JPS6191194A - グリコウレタン化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般式１ Ｂ１−（ＣＨ２）　−Ｃ油２−四Ｅ５−ＮＨ−Ｃ○−０
−Ｅ４　　　　Ｉで表わされる新規な化合物に関するも
のであって、 式中、ｎｌは水素原子、アルキル基（１〜５個の炭素原
子を有する）、カルボキシル基、ペンヅルオキシカルぎ
ニル基または−ＣＯ−担持体でちり、Ｂ２は水素原子、
水酸基、第３アルコキシ基（４〜１０個の炭素原子全盲
する）または−ｏ−ｃ（ｃ）（ｘ）２−ｐｈ（ＯＣＨｇ
）、　（ただしｍは０〜３）であり　Ｂ３は水素原子、
カルボキシル基、Ｃｊ　−ｃ４−アルコキシカルゼニル
基、ペンヅルオキシカル／＝ル基または−ＧＯ−Ａ−Ｎ
Ｈ−（ＣＨ２）ａ−ＣＯ−Ｔ　（ここで、Ａは結合線で
あるかまたは天然に存在するＬ−アミノ酸の基であって
好適にはペプチド結合には関与しない反応基がペプチド
化学上一般的な保護基により保護されているものであり
、Ｔは水酸基、Ｏ−アルキル保護基、Ｏ−アリールアル
キル保護基、カルボキシル基を活性化する基、ケファリ
ン基、アミノ基を有する担持体分子例えばタンパク質、
ポリペブチ）″またはゲルまたは吸着剤のようなもので
あり、ａは１〜１０の数字上水している）であり、Ｂ４
はグリコピラノース、グリコフラノースまたは寡糖類よ
り誘導される炭水化物化学上の一般的な保護基により保
護されているかまたはいないグリコシル基であり、ｎは
０〜６である化合物に関するものであると同時に、その
調製方法および、担持体に結合されて人工抗体、糖脂質
、抑制剤１７ＩＣは免疫吸着剤として使用する用法に関
するものでおる。

合成炭水化物抗原または免疫吸着剤の調製のためには、
適当な担持体分子と反応できる化合物が必要となる。

炭水化物がスペーサーを介して担持体に結合され次とき
に、人工の抗原となるということは周知である。

抗原性炭水化物決定因子は、糖タン・臂りまたは糖脂質
のような寡糖類構造体であって、生物学的機能全盲する
ものである。Ｂ４で示された炭水化物基は生物学的物質
から単離されるかあるいは化学的に製造されうる。この
ような単糖類あるいは寡糖類基は、その生物学的特性音
保持するためには還元末端を介して結合されなければな
らない、それ自体は免疫原性のない炭水化物を、免疫原
性抗原または活性免疫吸着剤金得るために、５〜１２個
の原子（スペーサー）の鎖により、担体分子に結合させ
るということは有利なことである。

意外なことに、意図した糖ペプチド（式１参照）の調製
の際に、０−グリコシドとして結合している所望の糖ペ
プチドの代わりに、新規のグリコシルウレタン化合物が
ＤＤＺ−保護基の関与の下での転位反応により生成され
念。

式１ これにより、新規な糖液合体の調製方法が究明され始め
たと同時に、この新規なスペーサー結合方法により、寡
糖類セグメントヲ担持体へ共有結合的に結合させること
が可能となった。

この転位反応により、セリンセグメントの水酸基は、α
、α−ツメチル−６，５−ノメトキシペンノル基とエー
テル結合する。

この基は塩基に対しては安定でおるが、酸性溶媒中では
容易に除去されうるので、アルコール性水酸基の新しい
保護基と見做されうる。

本発明の目的は、生物学的活性を有する炭水化物・・ブ
テンを担持体分子に共有結合的に結合させるための新規
表カップリング化合物およびカップリング方法を開発す
ることである。

この目的は一般式ｌで示される化合物全調製し、担持体
へ結合させることによって達成される。

式Ｉの化合物であってさらに好適なものは、式中、Ｂ１
は水素原子、アルキル基（１〜５個の炭素原子全盲する
）、カルボキシル基、ベンジルオキシカル２ニル基また
はアルブミン、ポリリジンもしくはアミノ基を担持する
ゲルよりなる一〇〇−担持体であり、Ｂ２は水素原子、
水酸基、第３ブトキシ基またはα、α−ジメチルー３．
５−ジメトキシベンジル基であり、Ｂ５は水素原子、カ
ルどキシル基、メトキシカルボニル基、ベンジルオキシ
カルボニル基または−Ｃ０−Ａ−ＮＨ−（田２）５−Ｃ
Ｏ−Ｔ　（式中、Ａは結合線であるかまたはＶａｌ、Ｓ
ｅｒ　、　Ｇｌｕ　、　Ｇｌｕ（ｒ−ｔ、−Ｂｕｔ）、
ＬｅｕおよびＩｌｅのＬ−アミン基であり、Ｔは水酸基
、メトキシ基、ベンジルオキシ基、力ｙＮキシル基を活
性化する基（０−（Ｎ−スクシンイミド）またはニトロ
フェノキシ基のようなもの）、ケファリン基または担持
体としてのアルブミン、担持体としてのポリリジンまた
は担持体としてのアミノ基担持ゲルであり、Ｂ４は式■ ５０ＧＨｚ で表わされるグリコシル基（式中、Ｂ５は水素原子、ア
セチル基もしくはベンゾイル基のようなアシル保護基ま
たはベンジル基であり、Ｂ６は水素原子、アシル保護基
、ベンノル基、β−Ｄ−がラクトピラノシル基ま７１ｃ
は２．！１．４．６−チトラー０−アセテルーβ−Ｄ−
ガラクトピラノシル基であり、Ｒ７は水素原子、水酸基
、アット基、アミノ基、アセトアミド基、ベンジルオキ
シ基またはトリクロロアセトキシ基であり、Ｂ８は結合
手であり、ｎは０〜３の数字を示している）である化合
物である。

