JPS62221627A - キノリン−２，８−ジカルボン酸誘導体を含有する医薬製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規化合物、混合物およびそれらの製法に関す
る。

ネトクロミル　すトリウム（ｎａｄｏｃｒｏｍｉｌ　５
ｏｄｉｕａ＋）は、９−エチル−６，９−ジヒドロ−４
，［ｉ−ジオキソ−１０−プロピル−４Ｈ−ピラノ（３
，２−ｆ）キノリン−２，８−ジカルボン酸のすトリウ
ム塩であって、アレルギーならびにその他の状態、特に
可逆性閉塞性気道疾患の治療における使用がＪｆｉ　５
！されてきた。

気管支拡張剤およびステロイドも可逆性閉塞性気道疾患
の治療における使用が推灸されてきた。

しかじから活性成分の組み合せ、特に固定量の組み合せ
を用いる治療は問題をひき起すことがあり、その結果と
してかかる組み合せを用いることに対する相当の偏見が
存在する。多くの患者において、規則的に例えば６週間
という長期間にわたって気管支拡張剤で治療することは
治療剤への応答の減退をもたらし、従って患者は保護さ
れなくなる。

ある場合には、気管支拡張剤の長期投与は反跳性気管支
収縮をもたらしさえしつる。他の場合には、混合物の成
分の一つがそれ自身で疾病の制御に充分であって他の成
分が余計なものとなる場合もありうる。

今、気管支拡張剤とステロイドから選択される吸入に適
する薬剤と祷→４条蘂ｉネドクロミルナトリウムとの混
合物、９−エチル−８，９−ジヒドロ−４，８−ジオキ
ン−１Ｏ−プロピル−４Ｈ−ピラノ（３，２−ｇ）キノ
リン−２，８−ジカルボン酸と前記薬剤との塩、および
これら塩とネドクロミルナトリウムｉまたは薬剤との適
当な治療比における混合物が種々の利点を存すること、
すなわち、軽減性かつ予防性であること、より効果があ
ること、応答性喪失がより少ないこと、副作用がより少
ないこと、気管支活動過多を低下させること、比較的少
量にて使用されうろこと、例えば吸入により、疾患の部
位に直接投与されうろこと、より頬度が少なく、例えば
１０１〜２回の投与ですむこと、長ＪｔｌＪ間の治療に
投Ｉ７−されうろこと、より長期間作用すること、ステ
ロイドにより誘発されるカンジダ症を減少させること、
より安定であること、相乗作用性であること、患者の応
諸性がより良好であること、ステロイドまたは気管支拡
張剤がそれら自体で使用された場合に比較して、または
ネトクロミル　ナトリウムがそれ自体で使用された場合
に比較してまたはある種の他の混合物に比較して、関連
する薬理学的モデルにおいて試験した場合に不快な味覚
がより少ないかまたは他の望ましい性質を有すること、
が見出された。

本発明によれば、 （ａ）「活性成分Ａ」としてのＩＦ！またはそれ以上の
９−エチル−６，９−ジヒドロ−４，８−ジオキン−１
０−プロピル−４Ｈ−ピラノＨ，２−ｇ〕キノリン−２
，８−ジカルボン酸またはその医薬上受容されうる塩、
を （以下余白） （ｂ）「活性成分Ｂ」としての、気管支拡張剤、ステロ
イドおよびそれらの医薬上受容されうる誘導体から選択
される吸入に適する１種またはそれ以上の薬剤、 と組み合せて含有する医薬混合物が提供される。

ネトクロミル　すトリウムとして知られる９−エチル−
〇、９−ジヒドロ−４，０−ジオキソ−１０−プロピル
−４Ｈ−ピラノ（３，２−ｇ）キノリン−２，８−ジカ
ルボン酸のナトリウム塩を使用するのが好ましい。唯一
種の活性成分Ａを活性成分Ｂとしての１種の気管支拡張
剤または１種のステロイドのいずれかと混合して使用す
ることが好ましい。

成分Ｂでありうる気管支拡張剤にはイソブレナリン（１
ｓｏｐｒｃｎａｌ　Ｉｎｃ）が包含される。

しかしながら、気管支拡張剤はＢ２−選択的であるのが
好ましい。

Ｂ２−選択的気管支拡張剤はＢ１−アドレノセブターに
対してよりもＢ２−アドレノセブターに対してより大き
い親和性を存するβ−アドレノセブター作働薬であり、
８２−アドレノセブターを刺激すると気管支筋（および
動脈筋および子宮筋で）を弛緩させるが、Ｂ１−アドレ
ノセブター作働薬は心臓刺激（および脂肪分解）を生ず
る。

