JPS633729A - ラツキヨウ種苗の大量増殖法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） この発明は組織培養によるラッキョウ種苗の人出増殖法
に関する。

（従来の技術） ラッキョウは、ユリ科ネギ属の多年草であり、地下に白
色の短紡綽形のｌ！ｌ茎を有する。このラッキョウには
、閲陽、ラクダ、へ房を中心に九頭龍、益田二号など種
々の系統に分かれた多種の在来種があり、いずれも食用
として広く栽培されている。

このラッキョウ種苗の増殖は、従来から、自然増殖を利
用して親株から種球を形成させて行なわれている。

（発明が解決しようとする問題点） 従来のラッキョウ種苗の増殖法では、自然ｉｆ１￥ｔｉ
率が低く、そのために多数の親株を必要とし、多くの人
手を要する。ざらに増殖時にウィルス病の蔓延によって
品質低下する恐れがある。

この発明は上述の事情に鑑みなされたものであり、その
目的とするところはラッキョウの種苗を大ｍかつ安価に
、しかも短期間に供給でき、また種々の植物病から保護
することのできるラッキョウ種苗の大量増殖法を提供す
ることである。

（問題点を解決するための手段） 組織培養法を利用したラッキョウ種苗の増殖に関する試
験・研究が、従来の増殖法の問題点を解消すべく始めら
れているが、従来の組織培養法の単なる私用では、種苗
の調製に多大の労力と時間を必要とし、゛また、増殖率
もさほど高いものとはいえない。また、比較的能率が良
いとの報告もあるが（大量、栗山、置皿ら著、野菜試験
場報告Ａ第９号巻第１６〜１９頁（１９８１年））、組
織片の生育速度が遅く、分化率も低いために実用的には
、増殖率に問題がある。

本発明者らは、上記を背景として組織培養によるラッキ
ョウ種苗の大和増殖法について種々研究した結果、この
発明を完成するに至った。

すなわちこの発明のラツギョ・り種苗の人通増殖法は、
ラッキョウの組織片を、生長調節物質を含有する第１固
体培地で培養して不定芽を分化させ、次いで分離して得
られた不定芽を生長調節物質を含有する第２固体培地で
培養して根を分化さけた幼植物体を得、この幼植物体を
さらに培養して根と鱗茎を有するラッキョウ種苗を形成
させることを特徴とするものである。

発明の詳細な説明　】 以下、この発明を具体的に説明する。

組織片の培養 この発明の増殖法において、まず、ラッキョウの組織片
を、生長調節物質を含有する第１固体培地で培養して不
定芽を分化させる。

この発明においてラッキョウの組織片としては、ラッキ
ョウ鱗茎の茎頂および茎頂近傍の組織を小片に、例えば
、０．５〜１履長に切断したものが好ましい。この切断
に先立って、組織体、例えばラッキョウ鱗茎の表面を、
次亜塩素酸ソーダ、エチルアルコールなどで殺菌処理し
たのち無菌水でよく洗っておくことができる。

第１固体培地の基本組成は、通常の植物組織培養に用い
られる培地のものとすることができる。

そのような培地として、例えば、ムラシゲ・スクーグ（
Ｈｕｒａｓｉｇｅ　−５ｋＯＯ９）氏培地１、リンスマ
イヤー・スクーグ（Ｌｉｎｓｍａｉｅｒ　−Ｓｋｏｏｇ
）氏培地、シエンク・ヒルデブランド（Ｓｃｈｅｎｋ　
−Ｈｉ　１ｄｅｂｒａｎｄｔ）氏培地、などがある。こ
の発明において用いられる第１固体培地としては、上記
の基本培地の他、これらに種々の改変を加えたものなど
を用いることができる。

植物組織培養片に対する培地中のＮ源は、生育速度に多
大の影響を与える。特にＮ源の形態が生育速度に及ぼす
影響は大きい。この発明において、して最適の釘比を決
定すべきである。この発明にのｍ比は例えば、１：２〜
１：１１であり、特に、１：約５が不定芽形成率および
生育速度の面で最適である。

培地を固体状にするために、寒天および／またはジェラ
ンガム（Ｇｅｌｌａｎ　Ｇｕｍ）を用いることができる
が、好ましくはジェランガムである。これは、寒天使用
培地における生育速ｊ度に比べてジェランガム使用培地
における成長速度が実際に大きいからであり、数種の植
物の再分化および生育速度を高める効果があるためだと
考えられる（下村講−部、鎌田博著、植物組織培養、３
　（１）、３８−４１頁（１９８６））。

第１固体培地に含められる生長調節物質は、組織片から
の多数の不定芽の分化を調節する働きを有するものであ
る。そのような物質として、例えばベンジルアデニン、
カイネチン、ナフタレン酢酸、インドール酢酸などがあ
り、好ましくは、ベンジルアデニンとインドール酢酸の
組み合せ、もしくはベンジルアデニンである。

