JPS6134615B2 - - Google Patents
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- JPS6134615B2 JPS6134615B2 JP10629578A JP10629578A JPS6134615B2 JP S6134615 B2 JPS6134615 B2 JP S6134615B2 JP 10629578 A JP10629578 A JP 10629578A JP 10629578 A JP10629578 A JP 10629578A JP S6134615 B2 JPS6134615 B2 JP S6134615B2
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- guanidines
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
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- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Description
本発明は、グアニジン類の新規な螢光定量法に
関する。 本発明者らは、モノ置換グアニジン類を含有す
る試料にベンゾインを加えて加熱反応させ、反応
混合物の螢光強度を測定することにより、グアニ
ジン類を簡易かつ確実に定量しうることを見出し
た。 本発明においてモノ置換グアニジン類とは、グ
アニジノ基を有する化合物を意味し、例えばグア
ニジン、アルギニン、アグマチン、グアニジノ酢
酸、グアニジノ酪酸、グアニジノコハク酸等の低
分子化合物のほか、アルギニンを構成アミノ酸と
するペプタイド、例えばアンジオテンシン、タフ
トシン、ブラジキニン、LH放出ホルモンそのほ
かストルプトマイシン等のグアニジノ基を有する
化合物も、同様に安定な螢光によつて高感度で測
定できる。 試料中のグアニジノ基とベンゾインとの反応機
構はまだ詳しく解明されていないが、アルカリの
存在下に沸騰水浴中で40〜50分間加熱反応させる
と、反応混合物の螢光強度は最大かつ一定値を示
すようになる。ベンゾインは溶剤例えばジメチル
ホルムアミドなどに溶解して添加することが好ま
しい。アルカリとしては水酸化ナトリウム又は好
ましくは水酸化カリウムが水溶液の形で用いられ
る。 反応終了後、メルカプトエタノールを好ましく
は水溶液の形で添加することによりグアニジン類
からの螢光を安定化することができ、3時間室温
に放置しても螢光強度は一定である。 一般にベンゾインは2〜4ミリモル/、アル
カリ特に水酸化カリウムは3〜5モル/、メル
カプトエタノールは0.2〜0.8モル/の濃度の溶
液として用いることが好ましい。 本発明によればモノ置換グアニジン類の量が
0.02〜500×10-9モル/mlの広い範囲において原
点を通る直線的な螢光強度の変化を測定すること
ができる。また本方法は励起極大波長及び螢光極
大波長は一般にそれぞれ320〜328nm及び434〜
437nmで一定しており、その差が約110nm以上で
大きく、しかも可視部で測定でき、操作が簡単で
あるなどの利点を有する。従つて本発明はグアニ
ジン類特にモノ置換グアニジンの微量定量法とし
て優れている。 実施例 下記表中に示す各試料の水溶液1mlにベンゾイ
ンのジメチルホルムアミド溶液(濃度4ミリモ
ル/)0.5ml及び4N−水酸化カリウム水溶液1
mlを加え、沸騰水浴中で45分間加熱し、冷後メル
カプトエタノール水溶液(濃度0.4モル/)0.5
mlを加える。各試料反応物の螢光強度を螢光波長
434〜437nmで測定したときの検出限界は次表に
示すとおりである。 表中の相対螢光強度はアルギニンの与える螢光
強度を100とし求めた値である。Argはアルギニ
ン、Valはバリン、Tyrはチロシン、Ileはイソロ
イシン、Hisはヒスチジン、Proはプロリン、Phe
はフエニルアラニン、Aspはアスパラギン酸、
Lysはリジン、Pyrはピログルタミン、Trpはト
リプトフアン、Serはセリン、Glyはグリシン、
Leuはロイシン、Asnはアスパラギン、Thrはス
レオニンを意味する。
関する。 本発明者らは、モノ置換グアニジン類を含有す
る試料にベンゾインを加えて加熱反応させ、反応
混合物の螢光強度を測定することにより、グアニ
ジン類を簡易かつ確実に定量しうることを見出し
た。 本発明においてモノ置換グアニジン類とは、グ
アニジノ基を有する化合物を意味し、例えばグア
ニジン、アルギニン、アグマチン、グアニジノ酢
酸、グアニジノ酪酸、グアニジノコハク酸等の低
分子化合物のほか、アルギニンを構成アミノ酸と
するペプタイド、例えばアンジオテンシン、タフ
トシン、ブラジキニン、LH放出ホルモンそのほ
かストルプトマイシン等のグアニジノ基を有する
化合物も、同様に安定な螢光によつて高感度で測
定できる。 試料中のグアニジノ基とベンゾインとの反応機
構はまだ詳しく解明されていないが、アルカリの
存在下に沸騰水浴中で40〜50分間加熱反応させる
と、反応混合物の螢光強度は最大かつ一定値を示
すようになる。ベンゾインは溶剤例えばジメチル
ホルムアミドなどに溶解して添加することが好ま
しい。アルカリとしては水酸化ナトリウム又は好
ましくは水酸化カリウムが水溶液の形で用いられ
る。 反応終了後、メルカプトエタノールを好ましく
は水溶液の形で添加することによりグアニジン類
からの螢光を安定化することができ、3時間室温
