JPS6328264B2 - - Google Patents
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- JPS6328264B2 JPS6328264B2 JP56064018A JP6401881A JPS6328264B2 JP S6328264 B2 JPS6328264 B2 JP S6328264B2 JP 56064018 A JP56064018 A JP 56064018A JP 6401881 A JP6401881 A JP 6401881A JP S6328264 B2 JPS6328264 B2 JP S6328264B2
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/28—Electrolytic cell components
- G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
- G01N27/327—Biochemical electrodes, e.g. electrical or mechanical details for in vitro measurements
- G01N27/3271—Amperometric enzyme electrodes for analytes in body fluids, e.g. glucose in blood
- G01N27/3274—Corrective measures, e.g. error detection, compensation for temperature or hematocrit, calibration
Description
この発明は、酵素電極を使用して試料中の特定
複合成分を電気化学的手法により定量する際に、
バツクグランドとして検出される電流が経時変化
を示す測定系において、酵素電極により検出され
る全反応電流値からバツクグランド電流値の経時
変化を予測して補正することにより、真の反応電
流値を算出するバツクグランド補正方法に関する
ものである。 一般に、酵素電極は、酵素と電極とを組合せ、
一体化した構成としたものであり、選択性、迅速
性および精度等に優れ、測定系の自動化が容易と
なる等の種々の利点および特徴を有する。このた
め、この種の酵素電極は、臨床化学分析や環境分
析等の分野で広く利用されている。また、酵素電
極と、他の試薬（基質や水溶性酵素等）を組合せ
て試料中の特定複合成分を定量する方法も試みら
れており、酵素電極の適用範囲は拡大しつつあ
る。 しかるに、酵素電極を使用して試料中の特定複
合成分を定量する場合、測定系においてバツクグ
ランドとして検出される電流が経時変化を生じる
ため、真の反応電流値を求めるためには、酵素電
極により検出される全反応電流値からバツクグラ
ンド電流値の経時変化を予測して補正する必要が
ある。従つて、このようなバツクグランドの補正
は、一般に正確でしかも再現性よく処理されるこ
とが望まれる。しかしながら、従来この種のバツ
クグランド補正方法に関しては、提案または実施
がなされたとの報告につき未だ確認されていな
い。 そこで、本発明者等は、前述した酵素電極を使
用する試料中の特定複合成分を定量する際に、真
の反応電流を正確かつ再現性よく算出できるバツ
クグランド補正方法を得るべく種々検討並びに試
験を重ねた結果、試料中に特定複合成分を定量す
るのに好適な酵素を添加して経時的に変化する全
反応電流値を測定すると共に、前記酸素を試料中
に添加する直前における反応電流値の経時的変化
から電流変化量を計測し、得られた電流変化量に
基づいて酵素添加後の全反応電流値の測定に至る
までの時間におけるバツクグランド電流値を演算
処理等により求め、全反応電流値を前記バツクグ
ランド電流値で補正することにより、試料中の特
定成分の酵素反応に基づく真の反応電流値を容易
に算出することができることを突き止めた。 すなわち、次の酵素反応を考えるものとする。 但し、Ａ、Ｂ：定量すべき物質 ａ、ｂ：それぞれ物質Ａ、Ｂに作用する
酵素 Ｐ：酵素反応生成物 試料中には、物質A1、Ｂが含まれているもの
とする。また、酵素ａは高分子膜等に固定化し、
これと酵素反応生成物Ｐを酸化あるいは還元する
電極とを組合せ、物質Ａを選択的に定量する酵素
電極を構成する。 このような条件下で、所定量の試料を酵素電極
の反応槽に注入し、一定時間経過後、物質Ｂを物
