JPS63124958A - 高速液体クロマトグラフによる芳香族アミノ酸の分析方法 - Google Patents
高速液体クロマトグラフによる芳香族アミノ酸の分析方法Info
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- JPS63124958A JPS63124958A JP61271188A JP27118886A JPS63124958A JP S63124958 A JPS63124958 A JP S63124958A JP 61271188 A JP61271188 A JP 61271188A JP 27118886 A JP27118886 A JP 27118886A JP S63124958 A JPS63124958 A JP S63124958A
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Landscapes
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
（技術分野）
本発明は、高速液体クロマトグラフを使用して芳香族ア
ミノ酸を分析する方法に間する。
ミノ酸を分析する方法に間する。
（従来技術）
チロシンや、フェニルアラニン、トリプトファン等の芳
香線アミノ酸を高速液体クロマトグラフィにより分析す
る場合には、カチオン交換クロマトグラフィーや逆相ク
ロマトグラフィーにより行なわれているが、前者にあっ
てはトリプトファンの溶出に５０分弱を（第３図イ）、
また少者にあっては２５分という長時間を要する間係上
（同図口）、分析作業に長い時間を要するという問題が
あった。
香線アミノ酸を高速液体クロマトグラフィにより分析す
る場合には、カチオン交換クロマトグラフィーや逆相ク
ロマトグラフィーにより行なわれているが、前者にあっ
てはトリプトファンの溶出に５０分弱を（第３図イ）、
また少者にあっては２５分という長時間を要する間係上
（同図口）、分析作業に長い時間を要するという問題が
あった。
（目的）
本発明はこのような問題に鑑みてなされたものであって
、その目的とするところは高い分離能を維持しつつ短時
間で芳香族アミノ酸を分離することができる新規な芳香
猿アミノ酸分析方法を提案することにある。
、その目的とするところは高い分離能を維持しつつ短時
間で芳香族アミノ酸を分離することができる新規な芳香
猿アミノ酸分析方法を提案することにある。
（発明の概要）
すなわち、本発明が特徴とするところは、オクタデシル
基を表面に化学結合したシリカ粒子を充填した分離用カ
ラムを固定相に、また水素イオン濃度ｐＨ２〜４で］０
〜１００ｍモルのリンＭ緩衝液に１〜５ｍモルのオクタ
ンスルホン酸ナトリウムを含む溶液に、アセトニトリル
を１０〜３０％、もしくはメタノールを２０〜５０％を
混合したものを移動相に使用した点にある。
基を表面に化学結合したシリカ粒子を充填した分離用カ
ラムを固定相に、また水素イオン濃度ｐＨ２〜４で］０
〜１００ｍモルのリンＭ緩衝液に１〜５ｍモルのオクタ
ンスルホン酸ナトリウムを含む溶液に、アセトニトリル
を１０〜３０％、もしくはメタノールを２０〜５０％を
混合したものを移動相に使用した点にある。
（実施例）
そこで、以下に本発明の詳細を図示した実施例に基づい
て説明する。
て説明する。
第１図は、本発明に使用する装置の一例を示すもので、
図中符号１は、オクタデシル基を表面に化学結合したシ
リカ粒子を充填剤とする逆相クロマトグラフィー用カラ
ムで、流入端側にはイオンペア試薬として作用するオク
タンスルホン酸ナトリウムを溶解したリン酸緩衝液に、
アセトニトリルやメタノール等の溶媒を混合した移動相
液槽２にポンプ３を介しで接続し、また流出端には分岐
管４を介して蛍光検出器５を接続するとともに、ポンプ
６により試薬槽７から誘導体化試薬を供給するように構
成されている。
図中符号１は、オクタデシル基を表面に化学結合したシ
リカ粒子を充填剤とする逆相クロマトグラフィー用カラ
ムで、流入端側にはイオンペア試薬として作用するオク
タンスルホン酸ナトリウムを溶解したリン酸緩衝液に、
アセトニトリルやメタノール等の溶媒を混合した移動相
液槽２にポンプ３を介しで接続し、また流出端には分岐
