JPS61189433A - 試薬溶液の調製方法および調製用装置 - Google Patents
試薬溶液の調製方法および調製用装置Info
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- JPS61189433A JPS61189433A JP61033087A JP3308786A JPS61189433A JP S61189433 A JPS61189433 A JP S61189433A JP 61033087 A JP61033087 A JP 61033087A JP 3308786 A JP3308786 A JP 3308786A JP S61189433 A JPS61189433 A JP S61189433A
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は複数種の物質を含有する試薬溶液の調製方法お
よび調製用装置に関する。試薬溶液、特に臨床化学分析
用の試薬溶液は実際の分析に必要な反応成分（酵素、補
酵素、基質、指示薬）および助剤（緩衝剤、界面活性剤
）並びに安定化剤のような非常に多くの異なる物質を含
有する。分析を行なうためには、これらの物質を特定の
順序および精確な使用景で一緒にしなければならない。
よび調製用装置に関する。試薬溶液、特に臨床化学分析
用の試薬溶液は実際の分析に必要な反応成分（酵素、補
酵素、基質、指示薬）および助剤（緩衝剤、界面活性剤
）並びに安定化剤のような非常に多くの異なる物質を含
有する。分析を行なうためには、これらの物質を特定の
順序および精確な使用景で一緒にしなければならない。
さもなくば精度および正確度についての厳格な要件に適
合する試薬溶液を得ることはできない。他方、毎日行な
われるおびただしい数の分析にとっては、調製しようと
する反応溶液が、簡単な手で行なう試験における分析用
に、必要なものであるか、または試料量の多い分析シス
テム用に必要なものであるかに関係なく、試薬溶液の調
製は使用者ができるだけ簡単におよび迅速に行い得るも
のであることが要求される。
合する試薬溶液を得ることはできない。他方、毎日行な
われるおびただしい数の分析にとっては、調製しようと
する反応溶液が、簡単な手で行なう試験における分析用
に、必要なものであるか、または試料量の多い分析シス
テム用に必要なものであるかに関係なく、試薬溶液の調
製は使用者ができるだけ簡単におよび迅速に行い得るも
のであることが要求される。
このために、原則としては、特殊の試験用にできるだけ
多種の物質を一つの溶液または固体混合物に含有させ、
後に水と混合することによりすぐに使用できる反応溶液
とするという試みがなされている。必要とされる物質の
あるものは要求される再現性をもって固体として簡単て
混合できない極く少量だけで要求されるので、この混合
は通常、溶液の形で行なわれ、このような溶液は安定性
の観点から次いで凍結乾燥される。この方法は時間とエ
ネルギーとを非常に消費する方法である。さらに、混合
物中に数種の物質を一緒に集めることは、特に各物質が
貯蔵し得ないものであったり、貯蔵する場合にもそれぞ
れにとり至適の条件（ｐＨ１安定化剤）下で貯蔵するよ
うなものについては、しばしば共存し得ないこととなる
。従って、場合によっては、単一の総合的混合物は実際
に使用し得ることにならず、また、いくつもの混合物を
調製することは労力と費用とを増加させることになる。
多種の物質を一つの溶液または固体混合物に含有させ、
後に水と混合することによりすぐに使用できる反応溶液
とするという試みがなされている。必要とされる物質の
あるものは要求される再現性をもって固体として簡単て
混合できない極く少量だけで要求されるので、この混合
は通常、溶液の形で行なわれ、このような溶液は安定性
の観点から次いで凍結乾燥される。この方法は時間とエ
ネルギーとを非常に消費する方法である。さらに、混合
物中に数種の物質を一緒に集めることは、特に各物質が
貯蔵し得ないものであったり、貯蔵する場合にもそれぞ
れにとり至適の条件（ｐＨ１安定化剤）下で貯蔵するよ
うなものについては、しばしば共存し得ないこととなる
。従って、場合によっては、単一の総合的混合物は実際
に使用し得ることにならず、また、いくつもの混合物を
調製することは労力と費用とを増加させることになる。
この場合には、一つの容器中で物質を別々に凍結させ、
乾燥させるいわゆる「重層凍結乾燥物」としなければな
らない。
乾燥させるいわゆる「重層凍結乾燥物」としなければな
らない。
多孔質で圧縮可能な材料が物質、特に液体を吸着し、保
持し、そしてまた、逆に、外圧を適用するとこれらの物
質を放出するという能力を有することは知られている。
持し、そしてまた、逆に、外圧を適用するとこれらの物
質を放出するという能力を有することは知られている。
この方法によ゛り容易で再現可能な液体の処理が可能に
なる。緩衝剤溶液を分析用フィルムに適用するだめの装
置は、たとえば西Ｐイツ国公開特許出願第２，５５９，
５７４号公報に記載されている。この装置はスポンジ状