式Ｉで表わされる新規な化合物の１つを本発明に従って
調製する之めの方法は、以下のａ）〜ｅ）からなる。

ａ）式■ Ｒ１−（ＣＨ２）　−Ｃ佃２−ＣＨＲ　５−ＮＨ−ＣＯ
−○−Ｆｔ９　　　　１１［〔式中、Ｂ１は水素原子、
アルキル基（１〜５個の炭素原子全有する）またはベン
ジルオキシカルダニル基であり、Ｂ２は水素原子または
水酸基であり、Ｂ３は水素原子、ｃｌ−ｃ４−アルコキ
シカルゼニル基またはベンジルオキシカルダニル基であ
り、Ｒ９は第３アルコキシ基（４〜１０個の炭素原子を
有する）または−ｏ−ｃ（ｃＨ３）２−ｐｈ（ｏｃａ３
）Ｔｎ（ここでｍは０〜３）である〕で表わされる化合
物を、式■で表わされる化合物〔式中、Ｂ５はアシル保
護基またはペンノル基であり、ｌ１１６はアシル保獲基
、ベンジル基または２．３．４．６−チトラー〇−アセ
チルーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル基であり、Ｂ７は水
素原子、水酸基、アジド基、ベンジルオキシ基まｆｃは
トリクロロアセトキシ基であり、Ｂ８は塩素または臭素
である〕と、ＤＭＦ　１ジオキサン、ＴＨＦ、酢酸エチ
ル、トルエン、クロロホルムまたはジクロロメタンのよ
うな有機溶媒のうちの１つまたは２つもしくは３つの混
合物中において、銀（１）塩または水銀（ＩＩ）塩およ
び酸受容体（ポリビニルピリジンまたはモレキュラーシ
ープのようなもの）の存在下で、該当する場合には乾燥
剤（硫酸カルシウムまたは硫酸マグネシウムのようなも
の）の存在下で、反応温度−５０℃〜＋８０℃で、好適
には一３０℃〜＋５０℃で反応させることにより一般式
Ｉで表わされる化合物であって、式中、Ｂ１は変化せず
、Ｂ２は水素原子、水酸基、第３アルコキシ基（４〜１
０個の炭素原子よりなる）または−〇−Ｃ（ＣＨ３）２
−Ｐｈ（ＯＣＨ３）ｍ（ただしｍは０〜５）であり、Ｒ
５は変化せず、Ｂ４は一般式■で表わされるグリコシル
基（ただし式中ＢＳ　、　Ｂ６およびＢ７の基は変化せ
ずＢ８は結合手である）でありｎは０〜３であるような
化合物を得る。

ｂ）　　ａ）の段階で得られたベンジルエステルとして
存在する生成物において、Ｐｄ／Ｃなどのような水素化
触媒および酢酸エチルまたはジオキサンのような有機溶
媒の存在下にて、°好適には室温で、ベンジル保護基を
水素化分解的に除去すると炭水化物セグメントのアジド
基が未変化のまま残り、そして所望の場合は遊離のカル
ボキシル基を含む反応性成物を、スクシンイミドエステ
ル、ｐ−ニトロフェニルエステルｆｉｌ無水物のような
ペプチド化学上慣用の活性エステル誘導体へ転換する。

ｃ）　　ｂ）の段階で得られた生成物ケ、ペグチド化学
上慣用の縮合方法により、一般式■ Ｈ−Ａ−ＮＨ−（ＣＨ２）ａ−ＣＯ−Ｔ　　　　　　Ｉ
Ｖで表わされるアミノ化合物であって、 式中、Ｔは０−アルキル保護基またはＯ−アリールアル
キル保護基であり、Ａは結合線または、縮合反応に関与
しないその反応性の基が保護基により保護されているＬ
−アミノ酸基であり、ａは１〜１０であるような化合物
と反応させる。

ｄ）　　ａ）またはｄ）の段階で得られた第３アルキル
エーテルまたはアリールアルキルニーテルトして存在す
る生″成物−１において、それ自体知られ次男法で、ト
リフルオロ酢酸ｔｆｃは酢酸／塩酸のような酸の存在下
で、場合によりジオキサン、メタノールま７’（は酢酸
エチルのような溶媒の存在下に第３ブチル基またはＤＤ
Ｂｎ保護基を除去すると生成物はアルコール誘導体とし
て存在する。

ｅ）　　ｄ）の段階で得られた生成物において、残って
いる保護基を、炭水化物化学またはペプチド化学上慣用
のブロック解除方法により除去し、スペーサー上にカル
ボキシル基を担持している化合物を、慣用の縮合方法で
、アミン化担持体と反応させる。

一般式■で表わされるグリコウレタン肪導体は、例えば
、ｒ　Ｍｅｔｈｏｄｅｎ　ｄｅｒ　ｏｒｇａｎｉｓｃｈ
ｅｎ　Ｃｈｅｍｉｅ　Ｊ１５巻のＨｏｕｂｅｎ　−Ｗｅ
ｙｌの方法のような、ペプチド化学で普通便われている
方法により調製される。

カルボキシル基の活性化は、例えば、カルボキシル基を
酸ハロゲン化物、アジド、無水物、イミダゾリド、また
はＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルまたはｐ−ニ
トロフェニルエステルのような活性エステルへ変換する
ことにより実行される。

アミノ基は、ホスファイトアミドへの転換またはホスフ
ォルアゾ方法により活性化される。

上述の縮合反応の慣用的な方法としては、ｒ　Ｔｈｅ　
Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　Ｊ、１巻、１９６５年（Ａｃａｄｅ
ｍｉｃＰｒｅｓｓ発行）に記載されているように、カル
ゼジイミド法、アジド法、混合無水物法および活性エス
テル法がある。

縮合反応に関与しない反応基は、例えば加水分解や還元
により簡単に再脱離されるような保護基によって、保護
される。保護基に関する説明は、適切な文献（Ｈｏｕｂ
ｅｎ　−Ｗｅｙｌ著［Ｍｅｔｈｏｄｅｎｄｅｒ　ｏｒｇ
、　Ｃｈｅｍｉｅ　Ｊ　１５巻）ｔ−参照されたい。

