JPS6183122A - 細胞のエイコサノイドバランスを正常化する方法及びそれに使用する組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は発ガン状態の治療に使用する物質及び前記物質
を含有する組成物に関する。

［従来の技術］ １９８０年にホロビンはほとんど全部のガン細胞に共通
な代謝￥４箔を広範囲にわたって説明した［ガンの可逆
性（Ｒｅｖｅｒｓｉｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｃａｎｃｅｒ
）：環式ＡＭＰ、カルシウム、必須脂肪酸及びプロスタ
クランジンＥ、の関連性；メディカル　ハ・イボセシス
（Ｍ　ｅｄ、ＨｙｐｏＬｌ＋ｅｓｉｓ）第６巻４６９〜
４８６頁（１９８０年）〕、ホホロンはプロスタグラン
ジン、スロンボサンド（Ｌｌ＋ｒｏｍｂｏｘａｎｄｅ）
Ａ　＋（”ｒ　Ｘ　Ａ　＋）及びプロスタグランジンＥ
１　（Ｐ　Ｇ　Ｅ　ｌ　）の合成にｔ〕ける代謝異常が
ｍ期のガン細胞がその異常を示す、すなわちガン細胞が
無制限に分裂することを可能にする最終因子であると結
論している。ポロビンは史に一般の文献にノｊ（された
証拠に）＾ついてＴＸＡ２及びＰ　Ｇ　Ｅ　１のご成に
Ｊ３　ｉ’ｌる異常を生ずる欠！ｐはデルタ−６−デサ
チュラー七酵素の阻害によるものであることを提唱した
。この酵素は体の全正常Ｒ回胞中の必須脂肪酸であるリ
ルン酸（ＬＡ）Ｅｒ−リルン酸（ＧＬＡ）に変える。こ
のＧＬＡは更にジホモ−γ−リルン酸（ＤＧ’ＬＡ）に
代謝され、このＤＧＬＡは次に第１系統のプロスタグラ
ンジン（Ｐ　Ｇ　Ｅ　、を含む）に変えられる。

ホロビンはＰ　Ｇ　Ｅ　＋とＴＸＡ、とは全正常細胞の
生化学の強力な、ｉＪ胞円内調節剤あること、しかし、
Ｔ　Ｘ　Ａ　２はＰＧＥ、の不在下では働がないことを
認めた。ホロビンはＰＧＥ、の欠如、従って無能のＴＸ
Ａ２は潜伏性ガン細胞の抑制不能の分裂のきっかけとな
るのに充分な大きさの細胞の異當代謝を生起するとまと
めている。

こうして、ポロビンは、鼓の仮説を試験するために、慣
用の治療を受けているガン患者にＧ　Ｌ　Ａ分補給すべ
きこと、すなわちデルタ−６−デサチュラーゼ（ｄ−６
−ｄ＞の活性の１１１害により生ずる代ａ（ｊ匹断３回
避すれは、逆形１１転換によってガン（（１１胞３正常
（ヒ１°ることが可能であると提唱した。

欧州特許００３７号において、ホロビンはガンｌｉｄ？
　ＩＫ”用にＧ　Ｌ　Ａとチオブロソンとの（昆き物を
特許請求している。

［発明が解決しようとする問題点］ 本発明の目的はエイコサノイド５１　（ｅｉｃｏｓａｎ
ｏｉｄｓ）の１種または２種以上の正常生温き物の産生
を考慮することによってガンの治療用組成物を提供する
にある。

［問題点を解決するための手段］ 本発明はエイコサペンタン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサ
ン酸（ＤＨＡ＞、ＥＰＡとＤＨＡの混き物及びＥＰＡ、
ＤＩ−（Ａ及びＧＬＡの混合物からなる群から忍ばれた
物質の実効量を含む組成物の実効投与量を温血動物に投
与することからなる、細胞のエイコサノイドバランスを
正常ｆヒする方法を提供するにある。

更に、本発明はエイコサベンクン酸（ＥＰＡ）、ドコサ
ヘキサン酸（ＤＮＡ）、ＥＰＡとＤ　Ｎ　Ａのｌ昆計掬
及びＥＰ、Ａ、ＤＩＩＡ及びＧＬＡの混な物からなるＩ
ｉＴかＩ’＋　Ｈ凹１１れた物質の実効Ｍ　ｔ　ｋむ組
成物よりなるガンの子Ｎノまたは治療用の細胞のエイコ
サノイドバランス分正常］ヒするための組成物ご提供す
るにある。

