JPS6192597A - 細菌の薬剤感受性検査方法 - Google Patents
細菌の薬剤感受性検査方法Info
- Publication number
- JPS6192597A JPS6192597A JP21216484A JP21216484A JPS6192597A JP S6192597 A JPS6192597 A JP S6192597A JP 21216484 A JP21216484 A JP 21216484A JP 21216484 A JP21216484 A JP 21216484A JP S6192597 A JPS6192597 A JP S6192597A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- schale
- drug
- fractionated
- sheet
- molds
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
この発明は、臨床材料等から分離、または分離後純培養
した細菌の薬剤感受性検査方法に関するものである。
した細菌の薬剤感受性検査方法に関するものである。
細菌感染症に対して化学療法を施す場合、その原因菌に
ついて最も効力のある薬剤を選定し、使用することが望
ましい。しかし、細菌はその種類によって有効な薬剤の
種類、及び濃度が異り、また最近の化学療法の普及は、
従来有効であった薬剤に対して耐性を示す菌株（耐性菌
）の出現をうながすなど、単に感染症の原因菌を決定し
ただけでは、有効な薬剤を推定することは事実上不可能
である。従って、臨床上適切で合理的な治療を行う上で
、薬剤感受性検査は、イ、■菌検査の中で最も重要な項
目の一つにあげなければならない。
ついて最も効力のある薬剤を選定し、使用することが望
ましい。しかし、細菌はその種類によって有効な薬剤の
種類、及び濃度が異り、また最近の化学療法の普及は、
従来有効であった薬剤に対して耐性を示す菌株（耐性菌
）の出現をうながすなど、単に感染症の原因菌を決定し
ただけでは、有効な薬剤を推定することは事実上不可能
である。従って、臨床上適切で合理的な治療を行う上で
、薬剤感受性検査は、イ、■菌検査の中で最も重要な項
目の一つにあげなければならない。
細菌の薬剤感受性検査法としては、希釈法、拡散法、比
濁法等があり、希釈法には寒天培地を用いる寒天平板希
釈法と液体培地希釈法が、そして拡散法には感応錠法、
感受性ディスク法、傾斜平板法、直立拡散法等がある。
濁法等があり、希釈法には寒天培地を用いる寒天平板希
釈法と液体培地希釈法が、そして拡散法には感応錠法、
感受性ディスク法、傾斜平板法、直立拡散法等がある。
しかし、実際の細菌検査の場においては゛、操作性の面
から寒天平板希釈法と感受法ディスク法が主に用いられ
ている。
から寒天平板希釈法と感受法ディスク法が主に用いられ
ている。
感受法ディスク法は、薬剤を含まない培地に被検菌を接
種したのち、薬剤を含浸させたペーパーディスクを培地
上に置き、一定時間培養後薬剤の拡散に従って生じる被
検菌の発育阻止円または阻止帯をもって判定する方法で
ある。この方法は、操作が簡単な上、一枚のシャーレで
複数の薬剤及び濃度について検査できるため広く利用さ
れているが、反面、ディスクを置く培地の厚さや傾きあ
るいは種類等により阻止円の大きさが変動しやすく再現
性に欠ける面がある。また、阻止円の大きさでなく、そ
の有無のみで判定を行う３濃度ディスク法もあるが、薬
剤濃度の設定幅が大きく被検菌の最小発育阻止濃度（Ｍ
Ｉ Ｃ）などを測定するには不向である。
種したのち、薬剤を含浸させたペーパーディスクを培地
上に置き、一定時間培養後薬剤の拡散に従って生じる被
検菌の発育阻止円または阻止帯をもって判定する方法で
ある。この方法は、操作が簡単な上、一枚のシャーレで
複数の薬剤及び濃度について検査できるため広く利用さ
れているが、反面、ディスクを置く培地の厚さや傾きあ
るいは種類等により阻止円の大きさが変動しやすく再現
性に欠ける面がある。また、阻止円の大きさでなく、そ
の有無のみで判定を行う３濃度ディスク法もあるが、薬
剤濃度の設定幅が大きく被検菌の最小発育阻止濃度（Ｍ
Ｉ Ｃ）などを測定するには不向である。
寒天平板希釈法は、予め一定濃度に薬剤を含有させた培
地を用いるため再現性も良く、また薬剤濃度の設定も自
由である。しかし、一つの薬剤または濃度設定で１枚の
培地を必要とし、接種操作も各培地毎に行わねばならず
煩雑である。
地を用いるため再現性も良く、また薬剤濃度の設定も自
由である。しかし、一つの薬剤または濃度設定で１枚の
培地を必要とし、接種操作も各培地毎に行わねばならず
煩雑である。
また、従来の薬剤感受性検査は治療指針を得ることを目
的としているため、全ての菌の発育が阻止される薬剤濃
度を重要視しており、各々の薬剤濃度における被Ｉ★菌
株の薬剤感受性の度合についてはあまり注目されなかっ
