JPS62249925A

JPS62249925A - 皮膚病治療用組成物

Info

Publication number: JPS62249925A
Application number: JP8916786A
Authority: JP
Inventors: サング　ラン　フシア; ウオルター　ボイグト; マーテイ　サワヤ; キヤスリン　ゼオリ
Original assignee: University of Miami
Current assignee: University of Miami
Priority date: 1986-04-17
Filing date: 1986-04-17
Publication date: 1987-10-30

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】発明の分野本発明は皮膚の過アンドロゲン作用ににりおこる皮春障
害の防止、特にプレグネノロン（△５−プレグネンー３
β−オールー２０−オン）を使って、そのＪ：うな過ア
ンドロゲン作用を冶療又ｔま減少させる発明に関する。

発明の背蒙いくつかの皮ｌｉ障害はアンドロゲンの刺激に対する皮
ｎの過剰反応の結果である。これらにはアクネ・ブルガ
リス、脂漏症、多毛症（女性の望ましくない発毛）およ
び男性型ハゲがある。アクネ・ブルガリスは特に若人の
間に共通している。これにはまた開閉したニキビ、化膿
性丘疹、プステル、シストおよび顔、胸、背中の結節に
特徴がある。この病気はアンドロゲン刺激に対する感受
性の皮脂腺に主として悩まされる。この腺のアンドロゲ
ンに対する過剰反応はアクネの多因了異変の重要な特長
である。この病気は肉体的・精神的両方にひどいＩ痕を
残す。

患者がストレスの状態にあると、アクネ病変はしばしば
突発し又は悪化することは共通の臨床知見である。これ
は、副腎皮質の分泌がストレスに感応して増大する時で
ある。副腎皮質により分泌される最も１富なステロイド
はデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＴ）およびぞの
硫ｍ塩−ＣあるＤＨＡは弱いアンドロゲン活性を有する
が、本発明やその他の研究者の研究によれば、それは皮
膚にて容易に代謝されて、潜在性アンドロゲンステロイ
ド、アンドロステンジオン、テストステロンおよびジヒ
ドロテストステロン（ＤＨＴ）を生成する。これらのス
テロイド特にＤ　ＨＴは皮脂活性を増大させかつアクネ
病変をさらに悪化さける。

理論的には、アクネ・ブルガリスの場合、Ｄ　Ｉ−Ｉ　
Ａをこれらの潜在的アンドロゲンに転換するのを抑止す
るのが望ましい。最近の研究では、ヒトの皮脂腺におけ
るΔ５−３β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ
Δ４−５−イソメラーゼの活性とそれらの分泌・活性間
の有意な相間々係を見出した（　Ｓｉｍｐｓｏｎ等、Ｊ
、　Ｉｎｖｅｓｔ、　Ｄｅｒｌａｔｏｌ、　８１　：１
３９−１４４．１９８３）。この活性活性はＤＮＡを一
層強いアンドロゲンに転換する第１工程に含まれる。

急性のアクネ・ブルガリスの現在市販されている治療薬
は次の通りである。

局所用抗生物質−１リスロマイシン、タリンカマイシン
。

局所用角化分解剤−過酸化ベンゾイル、レチノン酸、硫
黄。

経口用抗生物質−テトラサイクリン、その誘導体、■リ
スロマイシン。

ビタミンＡと誘導体−ビタミンＡ１毎口２５゜０００−
５０，０００単位、１３−シス　レチノン酸（アキュタ
ン）。

しかし、アクネの既存治療は全て欠点を有する。

例えば、レチノン酸又は過酸化ベンゾイルを局所適用す
ると、皮膚を刺激し、かつ剥皮の原因にな。　る。この
ような薬剤は急性のアクネ病変の治療に有効ではあるが
、赤味、刺激および皮膚の望ましくない外観の原因とな
る。抗生物質を使うと、体内の微生物環境を変えるとい
う望ましくない副作用を伴なう。アキュタンを内部適用
すると、血・中リピドを変え、肝臓毒性の原因となる。