質A2に変換する酵素ｂを反応槽に注入する。こ
の結果、試料中に内在する物質A1と、酵素ｂの
触媒作用により生成した物質A2とが、固定化さ
れた酵素ａにより反応生成物Ｐを生成し、しかも
この反応により例えば第１図に示すような経時的
に変化する反応電流が測定される。なお、第１図
において、t0は試料を注入した時点、t1は酵素ｂ
を添加した時点、そしてt2は全反応電流値を測定
した時点をそれぞれ示す。また、前記時点t1にお
ける電流値をi1とし、時点t2における電流値をi2
で示す。 第１図において、試料中に内在する物質A1に
基づく反応電流値の特性直線（破線で示す）
は、前記物質A1と酵素ｂの触媒作用により生成
した物質A2とに基づく全反応電流値の特性直線
（実線で示す）から物質Ｂを定量する際にバツ
クグランド電流値として作用する。そこで、試料
に対し酵素ｂを添加する直前（例えば１〜10秒
間）における反応電流値の経時的変化から、時点
t1ｔt2の範囲でバツクグランド電流値すなわ
ち特性直線を予測することが可能であり、この
予測の結果、全反応電流値すなわち特性直線か
ら定量すべき物質Ｂの生成を経時的変化を追跡す
ることができる。 また、前記バツクグランド電流値の予測は、酵
素ｂを添加する時点t1の直前１〜10秒間に測定さ
れる反応電流値から、高分解能Ａ−Ｄ変換器を使
用して１〜10秒の平均値あるいは平均化処理によ
る移動平均値等の１秒間当りの電流変化量（Δi）
を算出し、この電流変化量と酵素ｂの添加後にお
ける反応時間との積から容易に実現することがで
きる。すなわち、全反応電流値を測定した時点t2
におけるバツクグランド電流値iBは、次式で求め
られる。 iB＝i1＋Δi・（t2−t1） ……(3) なお、本発明は、例えば
複合成分を電気化学的手法により定量する際に、
バツクグランドとして検出される電流が経時変化
を示す測定系において、酵素電極により検出され
る全反応電流値からバツクグランド電流値の経時
変化を予測して補正することにより、真の反応電
流値を算出するバツクグランド補正方法に関する
ものである。 一般に、酵素電極は、酵素と電極とを組合せ、
一体化した構成としたものであり、選択性、迅速
性および精度等に優れ、測定系の自動化が容易と
なる等の種々の利点および特徴を有する。このた
め、この種の酵素電極は、臨床化学分析や環境分
析等の分野で広く利用されている。また、酵素電
極と、他の試薬（基質や水溶性酵素等）を組合せ
て試料中の特定複合成分を定量する方法も試みら
れており、酵素電極の適用範囲は拡大しつつあ
る。 しかるに、酵素電極を使用して試料中の特定複
合成分を定量する場合、測定系においてバツクグ
ランドとして検出される電流が経時変化を生じる
ため、真の反応電流値を求めるためには、酵素電
極により検出される全反応電流値からバツクグラ
ンド電流値の経時変化を予測して補正する必要が
ある。従つて、このようなバツクグランドの補正
は、一般に正確でしかも再現性よく処理されるこ
とが望まれる。しかしながら、従来この種のバツ
クグランド補正方法に関しては、提案または実施
がなされたとの報告につき未だ確認されていな
い。 そこで、本発明者等は、前述した酵素電極を使
用する試料中の特定複合成分を定量する際に、真
の反応電流を正確かつ再現性よく算出できるバツ
クグランド補正方法を得るべく種々検討並びに試
験を重ねた結果、試料中に特定複合成分を定量す
るのに好適な酵素を添加して経時的に変化する全
反応電流値を測定すると共に、前記酸素を試料中
に添加する直前における反応電流値の経時的変化
から電流変化量を計測し、得られた電流変化量に
基づいて酵素添加後の全反応電流値の測定に至る
までの時間におけるバツクグランド電流値を演算
処理等により求め、全反応電流値を前記バツクグ
ランド電流値で補正することにより、試料中の特
定成分の酵素反応に基づく真の反応電流値を容易
に算出することができることを突き止めた。 すなわち、次の酵素反応を考えるものとする。 但し、Ａ、Ｂ：定量すべき物質 ａ、ｂ：それぞれ物質Ａ、Ｂに作用する
酵素 Ｐ：酵素反応生成物 試料中には、物質A1、Ｂが含まれているもの
とする。また、酵素ａは高分子膜等に固定化し、
これと酵素反応生成物Ｐを酸化あるいは還元する
電極とを組合せ、物質Ａを選択的に定量する酵素
電極を構成する。 このような条件下で、所定量の試料を酵素電極
の反応槽に注入し、一定時間経過後、物質Ｂを物
質A2に変換する酵素ｂを反応槽に注入する。こ
の結果、試料中に内在する物質A1と、酵素ｂの
