JPS6069035A - 高力価緑膿菌免疫血清グロブリン - Google Patents
高力価緑膿菌免疫血清グロブリンInfo
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- JPS6069035A JPS6069035A JP59118371A JP11837184A JPS6069035A JP S6069035 A JPS6069035 A JP S6069035A JP 59118371 A JP59118371 A JP 59118371A JP 11837184 A JP11837184 A JP 11837184A JP S6069035 A JPS6069035 A JP S6069035A
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- globulin
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- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
- C07K16/1203—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria
- C07K16/1214—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Pseudomonadaceae (F)
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- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新規な免疫取消グロブリン及び新規なその製造
法に関し、これをその目的に含んでいる。
法に関し、これをその目的に含んでいる。
特に本発明は緑膿菌(Psendomonas aer
uginosa )のリポ多1jJIi類抗原に対する
天然産抗体の高力価を有する免疫血清グロブリンに関す
る。本発明の更なる目的は以下の記述から明らかになる
であろう。
uginosa )のリポ多1jJIi類抗原に対する
天然産抗体の高力価を有する免疫血清グロブリンに関す
る。本発明の更なる目的は以下の記述から明らかになる
であろう。
ここに以下の記述において部及び・ぞ−セン) k:L
特に断らない限り重量によるものとする。
特に断らない限り重量によるものとする。
超免疫Lfn清グログロブリンち特別な抗体の高力価を
有する免疫血清グロブリンd:抗体免疫欠陥の患者を無
筋するのに治療学的に有用である。例えば破傷風の超免
疫グロ・プリンは破傷風の処置に、また狂犬病の超免疫
グロブリンは狂犬病の処1首に有用である。超免疫血清
グロブリンは、平均的分布で普通に見出されるよりも非
常に高い特別な抗体に対する力価を有する選別された供
力者がら待られる血漿又は血清を用いて調製することが
できる。これらの供乃者は、最近特別なワクチンで免疫
にさせられたものであり(米国特ilr第4.174゜
388号)、或いは最近感染又は病気から回復したもの
である( Stiehm、、 pediatrics、
63(11,301〜319 (1979)j。これら
の高力価の血清又は血漿を集め、次いで画分II?a−
分動1する点1で普通のコーン(Cohn )分別法に
供するfニーC0htIら、J、 Am、 Chem、
Soc、 + 68 +459(1946)、及び0
ncleyら、同上、71.541 <+949)′X
1゜緑膿菌での感染は一般的な個体群の中で普通でない
けれども、ある感受性の患者群では非常にしばしば遭遇
する。火傷の儀牲者及び免疫の抑制されたガン患者は、
深刻な及び時には致命的な緑1儂菌の感染といし異常に
高い危険性にさらされているものと見なされてきた2、
緑膿菌の感染は普通家庭でなくて病院郡在中に起こる。
有する免疫血清グロブリンd:抗体免疫欠陥の患者を無
筋するのに治療学的に有用である。例えば破傷風の超免
疫グロ・プリンは破傷風の処置に、また狂犬病の超免疫
グロブリンは狂犬病の処1首に有用である。超免疫血清
グロブリンは、平均的分布で普通に見出されるよりも非
常に高い特別な抗体に対する力価を有する選別された供
力者がら待られる血漿又は血清を用いて調製することが
できる。これらの供乃者は、最近特別なワクチンで免疫
にさせられたものであり(米国特ilr第4.174゜
388号)、或いは最近感染又は病気から回復したもの
である( Stiehm、、 pediatrics、
63(11,301〜319 (1979)j。これら
の高力価の血清又は血漿を集め、次いで画分II?a−
分動1する点1で普通のコーン(Cohn )分別法に
供するfニーC0htIら、J、 Am、 Chem、
Soc、 + 68 +459(1946)、及び0
ncleyら、同上、71.541 <+949)′X
1゜緑膿菌での感染は一般的な個体群の中で普通でない
けれども、ある感受性の患者群では非常にしばしば遭遇
する。火傷の儀牲者及び免疫の抑制されたガン患者は、
深刻な及び時には致命的な緑1儂菌の感染といし異常に
高い危険性にさらされているものと見なされてきた2、
緑膿菌の感染は普通家庭でなくて病院郡在中に起こる。
緑胎菌はペニシリンGK内j性である。緑膿菌に特異的
なペニシリン及びアミノグリコシドの組合せは、緑膿菌
種に対する普通の治療であり、患者の生き残りに対して
、特に白血病に対して非常に寄与してきた。火傷の患者
における緑膿菌の処置は局所的な抗微生物の治療にも依
存する。
なペニシリン及びアミノグリコシドの組合せは、緑膿菌
種に対する普通の治療であり、患者の生き残りに対して
、特に白血病に対して非常に寄与してきた。火傷の患者
における緑膿菌の処置は局所的な抗微生物の治療にも依
存する。
Jamesら、Th、e Lancet、 1980年
12J]13日、1263〜1265は、敗血症の危険
のある火傷の患者の受動的免疫化VCついて記述してい
る。この免疫化は、多価のフ0ソイド七ナス属ワクチン
を接種した健康な人間の奉仕者の拙漿から得られる免疫
グロブリンを用いて達成される。勿論血漿中の力価を増
加させるプζめに健康な奉仕者にワクチンを接種するこ
とはいくらかの危険が必る。
12J]13日、1263〜1265は、敗血症の危険
のある火傷の患者の受動的免疫化VCついて記述してい
る。この免疫化は、多価のフ0ソイド七ナス属ワクチン
を接種した健康な人間の奉仕者の拙漿から得られる免疫
グロブリンを用いて達成される。勿論血漿中の力価を増
加させるプζめに健康な奉仕者にワクチンを接種するこ
とはいくらかの危険が必る。
Zaiaら、1°he Journal of Inj
’ectionaiノ1seases、 l 37 (
51、601〜604(197g)は、水痘−帝状症疹
(VZ)の免疫グロブリンの実際的な調製法を開示して
いる。
’ectionaiノ1seases、 l 37 (
51、601〜604(197g)は、水痘−帝状症疹
(VZ)の免疫グロブリンの実際的な調製法を開示して
いる。
VZウィルスに対する補体を固定する抗体のために古い
ゴ11液′(il−選別する。血漿7.1位の約15%
は16よシ大きい又はそれに等しい力価を有し、約7.