明かに、抗アンドロゲン作用を示しかつ先行技術の問題
・欠点を回避する物質又は組成物は、皮膚の過アンドロ
ゲン作用となる状態に罹っている人に有用である。この
ような組成物が本発明の本質である。

発明の概要本発明は皮膚の過アンドロゲン作用を伴なう状態を治療
するのに有用な組成物を供し、この組成物は治療有効量
のプレグネノロンを含む医薬上許容可能なキャリアーか
ら成る。

プレグネノロンは天然由来のステロイドで次の式を有す
る。

プレグネノロンはプロゲステロンやコーチコステロイド
の生合成の中間体である。しかし、それ自身ホルモン活
性は知られていない。

プレグネノロンは酵素３β−ヒドロキシステロイド　デ
ヒドロゲナーゼ　Δ　　−イソメラーゼ（３βＨ８Ｄ）
の阻害剤であると知見から本発明はうまれた。この阻害
活性はプレグネノロンの抗アンドロゲン活性に基づく。

３βｌ−Ｉ　Ｓ　Ｄは弱いアンド０ゲン副腎ステＯイド
［））−ＩＡをさらに強いアンドロゲンアンドロステン
ジオンに転換し、順次皮膚にてテストステロンおよびＤ
ＨＴを生成する酵素である。ＤＨＡのこれらの代謝産物
は過アンドロゲン作用の原因と考えられている。

したがって、３β＋ｉ　ｓ　ｎを有効に阻害りることに
Ｊ：す、過アンドロゲン作用は効率的に抑制又は減少す
ることがＣ′きる。

本発明の目的は皮膚の過アンドロゲン作用を阻止、減少
する組成物を供するにある。

更に別の目的は皮膚の過アンドロゲン作用が原因の状態
および障害を阻止しかつ減する組成物を供することにあ
る。

また先行技術の諸問題を回避する組成物であって、皮膚
の過アンドロゲン作用を阻止し、減する組成物を供する
ことも本発明の目的である。

本発明のこれらの目的やその伯の利点は本発明の望まし
い態様の次の詳細な記述から更に明らかになる。

詳細な記述プレグネノロンのアンドロゲン阻止活性を評価するため
に、ラットの包皮腺を使って、ＤＨＡのインビトロアン
ドロゲン作用を研究した。包皮腺の生育はアンドロゲン
の刺激に感応することが示されだが、■スト日ゲン又は
副腎皮質ステロイドではない（旧＋ｇｇｉｎｓ等、Ｅｎ
ｄＯＣｒｉｎＯ１００Ｌ／、　５７．３５−３２、１９
５５）。一対の包皮腺を１２５−２００＃ｌ！？、平均
２００９のラット、雄の動物では稍々大きい、両性のラ
ットの包皮におく。使用動物は雌のスプレーグ・ドウリ
イラット、１０−１２週齢、体重２２５〜３００ｇであ
る。

簡単に言うと、実験はラットから包皮腺を摘出し、それ
よりホモジネートを調整Ｊることである。

所定のホモジネート（試料）をプレグネノロンの存在又
は不存在で、ラベル（３ト目したＤＨＡでスパイクし、
ついで試料を培養した。ついで試料を抽出して、ステロ
イド（即ち、Ｄ　Ｎ　Ａと代謝産物）を回収し、薄層ク
ロマトグラフィによりＤｌ−ＩＡと代謝物を分離した。

代謝産物は薄層プレー１・から取り出しそしてシンチレ
ーションカウンターでカラン］へすることにより定量し
た。代謝産物の生成度を測ることにより、３βＨ８Ｄ（
７）Ｉｌｆｌ害度がり・ｊ応して測定できた。

包皮腺を得るために、畑のラツ１へ（特に断わられない
限り）を３つの方法：エーテルの多聞吸入、ネンブトー
ル　ナトリウム溶液（０，４ｄ）の腹腔内注射又は後頭
部打撃の１方法により殺し、包皮腺を摘出し重けを測っ
た。一対の包皮腺の大体の小さは雄成熟ラットで１ｌ２
５−１７５ＩＩｔ、雌では１５０−２００〜であった。