触媒作用により生成した物質A2とが、固定化さ
れた酵素ａにより反応生成物Ｐを生成し、しかも
この反応により例えば第１図に示すような経時的
に変化する反応電流が測定される。なお、第１図
において、t0は試料を注入した時点、t1は酵素ｂ
を添加した時点、そしてt2は全反応電流値を測定
した時点をそれぞれ示す。また、前記時点t1にお
ける電流値をi1とし、時点t2における電流値をi2
で示す。 第１図において、試料中に内在する物質A1に
基づく反応電流値の特性直線（破線で示す）
は、前記物質A1と酵素ｂの触媒作用により生成
した物質A2とに基づく全反応電流値の特性直線
（実線で示す）から物質Ｂを定量する際にバツ
クグランド電流値として作用する。そこで、試料
に対し酵素ｂを添加する直前（例えば１〜10秒
間）における反応電流値の経時的変化から、時点
t1ｔt2の範囲でバツクグランド電流値すなわ
ち特性直線を予測することが可能であり、この
予測の結果、全反応電流値すなわち特性直線か
ら定量すべき物質Ｂの生成を経時的変化を追跡す
ることができる。 また、前記バツクグランド電流値の予測は、酵
素ｂを添加する時点t1の直前１〜10秒間に測定さ
れる反応電流値から、高分解能Ａ−Ｄ変換器を使
用して１〜10秒の平均値あるいは平均化処理によ
る移動平均値等の１秒間当りの電流変化量（Δi）
を算出し、この電流変化量と酵素ｂの添加後にお
ける反応時間との積から容易に実現することがで
きる。すなわち、全反応電流値を測定した時点t2
におけるバツクグランド電流値iBは、次式で求め
られる。 iB＝i1＋Δi・（t2−t1） ……(3) なお、本発明は、例えば
【式】のよ
うな多段階の酵素反応系にも適用することができ
ることは勿論である。 従つて、本発明の目的は、試料中の複合成分を
酵素電極を使用して定量する際に、定量すべき特
定成分の真の反応電流を高精度に算出することが
できる酵素電極を使用する複合成分の定量におけ
るバツクグランド補正方法を提供するにある。 前記の目的を達成するため、本発明において
は、特定物質と酵素反応して所定の生成物を得る
酵素を固定化し、この固定化酵素と前記酵素反応
生成物を酸化あるいは還元する電極とを組合せ
て、前記特定物質を選択的に定量するよう構成し
た酵素電極を使用し、試料中に他の特定成分を前
記特定物質に変換する酵素反応を行う酵素を添加
し、前記酵素電極で全反応電流値を測定すること
により試料中の特定複合成分を定量する方法にお
いて、 試料中に酵素を添加する直前の反応電流値から
反応電流変化量を計測し、この反応電流変化量に
基づいて全反応電流値の測定時におけるバツクグ
ランド電流値を算出し、全反応電流値のバツクグ
ランド補正を行うことを特徴とする。 前記のバツクグランド補正方法において、反応
電流変化量は、試料中に酵素を添加する直前の１
〜10秒間における反応電流の１秒間当りの変化量
として計測すれば好適である。 また、補正すべきバツクグランド電流値は、反
応電流変化量と、試料中に酵素を添加した時から
全反応電流値を測定する時までに要した時間との
積で求めることができる。 さらに、測定された全反応電流値のバツクグラ
ンド補正は、全反応電流値からバツクグランド電
流値を差引くことによつて達成することができ
る。 次に、本発明に係る酵素電極を使用する複合成
分の定量におけるバツクグランド補正方法につ
き、実施例を挙げて説明する。 実施例 １ グルコースの存在下でマルトースの定量を試み
た。測定に使用した試料と試薬は次の通りであ
る。 グルコース150mg／dlとマルトース50mg／dl
を含む試料 α−グルコシダーゼ10mg／mlの酵素液 また、適用される酵素反応系は次の通りであ
る。 グルコース＋O2グルコースオキシダーゼ ――――――――――――→ グルコ
ン酸＋H2O2 マルトースα−グルコシダーゼ ――――――――――――→ ２・グルコース さらに、固定化グルコースオキシダーゼ膜と過
酸化水素電極とを組合せて構成した酵素電極を使
用し、この酵素電極を30〜37℃に保持されたPH７
の燐酸塩緩衝液で満たした反応槽（容積0.4ml）
に浸漬し、過酸化水素の指示電極（白金電極）と
対極（銀電極）との間に＋0.6〜0.8Vに範囲の電
位差となるよう一定電圧を印加した。 このような条件において、反応槽に試料を20μ
注入し、１分後酵素後20μを添加した。この
場合の酵素電極による反応電流の経時変化は、電
流−電圧変換器を使用して測定した結果を示せ