材料の表面コーティングを有する２個の水平ローラーを
有し、これらの中の少なくとも１個に緩衝剤溶液が装入
されている。ローラーの裂は目を通して分析用フィルム
が緩衝剤溶液で湿潤され、それがローラーの裂は目から
出てくるときに、過剰の緩衝剤溶液がスポンジ状材料に
吸着されることによって、除去される。
なる。緩衝剤溶液を分析用フィルムに適用するだめの装
置は、たとえば西Ｐイツ国公開特許出願第２，５５９，
５７４号公報に記載されている。この装置はスポンジ状
材料の表面コーティングを有する２個の水平ローラーを
有し、これらの中の少なくとも１個に緩衝剤溶液が装入
されている。ローラーの裂は目を通して分析用フィルム
が緩衝剤溶液で湿潤され、それがローラーの裂は目から
出てくるときに、過剰の緩衝剤溶液がスポンジ状材料に
吸着されることによって、除去される。
物質が含浸されている圧縮可能なマトリックス少なくと
も一つと、検査しようとする液体を吸収させた後に、マ
） ＩＪラックス圧縮して反応生成物を放出する装置と
を有する試験ンステムが西ドイツ国公開特許出願第３，
１３７，０１４号公報に記載されている。このマトリッ
クスの含浸処理は物質のそれぞれの溶液を吸着させ、次
いで凍結乾燥させることにより行なわれる。この方法は
両立できない物質を相互に分離して適用できるようにす
る。この圧縮可能なマトリックスは被験物質用の担体材
料であるばかりでなく、まだ同時に、実際の試験反応の
ための反応の場でもある。この理由から、実際の試験反
応はこの時点ではすでに完了するので、全ての物質がマ
トリックスから再現性をもってほとんど完全に溶離され
る必要はない。ある情況下においてゝ は、第１の部分
反応の物質が次の部分反応に持ちこされないことが望ま
しいことさえある。他方、反応溶液の調製においては、
充分に精確な分析を可能にするために、全ての物質が再
現性をもって、できるだけ完全に担体物質から溶離され
ねばならない。
も一つと、検査しようとする液体を吸収させた後に、マ
） ＩＪラックス圧縮して反応生成物を放出する装置と
を有する試験ンステムが西ドイツ国公開特許出願第３，
１３７，０１４号公報に記載されている。このマトリッ
クスの含浸処理は物質のそれぞれの溶液を吸着させ、次
いで凍結乾燥させることにより行なわれる。この方法は
両立できない物質を相互に分離して適用できるようにす
る。この圧縮可能なマトリックスは被験物質用の担体材
料であるばかりでなく、まだ同時に、実際の試験反応の
ための反応の場でもある。この理由から、実際の試験反
応はこの時点ではすでに完了するので、全ての物質がマ
トリックスから再現性をもってほとんど完全に溶離され
る必要はない。ある情況下においてゝ は、第１の部分
反応の物質が次の部分反応に持ちこされないことが望ま
しいことさえある。他方、反応溶液の調製においては、
充分に精確な分析を可能にするために、全ての物質が再
現性をもって、できるだけ完全に担体物質から溶離され
ねばならない。
既知の系には検査しようとする液体の操作について記載
されているが、安定性の点で固体の形であり、その中の
あるものは相互に両立できない物質である場合のこれら
の物質の再現可能な溶解および分配については何らの説
明もなく反応溶液の調製の必要を述べている。
されているが、安定性の点で固体の形であり、その中の
あるものは相互に両立できない物質である場合のこれら
の物質の再現可能な溶解および分配については何らの説
明もなく反応溶液の調製の必要を述べている。
本発明の目的は固体担体材料上に乾燥状態で存在する多
数の物質についての試薬溶液の調製方法を提供すること
にある。
数の物質についての試薬溶液の調製方法を提供すること
にある。
本発明は、分析しようとする数種の物質を含有する試薬
溶液の調製方法に関して、これらの物質を少なくとも１
つの固体担体材料要素に適用し、との担体材料が多孔質
で圧縮可能であり、そして、反応溶液の調製が試薬溶剤
を担体材料中に吸引し、次いで排出させることにより行
なうことを特徴とする方法に関する。使用する多孔質で
圧縮可能な担体材料は好ましくはオープンセル状ホリウ
レタンフオームである。
溶液の調製方法に関して、これらの物質を少なくとも１
つの固体担体材料要素に適用し、との担体材料が多孔質
で圧縮可能であり、そして、反応溶液の調製が試薬溶剤
を担体材料中に吸引し、次いで排出させることにより行
なうことを特徴とする方法に関する。使用する多孔質で
圧縮可能な担体材料は好ましくはオープンセル状ホリウ
レタンフオームである。
本発明はまた試薬溶液の調製用装置に関し、この装置は
含浸された多孔質で圧縮可能の担体材料のためのホルダ
ーと場合により、圧力の増加または減少を生じさせるた
めのピストンあるいはプランジャーよりなるものである
。
含浸された多孔質で圧縮可能の担体材料のためのホルダ
ーと場合により、圧力の増加または減少を生じさせるた
めのピストンあるいはプランジャーよりなるものである
。
驚くべきことに、多孔質で圧縮可能な固体の材料が試薬
溶液の調製用担体として使用し得ることが見い出された
