JPS6324897A - スクシノグリカンから誘導される水性ゲル組成物 - Google Patents

スクシノグリカンから誘導される水性ゲル組成物

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JPS6324897A
JPS6324897A JP62163887A JP16388787A JPS6324897A JP S6324897 A JPS6324897 A JP S6324897A JP 62163887 A JP62163887 A JP 62163887A JP 16388787 A JP16388787 A JP 16388787A JP S6324897 A JPS6324897 A JP S6324897A
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agrobacterium
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ブルース・エル・ダシンガー
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 不発８Ａは、新規な水性ゲル組成物、このような新規な
水性ゲル組成物の製造方法、炭化水素含有地層からの石
油の回収強化へのこのような新規な水性ゲル組成物の利
用方法およびゲル形成組成物の生産に用いるポリマーを
産生ずる細菌に関する。
（従来の技術） 近代社会の重要な必需品である石油は、炭化水素含有層
と一般に呼ばれる地下鉱床または地下溜ｐ中に存在する
。このような炭化水素含有層から石油を回収する場合に
は、層中に天然に存在する原動力のみを利用する。いわ
ゆる「−次回収法」は通常、入手可能な石油のごく小部
分を産出するにすぎない。従って残シの石油を回収する
ために、しばしば「二次回収」方法または「二次回収」
操作と呼ばれる。多様な補助力法が開発されている。
比較的一般に用いられている二次回収方法の１つは炭化
水素含有地層の流体によるフラッディングである。この
流体なる用語は液体と気体の両方を包括する。流体が液
体である場合に、この方法は水攻法と呼ばれ、水または
列えは塩水のような水含有液体を炭化水素含有地層に導
入して、石油を適当な生産系すなわち回収系に排除し、
この系によって石油を回収する段階を含む。
水攻法における一般的な困難性は、注入した液体が均一
な前面で移動せず、むしろ溜シの成る部分を通る流路を
形成して他の部分と短絡するかまたは他の部分を不充分
に押し流す傾向があることである。この非効率的な押し
流しまたは「フィンガーリング（ｆｉｎｇｅｒｉｎｇ　
）Ｊ　を最小にしようと試みて、種々なシックナーまた
は増粘剤をウォーターフラッドに加えてその可動性を調
節することが行われている。石油回収の二次回収力法の
効率を高めるためのこの「可動性調節」方法は幾らかの
成功を収めている。
しかし、炭化水素含有地層が「漏出帯（ｔｈｉｅｆｚｏ
ｎｅ　）　Ｊと呼ばれる高透過性部分をしばしば含み、
ウォーターフラッドがこの部分に流入じやすいことにさ
らに問題がある。このような話透過性帝の存在が低透過
性帯を押し流され誰〈シ、これらの低透過性帯も多量の
石油を含みうるので１石油回収量を減少させることＫな
る。従って、この漏出帯を閉塞するまたはこの漏出帯の
透過性を減じ、その代シに炭化水素富化帯へウォーター
フラッドを向けることによってウォーターフラッドを改
良することによって５石油回収総効率を高めることがで
きる。このようなアプローチは「透過性低下」または「
プロフィル修正」と呼ばれる。透過性低下方法は向えば
米国特許第３，２４３，０００号、第３，３９６，７９
０号、第３，５２２，８４４号、第４，０４０，４８４
号および第４，０４８，０７９号に開示されている。上
記特許は水性ゲルまたは微生物によって誘導された多糖
類を閉塞剤として開示している。
米国特許第４，４００，４６６号とヨーロッパ特許出願
１１ＧＯ，０４０，４４５号はスクシノグリヵンと呼ば
れる、成る微生物によって誘導されるヘテロ多糖類の増
粘剤としての使用を開示している。　・（発明が解決す
べき問題点〕 上記特許のいずれもスクシノグリカンの架橋による水性
ゲルを開示していす、また架橋スクシノグリカンのプロ
フィル修正剤としての使用を開示していない。従って、
ポリマーの単位重量あたりの良好なゲル強度を有する新
規な水性ゲル形成組成物を提供することが本発明の目的
である。このようなゲルの使用によって二次石油回収方
法の効率と高める次めに、炭化水素含有地層の漏出帯の
透過性を減する方法を提供することが、本発明の他の目
的である。