ば、第２図に示す通りである。第２図からも明ら
かな通り、酵素液を添加してから１分後における
全反応電流測定時の出力測定値は18ｍＶの変化を
示した。 そこで、酵素液を添加する直前１〜10秒間の測
定値を高速高分解能Ａ−Ｄ変換器を使用して１秒
間当りの変化量（Δv）を計測した結果、Δv＝0.1
ｍＶ／secが得られた。前記変化量Δvに基づき、
全反応電流測定時までのバツクグランド値を算出
すると６ｍＶとなつた。従つて、前記バツクグラ
ンド値（６ｍＶ）に基づき、全反応電流測定時の
出力測定値（（18ｍＶ）を補正することにより、
試料中のマルトースによる真の反応電流に対応す
る測定値は、12ｍＶとなることが確認された。 さらに、試料中のマルトースの濃度を変えて前
記と同様の測定を試みたところ、マルトースの濃
度とバツクグランド補正後の出力との間には、第
３図に示すような直線関係が認められ、このこと
から未知濃度の試料中のマルトースの定量が可能
であることが確認された。 実施例 ２ グルコースの存在下でα−アミラーゼの定量を
試みた。測定に使用した試料と試薬は次の通りで
ある。 グルコース217mg／dlとα−アミラーゼ
281IU／の血清を含む試料 マルトペンタオース100mg／mlの基質 α−グルコシダーゼ10mg／mlの酵素液 また適用される酵素反応系は次の通りである。 マルトペンタオースα−アミラーゼ ――――――――→ マルトース＋マルトトリオース マルトースα−グルコシダーゼ ――――――――――→ ２・グルコース マルトトリオースα−グルコシダーゼ ――――――――――→ ３・グルコース グルコース＋O2グルコースオキシダーゼ ――――――――――――→ グルコン酸＋H2O2 前記実施例と同一構成の酵素電極を同一条件に
設定して使用する。 このような条件において、まず所定の時点t1で
反応槽に基質20μを添加し、次いで30秒後（時
点t2）に試料20μを注入し、その後約１分後
（時点t3）に酵素液20μを添加し、ポーラログラ
フ法でグルコースの生成を追跡した結果、第４図
に示す特性曲線が得られた。第４図から明らかな
通り、酵素液を添加してから約１分後（t4）にお
ける全反応電流値は約2.78nAの変化を示した。 そこで、酵素液を添加する直前１〜10秒間の電
流値を高速高分解能Ａ−Ｄ変換器を使用して１秒
間当りの電流変化量（Δi）を計測した結果、 Δi＝0.0138nA／secが得られた。前記電流変化
量Δiに基づき、全反応電流測定時（t4）までのバ
ツクグランド電流値を算出すると約0.83nAとな
つた。従つて、前記バツクグランド電流値（約
0.83nA）に基づき、全反応電流測定時（t4）の電
流測定値（約2.78nA）を補正することにより、
試料中のα−アミラーゼによる真の反応電流は約
1.95nAとなることが確認された。 前述した実施例から明らかなように、本発明に
よれば、バツクグランド電流の予測に際し、目的
とする酵素反応が開始する直前の１〜10秒間の範
囲で１秒間当りの電流変化量を平均値もしくは移
動平均値等により計測するようにしたため、目的
とする特定物質の酵素反応に基づく真の反応電流
値を正確にしかも再現性よく算出することができ
る。 以上の説明においては、目的とする特定物質
（基質および酵素）の定量に過酸化水素をアンペ
ロメトリー法により検出する方法に関して述べた
が、本発明は酵素を検出する酵素電極にも適用す
ることができる。また、酵素反応生成物をイオン
選択性電極、ガラス電極等を利用して定量するポ
テンシヨメトリー法にも応用することが可能であ
る。 酵素電極および基質もしくは酵素を使用して本
発明方法を適用する分析法は、臨床化学や環境計
測分野のみならず、化学プロセス制御分野への適
用も可能となり、今後の酵素電極の応用範囲の拡
大に寄与する効果は極めて大きい。 以上、本発明の好適な実施例について説明した
が、本発明の精神を逸脱しない範囲内において
種々の設計変更をなし得ることは勿論である。
ることは勿論である。 従つて、本発明の目的は、試料中の複合成分を
酵素電極を使用して定量する際に、定量すべき特
定成分の真の反応電流を高精度に算出することが
できる酵素電極を使用する複合成分の定量におけ
るバツクグランド補正方法を提供するにある。 前記の目的を達成するため、本発明において
は、特定物質と酵素反応して所定の生成物を得る
酵素を固定化し、この固定化酵素と前記酵素反応
生成物を酸化あるいは還元する電極とを組合せ
て、前記特定物質を選択的に定量するよう構成し
