JPS6186654A - 液体クロマトグラフイ−用カラム充填剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、糖類及び／又は糖アルコール、例えば、砂塘
、糖蜜等に少量含まれているイソマルトース、マルトー
ス及びグルコース並びに食品中に含マレるシュークロー
ス、マルトース、フルクトース及びンルビトールの、夜
体クロマトグラフィーによる分離に適したカラム充填剤
に関する。

（従来の技術） 液体クロマトグラフィーによって糖類を分離する方法と
しては、１）アミノ基等を化学結付した充填剤（例えば
、アミノグロビルシリル基を化学結合したシリカゲル等
）金属いた分配型の分離〔ジャーナル・クロマトグラフ
ィー（Ｊ、　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ、）１４４巻１６９
頁（１９７７年）〕、２）架橋デキストランゲル等を用
いた分子ふるいによる分離〔ニス・ノー・チャームズ（
Ｓ、　Ｃ，Ｃｈｕｒｍｓ　）著。

アドパンンーズ・イン・カーボハイドレート・ケミスト
リー（Ａｄｖａｎｃｅｓ　　ｉｎ　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ
ａ　ｔｅＣｈｅｍｉｓｔｒｙ　）２５巻１３頁、アカデ
ミツク・ブレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ　　Ｐｒｅｓｓ　）
１９７０年発行、米国〕。

３）陰イオン交換樹脂を用いたホウ酸錯イオンとしての
分離（アナリティカル・ケミストリー（ＡｎａｌＣｈｅ
ｍ、）　５２巻１０７９頁（１９ＳＯ年）　：）　、　
４）塩型陽イオン交換樹脂を用いた分子ふるいと分配の
折衷モードによる分離〔ジャーナル・クロマトグラフィ
ー（Ｊ、　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ、　）　１０３巻２２
９頁（１９７５年）〕等が知られている。これらのうち
１）の方法は溶離液としてアセトニトリル等の毒性のあ
るものを使用する必要があり、３）の方法は操作が煩雑
になるという問題点があるのに対し。

２）及び４）の方法は溶離液として水を使用するため操
作が容易である。しかし、イソマルトース、マルトース
及びグルコースの分離並びにシュークロース、マルトー
ス、フルクトース及びツルピトーＩの分離は、上記の２
）の方法では不可能であり。

上記４）の方法でも満足できる分離性が得られていない
。

（発明が解決しようとする問題点） 一般に、糖類を塩型陽イオン交換樹脂粒子を用いて分離
する場合、その分離性は対イオンの種類（塩を構成して
いる陽イオンの種類）に左右されることが知られている
。

二種類の分離においては、Ａｇ＋イオン以外の陽イオン
、例えばＬｔ”＋　Ｎａ＋＋　Ｋ”＋　Ｒｂ”＋　Ｃｓ
＋等のアルカリ金騙イオン、Ｍｇ”、Ｃａ”、Ｓｒ”、
Ｂａ”等のアルカリ土類金属イオン、　Ｆｅ”、　Ｆｅ
”、　Ｃｏ”＋Ｎｉ”　、　Ｃｕ”＋等の遷移金嬉イオ
／は対イオンとして効果はなく、二種類であるイソマル
トースとマルトースの分離及びシュークロースとマルト
ースの分離に好適な対イオンはＡｇ＋イオンである。し
かし、対イオンがＡｇ＋イオンであると、インマルトー
スとグルコース及びフルクトースとソルビトールの溶出
時間が近似しており、それぞれの分離が不可能となる。

また、二種類と単糖類の分離に好適な対イオンは＋　Ｌ
　ｒ　＋Ｔ　Ｎａ　”　＋　Ｋ　”　Ｔ　Ｒｂ＋＋　Ｃ
ｓ　＋等のアルカリ金属イオ７．Ｍｇ”、Ｃａ”、Ｓｒ
”＋Ｂａ２＋等のアルカリ土類金属イオンであり、これ
らのうち一つ或いは複数を対イオンとすることにより、
二種類と単糖類、即ち、イソマルトースとグルコースの
分離及びフルクトースとソルビトールの分離が可能とな
るが、複数の二糖類、即ち、マルトースとイソマルトー
スの分離は不可能であり。