Ｂ２−選択性を判定するには、その化合物の活性につい
て、（ａ）自然発生的緊張を有する単離されたモルモッ
トの気管標本の弛緩剤として（ＥＣ５ｏ−イソブレナリ
ンに対する最大弛緩応答の５０％を生ずるモル濃度）、
および（ｂ）モルモットの心臓から単離された自然発生
搏動性心房の心房搏動頻度増大（ＥＣ５ｏ−インブレナ
リンにより誘発される最大搏動増加の５０％を惹起する
モル濃度）、を比較する。Ｂ２−選択的化合物は心房に
対してよりも気管に対してより低いＥＣ５ｏを有してい
よう。負のｌｏｇ　Ｅ　Ｃ３ｏ（気管）と負のＪｏｇ　
Ｅ　Ｃｓｏ　（心房）との間の差の真数である選択度比
が判定されつる。

この選択度比が大きければ大きいほどその化合物はＢ２
−アドレノセブターに対してより選択的である。

Ｂ２−選択性気管支拡張剤は長期間作用性であるのが好
ましい。「長期作用性」なる用語はその化合物が薬理試
験において気管支平滑筋の弛緩剤としてインブレナリン
またはオルシブレナリン（ｏｒｃｌｐｒｏｎａｌ　Ｉｎ
ｃ）よりも長い作用期間を有することを意味する。作用
期間の研究には、麻酔されたモルモットにおけるアセチ
ル　コリンまたはヒスタミンにより誘発された気管支Ｙ
痙学の阻害剤としての等活性生体内量の効果を比較する
。かかる試験におけるイソブレナリンの作用期間は比較
的短い（正常に戻るまでの調節応答１０〜２５分）。比
較的作用期間が長い化合物の場合、調節応答は幾倍か長
い時間経過後にやっと正常値に戻る。

詳細な気管支拡張剤としてあげられうるものはテルブタ
リン（ＬｅｒｂｕＬａｌ　Ｉｎｅ）、フェノテロール（
１’ｅｎｏｔｅｒｏｌ）、レプロテロール（ｒａｐｒｏ
Ｌｃｒｏｌ）、ピルブチロール（ｐ［ｒｂｕｔｅｒｏｌ
）　、リミテロール（ｒｉａ＋（ｔｅｒｏｌ）、オルシ
ブレナリン（ｏｒｅｉｐｒｅｎａｌ　１ｎｅ）そして特
にサルブタモール（ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ）である。

活性成分Ｂとしとて使用するのに適当なステロイドには
ヒドロコルチゾン、およびより活性な化合物例えば、吉
草酸　ベタメサゾン（ｂｃＬａｍａＬｈａｓｏｎａ　ｖ
ａｌａｒａＬａ）　、酪酸クロベタソン（ｅｌｏｖｃＬ
ａｓｏｎａ　ｂｕＬｙｒａＬｃ）　、フルシノニド　ア
セトニド（［’１ｕｏｃｉｎｏｌｏｎａ　ａｃｃＬｏｎ
ｌｄｃ）　、フルオコルトロン　ヘキサノエート（１’
　１ｕｏｃｏｒＬｏｌｏｎｃｂｃｘａｎｏａＬｃ）、ベ
クロメタゾンジブロピオネート（ｂｃｅｌｏｍａＬｂａ
ｓｏｎｃ　ｄｌｐｒｏｐｌｏｎａＬｃ）、酪酸ヒドロコ
ルチゾン（ｂｌｄｒｏｃｏｒＬＩｓｏ＋ｔｃ　ｂｕＬｙ
ｒａｔｃ）、吉程（酸ジフルコルトロン（ｄｌｌ’１ｕ
ｃｏｒＬｏｌｏｎｃ　ｖａｌｃｒａｔｃ）％トリアムシ
ノロン　アセＩ・ニド（Ｌｒｌａｍｃｉｎｏｌｏｎｃａ
ｅａＬｏｎｌｄｃ）、フルシノニド（ｒ　１ｕｃｉｎｏ
ｎｉｄａ）、デソニド（ｄａｓｏｎｉｃｌａ）　％フル
ランドレナロン（（’　１ｕｒｐｎｄｒｏｎａｌｏｎｃ
）、ピバル酸フルメタゾン（ｆ’１ｕＩＩｌｃＬＩ＋ａ
ｓｏｎａ　ｐｌｖａｌａＬｃ）、メチルプレドニソロン
、プロピオン酸　クロベタゾール（ｅｌｏｔ＋ｃｔａｓ
ｏｌｐｒｏｐｒｉｏｎａｔａ）、ハルシノニド（ｂａｌ
ｅｌ＋ｏｎ［ｄｃ）、チキソコルトール（ＬＩｘｏｅｏ
ｒＬｏｌ）　、プレドニソロン、およびフルプレドニリ
デン−２１−アセテートが包含される。