ポリトロンホモジナイザー、型ＰＴ　１Ｏ−３Ｔ（にｉ
ｎｅｍａｔｔｃａ、スイス、ルザーン）によりボルテー
ジコントロート３−５で約３０秒０．１Ｍヒトリスバッ
ファー中ンチした法線を捕潰して満、足のいく均質化を
行なった。別法はモーター駆動の全ガラスＩＪｉ維布ホ
モジナイ量アー（Ｔｅｎ　Ｂｒｏｅｃｋ＞を使うことで
ある。全体の操作は４℃以下で行なった。

後者の方法は、０．１Ｍクエン酸／リン酸バッファー、
ｐＨ７，４中、バンドＩ−■における単１１１ｔ１１１
胞の均質化のために使った（ｕｓｔａ等、Ｊ、　Ｓｔｅ
ｒｏｉｄＢｉｏｃｈｅｍ、　１９：５９９−６０５（１
９８３）　）。

Ｄ　Ｉ−Ｉ　Ａとその代謝産物をクロマトグラフで分別
できるように最初実験を行なった。クロマトグラフの操
作は、５　ｃｍ巾、４０ｃｔｒｒ長、３／８馴厚さのガ
ラスプレートートシリカゲル１−１で調整した薄層板で
行なった。プレー１−を８０°、３０−６０分活性化し
、ジクロロメタン：酢酸エチル（４：１、Ｖ／Ｖ）の溶
媒系にて展開した。室温で１８時間展開させた後、キャ
リアーム４−３−ケト（代謝産物は主としてアンドロス
テンジオンであり、テストステロンは牛用である）ステ
ロイドをＵ　Ｖ光線により明視化し、他は沃素蒸気に暉
らした。マシコーズ等（１９６２）の方法ににれば、展
開したプレー１−を数分間沃素蒸気におくと、初め見え
ないステロイドのスポットが黄色又は黄褐色になる。こ
のステロイドの位置はこの方法により容易にトレースす
ることができる。過剰の沃素は温風（３０−５０℃）で
相から容易に除去できるから、Ｃ１９ステロイドは検出
中分解しない。ステロイドの溶離と定量評価は沃素を除
いた後に行なうことができる。３−ケト−４−エンおよ
び５−エン−７−ケト構造を有するステロイドは２４０
ｍμ波長のＵＶ光を吸収し、ＵＶ光を照射すると、赤褐
色のスポットがアルミナ又はシリカゲル薄層プレ−トに
ステロイドの部位に現われる。定量のために、パラカー
ド・トリカーブ液体シンチレーションカウンターにて３
ト１のラジオアッセイについて１　ｃｔｓ区分でプレー
トをスクレープした。シリカゲルＨブランクと３１−１
−標準（パラカード・インストルメント社）もカウント
した。長いプレートを使うこのＴＬＣ系は明らかに対照
ステロイドを分離した（第１図）。展開１８時間後のス
テロイドの動きは次の通りであった。アンドロステンジ
オール、７−９　ａｎ　：アンドロスタンジオール、１
０−１２ｃｍ：テストステロン、１７−１９　ｃｍ　：
　Ｄ　ＨＡ、２２１−２３ｔ：Ｄ）−ＩＴ、２３−２５
　ｃｍ　；アンドロステンジオン、２７−２９　ｃｍお
よびアントロスタンジオン、３２−３４　ｃｍ、これら
のＴＬＩは、ＤＨＡおよびその代謝産物をクロマｌ−ｌ
ｊラフにより分離できることを明かに立証した。

ステロイド代謝活性は、非うジオ活竹１）ＨＡ１ｏｏｎ
モルで稀釈した１、２−３１１−ＤＨＡ　（１０６ｄｐ
ｍ）と共にホモジネートを培養して測定した。スーｊロ
イド基質をエタノールに溶解し、資料１０　ｕ　１をタ
ン白質２　ｍ’Ｊに相当する包皮線ホモジネートに加え
た。ＮＡＤ、ＮＡＤＨｌおよびＮΔＤＰＨ−発生系も包
含した。