5%は32よシ大きい又はそれに等しい力価を有する。
ゴ11液′(il−選別する。血漿7.1位の約15%
は16よシ大きい又はそれに等しい力価を有し、約7.
5%は32よシ大きい又はそれに等しい力価を有する。
Fischerらは緑膿菌の7つの無交配保護(non
−cross−protective )の免疫型を同
定した( Fischer ら、Jownal of
Bacteriolo−(7y、1969年5月、83
5〜836頁; これは本明細書に参考文献として引用
される)、、この著者は試験管内での崩清学的試験から
区別される如きマウスにおける攻撃保護(chαl l
engeprotection )に基づく緑膿菌の
だめの抗原スキーム(scheme )を開発した。
−cross−protective )の免疫型を同
定した( Fischer ら、Jownal of
Bacteriolo−(7y、1969年5月、83
5〜836頁; これは本明細書に参考文献として引用
される)、、この著者は試験管内での崩清学的試験から
区別される如きマウスにおける攻撃保護(chαl l
engeprotection )に基づく緑膿菌の
だめの抗原スキーム(scheme )を開発した。
今回、プソイドモナス属のワクチンを接種されてない或
いは最近プソイドモナス属の感染を受けていない供与者
からの正常の血漿は、緑膿菌の7つの免疫型(Fiac
herら)のうち4つに対する抗体の正常の力価よシも
高力価なものに対して選別できることが発見された。約
1:1600よシも大きい力価を有するこれらのmu漿
を集め、次いで分別して、すべての7つのフィッシャー
(Fis−cher)免稜型のリボ多糖類抗原に対する
抗体の高力価を有する緑膿菌の超免疫力゛ンマグロブリ
ンを得ることができ、甘だこの血漿はフィッシャー免疫
型のすべての7つに対してかなりの保護を提供すること
ができる。ワクチンを接種されてない或いは最近プソイ
ドモナス属の感染を受けてない正常の供与者からの血漿
が、これを集め且つ分別した時、緑膿菌の感染の処置に
かなシの効果を示すプソイドモナス属の超免疫グロブリ
ンを生成するのに十分高い緑膿菌に対する抗体の力価を
有するということは予期されないから、上述の結果は全
く驚くべきことである。更に7つのフィッシャー免疫型
のうち4つだけに対する選別及び7つのフィッシャー免
疫型のうち4つだけに対して正常の力価よシも高い力価
の癩漿の収集物がフィッシャー免疫型のすべて7つに対
して重大な保護を提供する超免疫W+清グロン゛リンを
与えることは驚くべきことである。
いは最近プソイドモナス属の感染を受けていない供与者
からの正常の血漿は、緑膿菌の7つの免疫型(Fiac
herら)のうち4つに対する抗体の正常の力価よシも
高力価なものに対して選別できることが発見された。約
1:1600よシも大きい力価を有するこれらのmu漿
を集め、次いで分別して、すべての7つのフィッシャー
(Fis−cher)免稜型のリボ多糖類抗原に対する
抗体の高力価を有する緑膿菌の超免疫力゛ンマグロブリ
ンを得ることができ、甘だこの血漿はフィッシャー免疫
型のすべての7つに対してかなりの保護を提供すること
ができる。ワクチンを接種されてない或いは最近プソイ
ドモナス属の感染を受けてない正常の供与者からの血漿
が、これを集め且つ分別した時、緑膿菌の感染の処置に
かなシの効果を示すプソイドモナス属の超免疫グロブリ
ンを生成するのに十分高い緑膿菌に対する抗体の力価を
有するということは予期されないから、上述の結果は全
く驚くべきことである。更に7つのフィッシャー免疫型
のうち4つだけに対する選別及び7つのフィッシャー免
疫型のうち4つだけに対して正常の力価よシも高い力価
の癩漿の収集物がフィッシャー免疫型のすべて7つに対
して重大な保護を提供する超免疫W+清グロン゛リンを
与えることは驚くべきことである。
本発明の1つの明らかな利点は、正常な供与者にワクチ
ンを接種する必要のないことである。結果としてそのよ
うな実施に固有の危険が回避される。本発明の他の利点
は、得られる超免疫グロブリンが直接的な保岐を提供し
且つ静脈内注射できるようにするために処置でき、従っ
て筋肉的投与と関連した患者の不快さが回避できるとい
うことである。更に筋肉内に投与される生成物で得られ
るのと同一量の予防又は治癒を達成するためには、よシ
少い生成物を静脈内投与するたけでよい。
ンを接種する必要のないことである。結果としてそのよ
うな実施に固有の危険が回避される。本発明の他の利点
は、得られる超免疫グロブリンが直接的な保岐を提供し
且つ静脈内注射できるようにするために処置でき、従っ
て筋肉的投与と関連した患者の不快さが回避できるとい
うことである。更に筋肉内に投与される生成物で得られ
るのと同一量の予防又は治癒を達成するためには、よシ
少い生成物を静脈内投与するたけでよい。
これらの及び他の本発明の利点は次の方法で得ることが
できる。
できる。
酵素結合の免疫吸着分析(、ELISA)又は他の同等
に敏感な選別法、例えば放射線免疫分析などを用いるこ
とによシ、供与者からの正常の血漿を、フィッシャー免
疫型1,2,4及び6の紅膿菌のリポ多糖類抗原に対す
る天然産の抗体に関して選別した。かなり効果的である
ためには、そのような供与者からの血漿は約1:160
0よりも大きい上述のフィッシャー免疫型に対する抗体
の力価を有すべきであることが発見された。血漿供与者
の約2〜5%はそのような力価を有する。この方法で得
られる超免疫血清グロブリンは、すべての7つのフィッ
シャ免疫型に対する抗体の正常の力価よシも高い力価を
有し、また緑膿菌に関してフィッシャー免疫型のすべて
7つに対して非常に有効であシ、従って緑膿菌の感染で
苦しむ患者の処置に有効である。
に敏感な選別法、例えば放射線免疫分析などを用いるこ
とによシ、供与者からの正常の血漿を、フィッシャー免
疫型1,2,4及び6の紅膿菌のリポ多糖類抗原に対す
る天然産の抗体に関して選別した。かなり効果的である
ためには、そのような供与者からの血漿は約1:160
0よりも大きい上述のフィッシャー免疫型に対する抗体
の力価を有すべきであることが発見された。血漿供与者
の約2〜5%はそのような力価を有する。この方法で得
られる超免疫血清グロブリンは、すべての7つのフィッ
シャ免疫型に対する抗体の正常の力価よシも高い力価を
有し、また緑膿菌に関してフィッシャー免疫型のすべて
7つに対して非常に有効であシ、従って緑膿菌の感染で
苦しむ患者の処置に有効である。
血漿の選別法、即ちE L I SA法は、本明細書に
参考文献として引用されるEngvall及び135
(1972) 、 Engvall ら、Bioche
micaEt Biophysica Acta、25
1 (1971)427−434 、 Engvall
