JPS63284127A - システインプロテイナーゼ阻害剤の投与による骨疾患の治療方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 多くの骨疾患の生理的機能異常は、骨再吸収量の実質的
増加による骨再吸収及び骨形成のバランス逸脱と関係が
ある。リソソーム酵素は、骨再吸収が副甲状腺ホルモン
によって促進される場合において数種の酸加水分解酵素
の放出が高められることから、骨再吸収機能を発揮する
と考えられている。酵素放出量の同様の増加は、骨再吸
収がプロスタグランジンＥ及び環状アデノシン−リン酸
により促進される場合にも生じる。放出量の減少は。

骨再吸収がカルシトニン、コルヒチン及びコルチゾール
により阻害される場合に見られる。

したがって、リソソーム酵素は、骨基質の非コラーゲン
成分の分解及びコラーゲンの分解に関するキー要素であ
ると考えられる。

コラーゲン分解に対するリソソーム酵素の直接的関与は
、カテプシンＢが不溶性コラーゲンを分解しうるという
事実によって示唆される。　しかも、リソソームブロテ
アーゼは、特異的コラ−ゲナーゼにより大断片に切断さ
れるコラーゲンの分解を完全化する。更にリソソームプ
ロテアーゼはコラーゲン分子間の分子間結合を開裂しか
つそれらをコラ−ゲゼ分解され易くするために必要であ
る。

リソソームシスティンプロテアーゼの数種の阻害剤は、
試験管内で骨再吸収を阻害することが最近になり示され
た［ドレッセ等。

１９８４年、バイオケミカル・アンド・バイオフィジカ
ル・リサーチ・コミュニケーションズ、第１２５巻、第
２号、第４４１−４４７頁（Ｄａｌａｉｓｓｅ　ａｔ　
ａｌ、、　（１９８４）　Ｂｉｏ−ｃｈａｍｉｃａｌ　
ａｎｄ　Ｂｉｏ　ｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ
Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ）　］、　　システイン
プロテイナーゼは、そのうちパパインが最も良く知られ
た例であるが、必須の高反応性チオール基を有しており
、したがってヨウ化アセテート及び安息香酸水銀のよう
なブロック剤で阻害される。

システインプロテア−ゼの類特異的阻害剤として作用す
る可能性がある新しい分類の化合物は、Ｌ−トランス−
エポキシスクシニルペプチドである。１種のかかるペプ
チドは化合物り一トランスーエボキシスクシニルーＬ−
ロイシルアミド（ｅ−グアニジノ）ブタンである。この
化合物は、パパインのチオール基を消失させてパパイン
を阻害し、かつカテプシンＢ、Ｌ及びＨを阻害すること
が示された。１方、セリンプロテア−ゼ及びメタロプロ
テイナーゼは影響を受けなかった。Ｌ−トランス−エポ
キシスクシニル−Ｌ−ロイシルアミド（ｅ−グアニジノ
）ブタンは触媒活性に必要なシスティン残基との化学量
論的反応によってカテブシンＢ及びＬを不活化すること
も明らかにされた［パレットら、バイオケミカル・ジャ
ーナル、１９８２年、第２０１巻、第１８９−１９８頁
（Ｂａｒｒａｔｔ　ａｔａｌ、、　Ｂｉｏｃｈａｍｉｃ
ａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ）　］ｅ　　阻害動力学では、Ｌ
−トランス−エポキシスクシニル−Ｌ−ロイルアミド（
ｅ−グアニジノ）ブタンの作用が基質と競合せず、しか
も結合が活性部位における共有結合反応によって不可逆
的であることも示している。阻害剤は、プロテア−ゼの
特異的部位における適当なペプチド成分（ジペプチド）
に対する阻害剤の親和性に基づき選択することが可能で
ある。

あるエポキシスクシニルアミノ酸誘導体、例えばＬ−ト
ランス−エポキシスクシニル−Ｌ−ロイシルアミド−（
ｅ−グアニジノ）ブタン（Ｅ−６４として知られる）は
、米国特許第４，４１８，０７５号明細書に示されてお
り、その技術は本明細書で引用される。しかしながら、
米国特許第４，４１８，０７５号の化合物は筋ジストロ
フィーの治療に用いられるカルシウム活性化中性チオー
ルプロテアーゼの阻害剤として開示されている。