混合物を培養し、所定の時間３７℃で振盪し、ドライア
イス／アセトン浴に培養管を浸漬し、続いて凍結乾燥し
て培養を終えた。キャリアーステロイド大体１００μシ
のテストステロン、ＤＨＴ。

アンドロステンジオン、アントロスタンジオン、アント
ロスタンジオール、アンドロステンジオールおよびＤ　
ＨＡを加え、その混合物をエタノールで繰り返えし抽出
した。キャリアーステロイドは、−上記したクロマトグ
ラフ操作に続くＵｖ光線下ＤＨＡとその代謝産物を検出
するのに加えた非ラジオ活性ステロイドである。抽出物
をＮ２ガス流下濃縮し、残渣をクロマトグラフ分離用薄
層プレー１〜に適用した。測定したラジオ活性に基づい
て、この操作による３Ｉ−１の回収は〉９５％であった
。

生成物に転換したＤ　ｌ−Ｉ　Ａ基質の割合は次の様に
計算した。

生成物の昂は最初に添加した基質ｎモルの生成物ピーク
中ラジオ活性割合から計算した。

Ｄ　Ｉ−Ｉ　Ａの３βＨＳ　Ｄに対するプレグネノロン
の阻害活性はプレグネノロンの存在又番よ不存在下で生
成したラジオ活性のアンド０ステンジオンの量から計算
しそして阻害剤の不存在下で生成したΔ４−３−ケト生
成物（主にアンドロステンジオンと少量のテストステロ
ン）の令聞割合として表やした。４つの別々の培養はプ
レグネノロンについて９１〜９２％の阻害範囲を示した
。

皮脂腺に及ぼすホルモンおよびホルモン活性物質の影響
は動物モデルとしてシリアハムスターの側腹器官を使っ
て評価することもできる。ハムスターを使う実験結果は
、ラツ１〜の包皮線を使う上記のようなインビトロ実験
のインビボによるＴＭｍができるから有益である。コス
トパーティプラルスポット又はコストパーティブラル器
官と呼ばれる側腹器官は動物の各横腹におる皮脂構造で
あるヒトの皮脂腺およびラットの皮脂腺のように、それ
らはアンドロゲン依存性である（ＶｏｉｏｔとＨｓｉａ
。

１９７３；　Ｇｏｍｅｚ　とＦｒｏｓｔ、　　１９６９
；　　ＦｒｏｓｔとＧｏｍｅｚ。

１９７３）。

成熟雄ハムスターの器官は大体直径８履で、ひどく着色
しており、暗い粗毛で被われている（ＶｏｉｇｔとＨｓ
ｉａ、　１９７３）　。雌の動物の器官は未発達で、約
２ｍの直径であり、淡く着色し、暗い色はなく、特に見
つけるのが難しい。アンドロゲンに感応してこの器官の
解剖的かつ組織学的な変化はｌｌａｍｉｌｔｏｎやＨＯ
ｎｔａＯｎａ（１９５８）ｋ：より記載された。

ハムスターの側腹器官はアンドロゲン活性のインジケー
ターとして供された。ｒｒｏｓｔとＧｏｍｅｚ（１９７
３）は、テストステロン、ジヒドロデストステロンーメ
チルテストステロン、Δ４−アンドロステンジオン、ア
ンド０ステロン、エビアンド日ステロンおよびプロゲス
テロンの段階的投与に対する雌ハムスターの側腹器官の
感応を試験した。局部適用（２週間、５日／週）の結果
は、次のステロイド：テストステロン、ＤＨＴ、メチル
テストステロン、アンドロステンジオンに対する皮脂腺
の生育と着色化の片側だＧ−１の刺激を示した。試験し
た伯の化合物、アンドロステ［］シン■ビアンドロステ
ロンおよびプロゲステロンは局部適用した場合、側腹器
官の生育又は着色の増大をおこさなかった。しかし、こ
れらの研究者による一層の研究では、雌のハムスター側
腹器官を刺激するのにＤＨＡのアンドロゲンポテンシャ
ルに関係しなかった。