。使用される材料がその他の担体より大きい容積を有す
るものである場合でさえも、試薬の洗出がさらに迅速で
、さらに容易に再現されることは特に驚くべきことであ
る。これは含浸されたマトリックス要素を試薬溶剤、中
で数回絞シ出しと弛緩操作を行なうことにより達成でき
る。このマトリックス中に吸収されている試薬溶剤はマ
トリックス中に短時間だけ留まり、この間に適用されて
いる物質を溶出して、これらを総合溶液中に移す作用を
する。
溶液の調製用担体として使用し得ることが見い出された
。使用される材料がその他の担体より大きい容積を有す
るものである場合でさえも、試薬の洗出がさらに迅速で
、さらに容易に再現されることは特に驚くべきことであ
る。これは含浸されたマトリックス要素を試薬溶剤、中
で数回絞シ出しと弛緩操作を行なうことにより達成でき
る。このマトリックス中に吸収されている試薬溶剤はマ
トリックス中に短時間だけ留まり、この間に適用されて
いる物質を溶出して、これらを総合溶液中に移す作用を
する。
そこで、試薬の実際の再構成が生起する。そして、圧縮
操作を３回または４回反復した後だ。
操作を３回または４回反復した後だ。
適用されている物質の再現性を有する洗出が達成され、
これはマトリックス中の試薬溶剤のそれぞれの滞留時間
が物質の完全溶解に要する時間よりも格別〈短い場合で
さえも達成される。
これはマトリックス中の試薬溶剤のそれぞれの滞留時間
が物質の完全溶解に要する時間よりも格別〈短い場合で
さえも達成される。
同時に、総合溶液の充分な混合がこの圧縮操作によシ達
成される。本発明による方法により調製される試薬溶液
は分析の実施にそのままであるいは適量を用いて使用す
ることができる。
成される。本発明による方法により調製される試薬溶液
は分析の実施にそのままであるいは適量を用いて使用す
ることができる。
固体の多孔質で圧縮可能な原材料として使用できる材料
は水溶液を可逆的に吸収でき、外圧が加えられると、吸
収した水溶液をできるだけ完全に再び放出できる全ての
材料であることができる。本明細書において、「可逆性
」の用語はこのプロセスを所望されるとおりに反復でき
ることを意味する。この方法において、マトリックスそ
れ自体は同様に、これを試薬溶剤からもはや容易に取シ
出すことができないような形状の崩壊または固執を生じ
ることなくその容積の一部分にまで可逆的に圧縮される
。
は水溶液を可逆的に吸収でき、外圧が加えられると、吸
収した水溶液をできるだけ完全に再び放出できる全ての
材料であることができる。本明細書において、「可逆性
」の用語はこのプロセスを所望されるとおりに反復でき
ることを意味する。この方法において、マトリックスそ
れ自体は同様に、これを試薬溶剤からもはや容易に取シ
出すことができないような形状の崩壊または固執を生じ
ることなくその容積の一部分にまで可逆的に圧縮される
。
適当な材料は天然および合成のスポンジ状およびフオー
ム状多孔質物質、たとえば吸着剤物質のオープンセル状
成形物品、好ましくはポリエーテルフオーム、ポリエス
テルフオームまたはポリエーテル複合フオームのような
オープンセル状のポリウレタンフォームでアル。
ム状多孔質物質、たとえば吸着剤物質のオープンセル状
成形物品、好ましくはポリエーテルフオーム、ポリエス
テルフオームまたはポリエーテル複合フオームのような
オープンセル状のポリウレタンフォームでアル。
これらの材料の圧潰強度は２〜１０ ｋＰａの範囲であ
るべきであシ、２ｋＰａ以下の圧潰強度を有する材料は
貧弱な機械的性質を示し、そして１０ｋＰａ以上のもの
は液体を放出するために過大の圧力を要求する。
るべきであシ、２ｋＰａ以下の圧潰強度を有する材料は
貧弱な機械的性質を示し、そして１０ｋＰａ以上のもの
は液体を放出するために過大の圧力を要求する。
マトリックスは、一つのピースまたは数個の層あるいは
数個のセグメントよシなることができる。この数は相互
に分離して供給しようとする物質の数に依存して変わる
。一種の物質を含浸させた材料を数層として使用し得る
ことは勿論であり、これは、たとえば同一物質を異なる
濃度で使用する試験方法に必要である。
数個のセグメントよシなることができる。この数は相互
に分離して供給しようとする物質の数に依存して変わる
。一種の物質を含浸させた材料を数層として使用し得る
ことは勿論であり、これは、たとえば同一物質を異なる
濃度で使用する試験方法に必要である。
それぞれの部分は接着または交叉結合により相互に結合
されていてもよく、あるいは適当な装置により一緒に保
持できる。各マトリックス層は並列または水平配置で成
層することができる。この装置は好ましくは、マトリッ
クス層またはその一部分を試薬溶剤を含有する貯蔵容器
中に導入できるようＫ、そしてまた担体材料を数回、で
きるだけ完全に圧縮および弛緩させることができ、後で
貯蔵容器から取り出すことができるように設計されてい
る。第１図および第２図は２種の可能な簡単な設計を示
すものである。第１図は各マ） １７７２１層（１）が
その末端に止められている硬いホルダー（２）を示して
いる。
