JPS63501568A - リポソ−ムに有効に組み込まれた疎水性シス−プラチナ複合体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新しく合成された疎水性を有するプラチナ複合体に関する。予め合成 した該新規複合体を組み込んだリポソームの、抗癌化学療法における用途に関し ても記載する。

シス−プラチナ（ＣＤＤＰ）は、ヒトの種々の新生物疾患の治療において非常に 効果的な薬物である（レーラー（Ｌ　ｏｅｈｒｅｒ）ら、（１９８４年）、アナ ールズ・オブ・インターナル・メディシン（Ａｎｎ、Ｉ　ｎｔ。

Ｍｅｄ、　）、第１００巻、７０４〜７１３頁）。しかし、重篤な全身毒性、と りわけ腎毒性および神経毒性の故に、その用途は限定されている（ラウェリング （Ｚｗｅｌｌｉｎｇ）ら、プラチナ・コンブレフシーズ（Ｐ　ｌａｔｉｎｕｍ　 Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ）、ファーマコロジック・プリンシブルズ・オブ・カンサー ・トリートメント（Ｐ　ｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ　ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆ 　ｃａｎｃｅｒ　ｔｒｅａｔｒＡｅｎｔ）、（１９８２年）、編ビー・ニー・チ ャブナ（Ｂ、　Ａ、　Ｃｈａｂｎｅｒ）、ソーンダース（Ｓ　ａｕｎｄｅｒｓ） 、フィラデルフィア、ペンシルバニア）。ＣＤＤＰの治療指数を高める試みにお いて、ここ十年来、新規な誘導体が合成されている。しかし、このような有望な 類縁体の開発は、その水溶性が乏しい故に困難であり、臨床的使用の可能性が低 い（パーチェナル（Ｂｕｒｃｈｅｎａ　１）ら、（１９７９年）、カンサー・ト リートメント・レボーツ（Ｃａｎｃｅｒ　Ｔｒｅａｔ、　Ｒｅｐ、　）、第６３ 巻、１４９３〜１４９７頁）。

リポソームは、乾燥脂質フィルムに水溶液を加えると自然に形成し得る脂質小胞 である（メイヒュー（Ｍａｙｈｅｖ）ら、リポソームズ（Ｌ　ｉｐｏｓｏｍｅｓ ）、（１９８３年）、編マーク・ジェイ・オストロ（ＭａｒｅＪ、　０ｓｔｒｏ ）、マーセル・デツカ−社（Ｍａｒｃｅｌ　Ｄｅｋｋｅｒ、Ｉｎｃ、　）、ニュ ーヨーク、ニューヨーク）。リポソームは、それぞれリポソームの疎水性または 親水性のコンパートメントに保持した疎水性または親水性薬剤用の薬剤担体とし て使用し得る。多重ラメラリポソームは、疎水性コンパートメントが親水性コン パートメントよりも大きい故に、疎水性薬剤用担体として特に適当な多重脂質小 胞（ＭＬＶ）である。動物に対して（カシ（Ｋａｓｉ）ら、（１９８４年）、イ ンターナショナル・ジャーナノいオブ・ヌクレアー・メディシン・アンド・バイ オロジー（Ｉ　ｎｔ、　Ｊ、　Ｎｕｃｌ、　Ｍｅｄ、　Ｂｉｏｌ、　）、第１１ 巻、３７〜３７頁、ロペツーベレシュタイン（Ｌ　ｏｐｅｚ　−Ｂ　ｅｒｅｓｔ ｅｉｎ）ら、（１０１９８４年）、カンサー・ドラッグ・デリバリ−（Ｃａｎｃ ｅｒＤｒｕｇ　Ｄｅｌｉｖ、　）、第１巻、１９９〜２０５頁）、およびヒトに 対して（ロペツーベレシュタインら、（２）（１９８４年）、カンサー・リサー チ（Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　）、第４４巻、３７５〜３７８頁）静脈注射する と、ＭＬＶは、細網内皮組織（ＲＢＳ）細胞の多い肝臓、膵臓および他の器官に 集中する。

リポソームは、これまで、イン・ビトロで化学療法剤を輸送するため（メイヒュ ーら、リポソームズ、（１９８３年）、編オストロ、マーセル・デツカ−社、ニ ューヨーク、ニューヨーク）、イン・ビトロで免疫調節剤および抗菌剤を輸送す るため（メータ（Ｍｅｈｔａ）ら、（１９８４年）、イムノロジー（Ｉ　ｍｍｕ ｎｏｌｏｇｙ）、第５１巻、５１７〜５２７頁）、並びにイン・ビボで動物に（ ロペツーベレシュタインら、（４Ｘ１９８４年）、クリニカル・アンド・エクス ベリメンタル・メタスタシス（Ｃ，１ｉｎ　Ｅｘｐ　Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ）、 第２巻、１２７〜１３７頁、およびロペツーベレシュタインら、（１９８３年） 、ジャーナル・オン・インフエクシャス・ディシーズ（Ｊ　Ｉｎｆ　Ｄｉｓ）、 第１４７巻、９３７〜９４５頁）、およびヒトに（ロペツーベレシュタインら、 （１９８５年）、ジャーナル・オン・インフエクシャス・ディシーズ、第１５１ 巻、７０４〜７１０頁）用いられてきたち近年の研究によって、リポソームが、 特定の薬剤関連毒性、例えばドキソルビシン心臓前（フォーラセン（Ｆｏｒｓｓ ｅｎ）ら、（１９８１年〕、プロシーディンゲス・オン・ナショナル・アカデミ −・オン・サイエンシーズ（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　 ）第７８巻、１８７３〜１８７７頁、オルリン（Ｏｌ５ｏｎ）ら、（１９８２年 ）、ヨーロピアン・ジャーナル・オン・カンサー・アンド・クリニカル・オンコ ロジー（Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｉｎ、　０ｎｃｏ１．　）、第１ ８巻、１６７〜１７６頁、ガビゾン（Ｇ　ａｂｉｓｏｎ）ら、（１９８２年）、 カンサー・リサーチ、第４２巻、４７３４〜４７３９頁、ヘルマン（Ｈｅｒｍａ ｎ）ら、（１９８３年）、カンサー・リサーチ、第４３巻、５４２７〜５４３２ 頁）およびＣＤＤＰ腎毒性（フリーザ（Ｆ　ｒｅｉｓｅ）ら、（１９８２年）、 アーカイブズ・インターナショナルズ・デ・ファーマコダイナミー・工・デ・セ ラピー（Ａｒｃｈ、　Ｉｎｔ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｅ　Ｔｈｅｒａ ｐｉｅ）、第２５８巻、１８０〜１９２頁）を低下し得、遅延放出機構（メイヒ ューら、（１９７８年）、アナールズ・オン・二ニー・ヨーク・アカデミ−・オ ン・サイエンシーズ（Ａｎｎ、　Ｎ、　Ｙ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　）、第３ ０８巻、３７１〜３８６頁、バテル（Ｐａｔｅｌ）ら、（１９８４年）、インタ ーナショナル・ジャーナル・オン・カンサー（Ｉｎｔ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ） 、第３４巻、７１７〜７２３頁）、癌細胞によるより高い薬剤吸収またはより選 択的な器官分布（ガビゾンら、（１９８３年）、カンサー・リサーチ、第４３巻 、４７３０〜４７３５頁およびメイヒューら、（１９８３年）、カンサー・ドラ ッグ・デリバリ−（Ｃａｎｃｅｒ　ＤｒｕｇＤｅｌｉｖ、　）、第１巻、４３〜 ５８頁）によって抗癌活性を高め得ることがわかった。米国特許第４，３３０， ５３４号においては、例えば、リポソームに組み込まれたＮ４−アシルシトシン アラビノシドが、癌にかかった動物に投与して治療するのに有効であることが見 出されている。このような有望な結果にもかかわらず、主に処方、薬剤安定性お よび大規模な製造上の問題の故に、リポソームに保持された抗癌剤の臨床的適用 は遅れている。

ＣＤＤＰは、これまでにもＭＬＶに保持されているが、保持率は非常に低く（７ ，４％）、安定性も乏しがった（ｏ、９％ＮａＣｌ２溶液中、４８時間で７５％ ）（フリーザら、（１９８２年）、アーカイブズ・インターナショナルズ・デ・ ファーマコダイナミー・工・デ・セラピー、第２５８巻、１８０〜１９２頁）。

米国特許第４，２５６，６５２号には、！、２−ジアミノシクロヘキサン（Ｄ　 Ａ　ＣＨ）の分割した立体異性体を含んで成るプラチナ化合物が記載されている 。用いられた異性体は、シス−ＤＡＣＨ，）ランフ、−ＲＲ−ＤＡＣＨおよびト ランス−８ｓ−ＤＡｃＨであった。

該特許に記載のプラチナ化合物は、分割ＤＡＣＨ異性体に加えて、２個の親水性 プラチナ配位子、例えばプロミド、ヨード、ナイトレート、ブロモアセテート、 スルフェートまたはグルクロネートを有していた。トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨを 有するプラチナ化合物は、しばしばシス−ＤＡＣＨを有するプラチナ化合物より も治療活性が高いと記載されている。

欧州特許出願第８３３０６７２６．７号には、ジアミノシクロヘキサン（立体化 学的に分割されていない）を有していてよく、脂肪酸置換ホスファチジル基を存 する特定のプラチナ化合物が記載されている。これらの化合物は、血漿に殆ど溶 解せず、脂質小胞担体と共に使用することが好ましいと記載されている。このプ ラチナ化合物−リン脂質小胞は、単ラメラ小胞を得るように、超音波処理によっ て調製することが好ましいと記載されている。

本発明は、式； で示されるプラチナ（■）４配位複合体を含んで成る。この式において、Ｒ１お よびＲ２は、それぞれ疎水性基を有するカルボキシレート、最も好ましくはネオ デシルであるか、または互いに結合している場合は、疎水性基を有するジカルボ キシレートである。Ｒ１およびＲ４は、それぞれ、式： −Ｎ−Ｒ。

で示される基である。この式において、Ｒ６は、水素、炭素原子数２〜６のアル キル、例えばイソプロピル、アリール、アラールキル、アルケニル、シクロアル キル、例えばシクロアキル、シクロアルケニルから成る群から選択される基およ びそれらを組み合わせた基である。Ｒ６は、好ましくは水素、炭素原子数１〜２ ０、より好ましくは炭素原子数６〜１２、最も好ましくは炭素原子数２〜６のア ルキルまたは炭素原子数３〜１２のシクロアルキルである。

更に、Ｒ５およびＲ４は、結合して一つの基を形成していてもよい。

Ｒ８およびＲ４が結合している場合、炭素原子数的３〜７のシクロアルキル−１ ，２−ジアミノ基および炭素原子数２〜１２のアルキル（好ましくはエチル）− １，２−ジアミノから成る群から選択される基であることが好ましい。好ましい シクロアルキル−１，２−ジアミノ成分は、とりわけトランス−Ｒ，Ｒ−または トランス−８，Ｓ−型の１．２−ジアミノシクロヘキサンである。

前記複合体において、Ｒ，およびＲ，のカルボキシレートは、好ましくは炭素原 子数的５〜２０のアルキルカルボキシレート、アリールがフェニル、ナフチルま たは炭素原子数的１２〜１６のアルキルフェニルであるアリールカルボキシレー トである。

複合体がＲ１およびＲ３をジカルボキシレートとして有する場合、ジカルボキシ レートは、好ましくは炭素原子数的５〜２０のアルキルジカルボキシレート、ア リールがナフチル、フェニル、またはアルキル基中の炭素原子数的６〜１２のア ルキルフェニルであるアリールカルボキシレートである。前記のように、アリー ルは、好ましくは炭素原子数的６〜！４の基として更に定義付けられる。同様に 、アルケニルは、好ましくは炭素原子数的５〜２０の基である。

本発明においてシクロアルキルとは、好ましくは、炭素原子数的３〜１２の基で ある。前記のようなシクロアルケニルは、好ましくは炭素原子数的５〜２０の基 である。前記のようなアラールキルとは、好ましくは炭素原子数的７〜２０の基 であり、結合したアリールおよびアルキル基を有する。アリール部分は、好まし くは炭素原子数的６〜ｌＯで、アルキル部分は、好ましくは炭素原子数的１〜ｌ Ｏである。Ｒ３およびＲ４が一体となっている場合、炭素原子数的３〜２０のシ クロアルキル−１，２−ジアミノであることが好ましい。シクロアルキルのアル キル環は、好ましくは炭素原子数的３〜１２である。

本発明の他の態様は、式： ［式中、Ｒ３およびＲ２は、一体となって、式：０Ｃ−ＣＨ ００（、−ＣＨ ａ （式中、Ｒ８は炭素原子数的ｌＯ〜２０のアルキル、好ましくはペンチル、ネオ ペンチル、デシルまたはネオデシル、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ水素または炭 素原子数的ｌ〜５のアルキルを表す。）で示されるジカルボキシレート、好まし くはシス−ジカルボキシレートを表す。コ で示されるプラチナ（■）４配位複合体に関する。前記のように、Ｒ８およびＲ ４は、それぞれ、式： で示される基である。

Ｒ８およびＲ４が一体になっている場合、炭素原子数的３〜７のシクロアルキル −１，２−ジアミノ基および炭素原子数的２〜１２のアルキル−１，２−ジアミ ノから成る群から選択される。シクロアルキル−１，２−ジアミノは、好ましく は１．２−ジアミノシクロへキサン、より好ましくはトランス−Ｒ，Ｒ−１，２ −ジアミノシクロヘキサンまたはトランス−Ｓ、Ｓ−１，２−ジアミノシクロヘ キサンである。前記のように、この複合体は、実質的にメタノールまたはクロロ ホルムに可溶で、水には実質的に不溶性である。

