JPS62198601A

JPS62198601A - 角膜移植用眼球保存液

Info

Publication number: JPS62198601A
Application number: JP3815786A
Authority: JP
Inventors: Takashi Matsuyama; 松山　隆志; Akio Terajima; 寺嶋　昭夫; Yuzuru Matsumura; 松村　譲; Takashi Igari; 井狩　隆; Takao Goto; 孝夫後藤
Original assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1986-02-25
Filing date: 1986-02-25
Publication date: 1987-09-02

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は角膜移植用眼球保存液に関する。

（従来の技術・発明が解決しようとする問題点）近年１
手術の進歩と普及に伴ない１人における角膜移植手術の
件数は急激に増加している。一方、移植手術まで角膜の
活力を失うことなく保持しておくための眼球保存液の開
発も活発に行われてきている。

かかる例として、たとえば水用らは１組織培養液（アミ
ノ酸、ビタミン、核酸構成成分、中間代謝物、補助的増
殖因子などを含有）、炭酸水素ナトリウム、コンドロイ
チン硫酸ナトリウム、イノシン、アデノシン、アデニン
および抗菌性物質の適量を蒸溜水に溶解し、これにＭ素
と炭酸ガスの混合ガスを導入飽和しｐＨ６，５〜８．０
とした眼球保存液を開発している。（特公昭４６−２０
３６時公報参照）しかしこの眼球保存液には、処方中に含まれている炭酸
水素イオンによって角膜内皮のポンプ作用を活発にさせ
る作用がある。その結果、角膜の寿命が短かくなり、保
存液中で角膜が速やかに膨潤、混濁してしまうために、
この眼球保存液の有効性は２〜３目という短期間に限ら
れている。

また吉川らは、水用らの保存液の欠点である角膜内皮の
ポンプ作用の活発化を休止させる目的で、炭酸水素イオ
ン無添加のリン酸緩衝液中に電解質イオン（すトリウム
、カリウ１１、カルシウム、マグネシウム、塩素、クエ
ン酸、酢酸など）、細胞賦活剤としてのグルコースおよ
び角膜膨潤防止剤としてのデキストラン（分子量４万〜
１５万）を加えた眼球保存液を開発している。（特開昭
５８−１９２５４５号公報参照）しかしこの眼球保存液の処方中に含まれている高分子化
合物であるデキストランは、血漿増量剤としてすでに使
用されてはいるが、元来生体外成分でありかつその分子
量の割合を正確に規制することが必要なものである。さ
らにデキストランには１組織障害を起こしたり血液の交
叉反応を妨げたりする副作用があるという報告もあり、
現在その分子量の最適値は未定である（第１Ｏ改正日本
薬局方・注解）そこで９本発明者らはデキストランを用いることによっ
て生じるこの様な危惧を無くすために、吉川らの眼球保
存液においてデキストランの代りに、生体成分の一つで
ありデキストランより良好なコロイド形成能（膠質浸透
圧）を有するコンドロイチン硫酸ナトリウムを添加する
ことにより。

吉川らの眼球保存液の欠点を改善した本発明を完成する
に至った。

（問題点を解決するための手段）本発明に使用するコンドロイチン硫酸ナトリウムの分子
量は２万〜６万であり、その濃度は０゜５〜３．０ｗ／
ｖ％である。なかんづく、浸透圧が一定に維持されかつ
均一な眼球保存液が出来るところから、用いるコンドロ
イチン硫酸す１−リウムの分子量は４万〜６万、その濃
度はｌ、０〜２．０Ｗ／Ｖ％であることが好ましい。

コンドロイチン硫酸ナトリウムは水溶液中でポリエレク
トロライト（ｐｏｌｙｅｌｅｃｔｒｏｌｙｔｅ）の状態
で存在し、結合基質（ｓｔｒｏｍａ）の中でこの酸性ム
コ多糖類であるコンドロイチン硫酸と角膜のタンパクが
複合体となり生体内のイオンと相互作用を有するため水
のとり込みを抑え、その結果角ＩＩｇの膨潤抑制作用を
示すものと推察される。