ハムスターの側腹器官に対するプレグネノロンの抗アン
ドロゲン性を試験しかつその結果による前に、重要な疑
問に答える必要がある。□ＤＨＡは側腹器官における生
育を刺激することが示されたか？雌のハムスター（５匹
のハムスター／群）の右側に６週間（７日／週）、１２
μグ、６０　ｔ１３．１２０μグの段階的Ｄ　１１　Ａ
投与によりこの疑問に答えた。結果は局部的刺激だけで
なく、両側腹器官の刺激もあるから、全体的刺激である
ことを示した。

したがって、ハムスターの側腹器官はプレグネノロンの
アンドロゲン阻害性をインビボ試験するのに使った。

雌のシリアゴールデンハムスターをこの実験に使った。

すべてのハムスターは４″！ｆ４間各々、右側腹器官に
適用したＤＡＨ（１２０μｇ１０．１ｍｌ！アセトン）
で最大刺激した。同様に、左側はアセｉ〜ンで処理した
。ついでハムスターを２群に分Ｉｉだ。

１）対照−最大に刺激した器官に局部的に阻害剤を適用
しなかった場合。

２）プレグネノロン処理−プレグネノロンを最大に刺激
した側腹器官に各々（左と右）３日間局部適用した。

３日目の午後に、エーテル麻酔した両実験群に１．２−
３８−ＤＮＡ　（５μＣ１１０，１ｄ塩水バツフアー液
）を心臓内に注入した。注入侵１時間で、ハムスターを
殺し、側腹器官（左と右）を摘出し、液体Ｎ２に入れ、
重さを測った。ついで各器官をメタノール含有１６Ｉｆ
ＦＩＲ×１５０＃ｌＩＩ＋試験管に入れ、ホモジナイズ
し、抽出し、上記のように薄層クロマトグラフィを使っ
て代謝産物を分【ノ、ステロイド代謝産物について試験
した。分別した代謝産物を薄層プレートにより掻き取り
、シンブレーションカウンターを使って定量した。既述
したように計算を行なった。

結果は第２図に示す（ＤＰＭ／ｍｙ組織）。

包皮腺ミクロゾームにおいて予め観察したＤＨへの３β
Ｈ８Ｄに及ぼすプレグネノロンの明害効果はこのインビ
ボ実験でも見られたことを結果は示した。有意な差（Ｐ
＜０．０１）は、プレグネノロンを局部適用したハムス
ターに対し、局所阻害剤を受容しない対照群のものにお
ける１、２−３Ｈ−Ｄ）−ＩＡから転換した合体の代謝
産物にみられた。

阻害剤で処理しなかった対照ハムスターは、プレグネノ
ロンで予め３日間処理したハムスターよりテストステ日
ン、ＤＨＴおよびアントロスタンジオンを大いに生成し
た。

上記の実験によれば、プレグネノロンは強いアンドロゲ
ン活性を示すことを結論している。

ヒトに使用する処方については、プレグネノロンは水不
溶性であるから、殆どのペースビヒクルまたはキャリア
ーは本発明では有用でない。イソプロパツール又は長鎖
（Ｃ４−Ｃ１ｏ）アルカンあるいはアルケンを有するア
ルコール混合物の如き高アルコール含量のビヒクルはリ
キッド、ゲル又はクリームとして処方の適当なベースを
供する。

グリセロールはエモリエン１へどして組成物に加えるこ
とができる。グリセロールは吸湿性であるから、皮膚表
面の乾燥を防ぐ。当業界で公知の加湿剤や香料はプレグ
ネノロンと混和性である。