活性成分Ｂがベクロメタソン　ジプロピオネートである
のが好ましい。

本発明によればＢ　−２選択的気管支拡張剤とステロイ
ドとから選択される、吸入に適する塩基性薬剤と９−エ
チル−６，９−ジヒドロ−４，６−ジオキソ−１０−プ
ロピル−４Ｈ−ピラノ　（３，２−ｇ）キノリン−２，
８−ジカルボン酸との塩も提供される。

この塩は複分解法、例えば９−エチル−６，９−ジヒド
ロ−４，６−ジオキソ−１０−プロピル−４Ｈ−ピラノ
（３，２−ｇ”Ｊキノリン−２，８−ジカルボン酸の適
当な塩例えばジナトリウム塩を、吸入に適する薬剤であ
る塩基の適当な塩例えば塩酸塩または硫酸塩と反応させ
ることにより製造されうる。

しかしながら塩は好ましくは遊離の酸である９−エチル
−０，９−ジヒドロ−４，８−ジオキソ−１０−プロピ
ル−４Ｈ−ピラノ　　（３，２−ｇ）キノリン−２，８
−ジカルボン酸を吸入に適する薬剤の遊離塩基と反応さ
せることにより製造される。なぜならかかる方法では副
生物である無機塩が生成されないからである。

この反応は反応条件下に不溶性である溶媒中で実施され
うる。溶媒は所望される塩が溶解できるもの、例えば水
、が好ましい。所望の塩は単離し、そして例えば結晶化
または凍結乾燥により精製されうる。

それゆえ本発明によれば、溶液中でない塩例えば実施的
に乾燥した形態の塩、または塩すべてを溶解させるには
不充分である液体例えば水と混合した塩が提供される。

塩は、所望の場合は、９−エチル−６，９−ジヒドロ−
４，［ｉ　　−ジオキン−！ロープロピルー４Ｈ−ピラ
ノ（３，２−ｇ）キノリン−２，８−ジカルボン酸の１
種またはそれ以上の他の塩、特にそのジナトリウム塩と
一緒に使用されうる。

組成物中における活性成分ＡとＢの比率は個々の活性成
分、および組成物が意図される特定の目的に応じて変動
しよう。

活性成分Ａそれ自身が９−エチル−〇、９−ジヒドロ−
４，６−ジオキン−１Ｏ−プロピル−４Ｈ−ピラノ（３
，２−ｇｌキノリン−２，８−ジカルボン酸と吸入に適
する塩基性薬剤例えばＢ２−選択性気管支拡張剤との塩
である場合は、活性成分Ｂとして「遊離の」塩基性試薬
またはその他の塩を使用する必要がないか、または非常
に少ない割合でしか使用する必要がない。

吸入用の活性成分Ａの適当な量は１〜１００ａ＋ｇであ
りそして好ましくは１〜２ｈ＋ｇである（ネトクロミル
　ナトリウムとして測定）。

吸入用の活性成分Ｂの適当な薬量および活性成分Ｂの１
ｆｌｌ１部に対する活性成分Ａの適当な重量部数は（ネ
トクロミル　ナトリウムとして測定し　　　　−て）以
下に詳しく示しである。