た。しかし、より複雑化の傾向にある感染症に対して、
一層適確な指針を得るためにも、原因菌についてのさら
に詳細な情報をつかむ事が必要である。
的としているため、全ての菌の発育が阻止される薬剤濃
度を重要視しており、各々の薬剤濃度における被Ｉ★菌
株の薬剤感受性の度合についてはあまり注目されなかっ
た。しかし、より複雑化の傾向にある感染症に対して、
一層適確な指針を得るためにも、原因菌についてのさら
に詳細な情報をつかむ事が必要である。
この発明は、上記従来法の培地作製及び接種時の操作の
煩雑さ、並に感受性ディスク法の再現性の低さ等の問題
点を解決しようとするものである〔問題点を解決するた
めの手段〕 そこで、この発明の方法では、透過性シートを培養面と
して有する分画シャーレを用いて、各分画に含有薬剤の
種類の異なる培地、または同種で濃度の異なる薬剤含有
培地を組み合せ、菌接種を行うことにより、上記従来方
法の問題点を解決している。
煩雑さ、並に感受性ディスク法の再現性の低さ等の問題
点を解決しようとするものである〔問題点を解決するた
めの手段〕 そこで、この発明の方法では、透過性シートを培養面と
して有する分画シャーレを用いて、各分画に含有薬剤の
種類の異なる培地、または同種で濃度の異なる薬剤含有
培地を組み合せ、菌接種を行うことにより、上記従来方
法の問題点を解決している。
上記手段を施した結果、分画シャーレの各分画培地へ一
操作で各分画培地の全部に菌接種を行うことができるよ
うになった。
操作で各分画培地の全部に菌接種を行うことができるよ
うになった。
以下、この発明の方法の実施例を説明する。
実施例では、図示したようなシャーレ本体（１）の上縁
口部を透過性シート（２）で被覆し、シャーレ本体（１
）にシャーレ底部（３）より透過性シート（２）に達す
る高さの隔壁（４）を設け、シャーレ底部（３）に前記
隔壁（４）により生ずる分画部（５）の全てに連通した
小孔（６）を設け、さらに小孔（６）に封止体（７）を
設けた４分画シャーレを用いた。
口部を透過性シート（２）で被覆し、シャーレ本体（１
）にシャーレ底部（３）より透過性シート（２）に達す
る高さの隔壁（４）を設け、シャーレ底部（３）に前記
隔壁（４）により生ずる分画部（５）の全てに連通した
小孔（６）を設け、さらに小孔（６）に封止体（７）を
設けた４分画シャーレを用いた。
前記透過性シー） （１）として、多孔性フッ化ポリビ
ニリデン欣（孔径０．４５μ）を使用した。培地として
は、ミューラーヒントン（Ｍｉｉｌｌｅｒ−旧ｎｔｏｎ
）培地を使用し、表１に示す薬剤濃度になるよう各々の
薬剤の希釈溶液の一定量を培地に添加し、シャーレに１
分画をコントロールとして残し、３つの分画に薬剤濃度
に従い３段階ずつ分注、凝固させた。（１シヤ一レ３段
階であるから１２段階で４枚のシャーレを要した。）ま
た、コントロール培地としては薬剤を含まないミューラ
ーヒントン培地を分注した。
ニリデン欣（孔径０．４５μ）を使用した。培地として
は、ミューラーヒントン（Ｍｉｉｌｌｅｒ−旧ｎｔｏｎ
）培地を使用し、表１に示す薬剤濃度になるよう各々の
薬剤の希釈溶液の一定量を培地に添加し、シャーレに１
分画をコントロールとして残し、３つの分画に薬剤濃度
に従い３段階ずつ分注、凝固させた。（１シヤ一レ３段
階であるから１２段階で４枚のシャーレを要した。）ま
た、コントロール培地としては薬剤を含まないミューラ
ーヒントン培地を分注した。
そこで先ず、患者からの膿を検体として用手法により、
前記４分画シャーレの透過性シート（２）面に接種した
。
前記４分画シャーレの透過性シート（２）面に接種した
。
次に、患者からの膿を直接法にてスパイラルプレーター
（スパイラル・システム・インストルメンツ社；米国）
を用いて接種した。このスパイラルプレーターは、米国
においてＦＤＡにより開発、評価された生菌数測定用の
自りＪ他システム中の接種装置であるが、この装置にお
ける接種は培地中心部より検査材料に密度勾配を作りな
がら、螺旋状に塗抹するものである。
（スパイラル・システム・インストルメンツ社；米国）
を用いて接種した。このスパイラルプレーターは、米国
においてＦＤＡにより開発、評価された生菌数測定用の
自りＪ他システム中の接種装置であるが、この装置にお
ける接種は培地中心部より検査材料に密度勾配を作りな
がら、螺旋状に塗抹するものである。
従って、この発明の方法では一定の密度勾配によって透
過性シート（２）面に塗抹接種すると、孤立集落の数を
一定面積について計測するだけで、検査材料の単位量中
の全生菌数を算出することができ、さらに従来基準での
薬剤感受性値はもちろんのこと、原因菌の各薬剤に対す
る種々の濃度段階での感受性のパターンを簡便かつ迅速
に得ることができる。
過性シート（２）面に塗抹接種すると、孤立集落の数を
一定面積について計測するだけで、検査材料の単位量中
の全生菌数を算出することができ、さらに従来基準での
薬剤感受性値はもちろんのこと、原因菌の各薬剤に対す