ヒトの局部適用に有効なプレグネノロンの有用濃度範囲
は、プレグネノロン含有組成物を使用する重量に基づい
て約０．１％から特定の溶媒やキャリアーにおけるプレ
グネノロンの溶解性の上限の範囲である。さらに低い濃
醍では、治療効果は低くなるが、長時間かかることにな
る。

臨床試験の結果によれば、プレグネノロン含有組成物は
、過アンドロゲン皮膚状態による障害に罹っている患者
に対し高レベルの効果と適用性を示す。次の実験は曲型
的な試験法である。

二重盲検試験では、アクネ・ブルガリスの奉仕患者２３
名に参加してもらった。１５名の患者（女性１１名、男
性４名）には１％グリセリンを含むイソプロパツールに
溶解したプレグネノロンの１％溶液を供した。８名の患
者（女性５名、男性３名）にはグリセリンのイソプロパ
ツール１％溶液を供した。患者にも医者にも、供与する
溶液にプレグネノロンを含むかどうかは知らせない。

患者には予め２週間薬を使わないようにし、かつ１日に
二度顔に所定の溶液を塗るよう指示した。

これらは２週間毎に再試験した。。

処理後２週間して、１％グリセロールを含むイソプロパ
ツールの１％プレグネノロン溶液で処理した群の患者５
名（３３％）は病変の数と大きさが減った。５名の患者
（１３％）では油性の減少となり、そして４名の患者（
２６％）では病変と油性に変化はなかった。ある患者で
は皮膚にあいた孔の大きさが減り、皮膚が一層なめらか
になったことを認めた。特に、２人の患者は皮膚の油性
と孔の大きさの顕著な減少を示した。従って、皮膚の外
観はらよつとドラマティックな改善となった。

本明細書に開示した方法および組成物は一般に油性の顕
著な減少となり、油性は一般に皮膚過アンドロゲン作用
の主な徴候の１つであり、特脂漏症がそうである。

イソプロパツール中１％グリセロールで処理した群の内
、１名の患者は病変数の僅かな減少を示し、６名の患者
（７５％）は変化なく、１名の患者（１３％）は病変数
の増大を示した。

上記の結果から分ることは、アクネの治療にプレグネノ
ロンが有利な効果を示し、連続使用により新たな病変を
抑えた。プレグネノ０ンの局部適用により原因する刺激
や不快は見られなかった。

臨床試験に参加した多くの患者は前に他の薬を使用して
いた。プレグネノロンは彼等にとって一層有効でかつ受
容できるものであった。従来の治療法によりうまく行っ
ていれば、彼等はこの臨床試験には参加しなかったであ
ろう。プレグネノ日ンにより良結果を得たという事実は
、プレグネノロンが一層有効かつ許容しつるという証拠
である。

【図面の簡単な説明】

第１図はＤＮＡおよびその代謝産物のクロマトグラフに
よる分別を示すクロマトグラムである。第２図はプレグネノロンで処理した雌のハムスターと処
理しないものとの側脚器官における　Ｈ−ＤＮＡのグラ
フである。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）皮膚のアンドロゲン作用による障害の局所治療に
有用な組成物であって、この治療を行なうのに有効な量
のプレグネノロンを含有する医薬的に許容しうるキャリ
アーから成る、上記組成物。
（２）キャリアーはプレグネノロンを分散させる軟膏で
ある、特許請求の範囲第１項記載の組成物。
（３）キャリアーはプレグネノロンを溶解する溶媒であ
る、特許請求の範囲第１項記載の組成物。
（４）溶媒はアルコールである、特許請求の範囲第３項
記載の組成物。
（５）プレグネノロンは組成物の重量に対して少なくと
も約０．１％の量で存在する、特許請求の範囲第１項記
載の組成物。
（６）障害はアクネ・ブルガリスである、特許請求の範
囲第１項記載の組成物。
（７）病気は脂漏症である、特許請求の範囲第１項記載
の組成物。
（８）病気は多毛症である、特許請求の範囲第１項記載
の組成物。
（９）病気は男性型ハゲである、特許請求の範囲第１項
記載の組成物。