ツユ−クロースとマルトースの分離は不充分である。

従って１本発明は、＠記の従来技術の問題点を％Ｊ’ｌ
Ｌ、イソマルトース、マルトース及びグルコース並びに
シュークロース、マルトース、フルクトース及びソルビ
トールを液体クロマトグラフィーにより好適に分離する
のに適したカラム充填剤を提供することを目的とする。

（問題点を解決するための手段） 本発明は、　ＳＯ３−基含有陽イオン交換樹脂粒子から
なり、該ＳＯ３−基の対イオンとしてＡｇ＋並びにアル
カリ金桟イオン及び／又はアルカリ土類金属イオンを有
してなるカラム充填剤に関する。

本発明における陽イオン交換樹脂粒子は、　ＳＯ３−基
を樹脂１ｇ当だ９２ミリ当量（２ｍｅｑ／ｇ　）以上有
するのが好ましく、特に３〜５　ｍｅｑ／　ｇ有するの
が好ましい。ＳＯ３−基が２　ｍｅｑ　／　ｇ未満にな
ると、親水性が不充分となる傾向がある。また、陽イオ
ン交換樹脂は１分離は能の点で実質的に５Ｏ３Ｈ基又は
ＳＯｓ　Ｈ基が上記以外の無機陽イオンによって中和さ
れた基を有しないのが好ましい。ここで。

「実質的Ｋ」とは、中和滴定等によ？）ＳＯ３Ｈ基又は
その中和された基が検出されない程度であることを意味
する。

また９本発明における陽イオン交換樹脂粒子の粒子径は
、液体クロマトグラフィー分析用としては１〜２０μｍ
及び液体クロマトグラフィーによる分取用としては２０
〜３００μｍであるものが好ましい。

また１本発明における陽イオン交換１対脂粒子の細孔の
程度には特に制限はないが、排除限界が４００〜ｌＸｌ
０’の範囲になるようにするのが好ま　し７Ｉハ。

ＳＯ３−基含有陽イオン交換樹脂粒子は、スルホン化多
孔性スチレン−ジビニルベンゼン系共重合体粒子である
のが好ましい。このような陽イオン交換樹脂粒子におい
て、ＳＯ３′基はスチレン−ジビニルベンゼン系共電合
体に結合しているが、該共重合体は、ジビニルベンゼン
とスチレン系単量体の共重合体であり、ジビニルベンゼ
ンを２〜６０重ｆ％含むのが好ましい。該スチレン系単
量体としては、スチレン、エチル七ノビニルベンゼン、
ビニルトルエン、α−Ｍｅ−スチレン等７＞Ｅアり、酢
酸ビニル、メタクリル酸、アクリル酸等の他のモノマー
を５重ｆｆ１％以下の範囲で含有してもよい。

マえ、スチレンージビニルペンゼ／系共重合体は。

細孔を有する粒子状のものである。

スルホン化多孔性スチレンーンビニルベンゼン系共重什
体粒子は、従来公知の方法で製造することができる。

例えば、ジビニルペンゼ／及びスチレン系単１１Ｋｆア
ミルアルコール、トルエン等の非水（容性有機溶剤の存
在下に懸濁重合させ、得られる粒子を単離してンクロル
エタン、トリクロルエタン等の膨潤剤で膨潤させ、濃硫
酸又はクロル硫酸等を添加し、室温〜１２０℃でスルホ
ン化反応させることにより得ることができる。上記した
イオン交換容量は、濃硫酸又はクロル硫酸との反応時に
、その反応条件を適宜調整することにより調整すること
ができ１本発明における陽イオン交換樹脂の細孔の程度
は、上記野濁重合時に、その条件、主に非水溶性有機溶
剤の種類及び量を調整することにより調整することがで
き９粒径は懸濁重合条件を適宜選択して調整できる。

なお、上記反応成分の総量に対してジビニルベンゼンを
５〜６０重量％使用するのが好ましい。

また、スチレン系単量体としては、上記したものがあり
、酢酸ビニル、メタクリル酸、アクリル酸等の他のモノ
マーを反応成分の総量に対して５重量％以下の範囲で使
用してもよい。なお、＠濁重合に際して、過酸化ベンゾ
イル等の過酸化物等。