管４を介して蛍光検出器５を接続するとともに、ポンプ
６により試薬槽７から誘導体化試薬を供給するように構
成されている。
この装置においで、移動相液として１０ｍモルのリン酸
ナトリウム緩衝液ｕｐＨ２，６に調整するとともに３ｍ
モルのオクタンスルホン酸ナトリウムを溶解し、これに
アセトニトリルを混合したものを毎分１．０ｍｌで供給
しながら、チロシンや、フェニルアラニン、アンスラニ
ル酸、トリプトファン等の芳香核アミノ酸を含む試料を
分析したところ、第２図に示したようにチロシン、フェ
ニルアラニン、アンスラニル酸、トリプトファンの順序
でそれぞれ独立した状態で溶出するとともに、最終溶出
成分であるトリプトファンも従来法の４０％である１０
分弱という非常に短い時間で溶出した。
ナトリウム緩衝液ｕｐＨ２，６に調整するとともに３ｍ
モルのオクタンスルホン酸ナトリウムを溶解し、これに
アセトニトリルを混合したものを毎分１．０ｍｌで供給
しながら、チロシンや、フェニルアラニン、アンスラニ
ル酸、トリプトファン等の芳香核アミノ酸を含む試料を
分析したところ、第２図に示したようにチロシン、フェ
ニルアラニン、アンスラニル酸、トリプトファンの順序
でそれぞれ独立した状態で溶出するとともに、最終溶出
成分であるトリプトファンも従来法の４０％である１０
分弱という非常に短い時間で溶出した。
また、移動相の水素イオン濃度！ｐＨ２〜４の範囲で変
更するとともに、燐酸緩衝液の濃度を１０〜１００ｍモ
ル、オクタンスルホン酸ナトリウムを１〜５ｍモルの範
囲で、アセトニトリルの濃度を］０〜３０％の範囲で変
更して分析を行なったところ第２図に示したのと同様の
クロマトグラムを得ることができた。
更するとともに、燐酸緩衝液の濃度を１０〜１００ｍモ
ル、オクタンスルホン酸ナトリウムを１〜５ｍモルの範
囲で、アセトニトリルの濃度を］０〜３０％の範囲で変
更して分析を行なったところ第２図に示したのと同様の
クロマトグラムを得ることができた。
また、上述のアセトニトリルに代えてメタノ−・ルを２
０〜５０％の濃度で用いたが、第２図に示したクロマト
グラムと同様のものを得ることができた。
０〜５０％の濃度で用いたが、第２図に示したクロマト
グラムと同様のものを得ることができた。
これらのことから、オクタデシル基を表面に化学結合し
たシリカ粒子を充填した分離用カラムを固定相に、また
水素イオン濃度ｐＨ２〜４で１０〜１００ｍモルのリン
酸緩衝液に１〜５ｍモルのオクタジスルホン酸ナトリウ
ムを含む溶液に、アセトニトリルを１０〜３０％、もし
くはメタノールを２０〜５０％を混合したものを移動相
に使用することが有効であることが判明した。
たシリカ粒子を充填した分離用カラムを固定相に、また
水素イオン濃度ｐＨ２〜４で１０〜１００ｍモルのリン
酸緩衝液に１〜５ｍモルのオクタジスルホン酸ナトリウ
ムを含む溶液に、アセトニトリルを１０〜３０％、もし
くはメタノールを２０〜５０％を混合したものを移動相
に使用することが有効であることが判明した。
なお、この実施例においでは、分離成分を誘導体化法に
より検出しているが、紫外吸光度を検出するようにして
もよい。
より検出しているが、紫外吸光度を検出するようにして
もよい。
（効果）
以上、説明したように本発明によれば、オクタデシル基
表面に化学結合したシリカを充填したカラムを固定相に
、また水素イオン濃度ｐＨ２〜４で１０〜１００ｍモル
のリン酸緩衝液に１〜５ｍモルのオクタンスルホン酸ナ
トリウムを含む溶液に、アセトニトリルを１０〜３Ｑ％
、もしくはメタノールを２０〜５０％を混合したものを
移動相に使用したので、チロシンや、フェニルアラニン
、アンスラニル酸、トリプトファン等の芳香庫アミノ酸
を高い分離能を維持しながら短時間で分析することがで
きる。
表面に化学結合したシリカを充填したカラムを固定相に
、また水素イオン濃度ｐＨ２〜４で１０〜１００ｍモル
のリン酸緩衝液に１〜５ｍモルのオクタンスルホン酸ナ
トリウムを含む溶液に、アセトニトリルを１０〜３Ｑ％
、もしくはメタノールを２０〜５０％を混合したものを
移動相に使用したので、チロシンや、フェニルアラニン
、アンスラニル酸、トリプトファン等の芳香庫アミノ酸
を高い分離能を維持しながら短時間で分析することがで
きる。
第１図は本発明に使用する装置の一例を示す構成図、第
２図は同上装置により分析した芳香ｉｔアミノ酸のクロ