されていてもよく、あるいは適当な装置により一緒に保
持できる。各マトリックス層は並列または水平配置で成
層することができる。この装置は好ましくは、マトリッ
クス層またはその一部分を試薬溶剤を含有する貯蔵容器
中に導入できるようＫ、そしてまた担体材料を数回、で
きるだけ完全に圧縮および弛緩させることができ、後で
貯蔵容器から取り出すことができるように設計されてい
る。第１図および第２図は２種の可能な簡単な設計を示
すものである。第１図は各マ） １７７２１層（１）が
その末端に止められている硬いホルダー（２）を示して
いる。
担体材料はこのホルダーを貯蔵容器の底まで押し下げる
ことによって圧縮され、この圧力を放出するにつれて再
び弛緩する。第２図には孔を有する底を有し、その中に
各マｌ−ＩＪフッ２フクス製の客室（３）が示されてい
る。ホルダー（２）はこの室の頂上部と結合されている
。貯蔵容器が圧縮されると、マトリックスが圧縮され、
次いで弛緩されると、貯蔵容器内に存在する溶液の一部
分が可撓性プラスチックの孔を通して担体材料中に吸収
され、次いで再び新たに圧縮されると、総合溶液中に再
び放出される。本発明による系におけるマトリックスの
性質はこのプロセスの交互の反復を別の手段を要せずに
可能をてする。その中に試薬溶剤を吸引できる、使い捨
て注射器のような注射器状補助用具を使用することもで
きる。これらは一般的に、含浸されたマトリックスをピ
ストンまたはプランジャーによって圧縮させ、次いで弛
緩させることができる系よりなり、洗出処理に必要な液
体移送は圧力の増加または減少によって自発的に生起す
る。
ことによって圧縮され、この圧力を放出するにつれて再
び弛緩する。第２図には孔を有する底を有し、その中に
各マｌ−ＩＪフッ２フクス製の客室（３）が示されてい
る。ホルダー（２）はこの室の頂上部と結合されている
。貯蔵容器が圧縮されると、マトリックスが圧縮され、
次いで弛緩されると、貯蔵容器内に存在する溶液の一部
分が可撓性プラスチックの孔を通して担体材料中に吸収
され、次いで再び新たに圧縮されると、総合溶液中に再
び放出される。本発明による系におけるマトリックスの
性質はこのプロセスの交互の反復を別の手段を要せずに
可能をてする。その中に試薬溶剤を吸引できる、使い捨
て注射器のような注射器状補助用具を使用することもで
きる。これらは一般的に、含浸されたマトリックスをピ
ストンまたはプランジャーによって圧縮させ、次いで弛
緩させることができる系よりなり、洗出処理に必要な液
体移送は圧力の増加または減少によって自発的に生起す
る。
この系はまた反応容器および（または）分析容器として
使用し得るたとえばキュベツトのような装置と組合せる
ことができ、この場合には、反応溶液の生成後に分析反
応をこのキュベツト内で検査しようとする溶液の添加に
より直ちに行い得る総合的分析系が得られる。
使用し得るたとえばキュベツトのような装置と組合せる
ことができ、この場合には、反応溶液の生成後に分析反
応をこのキュベツト内で検査しようとする溶液の添加に
より直ちに行い得る総合的分析系が得られる。
一般に、マトリックスの含浸は所望の物質を含有する溶
液を含浸させ、次いで溶剤を除去することにより行なわ
れる。全ての適当な水性または非水性の溶剤、好ましく
は水または緩衝剤溶液のような水性溶液が試薬溶剤とし
て使用し得る。
液を含浸させ、次いで溶剤を除去することにより行なわ
れる。全ての適当な水性または非水性の溶剤、好ましく
は水または緩衝剤溶液のような水性溶液が試薬溶剤とし
て使用し得る。
溶剤の除去は適用された溶液を凍結させ、次いで凍結乾
燥させることＫより行うことができる。しかしながら、
この方法は比較的、エネルギーと時間とを消費する。驚
くべきことに、本発明による方法で比較的大量の水が使
用される場合でさえも、減圧下における乾燥が物質の損
失をともなうことなく０℃以上の温度で可能であること
が見い出された。この方法は低い溶解度を有するか、ま
たは比較的大量に用いられる物質の保持に、さらに恋人
すな凍結乾燥方法を使用する必要なく適用できる。従っ
て、既、知の方法に反して、緩衝物質をマトリックスに
適用することもでき、この場合には異なる被験溶液用の
反応溶液の再構成に同一の試薬溶剤が使用できる。さら
にまた、０℃以上の温度で乾燥させた物質は凍結乾燥に
より得られる物質に比較して乾燥による損失が少ないと
いう結果が得られる。このことは特にタン、ｅり質の場
合に適合し、この場合に、これらの物質の熱感受性の点
から特に驚くべきことである。
燥させることＫより行うことができる。しかしながら、
この方法は比較的、エネルギーと時間とを消費する。驚
くべきことに、本発明による方法で比較的大量の水が使
用される場合でさえも、減圧下における乾燥が物質の損
失をともなうことなく０℃以上の温度で可能であること
が見い出された。この方法は低い溶解度を有するか、ま
たは比較的大量に用いられる物質の保持に、さらに恋人
すな凍結乾燥方法を使用する必要なく適用できる。従っ
て、既、知の方法に反して、緩衝物質をマトリックスに
適用することもでき、この場合には異なる被験溶液用の