本発明の重要な態様は、脂肪物質、例えばリン脂質、要すればコレステロールお よび前記４配位プラチナ複合体を含んで成るリポソーム、並びに該リポソームの 製造および用途を含む。本発明のリポソームは、プラチナ複合体およびリン脂質 を、好ましくは約ｌ：ｌＯ〜約ｌ：３０の比で、より好ましくはｌ：１５の比で 含有する。

該リポソームの好ましいリン脂質には、ホスファチジルグリセロール、ホスファ チジルコリン、スフィンゴマイニリン、ホスファチジン酸またはホスファチジル セリンが含まれ、より好ましくは、リン脂質は、ホスファチジルグリセロール、 ホスファチジルコリンまたはその組み合わせである。最も好ましいホスファチジ ルグリセロールは、本質的にシミリストイルホスファチジルグリセロールから成 り、最も好ましいホスファチジルコリンは、本質的にシミリストイルホスファチ ジルコリンから成る。本発明のリポソームがシミリストイルホスファチジルグリ セロールおよびシミリストイルホスファチジルコリンを含んで成る場合、その比 は、約１：１０−１０：１゜より好ましくは約３ニアであることが好ましい。

本発明のリポソームは、多重ラメラ、単ラメラであるか、または定義されないラ メラ構造を有していてよい。該リポソームおよび薬学的に許容し得る担体または 希釈剤を含んで成る薬剤組成物を、癌のような病態の治療に使用し得る。

本発明の焦点は、プラチナ（■）４配位複合体に感受性のある癌細胞に冒された 宿主動物の治療方法である。この方法は、ある量の前記プラチナ（■）４配位複 合体、またはリン脂質および癌細胞抑制有効量の前記プラチナ複合体を含んで成 る本発明のリポソームを宿主に投与することを含んで成る。投与は、非経口的に 、および静脈内、動脈内、筋肉内、リンパ管内、腹腔内、皮下、胸膜内または胸 膜内注射によって、もしくは局所適用によって、または経口的に行うことが好ま しい。時間表に従って、例えば２週間にわたって１日２回、このような投与を反 復することが好ましい。治療は、癌が退化するか消滅するまで行い得、外科手術 または他の剤を用いた化学療法のような他の癌治療法と組み合わせて行ってよい 。

このような癌治療方法は、細網肉腫のような癌の転移の抑制にも用いてよい。プ ラチナ（ｎ）複合体または該複合体含有リポソームをワクチン注射様方法で予備 処置して、転移の防止に用いてよい。

プラチナ（■）４配位複合体は、ラセミ（非分割）ＤＡＣ）（、トランス−ＲＲ −ＤＡＣＨまたはトランス−５Ｓ−ＤＡＣＨを用いて調製した。トランス−ＲＲ −ＤＡＣＨまたはトランス−５Ｓ−ＤＡＣＨ。

およびシクロペンテン−カルボキシレートのような２個の疎水性配位子を含んで 成るプラチナ複合体は、ラセミＤＡＣＨを含んで成る類縁複合体よりも、リポソ ームへの組み込みが良好であることがわかった。

該プラチナ複合体を組み込んだリポソームは、水性環境中で安定であり、非腎毒 性であり、ネズミ白血病Ｌ−１２１０に対して活性であることがわかった。

通例、本発明の方形平面状のプラチナ（■）４配位複合体は、式：［式中、Ｒ３ およびＲ２は、好ましくは、疎水性基を有するカルボキシレートモノアニオンを 表す。コ で示される。Ｒ３およびＲ２は、カルボキシレート基が結合原子に結合し、それ が基に結合している単一のカルボキシレートジアニオンであってもよい。更に、 Ｒ３は、ビンナルジアミノアルカンまたはピンナルジアミノシクロアルカンであ る。Ｒ７は、２個の異なるアルキルアミン、シクロアルキルアミンまたはアンモ ニアで構成されていてよいと考えられる。これらの成分により、複合体は、実質 的に室温においてメタノールまたはクロロホルムに対して溶解性となり（通例、 約５　、　Ｏｖｉ／ｒＱを越える。）、実質的に室温において水溶液に対して不 溶性となる（約０．５ｙｔｇ／ｘＱを越えない。）。

カルボキシル基または中間の基もしくは結合基に共有結合している疎水性基とし ては、アルキル、置換アリール、アリール、アルケニル、シクロアルキルもしく はシクロアルケニル基またはこれらの基を組み合わせたもの、例えばアルキルア リールまたはアリールアルケニルが挙げられるが、他にも多くの可能な疎水性基 の組み合わせがある。疎水性基は、通例、炭素原子を５〜２０個有する。この疎 水性基がアルキルまたはアルケニルを有する場合、この基は直鎖または分枝状で あってよい。疎水性基上に置換された例えば水酸基のような極性基は、疎水性を 低下させる傾向があり、本発明の目的に対して有用性が小さくなる。

Ｒ１およびＲ３の基が相互結合し、例えば２個のアセテートまｋはプロピオネー ト基が窒素原子によって結合している場合がある。このような場合、Ｒ３および Ｒ９基は単一のカルボキシレートアニオンである。炭素原子数６〜２０のアルキ ル疎水性基、例えばｎ−デカンを架橋窒素に結合し、得られる化合物を、本発明 のプラチナ（■）４配位複合体の合成に用いることができる。

カルボキシレートモノアニオンに特定の疎水性基（例えばシクロペンテン）が結 合している場合、ｐｔ複合体のリン脂質リポソームへの有効な組み込みは、Ｒ３ 基の性質に依存することがわかった。例えば、Ｒ８が１，２−ジアミノシクロヘ キサン（Ｄ　Ａ　ＣＨ）である場合、アミノ基は、幾つかの相対的な立体化学配 置、シス、トランス−ＲＲおよびトランス−９Ｓ（これらの混合物を「ラセミ体 」と称する。）であってよい。シクロペンテン基（Ｒ，およびＲ，）および種々 の立体化学種のＤＡＣＨを有するプラチナ（ＩＩ）複合体の場合、トランス−Ｒ Ｒ−ＤＡＣＨおよびトランス−５Ｓ−ＤＡＣＨ複合体は、ラセミＤＡＣＨ類縁複 合体よりも、リン脂質リポソーム（小胞とは、リポソームと同義語である。）へ の組み込みが良好であることがわかった。

ネオデカノエート（Ｃ，。Ｒ２゜０７、実験式）におけるように、疎水性基が炭 素原子数９の分枝状アルキルである場合、ラセミＤＡＣＨまたはトランス−ＲＲ −ＤＡＣＨを含んで成るプラチナ（ＩＩ）複合体の組み込み率は最大であった（ １００％）。すなわち、炭素原子数的６〜１２の直鎖または分枝状のアルキル基 の存在によって、ＤＡＣＨ含有プラチナ（ＩＩ）複合体の、リン脂質リポソーム への組み込み率を高めることができる。

本発明のプラチナ（Ｉｆ）複合体を含有するリポソームは、天然または合成のリ ン脂質を含む種々の両親媒性物質から調製される。リポソームの製造に使用し得 るリン脂質は多種であり、通例当業者によく知られているので、詳細には例示し ない。これらのリン脂質には以下のようなものがあるが、これらに限定されるも のではない：レシチン、ホスファチジルエタノールアミン、リゾレシチン、リゾ ファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシト ール、スフィンゴマイニリン、カルジオライピン、ホスファチジン酸およびセレ ブロシド。本発明の態様に最も好ましいリン脂質には、シミリストイルホスファ チジルグリセロール（ＤＭＰＧ）およびシミリストイルホスファチジルコリン（ ＤＭＰＣ）がある。リン脂質およびプラチナ（ＩＩ）複合体に１％未未満的約５ ０の少量のコレステロールを含有させて、本発明のリポソームを調製し得る。Ｄ ＭＰＧおよびＤＭＰＣを３ニアの比で組み合わせることが好ましいが、それには 限定されず、１：１０〜１０：ｌの比で通例十分であると考えられる。プラチナ （ＩＩ）複合体とリン脂質の比が約１：１０−１：３０であれば十分であるが、 研究には主に１：１５の比を用いた。

単ラメラもしくは多重ラメラまたは他のプラチナ（Ｉ［）複合体含有″　リポソ ームを、本発明において使用し得る。本発明のプラチナ（ＩＩ）複合体は実質的 に水不溶性であり、リポソームラメラのリン脂質二重層に組み込まれると考えら れるので、多重ラメラリポソームが好ましい。

通例、本発明のプラチナ（ｎ）化合物の合成方法は、以下のように記載すること ができる：（１）ビシナルジアミノシクロアルカンまたはアルカン約１０ｍｍｏ ｆ２を、ＫｔＰｔＣ１２４（３，５ｇ）の水溶液５０ｍ１２に加え、室温で６〜 ８時間撹拌する。シス−ビス−ジクロロ−１，２−ジアミン−Ｐｔ（ｎ）を含有 する生成した黄色固体を濾取し、水、メタノールまたはアセトンのような液体で 洗浄し得る。次いで、固体をＨｘ　Ｏ約２０ｍ１２に懸濁させ、ＡｇｔＯｓ４約 ０．７５ｇを含有する水溶液をそれに加える。暗所で約２４時間撹拌後、沈澱し たＡｇＣｆｆを濾去してよい。次いで、スルファト−ビシナルジアミン−Ｐｔを ％Ｈ１Ｏ約１Ｏ０ｍ１２に溶解し、カルボキシレートアニオンのアルカリ土類金 属塩的２　ｍｍｏｆ２に加え、約３０分間撹拌し得る。濾過によってＢａＳＯ４ を除去後、例えば結晶化または溶媒の蒸発除去によって、本発明のプラチナ（ｎ ）複合体が得られる。

後述の実施例に記載の特定のプラチナ（ｎ）複合体調製方法および特定のプラチ ナ（ｎ）複合体を用いた化学療法は、単に適当なビシナルジアミンまたは疎水性 基含有カルボキシレートモノアニオンを換えることによって、同様に記載され、 本発明の範囲に含まれる複合体の製造および用途に容易に適用し得る。

リン脂質およびプラチナ複合体を含んで成る本発明のリポソーム（Ｐｔ−リポソ ーム）は、癌の増殖および転移の抑制に有用である。

このようなＰｉ−リポソームは、非経口、局所または経口的に投与し得る。この ようなＰｔ−リポソームの経口または非経口投与用量は、多くの場合、約２．５ 〜２５　Ｈ／　ｌａｇ体重で充分であると考えられる。癌にかかったヒトを治療 する場合の用量は、患者の症状、癌の種類および程度並びに用いるｐｔ−リポソ ームの毒性に従って場合に応じて変化させることができる。

薬剤組成物に含まれるリポソーム−プラチナの量および本発明の治療方法に用い る用量は、患者の症状、治療する癌の性質、リポソーム−プラチナの抗癌活性、 毒性および溶解性などに応じて変化させることができる。リポソーム−プラチナ を、組み合わせた治療法において、他の抗癌剤と組み合わせて投与してもよい。

非経口投与は、腹腔内、皮下、胸膜内、胸膜内、尿道内、静脈内、動脈内、筋肉 内またはリンパ管内投与であってよい。このような非経口投与は、薬学的に許容 し得る溶液、例えば滅菌等張水溶液中のＰｔ−リポソーム懸濁液を用いて行うこ とが好ましい。これらの懸濁液は、完全に調製するか、または予め生成している 成分を用いて得ることができる。当業者既知のように、Ｐｔ−リポソームは、ベ レットまたは粉末として調製される。これらのベレットまたは粉末を薬学的に許 容し得る溶液と混合して、非経口投与用懸濁液を形成してよい。

ｐｔ−リポソームの局所投与は、完全に調製するか、またはＰｔ−リポソーム粉 末またはベレットから調製される懸濁液、クリームまたは軟膏のような薬剤組成 物を用いて行い得る。このような局所投与は、例えば上皮または粘膜のような癌 病変の近辺に行い得る。

Ｐｔ−リポソームの経口投与は、Ｐｔ−リポソーム粉末またはベレットを包嚢す ることによって、包嚢から遊離する前にＰｔ−リポソームを胃腸の消化作用から 保護して行うことが好ましい。

所望により、例えば他の癌治療剤またはリポソームの安定化のための抗酸化剤を 含有するようにｐｔ−リポソームを調製し得る。

とりわけリポソームの成分としての本発明の複合体の主要な用途は、癌増殖の抑 制および癌転移の防止である。例えば、第１に、宿主が、しばしばプラチナ（■ ）複合体によって増殖が抑制される細胞を通例有することがわかっている癌にか かっていることを確認する。

宿主における癌増殖は、本発明のＰＴ−含有リポソームを宿主に投与することに よって抑制し得る。

同様に、宿主の癌の転移を抑制し得る。しばしばプラチナ（ｎ）？Ｊｔ合体に感 受性であることがわかっている転移性の癌または転移の可能性のある癌に宿主が かかっていることを第１に確認する。本発明のＰＴ−含有リポソームを該宿主に 投与することによって、転移を抑制し得る。

