JPS62135488A - サイクリツク・ビスデスモシドおよびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 技術分野 本発明は、新規サポニン（サイクリック・ビスデスモシ
ド）およびその製造法に関する。この化合物は、假貝母
（Ｂｏｌｂｏｓｔｅｍｍａ　ｐａｎｉ　（Ｍａｘｉｍ、
）Ｆｒａｎｑｕｅｓｔ　）の坊茎（別名上貝母（ｔｕ−
ｂｅｉ−ｍｕ）　）より抽出単離することができる。

先行技術 サポニンは、その精製単離の困難性と構造の複雑性のた
めに、研究の進展を見せたのはここ士数年のことである
。

サポニンの特性は、水溶液中の起泡性と赤血球破壊作用
（溶血活性）、魚肖性、コレステロール（ステロイド類
）とのコンプレックス形成能で代表されるが、医薬品と
しては、去痰、鎮咳、抗炎症、中枢抑制、抗疲労、抗潰
瘍、コレステロール代謝促進、脂質代謝の促進、核酸、
タンパクの合成促進の他に感染防御、抗腫瘍などの薬理
作用が近年見出だされている。

サポニンは、周知の通りアグリコンと糖より構成され、
アグリコンの構造によりトリテルペノイドサポニンとス
テロイドサポニンとに分類される。

生薬サポニンの多くは、前者のトリテルペノイドサポニ
ンに属している。そして、これらトリテルペノイドサポ
ニンは、例えば、アケビ（Ａｋｅｂｉａｇｕｉｎａｔａ
　Ｄｅｃｎｅ、）　（Ｃｈｅｍ、Ｐｈ’Ｆ’ｍ、　Ｂｕ
ｌｌ、　２４，１０２１（１９７６）　’）、ルイヨウ
ポタ：ｙ　（０ａｕｌｏｐｈｙユニｕｍ　ｒＯｂ−ｕｓ
ｔｕｍ　　Ｍａｘｉｍ、）　　（Ｃｈｅｍｉｃａユ　ム
ｂｓｔｒａｃｔｓ　　（Ｃｔ、　　ム、）８５．１０６
６４４ｈ　（１９７６）　］、ヤツデ（Ｆａｔａｉａｊ
ａｐｏｎｉｃａ　Ｄｅａｎｓ、）　（Ｐｈｙｔｏｃｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ　ルア８１　（１９７６）　”）、ムクロ
ジ（８ａｐｉｎｄｕｓ　ｍｕｋｕｒｏｓｓｉ　Ｇａｅｒ
ｔｎ。

）　（Ｏ，Ａ、　７３．７７５４４、ｎｏｏｓ２ｍ、　
　１１００７１１）　（１９７０）およびＯ，ム、７４
、ｘ３ｓｓ４ｆ（１９７１）　］、Ｌｅｃａｎｉｏｄｉ
ｓｃｕｓ　　ｃｕｐａｎｉｏｉｄｅｓ＋　　Ｐユａｍｃ
ｈ、　　ｅｘ　　Ｂｅｎｔｈ。

（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉａｔｒｙ　２０　、　１９３９
、（１９８１）　１などの植物から種々得られている。

一方、後者のステロイドサポニンは数種の植物または一
部の海洋動物（特開昭５９−２３１０２２号公報参照）
から発見されているのみである。

ところで上記トリテルペノイドサポニンは、化学構造に
基づいてさらに、モノデスモシド類およびビスデスモシ
ド類に分類されるが［Ｆｏｒｔａｃｈｒｉｔｔｅｄｅｒ
　Ｏｈｅｍｉｅ　Ｏｒｇａｎｉａｃｈｅｒ　Ｎａｔｕｒ
ｓｔｏｆｆｅ　、　ａｏ、ｐ４６１、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ
−Ｖｅｒｌａｇ（１９７３）　］、本発明のビスデスモ
シド・サポニンの両Ｍ鎖が有機酸で架橋されたサイクリ
ック・ビスデスモシドに関しては、今のところ報告がな
されてな（・。