この生長調節物質の添加量は、生長調節物質の種類、培
養段階などにより、適宜変更することが望ましい。しか
しながら、−般的に、その添加量は、０，１〜１１０ｌ
１／ｌ、好ましくは０．２〜５ｔｎｓ／Ｊ）程度である
。さらに、培地のｐＨは、添加量と同様に生長調節物質
の種類、培養段階などにより適宜変更することができる
が、例えば５．０〜６．０、好ましくは５．７〜５．８
である。培養中の照明は、必須ではないが、照明下に培
養することによってより良い結果が得られる。照明する
場合、その光通は例えば２００〜５０００ルクス、好ま
しくは１５００〜３０００ルクスである。

培養温度は、苗温、例えば、２０〜２５℃である。

培養環境は、例えば、試験管内の培養である。

例えば、固体培地２〜５ｍあたり上記小片１個の割合で
置床後、２０〜２５℃で４〜８３！！間培養する。この
培養によって１片あたり１〜数十個の不定芽が分化する
。培養条件によっては根も分化することもあるが、この
発明において、その俊の培養に支障はない。さらに、こ
の培養を、他の培地に移殖して複数回行なうこともでき
る。

不定芽の分離 組織片から分化した不定芽をその片から分離する。

通常、複数個の不定芽が分化し、個々の不定財に分離す
る。例えば、滅菌したメスやピンセットを用いて切断・
分離することができる。

不定芽の培養 分離された不定芽を、生長調節物質を含有する第２固体
培地上に移殖し、根を分化させて幼植物体を得る。

第２固体培地の基本組成は、通常の植物組織培養に用い
られる培地のものとすることができる。

そのような培地として、第１固体培地で挙げられたムラ
シゲ・スクーグ氏培地などがあり、不定芽の培養に用い
られる第２固体培地としては、上記の基本培地の他、こ
れらに上述のＮ源の形態などの種々の改変を加えたもの
などを用いることができる。

この第２培地には、それを固体状にするために寒天など
を用いることができるが、ジェランガムを用いることが
望ましい。

第２固体培地に含められる生長調節物質は、不定芽から
の根の分化を調節する働ぎを有するものである。そのよ
うな物質として、例えば、カイネチン、ベンジルアデニ
ン、ナフタレン酢酸などのがある。そのうち、好ましい
ものはカイネチンとナフタレン酢酸との組み合せである
。この生長調節物質の添加量は、生長調節物質の種類、
培養段階などに応じて適宜変更することができる。−般
的にその添加量は、例えば、０．１〜１０ＩＲｇ／４１
、好ましくは０．２〜５１１＋９／、Ｑである。

次いで培養条件、例えば培養ＤＨ，培養温度、照明、培
養雰囲気については、不定芽の培養における培養条件の
記載と実質的に同様である。

例えば、第２固体培地２〜５１１Ｉｌあたり不定芽１個
を置床後、２０〜２５℃の温度で２０〜３０日問静置培
養すると根が分化し、幼植物体が得られる。培養条件に
よっては、更に不定芽も分化することもあるが、この発
明においてその後の培養に支障はない。

さらに、培養を別の培地に移殖して複数回行なうことも
できる。

幼植物体の培養 幼植物体は、通常、種苗として使用することができない
ので、得られた幼植物体をさらに培養して根と鱗茎とを
有するラッキョウ種苗を形成する。

幼植物体の培養は、この幼植物体を種苗に形成するため
に行なわれる。

この工程における培地の基本組成は、第１固体培地およ
び第２固体培地の説明において記載されたものと実質的
に同様である。この培養の［４的に応じて、その組成を
改変してもよい。しかしながら、特にこの培地に生長調
節物質を添加づる必要はない。

この培養工程における培養条件は、幼植物体の種類、培
養段！ｉｆ！ｉなどに応じて適宜変更することが望まし
く、通常の培養手法を利用することができる。

例えば、固体゛培地５〜１０ｄあたり１個の割合で幼植
物体を移殖し、２０〜２５℃の温ｊ衰で２０・〜３０日
門静置培養すると、根が成育し、鱗茎が゛肥大してラッ
キョウの種苗が形成される。

このようにして得られた種苗を保存する場合、さらに培
養期間を延長して、また、０〜１０℃の低温下に置くこ
とによって、保存することができる。

この発明によって増殖した種苗は、通常の栽培に用いる
ことができ、この種苗から健全かつ均質の植物体に成育
し、良品質のラッキョウの鱗茎を得ることができる。

（発明の効果） この発明は、次のような効果を奏する。

（ａ）　　ラッキョウの種苗を大量かつ安価に、しかし
短期間で増殖することができる。

すなわち、本発明によれば、従来の栄蚤繁殆法（１球よ
り１年間で６〜１０球に分けつする）と較べてはるかに
能率が良く、ラッキョウ種苗を容易に大ｍ増殖すること
が可能である。例えば中程度のラッキョウ１球から１年
間の増殖率は、常法により計算すれば、ラクダ福井在来
種で２万倍もの種苗を得ることができることになる。