（問題を解決するための手段〕 本発明は１つの実施態様として、次の成分：（必）スク
シノグリカンパイオポリマーのゲル形成量と （ｂ）　　前記スクシノグリカンポリマーを架橋しりル
水啓性多価金属陽イオンの有効盆 を含有する水性液体から成るゲル形底組成物を包含する
。
好ましいバイオポリマーはスクシノグリカンとして分類
されるようなヘテロ多糖類である。これ（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ　）　属およびリゾビウム（Ｒｈｉｚｏｂｉ
ｕｍ）属の細菌の炭水化物に対する作用によって製造さ
れる。このようにして製造されたスクシノグリカンはガ
ラクトースと、ガラクトース１モルにつｅ６．０〜９．
０モルのグルコースとから成るヘテロ多糖類である。こ
れらのスクシノグリカンは酸性官能基によって置換され
て、ヘテロ多糖類に正味負の電荷を与える。アセテート
基が存在することも可能である。また１例えば英国特許
第４１２７，４６２Ａ号に開示されているような化学的
手段によって、付加的な基を導入することもできる。ス
クシノグルカン、スクシングルカン様まｆｃ、′＃ｉス
クシノグリカン様ポリマーと包含する。これらのへテロ
多糖類を以下では「スクシングリカン類」と呼ぶことに
する。
好ましいスクシングリカン類はアグロバクテリウム種の
ような細菌によって産生されるスクシノクリカンであシ
、特に好ましいスクシノグリヵンは、土壌サンプルから
単離されてＡＴＣＣ５３０２’８゜ＡＴＣＣ５３１７１
、ＡＴＣＣ５３０２’５３１７３：Ｔｈ！びＡＴＣＣ５
３１７４１７）受入れ番号の下にアメリカンタイプカル
チャーコレクシ目ン（Ａｍｅｒｌｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃ
ｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ）（ＡＴＣＣ）　
　に寄託されている。アグロバクテリウム・ラジオバク
ター（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒａｄｉｏｂａｃｔ
ｅｒ　）　、バイオパル（ｂｉｏｖａｒ）　Ｉの新規な
菌株によって産生されるスクシングリカン類である。こ
れらの菌株の特徴は第１衣に記載する。アグロバクテリ
ウム・ツメファンシェンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ　）　、その突然変異体、
およびその非植物病理学的変株によって産生されるスク
シングリカン類も好ましい。植物性病原笛が有するＴ１
　プラスミドを除去した、アグロバクテリウム・ツメフ
ァシェンスＩＦ０３０５８とその突然変異体の菌株が最
も好ましい。
本発明に用いることのできる他のスクシングリカン類は
アルカリ土類金属、シ二−ドモナス員およびリゾビウム
属の細菌が産生ずるスクシングリカン類である。
さらに、スクシノグリカン生合成の遺伝情報コードが導
入されている他の細菌によシ多糖類が単離されることも
可能である。遺伝物質導入方法はここに参考文献として
関係する米国特許第４．３２９，４４８号に開示されて
いる。
上記細菌が産生したヘテロ多糖類を飼えばアルカリを用
いて脱アシル化し、生成した脱アシル化へテロ多糖類を
本発明の組成物に用いることも可能である。
スクシノグリカンを架橋することのできる典壓的な多価
金属陽イオンはアルミニウム（ＩＤ、クロムｌ、チタン
■、ルテニウム（１）およびジルコニウム四から選択し
た陽イオンである。好ましい陽イオンはクロム（ＩＩ）
である。他の好ましい陽イオンはアルミニウム（１）で
ある。さらに他の好ましい陽イオンはチタン側である。
本発明はま次１本発明の水性ゲル組成物の製造方法１本
発明の新規な水性ゲルを用いて炭化水素含有地層の透過
性を選択的に低下させる方法およびアグロバクテリウム
・ラジオバクターの新規な菌株に関する。
本発明の水性ゲルの製造に用いることのできるヘテロ多
糖類は、シコードモナス駕、リゾビウム属、アルカリゲ
ネス萬およびアグロバクテリウム属の細菌を含めた、種
々な細菌によって製造されるヘテロ多糖類である。特に
適した細菌は、ヱユートモナスＩＩＮＣＴＢ　１１５９
２％シュードモナス種ＮＣＴＢ１１２６４，２ルカリゲ
ネス・フエカｌリウム・ラジオバクター、アグロバクテ
リウム・−乙しヱエヱ王／ＩＦＯ３０５８，リゾビウム
・トに土壌サンプルから単離し、受入れ番号ＡＴＣＣ５
３０２８、ＡＴＣＣ５３１７１，ＡＴＣＣ５３１７２゜
ＡＴＣＣ５３１７３＞！びＡＴＣＣ５３１７４ｔｖ下に
アメリカンタイプカルチャーコレクションに寄託されて