要旨 本発明は、ビスデスモシドの両糖鎖が有機酸で架橋され
たサイクリック・ビスデスモシドに関するものである。

すなわち、本発明によるサイクリック・ビスデスモシド
は、下式（Ｉ）で示されるものである。

また、本発明による下式（Ｉ）で示されるサイクリック
・ビスデスモシドの尖造法は、仮貝母からサイクリック
・ビスデスモシドを取得すること、を特徴とするもので
ある。

ｄ 効果 本発明によるサイクリック・ビスデスモシドは、これを
添加することにより他の物質の水に対する溶解性を増加
させることができる。従って、本発明サイクリック・ビ
スデスモシドは各種の有用物質、特に水に対する溶解度
の低いもの（たとえば、ステロイド類など）、の溶解性
増加への応用が期待できる。

発明の詳細な説明 化合物 本発明による化合物は、前記の式（Ｄで表わされるサイ
クリック・ビスデスモシドである。

この化合物の物理化学的性状は、下記の通りである。

（１）　　外観：白色粉末 （２）旋光度：　［ａ〕”　＋　１４．６°（Ｃ−１，
０９，ＭｅＯＨ）（３）　　”Ｏ−ＮＭＲ（ヒＩＪシｙ
ａ５　）　：　後記表Ｉ、■参照 （４１１Ｈ−ＮＭＲ（ピリジンｄ５）：Ｊ５．０５　（
Ｉ　Ｈａ、　：ｆｓｍ７．３　Ｈｚ　）Ｊ５．６１　（
Ｉ　Ｈａ、　Ｊ−７，７Ｈｚ　）（５１１１ｉ１−　Ｍ
ｅ　　：　ｍ／ｚ　３４９　（−Ｘ７１　（ＴＭ８）、
　）（６）　　ＦＤ−Ｍｅ　　：ｙｎ／Ｚ１３４１（Ｍ
＋Ｎａ）化合物の製造 本発明によるサイクリック・ビスデスモシドは、假貝母
から抽出によって得ることができる。

１■貝母 暇貝母（Ｂｏｌｂｏｓｔｅｍｍａ　ｐａｎｉｃｕｌａｔ
ｕｍ（Ｍａｘｉｍ、　）Ｆｒａｎｑｕｅｓｔ　）は、中
国の河北、阿南、山東、山面、映画、寸書、雲南省等に
生息するウリ科に属する多年生草木である。その詳細に
ついては、中華人民共和国江亦新医学院編「生薬大辞典
」第８２−８３頁（１９７７年７月上り人民出版社出版
）を参照されたい。

この仮貝母からサイクリック・ビスデスモシドを増得す
る場合は、材料となる部分はこの植物の任意の部分であ
りうるが、とりわけ塊茎部（上置母、上置、大貝母、地
苦胆または草貝とも言う）が好ましく、これを乾燥する
か、またはそのままの状態で抽出に供することができる
。

抽出 抽出は合目的的な任意の態様で行なうことができるが、
一つの好ましい態様は下記の単位工程からなるものであ
る。

ビ）抽出 假貝母（好ましくは上置母）を含水または非含水であっ
て水と混和可能な有機溶媒に浸漬して抽出を行う。

抽出剤として使用すべき有機溶媒は、低級アルコール（
炭素数１〜３の１価アルコールがふつうである）、アセ
トンあるいはアセトニトリル等の水と混和可能なもので
あり、特に好ましいのは炭素数１〜３の低級１価アルコ
ールである。

抽出は、加温下でも常温下でも行うことができるが、４
０〜７０℃で２〜４時間程度温浸に付すのが好ましい。

また、抽出効率を上げるために、対象植物体は、破砕し
たものであることが好まし、いのは言うまでもない。

幹）　分画 上記抽出液は、抽出溶媒を留去した後、ポリスチレン−
ジビニルベンゼン系共重合体樹脂によるカラムクロマト
グラフィーに付して、水で、次いで含水または非含水で
あって水と混和可能な有機溶媒で、順次溶出させ、含水
または非含水であって水と混和可能な有機溶媒で溶出す
る両分を採取する。なお、ここでいう有機溶媒とは、前
記と同様、低級アルコール（通常は炭素数１〜３の１価
アルコール）、アセト／あるいはアセトニトリル等の水
と混和可能なものであり、特に好ましく・のは炭素数１
〜３の低級１価アルコールである。