（ｂ）　　厳密な管理の下で培養することができるので
、種苗形成の過程で種々の植物病の感染、発病を防止す
ることができる。

（Ｃ）　　この発明による増殖法で得られた種苗は、低
温維持などにより保存が可能であり、種苗出荷の調節が
容易にできる。

（実論例） 以下の実論例によってこの発明をより具体的に説明する
。

実論例１ 下記第１表の組成の成分を、脱イオン水に溶かして１．
ｉｌとし、ｐＨ５，７に調製し、殺菌して生長調節物を
含む第１固体培地を調製した。

第　　　　１　　　　表 硝酸カリウム　　　　　　　　　２４６６■リン酸水素
二アンモニウム　　　３２２〃塩化カルシ「クム・２水
塩　　　　２００〃硫酸マンガン・７水塩　　　　　４
００Ｉ！硫酸第一鉄・７水塩　　　　　　　１５ＩＩＰ
ＪＮａ２ＥＤＴＡ　　　　　　　　　　２０〃硫酸マン
ガン　　　　　　　　　　１０Ｉ？硫酸亜鉛・７水塩　
　　　　　　　　１〃ホウ酸　　　　　　　　　　　　
　　　５ノ？硫酸第−銅・５水塩　　　　　　０．２１
Ｔモリブデン酸ソーダ・２水塩０．１１Ｉ、ヨウ化カリ
ウム　　　　　　　　　　１１Ｉ塩化コバルト・６水塩
　　　　　０．１〃イノシトール　　　　　　　　１０
００Ｉｌビタミン８１　　　　　　　　　　　５ＩＩ塩
酸ピリドキシン　　　　　　　０．５ＩＩニコチン酸　
　　　　　　　　　　　　５　ｎシュークロース　　　
　　　　３０．（１ジエランガム　　　　　　　　　２
．０７！ベンジルアデニン　　　　　　２．２５Ｉｎ９
インド一ル酢Ｍ　　　　　　　　１．７５１！ラクダ福
井在来種のＩ！ｉ茎を１０％次亜塩素酸ソーダ（有効塩
素聞１％）及び７０％エタノールで表面殺菌後、茎頂近
傍組織を０．５〜１Ｍ程度に切り、生長調節物質を含む
第１固体培地５−を含む直径２０ＩｎＩＲ，深さ１２５
ＮＲの試験管に試験管１本あたりラッキョウの組織片１
ｇ置床さけ、２５℃、１６００ルクスの照明下で３０日
間培養し、培養物を同一固体培地２０−を含む直径５０
ｍａ、深さ９０ｍの培養びん中に移殖し、同一条件下で
３０日間培養する。

この培養によって不定芽が分化し、１切片につぎ２０〜
３０個不定芽が分化した塊が得られる。

この塊を滅菌したメスとピンセットで不定芽を分離し、
その１つを２．１５／ｒｔ９／ρのカイネチンと０．１
９１１ｔｇ、ｌのナフタレン酢酸を含む５ｄの生長調節
物質を含む第２固体培地（第−表組成の培地中のベンジ
ルアデニンとインドールｆｉｌを除いた培地組成にカイ
ネチン２．１５ｍ９とナフタレン酸ＩＫ０．１９■を添
加したもの）を含む直径２０履、深さ１２５Ｍの試験管
に移殖する。

これを２５℃、１６００ルクス照明下３０日間培養する
と、根を分化し、大きさどして約１２ａＲの幼植物体を
得る。この幼植物体１つを１０ｍの、固体培地（第−表
組成の培地中のペンジルアデニ゛ンとインドール酢酸を
除いた培地）中に移殖し、２５℃、１６００ルクス照明
下３０日間培養すると鱗茎が肥大し種苗ラッキョウとな
る。

上記操作を１年間に３回繰り返し、１球より２万個の種
苗ラッキョウを得ることができた。

実施例２ 実施例１にＪ３いて、ラクダ福井在来種に変えて、九頭
龍種を用いて、実施例１と同様に行って中程度の鱗茎１
球から１年間で２万個の種苗を作ることができた。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ラッキョウの組織片を、生長調節物質を含有する第
   １固体培地で培養して不定芽を分化させ、次いで分離し
   て得られた不定芽を生長調節物質を含有する第２固体培
   地で培養して根を分化させた幼植物体を得、この幼植物
   体をさらに培養して根と鱗茎を有するラッキョウ種苗を
   形成させることを特徴とするラッキョウ種苗の大量増殖
   法。 ２、第１固体培地に含められる生長調節物質が、ベンジ
   ルアデニン、カイネチン、ナフタレン酢酸、およびイン
   ドール酢酸から選ばれた少なくとも１種からなる、特許
   請求の範囲第１項記載の増殖法。 ３、第２固体培地に含められる生長調節物質が、ベンジ
   ルアデニン、カイネチン、ナフタレン酢酸、インドール
   酢酸およびサイトカイニンから選ばれた少なくとも１種
   からなる、特許請求の範囲第１項記載の増殖法。 ４、第１固体培地および／または第２固体培地がジエラ
   ンガムからなる、特許請求の範囲第１項、第２項または
   第３項記載の増殖法。 ５、培地中のＮ源におけるＮＨ＿４態窒素とＮＯ＿３態
   窒素との比が、１：２〜１：１１である、特許請求の範
   囲第１項、第２項、第３項、または第４項記載の増殖法
   。