ら、Immwn o c h emi −8try、
8,871−874 (1971)、VOtlerら、
Bull、ll’orld Health Organ
、、51 。
参考文献として引用されるEngvall及び135
(1972) 、 Engvall ら、Bioche
micaEt Biophysica Acta、25
1 (1971)427−434 、 Engvall
ら、Immwn o c h emi −8try、
8,871−874 (1971)、VOtlerら、
Bull、ll’orld Health Organ
、、51 。
209−211 、(1974)、及びVollerら
、同上、上ユ、55−65(19763に本質的に記述
されているようなものである。この分析は抗体の定量分
析のだめの簡単な方法である。即ちポリスチレン製の抗
原で被覆された96の井戸のミクロ力価板を抗血清と、
続いて抗免疫グロブリンの酵素で標識した調製物と培養
する。洗浄後に管内に残る酵素は血清中の特異的な抗体
の量の尺度を与える。ELISA法を用いると、1〜1
00n Q / mlの抗体が測定できる。
、同上、上ユ、55−65(19763に本質的に記述
されているようなものである。この分析は抗体の定量分
析のだめの簡単な方法である。即ちポリスチレン製の抗
原で被覆された96の井戸のミクロ力価板を抗血清と、
続いて抗免疫グロブリンの酵素で標識した調製物と培養
する。洗浄後に管内に残る酵素は血清中の特異的な抗体
の量の尺度を与える。ELISA法を用いると、1〜1
00n Q / mlの抗体が測定できる。
緑膿菌のフィッシャー免疫型に対する抗体の十分高い力
価を有する血漿を集め、分別して免疫血清グロブリンを
得る。この目的のためには、集めた血漿から静脈内注射
しうる免疫“血清グロブリンを得るだめのいずれかの方
法を用いることができる。例えばコーン(Cohn )
分別法(前述の参考文献参照)を用いてコーン画分■を
得てもよく、また硫酸アンモニウム分別、ガスクロマト
グラフィー、半透過性膜での濾過法なども使用しうる。
価を有する血漿を集め、分別して免疫血清グロブリンを
得る。この目的のためには、集めた血漿から静脈内注射
しうる免疫“血清グロブリンを得るだめのいずれかの方
法を用いることができる。例えばコーン(Cohn )
分別法(前述の参考文献参照)を用いてコーン画分■を
得てもよく、また硫酸アンモニウム分別、ガスクロマト
グラフィー、半透過性膜での濾過法なども使用しうる。
本発明の免疫血清グロブリンは少くとも1:6400の
フィッシャー免疫型1,2.4及び6に対する、そして
少くとも1:1600のフィッシャー免疫型3.5及び
7に対する抗体の力価を有する。上述の免疫血清グロブ
リンはIQG、普。
フィッシャー免疫型1,2.4及び6に対する、そして
少くとも1:1600のフィッシャー免疫型3.5及び
7に対する抗体の力価を有する。上述の免疫血清グロブ
リンはIQG、普。
通IQG単量体の少くとも90%を含んでなる。
本物質は一般に他のガンマグロブリン例えばIQA。
1gM力ども含有する。
上述のように、緑膿菌の超免疫グロブリンは筋肉内に又
は静脈内圧投与しうる。後者のための物質は好適であシ
、例えば米国特許第3,903,262号(これは本明
細書に参考文献として引用)の方法或いはこの米国特許
に引用されているいずれかの方法に従って調製できる。
は静脈内圧投与しうる。後者のための物質は好適であシ
、例えば米国特許第3,903,262号(これは本明
細書に参考文献として引用)の方法或いはこの米国特許
に引用されているいずれかの方法に従って調製できる。
米国特許第亀901262号の改変免疫血清グロブリン
は、静脈内投与に適当であシ、部分的に無傷の銀白ジス
ルフィド結合を有する無傷の免疫血清グロブリン鎖から
なる。各開裂したソスルフィド結合は一対のアルキル化
メルカプト基で置換され、この開裂した鎖は非共有的会
合によって合体したま\であシ、従って非解離溶媒中に
おける改変取消グロブリンの見かけの分子量は改変され
てない免疫血清グロブリンと実質的に同一である。上述
の物質は免疫血清グロブリンの穏やかにアルカリ性の水
溶液をソチオスレイトール又はジチオリスリトールで選
択的に還元し、このように還元した銀白ジスルフィド基
をアルキル化し、そしてこのように改変したグロブリン
を非蛋白質性の反応生成物から公比ILすることによっ
て製造される。
は、静脈内投与に適当であシ、部分的に無傷の銀白ジス
ルフィド結合を有する無傷の免疫血清グロブリン鎖から
なる。各開裂したソスルフィド結合は一対のアルキル化
メルカプト基で置換され、この開裂した鎖は非共有的会
合によって合体したま\であシ、従って非解離溶媒中に
おける改変取消グロブリンの見かけの分子量は改変され
てない免疫血清グロブリンと実質的に同一である。上述
の物質は免疫血清グロブリンの穏やかにアルカリ性の水
溶液をソチオスレイトール又はジチオリスリトールで選
択的に還元し、このように還元した銀白ジスルフィド基
をアルキル化し、そしてこのように改変したグロブリン
を非蛋白質性の反応生成物から公比ILすることによっ
て製造される。
本発明の超免疫グロブリン調製物は、米国特許第4.1
86.192号の教示に従ってマルトースを安定剤とし
て含有することもできる。従って本調製物は重i/容量
基準で約1〜20%のマルトースを含有しうる。
86.192号の教示に従ってマルトースを安定剤とし
て含有することもできる。従って本調製物は重i/容量
基準で約1〜20%のマルトースを含有しうる。
本発明の超免疫生成物は、製薬学的調製物、普通治療の
目的に使用できる超免疫血清グロブリンの水溶液中に混
入してよい。しかしながら、「製薬学的調製物」とは、
広義において、治療の目的ばかりでなく試剤の目的、即
ちワクチンなどの調製に対して有機体例えばビールスを
血漿又は血漿画分、例えばコーン流出物11+ll[、
コー、ン画分■、コーン画分■、など上で生長させる組
織培養のために技術的に公知のように使用される本発明
の超免疫血清グロブリンを含有する調製物を包含するも
のとする。
目的に使用できる超免疫血清グロブリンの水溶液中に混
入してよい。しかしながら、「製薬学的調製物」とは、
広義において、治療の目的ばかりでなく試剤の目的、即
ちワクチンなどの調製に対して有機体例えばビールスを
血漿又は血漿画分、例えばコーン流出物11+ll[、
コー、ン画分■、コーン画分■、など上で生長させる組
織培養のために技術的に公知のように使用される本発明
の超免疫血清グロブリンを含有する調製物を包含するも
のとする。
治療用に意図された製薬学的調製物は、治療量の超免疫
血清グロブリン、即ち予防又は治癒の健康の尺度に対し
て必要な量のそれを含有すべきでおる。製薬学的組成物