いる、アグロパクテリウムーラジオバクノニバイオパル
エの新規な菌株である。
本発明に用いられるバイオポリマーは、その成分が多糖
類製造発酵の分野に習熟した人々に周知である適当な栄
養培地中で特定細菌を、実質的な量のへテロ多糖類が形
成されるまで培養することによって製造される。従って
、適当な栄養培地は当然、リン、カルシウム、マグネシ
ウムその他の無機イオンおよび選択した特定細菌によっ
て要求される他の痕跡栄養素とともに、適当な炭素源と
窒素源とを含む。炭素源はグルコース、スクロース、フ
ルクトース、マンニトール、ソルビトール。
９弓性殿粉、ジャガイモ殿粉等を含めた適当な炭水化物
である。グルコースは好都合な炭素源であシ、炭水化物
が精製された状態である必要はなく、天然の炭素源から
得られた粗原料として用いられることを経験が示してお
り、粗糖密およびブドウダイコンがこの種類の同である
。炭素源は培地中に通常１０〜１００　ｆ／ｌ、好まし
くは２０〜６０９／ｌの濃度で存在する。適当な窒素源
は大豆ミール、トウモロコシ浸せき液（ｃｏｒｎ　５ｔ
ｅｅｐ１ｉｑｕｅｒ　）　、酵母抽出物ならびに尿素も
しくはアンモニウム塩または上記ｇ素源の２種類以上の
組合せである。
好ましい培養方法は水性媒質中で実施される方法である
が、これに代る方法を多糖類製造に用いることもできる
。このような方法には、固体状態発酵または好ましい微
生物の固定化細胞系がある。
多糖類を製造する念めのこのような固体状態方法および
微生物細胞固定化方法は技術上周知である。
発酵は好気性条件下で生ずる。しかし、適当なレベルの
バイオポリマーを製造するために用いられる培養時間の
長さと温度とは、用いる微生物によって種々である。例
えば、用いた微生物がアグロバクテリウム種である場合
には、温度は２５”〜３５℃であることが好ましく、パ
ッチプロセスの発酵時間は５０〜２００時間、好ましく
は７２〜９６時間である。同じ条件を他の微生物に対し
ても用いることができる。発酵はパッチ式、補給パッチ
式、もしくは連続操作によってまたは他の適当な方法に
よって実施される。
発酵終了＃に、バイオポリマーをニート発酵ブイヨンと
して、すなわち限外濾過のような成る形式の濃縮を行っ
た発酵ブイヨンとしてまたはへテロ多糖類を回収した後
に用いることのできる発酵ブイヨンとして本発明の組成
物に用いることができる。ヘテロ多糖類は全発酵ブイヨ
ンから直接またはブイヨンを細胞から分離した後の精製
された形で回収することができる。ヘテロ多糖類は全ブ
イヨンま念は精製したブイヨンから、多糖類を不溶性に
する作用剤を添加した後にポリマーを沈澱させる一般に
是認された周知の方法によって回収される。このような
作用剤の例はメタノール、エタノール、インプロパツー
ルまたはアセトンのような有機溶媒、セチルトリメチル
アンモニウムプロミドもしくはセチルピリジニウムクロ
リドのような第四アミンである。沈澱した生成物は公知
の方法によって回収し、乾燥させることができる。
上記プロキスによって製造した、本発明に用いることの
できるヘテロ多糖類はスクシノグリカンまたはスクシノ
グルカンとして先行技術で充分に知られている多糖類と
同じである（ヨーロッパ特許出願第０，０４Ｑ、４４５
号参照）。この多糖類はＤ−グルコース残基７個とＤ−
ガラクトース残基１個とから成る人種類く）返し単位を
有することが確認された。このヘテロ多糖類はピルベー
ト。
スクシネートおよびアセテートのような酸残基を９変な
割合で付加的に含有する。
このような変化かへテロ多糖類の製造に用いた微生物、
培養の正確な条件、材料の異成分、および用いた分析方
法によるものであることは先行技術において充分く知ら
れてｂる。
このようＫして製造されたヘテロ多糖類は全ブイヨン、
乾燥ブイヨンまたは濃縮ブイヨンとして。
本発明の組成物に用いることができる。溌縮ブイヨン形
は高ぜん断速度に卦ける限外濾過または蒸発によって製
造することができる。さらに、ヘテロ多糖類は水酸化ナ
トリウムもしくは水酸化カリウムのようなアルカリの使
用によって脱アシル化して１本発明の組成物および方法
に用いることができる。ヘテロ多糖類の脱アシル化方法
は周知であシ（列えは米国特許第３，０９６，２９３号
）、このようにして製造したヘテロ多糖類は前記形状の
いずれかとして１本発明の組成物および方法に用いるこ
とができる。液体形状を用いる場合には。
腐敗を防ぐために通常の殺生物剤（１３’ｌＪえばホル
ムアルデヒド、２０００〜５０００〜／ｌの濃度で）を
加えるのが好ましい。
本発明の透過性低下方法に用いるバイオポリマー量は用
いる特定のバイオポリマーの種類および本発明の水性ゲ
ルに望まれる性質に依存して変動し得る。一般に、バイ
