JPS63263440A - 低温顕微鏡観察における生物試料の植氷方法 - Google Patents
低温顕微鏡観察における生物試料の植氷方法Info
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- JPS63263440A JPS63263440A JP62098193A JP9819387A JPS63263440A JP S63263440 A JPS63263440 A JP S63263440A JP 62098193 A JP62098193 A JP 62098193A JP 9819387 A JP9819387 A JP 9819387A JP S63263440 A JPS63263440 A JP S63263440A
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
低温顕微鏡観察において、生物試料の凍結過程を観察す
る為に、これを凍結する際の植木方法に関する。
る為に、これを凍結する際の植木方法に関する。
（従来の技術）
技術的背景としては。
近年、特に生物組織や、生物細胞を保存する為の凍結技
術の研究が盛んに行われ、バイオテクノロジーや医学分
野の進歩に大きく貢献してきている。
術の研究が盛んに行われ、バイオテクノロジーや医学分
野の進歩に大きく貢献してきている。
（精子、受精卵、血球、骨髄細胞・その他）これらの凍
結技術研究の上で、凍結用のチャンバーを備えた低温顕
微鏡を用いて、試料の凍結状態等を観察する事は、凍結
技術を進歩させる上で重要な要件である。
結技術研究の上で、凍結用のチャンバーを備えた低温顕
微鏡を用いて、試料の凍結状態等を観察する事は、凍結
技術を進歩させる上で重要な要件である。
゛ 低温顕微鏡において、試料を凍結する際、植木を行
わないと、過冷却した後凍結が始まり、その際の急激な
温度衝撃により、生体試料がダメージを受けたり、へい
死してしまい、凍結速度や凍害防止剤その他諸項につい
て、適正条件を見い出す為の観察そのものが無意味とな
ってしまう。
わないと、過冷却した後凍結が始まり、その際の急激な
温度衝撃により、生体試料がダメージを受けたり、へい
死してしまい、凍結速度や凍害防止剤その他諸項につい
て、適正条件を見い出す為の観察そのものが無意味とな
ってしまう。
従って、低温ｍｖａ鏡観察において植木によって過冷却
なしに試料を凍結する事は重要な要件である。
なしに試料を凍結する事は重要な要件である。
従来法としては、
第１に金属製の植木ピンや板を液体窒素等の冷媒で冷却
し、これを試料に接触させて植木する。
し、これを試料に接触させて植木する。
第２にペルチェ素子の冷却端に接続した金属棒や、金属
板を試料に接触させて植木する手段がとられているが、 以下の問題点がある。
板を試料に接触させて植木する手段がとられているが、 以下の問題点がある。
先ず特別な植木装置、器具を必要とする。
またＬＮ２等の冷媒や電気エネルギーを必要とする。
さらに、試料に接触させるピンや金属板の温度調節は困
難であり、特に、凝固点より大巾に低温に冷却された時
には、植木は可能であるがその周囲部が過冷却を起し易
い。
難であり、特に、凝固点より大巾に低温に冷却された時
には、植木は可能であるがその周囲部が過冷却を起し易
い。
（発明等が解決しようとする問題点）
本発明は上記の従来法がもつ問題点に鑑み検討されたも
ので、低温顕微鏡観察用スライドガラスの試料蔵置面を
エツチングにより部分的に蝕刻等の非エッチ部との境目
にできた小さな凹凸部において、多数の氷晶核を形成さ
せる特により、部分的過冷却もなく、スムースに凍結す
る事ができるようにするのが、その目的である。
ので、低温顕微鏡観察用スライドガラスの試料蔵置面を
エツチングにより部分的に蝕刻等の非エッチ部との境目
にできた小さな凹凸部において、多数の氷晶核を形成さ
せる特により、部分的過冷却もなく、スムースに凍結す
る事ができるようにするのが、その目的である。
（問題点を解決するための手段）
本発明は上記の目的を達成するために、スライドガラス
の一部にエツチング手段等により凹凸部を形成する低温
ｍ微鏡観察における生物試料の植木方法を提供しようと
するものである。
の一部にエツチング手段等により凹凸部を形成する低温
ｍ微鏡観察における生物試料の植木方法を提供しようと
するものである。
（実 施 例）
スライドガラスを部分的にエツチング処理したり、切削
具などを用いるなどの手段により、細かい凹凸部を形成
する。
具などを用いるなどの手段により、細かい凹凸部を形成
する。
第１図で１はスライドガラスを、
Ｅはエツチング部を示しており、
第２図は第１図Ａ部の拡大図である。
試料は通常、緩衝液に浸漬されてあり、スライドガラス
に採る時も緩衝液と共に載置される。
に採る時も緩衝液と共に載置される。
この状態で、凍結用チャンバーを起動して冷却を行って
いくと凍結点に達した時点で、第２図に示すエツチング
部Ｅの周縁に形成された微小な凹凸部Ｂにあって植木が
起るのである。
いくと凍結点に達した時点で、第２図に示すエツチング
部Ｅの周縁に形成された微小な凹凸部Ｂにあって植木が
起るのである。
何故ならば、
エツチングの凹凸部Ｂの突起部ｂ・・・・・・は緩衝液
にとっては、微少な突起となり、極めて熱容量の小さい
部分となる。
にとっては、微少な突起となり、極めて熱容量の小さい
部分となる。
従って、この部分ｂ・・・・・・が他の全体部分よりも
先に冷却が進み、この部分す−・・・・・だけが、過冷
却を起して凍結し氷結晶を作る。
先に冷却が進み、この部分す−・・・・・だけが、過冷
却を起して凍結し氷結晶を作る。
しかる後、これら多数の核から結晶が生長していき、試
料を含む全体が、過冷却なしに、スムースに凍結する。
料を含む全体が、過冷却なしに、スムースに凍結する。
（第３図参照）
ただし試料が前記突起部ｂ・・・・・・内に存在すると
、過冷却を起す為、これを避ける必要がある。
、過冷却を起す為、これを避ける必要がある。
即ち、第１図の様にエツチングした時は、試料がエツチ
ング部Ｅの略中央部におれば良い。
ング部Ｅの略中央部におれば良い。
以上の如くして、単に冷却を進めていくだけで、自然に
植木が行う事ができ、特別の植木作業を必要としない。
植木が行う事ができ、特別の植木作業を必要としない。
他の実施例として第４図（１）〜（３）のエツチング部
分Ｅとしてもよく、エツチングがスライドガラス１の部
分に対して行われる限り、エツチング部Ｅの形状、数は
、任意である。
分Ｅとしてもよく、エツチングがスライドガラス１の部
分に対して行われる限り、エツチング部Ｅの形状、数は
、任意である。
（発明の効果）
本発明は以上のようにして実施できるものであるから、
特別な植木装置１機器が不要であり、植木のためのＬＮ
２ 、電気等も不要、特別な植木作業もいらず、普通に
冷却していくだけで、自然植木が行われることとなる。
特別な植木装置１機器が不要であり、植木のためのＬＮ
２ 、電気等も不要、特別な植木作業もいらず、普通に
冷却していくだけで、自然植木が行われることとなる。
第１図は本発明を実施するｑに用いるスライドガラスの