以下の実施例は、本発明の好ましい態様をより詳細に説明するためのものであっ て、本発明を制限することを意図するものではない。

ＫｔＰｔＣＱ４を、ＡＥＳＡＲ（ジョンソン−７シ一社（Ｊ　ｏｈｎｓｏｎＭａ ｔｔｈｅｙ、Ｉ　ｎｃ、　）、シーブルック、ＮＨ）から入手した。シクロペン テンカルボン酸を、ファルツ・アンド・バラエル社（Ｐｆａｌｔｚ　ａｎｄＢａ ｕｅｒ、Ｉ　ｎｃ、スタンフォード、ＣＴ）から：　１，２−ジアミノシクロヘ キサン（Ｄ　Ａ　ＣＨ）を、アルドリッチ・ケミカル社（Ａ　ｌｄｏｒｉｃｈＣ ｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、　、ミルウオーキー、Ｗｌ）から；　トランス−ＲＲ− ＤＡＣＨおよびトランス−８Ｓ−ＤＡＣＨを、モードル・チオコル社（Ｍｏｒｔ ａｌ　Ｔｈ１ｏｋｏｌ、Ｉｎｃ、、ダンヴアース、ＭＯ）から；およびネオデカ ン酸を、エクソン・ケミカル社（Ｅｘｘｏｎ　ＣｈｅｍｉｃａｌＧｏ、、ヒユー ストン、テキサス）から入手した。プラチナ複合体の元素分析は、インテグラル ・ミクロアナリティカル・ラボラトリーズ社（ｉｎｔｅｇｒａｌ　Ｍｉｃｒｏａ ｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｉｎｃ、　、レライ、ＮＣ） およびロバートソン・ラボラトリ−社（ＲｏｂｅｒｔｓｏｎＬ　ａｂｏｒａｔｏ ｒｙ、Ｉ　ｎｃ、、フローハム・パーク、Ｎ、Ｊ、）によって行った。複合体（ ＫＢｒペレットとして）の赤外スペクトルは、ニコμ（Ｎ　１ｃｏｌｅｔ）　６ ０００フーリエ変換赤外スペクトル計を用いて、６００〜４０００ｃｍ”−’の 範囲で行った。

この研究に用いた、分析（薄層クロマトグラフィー）的に純粋なシミリストイル ホスファチジルコリン（Ｄ　Ｍ　Ｐ　Ｃ）およびシミリストイルホスファチジル グリセロール（ＤＭＰＧ）は、アヴアンティ・ポーラ−・リピッズ（Ａｖａｎｔ ｉ　Ｐｏ１ａｒ　Ｌｉｐｉｄｓ、バーミンガム、ＡＬ）から入手した。コレステ ロールは、シグマ・ケミカル社（ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、　ｓセン ト・ルイス、ＭＯ）から入手した。

シス−ビス−シクロペンテンカルボキシレート−１，２−ＤＡＣＩ（−プラチナ （Ｉｆ）は、リポソーム−プラチナ（Ｌ　−Ｆ　Ｔ）製剤の開発に通例用いられ る、１種のシス−プラチナ疎水性類縁体であった。

この複合体の一般構造は式： 該複合体は、ラセミＤＡＣＨに関する記載（コーカー（Ｋｈｏｋｈａｒ）ら、イ ンオーガニック・キミカ・アクタ・バイオインオーガニック中セクション（Ｉｎ ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、　Ａｃｔａ、　Ｂｉｏｉｎｏｒｇａｎｉｃ　５ｅｃｔｉｏ ｎ）、第１０８巻、６３頁、（１９８５年））のように、多段階反応によって次 のように合成した：　ＤＡＣＨｏ、９６ｇを、ＫｔＰ　ｔｃＩ２−（ＨｔＯ５０ ｍＱ中３　、５　ｇ）の濾過水溶液に加え、混合物を室温で６〜８時間撹拌した 。シス−ビス−ジクロロ−ＤＡＣＨ−Ｐｔ（ＩＩ）含有黄色固体を濾取し、Ｈ， Ｏ、メタノールおよび最後にアセトンで洗浄した。

最終生成物を減圧下に乾燥後、収率は５６％であった。次いで、シス−ビス−ジ クロロ−ＤＡＣＨ−Ｐｔ（ＩＩ）１．０ｇをＨｔＯ２０ｍ１！に懸濁させ、Ａｇ ｘＳＯ−ＣＨｖＯ１５０ｍ（２中０．７５ｇ）の水溶液を加え、水溶性スルファ ト＝ＤＡＣＨ−Ｐｔ　Ｈ，Ｏを得た。反応混合物を暗所で２４時間撹拌し、沈澱 したＡｇＣＱを濾去した。黄色溶液を４５〜５０℃で減圧下に蒸発乾固させ、黄 色生成物をＰ、０５で減圧下に更に乾燥した。スルファト−ＤＡＣＨ−Ｐｔ（ｎ ）ＨｔＯの収率は９０％であった。最後に、スルファト−ＤＡＣＨ−Ｐｔ（Ｉｔ ）０．４２３ｇ（Ｉ　ｍｍｏＱ）を、ＨｔＯ１００ｍ！２に溶解し、Ｂ　ａ（Ｏ Ｈ）ｔ　Ｏ、３ｇをＨ，０中のシクロペンテンカルボン酸０．２２６ｇ（２ｍｍ ｏ１２）に加えることによってバリウムシクロペンテンカルボキシレートを調製 した。これらの成分を混合し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。ＢａＳＯ ４沈澱を濾去し、黄色濾液を、回転蒸発器を用いて４５℃で減圧下に蒸発乾固し た。黄色固体が得られ、これをメタノールから精製した。生成物を最後に減圧乾 燥した。収率は７０％であった。分析：０４０．２６％、Ｈ５，６５％およびＮ ５．０５％Ｏｒ　ｌｌＨ３ｏ　Ｎ　ｔ　Ｏ４Ｐ　ｔ（Ｐ　ＴＸ理論値：Ｃ４０， ６７％、Ｈ５，６５％およびＮ５．２７％）。複合体（ＫＢｒベレットとして） の赤外スペクトル／Ｃ＝０　１６３２ｃｍ’および／Ｃ−０１３９８ｃｍ−’。

シス−ビス−シクロペンテンカルボキシレート−１，２−ＤＡＣＨ−Ｐｔ（ｎ） は、メタノールおよびクロロホルムに対する溶解性が高く、水にはわずかじか溶 解しない（０、５ｍｇ／ｍ（！未満）。前記合成方法を、トランス−ＲＲ−ＤＡ ＣＨおよびトランス−３Ｓ−ＤＡＣＨの両方を用いて行い、シス−ビス−シクロ ペンテンカルボキシレート−１，２−ＤＡＣＨ−Ｐｔ（ｎ）のトランス−ＲＲお よびトランス−８Ｓ異性体を合成した。シス−ビス−シクロペンテンカルボキシ レート−１，２−）ランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ−Ｐｔ（ＩＩ）−３ＨｔＯの分析値 は次の通りであった：Ｃ−３７．３６％、Ｈ−５，５０％、Ｎ−５，１２％（理 論値（、−３７，９３％、Ｈ−５，８２％、Ｎ−４，８実施例２に記載のように 合成したスルファト−ラセミＤＡＣＨ−プラチナ（ＩＴＸｏ、４２３ｇ）を、水 １０ｘ（！に溶解した。この溶液に、ネオデカン酸のカリウム塩（０，４２０ｇ ）を加え、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。ゴム状塊が得られ、これをク ロロホルムで抽出し、クロロホルム抽出物を無水Ｍｇ５Ｏａで乾燥した。ＭｇＳ Ｏ４を濾過によって分離し、濾液を蒸発乾固させた。オフホワイトの固体生成物 が得られ、これを減圧下にＰ、０．で乾燥した。この最終生成物を０℃で貯蔵し た。

最終生成物の元素分析：　Ｃ−４８，３０％、Ｈ−８，１０％およびＮ−３，９ ２％。実験式Ｃｔ　＊　Ｈｓ　ｔ　Ｎ　＊　０４Ｐ　ｔの化合物の元素分析計算 値：Ｃ−４，７，９３％、Ｈ−８，００％およびＮ−４，３０％。

シス−ビス−ネオデカノエート−ＤＡＣＨ−プラチナ（Ｉｆ）の構造式は次の通 りである： ［式中、Ｒ，Ｒ’、Ｒ”は、実験式Ｃ１゜Ｈ，、Ｏ，（ＭＷ＝１７２）のカルボ キシレート基を与えるように、ＣＨｓ、Ｃｔ　ＨｓまたはＣｓ　Ｈ？であり得る 。コ。

シス−ビス−ネオデカノエート−ＤＡＣＨ−プラチナ（Ｉｌ、）は、メタノール およびクロロホルムに対しては溶解性が非常に高く、水には不溶性であった。

前記合成方法を、トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨを用いて行い、シス−ビス−ネオデ カノエート−ＤＡＣＨ−プラチナ（ＩＩ）のトランス−ＲＲ異性体を合成した。

シス−ビス−ネオデカノエート−ＲＲ−ＤＡＣＨ−プラチナ（ｎ）の分析値は次 の通りであった：Ｃ−４７．７５％、Ｈ−８，１６％、Ｎ−３，９８％（理論値 （、−４７，９３％、Ｈ−８，００％、Ｎ−４，３０％）。

実施例４ シス−ビス−ｎ−デシルイミノジアセテート−Ｄ　Ａ　ＣＨ−プラチナ（ｎ）の 合成 実施例２に記載のように合成したスルファト−ＤＡＣＨ−プラチナ（ＩＩ）Ｈｔ Ｏ（０，４２３ｇ）を、ＨｔＯ１０ｒｎＱに溶解した。、Ｎａ０Ｈ（０，０８ｇ ）を水５０酎中のＮ−デシルイミノジ酢酸（０，２７３ｇ）に加えることによっ て、ｎ−デシルイミノジ酢酸のナトリウム塩を合成した。このナトリウムＮ−デ シルイミノジアセテートの水溶液を、スルファト−ＤＡＣＨ−プラチナ溶液に加 え、室温で３０分間撹拌した。得られた溶液を回転蒸発器で減圧下に４０℃で蒸 発乾固させた。このようにして得られた黄色固体をメチルアルコールに溶解し、 セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）で濾過した。黄色濾液を回転蒸発器で減圧下に蒸発乾 固した。黄色結晶生成物が得られ、これを１−プロパツールから更に精製した。

収率は８０％であった。

生成物の元素分析：Ｃ−３９，２８％、Ｈ−７，１２％およびＮ−６，６８％。

実験式ｃ、ｏＨ＋、Ｎａｏ、Ｐｔ−２Ｈ，Ｏの化合物の理論組成：　Ｃ−３８， ９５％、Ｈ−７，０２％およびＮ−６，８１％。複合体（ＫＢｒペレットとして ）の赤外スペクトル／Ｃ＝ＯＩ　５８０ｃｍ−’および／Ｃ−０１４］　Ｏｃｍ −’。

シス−ビス−ｎ−デシルイミノジアセテ−）−ＤＡＣＨ−プラチナ（ＩＩ）の構 造式は次の通りである：［式中、Ｒ＝ｎ−デシルまたはより長い直鎖もしくは分 枝状アルキル基を表す。］。

シス−ビス−ｎ−デシルイミノジアセテート−ＤＡＣＨ−プラチナ（ＩＩ）は、 メタノールおよびクロロホルムに対しては溶解性が非常に高く、水には不溶性で ある。前記合成方法を、トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨを用いて行い、シス−ビス− ｎ−デシルイミノジアセテ−）−ＤＡｃＨ−ｐｔ（Ｉ［）のトランス−ＲＲ異性 体を合成した。シス−ビス−ｎ−デシルイミノジアセテート−トランス−ＲＲ− ＤＡＣＨ−ＰＬ（ＩＩ）の分析値は次の通りであった：Ｃ−３８．６０％、Ｈ− ６，８７％、Ｎ−６，８２％（理論値Ｃ−３８，９５％、Ｈ−７，０２％、Ｎ− ６，８１％）。

前記化合物は、前記一般式のＲ，およびＲ９が同じであり、そのカルボキシレー トモノアニオンが、疎水性アルキル基を有する架橋原子によって互いに結合して 、実際はカルボキシレートジアニオンを形成している構造を有する。

、実施例５ プラチナ含有リポソーム（Ｌ−ＦＴ） 前記プラチナ複合体（ＦＴ）を保持する多重ラメラ脂質小胞（ＭＬ■）またはリ ポソームを、他の化合物に関する前記のような記載（ロペツーベレシュタイン（ Ｌ　ｏｐｅｚ　−Ｂ　ｅｒｅｓｔｅｉｎ）ら（４０１９８４年）、クリニカル・ アンド・エクスベリメンタル・メタスタシス（ＣＩｉｎ。

Ｅｘｐ、　Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ）、第２巻、１２７〜１３７頁およびロペツー ベレシュタインら（１９８３年）、ジャーナル・オン・インフエクシャス・ディ シーズ（Ｊ　Ｉｎｌ’　Ｄｉｓ）、第１４７巻、９３７〜９４５頁）に従って調 製した。簡潔に記載すると、脂質（所望のモル比）のクロロホルム溶液およびＰ Ｔを、脂質−ＰＴ比１５：１で混合し、クロロホルムを回転蒸発器内で蒸発させ た（ブチ（Ｂｕｃｈｉ）、ブリンクマン・インスツルメンツ（Ｂ　ｒｉｎｋｍａ ｎｎ　Ｉ　ｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）、ウェストバリー、ＮＹ）。次いで、得られ たＰＴ含有乾燥脂質フィルムを、激しく手で振盪することによって水溶液（水中 ＮａＣｌ２０　、９％）に分散させた。次いで＠濁液を３０，０００Ｘｇで４５ 分間遠心し、上澄を除去し、ＰＴ含有ペレットを０．９％ＮａＣｌ２溶液に再懸 濁させた。