オポリマー量は水−増粘化量すなわち少なくとも、バイ
オポリマーを加える水を有意に粘稠化するような量であ
る。一般に１使用レベルは水性液体の０．００５〜１重
量係の範囲であるが、好ましい範囲は水性液体の０．０
３〜Ｑ、０６重量幅（３００〜６００ＩＪＩ９／ｌ）で
ある。
これらの数字は使用レベルを限定するものではなく１例
えば透過性プロフィル、塩分濃度、ｐＨ等のような、石
油含有地層内の条件に依存して他のレベルを用いること
も可能である。一般に、適当な量の多価金属陽イオンと
ともに、バイオポリマー使用量が得られるゲルの稠度を
決定する。一般的に述べると、少量のバイオポリマーは
通常、容易に扱み出される液状の可動なゲルを形成する
が。
多量のバイオポリマーは通常、硬い固体ゲルを形成する
。望ましい場合には、このような硬いゲルをバイオポリ
マーの成る濃度にまで希釈することによって「希薄化」
することができる。この希薄化は例えば攪拌、ボンピン
グのような機械的手段によって、または例えばジェット
ノズルのような。
せん断を生ずる適当な乱流誘導装置分用いて行うことが
できる。従って、バイオポリマー使用量の上限は一定で
はなく１装資、使用等に依存する。
しかし、液状の可動なゲルが望ましい場合には。
濃厚なゲルをゲルが固化する前に希釈することが好まし
い。
本発明の組成物に用いる架橋剤は多価金属陽イオンであ
ることが好ましい。これらの多価金属陽イオンは元素周
期得表第■族〜第Ｖ■族の金属から選択する。このよう
な多価金属陽イオンの例には。
アルミニウム（ＩＤ％クロムＣｌｌ０．ルテニウム（Ｉ
［Ｄ、チタ／■およびジルコニウム■がある。好ましい
金属陽イオンはクロム（ＩＩ）である。他の好ましい金
属陽イオンはアルミニウム（ＩＩＩ）である。さらに他
の好ましい金属陽イオンはチタン（ＩＶ）である。
用いる架橋剤は例えば塩化クロム、硝酸クロム。
塩基性硫酸クロム、硫酸アンモニウムクロム、硫酸カリ
ウム・クロム等のような、水溶性５価クロム化合物であ
ることが好ましい。多価陽イオンを生ずる他の水溶性化
合物も使用可能であ、乙。このような化合物の例には、
塩化アルミニウム、塩化第二鉄、二塩化マンガン、ケイ
酸アルミニウムマグネシウム、酢酸アルミニウム、硝酸
コノ（ルト、硝酸マンガン、硫酸ニッケル、水酸化ルヒ
シウム、塩化ルテニウム、アンチモン化合物［：５ＢＥ
−１６８、アムスペック（Ａｍｓｐｅｃ）、二ｓ−ジャ
ークー州グローセスタ−〕、チタン化合物〔チゾール（
Ｔｙｚｏｒ　）　ＡＡ、イー・アイ・デュポンデネマー
ス社（Ｅ、　１．　Ｄｕｐｏｎｔ　ｄｏ　Ｎｅｍｏｕｒ
ｓ　Ｃｏ、））、塩化パナジウムシよびジルコニウム化
合物〔ジルチク（Ｚｉｒｔｅｃｈ）ＲＡＡ、ジルチル社
（Ｚｉｒｔｅｃｈ、ｃｌｎｃ）、フロリダ州、ゲインズ
ビル〕がある。
本発明の実施に用いることのできる金属化合物は、金属
が低い原子価状態に還元されることのできるような、原
子価状態で存在する多価金属の水浴性化合物である。こ
のような化合物の列には過マンガン酸カリウム、過マン
ガン酸ナトリウム、クロム酸アンモニウム、ニクロム酸
アンモニウム。
クロム酸アルカリ金属オよびニクロム酸アルカリ全翼が
ある。上記金属化合物は「多価金属陽イオン」なる用語
に含まれる。２種類以上の多価金属陽イオンの組合せ、
すなわちクロムとアルミニウム：ニッケル、マンガンと
コバルトの組合セモ用いることができる。
一般て、金属化合物の濃度は約６〜７２ｐｐｍ（バイオ
ポリマーの１〜２５重【１の範囲である。しかし、この
ことは使用可能な金属化合物の濃度を限定するものでは
ない。金属化合物の極限濃度は使用バイオポリマーの濃
度、使用水性培地の種類、望ましいゲル生成物の種類お
よびゲルの使用方法に依存する。
本発明では明細書および特許請求の範囲の中で一般的Ｋ
「水性培地」なる用語を包括的に用いる。
この用語は本発明によってゲル化することのできる、添
加剤を含むまたは含まない、新鮮水、食塩水、水道水、
蒸留水およびその他の水性培地を意味する。
本発明の水性ゲルの製造には種々な方法を用いることが
できる。金属含有化合物はバイオポリマーの溶液に加え
ることができる。またはバイオポリマーと金属含有化合
物分同時に混合することができる。可能な場合には、水
性培地にバイオポリマーを答辞してから、金属化合物を
加えることが好ましい方法である。
多価金属陽イオンを加えると、一般に３〜２４時間内に
ゲル化が明らかになる。望ましい場合には、適当なキレ
ート化剤を用いてゲル化をさら；で遅延させることがで
きる。使用可能なキレート化剤にはモノ−、ジーまたは
トリカルボン酸またはその金属塩、特にクエン酸、シュ
ウ酸卦よびリンゴ酸の金属塩がある。ゲル化は極端なｐ