を試剤として用いる場合には、それは試剤量の超免疫血
清グロブリンを含有すべきである。同様に、組織培養又
は培養媒体に用いる場合、調製物は所望の生長を得るの
に十分な量の超免疫血清グロブリンを含有すべきである
。
血清グロブリン、即ち予防又は治癒の健康の尺度に対し
て必要な量のそれを含有すべきでおる。製薬学的組成物
を試剤として用いる場合には、それは試剤量の超免疫血
清グロブリンを含有すべきである。同様に、組織培養又
は培養媒体に用いる場合、調製物は所望の生長を得るの
に十分な量の超免疫血清グロブリンを含有すべきである
。
次の例示的実施例は本発明を更に例示する。
分析法
分析法はVoilerら、上述、に記述されているもの
と本質的に同一であった。炭酸塩緩衝剤p E 9.6
中抗原(5μf/1d)200μlを、ポリスチレン製
ミクロ力価板の各井戸(well)に添加し、37℃で
3時間培養した。この板を、0.05%Twean 2
0を含む燐酸塩緩衝の食塩水(PES)で1回洗浄し、
除水した。血清をPBS−Twain中で希釈した。各
井戸にP B S −Tween20の50μlを添加
した。血清の最初の希釈(1:50)をワツセルマン省
・中で行った。この希釈からミクロカ価板中においてミ
クロ力[liループC1oop)soμlを用いること
にょ9、連続して2重の希釈を行った。板中での最初の
希釈は1:100であった。連続しfC2回目の希釈の
完了後、井戸内の容量をpBs −Tween 20の
150μlで200μlにした。このようにして各井戸
における最終希釈を4倍に増加させた。各版を室温で夜
通し培養し、次いで3回洗浄した。
と本質的に同一であった。炭酸塩緩衝剤p E 9.6
中抗原(5μf/1d)200μlを、ポリスチレン製
ミクロ力価板の各井戸(well)に添加し、37℃で
3時間培養した。この板を、0.05%Twean 2
0を含む燐酸塩緩衝の食塩水(PES)で1回洗浄し、
除水した。血清をPBS−Twain中で希釈した。各
井戸にP B S −Tween20の50μlを添加
した。血清の最初の希釈(1:50)をワツセルマン省
・中で行った。この希釈からミクロカ価板中においてミ
クロ力[liループC1oop)soμlを用いること
にょ9、連続して2重の希釈を行った。板中での最初の
希釈は1:100であった。連続しfC2回目の希釈の
完了後、井戸内の容量をpBs −Tween 20の
150μlで200μlにした。このようにして各井戸
における最終希釈を4倍に増加させた。各版を室温で夜
通し培養し、次いで3回洗浄した。
PBS −Tween 20中においてl:1000に
希釈されたアルカリホスファターゼに共役したヤギの抗
六間1ctG 2ooμノを井戸に添加し、室温で4時
間培養した。この板f P B S −1重wsen2
0で4回洗浄した後、酵素基質p−ニトロ7エ、、=/
lzホスフェート(Sigma Chetnical
Co、 。
希釈されたアルカリホスファターゼに共役したヤギの抗
六間1ctG 2ooμノを井戸に添加し、室温で4時
間培養した。この板f P B S −1重wsen2
0で4回洗浄した後、酵素基質p−ニトロ7エ、、=/
lzホスフェート(Sigma Chetnical
Co、 。
5aint Louis、 Missouri )のジ
ェタノールアミン緩衝剤1 ml!当り1 +ayの2
00μlを各井戸に添加し、室温で30分間培養させた
。発現する黄色を405 nmにおいて分光学的に定量
化した。
ェタノールアミン緩衝剤1 ml!当り1 +ayの2
00μlを各井戸に添加し、室温で30分間培養させた
。発現する黄色を405 nmにおいて分光学的に定量
化した。
1:1,600における正常の血清の希釈は0.05以
下の吸光度(OD)の読みを与えた。それ故に、0、1
又′はそれ以上のODの読みを有する1: 1,600
に希釈された血清は正と考えられる。
下の吸光度(OD)の読みを与えた。それ故に、0、1
又′はそれ以上のODの読みを有する1: 1,600
に希釈された血清は正と考えられる。
上述の工程で用いた物質及び試剤は次の通シであった:
pBs −Twain 20−0.05%のTween
20を含有。
20を含有。
炭酸塩緩衝剤−0,06Jf;pJ79.5−蒸留水l
l中NaC0,1,91f 、 NaBCO,3,52
2゜ ジェタノールアミン緩衝剤10%;pH9,8−1,M
lIC1でpHを調節(注:上記試薬に0.02%N
aN、を添加してバクテリヤの生長を禁じた)。
l中NaC0,1,91f 、 NaBCO,3,52
2゜ ジェタノールアミン緩衝剤10%;pH9,8−1,M
lIC1でpHを調節(注:上記試薬に0.02%N
aN、を添加してバクテリヤの生長を禁じた)。
アルカリホスホターゼで共役したヤギの抗人間1gG
(Miles Laboratories。
(Miles Laboratories。
Elkんart 、 Indiana )。
ポリスチレン製ミクロカ価板−DynatgchLab
oratoriesカタログ番号1−220−4X0 12−チャンネルピペット及びマルチチップ(mrbl
ti−tips ) 、 Flow Laboτato
riesカタログ番号77−889−0.0゜ 実施例1 上述のE L I SA法を用いることにより、供力者
から得た血漿を、緑膿菌のフィッシャー免疫型1.21
4及び6に対する抗体の力価に関して選別した。力価は
OD、。s nm > ” ’を与えるその希釈である
。
oratoriesカタログ番号1−220−4X0 12−チャンネルピペット及びマルチチップ(mrbl
ti−tips ) 、 Flow Laboτato
riesカタログ番号77−889−0.0゜ 実施例1 上述のE L I SA法を用いることにより、供力者
から得た血漿を、緑膿菌のフィッシャー免疫型1.21
4及び6に対する抗体の力価に関して選別した。力価は
OD、。s nm > ” ’を与えるその希釈である
。
1:1600又はそれ以上の脈膿菌のフィッシャー免疫
型1,2.4及び6の力価を有する血漿を集めた。この
集めた血清(0,1me )を用いて縁線−の20倍L
D、。で攻撃する3時間前に受動的に免疫化した。(2
0倍LD、o−攻撃されたマウスの50%を死亡きせる
のに必要な投薬量×20)。
型1,2.4及び6の力価を有する血漿を集めた。この
集めた血清(0,1me )を用いて縁線−の20倍L
D、。で攻撃する3時間前に受動的に免疫化した。(2
0倍LD、o−攻撃されたマウスの50%を死亡きせる
のに必要な投薬量×20)。
対照として、1 : 400以下、1:4QO及び1:
800の縁線閑に対する抗体の力価を有する血清を集め
た。これらの集めた血清の1つを、上述の如き緑膿菌の
20倍LD、。で攻撃する前にマウスに同様に注射した