ｅｌ　　順相および逆相カラムクロマトグラフィーによ
る精製。

上記溶出画分を、溶媒を留去した後、順相カラムクロマ
トグラフィーで精製し、次いで逆相クロマトグラフィー
で精製することにより、目的物質であるサイクリック・
ビスデスモシドを得ることができる。

ここで（・う順相カラムクロマトグラフィーは、ケイ酸
、シリカゲル等の極性の太き（・樹脂を固相担体に用い
たカラムクロマトグラフィーな（・い、移動相としては
通常、クロロホルム、ジクロロメタン、ヘキサ／あるい
は酢酸エチル等の非極性溶媒と含水または非含水の低級
アルコールとの混合液等の固相担体に比べて極性の小さ
い溶媒を用（・ることができる。なお、上記方法の一具
体例としては、後記実施例に示すように、シリカゲルク
ロマト−グラフィー〔展開溶媒：クロロホルム−メタノ
ール−水（６：４：１））を用いて精製することができ
る。

一方、逆相クロマトグラフィーは、上記シリカゲル等に
、ジメチルシラン、オクタデシルシラン、オクチルシラ
ン等の炭素数１〜工８の炭化水素残基を持つシランを化
学結合させたものや、前記スチレン−ジビニルベンゼン
系共重合体あるいはゲル濾過剤等、極性の小さい樹脂を
固相担体に用いたカラムクロマトグラフィーをいい、移
動相としては上記固相担体より極性の大きい任意の溶媒
を用（・ることかできる。例えば、含水または非含水の
低級アルコール、あるいはアセトン、アセトニトリル等
の水と混和可能な有機溶媒と水との混合液等が使用でき
るが、前者の含水または非含水の低級アルコールを用い
るのが好ましく・。ここでいう低墾アルコールとは、前
記と同様、炭素数１〜３のもの（通常は１価アルコール
）であり、特に好ましく・のはメタノールである。

本発明によるサイクリック・ビスデスモシドは、これを
添加することにより、他の物質の水に対する溶解性を増
加させる作用を有する。その−例として、本発明化合物
（サイクリックビスデスモシド〕の添加によるサポニン
Ａ（特開昭５８−５７４００号公報）および色素イエロ
ーＯＢの水またはリン酸緩衝液（ｐＨ７，５）に対する
溶解性の変化を下表に示す。

表−１（サポニンＡに対する溶解促進効果）表−２（イ
エローＯＢに対する溶解促進効果）（ここでサボニンム
は、３−０−（α−Ｌ−アラビノ、ピラノシル−（１→
３）・−α−Ｌ−ラムノピラノシル−（１→２〕−α−
Ｌ−アラビノピラノクル〕−へラケニンヲ示ス。） この実験例では、本発明サイクリック・ビスデスモシド
が、サビニンＡの水に対する溶解度をサイクリック・ビ
スデスモシドｔｍｇ／ｍｌ溶液中で１７６５倍にまで増
加させ、また水に不溶な色表イエローＯＢのリン酸緩衝
液（ｐＨｓ、ｓ、イオン強度０．０２）Ｋ対する溶解度
をサイクリック・ビスデスモシド０．４ｍＭ溶液中で５
０．３μＭ　まで増加させた。

大発明サイクリック・ビスデスモシドは、上記試験例の
みならず、さまざまな有用物質、特に水に対する溶解度
の小さい有用物質（例えば、ステロイド類など）の溶解
性増加への応用が期待できろ。本発明サイクリック・ビ
スデスモシドをこのような溶解補助剤として用（・る場
合には、この性質が利用できるさまざまな用途、たとえ
ば、医薬品の装造工程あるいは製剤化工程に用（・るこ
と、また本発明化合物それ自体を用（・た製品として有
害物質の除去などに利用すること、が考えられる。