グルタミン酸のガンマカルボキシル基を保護することが
望ましい。この場合の慣用的な保護基とは、第３プチル
基、ベンシル基またはメチル基である。

保護基は、その基の種類に応じ例えばトリフルオロ酢酸
による方法またはおだやかな還元（例えば）９ラノウム
など全触媒にした水素による還元または氷酢酸中での臭
化水素による還元）のような慣用的な方法により除去さ
れる。

保護基の種類に応じ、炭水化物セグメント上の保護基は
慣用的な方法（ｒ　Ａｎｇｅｗ、　Ｃｈｅｍ、　Ｊ（１
９８２）　、　９４．１８４　：　ｒ　Ｃａｒｂｏｈｙ
ｄｒ、　Ｂｅｓ、　Ｊ（１９８３）、１１６、Ｃ９〜Ｃ
ｌ２）により除去される。

アット基は、おだやかな還元反応（例えば、水素とパラ
ジウムなどの触媒による還元、または塩化ニッケル（［
１の存在下ナトリウムゼロノ飄イドライトによる還元）
にエリアミノ基へ転換されて、そのアミノ基は、アセチ
ル化（例えばメタノール中での無水酢酸によるアセチル
化）によりアセチルアミノ基へ転換されうる。０−アシ
ル保護基は、塩基性溶媒中（例えばメタノール中のナト
リウムメチレート、メタノール中の水酸化ナトリウムま
たはメタノール中の炭酸ナトリウム中）で有利に除去さ
れる。ベンジル基は、Ｐｄ／Ｃお↓び氷酢酸の存在下で
水素化分解的に除去される。

式！で表わされる本発明のグリコウレタンは、スペーサ
ーのカルボキシル基に作用するという慣用的な方法によ
り、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルマタはｐ−
ニトロフェニルエステルのような活性エステル誘導体に
転換され、１またはそれ以上のアミノ基を有する担持体
へ結合される。この場合、式Ｉの化合物の反応性の基で
縮合反応に関与しないものは、保護基により保護される
のが特に望ましい。保護基は、例えば加水分解または光
分解により再び除去されうる。

担持体の例としては、タンパク質好適にはヒトまｆ′ｃ
はウシ血清アルブミン、糖タンノ９り、ポリリジンやポ
リ（グリシルリジン）のようなポリマー、活性ゲル（こ
れはアミン基、グリシジル基、２−アミノエチルアミノ
基または活性工ステル基を担持している）、多糖類また
は多糖類ゲル（これらは臭化シアンで活性化されている
）または脂質（好適にはケファリンもしくはアミノ化リ
ン脂質）があげられる。

担持体と結合した本発明のグリコウレタン誘導体は人工
抗体、糖脂質または免疫吸着剤である。

以下の実施例により本発明を説明する。

明細書中で使用されている種々の略号は以下ｌ、■に従
って理解されたい。

■、アミノ酸基であって、光学的構造型が与えられてい
ないものは、Ｌ型七示している。アミノ酸基に対応して
を１以下の従来的な略号が使われる。

ｖａｌ　＝　Ｌ−バリル Ｓｅｒ　＝　Ｌ−セリル Ｇｌｕ　　＝　　Ｌ−グルタミル Ｇｌｕ（ｇａｍｍａ−ｔ、Ｂｕｔ）　＝　Ｌ−グルタミ
ル（ｒ−ｔｓｒｔ、−ブチル） Ｌｅｕ　　＝　　Ｌ−ロイシル １１ｅ　　＝　　Ｌ−イソロイシル ■、以下の略号は保護基あるいは活性基を示すために使
用する。

ＤＤＺ　　＝　　α、α−ジメチル−６，５−ジメトキ
シペンジルオキシカルゼニル ２　　＝ペンジルオキシカルセニル ＢＯＣ＝　　ｔｅｒｔ、−プチルオキシカルゼニルｔ、
−Ｂｕｔ　＝　ｔｅｒｔ、−ブチルＭｅ　　＝　メチル ｐＮＰ　　＝　　ｐ−二トロフェニル Ｂｎ　　＝　ベンジル Ｂｚ　　＝　　ベンゾイル ｐｈ　　＝　フェニル ＤＤＢｎ　＝α、α−ジメチル−３．５−−／メトキシ
ベンジル Ｇａｌ　　＝　　Ｄ−がラクトピラノシルＧａ１ＮＡｃ
　＝　Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトピ実験の部 実施例中に記載の化合物は以下のようにして特性化され
た。

ＩＦｔスペクトルによる分析 特に水酸基、アミノ基、アミド基、カルセニル基、アジ
ド基、アリール基、アルキル基等の官能基の存在を検べ
た。

ＮＭＢスペクトルによる分析 ’Ｈ１Ｌ５ｃおよび２ＤのＮＭＢスペクトルを用いた＠
マススペクトルによる分析 特に転位生成物の分子量全決定した。

元素分析 ゛　薄層クロマトグラフィーあるいは高圧液体クロマト
グラフィー（ＨＰＬＣ）による分析アミノ酸分析実施例
　１ グリコシルウレタンの調製 以下のグリコシルハロゲン化物がグリコシルウレタンの
調製に使用された。

Ｂｚ＝ＰｈＣＯ 化合物１　　　　　　　　化合物２ 化合物５の調製方法 Ｎ−（（３−〇−（２，６，４，６−テトラ−０−アセ
ｆｋ−β−Ｄ−ガ２クトピラノシ＃　）　−２−アジド
−４，６−ノー０−ベンゾイル−２−デオキシ−α−ロ
ーガラクトピラノシル）−オキシカルボニ／Ｉ／）−０
−（α、α−ツメチル−６，５−ノメトキシーペンノル
）−Ｌ−セリンベンノルエステル １０ｍｍｏｌの化合物１と１２　ｍｍｏｌのＤＤＺ　−
Ｓｅｒ　−０−Ｂｎ？乾燥ジクロロメタン／トルエン（
１：１：１００ｍｇ）に溶解させ、モレキュラーシープ
４Ａ（１ｏＰ）、硫酸カルシウム（８？；堰焼したもの
）および炭酸銀（１１Ｓ’）とともに２０℃で６０分間
役拌する。その後、過塩素酸銀（１，１ｆ）？加える。