た酵素電極を使用し、試料中に他の特定成分を前
記特定物質に変換する酵素反応を行う酵素を添加
し、前記酵素電極で全反応電流値を測定すること
により試料中の特定複合成分を定量する方法にお
いて、 試料中に酵素を添加する直前の反応電流値から
反応電流変化量を計測し、この反応電流変化量に
基づいて全反応電流値の測定時におけるバツクグ
ランド電流値を算出し、全反応電流値のバツクグ
ランド補正を行うことを特徴とする。 前記のバツクグランド補正方法において、反応
電流変化量は、試料中に酵素を添加する直前の１
〜10秒間における反応電流の１秒間当りの変化量
として計測すれば好適である。 また、補正すべきバツクグランド電流値は、反
応電流変化量と、試料中に酵素を添加した時から
全反応電流値を測定する時までに要した時間との
積で求めることができる。 さらに、測定された全反応電流値のバツクグラ
ンド補正は、全反応電流値からバツクグランド電
流値を差引くことによつて達成することができ
る。 次に、本発明に係る酵素電極を使用する複合成
分の定量におけるバツクグランド補正方法につ
き、実施例を挙げて説明する。 実施例 １ グルコースの存在下でマルトースの定量を試み
た。測定に使用した試料と試薬は次の通りであ
る。 グルコース150mg／dlとマルトース50mg／dl
を含む試料 α−グルコシダーゼ10mg／mlの酵素液 また、適用される酵素反応系は次の通りであ
る。 グルコース＋O2グルコースオキシダーゼ ――――――――――――→ グルコ
ン酸＋H2O2 マルトースα−グルコシダーゼ ――――――――――――→ ２・グルコース さらに、固定化グルコースオキシダーゼ膜と過
酸化水素電極とを組合せて構成した酵素電極を使
用し、この酵素電極を30〜37℃に保持されたPH７
の燐酸塩緩衝液で満たした反応槽（容積0.4ml）
に浸漬し、過酸化水素の指示電極（白金電極）と
対極（銀電極）との間に＋0.6〜0.8Vに範囲の電
位差となるよう一定電圧を印加した。 このような条件において、反応槽に試料を20μ
注入し、１分後酵素後20μを添加した。この
場合の酵素電極による反応電流の経時変化は、電
流−電圧変換器を使用して測定した結果を示せ
ば、第２図に示す通りである。第２図からも明ら
かな通り、酵素液を添加してから１分後における
全反応電流測定時の出力測定値は18ｍＶの変化を
示した。 そこで、酵素液を添加する直前１〜10秒間の測
定値を高速高分解能Ａ−Ｄ変換器を使用して１秒
間当りの変化量（Δv）を計測した結果、Δv＝0.1
ｍＶ／secが得られた。前記変化量Δvに基づき、
全反応電流測定時までのバツクグランド値を算出
すると６ｍＶとなつた。従つて、前記バツクグラ
ンド値（６ｍＶ）に基づき、全反応電流測定時の
出力測定値（（18ｍＶ）を補正することにより、
試料中のマルトースによる真の反応電流に対応す
る測定値は、12ｍＶとなることが確認された。 さらに、試料中のマルトースの濃度を変えて前
記と同様の測定を試みたところ、マルトースの濃
度とバツクグランド補正後の出力との間には、第
３図に示すような直線関係が認められ、このこと
から未知濃度の試料中のマルトースの定量が可能
であることが確認された。 実施例 ２ グルコースの存在下でα−アミラーゼの定量を
試みた。測定に使用した試料と試薬は次の通りで
ある。 グルコース217mg／dlとα−アミラーゼ
281IU／の血清を含む試料 マルトペンタオース100mg／mlの基質 α−グルコシダーゼ10mg／mlの酵素液 また適用される酵素反応系は次の通りである。 マルトペンタオースα−アミラーゼ ――――――――→ マルトース＋マルトトリオース マルトースα−グルコシダーゼ ――――――――――→ ２・グルコース マルトトリオースα−グルコシダーゼ ――――――――――→ ３・グルコース グルコース＋O2グルコースオキシダーゼ ――――――――――――→ グルコン酸＋H2O2 前記実施例と同一構成の酵素電極を同一条件に
設定して使用する。 このような条件において、まず所定の時点t1で
反応槽に基質20μを添加し、次いで30秒後（時
点t2）に試料20μを注入し、その後約１分後
（時点t3）に酵素液20μを添加し、ポーラログラ
フ法でグルコースの生成を追跡した結果、第４図
に示す特性曲線が得られた。第４図から明らかな
通り、酵素液を添加してから約１分後（t4）にお
ける全反応電流値は約2.78nAの変化を示した。 そこで、酵素液を添加する直前１〜10秒間の電