また、本発明のサイクリック・ビスデスモシドを溶解補
助剤として使用する場合は後記の操作などＫよって得ら
れたサイクリック・ビスデスモシド類化合物を含有する
ものであればよく、含有させるべきサイクリック・ビス
デス、モシド化合物は単一化合物であっても他の溶解補
助作用を有するビスデスモシド類化合物（特開昭５９−
２０２９９号および特開昭５９−１６２９３号各公報参
照〕の混合物であってもよい。また、上記溶解神助剤は
、必要ならば、このサイクリック令ビスデスモシド類化
合物と他の機能を有する物との混合物であってもよい。

そして、上記溶解補助剤は、その定義的な意味において
はいわゆる可溶化剤と区別されろものではなく、結果的
に対象の物の水溶性を実質的あるいは見かけ上増加させ
るものに他ならない。

本発明によって溶解補助されるべき対象物は、溶解補助
のメカニズムが明確でない（このこと自体は本発明では
さして重要なことではない）ところから、例えば前記実
験例のようなモノデスモシド類化合物（配糖体であって
ゲニン部の１個所に糖鎖を有するもの）Ｋ限定しなけれ
ばならな（・理由はな〜・。

本発明のサイクリック・ビスデスモシドを有効゛成分と
する上記溶解補助剤を用いて水に難溶性または不溶性の
化合物を水に溶解させるには、任意の方法が可能である
。例えば、本発明の溶解補助剤をあらかじめ水に溶解し
ておき、得られた水溶液に目的化合物を溶解する方法、
目的化合物と本発明の溶解補助剤とを予じめ混合したも
のまたは必要ならばこの混合物について両者をよく溶か
す有機溶質に溶解後、溶媒を完全に留去したものを水に
溶解させる方法などが一般的である。

本発明のサイクリック・ビスデスモシドの使用量は、溶
解しようとする化合物に応じて適宜変えることができる
。一般に、溶解させろ水１ｍｌあたり０．０２　ｍｇ％
　１０　ｍｇ％特に０．１〜２　ｍｇ、程度が望ましく
・。

なお、前述のように、この種のサポニンの本格的な薬理
学的研究は進んでおらず、本発明化合物が一般的すボニ
ンのよ５な薬理作用を有する可能性が否定できないこと
はいうまでもない。

実施例 製造法 仮貝母の乾燥した塊茎（上置母）　５００　ｇを粉末と
し、メタノールで次いで５０係メタノールで、順次温浸
抽出（７０℃）し、抽出液を合わせた後、溶媒を減圧濃
縮して、抽出物２６１ｇを得た。

この抽出物を、ダイアイオン■ＨＰ　−２０（三菱化成
〕Ｋよるカラムクロマトグラフィーに付し、水：メタノ
ール、アセトンで順次溶出を行（・、メタノールで溶出
される両分から混合物（粗配糖体分画）　４９．５　ｇ
を得た。　この混合物につ（・て、シリカゲルクロマト
グラフィー〔展開溶媒；クロロホルム−メタノール−水
（６：４：１））を行（・、フラクションＮｏ、ｌ（６
，４ｇ）、Ｎｏ、　２　（１３，５ｇ）、Ｎｏ、３　（
１２，８ｇ　）およびＮｏ、　４　（５，７ｇ）の４つ
の両分に分画した。さらに、このうちフラクションＮ０
０２の２．１　ｇをリクロブレツプ（Ｌｉｃｈ−ｒｏｐ
ｒｅｐ）■Ｒｐ−８（メルク社）による逆相クロマトグ
ラフィーに付し、６５％メタノールで精製し、溶媒を留
去して、サイクリック・ビスモシド１．５ｇを得た。