本発明の眼球保存液に用いられる他の成分として、通常
、陽イオンとしてナトリウムイオン、カリウムイオン、
カルシウムイオン及びマグネシウムイオン並びに陰イオ
ンとして塩素イオン、リン酸イオン、硫酸イオン、クエ
ン酸イオン及び（又は）酢酸イオン並びにグルコースが
含有されている。

上記各成分を適当な濃度で処方して、そのＰ　Ｈを６．
５〜７．８、その浸透圧を　２７０〜３５０ｒロ○ｓＭ
の範囲に調製すると、本発明の角膜移植用眼球保存液が
提供される。

尚、各成分は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カ
ルシウム、硫酸マグネシウム、クエン酸ナトリウム、リ
ン酸−ナトリウム、リン酸水素ナトリウムとして添加さ
れるのが好ましい。

本発明の眼球保存液の製造方法としては、まずＮａｃｔ
、、ＫＣＱ、ＣａＣｌ２・２ｔＩ２０及びＭｇＳＯ３・
７　Ｈ２・○　を室温ないし６０℃以下で滅菌ｆｉ？製
氷に溶解せしめる。つぎにグルコース。

クエン酸ナトリウムニ水塩、コンドロイチン硫酸す１〜
リウム、Ｎ　ａ　Ｈ＊　Ｐ　Ｏ４，Ｎ　ａ　、３ＨＰ　
Ｏ４”１２１１２０　　をその順でそれぞれ添加溶解さ
せ最後に減菌する。

かくして得られる保存液は通常ｐｌ＋が６．５〜７．８
．浸透圧が２７０〜３５０ｍＯｓＭ、相対粘度が約１．
５〜１　Ｇ、Ｏｃ　ｐ　ｓの液性を有する。

（実施例）つぎに処方例をあげて本発明の角膜移植用眼球保存？＋
１をより詳細に説明するが、本発明はそれらの処方のみ
に限定されろものでない。

〔処方ｆａｌｌ　ｌ　）２Ｑフラスコ中にＮａＣｌ２７．８０ｇ−ＫＣＱＯ，４
１ｇ、ＣａＣｕ５・２ｔ１２０のＱ、１７２ｇおよびＭ
ｇ５Ｏ，・７Ｈ２０の０．２１８　ｇを採り、滅菌精製
水を加え、常温ないし６０　’Ｃ以下で撹拌してン容解
させた。つぎにグルコース０．７８２ｇを加えて溶かし
、さらにクエン酸ナトリウム二本塩０．９ｇ、コンドロ
イチン硫酸ナトリウム（分子量４万）６．５　ｇ、Ｎａ
Ｈ２ＰＯ４の０，２５ｇおよびＮ　ａ　Ｉ−Ｔ　ＰＯ４
・１２１（２０の３．６ｇをその順でそれぞれ添加溶解
させ全量をＩＱとした。このものを１００〜５０．０　
ｍ　Ｑ容アンプルまたはバイアル瓶に分注・封入しつい
で１１５℃で１０分間加熱滅菌した。

えられた眼球保存液は無色ないし微黄色の澄明であり、
液の物理特性はｐ　Ｈ７、２３、浸透圧二３２１　ｍ　
Ｏｓ　Ｍ、相対粘度約２．０ｃｐＳであった。

〔処方例２及び：３〕処方に供される成分およびその址を第１表に示すごとく
代えた他は処方例１と同様にして処方を行った。えられ
た眼球保存液の物理特性を第１表に併記する。

（発明の効果）つぎに本発明の眼球保存液の有用性を調べるために、処
方例２でえたものと吉川らによる眼・球保存液（特開昭
５８−１９２５４５号公報中の実施例）に準じた処方（
第１表：比較処方）との角ｉ摸保存効果の比較試験を行
った。

〔試験方法〕

雄性白色家兎の全眼球を摘出し、強色膜片固定プレート
に強色膜組織片として固定した。固定した強角膜片はそ
れぞれの保存液中に４°Ｃで一定期間（最長１０日間）
保存した。保存後の強角膜片は各時点で取り出し、直ち
に０．７８ｍＭに相当する炭酸水素イオンを添加した新
しい各保存液に移しかえ、３７℃の恒温槽上で１時間温
置した。