マトグラムを示す図、及び第３図は従来方法による芳香
核アミノ酸に関するクロマトグラムを示す図である。
２図は同上装置により分析した芳香ｉｔアミノ酸のクロ
マトグラムを示す図、及び第３図は従来方法による芳香
核アミノ酸に関するクロマトグラムを示す図である。
Claims (1)
- オクタデシル基を表面に化学結合したシリカを充填剤と
する逆相クロマトグラフィーカラムを固定相に、また水
素イオン濃度ｐＨ２〜４で１０〜１００ｍモルのリン酸
緩衝液に１〜５ｍモルのオクタンスルホン酸ナトリウム
を含む溶液に、アセトニトリルを１０〜３０％、もしく
はメタノールを２０〜５０％を混合したものを移動相に
使用し、逆相イオンペアクロマトグラフィーにより分離
することを特徴とする高速液体クロマトグラフによる芳
香族アミノ酸の分析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61271188A JPS63124958A (ja) | 1986-11-14 | 1986-11-14 | 高速液体クロマトグラフによる芳香族アミノ酸の分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61271188A JPS63124958A (ja) | 1986-11-14 | 1986-11-14 | 高速液体クロマトグラフによる芳香族アミノ酸の分析方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63124958A true JPS63124958A (ja) | 1988-05-28 |
Family
ID=17496574
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61271188A Pending JPS63124958A (ja) | 1986-11-14 | 1986-11-14 | 高速液体クロマトグラフによる芳香族アミノ酸の分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS63124958A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1038363C (zh) * | 1992-11-17 | 1998-05-13 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种反相氨基酸专用色谱柱的制备方法 |
| CN1320354C (zh) * | 2005-07-14 | 2007-06-06 | 天津药业研究院有限公司 | 氨基酸的分析方法 |
| CN103134892A (zh) * | 2011-11-30 | 2013-06-05 | 天津金耀集团有限公司 | 复方氨基酸(15)双肽(2)注射液的分析方法 |
| CN104198643A (zh) * | 2014-09-21 | 2014-12-10 | 上海海洋大学 | 一种同时测定三种芳香族氨基酸含量的方法 |
-
1986
- 1986-11-14 JP JP61271188A patent/JPS63124958A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1038363C (zh) * | 1992-11-17 | 1998-05-13 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种反相氨基酸专用色谱柱的制备方法 |
| CN1320354C (zh) * | 2005-07-14 | 2007-06-06 | 天津药业研究院有限公司 | 氨基酸的分析方法 |
| CN103134892A (zh) * | 2011-11-30 | 2013-06-05 | 天津金耀集团有限公司 | 复方氨基酸(15)双肽(2)注射液的分析方法 |
| CN104198643A (zh) * | 2014-09-21 | 2014-12-10 | 上海海洋大学 | 一种同时测定三种芳香族氨基酸含量的方法 |
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