。
800の縁線閑に対する抗体の力価を有する血清を集め
た。これらの集めた血清の1つを、上述の如き緑膿菌の
20倍LD、。で攻撃する前にマウスに同様に注射した
。
結果を第1表に要約する。
実施例2
実施例1からの16人の供与者は実施例1の供与から1
〜3ケ月後に更なる血漿を供給した。8つの血清試料に
おいてELISAによる緑膿菌に対する抗体の力価が1
: 1600又はそれ以上であり;他の8つの試料に
おいて力価は1:800又はそれ以上であった。
〜3ケ月後に更なる血漿を供給した。8つの血清試料に
おいてELISAによる緑膿菌に対する抗体の力価が1
: 1600又はそれ以上であり;他の8つの試料に
おいて力価は1:800又はそれ以上であった。
集めた血清を実施例1における如くマウスに注射し、こ
のマウスを上述の如く緑膿菌で攻撃した。
のマウスを上述の如く緑膿菌で攻撃した。
1 : 400よシ低い力価の血清及び食塩水を対照に
した。
した。
結果を第2表に要約する。
実施例3
1:1600又はそれ以上の!+膿菌のフィッシャー免
疫型1.2.4及び6に対する抗体の力価を有する血清
の集めたものを分別して静脈の免疫血清グロブリン(I
GIV)を得た。1leide ら著、” 1iand
book of Experimental Imyn
rbno−lo a y II、第3版、1979年、
の硫酸アンモニウム分別法を用いた。対照として、正常
の血清を上述の方法で分別してIGIVを得た。
疫型1.2.4及び6に対する抗体の力価を有する血清
の集めたものを分別して静脈の免疫血清グロブリン(I
GIV)を得た。1leide ら著、” 1iand
book of Experimental Imyn
rbno−lo a y II、第3版、1979年、
の硫酸アンモニウム分別法を用いた。対照として、正常
の血清を上述の方法で分別してIGIVを得た。
不発明及び対照の超免疫IGIVの抗体分布を第3表に
要約する。
要約する。
実施例4
実施例30分別した超免疫プソイドモナス属IGIV並
びに実施例3からの血清を実施例1に記述したようにマ
ウスに投与し、このマウスを実施例1における如く攻撃
した。
びに実施例3からの血清を実施例1に記述したようにマ
ウスに投与し、このマウスを実施例1における如く攻撃
した。
結果を第4表に要約する。
第 4 表
I(7G(1:6400) 2/10
血清(1:1600) 4/10
レーテツド
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、 少くとも約1 : 6400の、フィッシャー免
疫型1,2.4及び6の緑膿菌の9−多糖類抗原に対す
る抗体の力価を有する免疫血清グロブリン。 2 ・免疫血清グロブ+jンを緑膿菌の感染の処置に有
効ならしめるのに十分であるフィッシャー免疫型1〜7
の緑膿菌のリポ多糖類抗原に対する抗体の力価を有する
特許請求の範囲第1項記載の免疫血清グロブリン。 & 特許請求の範囲第1項記載の免疫血清グロブリンを
含んでなる製薬学的調製物。 4、 マルトースを更に含んでなる特許請求の範囲第3
項記載の調製物。 5、静脈内注射しうる特許請求の範囲第1項記載の免疫
血清グロブリン。 6、(α) 1:1600又はそれ以−ヒであるフィッ
シャー免疫型1,2.4及び6の緑膿菌のリポ多糖類に
対する滅相しtない抗体の力価のだめの供与者の血漿を
スクリーニングし、 (b)該力価の抗体のMat漿を集め、そして(C)
該集めた血漿から免疫血清グロブリンを調製する、 ことを含んでなるフィッシャー免疫型l〜7の緑膿菌の
リポ多糖勢抗原に対する抗体の高力価を有す夛免疫血清
グロブリンの調製法、。 7、工程Cの免疫血清グロブリンを静脈内注射しうるよ
うにする工程を更に含んでなる特許請求の範囲第6項記
載の方法。 8、供与者の顛漿を、酵素結合の免疫吸着分析によって
スクリーニングする特許請求の範囲第6項記載の方法。 9.免疫血清グロブリンをコーン分別法によって得る%
許請求の範囲第6項記載の方法。 10、免疫薄情グロブリンを硫酸アンモニウム分別法に
よって得る特許請求の範囲第6項記載の方法。 11、免疫血清グロブリンを還元し且つアルキル化して
これを静脈内注射しうるようにする特許請求の範囲第6
項記載の方法。 1z 免疫血7F?グロブリンがIgGを含んでfJ:
る特許請求の範囲第6項記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US06/504,106 US4587121A (en) | 1983-06-14 | 1983-06-14 | High titer Pseudomonas immune serum globulin |
US504106 | 2000-02-14 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS6069035A true JPS6069035A (ja) | 1985-04-19 |
JPH0639389B2 JPH0639389B2 (ja) | 1994-05-25 |
Family
ID=24004869
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP59118371A Expired - Lifetime JPH0639389B2 (ja) | 1983-06-14 | 1984-06-11 | 高力価緑膿菌免疫血清グロブリン |
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Country | Link |
---|---|
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EP (1) | EP0129147B1 (ja) |
JP (1) | JPH0639389B2 (ja) |
AT (1) | ATE49219T1 (ja) |
DE (1) | DE3480931D1 (ja) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6230729A (ja) * | 1985-05-04 | 1987-02-09 | ビオテスト、フアルマ、ゲゼルシヤフト、ミツト、ベシユレンクテル、ハフツンク | 多価高度免疫グロブリン製剤およびその製法 |
JPS62108825A (ja) * | 1985-11-07 | 1987-05-20 | マイルス・ラボラトリ−ス・インコ−ポレ−テツド | 静脈内投与のための高力価水痘−帯状疱疹免疫グロブリン |
JPS63159328A (ja) * | 1986-10-27 | 1988-07-02 | マイルス・インコーポレーテツド | 乗的製薬学的放出系 |