反応溶液の再構成に同一の試薬溶剤が使用できる。さら
にまた、０℃以上の温度で乾燥させた物質は凍結乾燥に
より得られる物質に比較して乾燥による損失が少ないと
いう結果が得られる。このことは特にタン、ｅり質の場
合に適合し、この場合に、これらの物質の熱感受性の点
から特に驚くべきことである。
含浸は各物質のそれぞれについて最適の条件下に行なう
。従って、両立できない物質はマトリックスの別々の一
領域に適用する。適用しようとする各溶液中の添加剤お
よび各溶液の−を変えることも同様に可能である。総合
的に、本発明の方法は、溶出により得られる総合溶液が
分析試験系に要求される条件に適合することを確実にす
る。従って、各試験物質の安定性および総合試験系の反
応条件の両方が考慮される。
。従って、両立できない物質はマトリックスの別々の一
領域に適用する。適用しようとする各溶液中の添加剤お
よび各溶液の−を変えることも同様に可能である。総合
的に、本発明の方法は、溶出により得られる総合溶液が
分析試験系に要求される条件に適合することを確実にす
る。従って、各試験物質の安定性および総合試験系の反
応条件の両方が考慮される。
次列は本発明を説明するものである。これらの例では下
記の種々のマトリックスを使用する＝１、 １２０．１
７／ｍ２の単位面積当りの重量を有する比較織物として
木綿布地を使用し、以下、これを「木綿」と称する； ２、比較級担体として、１２４．９／ｍ２の単位面積当
りの重量を有するセルロース小塊ＡＤ工Ｎ １９３１０
を使用し、以下、これを「紙」と称する；３、本発明に
よるマトリックスとして、メッッラー、メミンゲン（Ｍ
ｅｔｚｒｌｅｒ、 Ｍｅｍｍｉｎｇｅｎ ）により供給
されるポリウレタン／ポリエステルフオームＭＥ６０６
０を使用し、以下、これを「フオーム」と称する。
記の種々のマトリックスを使用する＝１、 １２０．１
７／ｍ２の単位面積当りの重量を有する比較織物として
木綿布地を使用し、以下、これを「木綿」と称する； ２、比較級担体として、１２４．９／ｍ２の単位面積当
りの重量を有するセルロース小塊ＡＤ工Ｎ １９３１０
を使用し、以下、これを「紙」と称する；３、本発明に
よるマトリックスとして、メッッラー、メミンゲン（Ｍ
ｅｔｚｒｌｅｒ、 Ｍｅｍｍｉｎｇｅｎ ）により供給
されるポリウレタン／ポリエステルフオームＭＥ６０６
０を使用し、以下、これを「フオーム」と称する。
例 Ｉ
ＮＡＤ）！含有試薬溶液の製造
ビス／トリス緩衝液（ｐＨ８，５） ０．０３モル／ｌ
および関ミリモル／ ｌ ＫＤＴＡ含有ｎミリモル／Ｉ
ＮＡＤＨの溶液２０〜７０μｌを木綿、紙およびフオー
ムよりなるマトリックスの各６枚のディスク（直径：１
２ａｔ；厚さ： ８ ｍｍ ）に適用し、次いで減圧下
に室温で乾燥させる。各ディスクをそれぞれ使い捨て注
射器（直径：１２１！ｍ）中に入れ、次いで注射器のピ
ストンを上下することによって、０．０５モル／ｌリン
酸塩緩衝液（ｐＨ７，０）の溶液１ ａｔを吸着させ、
再び貯蔵容器に戻す。この処理を２回繰返す。生成する
反応溶液を第１回洗出および第３回洗出処理後に、その
ＭＡＤＨ含有量について分光光度計で測定し、６回の平
行試験の平均値をと９、次いで使用量と対比する。
および関ミリモル／ ｌ ＫＤＴＡ含有ｎミリモル／Ｉ
ＮＡＤＨの溶液２０〜７０μｌを木綿、紙およびフオー
ムよりなるマトリックスの各６枚のディスク（直径：１
２ａｔ；厚さ： ８ ｍｍ ）に適用し、次いで減圧下
に室温で乾燥させる。各ディスクをそれぞれ使い捨て注
射器（直径：１２１！ｍ）中に入れ、次いで注射器のピ
ストンを上下することによって、０．０５モル／ｌリン
酸塩緩衝液（ｐＨ７，０）の溶液１ ａｔを吸着させ、
再び貯蔵容器に戻す。この処理を２回繰返す。生成する
反応溶液を第１回洗出および第３回洗出処理後に、その
ＭＡＤＨ含有量について分光光度計で測定し、６回の平
行試験の平均値をと９、次いで使用量と対比する。
この結果を次表に示す。
適用試薬の量 加μｌ ２０μｌ ５０μ１５０μｌ
７０．＃ ７０μｌ洗浄処理 の回数 １ ３１ ３１３ 回収チ 木 綿 ２１ ８１ ３０ ８２
２５ ８３紙 ６８ ９５ ６７
７０ ６２ ９５フオームがマトリックスとして格
別に優れていることが証明される；−回の洗出処理でさ
えも満足な姑来が得られ、多回の洗出は完全な回収を可
能にする。
７０．＃ ７０μｌ洗浄処理 の回数 １ ３１ ３１３ 回収チ 木 綿 ２１ ８１ ３０ ８２
２５ ８３紙 ６８ ９５ ６７
７０ ６２ ９５フオームがマトリックスとして格
別に優れていることが証明される；−回の洗出処理でさ
えも満足な姑来が得られ、多回の洗出は完全な回収を可
能にする。
例 ２
ラクテートデヒドロゲナーぜ含有試薬溶液の製造
例１と同様にして、３種の異なるマトリックスのそれぞ
れの６枚のディスク（直径：１２．、）に０．１モル／
ｌリン酸塩緩衝液（ｐＨ７，Ｑ）中の４０ＫＵ／ ｌ
ＬＤＨの溶液を種々の量で含浸させ、次いで減圧下に室
温で乾燥させる。使い捨て注射器中に入れたこれらのマ
トリックスディスクの洗出処理を各回１ ｍｌの０．０