プラチナ複合体含有ＭＬＶまたはリポソームは、脂質およびプラチナ化合物を含 有する凍結乾燥粉末から調製することもできる。脂質およびプラチナ化合物を、 前記の比で疎水性溶媒第３級ブタノール（Ｍ、Ｐ、２６℃）に溶解する。この溶 液を凍結乾燥し、白色粉末を得る。手で穏やかに振盪しながら、水中の０．９％ ＮａＣＱ溶液を凍結乾燥粉末に加えると、プラチナ化合物含有ＭＬＶが生成する 。

リポソーム懸濁液およびベレット中のプラチナ元素（Ｐ　ｔ）を、文献（ザイフ ェルト（Ｓ　ｅｉｆｅｒｔ）ら、＜１９７９年）、（Ｐｒｏｃ、　Ａｍｅｒ。

Ａｓｓ’ｎ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　）第２０巻、１６８頁）に記載のよう に、ザ・デパートメント・オン・アナリティカル・ケミストリー、ザ・ユニバー シティ・オン・テキサス・メディカル・スクール（ｔｈｅＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ 　ｏｆ　Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｔｈｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓ ｉｔｙｏｆ　Ｔｅｘａｓ　Ｍｅｄｉｃａｌ　５ｃｈｏｏｌ、ヒユーストン、ＴＸ ）において、Ｘ線蛍光によって測定した。プラチナ複合体（ＰＴ）の量は、上澄 中、波長２２４ｎｍの紫外線スペクトル法によって測定した。ＥＥは、以下の２ つの式を用いて最初に計算した：１’、ＥＥ−ペレブト中のＰｔ／最初のリポソ ーム懸濁液中の全Ｐｔ２、ＥＥ＝最初に加えた全Ｐｔ−上澄中のＰｔ／最初に加 えた全Ｐｔこれら２方法による結果は非常によく対応しており、第２の方法はＵ Ｖスペクトル法によってＰＴを測定するだけでよいので、殆どのＥＥ測測定、第 ２の方法で計算した。

４℃における０、９％ＮａＣρ溶液中の種々のリポソーム−ＰＴ（Ｌ−ＰＴ）製 剤、および３７℃における０、９％ＮａＣＱ溶液中の５０％ヒト（ＡＢ）血清の 安定性を、以下の式を用いて測定した：安定性測定に用いたＥＥ値は、ＵＶスペ クトル法（０，９％ＮａＣＱすることによって得た。最初の調製から１４日後ま で０．９％ＮａＣＱ中の安定性を測定した。更に、１４日日目Ｌ−ＰＴ調製剤顕 微鏡で観察して、小胞の形態を調べた。５０％ヒトＡＢ血清の安定性は、インキ ュベーション後１８８目まで測定した。

ＤＭＰＣ：ＤＭＰＧの比が７：３の多重ラメラ小胞に、種々のシス−プラチナ類 縁体を保持させた。Ｐｔ−シクロペンテンカルボキシレート−ラセミＤＡＣＨの 保持率は６６％であった。純粋なトランス−ＲＲ−ＤＡＣＨまたはトランス−３ Ｓ−ＤＡＣＨ異性体を使用した場合には、保持率は顕著に高かった（それぞれ８ ８％および９０％）。Ｐｔ−ネオデカノエート−ラセミＤＡＣＨ，Ｐｔ−ネオデ カノエート−トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ，ＰＬ−ｎ−デシルイミノジアセテート −ラセミＤＡＣＨ複合体の保持率を以下の第１表に示す。

第１表 種々の類縁体を用いたし−ＰＴの保持率ブラヂナ類縁体　保持率％１ ｐｔ−シクロペンテンカルボキシレート−ラセミＤＡＣＨ混合物　６６ ｐｔ−シクロペンテンカルボキシレート−トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ８８ ｐｔ−シクロペンテンカルボキシレート−トランス−９Ｓ−ＤＡＣＨ９０ ｐｔ−ネオデカノエート− ラセミＤＡＣＨ混合物　９９ Ｐｔ−ネオデカノエート− トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ９９ Ｐｔ−Ｎ−デシルイミノジアセテート−ラセミＤＡＣＨ混合物　１００ Ｐｔ−Ｎ−デシルイミノジアセテート−トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ９８ １少なくとも３回の実験の平均値。リポソーム組成＋　ＤＭＰＣ：ＤＭＰＧ　７ ：３ ＤＭＰＣのみ、ＤＭＰＧのみ、コレステロールのみ、コレステロールを用いた場 合または用いない場合のＤＭＰＣおよびＤＭＰＧの他の濃度の組み合わせを用い て同様の実験（記載せず）を行ったが、より良好な保持率は得られず、ＥＥか低 下した場合が多かった。

製剤を０．９％生理食塩液に懸濁させ、４℃で１４日間インキュベートした。リ ポソーム組成物を光学顕微鏡で観察し、生理食塩液中の遊離ＰＴの量を測定した 。ＰＴを含有し、ＤＭＰＧを唯一のリン脂質とするリポソームは、顕微鏡で観察 すると、顕著な構造の損失が見られた。遊離ＰＴを測定し、リポソーム中に残っ ているＰＴの割合として安定性を計算した。この測定の結果を第２表に示す。

第２表 １４日後の生理食塩液中におけるＬ−ＰＴの安定性１プラチナ類祿体　安定性％ Ｐｔ−シクロペンテンカルボキシレート−ラセミＤＡＣＨ８９ ｐｔ−シクロペンテンカルボキシレート−トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ９４ ｐｔ−シクロペンテンカルボキシレート−トランス−９Ｓ−ＤＡＣＨ−− ｐｔ−ネオデカノエート− ラセミＤＡＣＨ１００ Ｐｔ−ネオデカノエート− トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ９９ Ｐｔ−イミノジアセテート− ラセミＤＡＣＨ１００ ！　リポソーム組成二ＤＭＰＣ：ＤＭＰＧ　７：３上記のデータかられかるよう に、Ｐｔ−シクロペンテンカルボキシレート−トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨも、Ｐ ｔ−ネオデカノエート−ラセミＤＡＣＨも、Ｐｔ−シクロペンテンカルボキシレ ート−ラセミＤＡＣＨよりも高い安定性を示す。

実施例８ Ｌ−ＰＴ（シクロペンテンカルボキシレート−ラセミＤＡＣＨ）の毒性試験 ザ・ユニバーシティ・オン・テキサス・サイエンス・パーク（Ｔｈｅ　Ｕｎｉｖ ｅｒｓｉｔｙ　ｏｒ　Ｔｅｘａｓ　５ｃｉｅｎｃｅ　Ｐａｒｋ、バストロープ、 ＴＸ）から入手した、体重２２〜２５ｇの、生後６〜８週間のＣＤ−１スイス（ Ｓｗｉｓｓ）マウスを用いて、毒性試験を行った。ヒドロキシプロピルセルロー ス中の懸濁液中の遊離ＰＴ、ＤＭＰＧ、ＤＭＰＧ−ＦＴ、ＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７ ：３およびＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴを、０．１〜０．３ｍＣの量で腹腔 内（ｉｐ）投与した。ＤＭＰ　Ｃ：ＤＭＰＣ７：３−ＦＴは、１回の注射または ３日間１日１回の注射で静脈内投与も行った。臨床的作用および生存時間を毎日 調べた。

注射後１４日までの死亡数から、ＬＤ、！、５ＬＤ５゜およびＬ　Ｄ　９゜を計 算した。

ヒドロキシプロピルセルロース中の懸濁液中のＦＴ、ＤＭＰＧ−ＦＴおよびＤＭ ＰＣ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴのＬＤ５゜用量レベルは、１回の腹腔内（ｉｐ）注 射の場合には同様であった（それぞれ、９１ｍｇ／　ｋｇ、８６　ｍｇ／　ｋｇ および７５　ｍｇ／ｋｇＸ第３表）。ＤＭＰＧおよびＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３ から成る空のリポソームのＬ　Ｄ　ｓ。用量レベルで保持すべきＰＴの量はより 高かった（それぞれ１８３　ｌｌ１ｇ／　ｋｇおよび＞　３０４　ｍｇ／ｋｇ） 。ｉｖ注射したＤＭＰＣ＋ＤＭＰＧ７：３−ＰＴのＬ　Ｄ　ｓ。用量は、２種の スケジュールにおいて同様であった：単一の注射および３日間１臼Ｉ日の注射（ ８２ｍｇ／ｋｇと９６　ｍｇ／　ｋｇ）。ｉｐおよびｉｖ毒性試験の両方におい て、注射後５〜１０日目に最も死亡が多かった。これらの結果を第３表に示す。

第３表 腹腔内および静脈内に投与した種々のＬ−ＦＴ（シクロペンテンカルボキシレー ト−ラセミＤＡＣＨ）製剤の毒性Ｌ−ＰＴ製剤　投与方法　Ｌ　Ｄ　＋　ｏ　Ｌ 　Ｄ　ｓ　ｏ　Ｌ　Ｄ　ａ。

ｍｇ／　ｋｇ　ｍｇ／　ｋｇ　＋ｎｇ／　ｋｇ遊離ＰＴ　１ｐＸ１　６１　９１ 　１２５ＤＭＰＧ−ＰＴ　１ｐＸｌ　５６　８６　１３３ＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７ ：３−ＰＴ　ｉｐＸ　Ｉ　５４　７５　９４ｉｖＸ１　−−　８２　１００ ｉｖｑｄＸ３　６３　８６　１０７ １０７Ｄ＊　ｉｐＸ　ｌ　＋　５８　１８３　２２８ＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３ ＊　１ｐＸ１　＞３０４　＞３０４　＞３０４＊結果は、空のリポソームのＬ　 Ｄ　１ｏ１Ｌ　Ｄ　ｓ。およびＬＤｓｏ用量レベルで保持すべきＦ　Ｔ　量（ｍ ｇ／　ｋｇ）で表した。

体重２２〜２５ｇのＣＤＩスイスマウスの眼窩後叢から得られた試料中の血液尿 素窒素（ＢＵＮ）を、ＣＤＤＰ、ヒドロキシプロピルセルロース中のＰＴ−シク ロペンテンカルボキシレート−ラセミＤＡＣＨ，ＤＭＰＧ−ＦＴまたはＤＭＰＣ ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴを前記ＬＤ、。に相当する用量でｉｐ注射（１回）を行 ってから９６時間後に測定した。毒性を試験したＬ−ＦＴ製剤はすべて、実験当 日に滅菌条件下に調製した。ヒドロキシプロピルセルロース中の懸濁液中のＰＴ 、ＤＭＰＧ−ＰＴおよびＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴをＬ　Ｄ　ｓ。

用量でｉｐ投与後、顕著なりＵＮ上昇は無かった（９６時間後のＢＵＮは、それ ぞれ３４．４±９　、６　ｍｇ％、３０．０±４　、６　ｍｇ％および３２．０ ±２　、３　ｍｇ％）。結果を第４表に示す。

第４表 ＣＤ、マウスにおける、Ｌ　Ｄ　ｓ。用量のＣＤＤＰ、遊ＭＰＴ（シクロペンテ ンカルボキシレート−ラセミＤＡＣＨ）およびＬ−ＰＴの急性腎毒性１ 製剤　Ｌ　Ｄ　ｓ。用量　９６時間後の１回のｉｐ注射（ｍｇ／　ｋｇ）　Ｂ　 Ｕ　Ｎ　（ｍｇ％）１ＣＤＤＰ　１７　７８．３±８．０ 遊離ＰＴ　９１　３４．４±９．Ｃ ＤＭＰＧ−ＰＴ　８６　３０．０±４．６ＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３　７５　３ ２．０±２．３１正常値＝２７．２±ｍｇ％ 実施例１０ Ｌ１２１０細胞に対するシクロペンテンカルボキシレート−ラセミＤＡＣ）（− ＰＬのイン・ビトロ抗癌活性Ｌ１２１０白血病細胞を、１０％ウマ血清、グルタ ミン、ストレプトマイシンおよびペニシリンを含有するマツコイ（Ｍｃ　Ｃａｙ ）　５　Ａ培地（ギブコ・ラボラトリーズ（Ｇ　１ｂｃｏ　Ｌ　ａｂｏｒａｔｏ ｒｉｅｓ）、グランド・アイランド、ＮＹ）中で、５％ＣＯ７空気中、３７℃、 相対湿度９５％で懸濁培養によって増殖させた。細胞懸濁液４ｚＱを培養管に入 れ、適当な濃度の遊離ＰＴまたはＩ、−ＰＴを加えた（最終濃度０．０１−１０ μｇ／ｘ１２）。９６時間後、対照および実験培養の細胞濃度をコールタ−・カ ウンター（コールタ−・エレクトロニクス（ＣｏｕｌＬｅｒＥ　１ｅｃｔｒｏｎ ｉｃｓ）、ハイアレー、ＰＬ、Ａ）で計算し、抑制の割合を計算した。以下の製 剤を試験した：遊離ＦＴ％ＤＭＰＧ、ＤＭＰＣ：ＤＭＰＧ７：３、ＤＭＰ　Ｇ　 −Ｐ　ＴおよびＤ　Ｍ　Ｐ　Ｃ：　Ｄ　Ｍ　Ｐ　Ｇ　７　：　３　ＰＴ０結果を 、５０％の増殖抑制を達成する用１ｉ（ＩＤ、。）として表した。空のリポソー ムの結果は、そのＩＤ５゜濃度に対応して保持させるのに要するＦＴの量として 表した。