暗所にて２０時間攪拌すると、反応が完結する。

混合物を乾燥トリエチルアミンで中和して、ろ過し、真
窒濃縮する。シリカゲル６０　（’７０〜２５０メツシ
ユ）のカラムクロマトグラフィーにより生成物全精製す
る。

収率：グリコシル化合物に対する理論値の７０％ （α稲０＝＋５α８°（クロロホルム中　ｃ＝１）化合
物６の調製方法 Ｎ−（（３−０−（２，３，４，６−チトラーｏ−７セ
チルーβ−Ｄ−ｆｆラクトピラノシル）−２−アジド−
４，６−ジー０−ベンゾイル−２−デオキシ−α−Ｄ−
がラクトピラノシル）−オキシカルボニル）　−０−（
ｔｅｒｔ、−グチル）−Ｌ−セリンベンノルエステル 化合物６は、化合物１およびＢＯＣ−８ａｒ−０−Ｂｎ
ｔ出発原料として、前述の方法にて調製された。

化合物７の調製 Ｎ　−（（５，４，６−トリー〇−アセチルー２−アジ
ド−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−オキ
シカルボニル＞−０−＜α、α−ジメチルー３．５−ジ
メトキシベンジル）−アミノエタノール 化合物７は、化合物２およびＮ　−ＤＤＺ−アミノエタ
ノール全出発原料として、前述の方法にて調製される。

収率：６８チ Ｃ（１）ｇｏ＝＋　６５．３°　（りｏ　ｏ　ホルｂ中
ｃ＝１　）化合物８の調製 Ｎ　−（２，３，４，８−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−
Ｄ−ガラクトピラノシルーオキシカルゼニル）−ｎ−ペ
ンチルアミン 化合物８は、化合物３およびＮ　−ＤＤＺ−ペンチルア
ミンを出発原料として、前述の方法にて調製される。

化合物９の調製方法 Ｎ　−（３，４，６−）ジ−０−アセチル−２−トリク
ロロアセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル−オキシカル
ボニル）−０−（α、α−ジメチルー３．５−ジメトキ
シベンジル）−アミノエタノール 化合物９は、化合物４とＮ−ＤＤＺ−アミノエタノール
を出発原料として、調製される。

化合物１０の調製方法 ペンシルＮ　−（３，４，１５−）リー〇−アセチルー
２−アジド−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコビラノシル
ーオキシカルゼニル）−５−アミン−ヘキサノエート 化合物１０は、化合物２およびベンジルＮ−ＤＤＺ　−
６−アミノヘキサノエートを出発原料として調製される
。

収率：８５％ （α）２ｏ＝＋６１°（クロロホルム中　ｃ＝１）実施
例　２ ベンジルエステル化合物５．６および１０からベンジル
基全選択的に水素化分解して除去する。

一般的な実験方針 ３　ｍｍｏｌのベンジルエステル化合物を７０−の乾燥
酢酸エチルに溶解させ、室温にて２時間、′５．５２の
Ｐｄ／Ｃ（１０％）の存在下で水素化する。

その後、混合物をろ過し、洗浄してシロップ状になるま
で真空濃縮する。

反応生成物は、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに
て精製された。　収率：９２チ化合物１１の調製方法 １４−ＣＣ３−０−（２，３，４，６−テトラ−０−ア
セチルーβ−Ｄ−１フラクトピラノシル）−２−アノＦ
−４．６−ジー〇−ベンゾイル−２−デオキシ−α−Ｄ
−ガラクトピラノシル）−オキシカルボニル）−０−（
α、α−ツメチル−６，５−ジメトキシペンノル）−Ｌ
−セリン （α）２０＝＋５０．６°（クロロホルム中　Ｃ＝１）
化合物１２の調製方法 Ｎ−（（！ｌ　−０−（２，３，４，６−テトラ−０−
フセチルーβ−Ｄ−がラクトピラノシル）−２−アット
−４，６−・シー０−ベンゾイル−２−デオキシ−α−
Ｄ−ガラクトピラノシル）−オキシカルボニル）　−０
−（ｔｅｒｔ、−ブチル）−Ｌ−セリ　　ン （α）２０＝＋５１．６°（クロロホルム中Ｃ＝１）実
施例　６ 化合物１０のアンプロックキング 化合物１３の調製方法 Ｎ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−オキシカルボニル）−６−アミノへキサ
ン酸 ５　ｍｍｏｌの化合物１０’（ｒ５０−の乾燥氷酢酸に
溶解させ室温で２０時間、５００■のｐａ／ｃ（１０％
）の存在下で水素化する。その後、１０づの無水酢酸音
訓え、混合物をさらに５時間攪拌する。触媒ｔろ去した
後、溶液を真空濃縮し、生成したシロップ状物質を数回
にわたってトルエンとともに蒸留する。生成物を水性メ
タノールに溶解させ反応混合物の一値全す）　ＩＪウム
溶液でｐＨ９，５に調整する。２４時間攪拌した後、活
性化されたイオン交換体で°混合物全中和し、活性化さ
れたイオン交換をろ云して、ろ液を真空濃縮してシロッ
プ状にする。生成物はカラムクロマトグラフィー（５ｅ
ｐｈａｄｅｘ　ＬＨ−２０）により精製された。

収率ニア４％ 実施例　４ 化合物１１または１２のアミノ化合物との縮合化合物１
１または１２はまず以下の一般的な実験方針に沿って、
活性エステルに変換される。

ａ）゛′活性エステル”の調製方法 ３　ｍｍｏｌのカルゼン酸誘導体（ただし、遊離のカル
ボキシル基全１個だけ有し、残りの反応基は保護されて
いる）ｔ５０−の乾燥アセトニトリルに溶解する。これ
に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３ｍｍｏｌ　）お
よびジシクロへキシルカルホシイミ）’　（５ｍｍｏｌ
　）　ｆ攪拌しながら加える。

２４時間後、反応槽を０℃にてろ過し、真空こ縮する。

このシロップ状物質にトルエン（２５ｒｒＬｔ）’ｉ加
え、これを真空濃縮する。こうしてできたシロップ状物
質はそれ以上精製することなく矢の反応ステップに使わ
れる。