JPH0293249U (ja) * | 1988-12-30 | 1990-07-24 |
Families Citing this family (43)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4693891A (en) * | 1985-09-09 | 1987-09-15 | Miles Laboratories, Inc. | Vaccine for Pseudomonas aeruginosa |
US4918163A (en) * | 1985-09-27 | 1990-04-17 | Pfizer Inc. | Monoclonal antibodies specific for lipid-A determinants of gram negative bacteria |
US5179001A (en) * | 1985-09-27 | 1993-01-12 | The Regents Of The University Of California | Detection and monitoring of chronic and gram-negative infection |
US4777136A (en) * | 1985-09-27 | 1988-10-11 | The Regents Of The University Of California | Monoclonal antibody reactive with Pseudomonas Aeruginosa |
NZ218499A (en) * | 1985-12-10 | 1990-04-26 | Genetic Systems Corp | Monoclonal antibodies against pseudomonas aeruginosa, pharmaceutical compositions and detection methods |
US4970070A (en) * | 1986-02-07 | 1990-11-13 | Genetic Systems Corporation | Protective monoclonal antibody compositions for infections due to group B streptococcus |
IL81370A (en) * | 1986-02-07 | 1991-06-30 | Genetic Systems Corp | Pharmaceutical and diagnostic compositions comprising a plurality of human monoclonal antibodies for the treatment of bacterial diseases,methods for the preparation of the compositions and antibodies and kits containing said compositions |
ES2009365A6 (es) * | 1986-04-24 | 1989-09-16 | Univ California | Procedimiento de otencion de anticuerpos monoclonales para bacterias gram-negativas. |
NZ221895A (en) * | 1986-09-26 | 1990-09-26 | Univ California | Composition and method for the diagnosis of pseudomonas aeruginosa infections |
US5093117A (en) * | 1989-01-24 | 1992-03-03 | Baxter International Inc. | Compositions and method for the treatment or prophylaxis of sepsis or septic shock |
EP0382031A3 (en) * | 1989-02-10 | 1991-06-26 | Miles Inc. | Monoclonal antibodies in immune serum globulin |
US5219578A (en) * | 1991-02-25 | 1993-06-15 | Innovet, Inc. | Composition and method for immunostimulation in mammals |
US20010043928A1 (en) * | 1995-05-03 | 2001-11-22 | Howard Mark E. | Serum preparations for inhibiting retroviruses and tumor growth |
US7713297B2 (en) | 1998-04-11 | 2010-05-11 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Drug-releasing stent with ceramic-containing layer |
US8601903B1 (en) * | 1999-09-14 | 2013-12-10 | Huf Hülsbeck & Fürst Gmbh & Co. Kg | Closing system, especially for motor vehicles |
US20070224235A1 (en) | 2006-03-24 | 2007-09-27 | Barron Tenney | Medical devices having nanoporous coatings for controlled therapeutic agent delivery |
US8187620B2 (en) | 2006-03-27 | 2012-05-29 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical devices comprising a porous metal oxide or metal material and a polymer coating for delivering therapeutic agents |
US8815275B2 (en) | 2006-06-28 | 2014-08-26 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Coatings for medical devices comprising a therapeutic agent and a metallic material |