５モル／ｌリン酸塩緩衝剤（ｐＨ７，０）の溶液で３回
行なうことによシ試薬溶液を製造する。この実験で得ら
れた結果を６回の平行試験の平均値として次表忙示す：
適用試薬の量 加μｌ ５０μｌ ７０μｌ回収チ 木 綿 ２ ７ ６紙
１ １ １フオーム ９６
８２ ９４この表はフオームだけが担体マトリックス
として適する性質を有することを示している。
れの６枚のディスク（直径：１２．、）に０．１モル／
ｌリン酸塩緩衝液（ｐＨ７，Ｑ）中の４０ＫＵ／ ｌ
ＬＤＨの溶液を種々の量で含浸させ、次いで減圧下に室
温で乾燥させる。使い捨て注射器中に入れたこれらのマ
トリックスディスクの洗出処理を各回１ ｍｌの０．０
５モル／ｌリン酸塩緩衝剤（ｐＨ７，０）の溶液で３回
行なうことによシ試薬溶液を製造する。この実験で得ら
れた結果を６回の平行試験の平均値として次表忙示す：
適用試薬の量 加μｌ ５０μｌ ７０μｌ回収チ 木 綿 ２ ７ ６紙
１ １ １フオーム ９６
８２ ９４この表はフオームだけが担体マトリックス
として適する性質を有することを示している。
例 ３
各種試薬溶液の調製
３種の異なるマトリックスの各６枚のディスク（直径：
１２ｍｍ）に下記の溶液を含浸させ、次いで減圧下に室
温で乾燥させる： Ｇ−６−ＰＤＨ： ０．０５モル／１３ トリエタノー
ルアミン（ｐＨ７，５）中Ｏ７５Ｋ１１ｆｆ／Ｊ クル
コース−６−ホスフェートデ ヒドロゲナーゼの溶液加μｌ； ＧＬＤＨ： ０．０５モル／ｌビス／トリス緩
衝液（ｐＨ７，６）、刃ミリモル／１ ＫＤＴＡおよび１０ミリモル／ ｌ ＡＤＰ中の４００
０ ＫＵ ／ ｌグルタメートデヒドロゲナーゼの溶液
５μｌ： ケトグルタレート： ０．０３モル／ｌリン酸塩緩衝液
（ｐｆ（７，０）中の１．８モル／ｌケトグルタレート
の溶液１５μ１０ これらの試薬溶液は例１に記載の方法により、生成する
マトリックス層を０．０５モル／ｌリン酸塩緩衝剤（ｐ
Ｈ７，０）含有溶液１ ｍｌで３回洗出処理することに
より行なって製造する。各被験物質の最終含有量は分光
光度計により測定し、初めの溶液の含有量と比較する。
１２ｍｍ）に下記の溶液を含浸させ、次いで減圧下に室
温で乾燥させる： Ｇ−６−ＰＤＨ： ０．０５モル／１３ トリエタノー
ルアミン（ｐＨ７，５）中Ｏ７５Ｋ１１ｆｆ／Ｊ クル
コース−６−ホスフェートデ ヒドロゲナーゼの溶液加μｌ； ＧＬＤＨ： ０．０５モル／ｌビス／トリス緩
衝液（ｐＨ７，６）、刃ミリモル／１ ＫＤＴＡおよび１０ミリモル／ ｌ ＡＤＰ中の４００
０ ＫＵ ／ ｌグルタメートデヒドロゲナーゼの溶液
５μｌ： ケトグルタレート： ０．０３モル／ｌリン酸塩緩衝液
（ｐｆ（７，０）中の１．８モル／ｌケトグルタレート
の溶液１５μ１０ これらの試薬溶液は例１に記載の方法により、生成する
マトリックス層を０．０５モル／ｌリン酸塩緩衝剤（ｐ
Ｈ７，０）含有溶液１ ｍｌで３回洗出処理することに
より行なって製造する。各被験物質の最終含有量は分光
光度計により測定し、初めの溶液の含有量と比較する。
この実験から得られた結果を次表に示す：
試薬 回収チ
Ｇ−６−ＰＤＨ１６１６１００
ＧＬＤＨ２１６２９５
ケトグルタレート ８２ ８６ ９
３フオームはこの場合〈もまた優れた性質を示す。
３フオームはこの場合〈もまた優れた性質を示す。
例 ４
グルコース分析用総合試薬溶液の調製
フオーム製ディスク（直径：１８ｍ；厚さ：８ａｍ ）
に下記の溶液を含浸させ、次いで減圧下に室温で乾燥さ
せる： ４枚のディスクには０．７モル／ｌリン酸塩緩衝剤（ｐ
Ｈ７，６）および１０ミリモル／ Ｊ ＫＤＴＡを含有
する溶液Ｑ、５ｒｎｌを含浸する； １枚のディスクには０．１モル／ｌリン酸塩緩衝液（ｐ
Ｈ７，６）および関ミリモルｌｌ ＫＤＴＡ中に１００
０ ＫＵ ／ ｌグルコースデヒＰロゲナーゼおよび２
２ＫＵ／ｌムタロターゼを含有する溶液０．５ｍ７！を
含浸する； １枚のディスクには０．１モル／７３リン酸塩緩衝剤（
ｐＨ７，６）および関ミリモル／ ｌ ＫＤＴＡ中の２
００ミリモル／ ｌ ＮＡＤの溶液０．５１ｎｌを含浸
する；乾燥雰囲気下に室温で１年間安定であるこれらの
乾燥したディスクを第２図に相当する装置に入れる。グ
ルコース分析用の反応溶液を製造するＫは、この装置を
蒸留水１００ｉＡ！を含有する貯蔵容器内に保持し、フ
オームディスクを次いで５回、迅速に圧縮しおよび弛緩
させる。各操作回毎に、貯蔵容器中に存在する水はマト
リックス中に流入し、次いでマトリックスから放出され
る。この処理の後に、下記の組成を有する反応溶液１０
０ｍＡ！が得られる： ０．０３４ミリモル／ｌ リン酸塩緩衝剤（ｐＨ７，６
）５．００ ＫＴＴ ／ ｌ ｆルコースデヒドロ
ｒ＋−ゼ０．１１ ＫＵ／ｌ ムタロターゼ １．００ ミリモル／ｌ ＮＡＤ 検査溶液中のグルコース含有量はこの反応溶液２ｍｌに
試料加μｌを加えることにより分析する。
に下記の溶液を含浸させ、次いで減圧下に室温で乾燥さ
せる： ４枚のディスクには０．７モル／ｌリン酸塩緩衝剤（ｐ
Ｈ７，６）および１０ミリモル／ Ｊ ＫＤＴＡを含有