本発明の好適な弓様によれば、ＥＰＡまたはＤ　ＨＡま
たはＥＰＡとＤ　ＨＡとのｌ昆、ｌｌ＋才勿と種々の形
望、例えばカプセル、タブレットまたは池の慣用の製剤
形態または食品、飲料等と混合して投与できる。

上述の化合物の好適な塩、誘導体または化学上の同族体
も本発明の範囲に入ること分理解されたい。↑νに、マ
グネシウムまたは亜鉛塩は重要である。

上述の物質またはそれを含む組成物はタブレ・Ｉトまた
はカプセル中に含ませるような単位投与量を例えば毎日
または１日当たり２回ずつ投与することができる。各カ
プセル中の活性成分は上述のように溶液であってもよく
、あるいは活性成分と固体畠ＴＦＳ剤またはキャリアか
らなる混合１勿の形誓て゛あってもよい、毎日投与する
単位投与量はｌｊｔ通５０〜１００ｋｇの体重の人グ）
場ご活性成分ＬＯＯＯｍｇまて含ご有することかてきる
。

活性成分用の適当な溶媒には植物油、等張性食塩溶液ま
たは大木が摂取するのに適した任息の池の脂質または水
性溶媒が３よれる。

［′Ａ　　施　　例］ 以下に不例のため力試験管内及び生体内研究を含む実施
例（以下、単に「例」と記載する）　ｅ　’ｉ′＋げ、
本発明を更に説明する。

人間の骨原性肉ＭｉＲ佃胞を５Ｑｍｌ！グレーナープラ
ス千ツクフラスコに植え付け、通常の方法で維持した。

細胞を以下に記載する物質の存在下で３週間培貫した・ （ｉ）成長培地のみ一対照。

（１１）成長培地及び培地ｌｌ１１１当たりＩＯＪのＮ
ａ、Ｃｏｓヲ２１１ｉＮ、：１．ｆ：；加。

（…）成１’冒’＝＝地及び培地１ｊｎＮ　山１．−リ
２０ｉ／のＥＰＡ分２日毎にｒ、’＃加。

（Ｉｖ）成長培地及び培地ＩＩＩｚ当たり２０ｇのオレ
イン酸を２０毎に添加。

（ｖ）成長培地及び培地ＩＩ＾ｌ当たり５ｊのＰＧＥ、
を２日毎に添加。

（ｖｌ）成長培地及び培地１＋ｎｌ当たり５２のＰ　Ｇ
　Ａ　（を２０毎に添加。

（ｖｉｉ）成長培地及び培地１１１１１当たり５ｇのＰ
　Ｇ　Ｆ　１　ａを２０毎に添加。

３週間後、”９　Ｄフラスコを０．１％アミドシュバル
ッ（Ａ　ｍ１ｄｏｓｃｌ＋ｗａｒｚ）染色液で染色した
。

１＝＞ ３週間後、始めに植え付けた雪原性肉腫細胞は対照の培
養フラスコ及びＮ　ａ　２　ＣＯｊを補充したフラスコ
の底全体をほとんど覆う種々の寸法のコロニーを生じた
。

オレイン酸分ｔｕｆｆ充した培養物は対照培養物より成
長は激しか−）な。

ＰＧＥ、８１．びＰＧＡ１培養物は対照培養物の約２５
°１、の成長を達成した。

ＰＧＦ１ａｌΔ養鞠は対照培Ｊ１２鞠と番Ｊは同様の成
長をｊｉ！成した。

Ｅ　Ｆ’　Ａ　ｔｉｌｔ充培ｎ物は５００．１０００及
び２０００４（１を胞密度培地中でコロニーは完全に無
かった。

ＰＧＥ、及びＰ　Ｇ　Ａ　１はより著しい成長抑制効果
をもつが、ＰＧＦｌａはガン細胞成長に際して少しら効
果が無かった。これとは異なって、ＥＰＡは完全な成長
抑制効果をもっていた。

上述の結果はガン細胞中の制御できない細胞分裂が先駆
体脂肪酸類からプロスタグランジンのき成の阻害から生
ずる該細胞中のプロスタグランジンの濃度の異常の結果
であることを示唆するものである。該異常はガン細胞に
ＥＰＡを供給することによって必要な１０スタグランジ
ンが必要潤度でき成されることによって明らかに除去さ
れる。