遊離シクロペンテンカルボキシレート−ラセミＤＡＣＨのＩＤ５゜は、１．３μ ｇ／＋Ｑであった（第５表）。試験した２種のＬ−ＰＴ製剤のうち、ＤＭＰＧ− ＰＴｌｉ、ＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３−ＦＴよりもわずかに活性が高かった（こ れらの実験の平均ＩＤ５ｏ；それぞれ０．７および１．６μｇ／ｘＱ）。ＤＭＰ Ｇから成る空のリポソームのＩＤ５ｏは３．７μｇ／ｒｒｔＱであり、ＤＭＰＣ ：ＤＭＰＣ７：３から成る空のリポソームのＩＤ５ｏは＞１０μｇ／ｉｃであっ た（第５表）。

第５表 Ｌ１２１０細胞に対する遊離ＰＴＳＬ−ＰＴおよび空のリポソームのイン・ビト ロ抗癌活性（ＰＴは、シクロペンテンカルボキシレート−ラセミＤＡＣＨ−ＰＴ ） 遊離ＰＴ　１．３　−−　−−　− ＤＭＰＧ−ＰＴ　Ｏ，７１，０１，４０，７ＤＭＰＧ’　３．０　３゜０　５． ０　３．７ＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴ　１．９　２．０　０．９　１．６ ＤＭＰＣ＋ＤＭＰＧ？：３’　＞１０．０−一一一−−’　ＣＤＤＰ　ＩＤ５Ｇ ＝０．１μｇ／ｘ（１’ＩＤ５ｏは、空のリポソームのＩＤ５ｏ濃度に対応して 保持するのに要するＰＴ量（μｇ／ｍ１２）として表した。

ＣＤＤＰ、ヒドロキシプロピルセルロース中のＰＴ、ＤＭＰＧ。

ＤＭＰＧ　ＰＴ％ＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３およびＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３− ＰＴのイン・ビボ抗癌活性を、Ｌ、　１２１０−ＢＤＦ、マウスモデル（２５） で試験した。ＢＤＦ、マウスは、チャールズ・リバ（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅ ｒ、ウィルミントン、ＭＡ）から入手した。体重１８〜２２ｇのマウス６〜８匹 の群に、Ｌ１２１０白血病細胞ｌ×１０＠を０日目にｉｐ接種した。Ｌ１２１０ 細胞は、異なる実験から何週間も経過したＤＢＡ、マウス中に保持したものであ った。癌接種の２４時間後に、全Ｌ−ＰＴ製剤を、０．１〜０　、３　ｘ（ｌの 量でｉｐ注射した。２種の異なる投与スケジュールを用いた：　１日目に１回注 射するか、または１，５および９日目に注射した（複数回）。用いたＣＤＤＰの 量は、予め実験において最大抗癌活性を示した量であった。ＰＴＳＤＭＰＧ−Ｐ ＴおよびＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴは、３．１２５〜５０ｒｎｇ／ｋｇ（ およそのＬＤ、。）の量で用いた。全動物が死亡するまで、臨床的作用および生 存時間を調べた。結果は、％Ｔ／Ｃ（処理マウスの生存時間の中央値／対照マウ スの生存時間の中央値Ｘ１００）および長期間生存動物の数で表した。１回およ び複数回注射スケジュールのそれぞれについて、３０日および６０日よりも長く 生存したマウスを長期間生存マウスとした。抗癌活性を試験した全Ｌ−ＰＴ製剤 は、実験当日に滅菌条件下に調製した。第１の実験において、ＣＤＤＰ、遊離Ｐ Ｔ、ＤＭＰＧ−ＰＴおよびＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴの１回ノｉｐ投与に よる、Ｌ１２１０白血病治療効果を試験した。１２　、５　ｍｇ／ｋｇおよび２ ５ｍｇ／ｋｇの用量の遊離ＰＴで処置したマウスの％Ｔ／ｃは、ＣＤ　Ｄ　Ｐ　 ｌ　Ｏｍｇ／ｋｇテ処置した場合のそれと匹敵していた（１６２と１７８．３実 験値の平均値）（第６表）。Ｉ　２，５ｍｇ／ｋｇ、　６．２５ｍｇ／ｋｇおよ び３．１２５ｍｇ／ｋｇノ用量のＤＭＰＧ−ＰＴの抗癌活性は、遊離ＰＴおよび ＣＤＤＰのそれに匹敵しティた（平均％Ｔ／Ｃ＝　１７５　（１２，５ｍｇ／ｋ ｇ）；１５８（６，２５ｍｇ／ｋｇ）；および１６３（３，１２５ｍｇ／ｋｇ） Ｘ第６表）。２５ｍｇ／ｋｇまたはそれ以上の用量のＤＭＰＧ−ＦＴは、Ｌ１２ １０白血病にかかったＢＤＦ、マウスに対して毒性であった。２５ｍｇ／ｋｇ１ １２．５ｏ＋ｇ／ｋｇおよび６．２５ｍｇ／ｋｇの用量のＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７ ：３−ＰＴで処置したマウスの％Ｔ／ｃは、ＣＤＤＰ、遊雌ＦＴおよびＤＭＰＧ −ＰＴによる％Ｔ／Ｃと同様か、それよりもわずかに高かった（平均値：％Ｔ／ Ｃ＝２１５（２５ｍｇ／ｋｇ）；　１７８（１２、５ｍｇ／　ｋｇ）　：および ２００　（６、２５ｍｇ／ｋｇ）Ｘ第６表）。５０ｍｇ／ｋｇの用量のＤＭＰＣ ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴは、ＬＩ２１０白血病にかかったＢＤＦ、マウスに対し て毒性であった。ＤＭＰＧおよびＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３から成る空のリポソ ームは、空でない粒子（Ｌ−ＰＴ）の最適の用量に匹敵する用量において、抗癌 活性を示さなかった（％Ｔ／Ｃ＝１０５（ＤＭＰＧ）および９３（ＤＭＰＣ：Ｄ ＭＰＣ７：３））。長期間生存マウス（６匹中１または２匹）は、ＣＤＤＰｌＤ ＭＰＧ−ＰＴおよびＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴで処置した群においてみら れた（第６表）。

複数回投与スケジュールを用いた実験において、ＣＤＤＰ７．５ｍｇ／ｋｇＸ３ 投与によって最も高い％Ｔ／Ｃ値２５３が得られ、遊離ＰＴ１２．５ｍｇ／ｋｇ Ｘ３投与では％Ｔ／Ｃは２８４、ＤＭＰＧ−ＦＴ６．２５ｍｇ／ｋｇＸ３投与で は１７９およびＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３−ＰＴｌ　２．５ｎ＋ｇ／ｋｇＸ３投 与では４０３であった。長期間生存マウス（６匹中１匹）は、ＤＭＰＣ：ＤＭＰ Ｃ７：３−ＰＴで処置した群においてのみ見られた（第７表）。

第６表 マウスＬ１２１０白血病に対するＣＤＤＰ、遊離ＰＴおよびＬ−ＰＴ腹腹腔膜投 与１８目）のイン・ビトロ抗癌活性（ＰＴは、シクロペンテンカルボキシレート −ラセミＤＡＣＨ）群　製剤４　％Ｔ／Ｃ（３０日口の生存マウス数）番号　実 験１１　実験２２　実験３ｓ Ｉ　ＣＤＤＰ　１０　ｍｇ／ｋｇ　１６７　１８９（１／６）２　遊離ＦＴ　２ ５　ｍｇ／ｋｇ　−−１６８３１２，５ｍｇ／ｋｇ　１７３　１３６　１７９４ 　ＤＭＰＧ−ＦＴ　２５　ｍｇ／ｋｇ　１００　−−　−−５　１２．５　ｍｇ ／ｋｇ　１６０　２０９（２／６）　１５８６　６．２５ｍｇ／ｋｇ　−−１５ ８ ７３，１２ｍｇ／ｋｇ−−−−１６３（２／６）８　ＤＭＰＣ：ＤＭＰＣ７：３ −ＦＴ２５　ｍｇ／ｋｇ　２１３　２００（１／６）　２３２（１／６）９　１ ２．５　ｍｇ７ｋｇ　１６７（１／６）　”　−１８９（１／６）１０　６．２ ５ｍｇ／ｋｇ　−−２００！対照の生存日数中央値−７，５日間 ２対照の生存日数中央値＝１１日間 ３対照の生存日数中央値＝９日間 ４製剤は、いずれも、１ｘｌＯ”Ｌ１２１０細胞のｉｐ接種から２４時間後に０ ．１〜０　、３　ｘＱの量でｉｐ注射した。

第７表 マウスＬ１２１０白血病に対するＣＤＤＰ、遊離ＰＴおよびＬ−ＰＴ腹腹腔膜投 与ｌ、５および９日日）のイン・ビボ抗癌活性（ＰＴは、シクロペンテンカルボ キシレート−ラセミＤＡＣＨ）群　製剤１　用量　％Ｔ／Ｃ Ｔ号　（６０日口の生存マウス数） ｌ　ＣＤＤＰ　７．５　ｍｇ／ｋｇｘ３　２５３２　遊離Ｐ　Ｔ　２５　ｍｇ／ ｋｇｘ　３　１５８３　１２．５　ｍｇ／ｋｇＸ３　２８４４　６．２５　ｍｇ ／ｋｇｘ　３　１６ｇ５　ＤＭＰＧ−ＰＴ　１２．５　ｍｇ／ｋｇｘ３　１０５ ６　６．２５　ｍｇ／ｋｇｘ　３　１７９７　３．１２　ｍｇ／ｋｇｘ　３　１ ６８８　１．５６　ｍｇ／ｋｇＸ　３　１１５９　ＤＭＰＣ：ＤＭＰＧ７二３− ＰＴ　１２．５　ｍｇ／ｋｇｘ　３　４０３（１／６）１０　６．２５　ｍｇ／ ｋｇｘ　３　２５３１１　３、１２５ｍｇ／ｋｇＸ　３　２１０（１／６）１製 剤は、いずれも、癌の接種から２４時間後、５日後および９日後にＯ９１〜０　 、３　ｘ（ｌの量でｉｐ注射した。

実施例１２ Ｌ−１２１０ネズミ白血病に対する種々のＬ−ＰＴＴ縁体の抗癌活性を、前記の ように、Ｌ−１２１０−ＢＤＦマウスモデルにおいて評価した（０日月に癌接種 、１８目に処置、ｉｐ）。ＣＤＤＰ（％Ｔ／Ｃ＝１７５）と比較すると、Ｌ−Ｐ ＴＴ縁体は、Ｌ−ＰＴ（シフペンテンカルボキシレート−トランス−５Ｓ−ＤＡ ＣＨ＝１５５およびＮ−デシルイミノジアセテート−ラセミＤＡＣＨ＝１５０お よびＮ−デシルイミノジアセテート−トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ＝１６２）以外 は、同等またはわずかに高い抗癌活性を示した。これらの結果を第８表に示す。

第８表 Ｌ１２１０白血病３に対するシス−プラチナおよび種々のりボソームープラチナ 類縁体１の抗癌活性 プラチナ類縁体　用量’（ｍｇ／ｋｇ）％Ｔ／Ｃ’ＰＴ−シクロペンテンカルボ キシレート−ラセミ−ＤＡＣＨ２５２１３ ＰＴ−シクロペンテンカルボキシレート−トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ２５１８７ ＰＴ−シクロペンテンカルボキシレート−トランス−５Ｓ−ＤＡＣＨ２５１５５ ＰＴ−ネオデカノエート− ラセミ−ＤＡＣＨ５０１８７ ＰＴ−ネオデカノエート− トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ２５１７５ ＰＴ−Ｎ−デシルイミノジアセテート−ラセミ−ＤＡＣＨ２５１５０ ＰＴ−Ｎ−デシルイミノジアセテート−トランス−ＲＲ−ＤＡＣＨ２５１６２ シス−プラチナ（ＣＤＤＰ）’　１０　１７５１リポソ一ム組成：　ＤＭＰＣ： ＤＭＰＣ７：３ｓＯ日目に、ｌＸ１０’Ｌ１２１０細胞を１ｐＪＨ１４処置：　 １０目にｉｐ ５生理食塩液に溶解、Ｉｍｇ／村 実施例１３ マウスＭ５０７６細網肉腫の肝臓転移に対するＩ、−ＰＴ−ネオデカノエート− ラセミ−ＤＡＣＨのイン・ビボ抗癌活性肝臓転移に対するＬ−ＰＴの抗癌作用を 、実施例６に記載のように調製したＬ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−Ｄ　 Ａ　ＣＨｌおよびもっばら肝臓に転移するマウスＭ５０７６細網肉腫を用いて試 験した。

２種の異なる接種物および投与スケジュールを用いたＭ５０７６の肝臓転移の治 療において、Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−ＤＡＣＨは、シス−プラチ ナよりも活性であった（第９表および第１Ｏ表）。１０５Ｍ５０７６細胞の静脈 内接種から３０日後、Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−ＤＡＣＨ（２５ｍ ｇ／ｋｇ、８．１２．１６日回しは、シス−プラチナ＜７．５ｍｇ／ｋｇ、８． １２．１６日回しよりも、肝臓転移数を２倍以上低下した（肝臓転移数平均値上 ５Ｄ＝３９±２１（Ｌ−ＰＴ）、＋１４±３８（シス−プラチナ））（第９表） 。Ｌ−ＰＴ−ネオテカノエ−）−ラーｔ？ミーＤＡＣＨ（２５ｍｇ／ｋｇ、　４ ．８．１２日１）は、１０’Ｍ５０７６細胞の接種から４５日後に、Ｍ５０７６ の肝臓転移を完全に抑制したが、シス−プラチナ（７，５ｍｇ／ｋｇ、４．８． １２日１）で処置した動物の４／６は、肝臓転移が１７５またはそれ以上であっ た（第１０表）。

Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−Ｄ　Ａ　ＣＨハ、Ｍ５０７６細網肉腫の 肝臓転移の予防に有効であった。Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−ＤＡＣ Ｈ（３７，５ｍｇ／ｋｇ、−１０目）は、シス−プラチナ（１（ｌａｇ／ｋｇ、 　−］日日目および未処置動物と比較して、ＩＯ’Ｍ５０７６細胞の静脈内接種 （θ日日に接種）から２１１００肝臓転移数を５倍低下した（肝臓転移数平均値 ±５Ｄ＝５２±２０（Ｌ−ＦＴ）、２５６±５４（シス−プラチナ）、および２ ２６±２１（対照））（第１１表）。

第９表 Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−ＤＡＣＨによる、Ｍ５０７６細網肉腫の 肝臓転移の処置 用量　スケジュール　３０日口の 肝臓転移数 Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート− ラセミ−ＤＡＣＨ２５８，１２，１６３９±２１＊１０　Ｃ５７ＢＬ／６マウス の群に、０日目に、ＩＯ’Ｍ５０７６細胞を静脈内接種した。８．１２および１ ６日回し、シス−プラチナまたはＬ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−ＤＡＣ Ｈで動物を処置した。未処置動物の生存時間の中央値は１９日間であった。

処置動物を３０日口の殺し、肝臓を解剖し、ブーアン固定液に入れ、肝臓癌コロ ニー数を数えた。

第１０表 Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−ＤＡＣＨによる、Ｍ５０７６細網肉踵の 肝臓転移の処置 用量　スケグ　４５日目の ニール　肝臓転移数 Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート− ラセミ−ＤＡＣＨ２５４，８，１２０，０，０，０，０，１＊６　Ｃ５７ＢＬ／ ６マウスの群に、θ８目に、ＩＯ’Ｍ５０７６細胞を静脈内接種した。４．８お よび１２日目に、シス−プラチナまたはＬ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ− ＤＡＣＨで動物を処置した。未処置動物の生存時間の中央値は３０日間であった 。処置動物を４５日目に殺し、肝臓を解剖し、ブーアン固定液に入れ、肝臓癌コ ロニー数を数えた。シス−プラチナで処置した動物のうち２匹は４５日目までに 死んだが、Ｌ−ＰＴで処理した群の動物のうち死んだものはなかった。

第１１表 Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−ＤＡＣＨによる、Ｍ５０７６細網肉腫の 肝臓転移の予防＊ 用量　スケジュール　２１日目の 肝臓転移数 処理　ｍｇ／　ｋｇ　日　平均値±ＳＤなし　−−−−２２６±２１ シス−プラチナ　１０　−１　２５６±５４Ｌ−ＰＴ−ネオデカノエート− ラセミ−ＤＡＣＨ３７，５−１５２±２０＊６　Ｃ５７ＢＬ／６マウスの群を、 −１８目に、シス−プラチナまたはＬ−ＰＴ−ネオデカノエート−ラセミ−ＤＡ ＣＨで処置した。０８目に、１０’Ｍ５０７６細胞を動物に静脈内接種した。未 処置動物の生存時間の中央値は２１日間であった。処置動物を２１日目に殺し、 肝臓を解剖し、ブーアン固定液に入れ、癌コロニー数を数えた。

シス−ジアミン−ショート−プラチナ（ＩＩＸＮＨ３）ｔＰ　ｔ　Ｉ　ｔを以下 の方法でまず調製した： Ｋｔｐｔｃｃ４（５ｇ）を水（２０ｊ＋１２）に溶解した。Ｋｌ（３ｇ）の水溶 液を加え、暗褐色溶液を得た。水性濃アンモニア（２ｘＱ）を混合物に加え、室 温で２〜３時間撹拌した。混合物を濾過し、固体を過剰の水、エタノールおよび エーテルで洗った。生成物をＰ、０．で減圧下に乾燥した。収量４．５ｇ（７７ ％）。

次いで、本発明の化合物を以下のように調製した：（ＮＨ３）２　Ｐ　ｔ　Ｉ　 ｔ（１，０ｇ）を水（５０Ｒ＆）に懸濁させ、Ａ　ｇ　Ｎ　Ｏ３の水溶液（０， ６８ｇ　２０ｒｎＱ　Ｈ，Ｏ）を加えた。反応混合物を、暗所で室温で一晩撹拌 した。Ａｇｌ沈澱を濾過し、濾液を回転蒸発により濃縮した。濃縮溶液に、ナト リウムネオデカノエートの溶液（メタノール２０叶中のネオデカン酸０．６８８ ｇおよびＩＮ　ＮａＯＨ。

４ｍのを加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。黄色反応混合物を、回転蒸 発器を用いて減圧下に４０℃で蒸発乾固させた。ゴム状生成物が得られ、これを クロロホルムで抽出し、クロロホルム抽出物を無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。Ｍ　 ｇ　Ｓ　Ｏ４を濾去し、回転蒸発器を用いて減圧下に濾液を蒸発乾固させた。ク リーム色の固体が得られ、これを減圧下にＰ、０５で乾燥した。最終生成物を０ ℃で貯蔵した。

最終生成物の元素分析は、Ｃ４１，５Ｂ、Ｈ８，０３，Ｈ４，４５％であった。

Ｃ７゜Ｈ，、Ｎ！、Ｐｔとしての計算値は、Ｃ４２，００，Ｈ７，７、Ｈ４，９ ０％である。

シス−ビス−ネオデカノエート−シス−ジアミン−プラチナ（ＩＩ）の構造式は 次の通りである： ［Ｈ３Ｎコｔ　Ｐ　ｔ　［００ＣＣＲ’　ＲＲ”］ｔ［式中、Ｒ，Ｒ’、Ｒ”は 、実験式〇＋ｏＨ＋ｓＯｔ（ＭＷ＝１７１）の力、ルポキシレート基を与えるよ うにＣＨ，、Ｃ、Ｈ５またはＣ３Ｈ？であり得る。］。

シス−ビス−ネオデカノエート−シス−ジアミン−プラチナ（ｎ）は、クロロホ ルム、メタノールおよび他の通常の存機溶媒に対する溶解性が高いが、水には不 溶性である。

プラチナ（■）２水和物の調製 アンモニアの代わりにシクロヘキシルアミン配位子を用いて、実施例１４の方法 を行った。複合体は、クロロホルム、メタノールおよび他の有機溶媒に対する溶 解性が高いが、水には不溶性である。

元素分析；　Ｃ３２Ｈｅ　−Ｎ　ｔ　Ｏ−・２Ｈ３０としての計算値、Ｃ４９， ７１：　Ｈ８，８０、Ｎ３．６２％、実測値Ｃ４９，３１，Ｈ８，３９，Ｎ３． １６％。

シス−ビス−ネオデカノエート−ビス−シクロヘキシルアミン−プラチナ（ＩＩ ）の構造式は次の通りである：［ＣｅＨ＋＋ＮＨｔ：Ｌ　Ｐｔ　［ＯＯＣＣＲ’ ＲＲ″］。

［式中、Ｒ，Ｒ’、Ｒ”は、実験式Ｃ＋ｏＨ＋ｅＯｔ（ＭＷ＝１７１）のカルボ キシレート基を与えるようにＣＨ８、Ｃ，Ｈ５またはＣｓ　Ｈ？でありアンモニ アの代わりにエチレンジアミン配位子を用いて、実施例■の方法で、まずシスー ジョードーエチレンジアミンープラチナ（Ｉｆ）を、生成物収率９６％で調製し に０スルフアトーエチレンジアミンープラチナ（ｎ）・Ｈｔｏを以下の方法で調 製した。

シスービスージョードーエチレンジアミンープラチナ（Ｉｆ）、（３゜９）を、 ＨｔＯ１０ｔｔｒ（！に懸濁させ、Ａｇ、Ｓｏｔの水溶液（Ｈｔ０２０ＯｍＱ中 ２　、２　ｇ）をこれに加えた。反応混合物を暗所で室温で一晩撹拌した。Ａｇ ｌを濾過により除去し、回転蒸発によって黄色濾液を減圧下に４０〜４５℃で蒸 発乾固さ什た。最終生成物を減圧下にＰ、０５で乾燥した。生成物収量は２．３ ５ｇ（８１％）であった。

次いで、本発明の化合物を以下のように調製した：スルファトーエチレンジアミ ンープラチナ（ＩＩ）、ＨｔＯ（０，３６９ｇ）をＨｙＯ（２０ｒｔｒ（Ｄに溶 解し、ナトリウムネオデカノエートの溶液（ネオデカン酸、メタノール２０ｊｌ Ｑ中０．３４４ｇおよび１．ＮＮａＯＨ１２Ｊｌｉ２）を加えた。反応混合物を 室温で２〜３時間撹拌した。

回転蒸発により、反応混合物を減圧下に、４０〜４５℃で蒸発乾固した。ゴム状 生成物が得られ、これをクロロホルムで抽出し、クロロホルム抽出物を無水Ｍｇ ＳＯ４で乾燥した。Ｍｇ　Ｓ　Ｏ４を濾過により分離し、回転蒸発器を用いて濾 液を減圧下に蒸発乾固した。最終生成物を減圧下にＰ、０５で乾燥した。゛生成 物を０℃で貯蔵した。

元素分析：　ＣｔｔＨａｅＮｙＯ−ＰＬ’　Ｈ２０としての計算値、Ｃ４２゜８ ６、Ｈ７，７９，Ｈ４，５４％、実測値Ｃ４３，０７，Ｈ７，３２；Ｈ４，７１ ％。

シスービスーネオデカノエートーエチレンジアミンープラチナ（ＩＩ）は、クロ ロホルム、メタノールおよび他の通常の有機溶媒に対する溶解性が高いが、水に は不溶性である。

シスービスーネオデヵノエートーエチレンジアミンープラヂナ（ＩＩ）の構造式 は次の通りである： ［式中、Ｒ，Ｒ’、Ｒ’は、実験式〇、。Ｈ，０２（Ｍ〜Ｖ＝１７１）のカルボ キシレート基を与えるようなＣＨ３、Ｃｔ　ＨａまｆこはＣａ　Ｈ？でありシス −ビス−ネオデカノエート−ビス−イソプロピルアミン−プラチナ（ＩＩ）の調 製 エチレンジアミンの代わりにイソプロピルアミン配位子を用いて、実施例１６の 方法で、まずシス−ビス−ネオデカノエート−ビス−イソプロビルアミン−プラ チナ（Ｕ）およびスルファト−ビス−イソプロピルアミン−プラチナＣＴＪ）を 調製した。

次いで、本発明の化合物を以下の方法で調製した：スルファトービスーイソプロ ビルアミンープラチナ（ｎ）・Ｈ２０（０，４２７ｇ）をｒ（ｔｏ　（５０１ｆ ｆ）ニ溶解し、ナトリウム−ネオデカノエートの溶液（メタノール２０ｍＱ中ネ オデカン酸０．３４４ｇおよび１、ＮＮａＯＨ１２ｍＱ）を加えた。反応混合物 を室温で２〜３時間撹拌した。回転蒸発器を用いて、反応混合物を減圧下に４０ 〜４５℃で蒸発乾固した。ゴム状塊が得られ、これをクロロホルムで抽出し、ク ロロホルム抽出物を無水Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４で乾燥した。ＭｇＳＯ４を濾過により 分離し、回転蒸発器を用いて濾液を減圧下に蒸発乾固した。生成物を減圧下にＰ 、０．で乾燥した。生成物を０℃で貯蔵した。

元素分析；　Ｃ２＠ＨｓｓＮｔＯ４Ｐｔとしての計算値、Ｃ４７，６３，Ｈ８， ５３，Ｈ４，２６％、実測値Ｃ４７，７４：　Ｈ８，４７，Ｎ３．９３％。

シス−ビス−ネオデカノエート−ビス−イソプロピルアミン−プラチナ（ＩＩ） の構造式は次の通りである：（［ＨａＣ］ｚｃＨＮＨｔ）ｔ−Ｐｔ　［ＯＯＣＣ Ｒ’ＲＲ”コ。

［式中、Ｒ，Ｒ’、Ｒ”は、実験式Ｃ８゜Ｈ＋ｓＯｔ（ＭＷ＝　１７１　）のカ ルボキシレート基を与えるようなＣＨｓ、Ｃｔ　ＨｓまたはＣ８Ｈ，であり得る 。］。

シス−ビス−ネオデカノエート−ビス−イソプロピルアミン−プラチナ（ＩＩ） は、クロロホルム、メタノールおよび他の有機溶媒に対する溶解性が高いが、水 には不溶性である。

実施例１８ シスービスーデカノエートートランスーＲ，Ｒ−１，２−ジアミノシクロヘキサ ン−プラチナ（ＩＩ）の調製スルファト−トランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジアミノ シクロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）・ＨｔＯ（０，４２３ｇ）をＨｔＯＣ２０ｍ のに溶解し、ナトリウム−ネオデカノエートの溶液（メタノール２０酎およびｌ ＮＮａ０Ｈ２ｘρ中ネオデカン酸０．３４４ｇ）を加えた。反応混合物を室温で ２〜３時間撹拌した。回転蒸発器を用いて、反応混合物を減圧下に４０〜４５℃ で蒸発乾固した。固体が得られ、これをクロロホルムで抽出し、クロロホルム抽 出物を無水Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏａで乾燥した。