その後、角膜内皮の構造を走査型電子顕微鏡（以下電顕
と略す）によって観、察した。

〔試験結果〕

第２表に強角膜片を各溶液中に３１１間、６０間または
９［１間保存したときの結果を簡単に示す。

なお、観察するに際し摘出したばかりの眼球の強角膜片
（以下ノーマルという）を対照例として用いた。

第２表第１図にノーマルの電顕写真を示す。

（倍ＩｆＫ：１１０００、以下同様）細胞は一様に明るくモザイク模様がはっきりと見られる
。第２表のそれぞれの観察結果に対応する電顕写真を、
第２〜７図に示す。第２〜４図かられかるように、本発
明の眼球保存液（処方例２でえたもの）中に３〜９［１
間保存した強色！公）“１の角膜内皮は、いづれも異常
がなく良く保存されていることがわかる。また、吉川ら
の保存液についても本発明とほぼ同様の結果が得られて
いる。（第５図〜第７図参照）以上の試験結果かられかる様に生体成分の−っであり、
デキストランより良好なコロイド形成能を有しかつ安全
性の高いコンドロイチン硫酸ナトリウムを添加して皇る
本発明の眼球保存液は、°吉川らのデキストランが添加
された眼球保存液と同等以上の優れた角膜保存効果を有
するものであった。

また本発明眼球保存液は、水用らの組織培養液にコンド
ロイチン硫酸ナトリウム等を添加した比較的不安定な成
分を含む複雑な組成を持つ眼球保存液と比較して、製剤
化が容易でありかつ室温で安定な製剤であるので、眼球
保存液としてきわめて優れているものである。

なお本発明の眼球保存液は、強角膜片のみならず全眼球
のばあいにも充分に使用に供しうるものである６

【図面の簡単な説明】

第１図はノーマルの走査型電子顕微鏡写真、第２〜７図
は各眼球保存液中に３〜９日間保存した強角膜片の角膜
内皮の走査型電子顕微鏡写真である。特許出願人　　科研製薬株式会社兄　　ｉ　　上１　　　ユ七−にテ　　ご・１）；ｎ　＝１・　　国〜計２　１、　（七元　Ｃ渕：槽　”（′ｊｊ１手続補正書は式）％式％２、発明の名称角膜移植用眼球保存液３、補正をする者事件との関係　　特許出願人郵便番号　１１３４、補正命令の日付　　昭和６１年３月３１日５、補正
の対象ｍＷ　ｒ特許出願人」の捺印及び明細書「図面の簡単な
説明」の欄訂正書（特願昭６１−３８１５７号）（１）願書を別紙訂正願書のとおり訂正する。（２）明細書「図面の簡単な説明」の欄を次のとおり訂
正する。４、図面の簡単な説明第１図は家兎の摘出したばかりの眼球の傾角膜片の角膜
内皮細胞（ノーマル）の走査型電子顕微鏡写真（１００
０倍）、第２〜７図は各眼球保存液中に３〜９日間保存
した家兎の傾角膜片の角膜内皮細胞の走査型電子顕微鏡
写真（１０００倍）である。」以上

Claims

【特許請求の範囲】

（１）コンドロイチン硫酸ナトリウムを添加されてなる
ことを特徴とする角膜移植用眼球保存液。
（２）コンドロイチン硫酸ナトリウムの分子量が２万〜
６万であり、その濃度が０．５〜３．０ｗ／ｖ％である
特許請求の範囲第１項記載の眼球保存液。
（３）コンドロイチン硫酸ナトリウムの分子量が４万〜
６万であり、その濃度が１．０〜２．０ｗ／ｖ％である
特許請求の範囲第１項または第２項記載の眼球保存液。
（４）浸透圧が２７０〜３５０ｍＯｓＭに調整されてな
る特許請求の範囲第１項、第２項または第３項記載の眼
球保存液。
（５）摘出全眼球又は強角膜片の保存に使用できる特許
請求の範囲第１項、第２項、第３項または第４項記載の
眼球保存液。