一旦、これをガン細胞から達成することができれば、ガ
ン細胞の制御てきない分裂は明らかに完全に、Ｉ１１制
御される。

匹−シし 例１に記載した苅くべき事実を考Ｌ・肛すると、Ｂ［ゝ
八［３系列グ）・ビ・須脂１１／ｉ酸中間体のフ゛ロス
タグランジン先＠体、すなわちプロスタサイクリン（ｕ
ｒｏｓｔａｃｙｃｌｉ＋＋）、ｌ−ロンホキサン（ｔｌ
＋ｒｏｍｂｏｘａｎｅ）−４３及びロイコトリエンちま
た調査したーＥＰＡは天然産必須脂肪酸γ−リルン酸（
Ｃ１８：３Ｗ３　）ｉ（ｃｌ−６−ｄの１ヤ用によりオ
クタデカテトラエ　シ′晶２（ｏｃｔａｄｅｃａＬｅｔ
ｒａｅｏｎｉｃ　　ａｃｉｄ）（Ｃ１８：４Ｗ３）を得
て、エイコサテトラエン酸 （ｅｉｃｏｓａＬｅｔｒａｅｎｏｉｃ　　ａｃｉｄ）（
Ｃ２０：４　　　　Ｗ　３　　）に連鎖延長し、次にデ
ルタ−５−デサチュラーゼの１ヤ用によりエイコ→ｒペ
ンタン酸（ｅｉｃｏｓａｐｅｎＬａｎｏｉｃａｃｉｄ）
（Ｃ２０：４　　Ｗ　３　）”遺る二とによって誘導し
たコをＭ　Ｇ　６３骨原性肉腫の培地１＋ｎ／に４０ｇ
補充することによって培養物中の細胞の増殖及びコロニ
ー形成分完全に抑制した。この実験は例１で観察された
事実３Ｖｌ認するために反復されたもので、ｌる。

更に、Ｄ　ＣＡＡであるγ−リルン酸の代謝の最終生成
物をら培１￥物中の渭原性細胞に添加した。

慄−ゴ色 Ｍ　６６３人間の慣原性肉肝細胞を例１に記載したよう
に培養フラスコに植えけけな、２０００ＩＩｌ！Ｉのδ
細胞と個々のフラスコに植え付けた。試験した個・７の
脂肪酸について正副一対のフラスコを「吏用した０細胞
（１着のための２日間後及び更に３日間すなわち５日？
炎、標準成長培地中に溶解した以下に記載する脂肪酸を
培養中の細胞に添加した。それ故、個々の培養物は関連
する脂肪酸ｆ！：２回のみ（、鴛加した。７日間の培養
の終了時点で、１”細胞念染色し、検査した。

（１）培養培地のみ一対照。

（２）’ａｎ培地培地１当ｌ当それぞれ５．１０．２０
．４０．６０．８０及び１００ｇのオレイン酸［オレイ
ン酸（ＯＡ）はオメガ−９位置に１個の不飽和結きなも
つ炭素数１８個の脂肪酸である。それ故、分子中に３よ
れる二重結合の数取外にはリルン酸及びγ−リルン酸と
構造的にほぼ同一である。

凌者の差のために、ＯＡはリルン酸及びγ−リルン酸と
は異なってエイコサノイド３造ることがて゛きない。そ
れ故、上イコサノイドの効果を調査する場６ノ）りｊ　
ｊｊｊ４として１吏用するために閏れた脂肪酸であると
みなす二とができる。

（３）培養媒体１ｍＮ当たりＥＰＡそれぞれ５．１０．
２０．４０．６０．８０及び１００．、。

（４）培養培地１＋ｎｌ当たりＤＨＡそれぞれ５，１０
．２０．４０．６０．８０及び１００ｙ。

周−ｊ− （１）オレイン酸を補給した細胞は５〜ｔｏｏｇ／ｍＮ
の全ての補給量で培養培地のみを用いた対照と同様に非
缶に高い富度のコロニーを生じた。

（２）ＭＧ６３骨原性肉肚細胞の増殖及びコロニー形成
にＥ　Ｐ　Ａ及びＤ　１＋　Ａはほぼ等しい溜進的な抑
制御Ｙ用を示した。

（３）ＥＰＡ及びＤＨＡは培養媒体ＩＩＡ／当たり４０
ア以上の補！８量て４Ｊ胞の増殖及びコロニーの形成を
完全に抑制した。

ＥＰＡまたはＤ　ＨＡと１０〜１００　ｇ／　ｎ？７）
　１ｉｌｉ給量でｈＩｉ給した培養物の顕微鏡試験にお
いて５１個の細胞または細胞のコロニーも！Ｉ１１察さ
れながっ’ｃ　ｔＬ　故、脂ｎｈ　酸代ａｔ　物、Ｅ　
ＰＡ及ヒｌＪ　Ｉｆ　Ａ＋ｉ’１ｌＪ７にガン、ｉＩ胞
成長を遅延及び抑制することか明らかである。更に、こ
れらのエイコサノイド先駆体脂肪酸と別個にまたは組み
会わせてガンの治療に１吏用できることが明らかであろ
う。