Ｈ値では遅延するが、一般にゲル形成時にｐＨは調節し
ない。望ましい場合には、適当な酸、塩基、または緩衝
剤の添加によって、ｐＩ（’に調節することができる。
ゲル形成時に一般に巳度も調節しない。
本発明の水性ゲルは地下炭水化物含有層のプロフィル修
正すなわち透過性低下に￥ｆに有効である。
実際に１本発明のゲルは何らかの適当な方法および適当
な量で、望ましい深部浸透を果し、石油含有層の高透過
性帝の透過性を減するために充分な期間井戸に送シ込ま
れて石油含有層に達することができる。通常、油井から
１０〜ｉ　ｏｏｏフイ−ト、好ましくは７５〜９００フ
イートの深部浸透で充分である。この範囲は地層によっ
て当然変動し、これらの範囲外の浸透も利用可能である
。
上記操作において、ゲル注入は通常のやシ方で実施する
ことができる。本発明によって注入されるゲルを予め調
製して、貯蔵タンクＫｉ存することができるが、好まし
い方法では、多価金属化合物とバイオポリマーを地表で
混合し、生成するゲルを直接井戸に注入する。
上述したように１本発明の水性ゲルは地下石油溜シの透
過性修正Ｋ特に有用である。これらの地下石油溜りは生
産井戸ま次は注入井戸のいずれにおいても発見され１本
発明による新規なゲルをこのような井戸の透過性修正方
法に用いることができる。注入井戸と生産井戸の公知の
例と水攻法および、二次石油回収を最大にするためのこ
れらの井戸のパターン化分析はエル・シー・ウレン（Ｌ
、　Ｃ，Ｕｒｅｎ　）の「石油生産工学−油田探査（Ｏ
ｌｌ　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
−０１１ｆｉｅｌｄ　Ｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎ　）Ｊ第
２版、マグロウヒルブックカンパニー社（ＭｃＧｒａｗ
−Ｈｌｌｌ　ＢｏｏｋＣｏｍｐａｎ）’　ｃｌｎｃ、　
）、　二、−ヨークとロンドン、１．９３９年ならびＫ
さらに詳しくは、同文献の４４４〜４５９頁の「水攻法
（Ｔｈｅ　Ｗａｔｅｒ−Ｆｌｏｏｄｉｎｇ　Ｐｒａｃｅ
ｓｓ　）Ｊ　　と云うタイトルの章に記載されている。
ウレンの参考文献に述べられている方法によると、流体
フラッディングが阻止されるまたは停止する水突破点（
ｔｈｅ　ｐｏｉｎｔ　ｏｆｗａｔｅｒ　　ｂｒｅａｋｔ
ｈｒｏｕｇｈ　）を確認する。次に、上記方法のいずれ
かを用いて、井戸を本発明のゲル形成組成物によって処
理する。ゲル化が終了し。
層の透過性が低下した後に、Ｒ，体フラッディングを再
開する。他の場合には１本発明の方法を水突破の前また
は後に用いることができる。
本発明を一般的に説明してきたが、次に本発明の特定の
実施例を記載する。
第１表 および５３１７４（’１７４）の特性化下記に詳述する
新規な土壌微生物の形態学的。
生化学的および植物病理学的特徴は「バーシイの系統的
細蕗学マニュアル（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｎａｌｏ
ｆ　Ｓｙａｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇ７
　）Ｊ第１巻。
〔ウィリアム　アンド　ゥィルキンス（Ｗｉ　１１　ｉ
　ａｍｓａｎｄ　Ｗｉｌｋｉｎｓ　）　、　　パルティ
モア、１９８４年〕によるアグロバクテリウム・ラジオ
バクター、バイオバルエとしての同定に一致する。
＋Ｓ′＋ ヤヤ Ｓ墾濡 翼ｔｉ箋 ＩＩ　　ＩＩ　　ＩＩ ≧０Ｅ−４ 、Ｗ４’）（ロロロロペーへンロローロにムロ探　　Ｉ
Ｉ田 −ロロ１へンｑ−ロｑ　　ロ ・−ロ目ヘロしてｈ七に一 ロ　　４０口ローｑ　　　　ロー 発癌性研究 エム・ギルストラップＣＭ、　Ｇ１１ｓｔｒａｐ）、ジ
エイ、クレイン（Ｊ、に１ｅ７ｎ）およびシー、ダブリ
二。
ネスター（Ｃ，Ｗ、　Ｎｅａｔｅｒ　）の１９７８年の
「クラウンゴール腫瘍、植物における疾患（Ｃｒｏｗｎ
Ｇａｌｌ　Ｔｕｍｏｒ　、ａ　Ｄｉｓｅａｓｅ　ｉｎ　
Ｐｌａｎｔｓ）Ｊ。
（Ｓ社ｕｎｄｅｒｓ）、　　ニコーヨーク、の方法に従
って。
単離物をニンジン・スライスの表面に接種した。
６週間後の結果 ＡＴＣｏ　　５３０２Ｂ　　陰性 ＡＴＣＣ５３１７１陰性 ＡＴＣＣ５３１７２陰性 ＡＴＣＣ５３１７３陰性 ＡＴＣＣ５３１７４陰性 ＡＴＣＣ１５９５５（陽性対照）　陽　性ＡＴＣＣ１９
３５８（陰性対照）　陰　性非接種ニンジン　　　　　
　陰　性 実施例１ ５０５８の培養によるバイオポリマーの生産アグロバク
テリウム・ツメフプシエンＩＦ０６０５８のバッチ培養
接種物をオービタール・シュイカ−上のトリブティカー
ゼ大豆ブイヨン中で３０℃において２４時間増殖させ、