薄層クロマトグラフィーによく使用される溶媒系は、ク
ロロホルム／メタノール（９：１．７：１．３：ＩＪ？
工びに１）；クロロホルム／酢酸エチル（１：１）であ
る。

ｂ）ペプチド結合の生成 化合物１１または１２の活性ニスデルを式■で示される
アミン化合物と反応させる。反范５方法は以下の実験方
針に従う。

Ｈ２Ｎ−（ＣＨ２）　５−ＣＯｏ−ベンジル　　　　化
合物１４Ｈ２Ｎ−（ＣＨ２）５−ＣＯｏ−メチル　　　
　　化合物１５Ｈ−Ｖａｌ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｓ−ＣＯ
ｏ−メチル　　化合物１６Ｈ−８ｅｒ−Ｎ）ｉ−（ＣＨ
２）ｓ−ＣＯＯ−メチル　　化合物１７Ｈ−Ｌｅｕ−Ｎ
Ｈ−（ＣＨ２）ｓ−ＣＯｏ−メチル　　化合物１８Ｈ−
ｎｅ−ＮＨ−（ｃＨ２）ｓ−ｃｏｏ−メチル　　化合物
１９Ｃ）ペプチド結合の生成法 アミン化合物（３ｍｍｏｌ）　’！−乾燥クロロホルム
（２５ｍ）に溶解させ、約５　ｍｍｏｌの４−（’Ｎ、
Ｎ−ツメチルアミノ）ピリノンを攪拌しながら加えてＰ
」４９に調贅する。１０分後、ａ）段階の゛活性エステ
ル”で２５ゴの乾燥クロロホルムに溶かしたもの金加え
た。２４時間後、反応種ｔ５％（Ｗ／Ｖ）クエン酸で１
回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空濃縮した。生
成したシロップ状物質全シリカゲルカラムクロマトグラ
フィーで精製し７’Ｃ＊ 収率：化合物１１または１２に対する理論値の７０〜８
５％。

クロマトグラフィーでよく使用される溶媒系：クロロホ
ルム／酢酸エチル（１：１）；りａｏ＊ルム／アセトン
（７：１．４：１および１：１）：クロロホルム／メタ
ノール（９：１および５二１）。

これらの方針に従って、以下の化合物が調製される。

化合物　２１ （化合物１２（活性エステル）と化合物１５から） Ｎ　−（Ｃ５−０−（２，３，４，６−チトラーＯ−ア
セテルーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アット−
４，６−ノー〇−ベンゾイル−２−デオキシ−アルファ
ーＤ−がラクトピラノシル）−オキシカＡ／　ｉ　＝ル
）　−ｏ　−（ｔｅｒｔ、−ブチル）−Ｌ−セリル−５
−メトキシカルボニル−ペンチルアミ　ド。

（α）２０　：　＋　６３．Ｂｏ（Ｃ＝１クロロホルム
中）化合物　２２ （化合物１１（活性エステル）と化合物１４から）Ｎ−
（（ろ−０−（２，５，４，６−テトラ−０−フセチル
ーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アット−４，６
−ジー〇−ベンゾイル−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラク
トピラノシル）−オキ７カルゼニル）−０−（α、α−
シ）チル−５，５−ジメトキシベンジル）−Ｌ−セリル
−５−ペンジルオキシ力ルボニルーペンチルアミト。

（α）２０＝＋５４．２°（ｃ＝１クロロホルム中）化
合物　２３ （化合物１１（活性エステル）と化合物１６から）”　
−（（５−０−（２−３Ｆ　４　ｅ　６−　テトラ−ｏ
−ｙセ’チル−β−Ｄ−がラクトピラノシル）−２−ア
ット−４，６−ジー０−ベンゾイル−２−デオキシ−α
−Ｄ−ガラクトピラノシル）−オキシカルボニル）−〇
〜（α、α−ジメチルー５，５−ジメトキシベンジル）
−Ｌ−セリル−Ｌ−バリル−５−メトキシ力ルボニルー
ペンチルアミト（α）２０　＝＝　＋　４Ｉ．８°（ｃ
＝１　クロロホルム中）化合物　２４ （化合物１１（活性エステル）と化合物１７から）Ｎ−
（（ｓ−ｏ−（２，５，４，６−テトラ−０−アセチル
ーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アジド−４，６
−ジー０−インシイルー２−デオキシ−α−Ｄ−ガラク
トピラノシル）−オキシカルボニル’）−０−（α、α
−ジメチル−３，５−ジメトキシペンノル）−Ｌ−セリ
ル−し−セリル−５−メトキシカルボニルーペンチルア
ミド （α）２０＝＋４Ｉ．２°　（ｃ＝１　クロロホルム中
）化合物　２５ （化合物１１（活性エステル）と化合物１８から）Ｎ−
（（３＝Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−０−アセチル
ーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−ア°ノドー４．
６−ジー０−ベンゾイル−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラ
クトピラノシル）−オキシカルＩニル）−０−＜α、α
−ジメチルー３．５−ジメトキシベンノル）−Ｌ−セリ
ル−Ｌ−ロイシル−５−メトヤシカルダニルーペンチル
アミド化合物　２６ （化合物１１（活性エステル）と化合物１９から）Ｎ−
（（３−０−（２，３，４，６−チトラーＯ−アセチル
ーβ−Ｄ−ガ２クトピラノシル）−２−アジド−４，６
−ジー０−ベンゾイル−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラク
トピラノシル）−オキシカルゼニル）　−〇−（α、α
−ジメチルー５．５−　・ジメトキシペンジル）−Ｌ−
セリル−Ｉ、−イソロイシル−５−メトヤシカルダニル
ーペンチルアミド化合物　２７ （化合物１１（活性エステル）と化合物２０から）Ｎ−
（（３−０−（２，３，４，６−テトラ−０−アセテル
ーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アジド−４，６
−ジー０−ぺ／シイルー２−デオキシーα−Ｄ−ガラク
トピラノシル）−オキシカルゼニル）−０−（α、α−
ジメチル−６，５−ジメトキシペンジル）−Ｌ−セリル
−Ｌ−グルタミル（７−ｔｅｒｔ、−ブチル）−５−ペ
ンジルオキシ力ルゼニルーペンチルアミド （α）２０＝＋２五５°（Ｃ＝１　クロロホルム中）実
施例　５ アンプロッキング反応 アンプロッキング反応は以下に示す一般的実験方針（以
下ＧＷＩと略記する）に従って行なわれた。