これらの結果は他の３種類のガン細胞、すなわち喉頭ガ
ン、ヘパドーム（肝臓ガン）及び色素細胞腫（皮膚ガン
）を使用して確＝２された。

（Ｌ友 第１表は培地中の人間の喉頭ガン細胞に種々の濃度のオ
レインＭ（ＯＡ）及びエイコサペンタン酸（ＥＰＡ）を
補給した場きの増殖速度の影響を示すものである。細胞
を実験１０目に０　、０６つ８／１０’／＋ａｌの濃度
で植え付けた９種々の脂肪酸補給物を含有する成長培地
を実験期間の３日口及び５日口に培え物に（；ホ加し、
実験期間８日口に４佃胞数３数えた。対照培養物は標準
成長培地だけを入れた。

対照　　０．２０９８０．０５７ （〇八）　　２０　　　　　　　　　　０．３（ｉ　　
　　　　０．１（＋３　　　０．０５　　　　　　　　
　　ｎｒ。

４０　　　　　０．４１　　　０．０９１　０．０５　
　　　　　ｎ５６０　　　　　０．２］　　　　０．４
９　　０．０５　　　　　　ｕｓ（εＩ’／ｌ）２０　
　　　　　　　　０．２６　　　　　０，４２　　　　
０．０５　　　　　　　　　　ｕｓ４０　　　　　０．
０７　　　０．０＋５　０．０１　　　　　１Ｉｓ６０
　　　　　０．０３　　　０．０３５７　０．０１　　
　　　１１！；泣３」！ 第２人は培養物中の人間ヅ）喉頭ガン≦［胞に等ｖ１き
の７・−リルン酸及びエイコサベンクン酸、）。

ロスタグランジンＥ及びＡ、プロスタグランジンＦ及び
Ｆ２の０１用、及び種々の濃度のドコサヘキサン酸を用
いた場きの増殖速度の影響を示すものである。実験１０
口に０．０２５　Ａ　Ｉ　Ｑ　′７’ｒｈ１ｉＪ：、度
て５個胞ｆ：植んけけた。実験１１ＪＩ間の３０口及び
５日口に種々のｒ市充物ｆ！−添Ｊ用し、８日口に細胞
数３数えた。

対照　０．３３　０．００６ ＧＬ＾　　　２０　　　　０．２２　　　０．００５　
０．０＋　　　　　　１．ｓεＰ八　　　　　　（う　
ＯＯ，０９０，００９０，０１ｌｌ５１”（：Ｅ。

５　　　　０．１９　　　０．０＋６　０．０１　　　
　　１ｌｓｐ「へ ｒＧＥ。

５　　　　０．３３　　　０．００９　　０．０５　　
　　　　ｎ＝Ｔ’ｌ″ｒ ［Ｐ＾　　　２０　　　　０．＋３　　０．０１８　０
．０＋　　　　　１１５０Ｈ＾　　　４０　　　　０．
０６　　　０．００５　０．０１　　　　　　ｂｓ１１
１１＾　　　　６０　　　　０．００！］　　　０．０
０３　０．０１　　　　　　ｈ：＋ｌ＼バトーム及び色
票細胞腫に関する結毛は喉頭ガンにおける上述の実験と
非常に良＜　Ｄノ、てぃた。

−上述の実験の全てにおいて、培養物中の正；°：Ｘな
Ｍ　Ｉ）　Ｂ　Ｋ　細胞３使用して２回の実＠分行なっ
た６ＣＦ　Ａ　Ｃ−ｇ−須脂肪酸）　１．ｔ　Ｍ　Ｄ　
１３　Ｋ　細＋１ａ　ノｈＥ　ｎ　’：　１１１１　制
し・五′いことは！１！要なことである。それ故、Ｅｒ
Ａの成長抑制作用はガン綿服について川；ｉニーに１１
ア・：４゛ちし１）である。