したがって、経口又は静注投与された場合に有効な血中
カルシウム低下剤たるシステインプロテイナーゼ阻害剤
を提供することが。

本発明の目的である。骨再吸収性増加疾患治療用の経口
活性剤を提供することも１本発明の目的である。早期段
階の悪性高カルシウム血症、ベージェット病又は骨粗鬆
症のような骨軟化性増加疾患を治療することも、本発明
の目的である。

本発明において、動物における骨疾患の治療方法は、有
効量の下記式１の化合物：が前記骨疾患に冒された動物
に投与されることからなる０本発明の化合物は、悪性高
カルシウム血症、ベージェット病又は骨粗髭症のような
骨疾患に対して特に有効である。

本発明で使用される化合物は、エポキシスクシニル−ロ
イシルアミド（４−グアニジノ）ブタン、特にＬ−トラ
ンス異性体（Ｅ−６４として知られる）である。

医薬組成物とする場合、式Ｉの化合物の活性成分は無毒
性医薬担体と混合され、単位用量に分割されるが、各用
量は骨疾患治療量の式Ｉの化合物を含有する。

本発明の治療方法は、骨疾患に冒された動物に所望の薬
学上許容される希釈剤、アジュバント及び担体と一緒に
活性成分として式１の化合物の有効量を投与することか
らなる。

０．１〜５００■の単位用量形化合物が本発明の方法に
従い投与される。かかる単位用量形は、被治療動物の体
重聴当たり１〜５０〇−１好ましくは１０〜５０１Ｉ１
ｇの日量で投与される。経口投与が本発明の実施に際し
て望ましい経路である。

式１の化合物は米国特許第４，４１８，０７５号明細書
に記載の操作に従い製造されるが、この明細書は参考の
ため本明細書に組込まれる。

下記実施例は説明のためだけのものであって、いずれに
しても本発明を限定するものと、考えられるべきではな
い。

実施例　１ カルシウム血 ヒトの悪性体液性高カルシウム血症症候群を非常によく
擬態しているラットモデルは、インソグナら、エンドク
リノロジー、第１１４巻、第８８８−８９６頁、１９８
４年［Ｉｎｓｏｇｎａ　ａｔ　ａｌ、　Ｅｎｄｏｅｒｉ
ｎｏｌｏｇｙ］に記載されていが、このモデルにおいて
は、ライス５００ライデイツヒ腫瘍細胞（Ｒｉｃｅ５０
０Ｌｅｙｄｉｇ　ｃｅｌｌ　ｔｕｍｏｒ）が雄性フィッ
シャー系（Ｆ　１ｓｈｅｒ）ラットに移植されている。

移植後１１〜１４日目に、日月担持動物は著しい高カル
シウム血症となる。骨組織形態調査では、腫瘍群中骨細
胞機能のバランスがくずれ、著しい骨再吸収と著しい骨
形成抑制とを示す。

これらの事実は悪性のヒト体液性高カルシウム血症の場
合とよく似ている。

同モデルを、確立された悪性高カルシウム血症のげっ歯
動物において血中Ｃａ−レベルを低下させる式Ｉの化合
物の効果を調べるために用いた。ラット（１５０〜２０
０ｇ）に１日１回挿管し、第１図に示される如く１０電
、２５■及び８０■／ｋｇ／日の３通りの用量で式１の
化合物を投与した。コントロール動物は化合物投与をう
けなかった。化合物は、すべての動物が高カルシウム血
症になる移植後１０〜１５日目に投日月れた。実験２（
第１表）においては、げっ歯動物に１日／１回挿管して
、腫瘍移植後２日間にわたり式１の化合物４０ｍｇ／ｋ
ｇを投与した。これらの実験は、通常移植後８〜１０日
目に日月するこれら動物の腫瘍誘導性高カルシウム血症
を式Ｉの化合物が予防しろるか否かについて調べるため
に行なわれた。