Ｃ）ＷＩ　１　：α、α−ジメチル−３．５−ジメトキ
シ−ベンジル（ｐＤＢｎ）−保護基の選択的加水分解除
去 ＤＤＢｎ保護基全担持する化合物（３ｍｍｏｌ）’ｊ：
、トリフルオロ酢酸を５容量チ含むジクロロメタン５〇
−に室温にて溶解させた。３０分間攪拌した後、Ｎ−メ
チルモルホリンで混合物全中和した。混合物を氷水で１
回洗浄し、次に希塩酸で洗浄した。有機層全硫酸ナトリ
ウムで乾燥させ、真空下に鍛縮してシロップ状にした。

生成物は塩酸塩の形になる。

収率：９６〜９９チ 薄層クロマトグラフィーによる検食は以下の溶媒系にて
行なわれた。

クロロホルム／酢酸エチル（１：１）；クロロホルム／
アセトン（４：１および１：１）；クロロホルム／メタ
ノール（４：１および１：１）。

ＧＷＩ　２　：　ｔｅｒｔ、−ブチル保護基の選択的加
水分解除去 ｔ、　−Ｂｕｔ保護基を担持する生成物（２，６ｍｍｏ
ｌ　）　ｆ、１．２規定の塩酸全含有する乾燥氷酢酸１
０−に室温にて溶解させる。２０分間攪拌した後、反応
槽に２０−のエーテルを加え真空下に濃縮する。生成し
たシロップ？数回にわたりトルエン処理し、酢酸臭が検
知されなくなるまで濃縮した。得られる単一生成物はシ
リカゲルカラムクロマドグ２フイーで精製された。

収率：８３〜８５チ クロマトグラフィーによく使用される。容媒系：クロロ
ホルム／アセトン（９：１および４：１　）、クロロホ
ルム／メタノール（９：１および５：１）ＧＷＩ　３　
ニガラクトース単位上の２−アジ１基を２−アミノ基へ
選択的加水分解還元し つづけてアセチル化してアセトアミド 基となす ａ）アット基からアミン基への還元 ５００ＩＩｖの１０％Ｐｄ／Ｃと１００ｒｎｔの乾燥メ
タノールの懸濁液に６０分間水Ｘｔ通す。メタノールと
濃炭酸す）　ＩＪウム水浴ｇ（５０：１）の混合物音用
いて懸濁液の−を７に調整する。少量のメタノールにア
ット化合物（５ｍｍｏｌ　）　ｔ（８解させたものを加
え、光があたらないようにして６時間水素化を続けた。

水素化している間に一？検査し、必要なら７に調整する
。それから混合物音ろ過し、残渣をメタノール／エーテ
ルで十分にすすぎ、ろ液を真空下に濃縮しシロップ状に
する。

ｂ）アセチル化 段階ａ）で得られた生成物全乾燥メタノールに溶解させ
、無水酢酸（５０ｍｍｏｌ　）ｆｔ加える。２４時間攪
拌した後、反応槽を真空下に濃縮し生成したシロップ状
物質を数回トルエンで処理し真空下に濃縮する。シリカ
ゲルカラムクロマトグラフィーにより単一生成物が和製
される。

収率ニア２〜７５％ クロマトグラフィーによく使用される溶媒系：クロロホ
ルム／アセトン（９：１．５：１　および２：１）：ク
ロロホルム／メタノール（９：１および６：１） ＧＷＩ　４　：炭水化物のベンジル保護基の選択的加水
分解除去 ベンジル基を担持する化合物（６皿ｏ１）’１７０−の
乾燥酢酸に溶解し、五５ｆの１０％Ｐｄ／Ｃ存在下で２
時間水素化した。それから触媒？ろ去してすすぎ、ろ液
を真空下に濃縮してシロップ状にした。生成物はカラム
クロマトグラフィーにて精製した。

収率：８９〜９４チ クロマトグラフィーの溶媒：クロロホルム／アセトン（
４：１および１：１）；クロロホルム／メタノール（５
：１および１：１） ＧＷＩ　５　：炭水化物単位のＯ−アシル保護基の除去 アシル化合物（２ｍｍｏｌ）’に５０−のメタノールに
溶解した。この溶液に製水性炭酸ナトリウム溶液を〆（
１１になるまで滴下した。２０時間攪拌した後、活性化
されたイオン交換体で反応槽全中和し、活性イオン交換
体音ろ去した。溶液全真空下に濃縮してシロップ状にし
、残った単一生成物全力ラムクロマトグラフィーで精製
した。

収率ニア３〜７７％ 炭酸ナトリウムの替わりに、触媒量のナトリウムメチラ
ートを使用してもアシル保護基の除去は行なわれる。

クロマトグラフィーによく使用される溶媒系：クロロホ
ルム／メタノール／水（２０：５：［ｌＬ４および４：
４：ｉ　） ＧＷＩ　１５　ニスペーサ−上のメチルエステルの除去
メチルエステル化合物（α５ｍｍｏｔ）　ｋ　５０−の
１．４−ジオキサン／水（９：１）に溶かして溶液にし
たものを、２０℃で攪拌しながら１Ｎの水酸化ナトリウ
ムを１−づつ分割して加えけん化する。その間、指示薬
としてチモールフタレイン全便いながらアルカリの消費
（ＮａＯＨで約０．５ｍｍｏｌ　）　ｋ検査する。混合
物はＤｏｗｅｘ　５０　ＷＸ　−８Ｈ−イオン交換体で
中和し、イオン交換体ｔろ去してずすぎろ液ｋＸ空濃縮
した。残存する単一生成物は、溶離剤としてメタノール
／水（１：１）を使用した５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ　−２
５カラムにて精製され、凍結乾燥された。