（以下余白） 成分Ｂの薬量が一時的作用よりも持続性を生ずるような
量であるのがはるかに好ましい。

混合物は１日当り１〜６回、好ましくは２〜４回に分割
して投与することができる。それぞれの量は１つまたは
それ以上の単位量からなることができる。

本発明による任意の組成物中における個々の活性成分Ａ
およびＢの詳細な比率は広範囲に変動しうる。しかしな
がら、活性成分Ｂの１重量部に対し０．４〜４００重量
部、より好ましくは２〜２００重量部の活性成分Ａ（ネ
トクロミル　ナトリウムとして測定して）を含有する組
成物が好ましい。

本発明による混合物はそれ自体知られた慣用の技術を用
いて種々の活性成分を混合することにより製造されうる
。

本発明の塩、混合物および組成物は動物に薬理作用を有
するゆえに有用である。特にそれらはある種の抗体と特
異的な抗原との生体内組み合せ、例えばレアギン抗体と
特異的な抗原との組み合せから生ずる薬理学的なメジエ
ータ−の放出および／または作用を阻害するので有用で
ある（英国特許第１．２９２．ＧＯ１号実施例２７参照
）。これら塩および組成物はまた肥満細胞の脱顆粒反応
を阻害し、そして実験動物および人間における反射経路
、特に肺機能と関連した反射を妨害することも見出され
た。人間においては、感作された患者が特異的な抗原を
吸入することから生ずる主観的変化および客観的変化の
両方ともがこれら新規塩および組成物を予め投与するこ
とにより阻１１−される。従って、新規な塩および組成
物は可逆性気道閉塞の治療および／または過剰の粘液分
泌の阻！１−に自°用である。従ってこれらはアレルギ
ー性喘息、いわゆる内因性喘息（これは外因性抗原に対
してｆｉｆら感受性を示さない）、運動等により誘発さ
れた喘息、鼻炎、農夫の肺、鳥愛好家病、気管支炎、咳
（百日咳を含む）および感冒に関連した鼻および気管支
の閉塞の治療にａ用である。これら新規な塩、混合物お
よび組成物は抗原−抗体反応または過剰な粘液分泌が原
因であるかまたはそれらを伴った疾病において他の状態
の治療にも価直がある。

本発明の新規な塩、混合物および組成物は多種類の径路
により投与できそして全身的にまたは局所的に作用しう
る。従ってこれら化合物は径口または鼻内吸入により肺
へ、直接鼻または眼へ、頬面窩洞へ、食道から、または
身体の他の有用表面に投与されうる。新規な塩または混
合物は症候を示す４管、または身体の一部に、または症
候を示すところと離れた部分に直接投＋７．することが
できる。

本発明によれば、 （ａ）「活性成分Ａ」としての１種または２種以上の９
−エチル−６，９−ジヒドロ−４，６−ジオキソ−１Ｏ
−プロピル−４Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ〕キノリン−２
，８−ジカルボン酸またはその医薬１−受容されうる塩
の治療上自°効なＬＵを、 （ｂ）「活性成分Ｂ」としての、Ｂ２−選択性気管支拡
張剤、ステロイドおよびそれらの医薬上受容されつる誘
導体から選択される吸入に適する１１４またはそれ以上
の薬剤の治療上角°効な量と組み合せて、可逆性閉塞性
気道疾患に罹患している患者に同時にまたは時間的に分
けて投与することからなるかかる疾患の治療法も提ＯＬ
される。

この治療法は好ましくは毎日規則的に、例えば１０１〜
４回行われる。この方法は長期間、例えば少くとも４週
間、より好ましくは少くとも８週間にわたり実施される
のが好ましい。この方法は、固定量の活性成分Ａを固定
量の活性成分Ｂと同時に投与するのが好ましい。

本発明の新規な塩、混合物および組成物はそれら自体で
か、または他の活性化合物のＩＰＩｉまたはそれ以上と
一緒にして種々の投薬スケジュールで使用されうる。

本発明の新規な塩、および混合物と組成物の活性成分は
広範囲の粒径で製造されうる。従って吸入および他の用
途にとっては、化合物は質ｔｉ１１１シ均直径０．０１
〜１０．好ましくは２〜６、そして最も好ましくは２〜
４ミクロンを有しうる。

本発明によれば、（好ましくは８０重ユ％以下、より好
ましくは５０重量％以下）の本発明による塩または混合
物を、医薬上受容されうるアジュバント、希釈剤または
担体と混合して含（＝ｒする医薬組成物も提供される。

