JPS63123455A - 微量遠心分離用セル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は分析のための生物試料作製法に係り。

特に通常の遠心沈澱管を用いた操作では試料の紛失を招
くような微量な試料を沈降せしめるのに好適な遠心分離
用セルに関する。

〔従来の技術〕

従来の微量遠心分離用セルは、「遺伝子観察への旅」山
岸秀夫編、東京大学出版（１９８１年）第１２４〜１２
７頁に記載にように、試料を沈降付着させるためのグリ
ッドの挿入ととり出しを試料誘導路を通じて行うように
構成されていた。しかし、この方法では１０００細胞を
直径３＋ａｍのグリッド上にランダムに沈降できるだけ
であり、より微量な試料をグリッド上の一定の位置に確
実に沈降付着させるという点については配慮されていな
かった。

〔発明が解決しようとする問題点〕

上記従来技術は試料を沈降付着させるためのグリッドメ
ツシュを試料誘導路を通じて出し入れする。そのために
試料誘導路の直径はグリッドメツシュの直径より大きく
なっており、試料の沈降をグリッドメツシュ上に限定す
ることができないばかりでなく、取出しの際に沈降した
試料が脱落しやすく、非常に微量な試料の遠心分離には
問題があった。

本発明の目的は、微量な試料を確実に目的とする試料台
上に沈降させ、操作後の試料の取り出しが簡便な遠心分
離用セルを提供することにある。

〔問題点を解決するための手段〕

上記目的は、試料を挿入するための誘導路の少なくとも
一方の端の口径面積試料を沈降させる試料台の面積より
も小さくシ、セルの試料誘導路を含む部分を、試料台の
保持部から分離可能な構成とすることにより達成される
。また、試料保持部と試料台保持部を分離可能な二律構
成にし、遠心分離後に試料保持部を取り去って、ピンセ
ット操作の十分可能なスペースを確保することにより、
試料台の簡便な取り出しが達成される。

〔作用〕

試料は遠心力によって試料誘導路に添って試料台に沈降
する。試料誘導路の試料台に接する端の口径の面積は試
料台よりも小さいので、遠心力の作用により試料は誘導
路に添って沈降し試料台上に到達する。試料沈降後、セ
ルの試料誘導路を含む部分を分離して取り去ることによ
って、試料台の取り出しが可能になる。

〔実施例〕 以下、本発明の一実施例を図を用いて説明する。

実施例１ 第１図において微量遠心分離用セルは試料誘導路１を有
する試料保持部３と、試料台２を保持する試料台保持部
４より構成されている。試料を含む溶液５は試料誘導路
の試料導入口２１より導入される０本実施例では、試料
保持部３と試料台保持部４としてアクリル材を、試料台
２として第２図に示すような電子顕微鏡用グリッドメツ
シュ（厚み１５μｍの＃３００の銅メツシユ）１０の表
面に試料吸着材（カーボン膜、コロジオン膜等、電子顕
微鏡ｗｔｒＡに用いる支持膜）１１を保持したものを用
い、微量遠心分離用セルを構成した。このセルの試料導
入口２１の直径は３ｍ、試料誘導路の試料台側の直径は
１ｍｌであり、後者の中心は直径３■の試料台（グリッ
ドメツシュ）２の中心とほぼ一致している１本発明者等
は、大腸菌細胞に浸透圧ショックをかけて細胞内容物を
放出させたものを試料として３０００Ｘｇで５分間遠心
操作を行うことにより、常にグリッドメツシュ上のほぼ
中央付近の直径約１ｍの範囲に試料を吸着させることが
でき、透過型電子顕微鏡による観察効率をあげることが
できた。また、試料誘導路をすり林状の構成にしたこと
により、試料導入口への試料注入の簡便化と、試料台上
の一定位置への遠心沈降の確実化を同時に達成すること
ができた。

試料保持部と試料台保持部の接合部分は直径２０ｍであ
り、遠心後に試料保持部を取り去ると、試料台保持部に
はピンセット操作を行うに十分なスペースができ、試料
台の取り出しは容易であった。

実施例２ 第３図において、試料保持部３の試料誘導路１は、円筒
状の空隙となっており、その直径は試料台２の直径より
も小さい１本発明者等は試料保持部３、試料台保持部４
をアクリル材で構成し、前者には直径ｌ１１１１１の試
料誘導路を設けた。試料台として前出グリッドメツシュ
上にカーボン膜を保持したものを用い、前出細胞試料を
試料導入口より注入し、４０００Ｘ　ｇ　、　１５分間
遠心分渭することにより、細胞内容物をカーボン膜上に
吸着させることができた６本実施例の構成により、１μ
α中に約１００細胞を含む溶液を２０μｍという従来法
の約１／２ｏの細胞数を含む微量な試料の遠心処理を達
成することができた。

実施例３ 第４図において、試料保持部３の中央には直径約ｌａｍ
の穴が貫通しており、その部分には試料を含む溶液５を
保持する試料保持管６（ここでは、ラムダピペット５μ
息用を用いた）がＯリング状のゴム製のストッパ２２に
より固定されている。

本実施例の構成により１〜５μＱの溶液中の試料をも、
試料台の目的の位置に沈降させることが可能となった。

実施例４ 第５図において、試料台保持部４は試料台の機能をも兼
備えており、遠心後に試料は試料台保持部のくぼみに沈
降している。遠心後、試料保持部を取り去り、試料台保
持部のくぼみに試料を吸着させたまま通常の処理を行い
、走査型電子ｍ微量により試料の表面構造なａ６するこ
とができた。

〔発明の効果〕

本発明によれば、微量な試料でも直径１閣程度の範囲内
に確実に沈降できるので、従来不可能であった１００細
胞以下、あるいは５μΩ以下という微量サンプルを遠心
処理することが可能になった。また、セルを二律構成に
したことで、従来試料取出しの際に多かった、沈降試料
の脱落を防ぐことができるようになった。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の実施例１の遠心用セル全体の縦断面図
、第２図は第１図の試料台部を拡大して示した断面図、
第３図は本発明の実施例２のセルの試料誘導路周辺の断
面図、第４図及び第５図はそれぞれ本発明の実施例３，
４のセル全体の断面図である。 １・・・試料誘導路、２・・・試料台、３・・・試料保
持部、Ｖ、ｔ　　口 嘱　５色

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、遠心分離機の遠心沈澱用セルにおいて、試料を沈降
   付着させる試料台を保持する試料台保持部と、試料台よ
   り小さい面積の孔径の末端を少なくとも一つ持つ試料誘
   導路とを設けた試料保持部より構成されることを特徴と
   する微量遠心分離用セル。