収率：８０〜８４チ 薄層クロマトグラフィーの溶媒系：クロロホルム／メタ
ノール／水（５：３：（１５および４：４：１） 化合物　２８ （化合物８ｔ−使用し、ＧＷＩ　４の方法によるもの）
Ｎ−（β−Ｄ−がラクトピラノシル−オキシカルボニル
）−ｎ−ペンチルアミ／ 化合物　２９ （化合物２１を使用し、ＧＷＩ　２．５．５および６の
方法によるもの） Ｎ−（（２−アセトアミド−２−デオキシ−６−〇−（
β−〇−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル）−オキシカルゼニル〕−Ｌ−セリル−５−カル
ゼキシーペンチルアミド化合物２９は化合物２２ｔ−使
用し、ＧＷＩ　１．６．５および４の方法によっても調
製される。

化合物　３０ （化合物２３を使用し、ＧＷｌｌ、６．５および６の方
法によるもの） Ｎ−（（２−アセトアミド−２−デオキシ−３−〇−（
β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル）−オキシカルボニル）−Ｌ−セリル−Ｌ−バリ
ル−５−カルボギシーペンチルアミド 化合物　３１ （化合物２４ｔ−使用し、ズエ１．３．５および６の方
法によるもの） Ｎ−（（２−アセトアミド−２−デオキシ−５−〇−（
β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル）−オキシカルボニル）−Ｌ−セリル−５−カル
ダキシーペンチルアミド化合物　３２ （化合物２５？使用し、ＧＷＩ　１　、３．５および６
の方法によるもの） Ｎ−（（２−アセトアミド−２−デオキシ−３−〇−（
β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル）−オキシカルボニル）−Ｌ−セリル−Ｌ−ロイ
シル−５−カルブキシ−ペンチルアミド 化合物　５５ （化合物２６を使用し、ＧＷＩ　１．３．５および６の
方法によるもの） Ｎ−（（２−アセトアミド−２−デオキシ−３−０−（
β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル）−オキシカルボニル）−Ｌ−セリル−Ｌ−イソ
ロイシル−５−カルボキシ−ペンチルアミド 化合物　６４ （化合物２７を使用し、ＧＷＩ　１．５．５および４の
方法によるもの） Ｎ−（（２−アセトアミド−２−デオキシ−６−０−（
β−Ｄ−がラクトピラノシル）−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル）−オキシカルボニル）−Ｌ−セリル−Ｌ−グル
タミル（γ−ｔｅ丁ｔ、−ブチル）−５−カルゼキシー
ペンチルアミド化合物　６５ （化合物１１を使用し、ＧＷｌｌ、６および５の方法に
よるもの） Ｎ−（（２−アセトアミド−２−デオキシ−５−０−（
β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル）−オキシカルボニル）−Ｌ−セリン 化合物　６６ （化合物７を使用し、（）ＷＩ　１、ろおよび５の方法
によるもの） Ｎ−（（２−アセトアミド−２−デオキシ−α−Ｄ−が
ラクトピラノシル）−オキシカルゼニル）−アミノエタ
ノール 実施例　６ 化合物２９によるピーナツレクチン（Ａｒａｃｈｉｓｈ
ｙｐｏｇｅａ　）の抑制 ノイラミニダーゼ（ＶＣＮ　）で処理した赤血球（２，
５％懸濁液）のグランドナツツレクチン（滴定濃度２−
８）による赤血球凝集反応が化合物２９（０，５η／Ｗ
Ｌ１．）により完全に抑制された。

実施例　７ グリコシルウレタン化合物１６．２９．３０．３１、ろ
６．５４および５５のアミノ化された担持体への結合 結合可能な遊離のカルダキシル基全盲するスペーサーの
糖ペプチド化合物は、カルゼジイミト°（例えば１−エ
チル−５−（３’−ノメチルアミノグロビル）−力ルゼ
ジイミ　ドヒドロクロリド）の働きにより直接であるか
、または、活性エステルＣ例、ｔばＮ−ヒドロキシスク
シンイミド誘導体）として、タンパク質（例えばウシ血
清アルブミン）、ポリペプチド（例えばポリリジン）ま
たはアミン化された吸着剤および担体物質に、既知の方
法（例えばｒ　Ａｎ　１ｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｔｏ　
ａｆｆｉｎｉｔｙ　ｃｈｒｏｍａ士、ｏｇｒａｐｈｙ　
Ｊ　＃　Ｃ，Ｂ、　Ｌｏｗｅ著、ＮＥ（ＰＣ発行、　（
１９７９）に記載の方法）で結合される。

３０当量の化合物１３が１分子あたり３５個の利用しう
るアミノ基を有するウシ血清アルブミンに結合された。

５００当童の化合物３４が、ポリ−１）　＋　リジン（
分子量６０．０００〜８０，０００　）に結合した。ポ
リ＋　ｐ　＋　リジンに残っている遊離のアミン基は無
水酢酸によりアシル化された。接合された化合物５４の
グルタミン酸単位に残存しているｒ−ｔｅｒｔ、−ブチ
ル保饅基は９０％ｌＪフルオロ酢酸によって除去された
。