適当なアジュバン！・、希釈剤または担体の例を示せば
下記のとおりである。

錠剤、カプセルおよび糖衣錠−徹品質セルロース、燐酸
カルシウム、けいそう土、糖例えばラクトース、デキス
トロースまたはマンニトール、タルク、ステアリン酸、
澱粉、重炭酸ナトリウムおよび／またはゼラチン、生薬
−天然のまたは硬化された油またはワックス、そして吸
入用組成物−組ラクトース。

吸入による投与には新規な塩または混合物は圧縮ガス例
えば窒素、または液体噴射剤を用いて加圧エーロゾル組
成物として製剤化でき、組成物は好ましくは１〜２０９
６ｖ／ｖの活性薬剤（類）を含゛ｑする。

新規な塩または混合物はまた霧状化された溶液としても
投与されうる。

本発明を下記実施例により説明する。

実施例　１ ネトクロミル　ナトリウム（２ｍｇ）および硫酸サルブ
タモール（０，１ｍｇ）を放出する加圧されたエーロゾ
ル ネドクロミルナトリウム （微粉化、乾燥物）　　　　１．４４２０％ｖ／ｖサル
ブタモール（微粉化）　　　　０．０７２１ソルビタン
トリオレエート　　　０．５０００ジクロロテトラフル
オロエタン ３９．１９４４ ジクロロジフルオロメタン　　５８．７９１５ジクロロ
ジフルオロメタンを一５５℃に冷却しそしてその中に高
剪断ミキサーを用いてソルビタントリオレエートを分散
させる。この混合物中にエタノール　スルフニー１・を
分散させ、予め一５５℃に冷却したジクロロテトラフル
オロエタンを加える。この懸濁液を缶に充填し、モして
６缶に１００μＩＩ′ｍの計量バルブを設ける。

実施例　２ ネトクロミル　ナトリウム（２ｍｇ）およびテルブタリ
ン（０，２５ｍｇ）を放出する加圧されたエーロゾル。

ネドクロミルナトリウム （微粉化、乾燥）　　　　１．４２８８％ｖ／ｗテルブ
タリン　（微粉化）　　　　０．１７８６ソルビタント
リオレエート　　　０．５０００トリクロロフルオロメ
タン　　２４．４７３２ジクロロテトラフルオロエタン ２４．４７３２ ジクロロジフルオロメタン　　４８．９４８４トリクロ
ロフルオロメタン中にソルビタン　トリオレエートを溶
解させそしてこの溶液中にネトクロミル　ナトリウムお
よび硫酸テルブタリンを分散させる。この溶液を一５５
℃に冷却しそして−５５℃に冷却したジクロロテトラフ
ルオロエタンおよびジクロロジフルオロメタンを加える
。この懸濁液を缶に充填しモして６缶に１００μｇ容量
の計量バルブを設ける。

実施例　３ ネトクロミル　ナトリウム（２ｍｇ）およびレプロテロ
ール（０，５ｍｇ）を放出する加圧されたエーロゾル ネドクロミルナトリウム （乾燥、微粉化）　　　　１．４Ｂ８３％ｖ／ｖレプロ
テロール　塩酸塩 （微粉化＞　　　　ｏ、ａｅｅｅ ソルビタントリオレエート １．００００ トリクロロフルオロメタン　　１０．００００ジクロロ
テトラフルオロエタン １３．０７５１ ジクロロジフルオロメタン　　７４．０９２０実施例２
におけると同様にして製造。

実施例　４ ネトクロミル　ナトリウム（２ｍｇ）およびベクロメタ
ゾン　ジプロピオネート（０，０５ｍ１）を放出する加
圧されたエーロゾル ネドクロミルナトリウム （乾燥、微粉化）　　　　１．４４２０％ｗ／ｗベクロ
メタゾンジプロピオネート （微粉化）　　　　０．０３Ｇｌ ソルビタン！・リオレエート ０．５０００ シクロロチ！・ラフルオロエタン ３９．２０８８ ジクロロジフルオロメタン　　５８．８１３１実施例１
におけると同様にして製造。

本発明による混合物、塩および組成物の効果を以下の系
において調べた。

例　　　　Ａ ラットの受動性肺アナフィラキレー試験雌ラット（チャ
ールス　リバー系、体重２５０ｇ）に卵アルブミンに対
する強化されたラットＩｇＥ抗血清０．５ｍｌを静脈注
射することにより受動感作させた。