下記に示す生産培地を含む発酵器に接種するために用い
た。
スクシノグリカン培地組成物 （？／ｌ　） グルコース　　　　　　　　　　　４０．０トウモロコ
シ浸出液　　　　　　　　　　　　ａ４に、　ＨＰ　０
．　　　　　　　　　　　　　　　　２．５Ｍｇ５Ｏ，
−７Ｈ，０１，０ ＮＨ４Ｓ０．　　　　　　　　　　　　　　　　０．５
４Ｍｎ５Ｏ，・Ｈ，ＯＯ，０１２ ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ（１０３６ ｚｎＳＯ４＃７Ｈ２０Ｑ、０７２ ＣｕＳＯａ　・７ＨｔＯＯ，００３２ ＣｏＣ１ｔ”６Ｈ，ＯＱ、００３６ ダウコーニングアンチフオームＡ （Ｄｏｗ　Ｃｏｒｎｉｎｇ　ＡｎｔｉｆｏａｍＡ）水 ｐＨはＺ４であった。
生産培地８１を含む１０’−二二−プルンスグイツク（
’Ｎｅｗ　Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ）発酵器に、接Ｕ物を３
壬の最終濃度で加えた。培養互変は２８℃に維持した。
攪拌は５００　ｒｐｍの速度の二二−ブルンスクイック
プロペラ−２１固で行い。
空気を４１／分の速既で発酵器に供給した。発ｅ（９６
１１５間）終了時に、ブルックフィールド（Ｂｒｏｏｋ
ｆ　１ｅｌｄ　）　ＬＶＴＤ粘度計、Ｉｓ　４　スピン
ドル（ｓｐｉｎｄｌｅ）、　３０　ｒｐｍ　Ｋよって測
定したブイヨン粘度は６，４００ｃｐｓであった。
発酵ブイヨンを６倍量の水で希釈し、次に１２．０００
Ｘ５’　　で２０分間遠心分離することによって清澄化
したブイヨンにＮ、Ｃ６２，５？／ｌを加え、次に２倍
量のインプロパツールを加えることによって、ヘテロ多
糖類を沈澱させた。
ヘテロ多ｇ＠をとり出し、１００メツシユ・スクリーン
上で圧縮して、残留液体を除去し、真空乾燥させた。こ
のようにして回収されたノ５イオボリマーは最初の発酵
ブイヨンの１．６重量％に相当した。
実施例２ による脱アシル化バイオポリマーの生産実施例１におけ
るように調製したアゲロバクチｌウムーツメフ　シエン
スＩＦ０３０５８の清澄化発酵ブイヨン１１を１機械的
攪拌装置と底部窒素スバージとを備えｆｃ２１−ビーカ
ーに入れた。混合物中に、攪拌しながら、窒素２徐々に
６０分間バブルさせて、酸素を排除した。
攪拌とスクーン上を続けながら、水酸化カリウムの５％
溶液１０ｍ／Ｑブイヨンに徐々に加えた。ブイヨンのＩ
）Ｈは上昇して１１にナシ、脱アシル化の過程中１１近
くに残留した。２時間後に、ｐＨ７，［］に達するまで
ＨＣｌ　の１０係溶液を加えることによって、ブイヨン
を中和した。
２倍量のインプロパツールき加えて、多糖類を沈澱させ
た。沈澱した生成物を濾過して、過剰なインプロパツー
ルを除去し、イソプロパツール２００ゴ中にちぎシ入れ
、多糖類をさらに脱水するために１時間静置した後に、
ゴムダム下で真空濾過し風乾させて、淡黄褐色、繊維質
の純粋な脱アシル化生成物を得た。
アグロバクテリウムーツメフプシエンスＩＦＯ６０５８
のＣｒ３＋イオン架橋ゲルの系列を調製して、この生成
物のゲル効率を、プロフィル修正剤として石油回収に用
いられている、一般に認められ次製品であるキサンタン
バイオポリマーに比較して評価した。アグロバクテリウ
ム・ツメファシェンスＩＦＯ３０５８とキサンタンバイ
オポリマーの浴液ｖ３４Ｎａ（Ｊと０．３　％　Ｃ−Ｃ
１２ｋ含有する合成食塩水中７５０ｐｐｍの検度で調製
した。次に、１ｔＩＪ塩化クロム標準浴液を用いて、Ｃ
ｒ”１１００ｐｐ　　でポリマー浴液を処理し、静置さ
せた。直径１（ｍのプラノジャーを何えたペネトロメー
タを用いて、２４．４８．７２時間および６日間の間隔
をおいてゲル強度を測定した。ゲル強度はゲル破壊が生
じ、ゲル破壊に対して最大抵抗を示す点（？）として測
定した。アグロバクテリウムΦツメファシェンスＩＦＯ
３０５８と架橋キサンタンバイオポリマーとのゲル強度
の比較２下キサンタン　　　　　　２　　　２　　　５
　　３３ＩＦ０３０５８ノくイン７にリマ−３０９９１
１０１３１３＋　。
Ｃｒ　　ケル アグロバクテリウム−ラジオバクター、バイオバルエの
幾つかの請株からのバイオポリマーのＣｒ”＋イオン架
橋ゲルを調製して、実施し１」３に述べたように評価し
念。７２時間後にゲル強度を測定して、同様に調製した
キサンタンバイオポリマー（７ｏコン（Ｆｌｏｃｏｎ）
４８００〕　のイオン強度と比較した。
アグロバクテリウム・ラジオバクタル菌床　　イオン強
度（２）ＡＴＣＣ５３１７２３０ ＡＴＣＣ５３１７３１８ ＡＴＣＣ５３０２８１８ ＡＴＣＣ５３１７１１２ ＡＴＣＣ５３１７４１１ キサンタン　　　　　　　　　　５ ＩＦ０３０５８のＣｒ”＋ゲル 実施９１２で述べたように脱アシル化したアグロバクテ