US8771343B2 (en) | 2006-06-29 | 2014-07-08 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical devices with selective titanium oxide coatings |
EP2068757B1 (en) | 2006-09-14 | 2011-05-11 | Boston Scientific Limited | Medical devices with drug-eluting coating |
US7981150B2 (en) | 2006-11-09 | 2011-07-19 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Endoprosthesis with coatings |
WO2008082698A2 (en) * | 2006-12-28 | 2008-07-10 | Boston Scientific Limited | Medical devices and methods of making the same |
US8431149B2 (en) | 2007-03-01 | 2013-04-30 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Coated medical devices for abluminal drug delivery |
US8067054B2 (en) | 2007-04-05 | 2011-11-29 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Stents with ceramic drug reservoir layer and methods of making and using the same |
US7976915B2 (en) | 2007-05-23 | 2011-07-12 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Endoprosthesis with select ceramic morphology |
US7942926B2 (en) | 2007-07-11 | 2011-05-17 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Endoprosthesis coating |
US8002823B2 (en) | 2007-07-11 | 2011-08-23 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Endoprosthesis coating |
JP2010533563A (ja) | 2007-07-19 | 2010-10-28 | ボストン サイエンティフィック リミテッド | 吸着抑制表面を有する内部人工器官 |
US7931683B2 (en) | 2007-07-27 | 2011-04-26 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Articles having ceramic coated surfaces |
US8815273B2 (en) | 2007-07-27 | 2014-08-26 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Drug eluting medical devices having porous layers |
WO2009018340A2 (en) | 2007-07-31 | 2009-02-05 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical device coating by laser cladding |
JP2010535541A (ja) | 2007-08-03 | 2010-11-25 | ボストン サイエンティフィック リミテッド | 広い表面積を有する医療器具用のコーティング |
US7938855B2 (en) | 2007-11-02 | 2011-05-10 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Deformable underlayer for stent |
US8216632B2 (en) | 2007-11-02 | 2012-07-10 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Endoprosthesis coating |
US8029554B2 (en) | 2007-11-02 | 2011-10-04 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Stent with embedded material |
WO2009131911A2 (en) | 2008-04-22 | 2009-10-29 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical devices having a coating of inorganic material |
US8932346B2 (en) | 2008-04-24 | 2015-01-13 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical devices having inorganic particle layers |
US8449603B2 (en) | 2008-06-18 | 2013-05-28 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Endoprosthesis coating |
US8231980B2 (en) | 2008-12-03 | 2012-07-31 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical implants including iridium oxide |
US8071156B2 (en) | 2009-03-04 | 2011-12-06 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Endoprostheses |