これらの研究では、式１の化合物が経口投与された場合
に腫瘍誘導性高カルシウム血症を予防（第１表）又は抑
制（第１図）しうろことを示している。

第　　１　　表 ラットの実験的悪性高カルシウム血症 において血中Ｃａ−に　ぼす効果 血中■％　Ｃａ＋ ２　　　１０．１　　±０．４　　１０．５　　ｆ　　
Ｏ，３４９，８±　０．３　　１０．１　　±　０．４
６　　　９．７　　ｆ　　Ｏ，３１０，２±０．２８　
　　９．６　　±０．４　　１０．３　　＝ｔ：　　０
．３１０　　　１０．５　　±　０．３　　　９．８　
　±　０．４１１　　　１０．７　　ｆ　　Ｏ，４１０
，３±０．４１２　　　１１．２　　±０．３　　１０
．１　　±０．３１３　　　１２．５　　±　０．３　
　１０．４　　±　０．４１４　　　１３、ｉ　　±　
０．４　　１０．５　　±　０．３１５　　　１３．３
　　±　０．４　　１０．６　　±　０．４実施例　２ このモデルにおいて、ラットにＣａ’″′欠乏食を与え
、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）放出量の増加と続発性副
甲状腺機能先進症とを生じさせる。この段階において、
血中Ｃａ−の大半は、骨から流出したものである。正常
範囲内に血中カルシウムレベルを維持するため、放出さ
れる副甲状腺ホルモンによって骨再吸収が促進される。

このモデルは、続発性副甲状腺機能先進症ラットにおけ
る式Ｉ　の化合物の効果を調べるために用いられた。ラ
ット（１５０〜２００　ｇ）には７日間にわたりＣａ＋
欠乏食が与えられた。動物（ｎ　−Ｌ　Ｏ）に挿管して
様々な用量の式Ｉの化合物を投与し、血中Ｃａ４″を０
，４，８，１２及び２４時間目にモニターした。最も有
効な用量４０■／−の場合に、１２時間目において２８
．８％という有意の低下を示した（第２表及び第２図）
。

第　　２　表 ラットの実験的続発性副甲状腺機能亢進において　　Ｃ
ａゝに　ぼす 血中■％Ｃａ一 式１の化合物による処理 豊皿　−−Ｌ虹４−−−Ｌ針隻−６０■０　１１．５±
０．５　１１．３±０．４　１１．７±０．６４　１０
．６±０．４　１０．２±０．３　９．８±０．４８　
１０．４±０．５　９．７±０．４　９．５±０．３１
２　１０．２±０．４　９．５±０．３　８．９±０．
４２４　１１．５±０．６　１２．０±０．３　１２．
７±０．４

【図面の簡単な説明】

第１図は、悪性高カルシウム血症モデルにおいて式１の
化合物１０．２５及び８０■／−７日投与時の経時的（
１４日間）血中Ｃａ”レベルに関する結果を示す。 第２図は、続発性副甲状腺機能先進症モデルにおいて式
１の化合物１０．１５及び４０■／ｋｇ／日投与時の経
時的（２４時間）血中Ｃａ−レベルに関する結果を示す
、副甲状腺機能先進症は、悪性高カルシウム血症、ベー
ジェット病及び骨粗鬆症に起因する高カルシウム血症と
関連がある。用量１５及び６０■／ｋｇ／日の場合のデ
ータが更に第２表で示されている。 ｍｑ％Ｃｏ′ 血中Ｃｏ＋＋（ｍｇ％） 手続補正書 昭和６３年２月１５日

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、動物における骨疾患の治療方法であ って、 前記骨疾患に冒された動物に有効量の下記 式の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） を投与することからなる方法。 ２、骨疾患が悪性高カルシウム血症、ペ ージェット病又は骨粗鬆症である、特許請求の範囲第１
   項記載の方法。 ３、化合物が１〜５００ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与さ
   れる、特許請求の範囲第２項記載の方法。 ４、化合物が１０〜５０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与さ
   れる、特許請求の範囲第３項記載の方法。 ５、化合物が経口投与される、特許請求 の範囲第４項記載の方法。