通常使用される重合開始剤を使用することができる。

丑た。上記スルホン化多孔性スチレン−ジビニルベンゼ
ン系共重合体粒子は、イオン交換容量が２ｍｅｑ／ｇ以
上のものが好ましく、特に３〜５ｍｅｑ／ｇのものが好
ましい。

本発明に使用するアルカリ金属イオン及び／又はアルカ
リ土類金属イオンとしては、　Ｌ−、Ｎａ”。

Ｋ”　、　Ｒｂ”　、　Ｃｓ＋等のアルカリ金楓イオン
、Ｍｇ”。

Ｃａ”　、　Ｓ　ｒ”　、　Ｂａ２＋等ノアルカリ土類
金ｔＡイ、ｔンが挙げられｏｏこれらを単−或いは複数
種用いることができるが、イソマルトースとグルコース
の分離性及び汎用性等を考慮すると、　Ｎａ＋イオンを
用いるのが最も好ましい。

本発明に係るカラム充填剤は、ＳＯ３−基含有陽イオン
交換樹脂粒子であって、　ＳＯｒ基の対イオンとして、
Ａｇ＋とアルカリ金ｉＵイオン及び／又はアルカリ土類
金属イオンとを粒子中に同時に有するもの、対イオンと
してＡｇ＋のみを有するもの並びに対イオンとしてアル
カリ金属イオン及び／又はアルカリ土類金属イオンのみ
含有するものの組合せからなる。ただし、対イオンとし
てＡｇ＋のみを有するものと対イオンとしてアルカリ金
鵡イオ／及び／又はアルカリ土類金桐イオンのみを有す
るものは、これらを混合してカラム充填して又はそれぞ
れ別個にカラムに充填してこれらを連結して使用される
。すなわち、充填剤全体として、　ＳＯ３−基の対イオ
ンであるＡｇ＋とアルカリ金属イオン及び／又はアルカ
リ土類金属イオンとが存在すればよい。

充填剤中に存在するＳＯ−基の対イオンであるＡ’ｇ”
　（（ａｌ　）とアルカリ金栖イオン及び／又はアルカ
リ土類金属イオンＣ（ｂｌ　］とは、当量比で（ａ）／
（ｂｌが９／１〜３／７の割合で存在するのが好ましい
。

特に、マルトース、イソマルトース及ヒグルコースの分
離のためには、（ａ）／（ｂ）カフ／３〜３／７の割合
で存在するのが好ましい。この比が大きすぎる場合、マ
ルトースとイソマルトースの分離は良好となるが、イソ
マルトースとグルコースの分離が悪くなり、小さすぎる
場合には、イソマルトースとグルコースの分離は良くな
るが、マルトースとイソマルトースの分離が悪くなる。

上記当量比は好ましくは５１５前後である。

上記塘の分８１１は、上記Ｆｂ）がアルカリ金属イオン
であることが好ましく、特にＮａ＋が好ましい。

マタ、ツユ−クロース、マルトース、フルクトース及び
ソルビトールの分離の之めには、　（ａ）／（ｂｌが９
／１〜５１５であるのが好ましく、上記（ｂｌとしてＢ
　ａ　”＋及び／又はＳｒ”＋を使用するのが好ましい
。

この比が大きすぎると、ンユークロースとマルトースの
分離は良好となるが、フルクトースとソルビトールの分
離が悪くなり、小きすぎるとフルクトースとソルビトー
ルの分離は艮くなるが、シュークロースとマルトースの
分離が悪くなる。上記当量比は４／１〜２／１が特に好
ましい。また、上記（ｂｌとしてＢａ＋＋及びＳｒ”十
以外のものは９分離効果がＢａ＋＋及びＳ、＋＋よシ劣
る。

上記対イオンの比率を調整するために次のように充填剤
を準備し、使用するのが好ましい。

すなわち、対イオンとしてＡｇ＋のみを有するＳＯｉ基
含有陽イオン交換樹脂粒子と対イオンとしてアルカリ金
属イオン及び／又はアルカリ土類金属イオンのみを有す
るＳＯ３−基含有陽イオン交換樹脂粒子を別個に用意し
ておき、それぞれについて。