平面図、第２図は第１図のＡ部を示す拡大平面説明図、
第３図は本発明に係る突起部における凍結曲線図表、第
４図（１）（２）（３）は第１図と別異なスライドガラ
スの各平面図である。 ｌ・・・・・・スライドガラス ｂ・・・・・・凹凸部 代理人 弁理士 斎 藤 義 雄 第４図 晴間 手続補正書彷式） ％式％ ｌ 事件の表示 特願昭６２−９８１９３２ 発明
の名称 低温顕微鏡観察における生物試料の植木方
法 ３ 補正をする者 事件との関係 特許出願人 株式会社 はく さん ４代理人〒１００ 東京都千代田区有楽町１丁目６番６号小谷ビル６ 補正
の対象 明細書全文と図面全図 ７ 補正の内容 （１）明細書を別紙の通り全文補正します（明細書中の
項目を除き、内容に変更なし）。 （２）図面を別紙の通り企図補正します（内容に変更な
し）。
平面図、第２図は第１図のＡ部を示す拡大平面説明図、
第３図は本発明に係る突起部における凍結曲線図表、第
４図（１）（２）（３）は第１図と別異なスライドガラ
スの各平面図である。 ｌ・・・・・・スライドガラス ｂ・・・・・・凹凸部 代理人 弁理士 斎 藤 義 雄 第４図 晴間 手続補正書彷式） ％式％ ｌ 事件の表示 特願昭６２−９８１９３２ 発明
の名称 低温顕微鏡観察における生物試料の植木方
法 ３ 補正をする者 事件との関係 特許出願人 株式会社 はく さん ４代理人〒１００ 東京都千代田区有楽町１丁目６番６号小谷ビル６ 補正
の対象 明細書全文と図面全図 ７ 補正の内容 （１）明細書を別紙の通り全文補正します（明細書中の
項目を除き、内容に変更なし）。 （２）図面を別紙の通り企図補正します（内容に変更な
し）。
Claims (1)
- スライドガラスの一部にエッチング手段等により凹凸部
を形成する低温顕微鏡観察における生物試料の植氷方法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62098193A JP2587935B2 (ja) | 1987-04-21 | 1987-04-21 | 低温顕微鏡観察における生物試料の植氷方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62098193A JP2587935B2 (ja) | 1987-04-21 | 1987-04-21 | 低温顕微鏡観察における生物試料の植氷方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63263440A true JPS63263440A (ja) | 1988-10-31 |
| JP2587935B2 JP2587935B2 (ja) | 1997-03-05 |
Family
ID=14213167
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62098193A Expired - Lifetime JP2587935B2 (ja) | 1987-04-21 | 1987-04-21 | 低温顕微鏡観察における生物試料の植氷方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2587935B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998015826A1 (en) * | 1996-10-10 | 1998-04-16 | Olga Kukal | Hypothermic storage technology for biological material |
| US6413252B1 (en) * | 1998-02-26 | 2002-07-02 | Lucid, Inc. | Confocal microscope for facilitating cryosurgery of tissue |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS543378A (en) * | 1977-06-08 | 1979-01-11 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | Feed water changeover apparatus for hydroextraction rinse type washing machine |
| JPS56114741A (en) * | 1980-02-14 | 1981-09-09 | Teisan Kk | Cooling and freezing method for sample |
-
1987
- 1987-04-21 JP JP62098193A patent/JP2587935B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS543378A (en) * | 1977-06-08 | 1979-01-11 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | Feed water changeover apparatus for hydroextraction rinse type washing machine |
| JPS56114741A (en) * | 1980-02-14 | 1981-09-09 | Teisan Kk | Cooling and freezing method for sample |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998015826A1 (en) * | 1996-10-10 | 1998-04-16 | Olga Kukal | Hypothermic storage technology for biological material |
| US5804444A (en) * | 1996-10-10 | 1998-09-08 | Tolix Holdings Limited | Hypothermic storage technology for biological material |
| USRE37892E1 (en) * | 1996-10-10 | 2002-10-22 | Tolix Holdings Limited | Hypothermic storage technology for biological material |
| US6413252B1 (en) * | 1998-02-26 | 2002-07-02 | Lucid, Inc. | Confocal microscope for facilitating cryosurgery of tissue |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2587935B2 (ja) | 1997-03-05 |
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