これらのラットをベンドパルビトン　ナトリウム（７０
ｍｇ　／　ｋｇ　）を用いて静脈から麻酔した。気管に
カニユーレに挿入しそして閉鎖系中でラットをバルマー
・ミニチュア・アイデアと（ＰａｌｍｅｒＭｌｎｉａｔ
ａｕｒｃ　Ｉｄｅａｌ）呼吸ポンプを用いて通気した。

気管圧は示差空気圧トランスデユーサ−（ＶＩＰ。

Ｐｙｅ　ＥＬｈｅｒ　Ｌｔｄ）に接続したカニユーレの
サイドアームにより記録した。呼吸速度は気管圧６ｃｍ
（水）で毎分９９回に設定された。

ラットに、感作４８時間後に卵アルブミン（２５■／　
ｋｇ、静脈内）の投与を行い、そして続く気管圧の増大
を気管を圧迫することにより測定して、ありうる最大の
気管支収縮度の％として表わした（ΔＰＣＢ　ａ＋ａｘ
）。

活性成分Ａおよび／または活性成分Ｂを単独でまたは組
み合せて、抗原投与の前に１〜５分間食塩水中で静脈か
ら投与した。

２ＰＩｉの化合物を組み合せて投与した結果を各セルに
ついて反復測定して要因配列の分散分析を行うことによ
り分析した。分析に先立ち平方根変換を行った。

２種の化合物の何らかの抵抗または相乗効果はベレンバ
ウム（ＩｌｃｒｃｎｂａｕＩｌｌ）氏のｒｃＩＩｎ、　
　ＥＸＩ）。

Ｉａ＋ｍｕｎｏ１．Ｊ　２８．１　（１９７７）記載の
方法を用いてさらに検査された。これは下記の値を計算
することからなる、すなわち、 Ａの薬用量　　　Ｂの薬用量 Ｚ＝Ａｃ　　　　＋　　　Ｂｅ 上式中（Ａ、Ｂ）は効果Ｘを生ずる組み合せ、Ａｃは効
果Ｘを有するＡ単独の量、 Ｂｅは効果Ｘを宵するＢ単独の量、 ここでＺ＜１である場合はＡとＢは相乗性である。

Ｚ−１である場合はＡとＢは付加的である。

Ｚ＞１である場合はＡとＢは拮抗性である。

例　　　Ｂ 気管支肺胞細胞からのメジエータ−放出の＋＋＋１害材
料および方法 材　　料 （３１１］＝Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン（５００
ｍ　　ＣＩ／ミリモル）および〔３２Ｐ〕　−オルト燐
酸（キャリア　フリー）はアマ−ジャム・インタナショ
ナル（Ａａ＋ｃｒｓｌ＋ａａ＋　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏ
ｎａｌ）　（英国、Ｂｕｃｋ　ｉ　ｎｇｌ＋ａａ＋ｓｂ
　ｉ　ｒｅ、ＡｉａｒｓｂａＩＩｌ）から得られ、ラッ
１−１　ｇ　Ｅに対する羊抗血清、ヒｌ−１ｇ　Ｅに対
するヤギ抗血清および正常なりギの而；ｉ’Ｊはマイル
ス・ラボラトリーズ（Ｍｉｌｅｓ　１．ａｂｏｒａＬｏ
ｒｉｃｓ）　（英国、ｎｕｃｋｉＢｌ＋ａＩＩｌｓｌ＋
Ｉｒａ、　！３１ｏｕｇｂ）から得られた。ヤギ抗ヒト
ＩｇＥおよび対照血清は４０％飽和硫酸アンモニウムを
用いて沈殿させ［１，ａｒｇｍａｎ氏他のｒＭａＬｂｏ
ｄ　ＩＥｎｇｙｍｏｌ、　Ｊ　　（１９８１）　７４　
：　２２　）そして透析後小球フラクションを本来の血
漬容ｊ；ｉに２１整した。回虫抗原は成゛虫ブタ回虫（
Ａｓｅａｒｌｓ　ｓｕｕｍ）偽体腔液体をＡｍｂｌｃｒ
氏他のｒＪ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　ＭｏＬＩ＋、　Ｊ（
＋９７２）、　　１．　３１７記載の方法を用い、セフ
ァデックスＧ２００（英国１３ｕｃｋ［ｎｇｂａｍｓｌ
＋Ｉｒｃ、　ＭＩＩＬｏｎＫｃｙｎｃｓ、　Ｐｈａｒｏ
＋ａｃｌａ　＞−１：製）でクロマトグラフィーするこ
とにより調製した。