単位重量当り又は単位容積当りの対イオンの当量を測定
しておき、これを目やすとして、それぞれの使用重量割
合又は使用体積割合を決め、それぞれを混合してカラム
に充填する方法か別個のカラムに充填したのち連結する
方法が、使用上、簡単で好ましい。このためには９粒径
、イオン交換容量、多孔度等の特性がほぼ同一のＳＯｓ
基含有陽イオン交換樹脂粒子を二とおり用意し、それぞ
れに上記ニゲループのイオンを同当量、対イオンとして
存在させるのが特に好ましい。

ＳＯ３′基の対イオンがＡｇ＋である陽イオン交換樹脂
粒子は、ＳＯ３−基の対イオンがＮａ＋、Ｈ＋等である
ＳＯ−基含有陽イオン交換樹脂粒子を硝酸銀等の水溶性
銀塩の水溶液で処理することによって得られる。また、
　ＳＯ３’基の対イオンがアルカリ金属イオン及び／又
はアルカリ土類金属イオンであるＳＯ３−基含有陽イオ
ン交換樹脂粒子は、　ＳＯ；基の対イオンがＮａ”、　
Ｈ＋等であるＳＯ３−基含有陽イオン交換樹脂粒子を水
溶性アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アルカリ金
属の水酸化物、アルカリ土類金属の水酸化物等の水溶液
で処理することによって得られる。

史に＋　ＳＯ３−ｈｉの対イオンが同時にＡｇ＋及びア
ルカリ金属イオン及び／又はアルカリ土類金属イオンで
あるＳＯ３−基含有陽イオン交換樹脂粒子は。

ＳＯ３−基のχ・ＩイオンがＡｇ＋であるｓｏ？基含有
陽イオン交換樹脂粒子を適量のアルカリ金属イオン及び
／又はアルカリ土類金妬イオン金含む水溶液で処理する
か、又はＳＯ３−基の対イオンがアルカリ金属イオン及
び／又はアルカリ土類金属イオンであるＳＯ♂基含有陽
イオン交換樹脂粒子を適量のＡｇ＋イオンを含む水溶液
で処理する。又は、　ＳＯ３−基の対イオンがＮａ＋、
　Ｈ＋等であるＳＯ３−基含有陽イオン交換樹脂粒子を
適量のＡｇ＋イオンと適量のアルカリ金１／３４イオン
及び／又はアルカリ土類金属イオンを含む水溶液で処理
することによって得られる。

本発明のカラム充填剤を用いた液体クロマトグラフィー
において、溶離液としては、水または水溶液が使用され
、水溶液としては、メタノール。

エタノール、グロパノール、アセトニトリル、テトラヒ
ドロフラン等の有ｍｓ媒、５０３−基含有イオン交換樹
脂粒子のＳＯｒ基の対イオンが置換されない程匪に希博
な塩、酸又はアルカリ性物質などを水に溶解されたもの
である。

マルトース、イソマルトース及ヒグルコースの分離には
、これらの溶解性の点から水を溶離液として使用するの
が好ましい。

また、シュークロース、マルトース、フルクトース及び
ソルビトールの分離には、溶離液として。

特に、アルカリ性物質の水溶液を使用するのが好ましい
。これは、他の溶離液よりもカラム充填剤の寿命が長く
なるからである。使用されるアルカリ性物質としては、
アルカリ金属、アルカリ土類金属等の水酸化物、炭酸水
素塩及び炭酸塩等、水溶液としたときにアルカリ性を示
すものでラシ。

具体的にはｒ　Ｌ　ｒ　ＯＨ＋　Ｎ　ａ　ＯＨ＋　ＫＯ
Ｈ＋　８　ｒ　（ＯＨ）２　＋Ｂａ　（ＯＨ）２　、　
ＮａＨＣＯ３，ＫＨＣＯａ　、　Ｎａ２　ＣＯ３＋に２
ＣＯ３等がある。これらのアルカリ性物質は５Ｘ１０〜
１０　　Ｍ／Ｖの濃度で使用される。濃度が５Ｘ１０　
　Ｍｌｌ未溝ではカラム充填剤の寿命が短くなり、１０
−３Ｍ１ｌを超えると、カラム充填剤の対イオンとのイ
オン交換が無視できなくなり、分＠性能が変化する。

