JPS63279170A - イムノアッセイ装置 - Google Patents
イムノアッセイ装置Info
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- JPS63279170A JPS63279170A JP62113580A JP11358087A JPS63279170A JP S63279170 A JPS63279170 A JP S63279170A JP 62113580 A JP62113580 A JP 62113580A JP 11358087 A JP11358087 A JP 11358087A JP S63279170 A JPS63279170 A JP S63279170A
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Landscapes
- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Electric Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
[産業上の利用分野]
本発明は、イムノアッセイ装置、特に反応用の電気泳動
膜を用いたイムノアッセイ装置に関する。
膜を用いたイムノアッセイ装置に関する。
[従来の技術]
膜状の担体に抗体を固体化し、この痕の面に垂直に電位
勾配をかけることにより、この方向に被測定試料中の抗
原を電気泳動によって移動せしめ、上記固定化された抗
体と抗原抗体反応を起こさせて固定させ、さらに、上記
過程で固定化させた抗原に標識された抗体を電気泳動に
よって移動せしめて反応させるか、又は膜状の担体に固
定化された抗体の未反応部に標識された抗原を電気泳動
によって移動せしめて反応させるかのいずれかの反応に
より膜状の担体に標識物を固定化し、この標識物の濃度
を測定することにより、試料中の抗原の濃度を測定する
方法が提案されている(特開昭6O−57257)。
勾配をかけることにより、この方向に被測定試料中の抗
原を電気泳動によって移動せしめ、上記固定化された抗
体と抗原抗体反応を起こさせて固定させ、さらに、上記
過程で固定化させた抗原に標識された抗体を電気泳動に
よって移動せしめて反応させるか、又は膜状の担体に固
定化された抗体の未反応部に標識された抗原を電気泳動
によって移動せしめて反応させるかのいずれかの反応に
より膜状の担体に標識物を固定化し、この標識物の濃度
を測定することにより、試料中の抗原の濃度を測定する
方法が提案されている(特開昭6O−57257)。
しかし、このイムノアッセイ法は、測定時間の短縮、装
置化が容易なと多くの効果を有する方法であるが、特に
これを装置化した時、測定結果の再現性、精度の面から
みて、電気泳動部にさらなる配慮をすることが望ましい
。
置化が容易なと多くの効果を有する方法であるが、特に
これを装置化した時、測定結果の再現性、精度の面から
みて、電気泳動部にさらなる配慮をすることが望ましい
。
〔発明が解決しようとする問題点]
上記従来技術は、電気泳動用担体が脆弱であるにもかか
わらず、取扱い中に生じる欠陥、亀裂等による影響につ
いて配慮がなされておらず、測定再現性、精度を低下さ
せるという問題があった。
わらず、取扱い中に生じる欠陥、亀裂等による影響につ
いて配慮がなされておらず、測定再現性、精度を低下さ
せるという問題があった。
本発明の目的は、測定に際し、電気泳動用担体の欠陥、
亀裂等の有無を判断し、使用に適する電気泳動用担体の
みを用いることにより、測定再現性及び精度を向上させ
たイムノアッセイ装置を提供することにある。
亀裂等の有無を判断し、使用に適する電気泳動用担体の
みを用いることにより、測定再現性及び精度を向上させ
たイムノアッセイ装置を提供することにある。
[問題を解決するための手段]
上記目的は、使用に際し、電気泳動用担体の電気的な抵
抗値を測定することにより達成される。
抗値を測定することにより達成される。
[作用]
欠陥のない正常な電気泳動担体は、同一の使用条件下で
は、はぼ一定の抵抗値を有する。一方、欠陥または亀裂
部分での抵抗値は小さいので、これを有する電気泳動用
担体は、正常な電気泳動担体に比較して、その抵抗値は
減少する。したがって、電気泳動担体の電気的な抵抗値
を測定し、正常な電気泳動担体に対する抵抗値と比較す
ることによって欠陥または亀裂の有無を検出できる6通
常の電気泳動による反応過程の直前に、抵抗値測定を行
い、欠陥または亀裂等を有すると推定される担体の使用
を中止すれば、誤って欠陥等を有する電気泳動担体を使
用することによる影響を除外することができる。なお、
抵抗値は電気泳動用担体に印加した電圧と、電気泳動用
担体に流れた電流値によっても算出できる。
は、はぼ一定の抵抗値を有する。一方、欠陥または亀裂
部分での抵抗値は小さいので、これを有する電気泳動用
担体は、正常な電気泳動担体に比較して、その抵抗値は
減少する。したがって、電気泳動担体の電気的な抵抗値