友肌亙玉瞭Ｕ、　Ｈ’、に１・Ｅｌｌ−る上側・内研′
（１Ｃ１川の（Ｌ′’；′：　１７：ｌ：法１１］１泊
ｆｌ！及び放射線心７１％処理に失敗した後の末期Ｍ　
４犬として記載される多数のカシ０者は毎日の食事によ
る組成物（ＧＬＡｌ、６り＋ＥＰＡ　Ｌ　、６．７’−
、ＤＮＡ０．５ｇ）の補給にｆにれた応答を示した。末
期症状の患者に対するこれらの公開試験を続行した。

例えば思名Ａ（約５５才）は食道ガン（末期症状と喜え
られる）に苦しんでいた。彼の食道及び波力胸腔中の大
きな転移を完全に切除後に上述のようにＥＰＡ、′ＤＨ
Ａ／ＧＬＡを補給した。６箇月畿に患者は明らかにｕＥ
ｌｌになり退院した。

忠音Ｂ（３５才）は脳腫瘍に苦しんでいた。腫瘍ヅ）切
除は勧奨されなかったので、（皮は１箇月以内しか生存
でさ・ないと思−〕ていた。

これは１９８２年ｌＯ月であった。彼の食事にＧ　Ｌ　
Ａ　／　Ｅ　Ｐ　Ａ　／　Ｄ　ＨＡを補給した。彼は規
則的に回復し、命は退院して家庭におり、彼自身の車企
１転している。腫瘍の直径は８０％だけ小さくなったか
、今なお回復中で６しる。

・°占名Ｃ（２６士’　）ｆよ大きな１扛厖−九（発カ
ッて′あった。

１≦）８３年１月に（皮は食事にＣＰ　Ａ　／’　ｍｌ
　ＩＩΔ／′Ｇ　Ｌ　Ａを補給した６腫瘍ｆ）人ささは
蓼３に回復しつつｒＰ）す、能事に復帰している。（肝
臓原発ガン・９０名は陽性の診断ｉ１４．’７４０口の
千Ｊ勺生存期間である）。

患ちＤ（６０才）は片側の喉頭ガンに罹病し、数箇月内
の寿命て′あると予想された。彼はいまなお（１年以上
も）ＥＰＡ、／ＤＨＡ／ＧＬＡの食事補給３受けており
、小結節が完全に退行し、昔通の生活とｊＸりつつある
。

中皮腫をわずらっている患者Ｅ及びＦ（５５才と５０才
）の２つの症例では二人の寿命は短期間のはずで、ちっ
た。しかし、彼等は組成物の食事補給をしてから６箇月
後の今はＵ康である。

ＥＰＡ、ＤＨＡ及びその混き物及びこの７昆き１勿とＧ
ＬＡとの温き物の効果に関して更に実験と行ない、対照
及びＧ　Ｌ　Ａ自体に関する効果とも比較した。これら
の実験の結果を図に揚（プる。

【図面の簡単な説明】

Ｖはｆ重・、・の・ビラ１′！脂肪酸川の綱３ぜによる
４口胞の増’′＋’ｉ　＋ご４２はす効宋企示４−線図
である。 １、Ｔ＄件の表示 昭和６０年特許願第１７６７９４号 ２．２明の名称 細胞のエイコサノイドバランスを正常化する方法及びそ
れに使用する組成物 ３、　ＩＩＩ！正をする者 事件との関係　特許出願人 名　称　セントラケム・リミテッド ４、代理人 住所　東京都千代田区丸の内二丁目４番１号九の内ビル
ディング４階 ５、補正の対象 （１）　Ｍ書の特許出願人の代表者の憫（２）代理権を
証する書面 （３）図面 ６、補正の内窒 （１）別紙願書の通り

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　エイコサペンタン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサン酸
   （ＤＨＡ）、ＥＰＡとＤＨＡの混合物及びＥＰＡ、ＤＨ
   Ａ及びＧＬＡの混合物からなる群から選ばれた物質の実
   効量を含む組成物の実効投与量を温血動物に投与するこ
   とからなる、細胞のエイコサノイドバランスを正常化す
   る方法。 ２、組成物が体重５０〜１００ｋｇ当り１０００ｍｇ以
   下の活性成分または活性成分の混合物を毎日投与するた
   めに単位投与量を含む特許請求の範囲第１項記載の方法
   。 ３、物質がマグネシウム塩または亜鉛塩である特許請求
   の範囲第１項記載の方法。 ４、エイコサペンタン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサン酸
   （ＤＨＡ）、ＥＰＡとＤＨＡの混合物及びＥＰＡ、ＤＨ
   Ａ及びＧＬＡの混合物からなる群から選ばれた物質の実
   効量を含む組成物よりなるガンの予防または治療用の細
   胞のエイコサノイドバランスを正常化するための組成物
   。