化合物６１は担体１を当り１ｏμｍｏｌの濃度のアミノ
化ゲル（例えば６個のアミノプロピル基を有するケイン
ウ土）に結合された。

譬許出願人　　ベーリングヴエルケ・アクチェンゲゼル
シャフト 外２名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）式 I Ｒ＾１−（ＣＨ＿２）＿ｎ−ＣＨＲ＾２−ＣＨＲ＾３−
   ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−Ｒ＾４ I で表わされる化合物。 〔式中、Ｒ＾１は水素原子、アルキル基（１〜５個の炭
   素原子を有する）、カルボキシル基、ベンジルオキシカ
   ルボニル基または−ＣＯ−担持体であり、Ｒ＾２は水素
   原子、水酸基、第３アルコキシ基（４〜１０個の炭素原
   子を有する）または−Ｏ−Ｃ（ＣＨ＿３）＿２−Ｐｈ（
   ＯＣＨ＿３）＿ｍ（ただしｍは０〜３）であり、Ｒ＾３
   は水素原子、カルボキシル基、Ｃ＿１−Ｃ＿４−アルコ
   キシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基または
   −ＣＯ−Ａ−ＮＨ−（ＣＨ＿２）＿ａ−ＣＯ−Ｔ（ここ
   で、Ａは結合線であるかまたは天然に存在するＬ−アミ
   ノ酸の基であつて好適にはペプチド結合には関与しない
   反応基がペプチド化学上慣用の保護基により保護されて
   いるものであり、Ｔは水酸基、Ｏ−アルキル保護基、Ｏ
   −アリールアルキル保護基、カルボキシル基を活性化す
   る基、ケフアリン基、タンパク質、ポリペプチド、アミ
   ノ基を有するゲルまたは吸着剤であり、ａは１〜１０の
   数字を示している）であり、Ｒ＾４はグリコピラノース
   、グリコフラノースまたは寡糖類より誘導される、炭水
   化物化学上慣用の保護基により保護されているかまたは
   いないグリコシル基であり、ｎは０〜３である。〕 ２）式 I Ｒ＾１−（ＣＨ＿２）＿ｎ−ＣＨＲ＾２−ＣＨＲ＾３−
   ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−Ｒ＾４ I で表わされる特許請求の範
   囲第１項に記載の化合物。 〔式中、Ｒ＾１は水素原子であるか、アルキル基（１〜
   ５個の炭素原子を有する）であるか、カルボキシル基で
   あるか、ベンジルオキシカルボニル基であるかまたは、
   アルブミン、ポリリジンもしくはアミノ基を担持するゲ
   ルよりなる−ＣＯ−担持体であり、Ｒ＾２は水素原子、
   水酸基、第３ブトキシ基またはα，α−ジメチル−３，
   ５−ジメトキシベンジル基であり、Ｒ＾３は水素原子、
   カルボキシル基、メトキシカルボニル基、ベンジルオキ
   シカルボニル基または−ＣＯ−Ａ−ＮＨ−（ＣＨ＿２）
   ＿５−ＣＯ−Ｔ（式中、Ａは結合線であるかまたは好適
   にはＶａｌ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ｇｌｕ（ｔ−Ｂｕｔ）、
   ＬｏｕおよびＩｌｅであるＬ−アミノ酸の基であり、Ｔ
   は水酸基、メトキシ基、ベンジルオキシ基、カルボキシ
   ル基を活性化する基（好ましくはＯ−（Ｎ−スクシンイ
   ミド）またはニトロフェノキシ基）、セフアリン基また
   は担体分子（好ましくはアルブミン、ポリリジン、もし
   くはアミノ基を担持するゲル）であり、Ｒ＾４は式II ▲数式、化学式、表等があります▼II で表わされるグリコシル基｛式中、Ｒ＾５は水素原子で
   あるか、アセチル基もしくはベンゾイル基のようなアシ
   ル保護基であるかまたはベンジル基であり、Ｒ＾６は水
   素原子、アシル保護基、ベンジル基、β−Ｄ−ガラクト
   ピラノシル基または２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセ
   チル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル基であり、Ｒ＾７は
   水素原子、水酸基、アジド基、アミノ基、アセトアミド
   基、ベンジルオキシ基またはトリクロロアセトキシ基で
   あり、Ｒ＾８は結合手であり、ｎは０〜３の数字を示し
   ている｝である。〕 ３）式III Ｒ＾１−（ＣＨ＿２）＿ｎ−ＣＨＲ＾２−ＣＨＲ＾３−
   ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−Ｒ＾９III〔式中、Ｒ＾１は水素原子
   、アルキル基（１〜５個の炭素原子を有する）またはベ
   ンジルオキシカルボニル基であり、Ｒ＾２は水素原子ま
   たは水酸基であり、Ｒ＾３は水素原子、Ｃ＿１−Ｃ＿４
   −アルコキシカルボニル基またはベンジルオキシカルボ
   ニル基であり、Ｒ＾９は第３アルコキシ基（４〜１０個
   の炭素原子を有する）または −Ｏ−Ｃ（ＣＨ＿３）＿２−Ｐｈ（ＯＣＨ＿３）＿ｍ（
   ここでｍは０〜３）である。〕 で表わされる化合物を、式II ▲数式、化学式、表等があります▼II 〔式中、Ｒ＾５はアシル保護基またはベンジル基であり
   、Ｒ＾６はアシル保護基、ベンジル基または２，３，４
   ，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノ
   シル基であり、Ｒ＾７は水素原子、水酸基、アジド基、
   ベンジルオキシ基またはトリクロロアセトキシ基であり
   、Ｒ＾８は塩素または臭素である〕 で表わされる化合物と、ＤＭＦ、ジオキサン、ＴＨＦ、
   酢酸エチル、トルエン、クロロホルムまたはジクロロメ
   タンのような有機溶媒のうちの１つあるいは２つまたは
   ３つの混合物中において、銀（ I ）塩（炭酸銀、過塩
   素酸銀、硝酸銀、トリフルオロメタンスルホン酸銀また
   はケイ酸銀のようなもの）または水銀（II）塩（シアン
   化水銀、臭化水銀、塩化水銀またはヨウ化水銀のような
   もの）および酸受容体（ポリビニルピリジンまたはモレ
   キユラーシーブのようなもの）の存在下で、該当する場
   合には乾燥剤（硫酸カルシウムまたは硫酸マグネシウム
   のようなもの）の存在下で、そして反応温度−５０℃〜
   ＋８０℃で、好適には−３０℃〜＋５０℃で反応させる
   ことによつて構造式 I の化合物を得ることを特徴とす
   る特許請求の範囲第１項記載の化合物の調製方法。 ４）−Ｃ（ＣＨ＿３）＿２−Ｐｈ（ＯＣＨ＿３）＿ｍで
   表わされる基（ただしｍは０〜５）をアルコール性水酸
   基を保護するべく使用する用法。 ５）特許請求の範囲第１項記載の化合物を担体へ結合す
   べく使用する用法。 ６）特許請求の範囲第１項記載の化合物を、担体に結合
   させて、抑制剤、抗原または免疫吸着剤として使用する
   用法。