構造の確認 サイクリック・ビスデスモシド（以下化合物Ａと記す）
は、ｌ　％　ＫＯＲ水溶液中０℃で、３時間処理した後
、塩酸酸性とし、エーテルで抽出することＫより、下式
（２）で示される３−ヒドロキシ−３−メチルグルぞル
酸を与えた（なお、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタ
ル酸の　Ｏ＋　１１ＭＲニスベクトルは後記衣１に示し
た通りである）。

ｌ１ １１２＋　　　１３１４１　　　ｓ＋ Ｂｏｏ（！　−０Ｈ２−０−ＣＨ２−０００Ｈ（２）ま
た化合物Ａは、０．５係ＫＯＨ中、０℃で１時間処理し
た後、中和し、シリカゲルクロマトグラフィーにて分Ｐ
’ｒすることにより、下式（３）で示されろ３−Ｏ−〔
α−Ｌ−アラビノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グル
コピラノシル〕−ハヨゲニンのβ−Ｄ−キシロピラノシ
ル（１→３）−α−Ｌ−ラムノビラノシル（１→２）−
α−Ｌ−アラビノピラノシルエステル体（以下化合物Ｂ
と記す）を与えた（化合物Ｂの詳細に関しては、特願昭
６０−１８４５８５号明細書参照）。

Ｈ さらに、化合物ＡのＦＤ　−ＭＳスペクトルに（Ｍ十Ｎ
ａ）十に帰属されるｍ／ｚ１３４１のイオンが認められ
ることより、化合物Ａは化合物Ｂを基本骨格とし、−そ
の（・ずれか２個の水酸基に３−ヒドロキシ−３−メチ
ルグルタル酸がエステル結合したサポ二ンであることが
推定される。

また、化合物ムは弱アルカリ条件下（０，２５％ＫＯＲ
１θ℃〕にて処理することにより、下式（４）で示され
る化合物（以下化合物０と記す〕を与えた。

田 化合物Ｃは、その完全メチル化体の糖結合分析および化
合物Ｂとの１”ＯＮＭＲ−スペクトル（下表−１および
表−２を参照）の比較により、化合物Ｂ　（１）　ラム
ノース４−位に３−ヒドロキシ−３−メチルグルタル酸
がエステル結合していると推定される。

また、化合物ＡのＨＩＩＲ−スペクトルでは８５．６ｐ
戸附近（２ｇ１図中に米で示されて（・る部分）にシグ
ナルが認められ、これは化合物ムのＨ−Ｈ相関二次元Ｎ
ＭＲ（第１図参照）および１３ＯＮＭＲ相関二次元ＮＭ
Ｒ（第２図参照）により、アグリコンの３位糖錯部の末
端アラビノース４−位に３−ヒドロキシ−３−メチルグ
ルタル酸がエステル結合しているものと推定される。

さらに、化合物ＡとＢの”　ＣＮＭＲスペクトル（下表
−１および表−２を参照）を比較することにより、化合
物Ａは化合物Ｂのアグリコンであるバヨゲニンの３−位
に結合した糖鎖のアラビノースの４−位と上記バヨゲニ
ンの１７−位カルボキシル基に結合した糖鎖のラムノー
スの４−位に有機酸（３−ヒドロキシ−３−メチルグル
タル酸）が環状に結合したサポニンであることが明らか
となった。