リウム・ツメファシェンスＩＦ０３０５８□多糖類をＣ
ｒ”＋で処理することによっても、ゲルが生成した。３
壬Ｎａｃｌ塩水におけるゲル強度の比較を下記に示す。
〔拘マー）ＣＣｒ”］　　ゲル強度 ポリマー　　（１）Ｐｍ）　　（ＰＰｍ）　　　（ｆ　
）ＩＦＯ３０５８１５００１００１６５２０９実施例６ プロフィル修正剤として石油回収強化に用いられるアグ
ロバクテリウム・ツメファシェンスＩＦＯ３０５８のＣ
ｒ　　ゲル 石油回収強化におけるプロフィル修正剤としてのアグロ
バクテリウム・ツメファシェンスＩＦＯ３０５８バイオ
ポリマーの効率を、ダウンホール条件を模倣するために
サンドパックを用いて測定した。種々な粒度（典型的に
は６０〜２００メツシコ）の砂混合物を含む標準１イン
チサンドパックを作成し次。３係ＣａＣ１＊の合成塩水
中ＩＦＯ３０５８バイオポリマー４００ｐＰｍのｍ液を
調製し、Ｃｒ　　　１１００ｐｐを供給し１石油と塩水
を交互にフラッドさせるカラムにこの浴液を送シ込み、
それぞれに対するカラムの相対透過性を測定した。石油
に対する好ましい透過性を維持しながら塩水に対する透
過性を非常に効果的に低下させることを示す次のデータ
を得られ念。
透過性〔ミリダルセイ（ｍｉｌｌｉｄａｒｃｅｙ）　）
の例 アグロバクテリウム・ツメフプシエンスＩＦ０３０５８
多糖類（３１Ｎ−ＣＪ中２０００ｐｐｍ）に適当な陽イ
オン１０１００ｐｐ混合し、２日間ゲル化させた。ゲル
の強度を下記に示す。
陽イオン　　陽イオン源　　　　　　　　　ゲルの性質
ＡＩ”　　　　ＭＣＣＨ４Ｃ００）ａ　　　　　　　　
　　　　＋十＋＋！十 Ｃｏ　　　　Ｃｏ　ＣＮＯｓ　）ｚ　　　　　　　　　
　　　　＋８＋ Ｃｒ　　　　　ＣｒＣ１，＋＋＋＋ ３＋ Ｆｅ　　　　　ＦｅＣ１＠　　　　　　　　　　　　　
　　　　＋２＋ Ｍｎ　　　　　Ｍｎ　（ＮＯｓ　）１　　　　　　　　
　　　　　＋＋宜十 ＨＩ　　　　　Ｎ１５Ｏ，＋ Ｒｂ”、、　　　ＲｂＯＨ＋ Ｓ＋ Ｒ１１ＲｕＣ１＠　　　　　　　　　　　　　　　　　
＋＋＋＋５＋ Ｂｂ　　　５ＢＥ−１６８＋ Ｔｉ　　　　　チゾール（Ｔｙｚｏｒ）ＲＡＡ　　　　
　　　＋＋＋＋４＋ デ＋　　ＶＯＣＩ、　　　　　　　　　　　　＋Ｚｒ　
　　　　　ジルデック（Ｚｉｒｔｅｃｈ）ＲＡＡ　　　
　　　　　＋＋＋４＋ ＋＋＋＋　＝強く、硬いゲル　＋５弱いゲル１、ヘキソ
ースはそれらのアルジトールアセテート誘導体として、
気液クロマトグラフィによって定量した。有機酸はヒサ
マツ（Ｈｉｓａｍａｔｓｕ）等の方法〔カルブ−レス（
Ｃａｒｂ、Ｒａｓ、　）、６１．８９−９６（１９７８
年）〕によって〕バイオーラッドＢｉｏ−Ｒａｄ）ＨＰ
Ｘ−８７Ｈカラムｆ用いたＨＰＬＣによって定量した。
２、ｙ、−）”モナｘｍＮＣＩＢ　　１１２６４　と１
１５９２に関するデータはヨーロッパ特許出願第０．０
４０，４４５号からのものである。アゲロバ３０５８に
関するデータは米国特許第４，２６９，９３９号とヒサ
マツ等の文献（上記参考文献）からそれぞれ引用した。
＆　０−アシルとして定量した総０−アシル。
実施例９ 石油回収強化にプロフィル修正剤として用いたアグロバ
クテリウム・ツメフフシエンスＩＦＯ３０５８誘導ポリ
マーのＣｒ　　ゲル 石油回収強化におけるプロフィル修正剤としてのアグロ
バクテリウム・ツメファシェンスＩＦ０３０５８バイオ
ポリマーの効率を注入井戸のダクンホール条件を模倣し
た実験室サンドパック装置を用いて測定した。種々の粒
度（典型的に６０〜２００メクシ一）の砂混合物を含む
、標準１インチサンドバック装置を作成した。合成塩水
中ＩＦ０３０５８バイオポリマーの溶液を真裏し、適当
量のＣｒ　　を加え、カラムに送シ込み、７日間ゲル化
させた。ゲル化した後、カラムに塩水をフラッドさせ、
塩水透過性の相対的低下を記録した。次聚はゲルの効果
ｔ−列証するものである。ポリマーは、他に指示しない
かぎり、限外濾過した全発酵ブイヨンとして用いた。

Claims (18)

    【特許請求の範囲】
  1. （１）（ａ）スクシノグリカンポリマーのゲル形成量お
    よび （ｂ）前記スクシノグリカンポリマーを架橋し得る少な
    くとも１種類の水溶性多価金属陽イオンの有効量 を含有する水性液体から成るゲル形成組成物。
  2. （２）前記金属物イオンをアルミニウム（III）、クロ
    ム（III）、ルテニウム（III）、チタン（IV）およびジ
    ルコニウム（IV）から成る群から選択する特許請求の範
    囲第１項記載の組成物。
  3. （３）前記金属陽イオンがクロム（III）である特許請
    求の範囲第２項記載の組成物。
  4. （４）前記金属陽イオンがアルミニウム（III）である