る種々の濃度段階での感受性のパターンを簡便かつ迅速
に得ることができる。
上記スパイラルプレーターを用いた結果、この検体中の
病原菌としてスタフィロコッカス・オーレウス（ｓｔａ
ｐｔ＋ｙｌｏｃｏｃｃｕｓ 、］ｕｒｅｕｓ ）が２．
８ Ｘｌ０４ＣＦＵ ／ｍ＋の割合で分離された。
病原菌としてスタフィロコッカス・オーレウス（ｓｔａ
ｐｔ＋ｙｌｏｃｏｃｃｕｓ 、］ｕｒｅｕｓ ）が２．
８ Ｘｌ０４ＣＦＵ ／ｍ＋の割合で分離された。
従来の発育の有無による判定基準を用いるならば、表Ｉ
より前記分離菌に対するＡＢＰＣのＭＩＣ値は１．５６
．ｕｇ ／ｍｌ、同様にＣＴＭでは０．１８１１８／ｍ
ＬｃＺＸでは６．２５μｇ ／ｍｌ、 ＧＭでは５０μ
ｇ／ｍ１以上、ＮＦＬＸでは３．１３μｇ ／ｍｌと判
定できる。
より前記分離菌に対するＡＢＰＣのＭＩＣ値は１．５６
．ｕｇ ／ｍｌ、同様にＣＴＭでは０．１８１１８／ｍ
ＬｃＺＸでは６．２５μｇ ／ｍｌ、 ＧＭでは５０μ
ｇ／ｍ１以上、ＮＦＬＸでは３．１３μｇ ／ｍｌと判
定できる。
また、各薬剤の各々の濃度における孤立隼落数の変化に
注目するならば、従来基準ではＧＭのＭＩＣ値は５０μ
ｇ／ｍ１以上となるが、実際には６．２５μｇ／ｍｌの
濃度で被検菌中の約５０％の菌は感受性を示しているこ
とが読みとれる。
注目するならば、従来基準ではＧＭのＭＩＣ値は５０μ
ｇ／ｍ１以上となるが、実際には６．２５μｇ／ｍｌの
濃度で被検菌中の約５０％の菌は感受性を示しているこ
とが読みとれる。
（以下余白）
表１
Ａ Ｉ＋ Ｐ Ｃ： ａｍｐｉｃ目ｆｉｎ ＣＴＭ
：ｃｅｆｏｔｉａｍ ＣＺＸ：ｃｅｆｔｉ、＋ｏ
ｘｉｍｃＧ Ｍ ： ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ Ｎ
Ｆ Ｌ Ｘ ： ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ〔発明の効果
〕 この発明の方法によれば、培６面として透過性シートを
利用するため分画シャーレにもかかわらず、非常に平ら
な培養面を確保することができるので、用手法による菌
接種を容易にするばかりでなく、スパイラルプレーター
（スパイラル・システム・インストルメンツ社：米国）
のような自動接種器の利用も可能とするものであり、優
れた効果を有する。
：ｃｅｆｏｔｉａｍ ＣＺＸ：ｃｅｆｔｉ、＋ｏ
ｘｉｍｃＧ Ｍ ： ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ Ｎ
Ｆ Ｌ Ｘ ： ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ〔発明の効果
〕 この発明の方法によれば、培６面として透過性シートを
利用するため分画シャーレにもかかわらず、非常に平ら
な培養面を確保することができるので、用手法による菌
接種を容易にするばかりでなく、スパイラルプレーター
（スパイラル・システム・インストルメンツ社：米国）
のような自動接種器の利用も可能とするものであり、優
れた効果を有する。
第１図はこの発明の細菌の薬剤感受性検査方法に用いる
分画シャーレの一実施例を示す分解斜視図、第２図はそ
の分画シャーレの封止体を取外した状惑の底面図である
。
分画シャーレの一実施例を示す分解斜視図、第２図はそ
の分画シャーレの封止体を取外した状惑の底面図である
。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、透過性シートを培養面として有する分画シャーレに
菌接種を行うことを特徴とする細菌の薬剤感受性検査方
法。 ２、分画シャーレは、含有薬剤の濃度の異る培地を組み
合せたものである特許請求の範囲第１項に記載の細菌の
薬剤感受性検査方法。 ３、分画シャーレは、含有薬剤の種類の異る培地を組み
合せたものである特許請求の範囲第１項に記載の細菌の
薬剤感受性検査方法。 ４、菌接種は、密度勾配を作りながらの螺旋状接種であ
る特許請求の範囲第１項に記載の細菌の薬剤感受性検査
方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21216484A JPS6192597A (ja) | 1984-10-09 | 1984-10-09 | 細菌の薬剤感受性検査方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21216484A JPS6192597A (ja) | 1984-10-09 | 1984-10-09 | 細菌の薬剤感受性検査方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6192597A true JPS6192597A (ja) | 1986-05-10 |
| JPH0527396B2 JPH0527396B2 (ja) | 1993-04-21 |
Family