Ｍｇ５Ｏｔを濾過により除去し、回転蒸発器を用いて濾液を減圧下に蒸発乾固し た。生成物を減圧下にＰ　ｔ　Ｏｓで乾燥した。最終生成物を０℃で貯蔵した。

元素分析−ＣｙａＨｓｔＮｔＯａＰｉ　ＨｔＯとしての計算値、Ｃ４６゜５９、 Ｈ８，０６，Ｈ４，１８％、実測値Ｃ４５，９４：　Ｈ７，８７゜Ｈ４，３１％ 。

シスービスーデカノエートートランスーＲ，Ｒ−１，２−ジアミノシクロヘキサ ン−プラチナＯ１）は、クロロホルムおよび他の有機溶媒に対する溶解性が高い が、水には不溶性である。

シスービスーデカノエートートランスーＲ，Ｒ−１，２−ジアミノシクロヘキサ ン−プラチナ（ＩＩ）の構造式は次の通りである：実施例１９ シス−ビス−ネオペンタノエート−トランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジアミノシクロ ヘキサン−プラチナ（ＩＩ）スルファト−トランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジアミノ シクロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）・Ｈ，Ｏ（０，４２３ｇ）を水（２０ＩＱ） に溶解し、バリウム−ネオペンタノエートの溶液（メタノール５ｊｌＩｌ！中の ネオペンタン酸０．２０４ｇお上びＨｔ　Ｏ５０ｍＱ中のＢａ（ＯＨ）！・８Ｈ ｔＯ０゜３ｇを組み合わせたもの）を加えた。反応混合物を室温で２〜３時間撹 拌した。回転蒸発器を用いて、反応混合物を減圧下に４０〜４５℃で蒸発乾固し た。残渣をメタノールで抽出し、濾過し、濾液を蒸発乾固した。固体が得られ、 これを更にクロロホルムで抽出した。

クロロホルム抽出物を蒸発乾固し、クリーム色の生成物を得た。生成物を減圧下 にＰｙＯｓで乾燥した。

元素分析　Ｃｒ　ｓ　Ｈ３ｔ　Ｎ　ｔ　０４Ｐ　ｔ・２Ｈ２０としての計算値、 Ｃ３５゜ｏｏ；　Ｈ６，５７，Ｈ５，１１％、実測値Ｃ３５，１６，Ｈ６，１７ ゜Ｈ５，２７％。

シス−ビス−ネオペンタノエート−トランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジアミノシクロ ヘキサン−プラチナ（ＩＩ）は、クロロホルム、メタノールおよび他の通常の有 機溶媒に対する溶解性が高い。

シス−ビス−ネオペンタノエート−トランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジアミノシクロ ヘキサン−プラチナ（ＩＩ）の構造式は次の通りである：脂質親和性シスプラチ ナ類縁体の保持率および抗癌活性実施例１４〜１９において調製した化合物のリ ポソーム保持率を、実施例６に記載の方法によって試験した。これらのリポソー ム保持化合物を、実施例１２に記載のように、イン・ビボにおける癌増殖阻害剤 としての最適用量および活性を決定するために試験した。第１２表のデータは、 測定結果である。

第　１２　表 リポソーム中に組み込まれた脂質親和性シスプラチナ類縁体の保持率および抗癌 活性 化合物　保持率　最適　％Ｔ／Ｃ 用量　Ｌ１２１０ｉｐ／ｉＰ ｍｇ／ｋｇ　１回投与 シス−ビス−ネオデカノエート− シス−ジアミン−プラチナ（ｎ）　９５％　５０　２００シス−ビス−ネオデカ ノエート−ビス−シクロヘキシルアミン−プラチナ（ＩＩ）　８９％　１００　 １２５シス−ビス−ネオデカノエート− エチレンジアミン−プラチナ（ＩＩ）　８２％　７５　１４４シス−ビス−ネオ デカノエート−ビス−イソプロピルアミン−プラチナ（ＩＩ）　８７％　１００ 　１５０シスービスーデカノエートートランスーＲ，Ｒ−１，２−ジアミノシク ロヘキサン−プラチナ（ｕ）　９６％　５０　１８７シスービスーネオベンタノ エートー トランスーＲ，Ｒ−１，２一 実施例２１ ヒト悪性細胞ラインに対するイン・ビトロ細胞毒性コロニー形成阻害アッセイを 用いて、結腸癌の３種類のヒト悪性セルライン（ＬｏＶｏ、ＳＷ６２０およびＳ ’Ｗ４０３）に対して、シス−ビス−ネオデカノエート−１，２−ジアミノシク ロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）をリポソームの形で試験した。コロニー形成５０ ％阻害を達成した薬剤濃度（ＩＣ５０）は、４〜８ｕＭであった。これらのセル ラインに対するシスプラチナのＩＣ５０は３〜７ｕＭであった。

以下の請求の範囲に記載の本発明の概念および範囲から逸脱することなく、本発 明に記載の種々の組成、要素、工程および方法に変化を加え得る。

国際調査報告 ＬＬＩ＋ｕ１１ｍｌ−ａへａｌＡｌ−−Ｉｌｅｊｌ＋ａｓｓｏ、ＰＣτ／υ５８ ６１０２１８１

Claims (123)