US8287937B2 (en) | 2009-04-24 | 2012-10-16 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Endoprosthese |
US9815886B2 (en) | 2014-10-28 | 2017-11-14 | Adma Biologics, Inc. | Compositions and methods for the treatment of immunodeficiency |
US10259865B2 (en) | 2017-03-15 | 2019-04-16 | Adma Biologics, Inc. | Anti-pneumococcal hyperimmune globulin for the treatment and prevention of pneumococcal infection |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0048422A2 (en) * | 1980-09-15 | 1982-03-31 | Bactex Incorporated | Pili of pseudomonas aeruginosa and utilization of same as vaccines against infectionary p.aeruginosa |
JPS5865223A (ja) * | 1981-08-31 | 1983-04-18 | ステイ−ブン・レスリ−・ギヤフイン | エンドトキシン不活性化用組成物 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK79841C (da) * | 1952-08-04 | 1955-09-12 | Behringwerke Ag | Fremgangsmåde til fremstilling af stabile γ-globulinpræparater. |
DE1667908B1 (de) * | 1967-02-28 | 1970-12-03 | Parke Davis & Co | Polyvalenter Impfstoff gegen Pseudomonas aeruginosa Infektionen |
GB1499035A (en) * | 1975-04-10 | 1978-01-25 | Ts Nii Gematologii I Perelivan | Antistaphylococcus human immune globulin and method of preparing same |
JPS5296731A (en) * | 1976-02-05 | 1977-08-13 | Green Cross Corp:The | Prophylactics and remedies of cyanomycosis |
US4285936A (en) * | 1979-12-10 | 1981-08-25 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Method for producing a vaccine against bacterial infections caused by pseudomonas aeruginosa |
US4482483A (en) * | 1983-04-06 | 1984-11-13 | Armour Pharmceutical Company | Composition of intravenous immune globulin |
-
1983
- 1983-06-14 US US06/504,106 patent/US4587121A/en not_active Expired - Lifetime
-
1984
- 1984-06-06 DE DE8484106445T patent/DE3480931D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1984-06-06 EP EP84106445A patent/EP0129147B1/en not_active Expired
- 1984-06-06 AT AT84106445T patent/ATE49219T1/de not_active IP Right Cessation
- 1984-06-11 JP JP59118371A patent/JPH0639389B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0048422A2 (en) * | 1980-09-15 | 1982-03-31 | Bactex Incorporated | Pili of pseudomonas aeruginosa and utilization of same as vaccines against infectionary p.aeruginosa |
JPS5865223A (ja) * | 1981-08-31 | 1983-04-18 | ステイ−ブン・レスリ−・ギヤフイン | エンドトキシン不活性化用組成物 |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6230729A (ja) * | 1985-05-04 | 1987-02-09 | ビオテスト、フアルマ、ゲゼルシヤフト、ミツト、ベシユレンクテル、ハフツンク | 多価高度免疫グロブリン製剤およびその製法 |
JPS62108825A (ja) * | 1985-11-07 | 1987-05-20 | マイルス・ラボラトリ−ス・インコ−ポレ−テツド | 静脈内投与のための高力価水痘−帯状疱疹免疫グロブリン |
JPS63159328A (ja) * | 1986-10-27 | 1988-07-02 | マイルス・インコーポレーテツド | 乗的製薬学的放出系 |
JPH0293249U (ja) * | 1988-12-30 | 1990-07-24 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP0129147B1 (en) | 1990-01-03 |
JPH0639389B2 (ja) | 1994-05-25 |
EP0129147A2 (en) | 1984-12-27 |
EP0129147A3 (en) | 1986-11-26 |
ATE49219T1 (de) | 1990-01-15 |
US4587121A (en) | 1986-05-06 |
DE3480931D1 (de) | 1990-02-08 |
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