ID=16617960
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21216484A Granted JPS6192597A (ja) | 1984-10-09 | 1984-10-09 | 細菌の薬剤感受性検査方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6192597A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6203996B1 (en) * | 1994-03-01 | 2001-03-20 | Teagasc, The Agriculture And Food Development Authority | Rapid detection of bacteria liquid cultures |
| WO2002087589A1 (fr) * | 2001-04-26 | 2002-11-07 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Medicament permettant d'inhiber une pompe d'elimination de medicament |
| JP2005270003A (ja) * | 2004-03-25 | 2005-10-06 | Akita Prefecture | 変異株選抜培地および該培地の調製方法 |
| US7056917B2 (en) * | 2001-04-26 | 2006-06-06 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Drug efflux pump inhibitor |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5114393A (en) * | 1974-07-22 | 1976-02-04 | Ii Girubaato Baan | Koseibutsushitsuno kannodooshikensuru hohooyobisorenimochiiru sochi |
| JPS52154589A (en) * | 1976-06-14 | 1977-12-22 | Yuasa Battery Co Ltd | Simple testing paper |
-
1984
- 1984-10-09 JP JP21216484A patent/JPS6192597A/ja active Granted
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5114393A (en) * | 1974-07-22 | 1976-02-04 | Ii Girubaato Baan | Koseibutsushitsuno kannodooshikensuru hohooyobisorenimochiiru sochi |
| JPS52154589A (en) * | 1976-06-14 | 1977-12-22 | Yuasa Battery Co Ltd | Simple testing paper |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6203996B1 (en) * | 1994-03-01 | 2001-03-20 | Teagasc, The Agriculture And Food Development Authority | Rapid detection of bacteria liquid cultures |
| WO2002087589A1 (fr) * | 2001-04-26 | 2002-11-07 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Medicament permettant d'inhiber une pompe d'elimination de medicament |
| US7056917B2 (en) * | 2001-04-26 | 2006-06-06 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Drug efflux pump inhibitor |
| JP2005270003A (ja) * | 2004-03-25 | 2005-10-06 | Akita Prefecture | 変異株選抜培地および該培地の調製方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0527396B2 (ja) | 1993-04-21 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |