＡの２位フエルロイル基
が６位に転位した構造であると推定された。 (イ) 性状：50％メタノールから再結晶したとき融
点214〜217℃の微黄色針状晶を与える。 (ロ) 元素分析計算値（C₄₃H₄₈O₂₄・2H₂O）Ｃ 52.44％、Ｈ 5.32％実測値Ｃ 52.38％、Ｈ 5.09％ (ハ) 溶解性アルカリ性水溶液、ジメチルホルムアミドお
よびジメチルホキサイドに易溶、エタノールに
可溶、水およびベンゼン、酢酸エチル、エーテ
ル、メタノールなどに難溶。 (ニ) 紫外部吸収スペクトル λ^EtOH _naxｎｍ（1ogε）：233（4.31）、247（4.21）
、
298（4.22）、333（4.33） λ^EtOH+AlCl3 _naxｎｍ（logε）：235（4.30）、279
（4.28）、303（4.16）、338（4.30）、396（3.94） λ^EtOH+NaOAc _naxｎｍ（logε）：234（4.29）、248
（4.17）、268（4.19）、334（4.31） (ホ) 赤外部吸収スペクトル ν^KBr _naxcm^-1：3400、1655、1600、1080 (ヘ) マススペクトル FD−MS ｍ／ｚ：987（M⁺＋Ｋ）、971（M⁺
＋Na）、809、795、663、633 (ト) 該磁気共嗚スペクトル（200MHz、DMSO−
d₆−D₂O）δppm（ＪHz）： 3.80（3H、ｓ） 4.21（1H、dd、Ｊ＝12.8） 4.52（1H、Ｊ＝12） 4.66（1H、ｄ、Ｊ＝８） 5.18（1H、ｄ、Ｊ＝８） 5.70（1H、brd、Ｊ
＝８） 6.47（１、ｄ、Ｊ＝16） 6.55（1H、ｓ） 6.82（1H、ｄ、Ｊ＝８） 6.85（1H、ｓ） 6.93（2H、ｄ、Ｊ＝８） 7.08（1H、ｄ、Ｊ
＝８） 7.27（1H、ｓ） 7.59（1H、ｄ、Ｊ＝16） 8.12（2H、ｄ、Ｊ＝８）フラボノイドＣは、フラボノイドＢの部分加水
分解によつて得られる。フラボノイドのグルコサ
イドは結合位置により酸加水分解に対する抵抗性
が異なることは公知（例えば、J.B.Harborne、
Phytochemistry４、107（1965年））であり、７位
グルコサイドを残し、３位グルコサイドのみを選
択的に加水分解することができる。この方法を適
用して、フラボノイドＢから得たフラボノイドＣ
の理化学的性質は表１に示した。フラボノイドＤは、同様にして、フラボノイド
Ａの３位グルコサイドを部分加水分解して得ら
れ、その理化学的性質は表１に示した。フラボノイドＥは、フラボノイドＡの３位ソホ
ロースの非還元末端のグルコースのみを選択的に
加水分解する方法、例えばヘスペリジナーゼを用
いる酵素分解で得ることができる。フラボノイド
Ｅの理化学的性質は表１に示した。

【表】フラボノイドＡ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥの線溶誘
導活性および抗アレルギー活性を試験した結果を
表２に示した。

【表】実施例１ニラの葉部（湿重量8.0Kg）を粉砕し、80％メ
タノール25で室温にて６日間抽出した。濾過
後、濾液からメタノールを留去し、得られた水溶
液を多孔性樹脂（三菱化成製ダイヤイオンHP−
20）1.0のカラムに通過させ、水３で洗浄し
た。つぎに80％メタノール２で溶離する部分を
集め、濃縮乾固して、濃褐色粉末が14.0ｇ得た。この粉末9.0ｇを10％メタノール１に溶かし、
10％メタノールで充填したHP−20（1.0）カラ
ムにかけた。カラムを10％メタノール１、50％
メタノール２で洗浄後80％メタノール２で溶
離する部分を集め、濃縮乾固すれば、茶褐色粉末
が2.48ｇ得られた。つぎにこの粉末1.60ｇを90％メタノール80mlに
溶かし、逆相系シリカゲル（東洋曹達製TSK−
GEL LS−410 ODS SIL）（１×12インチ）カラ
ムを用いて高速液体クロトト装置による分取を行
つた。溶媒は60％メタノール、流速は14ml／分、
サンプルの注入量は毎回３mlとし、紫外部254n
ｍによつて検出した。活性画分として保持時間６
ないし８分の部分を分取し、濃縮乾固して0.50ｇ
の茶褐色粉末を得た。さらに、精製するために再びLS−410カラムに
かけた。すなわち、この粉末346mgを45％メタノ
ール17.3mlに溶かし、LS−410カラム（１×12イ
ンチ）を接続した高速液体クロマト装置により分
画した。45％メタノールを流速14ml／mmで流し、
18ないし21分の保持時間で溶出する活性画分を集
め、濃縮乾固すれば淡褐色粉末が44mg得られた。
この粉末をｎ−ブタノール−エタノールの混合溶
媒から再結晶し、フラボノイドＡを淡黄褐色粉末
晶として得た。実施例２フラボノイドA109mgをPH7.0のリン酸緩衝液
10.9mlに溶解し、沸騰水溶上で３時間加熱した。
一晩冷蔵庫内に放置し、生じた沈殿を遠心分離し
た。沈殿は水５mlで洗浄後、50％メタノールで再
結晶し、微黄色針状晶のフラボノイドＢを55mg得
た。実施例３フラボノイドB40mgを2.5％硫酸の50％エタノ
ール溶液10ml中で100分間加熱還流した。反応液
を酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル相を水洗、乾
燥後、濃縮乾固した。得られた黄色粉末をエタノ
ールから再結晶すれば、黄色針状晶のフラボノイ
ドC13mgが得られた。実施例４フラボノイドA50mgを５％硫酸３mlに溶解し、
沸騰水浴上で100分間加熱した。冷却後生じた黄
色沈殿をエタノールから再結晶して、黄色粉末晶
のフラボノイドD10mgを得た。実施例５フラボノイドA100mgをPH４のクエン酸−リン
酸緩衝液25ml中で可溶性ヘスペリジナーゼ（田
辺）200mgを用い37℃で40時間酵素分解した。冷
却後生じた沈殿を十分に水洗し、黄色粉末晶のフ
ラボノイドE61mgを得た。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（式中R₁はソホロシル基、グルコシル基または
水素を、R₂およびR₃は一方が水素を、他方がフ
エルロイル基をあらわす。）であらわされるフラ
ボン誘導体。２３−Ｏ−β−Ｄ−ソホロシル−７−Ｏ−β−
Ｄ−（2″−Ｏ−フエルロイル）−グルコシルケンフ
エロールである特許請求の範囲第１項記載の化合
物。３３−Ｏ−β−Ｄ−ソホロシル−７−Ｏ−β−
Ｄ−（6″−Ｏ−フエルロイル）−グルコシルケンフ
エロールである特許請求の範囲第１項記載の化合
物。