【特許請求の範囲】
1. １．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［Ｒ１およびＲ２は、それぞれ疎水性基を有するカルボキシレートであるか、ま たは結合している場合は、疎水性基を有するジカルボキシレート▽であり、Ｒ３ およびＲ４は、それぞれ式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ５は、水素、アルキル、アリール、アラールキル、アルケニルもしく はシクロアルキル、シクロアルケニルから成る群から選択される基またはその組 み合わせである。）で示される基であるか、または結合している場合は、炭素原 子数約３〜７のシクロアルキル−１，２−ジアミノおよび炭素原子数約２〜１２ のアルキル−１，２−ジアミノから成る群から選択される基である。］ で示され、メタノールまたはクロロホルムに実質的に可溶性であり、水に実質的 に不溶性であるプラチナ（ＩＩ）４配位複合体。
2. ２．Ｒ３およびＲ４が、炭素原子数１〜２０のアルキルまたは炭素原子数３〜１ ２のシクロアルキルを含んで成る第１項記載の複合体。
3. ３．Ｒ５が炭素原子数１〜２０のアルキルである第２項記載の複合体。
4. ４．アルキルの炭素原子数が６〜１２である第２項記載の複合体。
5. ５．アルキルの炭素原子数が約２〜６である第２項記載の複合体。
6. ６．カルボキシレートが、炭素原子数約５〜２０のアルキルカルボキシレート、 またはアリールがフェニル、ナフチルもしくは炭素原子数約１２〜１６のアルキ ルフェニルであるアリールカルボキシレートである第１項記載の複合体。
7. ７．ジカルボキシレートが、炭素原子数約５〜２０のアルキルジカルボキシレー ト、またはアリールがナフチル、フェニルもしくは炭素原子数約６〜１２のアル キルフェニルであるアリールジカルボキシレートである第１項記載の複合体。
8. ８．アリールが、炭素原子を約６〜１４個有する第７項記載の複合体。
9. ９．アルケニルが、炭素原子を約５〜２０個有する第１項記載の複合体。
10. １０．シクロアルキルが、炭素原子を約３〜１２個有する第１項記載の複合体。
11. １１．Ｒ１およびＲ２が、シクロアルケニルの炭素原子数約５〜２０のシクロア ルケニルカルボキシレートであり、シクロアルケニルの炭素原子数が６またはそ れ以下である場合、Ｒ３およびＲ４が、一体に結合して、トランス−Ｓ，Ｓまた はＲ，Ｒ−１，２−ジアミノシクロヘキサンである第１項記載の複合体。
12. １２．アラールキルが、結合アリールおよびアルキル部分を含み、炭素原子数約 ７〜２０である第１項記載の複合体。
13. １３．アリール部分の炭素原子数が約６〜１０である第１２項記載の複合体。
14. １４．アルキル部分の炭素原子数が約１〜１０である第１２項記載の複合体。
15. １５．Ｒ３およびＲ４が、一体になってシクロアルキル−１，２−ジアミノ基で あり、炭素原子を約３〜２０個有し、シクロアルキル環の炭素原子数が約３〜１ ２である第１項記載の複合体。
16. １６．１，２−ジアミノシクロヘキサンが、トランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジアミ ノシクロヘキサンであり、Ｒ１およびＲ２がシスのデカノエートである第１５項 記載の複合体。
17. １７．Ｒ１およびＲ２がネオデカノエートである第１６項記載の複合体。
18. １８．Ｒ２およびＲ２が、結合して式：▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ６は炭素原子数約１０〜２０のアルキル、Ｒ７およびＲ８はそれぞれ 水素または炭素原子数約１〜５のアルキルである。］で示されるジカルボキシレ ートである第１項記載の複合体。
19. １９．Ｒ７およびＲ８がそれぞれ水素である第１８項記載の複合体。
20. ２０．シクロアルキル−１，２−ジアミノが、１，２−ジアミノシクロヘキサン である第１８項記載の複合体。
21. ２１．１，２−ジアミノシクロヘキサンが、トランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジアミ ノシクロヘキサンまたはトランス−Ｓ，Ｓ−１，２−ジアミノシクロヘキサンで ある第２０項記載の複合体。
22. ２２．Ｒ６がデシルである第２１項記載の複合体。
23. ２３．Ｒ６がデシル、Ｒ７およびＲ８が水素であり、ジカルボキシレートがシス である第２１項記載の複合体。
24. ２４．Ｒ７およびＲ８が水素であり、ジカルボキシレートがシスである第１８項 記載の複合体。
25. ２５．Ｒ７およびＲ８が水素である第１８項記載の複合体。
26. ２６．Ｒ１およびＲ２がネオーペントエートである第１６項記載の複合体。
27. ２７．ジカルボキシレートがシスである第１８項記載の複合体。
28. ２８．１，２−ジアミノシクロヘキサンがＲ，Ｒ立体配座である第１８項記載の 複合体。
29. ２９．Ｒ５が水素である第１項記載の複合体。
30. ３０．Ｒ１およびＲ２がそれぞれアルキルカルボキシレートである第２９項記載 の複合体。
31. ３１．アルキルカルボキシレートがネオーデカノエートである第３０項記載の複 合体。
32. ３２．Ｒ１およびＲ２がシスである第１２項記載の複合体。
33. ３３．Ｒ３およびＲ４が結合しておらず、それぞれ式：▲数式、化学式、表等が あります▼ ［式中、Ｒ５はシクロヘキシルである。］で示される基である第１項記載の複合 体。
34. ３４．Ｒ１およびＲ２がそれぞれアルキルカルボキシレートである第３３項記載 の複合体。
35. ３５．Ｒ１およびＲ２がそれぞれネオ−デカノエートである第３３項記載の複合 体。
36. ３６．Ｒ１およびＲ２がシスである第３３項記載の複合体。
37. ３７．Ｒ３およびＲ４が結合しておらず、それぞれ式：▲数式、化学式、表等が あります▼ ［式中、Ｒ５はイソプロピルである。］で示される基である第１項記載の複合体 。
38. ３８．Ｒ１およびＲ２がそれぞれネオ−デカノエートである第３７項記載の複合 体。
39. ３９．Ｒ１およびＲ２がシスである第３７項記載の複合体。
40. ４０．Ｒ３およびＲ４が結合して、炭素原子数２〜１２のアルキル−１，２−ジ アミノ基である第１項記載の複合体。
41. ４１．アルキルがエチルである第４０項記載の複合体。
42. ４２．Ｒ１およびＲ２がアルキルカルボキシレートである第４１項記載の複合体 。
43. ４３．アルキルカルボキシレートがネオ−デカノエートである第４２項記載の複 合体。
44. ４４．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［Ｒ１およびＲ２は、それぞれ疎水性基を有するカルボキシレートであるか、ま たは一体に結合している場合は、疎水性基を有するジカルボキシレートであり、 Ｒ３およびＲ４は、それぞれ式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ５は、水素、炭素原子数約１〜２０のアルキル、または炭素原子数約 ３〜１２のシクロアルキルである。）で示される基であるか、または一体に結合 している場合は、炭素原子数約３〜７のシクロアルキル−１，２−ジアミノおよ び炭素原子数約２〜１２のアルキル−１，２−ジアミノである。］で示され、メ タノールまたはクロロホルムに実質的に可溶性であり、水に実質的に不溶性であ る４配位プラチナ複合体と、リン脂質とを含んで成るリポソーム。
45. ４５．第４４項記載のリポソームおよび薬学的に許容し得る担体または希釈剤を 含んで成る薬剤組成物。
46. ４６．Ｒ５が炭素原子数約６〜１２のアルキルである第４４項記載のリポソーム 。
47. ４７．カルボキシレートが炭素原子数約５〜２０のアルキルカルボキシレート、 またはアリールがナフチル、フェニルもしくは炭素原子数約１２〜１６のアルキ ルフェニルであるアリールカルボキシレートである第４４項記載のリポソーム。
48. ４８．ジカルボキシレートが、炭素原子数約５〜２０のアルキルカルボキシレー ト、またはアリールがナフチル、フェニルもしくは炭素原子数約１２〜１８のア ルキルフェニルであるアリールカルボキシレートである第４４項記載のリポソー ム。
49. ４９．各疎水性基が、アルキル、アリール、アラールキル、アルケニルもしくは シクロアルキル、シクロアルケニルであるか、またはその組み合わせである第４ ４項記載のリポソーム。
50. ５０．複合体がシス−ビス−ｎ−デシルイミノジアセテートートランス−Ｒ，Ｒ −１，２−ジアミノシクロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）である第４９項記載のリ ポソーム。
51. ５１．複合体がシス−ビス−ｎ−デシルイミノジアセテートートランス−Ｒ，Ｒ −１，２−ジアミノシクロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）である第４４項記載のリ ポソーム。
52. ５２．複合体がシス−ビス−ネオデカノエートートランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジ アミノシクロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）である第４４項記載のリポソーム。
53. ５３．複合体がシス−ビス−アミン−ビス−ネオデカノエート−プラチナ（ＩＩ ）である第４４項記載のリポソーム。
54. ５４．複合体がシス−ビス−デカノエート−トランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジアミ ノシクロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）である第４４項記載のリポソーム。
55. ５５．複合体がシス−ビス−ネオペンタノエート−１，２−ジアミノシクロヘキ サン−プラチナ（ＩＩ）である第４４項記載のリポソーム。
56. ５６．複合体がシス−ビス−シクロペンテンカルボキシレートートランス−Ｒ， Ｒ−１，２−ジアミノシクロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）である第４４項記載の リポソーム。
57. ５７．複合体がシス−ビス−ネオデカノエート−エチレンジアミン−プラチナ（ ＩＩ）である第４４項記載のリポソーム。
58. ５８．複合体がシス−ビス−ネオデカノエート−ビス−イソプロピルアミン−プ ラチナ（ＩＩ）である第４４項記載のリポソーム。
59. ５９．複合体が、シス−ビス−デカノエート−トランス−Ｒ，Ｒ−１，２−ジア ミノシクロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）である第４４項記載のリポソーム。
60. ６０．複合体が、シス−ビス−ネオペンクノエート−トランス−Ｒ，Ｒ−１，２ −ジアミノシクロヘキサン−プラチナ（ＩＩ）である第４４項記載のリポソーム 。
61. ６１．複合体が、シス−ビス−ネオデカノエート−ビス−シクロヘキシルアミン −プラチナ（ＩＩ）である第４４項記載のリポソーム。
62. ６２．リン脂質が、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルコリン、スフ ィンゴマイェリン、ホスファチジン酸またはホスファチジルセリンである第４４ 項記載のリポソーム。
63. ６３．リン脂質が、実質的にホスファチジルグリセロール、ホスファチジルコリ ンまたはその組み合わせから成る第４４項記載のリポソーム。
64. ６４．コレステロールを含んで成る第４４項記載のリポソーム。
65. ６５．ホスファチジルグリセロールが、本質的にジミリストイルホスファチジル グリセロールから成り、ホスファチジルコリンが、本質的にジミリストイルホス ファチジルコリンから成る第６３項記載のリポソーム。
66. ６６．ジミリストイルホスファチジルグリセロールおよびジミリストイルホスフ ァチジルコリンの比が約１：１０〜１０：１である第６５項記載のリポソーム。
67. ６７．ジミリストイルホスファチジルグリセロールおよびジミリストイルホスフ ァチジルコリンの比が約３：７である第６５項記載のリポソーム。
68. ６８．プラチナ複合体およびリン脂質の比が約１：１０〜約１：３０である第４ ４項記載のリポソーム。
69. ６９．プラチナ複合体およびリン脂質の比が約１：１５である第４４項記載のリ ポソーム。
70. ７０．多重ラメラである第４４項記載のリポソーム。
71. ７１．単ラメラである第４４項記載のリポソーム。
72. ７２．リポソームを動物に投与することを含んで成る、プラチナ（ＩＩ）４配位 複合体に感受性のある癌細胞に侵された動物を治療する方法であって、該リポソ ームは、リン脂質と、式：▲数式、化学式、表等があります▼ ［Ｒ１およびＲ２は、それぞれ疎水性基を有するカルボキシレートであるか、ま たは一体に結合している場合は、疎水性基を有するジカルボキシレートであり、 Ｒ３およびＲ４は、それぞれ式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ６は、水素、炭素原子数約１〜２０のアルキル、または炭素原子数約 ３〜１２のシクロアルキルである。）で示される基であるか、または一体に結合 している場合は、炭素原子数約３〜７のシクロアルキル−１，２−ジアミノもし くは炭素原子数約２〜１２のアルケニル−１，２−ジアミノである。］で示され 、メタノールまたはクロロホルムに実質的に可溶性であり、水に実質的に不溶性 であるプラチナ（ＩＩ）４配位複合体とを含んで成る方法。
73. ７３．カルボキシレートが、炭素原子数約６〜１２のアルキルカルボキシレート である第７２項記載の方法。
74. ７４．カルボキシレートが、炭素原子数約５〜２０のアルキルカルボキシレート 、またはアリールがナフチル、フェニル、もしくは炭素原子数約７〜１６のアル キルフェニルであるアリールカルボキシレートである第７２項記載の方法。
75. ７５．ジカルボキシレートが、炭素原子数約５〜２０のアルキルカルボキシレー ト、またはアリールがナフチル、フェニル、もしくは炭素原子数約１２〜１８の アルキルフェニルであるアリールカルボキシレートである第７２項記載の方法。
76. ７６．各疎水性基が、炭素原子数約５〜２０の、アルキル、アリール、アラール キル、アルケニル、シクロアルキルもしくはシクロアルケニルまたはその組み合 わせである第７２項記載の方法。
77. ７７．リン脂質が、実質的にホスファチジルグリセロール、ホスファチジルコリ ンまたはその組み合わせから成る第７２項記載の方法。
78. ７８．リポソームがコレステロールを含んで成る第７２項記載の方法。
79. ７９．ホスファチジルグリセロールが、本質的にジミリストイルホスファチジル グリセロールから成り、ホスファチジルコリンが、本質的にジミリストイルホス ファチジルコリンから成る第７７項記載の方法。
80. ８０．ジミリストイルホスファチジルグリセロールおよびジミリストイルホスフ ァチジルコリンの比が、約１：１０〜１０：１である第７９項記載の方法。
81. ８１．ジミリストイルホスファチジルグリセロールおよびジミリストイルホスフ ァチジルコリンの比が、約３：７である第７９項記載の方法。
82. ８２．リポソームが、複合体およびリン脂質を約１：１０〜約１：３０の比で有 する第７２項記載の方法。
83. ８３．リポソームが、複合体およびリン脂質を約１：１５の比で有する第７２項 記載の方法。
84. ８４．リポソームが多重ラメラである第７２項記載の方法。
85. ８５．リポソームが単ラメラである第７２項記載の方法。
86. ８６．静脈内、動脈内、筋肉内、リンパ管内、腹腔内、皮下、胸膜内もしくは胞 膜内注射または局所適用または経口的に投与する第７２項記載の方法。
87. ８７．時間表に従って投与を反復する第７２項記載の方法。
88. ８８．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［Ｒ１およびＲ２は、それぞれ疎水性基を有するカルボキシレートであるか、ま たは一体に結合している場合は、疎水性基を有するジカルボキシレートであり、 Ｒ３およびＲ４は、それぞれ式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ５は、水素、炭素原子数約１〜２０のアルキル、または炭素原子数約 ３〜１２のシクロアルキルである。）で示される基であるか、または一体に結合 している場合は、炭素原子数約３〜７のシクロアルキル−１，２−ジアミノまた は炭素原子数約２〜１２のアルキル−１，２−ジアミノである。］で示され、 メタノールまたはクロロホルムに実質的に可溶性であり、水に実質的に不溶性で あるプラチナ（ＩＩ）４配位複合体の製法であって、スルファトートランス−Ｒ ，Ｒ−１，２−ジアミノアルカン−プラチナ（ＩＩ）複合体と、疎水性基を有す るカルボキシレートモノアニオンのアルカリ土類金属塩とを反応させて、該プラ チナ（ＩＩ）４配位複合体を合成することを含んで成る方法。
89. ８９．Ｒ５が、炭素原子数約１〜２０のアルキルである第８８項記載の方法。
90. ９０．水性環境中で反応を行う第８８項記載の方法。
91. ９１．アルカリ土類金属のスルファト塩を濾過によって除去し、結晶化または溶 媒の蒸発除去によってプラチナ複合体を得る第８８項記載の方法。
92. ９２．蒸発を減圧下に４５〜５０℃で行う第８８項記載の方法。
93. ９３．プラチナ複合体を乾燥剤で更に乾燥させる第８８項記載の方法。
94. ９４．乾燥剤が、五酸化リンである第９３項記載の方法。
95. ９５．第８８項記載の方法によって製造されるスルファト−トランス−Ｒ，Ｒ− １，２−ジアミノアルカン−プラチナ（ＩＩ）複合体。
96. ９６．リポソームの製法であって、 （ａ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［Ｒ１およびＲ２は、それぞれ疎水性基を有するカルボキシレートであるか、ま たは一体に結合している場合は、疎水性基を有するジカルボキシレートであり、 Ｒ３およびＲ４は、それぞれ式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ５は、水素、炭素原子数約１〜２０のアルキル、または炭素原子数約 ３〜１２のシクロアルキルである。）で示される基であるか、または一体に結合 している場合は、炭素原子数約３〜７のシクロアルキル−１，２−ジアミノまた は炭素原子数約２〜１２のアルケニル−１，２−ジアミノである。］で示され、 メタノールまたはクロロホルムに実質的に可溶性であり、水に実質的に不溶性で あるプラチナ（ＩＩ）４配位複合体を調製し、（ｂ）疎水性溶媒中で、該複合体 をリン脂質と約１：１５の比で混合し、（ｃ）疎水性溶媒を蒸発させてリン脂質 および複合体のフィルムを調製するか、混合物を凍結乾燥して粉末とし、（ｄ） 該フィルムまたは粉末を水溶液に分散させてリポソームを調製する ことを含んで成る製法。
97. ９７．Ｒ５が、炭素原子を約６〜１２個有する第９６項記載の方法。
98. ９８．リン脂質が、実質的にホスファチジルグリセロール、ホスファチジルコリ ンまたはその組み合わせから成る第９６項記載の方法。
99. ９９．工程（ｂ）において、前記複合体をリン脂質およびコレステロールと混合 する第９６項記載の方法。
100. １００．ホスファチジルグリセロールが、本質的にジミリストイルホスファチジ ルグリセロールから成り、ホスファチジルコリンが、本質的にジミリストイルホ スファチジルグリセロールから成る第９８項記載の方法。
101. １０１．ジミリストイルホスファチジルグリセロールおよびジミリストイルホス ファチジルコリンの比が、約１：１０〜１０：１である第１００項記載の方法。
102. １０２．ジミリストイルホスファチジルグリセロールおよびジミリストイルホス ファチジルコリンの比が、約３：７である第１００項記載の方法。
103. １０３．リポソームが、複合体およびリン脂質を約１：１０〜約１：３０の比で 含んで成る第９１項記載の方法。
104. １０４．リポソームが、複合体およびリン脂質を約１：１５の比で含んで成る第 ９１項記載の方法。
105. １０５．リポソームが多重ラメラである第９６項記載の方法。
106. １０６．リポソームを超音波処理に付して単ラメラリポソームを調製する工程を 更に加える第９６項記載の方法。
107. １０７．工程（ｃ）が、回転蒸発を含んで成る第９６項記載の方法。
108. １０８．プラチナ（ＩＩ）複合体によって増殖が抑制される細胞を通例有するこ とが知られている癌に宿主がかかっていることを確認し、第４４項記載のリポソ ームを宿主に投与することを含んで成る、宿主の癌増殖を抑制する方法。
109. １０９．リポソームが多重ラメラである第１０８項記載の方法。
110. １１０．リポソームが単ラメラである第１０８項記載の方法。
111. １１１．リポソームを非経口的に投与する第１０２項記載の方法。
112. １１２．プラチナ（ＩＩ）複合体によって増殖が抑制される細胞を通例有するこ とが知られている癌に宿主がかかっていることを確認し、第１項記載の複合体を 宿主に投与することを含んで成る、宿主の癌増殖を抑制する方法。
113. １１３．プラチナ（ＩＩ）複合体によって抑制されることが通例知られている、 転移の可能性があるか、または転移性の癌に宿主がかかっていることを確認し、 第４４項記載のリポソームを宿主に投与することを含んで成る、宿主の癌転移を 抑制する方法。
114. １１４．リポソームが多重ラメラである第１１３項記載の方法。
115. １１５．リポソームが単ラメラである第１１３項記載の方法。
116. １１６．リポソームを非経口的に投与する第１１３項記載の方法。
117. １１７．プラチナ（ＩＩ）複合体によって抑制されることが通例知られている、 転移の可能性があるか、または転移性の癌に宿主がかかっていることを確認し、 第１項記載の複合体を宿主に投与することを含んで成る、宿主の癌転移を抑制す る方法。
118. １１８．複合体を非経口的に投与する第１１７項記載の方法。
119. １１９．第４４項記載のリポソームを宿主に投与することを含んで成る、癌転移 に抗するために宿主にワクチン接種する方法。
120. １２０．リポソームが単ラメラである第１１９項記載の方法。
121. １２１．リポソームが多重ラメラである第１１９項記載の方法。
122. １２２．リポソームを静脈内に投与する第１１９項記載の方法。
123. １２３．転移が細網肉腫によるものである第１１９項記載の方法。