マカークザルの感染および気管支肺胞洗浄体１１ｉ８〜
１８ｋｇのマカカ・アークトイデス（Ｍａｃａｃａ　ａ
ｒｃｔｏｌｄｅｓ）サル２０匹の群をこの研究に用いた
。動物をブタ回虫に感染させそしてＰｉｔｅｈａｒｄ氏
他のｒｃＩｌｎ、　ＥＸＩＴ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｊ
（１９８３）、　５４　：　４［ｉ９の記載と同様にし
て洗浄した。

洗浄液はヘパリン投与したチューブ中に回収して水中に
置いた。

ＢＡＬ細胞の処理 洗浄液を１７５μｍのナイロンメツシュを通して枦遇し
そして遠心分離（４５０ｇ、　　５分、４℃）により細
胞を回収した。この細胞を洗浄し、そして緩衝液（ｌｆ
ｆ１ｇ／ｍｌのゼラチンおよび５単位／ｍｌのヘパリン
を含有するｐＨ７，４のｌＯミリモルＩＩＩＥＰＥＳ緩
衝タイロード液）中に所望の操作希釈度となるまで再懸
濁した。示差細胞計測はキムテ（にｉｍｕｒａ）染色し
た湿った標本（２０）中で行われた。ヒスタミン放出の
みを測定すべき場合は、例えば放出剤および、成分Ｂ例
えば（３Ｘ　１０’〜ｔｏ−６Ｍ）およびネドクロミル
ナトリウム（３Ｘ　１０’〜１０−’Ｍ）を単独でおよ
び組み合せて含有する緩衝液０．０５ｍ１に肥満細胞１
０５／ｍｌの密度の細胞０．０５ｍ１を３７℃で添加す
ることにより三通りで細胞を攻撃した。

３７℃で２０分間インキュベートしたのち、２ｍＭのＥ
ＤＴＡを含有する氷冷された、Ｃａ２＋およびＭｇ２＋
不含の緩衝液０．２５ｍ１を添加することにより放出過
程を急冷させた。遠心分離したのち（４５０ｇ。

５分、４℃）　、０．２　ｍｌの上澄み液を試料採取し
てヒスタミンについて分析した。すべての阻害実験にお
いて、その動物の予備洗浄実験から、全ヒスタミンの１
５〜２５％を放出するが最大放出の半分以上とならない
最高値以下のレベルの抗原投与が選択された。

ヒスタミンの測定 ヒスタミンはＰｉｔｃｈａｒｄ氏他に記載されるように
して修正されたＢｏａｖｃｎ氏他のｒｃｌｉｎ、　Ｃｈ
ｉｎａ、　ＡｃｔａＪ（１９７２）、　３７．９７記載
の二重アイソトープ法により測定した。

例　　　Ｃ 成人喘息患者における非特異的な気管支活動過多 成人喘息患者が同意して研究に参加した。

Ｃｏｃｋｃｒｏｌ’を氏のｒｃｌｌｎ、　Ａｌｌｅｒｇ
ｙＪ　（１９７７）、　７゜２３５記載の方法によりヒ
スタミン投与を行った。

燐酸ヒスタミンの二重濃度（０，０３〜８ａｇ／ｍｌ）
を５分間隔で２分間吸入させた。各吸入の前、および０
．５分後および１．５分後にビタログラフ（Ｖｌｔａｌ
ｏｇｒａｐｈ）ドライ　ウェッジ肺活量計でＦＥＶ　　
を測定した。ＦＥＶｌが基準測定値から２０％またはそ
れ以上低下したら投与を中止した。

Ｌｏｇ量応答曲線を作成しそして最後の２点を挿入する
ことによりＰ　Ｃ２０を測定した。

例　　　Ｄ 特定のアレルギー性喘息に罹患しているヒト自発志願者
を選択して研究に用いた。これらのヒト自発志願者にお
いては喘息発作は通常その人が特異的な感受性を有する
抗原の吸入に続いて起こる。