本発明方法では、サンプル注入口より試料を注入し、上
記のカラム充填剤を充填したカラム内に上記溶離液を通
液しつつ通過させ９通過物を検知器により検知させて、
クロマトグラムを書かせる高速液体クロマトグラフィー
分析、カラム充填剤を充填したカラム内に試料を通過さ
せ９分画毎に採取する分取等に適用できる。このような
分離方法において１本発明に使用したカラム充填剤はイ
オン交換容量として機能しない。

また、カラム充填剤をカラムに充填するには。

従来公知の方法を採用することができ、特にスラリー状
で圧入するのが好ましい。

（作用） 本発明において、カラム充填剤中、　ＳＯｘ基の対イオ
ンがＡｇ＋であることにより、マルトースとイソマルト
ースの分離に役立つ。他方、　ＳＯ３′基の対イオンが
アルカリ金属イオン及び／又はアルカリ土類金ハイオン
であることにより、イソマルトースとグルコースの分離
に役立つ。これらの糖の分離が、上記二種の対イオンを
使用することによって相乗的に可能となる。

イオンＡｇ＋であることにより、シュークロースとマル
トースの分離に役立つ。他方、　ＳＯｒ基の対イオンが
Ｂａ＋＋／Ｓｒ＋＋であることによ凱フルクトースとン
ルビトールの分離に役立つ。これらの糖及び糖アルコー
ルの分離が、上記二種の対イオンを使用することによっ
て互いに阻外されることがなく、従って、相乗的に可能
となる。

（実施例） 次に９本発明を実施例及び比較例に基づいて詳述する。

実施例１ 平均粒径１０μｍ、イオン交換容量４．３　ｍｅ　ｑ／
ｇ及び架橋度（共重合体中のジビニルベンゼン成分の重
量割合）１０％であるスルホン化多孔性スチレン−ジビ
ニルベンゼン共重合体粒子２５９を水で膨潤させ、ガラ
スフィルター上に載せた。これに５％硝酸銀水溶液１／
を流し、　ＳＯ３−基の対イオンを完全にＡｇ＋にし、
水洗後、水で膨潤させ、スラリー状にし、直径１０．７
ｍｍ、Ａさ３００ｍｍのステンレス製カラムに充填した
。これをカラム（３）とする。

別に、平均粒径１０μｍ、イオン交換容量４．３ｍｅｑ
／ｇ及び架橋度（共重合体中のジビニルベンゼン成分の
重量割合）１０チであるスルホン化多孔性スチレン−ジ
ビニルベンゼン共重合体粒子２５９を水で膨潤させ、ガ
ラスフィルター上に載せた。これに５％塩化ナトリウム
水溶液５００ｍ６を流し、ＳＯ♂基の、対イオンを完全
にＮａ＋にし、水洗後、水で膨潤させ、スラリー状にし
、直径１０．７胴、高さ３００ｎｒｍのステンレス製カ
ラムに充填した。これをカラム（Ｂｌとする。

カラム（５）及びｆＢｌを直列に１本ずつ接続し、高速
液体クロマトグラフ（日立６３５Ａ型）及び５ｈｏｄｅ
ｘ　ＳＥ　　１１型示差屈折計（昭和電工製）を用い、
下記の試料液を注入した後、溶離液として水を用い、流
ｆｉｔ１．　Ｏｍ１１分、カラム温度６０℃で測定を行
った。

マルトース、イソマルトース及ヒクルコースを各０．１
％含む試料液を１００μｌ注入して得たクロマトグラム
を第１図に示す。第１図から明らかなとおり、良好な分
離が行われた。

実施例２ 試料液としてシュークロース、マルトース、イソマルト
ース、グルコース及びフルクトースヲ各０．１％含む試
料液を使用する以外は実施例１と同様に操作し、試料液
１００μｌ注入して得たクロマトグラムを第２図に示す
。