その他のスペクトルデータおよび性状については、前記
した通りである。

表−１アグリコン部および有機酸の”　Ｃ−ＮＭＲ化学
シフト アグリコン部Ｃ−１４４，１４４，１４４，０２７０，
５６９，３７０，５ ３８２，５８２，９８２，５ ４４２，７４３，１４２，７ ５４８，５４８，６４８，５ ６１８，１１８，６１８，２ ７３３，１３３，１３３，０ ８４０，０４０，４４０，１ ９４７，７４７，９４７，７ １０３６，９３７，２３６，９ １１２４，０２３，９２３，９ １２１２３，１１２２，７１２２，５ １３１４４，２１４４，２１４４，２ １４４２，３４１，８４２，５ １５２Ｂ、３　　２９．１　　２Ｂ、２１６　　２３．
２　　２２．７　　２３，０１７　　４７．３　　４７
，０　　４７，３１８　　４１．７　　４１，３　　４
１，７１９　　４６．２　　４６，３　　４６，４２０
　　　３０．８　　３０，８　　３０．８表−１（つづ
き） ２１　　　　３４．２　　　３３，９　　　　３３，７
２２　　３２．７　　３２，２　　３２，６２３　　　
　６４．６　　　　６４．６　　　　６４．４２４　　
　　１４．７　　　　１５．６　　　　１４．６２５　
　　　１７．３　　　　１？、７　　　　１７，３２６
　　　　１７．６　　　　１７，７　　　　１７．６２
７　　　　２６．１　　　　２６，０　　　　２６．１
２８　　　１７６．２　　　１７６．０　　　１７６．
３２９　　３３．１　　３３，１　　３３．１３０　　
２３．７　　２３．７　　２３．６有機酸Ｃ−１’　　
　　１７１．２　１７１．７２’　　　　　　　４６．
０　　４６，３３’　　　　　　　７０，１　　７０．
１４’　　　　　　　４７，４　　４６．３５’　　　
　　　　１７１，４　　１７４．９６’　　　　　　　
２６．４　　２８．２表−２糖鎖部の１３Ｃ−ＮＭＲ化
学シフト３−　〇　− Ｇｌｃ−１１０３，２１０３，０１０３，４−２８３，
５７９，８８３，４ −３７７，９７８，０７８，０ −４７１，８７０，８７１，６ −５７８，０７８，２７８，０ −６６２，４６２，５６２，３ Ａｒａ−１１０６，５１０４，４１０６，４−２７３，
８７３，７７３，７ −３７４，３７２，５７４，２ −４６９，２７２，３６９，２ −５６７，２６４，６６７，１ Ａｒａ　−１９３，５９４，０９３，７−２７５，６７
４，７７４，６ −３７０，１７０，９７０，８ −’　　　６６．２　　６６．９　　６７．１−５　　
　　６３，１　　　　６４，４　　　　６４．３表−２
（つづき） Ｒｈａ−１１０１，４１００＠６　　１０１．５−２　
　７１，２　　７２，４　　７２．０−３　　８３，２
　　７８．９　　７８．９−４　　７２．８　　７３，
２　　７３．１−５　　７０．１　　６８，０　　６８
．０−６　　１８．４　　１８，３　　１８．０Ｘｙｌ
−１１０７，２１０６，６１０６，７−２７５，０７４
，６７５，０ −３７８，３７８，５７８，０ −４７１，０７１，４７１，２ −５６７，２６７，５６７，１

【図面の簡単な説明】

第１図は、化合物のＩＨｊＨ相関二次元ＮＭＲスペクト
ル（Ｃ，Ｄ、Ｎ中）図を模写したものである。 第２図は、化合物Ｂの１３０−ＩＨ相関二次元ＮＭＲス
さクトル（Ｃ，Ｄ、Ｎ中）図を模写したものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下式で示されるサイクリック・ビスデスモシド。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ２、假貝母からサイクリック・ビスデスモシドを取得す
   ることを特徴とする、サイクリック・ビスデスモシドの
   製造法。 ３、假貝母からサイクリック・ビスデスモシドを取得す
   る方法が下記の工程からなる、特許請求の範囲第２項に
   記載のサイクリック・ビスデスモシドの製造法。 （イ）假貝母の塊茎（土貝母）を、含水または非含水で
   あって水と混和可能な有機溶媒によ る抽出に付すこと。 （ロ）得られる抽出物をポリスチレン−ジビニルベンゼ
   ン系共重合体によるカラムクロマト グラフィーに付して、含水または非含水で あって水と混和可能な有機溶媒で溶出され る画分を得ること。 （ハ）得られる画分を、順相カラムクロマトグラフィー
   、および逆相カラムクロマトグラフ ィーによる精製に付すこと。