この方法により誘発された喘息の度合いは気道抵抗を反
復検査することにより測定されつる。

気道抵抗における変化が始まって以来１秒間の強制呼気
ｎｉ　（Ｆ　Ｅ　Ｖ　Ｉ）を測定するために適当に設計
された肺活量計を用いる。

薬物により誘発されたＦＥＶ、の変化は薬物投与５分後
にΔｐ１定する。

薬物投与６時間後にヒト自発志願者に標準抗原投与を行
い、そして抗Ｉに（投与５分後にＦＥＶ、の降下を測定
する。

％打出願人　　ファイソンズ・ピーエルシー外２名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）（ａ）「活性成分Ａ」としての１種またはそれ以上
   の９−エチル−６，９−ジヒドロ−４，６−ジオキソ−
   １０−プロピル−４Ｈ−ピラノ〔３，２−ｇ〕キノリン
   −２，８−ジカルボン酸またはその医薬上受容されうる
   塩、を （ｂ）「活性成分Ｂ」としての、気管支拡張剤、ステロ
   イドおよびそれらの医薬上受容されうる誘導体から選択
   される吸入に適する１種またはそれ以上の薬剤、 と組み合せて含有する医薬混合物。 ２）活性成分Ａがネドクロミル　ナトリウムである前記
   特許請求の範囲第１項記載の混合物。 ３）活性成分Ｂ１重量部につきネドクロミル　ナトリウ
   ムとして測定して活性成分Ａ０．４〜４００重量部を包
   含する前記特許請求の範囲第１項記載の混合物。 ４）活性成分Ｂが気管支拡張剤またはその医薬上受容さ
   れうる誘導体である前記特許請求の範囲第１〜３項のい
   ずれか１項記載の混合物。 ５）活性成分ＢがＢ−２選択的気管支拡張剤またはその
   医薬上受容されうる誘導体である前記特許請求の範囲第
   １〜４項のいずれか１項記載の混合物。 ６）活性成分Ｂがサルブタモールまたはその医薬上受容
   されうる塩である前記特許請求の範囲第１〜４項のいず
   れか１項記載の混合物。 ７）活性成分Ｂがテルブタリン、フェノテロール、レプ
   ロテロール、ピルブテロール、リミテロール、またはそ
   れらの医薬上受容されうる塩である前記特許請求の範囲
   第１〜４項のいずれか１項記載の混合物。 ８）活性成分Ｂがステロイドまたはその医薬上受容され
   うる誘導体である前記特許請求の範囲第１〜３項記載の
   いずれか１項記載の混合物。 ９）活性成分Ｂがベクロメタソン、その溶媒和物または
   そのいずれかの医薬上受容されうる誘導体である前記特
   許請求の範囲第８項記載の混合物。 １０）活性成分Ｂがヒドロコルチゾン、吉草酸　ベタメ
   サゾン、酪酸クロベタソン、フルオシノロン　アセトニ
   ド、フルオコルトロン　ヘキサノエート、ベクロメタソ
   ンジプロピオネート、酪酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ジ
   フルコルトロン、トリアムシノロン　アセトニド、フル
   シノニド、デソニド、フルランドレナロン、ピバル酸フ
   ルメタゾン、メチルプレドニソロン、プロピオン酸　ク
   ロベタゾール、ハルシノニド、チキソコルトール、プレ
   ドニソロン、フルプレドニリデン−２１−アセテートま
   たはその溶媒和物である特許請求の範囲第８項記載の混
   合物。 １１）Ｂ−２選択的気管支拡張剤とステロイドとから選
   択される、吸入に適する塩基性薬剤と９−エチル−６，
   ９−ジヒドロ−４，６−ジオキソ−１０−プロピル−４
   Ｈ−ピラノ〔３，２−ｇ〕キノリン−２，８−ジカルボ
   ン酸の塩。 １２）吸入に適する形態をした、医薬上受容されうるア
   ジュバント、希釈剤または担体と混合した前記特許請求
   の範囲第１〜１０項のいずれか１項記載の混合物または
   特許請求の範囲第１１項記載の塩からなる医薬製剤。 １３）１〜２０重量％の活性成分（類）および０．０５
   〜１．５重量％の表面活性剤を含有する加圧されたエー
   ロゾル組成物の形態をした特許請求の範囲第１２項記載
   の組成物。