    特許請求の範囲第２項記載の組成物。
  5. （５）前記金属陽イオンがチタン（IV）である特許請求
    の範囲第２項記載の組成物。
  6. （６）スクシノグリカンが￥アグロバクテリウム（Ａｇ
    ｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）￥属、￥アルカリゲネス（Ａ
    ｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）￥属、￥シュードモナス（Ｐｓ
    ｅｕｄｏｍｏｎａｓ）￥属、または￥リゾビウム（Ｒｈ
    ｉｚｏｂｉｕｍ）￥属のスクシノグリカン産生菌の培養
    によって得られる特許請求の範囲第１項記載の組成物。
  7. （７）スクシノグリカンをアグロバクテリウム属のスク
    シノグリカン産生菌の培養によって製造する特許請求の
    範囲第６項記載の組成物。
  8. （８）前記菌が￥アグロバクテリウム￥・￥ラジオバク
    ター￥￥（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｒａｄｉｏｂ
    ａｃｔｅｒ）￥、バイオバル（ｂｉｏｖａｒ） I 、ま
    たは￥アグロバクテリウム￥・￥ツメファシエンス￥￥
    （Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎ
    ｓ）￥、ＩＦＯ３０５８、またはこれらの突然変異体の
    スクシノグリカン産生菌株である特許請求の範囲第７項
    記載の組成物。
  9. （９）前記スクシノグリカンポリマーが脱アシル化スク
    シノグリカンポリマーである特許請求の範囲第１項記載
    の組成物。
  10. （１０）￥アグロバクテリウム￥・￥ラジオバクター￥
    （Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｒａｄｉｏｂａｃｔｅ
    ｒ）、バイオバル（ｂｉｏｖａｒ） I 、ＡＴＣＣ５３
    ０２８；￥アグロバクテリウム￥・￥ラジオバクター￥
    、バイオバル I 、ＡＴＣＣ５３１７；￥アグロバクテ
    リウム￥・￥ラジオバクター￥、バイオバル I 、ＡＴ
    ＣＣ５３１７２；￥アグロバクテリウム￥・￥ラジオバ
    クター￥、バイオバル I 、ＡＴＣＣ５３１７３；￥ア
    グロバクテリウム￥・￥ラジオバクター￥、バイオバル
    I 、ＡＴＣＣ５５１７４；およびこれらの突然変異体
    から成る群から選択した、スクシノグリカンポリマー産
    生能力を有する細菌の生物学的に純粋な培養物。
  11. （１１）（ａ）スクシノグリカンバイオポリマーのゲル
    形成量； （ｂ）前記スクシノグリカンバイオポリマーを架橋する
    ために有効な、少なくとも１種類の水溶性多価金属陽イ
    オンの前記スクシノグリカンバイオポリマーを架橋する
    ために充分な量；および（ｃ）水性液体 をいっしょにし、その後この混合物をゲル化させること
    から成る、炭化水素含有地層からの炭水化物回収に有用
    な、水性ゲル組成物の製造方法。
  12. （１２）前記金属陽イオンがクロム（III）である、特
    許請求の範囲第１１項記載の方法。
  13. （１３）前記金属陽イオンがアルミニウム（III）であ
    る、特許請求の範囲第１１項記載の方法。
  14. （１４）前記金属陽イオンがチタン（IV）である、特許
    請求の範囲第１１項記載の方法。
  15. （１５）層に連通する井戸に、 （ａ）スクシノグリカンバイオポリマーのゲル形成量； （ｂ）前記スクシノグリカンバイオポリマーを架橋させ
    るために有効な、少なくとも１種類の水溶性多価金属陽
    イオンの前記スクシノグルカンバイオポリマーを架橋さ
    せるために充分な量；および（ｃ）水性液体 を導入し、次に前記井戸を閉鎖し、成分（ａ）、（ｂ）
    および（ｃ）にゲルを形成させることから成る、地下の
    炭化水素を含有する地層の透過性を選択的に低下させる
    方法。
  16. （１６）前記金属陽イオンがクロム（III）である特許
    請求の範囲第１５項記載の方法。
  17. （１７）前記金属陽イオンがアルミニウム（III）であ
    る特許請求の範囲第１５項記載の方法。
  18. （１８）前記金属陽イオンがチタン（IV）である特許請
    求の範囲第１５項記載の方法。
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