第２図から、良好な分離が行われたことが分かる。

実施例３ 平均粒径１０μｍ、イオン交換容量４．３　ｍｅｑ／ｇ
および架橋度（共重合体中のジビニルベンゼン成分の重
量割合）１０％であるスルホン化多孔性スチレノージビ
ニルベンゼン共重合体粒子２５ｇを水Ｋｍ潤δせ、ガラ
スフィルター上にのせた。

これに５％の硝酸銀水溶液１１を流し、　ＳＯｒ基の対
イオンを完全にＡｇ＋にし水洗した汲水で膨潤させスラ
リー状にする。これをスラリー（Ａ′）とする。

平均粒径１０μｎｌ　、イオン交換容量４．３ｍｅｑ／
ｇおよび架橋戻１０チであるスルホン化多孔注スチレン
ージビニルベンゼン共重合体粒子３５ｇｔ−水に膨潤さ
せガラスフィルター上にのせた。これに５チの塩化ナト
リウム水浴液５００　ｍｌを流し。

ＳＯｓ’Ｍの対イオンを完全にＮａ＋にし、水洗汲水で
膨潤させスラリー状にする。これ金スラリー（Ｂ′）と
する。

スラリー（に）とスラリー（Ｂ′）をよく混合し。

１０．７ｎｎｎφＸ３００ｍｍのステンレス製カラムに
充填し、カラム（Ｃ）を得た。このカラム（Ｃ）を用い
１次の条件で、糖類の分離を行った。

０試薬　　シュークロース、マルトース、クルコース、
フルクトースは和光紬薬製試薬を、イソマルトースは東
京化成製試薬を使用した。溶離液には比抵抗５−ＯＸＩ
Ｏ’Ωｃｍ以上のイオン交換水を使用した。

０装置　　高速液体クロマトグラフは日立６３５Ａ型を
、検出器としては示差屈折計は５ｈｏｄｅｘＳＥ　　１
１（昭和電工製）をそれぞれ用い、カラム（Ｃ１を直列
に２本接続した。

０条件　　溶離液には水を用い、流量Ｌ　Ｏｍｅ／ｍ　
ｉｎ　。

カラム温度６０℃で測定を行った。

第３図ｉｄマルトース、インマルトース、クルコースを
１，０％含有するサンプル液を２０μｌ注入して得たク
ロマトグラムを示したものであり、良好な分離が得られ
ることがわかる。

ｇ４図ｈシュークロース、マルトース、イソマルトース
、グルコース、フルクトースを各１．０チ含有するサン
プル液を２０μｅ注入して得たクロマトグラムを示した
ものであシ、良好な分離が得られることがわかる。

比較例１ カラム（Ａ）１本だけを使用し、カラム（Ｂｌを使用し
なかった以外は、実施例１と同様に操作を行った。

マルトース、イソマルトース及ヒクルコースを各０．１
％含む試料液を５０μｌ注入して得たクロマトグラムを
第５図に示す。

第５図から分かるとおり、イソマルトースとグルコース
の分離を行うことができなかった。

比較例２ カラム（Ｂ）１本だけを使用し、カラム囚を使用しなか
った以外は、実施例１と同様に操作を行った。

マルトース、イソマルトース及ヒグルコースを各０．１
％含む試料液を５０μｌ注入して得たクロマトグラムを
第６図に示す。

第６図から分かるとおり、マルトースとインマルトース
の分離を行うことができなかった。

実施例４ 粒径１２±２μｍ、イオン交換容量４．３　ｍｅｑ／ｇ
及び架橋度（共重合体中のジビニルベンゼン成分のｉｆ
ｘ台割合、以下同様）１０チであるスルホン化多孔性ス
チレン−エチルモノビニ／Ｌ？ベンゼンージビニルベン
ゼン三元共市合体粒子２４９ゲ水に膨潤させ、ガラスフ
ィルター上Ｖこのせた。これに５チの硝酸銀水溶液１１
！を流し、ＳＯｉ基の対イオンを完全にＡｇ＋にし水洗
した汲水で膨潤させスラリー状にする。これ金スラリー
囚とする。