流値を高速高分解能Ａ−Ｄ変換器を使用して１秒
間当りの電流変化量（Δi）を計測した結果、 Δi＝0.0138nA／secが得られた。前記電流変化
量Δiに基づき、全反応電流測定時（t4）までのバ
ツクグランド電流値を算出すると約0.83nAとな
つた。従つて、前記バツクグランド電流値（約
0.83nA）に基づき、全反応電流測定時（t4）の電
流測定値（約2.78nA）を補正することにより、
試料中のα−アミラーゼによる真の反応電流は約
1.95nAとなることが確認された。 前述した実施例から明らかなように、本発明に
よれば、バツクグランド電流の予測に際し、目的
とする酵素反応が開始する直前の１〜10秒間の範
囲で１秒間当りの電流変化量を平均値もしくは移
動平均値等により計測するようにしたため、目的
とする特定物質の酵素反応に基づく真の反応電流
値を正確にしかも再現性よく算出することができ
る。 以上の説明においては、目的とする特定物質
（基質および酵素）の定量に過酸化水素をアンペ
ロメトリー法により検出する方法に関して述べた
が、本発明は酵素を検出する酵素電極にも適用す
ることができる。また、酵素反応生成物をイオン
選択性電極、ガラス電極等を利用して定量するポ
テンシヨメトリー法にも応用することが可能であ
る。 酵素電極および基質もしくは酵素を使用して本
発明方法を適用する分析法は、臨床化学や環境計
測分野のみならず、化学プロセス制御分野への適
用も可能となり、今後の酵素電極の応用範囲の拡
大に寄与する効果は極めて大きい。 以上、本発明の好適な実施例について説明した
が、本発明の精神を逸脱しない範囲内において
種々の設計変更をなし得ることは勿論である。
第１図は本発明方法の原理を示す一般的な酵素
反応に基づく電流−時間特性曲線図、第２図はマ
ルトースの定量を行つた場合のグルコース生成状
態を示す電圧−時間特性曲線図、第３図はマルト
ース濃度とグルコース生成速度との関係を示す特
性線図、第４図はα−アミラーゼの定量を行つた
場合のグルコース生成状態を示す電圧−時間特性
曲線図である。
反応に基づく電流−時間特性曲線図、第２図はマ
ルトースの定量を行つた場合のグルコース生成状
態を示す電圧−時間特性曲線図、第３図はマルト
ース濃度とグルコース生成速度との関係を示す特
性線図、第４図はα−アミラーゼの定量を行つた
場合のグルコース生成状態を示す電圧−時間特性
曲線図である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 特定物質と酵素反応して所定の生成物を得る
酵素を固定化し、この固定化酵素と前記酵素反応
生成物を酸化あるいは還元する電極とを組合せ
て、前記特定物質を選択的に定量するよう構成し
た酵素電極を使用し、試料中に他の特定成分を前
記特定物質に変換する酵素反応を行う酵素を添加
し、前記酵素電極で全反応電流値を測定すること
により試料中の特定複合成分を定量する方法にお
いて、 試料中に酵素を添加する直前の反応電流値から
反応電流変化量を計測し、この反応電流変化量に
基づいて全反応電流値の測定時におけるバツクグ
ランド電流値を算出し、全反応電流値のバツクグ
ランド補正を行うことを特徴とする酵素電極を使
用する複合成分の定量におけるバツクグランド補
正方法。 ２ 特許請求の範囲第１項記載のバツクグランド
補正方法において、反応電流変化量は、試料中に
酵素を添加する直前の１〜10秒間における反応電
流の１秒間当りの変化量として計測することを特
徴とする酵素電極を使用する複合成分の定量にお
けるバツクグランド補正方法。 ３ 特許請求の範囲第１項または第２項に記載の
バツクグランド補正方法において、補正すべきバ
ツクグランド電流値は、反応電流変化量と、試料
中に酸素を添加した時から全反応電流値を測定す
る時までに要した時間との積で求めてなる酵素電
極を使用する複合成分の定量におけるバツクグラ
ンド補正方法。 ４ 特許請求の範囲第１項乃至第３項のいずれか
に記載のバツクグランド補正方法において、測定
された全反応電流値のバツクグランド補正は、全
反応電流値からバツクグランド電流値を差引くこ
とからなる酵素電極を使用する複合成分の定量に