する溶液Ｑ、５ｒｎｌを含浸する； １枚のディスクには０．１モル／ｌリン酸塩緩衝液（ｐ
Ｈ７，６）および関ミリモルｌｌ ＫＤＴＡ中に１００
０ ＫＵ ／ ｌグルコースデヒＰロゲナーゼおよび２
２ＫＵ／ｌムタロターゼを含有する溶液０．５ｍ７！を
含浸する； １枚のディスクには０．１モル／７３リン酸塩緩衝剤（
ｐＨ７，６）および関ミリモル／ ｌ ＫＤＴＡ中の２
００ミリモル／ ｌ ＮＡＤの溶液０．５１ｎｌを含浸
する；乾燥雰囲気下に室温で１年間安定であるこれらの
乾燥したディスクを第２図に相当する装置に入れる。グ
ルコース分析用の反応溶液を製造するＫは、この装置を
蒸留水１００ｉＡ！を含有する貯蔵容器内に保持し、フ
オームディスクを次いで５回、迅速に圧縮しおよび弛緩
させる。各操作回毎に、貯蔵容器中に存在する水はマト
リックス中に流入し、次いでマトリックスから放出され
る。この処理の後に、下記の組成を有する反応溶液１０
０ｍＡ！が得られる： ０．０３４ミリモル／ｌ リン酸塩緩衝剤（ｐＨ７，６
）５．００ ＫＴＴ ／ ｌ ｆルコースデヒドロ
ｒ＋−ゼ０．１１ ＫＵ／ｌ ムタロターゼ １．００ ミリモル／ｌ ＮＡＤ 検査溶液中のグルコース含有量はこの反応溶液２ｍｌに
試料加μｌを加えることにより分析する。
室温で１０分間インキュベートした後に、３３４ｎｍに
おける吸光値を測定する。グルコース濃度は下記の等式
から得られる： ｃ （”９／ １００ｍ／ 〕＝ ２９４．１例 ５ グルタメート−オキサルアセテートトランスアミナーゼ
（ＧＯＴ ）分析用の総合反応溶液の調製 フオームディスク（直径：１８ｍｍ）に下記の溶液を適
用する： １枚のディスク（厚さ＝８朋）上に１．６モル／ｌリン
酸塩緩衝液（ｐＨ７，６） ０．５ｒｎｌ； １枚のデ
ィスク（厚さ：２２ｍ１り上に０．１モル／ｌリン酸塩
ａｍ液（ｐＨ７，０）中ノ１．５モル／ｌアスノｅルテ
ートの溶液１．ｌｔｌ；１枚のディスク（厚さ：１６ｍ
ｍ）上に０．１モル／ｌリン酸塩緩衝液（ｐＨ７，０）
中の１８０ミリモル／ｌケトグルタレートの溶液０．８
ｍに１枚のディスク（厚さ：４ｍｍ）上ニ０．０５モル
／ｅヒス／トリス緩衝剤（１）Ｈ８，５）および刃ミリ
モル／ Ａ’ ＫＤＴＡ中の１８ミリモル／ｌＮＡＭの
溶液０．０１ ｍｌ ；および１枚のディスク（厚さ＝
４皿）上に０．１モル／ｌ’）ン醒塩緩衝剤（ｐＨ７，
０）中の６０１Ｎ／１１ Ｉ、ＤＨおよび３０ ＫＩＴ
／ぎＭＤＨの溶液０．０２ｍＡ’。
おける吸光値を測定する。グルコース濃度は下記の等式
から得られる： ｃ （”９／ １００ｍ／ 〕＝ ２９４．１例 ５ グルタメート−オキサルアセテートトランスアミナーゼ
（ＧＯＴ ）分析用の総合反応溶液の調製 フオームディスク（直径：１８ｍｍ）に下記の溶液を適
用する： １枚のディスク（厚さ＝８朋）上に１．６モル／ｌリン
酸塩緩衝液（ｐＨ７，６） ０．５ｒｎｌ； １枚のデ
ィスク（厚さ：２２ｍ１り上に０．１モル／ｌリン酸塩
ａｍ液（ｐＨ７，０）中ノ１．５モル／ｌアスノｅルテ
ートの溶液１．ｌｔｌ；１枚のディスク（厚さ：１６ｍ
ｍ）上に０．１モル／ｌリン酸塩緩衝液（ｐＨ７，０）
中の１８０ミリモル／ｌケトグルタレートの溶液０．８
ｍに１枚のディスク（厚さ：４ｍｍ）上ニ０．０５モル
／ｅヒス／トリス緩衝剤（１）Ｈ８，５）および刃ミリ
モル／ Ａ’ ＫＤＴＡ中の１８ミリモル／ｌＮＡＭの
溶液０．０１ ｍｌ ；および１枚のディスク（厚さ＝
４皿）上に０．１モル／ｌ’）ン醒塩緩衝剤（ｐＨ７，
０）中の６０１Ｎ／１１ Ｉ、ＤＨおよび３０ ＫＩＴ
／ぎＭＤＨの溶液０．０２ｍＡ’。
これらのディスクは乾燥させた後に、第１図に相当する
装置に順次的に入れ、前記方法だより蒸留水１０コで５
回洗出する。下記の組成を有する反応溶液ＩＱｍＡ’が
得られる： ０．０８モル／ｌ リン酸塩緩衝剤（ｐＨ７，０
）２００．００ミリモル／ｌ アスパルテート１２．０
０ミリモル／ｌ ケトグルタレート０．１８ミリモル
／ｌ ＮＡＤＨｌ、２０ ＫｔＴ ／ ｌ
ＬＤＨおよび０．６０ ＫＵ ／ ｌ
ＭＤＨこの反応溶液は既知の方法によるＧＯＴの分析に
適している。
装置に順次的に入れ、前記方法だより蒸留水１０コで５
回洗出する。下記の組成を有する反応溶液ＩＱｍＡ’が
得られる： ０．０８モル／ｌ リン酸塩緩衝剤（ｐＨ７，０
）２００．００ミリモル／ｌ アスパルテート１２．０
０ミリモル／ｌ ケトグルタレート０．１８ミリモル
／ｌ ＮＡＤＨｌ、２０ ＫｔＴ ／ ｌ
ＬＤＨおよび０．６０ ＫＵ ／ ｌ
ＭＤＨこの反応溶液は既知の方法によるＧＯＴの分析に
適している。
第１図および第２図は本発明による試薬溶液を製造する
ための２種の単純な設計の装置を示すものである。 １・・・マトリックス層 ２・・・ホルダー ３・・・
可撓性プラスチック容器
ための２種の単純な設計の装置を示すものである。 １・・・マトリックス層 ２・・・ホルダー ３・・・
可撓性プラスチック容器
Claims (4)
- （１）分析を行なうための数種の物質を含有する試薬溶
液の調製方法であって、これらの物質を固体担体材料の
少なくとも一つの要素に適用し、この担体材料が多孔質