粒径Ｉ　Ｑ　μｍ　、イオン交換容ｊｔ４．３ｍｅｑ／
ｇおよび架橋度１０チであるスルホン化多孔性スチレン
−ジビニルベンゼン共重合体粒子１０ｇを１５０９の水
で膨潤させてスラリー状とし、これにＢａ　（ＯＨ）２
　・８　Ｈ２Ｏ６，８ｇを水に溶解させて５００ｍ１　
とした水溶液を混合し、１時間攪拌した。その後、濾過
し、水洗し、水で膨潤させスラリー状にする。これをス
ラリー（Ｂｌとする。スラリー囚とスラリー（Ｂ）をよ
く混合し、１０．７ｍｍφＸ３００ｍｍのステンレス製
カラムに充填し、カラムｔＣ＋　ｔ−得た。

これを高速液体クロマトグラフィー用分析装置にセット
シ、シュークロース、マルトース、グルコース、マルチ
トール、フルクトース及びンルビトールを含有する試料
（以下試料Ｉと記す）を分析した。分析条件は、流量１
．０　ｍｌ　／分、溶離液は１０−’　Ｍ　／　ｌ　Ｎ
ａＯＨ水溶液及びカラム温度６０℃とし、検知器は示差
屈折計を用いて、クロマトグラムを得た。得られたクロ
マトグラムを第７図に示す。

第７図において、ピーク４はシュークロース。

ピーク１はマルトース、ピーク３はグルコース。

ピーク８はマルチトール、ピーク５はフルクトース、ピ
ーク９はソルビトールである。

実施例５ 実施例４において、　Ｂａ（ＯＨ）ｚ・８Ｈ２０６，８
ｇの代わ’）　ＶＣ５ｒ（０）１）２　・８Ｈ２０５，
７ｇを使用した以外は実施例１と同様にして、カラム充
填剤を得た。

この後、実施例１と同様にしてカラムに充填し。

高速液体クロマトグラフィーにより試料Ｉのクロマトグ
ラムを得た。得られたクロマトクラムを第８図に示す。

第８図において、各ピーク名は実施例４と同じである。

実施例６ 実施例４において、　Ｂａ　（Ｏｆ（）ｚ　・８　Ｈ２
Ｏ６，８９の代わりにＢａ（ＯＨ）ｚ　・８　Ｈ２Ｏ３
，４ｇ及びＳｒ（ＯＨ）２・８Ｈ２０２，９ｇ’ｉ−使
用した以外は、実施例１と同様にして、カラム充填剤を
得た。この後、実施例４と同様にしてカラムに充填し、
高速液体クロマトグラフィーによシ試料Ｉのクロマトグ
ラムを得た。得られたクロマトグラムを第９図に示す。

第９図において、各ピーク名は実施例４と同じである。

比較例３ 実施例４において、スラリー囚のみを、カラムに充填し
た以外は実施例１と同様にして、カラム（Ｃ）を得た。

高速液体クロマトグラフィーにより試料■のクロマトグ
ラムを得た。得られたクロマトグラムを第１０図に示す
。

第１０図において、ピーク４はクユークロース。

ピークｌはマルトース、ピーク３はグルコース。

ピーク８はマルチトール、ピークｌＯはフルクトースと
ソルビトールの合同ピークである。

比較例４ 実施例６において、スラリー田）のみを充填した以外は
、実施例６と同様にしてカラム（Ｃｈ−得た。

高速液体クロマトグラフィーにより試料■のクロマトグ
ラムを得た。得られたクロマトグラムを第１１図に示す
。

第１１図において、各ピーク名は実施例１と同じである
。

クロマトから明らかなようにシュークロース（ピーク４
）とマルトース（ピーク１）の分離が不十分であること
がわかる。

なお９以上の分析に用いた装置の模式図ｔｌ−第１２図
に示す。この装置において、溶離液は容器１１に蓄えら
れ、溶離液はポンプ１２によりパイプ１３全通して、カ
ラム１４及び検知器１ｓｔ−通して容器１６に廃液され
る。試料は注入口１７（例えば三方コック）より導入さ
れ、検知器１５にはクロマトグラムの記録計１８が連結
される。