おけるバツクグランド補正方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56064018A JPS57179655A (en) | 1981-04-30 | 1981-04-30 | Compensating method for background in quantification of composite constituent wherein enzyme electrode is used |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56064018A JPS57179655A (en) | 1981-04-30 | 1981-04-30 | Compensating method for background in quantification of composite constituent wherein enzyme electrode is used |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS57179655A JPS57179655A (en) | 1982-11-05 |
| JPS6328264B2 true JPS6328264B2 (ja) | 1988-06-07 |
Family
ID=13245995
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56064018A Granted JPS57179655A (en) | 1981-04-30 | 1981-04-30 | Compensating method for background in quantification of composite constituent wherein enzyme electrode is used |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS57179655A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2020061080A1 (en) * | 2018-09-18 | 2020-03-26 | Texas Instruments Incorporated | Methods and apparatus to improve power converter on-time generation |
| US11177738B1 (en) | 2020-07-31 | 2021-11-16 | Texas Instruments Incorporated | Digital on-time generation for buck converter |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62168045A (ja) * | 1986-01-18 | 1987-07-24 | Matsushita Electric Works Ltd | 成分測定法 |
| JPH06313760A (ja) * | 1993-04-30 | 1994-11-08 | Kyoto Daiichi Kagaku:Kk | 酵素電極による検体測定方法 |
| US5620579A (en) * | 1995-05-05 | 1997-04-15 | Bayer Corporation | Apparatus for reduction of bias in amperometric sensors |
-
1981
- 1981-04-30 JP JP56064018A patent/JPS57179655A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2020061080A1 (en) * | 2018-09-18 | 2020-03-26 | Texas Instruments Incorporated | Methods and apparatus to improve power converter on-time generation |
| US11177738B1 (en) | 2020-07-31 | 2021-11-16 | Texas Instruments Incorporated | Digital on-time generation for buck converter |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS57179655A (en) | 1982-11-05 |
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