で圧縮可能なものであり、そして反応溶液の調製を試薬
溶剤を担体材料中に吸引させ、次いでこの溶剤を除去す
ることにより行なうことを特徴とする方法。 - （２）使用される多孔質で圧縮可能な担体材料がオープ
ンセルポリウレタンフォームである特許請求の範囲第１
項に記載の方法。 - （３）使用される試薬溶剤が水性溶液である特許請求の
範囲第１項または第２項に記載の方法。 - （４）含浸された多孔質で圧縮可能な担体材料用のホル
ダーおよび場合により、圧力の増加または減少を生じさ
せるピストンまたはプランジャーよりなる試薬溶液調製
用装置。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3505631.2 | 1985-02-19 | ||
| DE19853505631 DE3505631A1 (de) | 1985-02-19 | 1985-02-19 | Verfahren und vorrichtung zur herstellung von reagenzloesungen |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61189433A true JPS61189433A (ja) | 1986-08-23 |
Family
ID=6262888
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61033087A Pending JPS61189433A (ja) | 1985-02-19 | 1986-02-19 | 試薬溶液の調製方法および調製用装置 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0192129B1 (ja) |
| JP (1) | JPS61189433A (ja) |
| DE (2) | DE3505631A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992017782A1 (en) * | 1991-03-28 | 1992-10-15 | Meiji Seika Kabushiki Kaisha | Simple analyzing device |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0941306A1 (en) * | 1996-11-27 | 1999-09-15 | Durand (Assignees) Limited | Methods and apparatus for enhancement of mass transfer of a fluid in a porous matrix system containing biomass |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3137014A1 (de) * | 1981-09-17 | 1983-03-24 | Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt | "testsystem und verfahren zur bestimmung von inhaltsstoffen von fluessigkeiten". |
-
1985
- 1985-02-19 DE DE19853505631 patent/DE3505631A1/de not_active Withdrawn
-
1986
- 1986-02-05 DE DE8686101507T patent/DE3674429D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1986-02-05 EP EP86101507A patent/EP0192129B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-02-19 JP JP61033087A patent/JPS61189433A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992017782A1 (en) * | 1991-03-28 | 1992-10-15 | Meiji Seika Kabushiki Kaisha | Simple analyzing device |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3674429D1 (de) | 1990-10-31 |
| EP0192129A3 (en) | 1987-08-12 |
| EP0192129A2 (de) | 1986-08-27 |
| EP0192129B1 (de) | 1990-09-26 |
| DE3505631A1 (de) | 1986-08-21 |
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