（発明の効果） 本発明に係るカラム充填剤を用いると液体クロマトグラ
フィーによって、抛及び／又は塘アルコール、例えばイ
ソマルトース、マルトース及びグルコース並ヒニシュー
クロース、マルトース、フルクトース及びソルビトール
を極めて良好に分離することができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例１の分析結果を示すクロマトグラム、第
２図は実施例２の分析結果を示すクロマトダラム、第３
図は％＃？！１３の分析結果のうち。 マルトース、インマルトース及ヒクルコースヲ含むサン
プル液の結果を示すクロマトグラム、第４図は実施例３
の分析結果のうち、７ユークロース。 マルトース、インマルトース、グルコース及ヒフルクト
ースを含むサンプル液の結果を示すタロマドグラム、第
５図は比較例１の分析結果を示すクロマトグラム、第６
図は比較例２の分析結果を示すクロマトグラム、第７図
は実施例４の結果を示すクロマトグラム、第８図は実施
例５の結果を示すクロマトグラム、第９図は実施例６の
結果を示すクロマトグラム、第１０図は比較例３の結果
を示すクロマトグラム、第１１図は比較例４の結果を示
すクロマトグラム、第１２図は実施例及び比較例に用い
た分析装置の模式図を示す。 符号の説明 ■・・・マルトースのピーク ２・・・イソマルトースのピーク ３・・・グルコースのピーク ４・・・ツユ−クロース、のピーク ５・・・フルクトースのピーク ６・・・イノマルトースとグルコースの合同ピーク７・
・・マルトースとイソマルトースの合同ビーク８・・・
マルチトールのピーク ９・・・ソルビトールのピーク １０・・・フルクトースとソルビトールの合同ピーク代
理人　弁理士　若　林　邦　彦・パ″゛。 −′ 冨　１　図 １・・・フルドースｎご−７ Ｚθ　　　　　　　　　　　３θ 溶　　出　２容、ｔ（ｍ）〕− 第　２　図 ４　　ンユー７ａ−スクこ’−７ ５・　フル外−スフこ−７ ２０３θ　　　　　　　　　　　　　　　４ρニ孤　土
　客　量（ユノノ　ヨ ｘ　３　　図 Ｚθ　　　　　　　　　　　　　３ρ 腺：Ｊ：、各−ｆ（九〇→ 菖　４　図 １　２ルトースＱヒ０−７ ？　　イソスル１−ズｎこ０−７ ５　フルクトース／）ヒーー７ 考　土　谷　！　（、？７ｔノラ　− 第　　５　　図 ／　マルトースのヒ−７ ６イソ！ルｈ−スと７゛ルコーズｆ）今１ｍｌ仁６−ク
シ塔５ミ　乏り二　捧呈　（りｎｌジ Ｙ　ｑ　図 Ｅ　Ｉｕｔｔｏｎ　　ｔｉｍｅ　（？ｒＬＬａ）第　１
０　　図

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ＳＯ＿３＾−基を有する陽イオン交換樹脂粒子から
   なり、該ＳＯ＿３＾−基の対イオンとしてＡｇ＾＋＾＋
   並びにアルカリ金属イオン及び／又はアルカリ土類金属
   イオンを有してなる液体クロマトグラフィー用カラム充
   填剤。 ２、ＳＯ＿３＾−基の対イオンがＡｇ＾＋であるＳＯ＿
   ３＾−基を有する陽イオン交換樹脂粒子とＳＯ＿３＾−
   基の対イオンがアルカリ金属イオン及び／又はアルカリ
   土類金属イオンであるＳＯ＿３＾−基を有する陽イオン
   交換樹脂粒子からなる特許請求の範囲第１項記載の液体
   クロマトグラフィー用カラム充填剤。 ３、対イオンであるＡｇ＾＋〔（ａ）〕とアルカリ金属
   イオン及び／又はアルカリ土類金属イオン〔（ｂ）〕が
   当量化で（ａ）／（ｂ）が９／１〜３／７の割合で存在
   する特許請求の範囲第１項又は第２項記載の液体クロマ
   トグラフィー用カラム充填剤。 ４、ＳＯ＿３＾−基を有する陽イオン交換樹脂粒子がＳ
   Ｏ＿３＾−基を有する多孔性スチレン−ジビニルベンゼ
   ン系共重合体粒子である特許請求の範囲第１項、第２項
   又は第３項記載の液体クロマトグラフィー用カラム充填
   剤。