を測定し、正常な電気泳動担体に対する抵抗値と比較す
ることによって欠陥または亀裂の有無を検出できる6通
常の電気泳動による反応過程の直前に、抵抗値測定を行
い、欠陥または亀裂等を有すると推定される担体の使用
を中止すれば、誤って欠陥等を有する電気泳動担体を使
用することによる影響を除外することができる。なお、
抵抗値は電気泳動用担体に印加した電圧と、電気泳動用
担体に流れた電流値によっても算出できる。
[実施例コ
以下、本発明の一実施例を第1図により説明する。
測定したい成分に対する抗体を固定化させたポリアクリ
ルアミドゲルである抗体固定化膜1の上下に設けられた
上部電解槽2及び下部電解槽3に、それぞれ上部電解液
注入ノズル4、及び下部電解液注入口5を介してトリス
・グリシン緩衝液を注ぎ込み、上部電解液6及び下部電
解液7とする。
ルアミドゲルである抗体固定化膜1の上下に設けられた
上部電解槽2及び下部電解槽3に、それぞれ上部電解液
注入ノズル4、及び下部電解液注入口5を介してトリス
・グリシン緩衝液を注ぎ込み、上部電解液6及び下部電
解液7とする。
次に直流電源8を用いて白金電極9及び10の間に直流
電圧を電極9が陰極、電極10が陽極となるように印加
する。この時抗体固定化膜1を通して流れる電流値及び
印加した電圧値をそれぞれ電流計11及び電圧計12を
用いて測定する。測定値により抵抗値を算出し、正常な
抗体固定化膜に対する値の範囲を超えて低い又は高い値
を示す抗体固定化膜は使用を中止し、正常な抗体固定化
膜に対する値と同等な値を示すもののみについて以下の
測定操作を続行させる。
電圧を電極9が陰極、電極10が陽極となるように印加
する。この時抗体固定化膜1を通して流れる電流値及び
印加した電圧値をそれぞれ電流計11及び電圧計12を
用いて測定する。測定値により抵抗値を算出し、正常な
抗体固定化膜に対する値の範囲を超えて低い又は高い値
を示す抗体固定化膜は使用を中止し、正常な抗体固定化
膜に対する値と同等な値を示すもののみについて以下の
測定操作を続行させる。
測定しようとする試料にショ糖溶液を1:1の割合で添
加し、比重を増した液20μQを試料注入ノズル13を
介して、抗体固定化膜上に注ぐ。
加し、比重を増した液20μQを試料注入ノズル13を
介して、抗体固定化膜上に注ぐ。
次いで、直流電源9を用いて、上記と同様な方法で電流
電圧を印加する。この時試料中の各成分が抗体固定化膜
中に移動し、測定成分のみが膜中に捕捉される。他の成
分は抗体固定化膜を通過し下部電解液7へ移動する。
電圧を印加する。この時試料中の各成分が抗体固定化膜
中に移動し、測定成分のみが膜中に捕捉される。他の成
分は抗体固定化膜を通過し下部電解液7へ移動する。
次にルミノールを標識した抗体溶液(20%の割合でシ
ョ糖を含む溶液)10μQをa識抗体注入ノズル14を
用いて抗体固定化膜1上に静かに注入し、再び直流電圧
を印加する。この時、先に抗体固定化膜1上に捕捉され
た測定成分の量に比例した量のルミノール標識抗体が膜
1に残され、過剰のルミノール標識抗体は下部電解液7
に移動する。
ョ糖を含む溶液)10μQをa識抗体注入ノズル14を
用いて抗体固定化膜1上に静かに注入し、再び直流電圧
を印加する。この時、先に抗体固定化膜1上に捕捉され
た測定成分の量に比例した量のルミノール標識抗体が膜
1に残され、過剰のルミノール標識抗体は下部電解液7
に移動する。
次に上部電解液6を吸引ノズル15を用いて上部電解槽
2から排除し、下部電解液7も下部電解液排出口16を
用いて下部電解槽3から排出する。
2から排除し、下部電解液7も下部電解液排出口16を
用いて下部電解槽3から排出する。
発光試薬注入ノズル17を用いて、O,1Mの過酸化水
素水溶液100μQと0.IN水酸化ナトリウム溶液に
lomMの濃度で次亜塩素酸ナトリウムを含む溶液20
0μQを膜1の上に注入しその時の発光量を石英ガラス
窓18を通してその下に受光部19を配置したフォトン
カウンタ20で測定する。
素水溶液100μQと0.IN水酸化ナトリウム溶液に
lomMの濃度で次亜塩素酸ナトリウムを含む溶液20
0μQを膜1の上に注入しその時の発光量を石英ガラス
窓18を通してその下に受光部19を配置したフォトン
カウンタ20で測定する。
測定対象としてヒト免疫グロブリンGを選び、直流電圧
の印加を、印加電圧50Vとした時の結果を示す。正常
な抗体固定体膜の抵抗値は1本使用条件下で17±2に
Ωであった。この値を基準にそれぞれの電流、電圧測定
値から抗体固定膜の適否を判断したところ約7%の抗体
固定化膜が使用不適と判断された。使用不適な抗体固定
化膜を使用しないで、同一試料を本装置で20回測定し
た時の試料中のヒト免疫グロブリン濃度は、3.3xl
O’ g/Qで標準偏差は0.23 X10′″g /
Qであった。一方抗体固定化膜の抵抗値測定により使
用適否の判断を行わずに、すべての膜を用いて測定する
と、同一試料に対して平均値3.0X10− g/Q標
準偏差0.52 x 10−g/ρを得た。このように