に放置しても螢光強度は一定である。 一般にベンゾインは2〜4ミリモル/、アル
カリ特に水酸化カリウムは3〜5モル/、メル
カプトエタノールは0.2〜0.8モル/の濃度の溶
液として用いることが好ましい。 本発明によればモノ置換グアニジン類の量が
0.02〜500×10-9モル/mlの広い範囲において原
点を通る直線的な螢光強度の変化を測定すること
ができる。また本方法は励起極大波長及び螢光極
大波長は一般にそれぞれ320〜328nm及び434〜
437nmで一定しており、その差が約110nm以上で
大きく、しかも可視部で測定でき、操作が簡単で
あるなどの利点を有する。従つて本発明はグアニ
ジン類特にモノ置換グアニジンの微量定量法とし
て優れている。 実施例 下記表中に示す各試料の水溶液1mlにベンゾイ
ンのジメチルホルムアミド溶液(濃度4ミリモ
ル/)0.5ml及び4N−水酸化カリウム水溶液1
mlを加え、沸騰水浴中で45分間加熱し、冷後メル
カプトエタノール水溶液(濃度0.4モル/)0.5
mlを加える。各試料反応物の螢光強度を螢光波長
434〜437nmで測定したときの検出限界は次表に
示すとおりである。 表中の相対螢光強度はアルギニンの与える螢光
強度を100とし求めた値である。Argはアルギニ
ン、Valはバリン、Tyrはチロシン、Ileはイソロ
イシン、Hisはヒスチジン、Proはプロリン、Phe
はフエニルアラニン、Aspはアスパラギン酸、
Lysはリジン、Pyrはピログルタミン、Trpはト
リプトフアン、Serはセリン、Glyはグリシン、
Leuはロイシン、Asnはアスパラギン、Thrはス
レオニンを意味する。
【表】
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 モノ置換グアニジン類を含有する試料にベン
ゾインを加えて加熱反応させ、反応混合物の螢光
強度を測定することを特徴とする、グアニジン類
の定量法。 2 モノ置換グアニジン類を含有する試料にベン
ゾインを加えて加熱反応させ、反応混合物にメル
カプトエタノールを添加したのち螢光強度を測定
することを特徴とする、特許請求の範囲第1項に
記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP10629578A JPS5533627A (en) | 1978-09-01 | 1978-09-01 | Quantitization of mono-substituted guanidine |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP10629578A JPS5533627A (en) | 1978-09-01 | 1978-09-01 | Quantitization of mono-substituted guanidine |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS5533627A JPS5533627A (en) | 1980-03-08 |
JPS6134615B2 true JPS6134615B2 (ja) | 1986-08-08 |
Family
ID=14430042
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP10629578A Granted JPS5533627A (en) | 1978-09-01 | 1978-09-01 | Quantitization of mono-substituted guanidine |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5533627A (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2020158750A1 (ja) | 2019-01-31 | 2020-08-06 | 旭化成株式会社 | イムノクロマト診断キット用吸収パッド |
WO2020230826A1 (ja) | 2019-05-14 | 2020-11-19 | 旭化成株式会社 | イムノクロマト診断キット用吸収パッド及びイムノクロマト診断キット |
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1978
- 1978-09-01 JP JP10629578A patent/JPS5533627A/ja active Granted
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2020158750A1 (ja) | 2019-01-31 | 2020-08-06 | 旭化成株式会社 | イムノクロマト診断キット用吸収パッド |
WO2020230826A1 (ja) | 2019-05-14 | 2020-11-19 | 旭化成株式会社 | イムノクロマト診断キット用吸収パッド及びイムノクロマト診断キット |
KR20210107781A (ko) | 2019-05-14 | 2021-09-01 | 아사히 가세이 가부시키가이샤 | 이뮤노크로마토 진단 키트용 흡수 패드 및 이뮤노크로마토 진단 키트 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS5533627A (en) | 1980-03-08 |
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