抗体固定化膜の選別を行うことにより、大幅に精度が向
上した測定結果を得ることができた。
の印加を、印加電圧50Vとした時の結果を示す。正常
な抗体固定体膜の抵抗値は1本使用条件下で17±2に
Ωであった。この値を基準にそれぞれの電流、電圧測定
値から抗体固定膜の適否を判断したところ約7%の抗体
固定化膜が使用不適と判断された。使用不適な抗体固定
化膜を使用しないで、同一試料を本装置で20回測定し
た時の試料中のヒト免疫グロブリン濃度は、3.3xl
O’ g/Qで標準偏差は0.23 X10′″g /
Qであった。一方抗体固定化膜の抵抗値測定により使
用適否の判断を行わずに、すべての膜を用いて測定する
と、同一試料に対して平均値3.0X10− g/Q標
準偏差0.52 x 10−g/ρを得た。このように
抗体固定化膜の選別を行うことにより、大幅に精度が向
上した測定結果を得ることができた。
なお、抗体固定化膜の選別において、電流値、電圧値を
測定しても良いし、抵抗値を直接測定しても良い。また
、選別の判断は、適当な電気回路部分またはパーソナル
コンピュータにより行なわせ、表示素子または表示装置
に選別結果を表示させるようにしても良い。
測定しても良いし、抵抗値を直接測定しても良い。また
、選別の判断は、適当な電気回路部分またはパーソナル
コンピュータにより行なわせ、表示素子または表示装置
に選別結果を表示させるようにしても良い。
[発明の効果]
以上で説明したように、本発明は精度の高い測定結果が
得られるという効果を有する。
得られるという効果を有する。
第1図は本発明の一実施例を示す概略図である。
1・・・抗体固定化膜、2・・・上部電解槽、3・・・
下部電解槽、4・・・上部電解液注入ノズル、5・・・
下部電解液注入口、6・・・上部電解液、7・・・下部
電解液、8・・・直流電源、9・・・白金電極、10・
・・白金電極、11・・・電流計、12・・・電圧計、
13・・・試料注入ノズル、14・・・標識抗体注入ノ
ズル、15・・・吸引ノズル、16・・・下部電解液排
出口、17・・・発光試薬注入ノズル、18・・・石英
ガラス窓、19・・・受光部、20・・・フォトンカウ
ンタ。
下部電解槽、4・・・上部電解液注入ノズル、5・・・
下部電解液注入口、6・・・上部電解液、7・・・下部
電解液、8・・・直流電源、9・・・白金電極、10・
・・白金電極、11・・・電流計、12・・・電圧計、
13・・・試料注入ノズル、14・・・標識抗体注入ノ
ズル、15・・・吸引ノズル、16・・・下部電解液排
出口、17・・・発光試薬注入ノズル、18・・・石英
ガラス窓、19・・・受光部、20・・・フォトンカウ
ンタ。
Claims (1)
- 1、上部電解槽、下部電解槽、両者の間に配置された実
質的に全域に抗体を固定化した電気泳動用膜、上記上部
電解槽中に配置された上部電極及び上記下部電解槽中に
配置された下部電極よりなるイムノアッセイ装置におい
て、上記電気泳動用膜に印加されている電圧及び電流、
または抵抗値を検出する装置を有することを特徴とする
イムノアッセイ装置。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP62113580A JPH0641951B2 (ja) | 1987-05-12 | 1987-05-12 | イムノアッセイ装置 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP62113580A JPH0641951B2 (ja) | 1987-05-12 | 1987-05-12 | イムノアッセイ装置 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS63279170A true JPS63279170A (ja) | 1988-11-16 |
JPH0641951B2 JPH0641951B2 (ja) | 1994-06-01 |
Family
ID=14615829
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP62113580A Expired - Lifetime JPH0641951B2 (ja) | 1987-05-12 | 1987-05-12 | イムノアッセイ装置 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0641951B2 (ja) |
-
1987
- 1987-05-12 JP JP62113580A patent/JPH0641951B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH0641951B2 (ja) | 1994-06-01 |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
EXPY | Cancellation because of completion of term |