JPS6054398A - ポリヌクレオチド合成装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はポリヌクレオチド合成装置に関する。

ポリヌク１７オチド、例えばＤＮＡ　（デオキシリボ核
酸）を合成する方法として、ヌクレオチドを化学結合さ
せたサボーＩ・を使用し、リンＭｌ〜リエステル法、リ
ン酸ジエステル法、フォスファイト法などにより順次ヌ
クレオチドを縮合して行く方法が知られている。この合
成方法で番、！、洗浄−説保護一洗浄一縮合反応一洗浄
等の工程を繰り返すもので、工程の種類は多くないが、
繰り返し操作が多く煩雑である。

近年、合成操作の煩わしさをＭ消する目的で種々のＤＮ
Ａ合成装置が提案されている。

例えば、装置本体に、反応器と、ポリヌクレオチド合成
反応に必要な試薬、溶剤等が充填された試薬ビン、溶剤
ビンを装備し、かつ各試薬ビン、溶剤ビンと反応器とを
接続する流路にそれぞれコックを設けて、窒素ガスの圧
力を利用し、各コックを開閉操作（−７で試薬ビン、溶
剤ビンから反応器に試薬、溶剤等を順次送り込み、洗浄
−説保護一洗浄等を繰り返すように構成したものが知ら
れている。

しかしながら、上記装置では、多数のコックがあり、誤
操作するおそれがあった。このような誤操作すると、初
めからやり直さなければならす、それまでの作業が全て
無駄となることがあった。

また、自動化する場合には、コックを電磁弁で置き換え
ることが考えられるが、多数の電磁弁を使用するためコ
スト高となる上に、制御が複雑となる等の問題があった
。

本出願人は」二記問題を解決するため、第１図に示すよ
うな装置を提案した（特願昭５８−１２６２４９号）。

図中符号１は窒素ボンベ、２はディストリビューター、
３ａ〜３１は窒素ガスの流路、４、　、５　、６　、８
は試薬ビン、７，９は溶剤ビン、１０は六方切換弁、１
　ｌ　ｂ〜ｌ１ｇは試薬、溶剤の流路、１２は、三方コ
ック、１３は三方コック、１４ａ〜１４．　ｈは試薬、
溶剤、窒素ガスの流路、１５は双方コック、１６は反応
器、１７は廃液タンクである。

上記装置によれば、例えば、六方切換弁１０に設けた操
作ツマミ　（図示せず）により共通ボート１０ｈをボー
１１０ｂに合わｌ！ると、試薬ビン４が反応器１（ｉ、
１６と接続される。すると、窒素ポンベ１からディス）
−リビューター２、流１？３３ｂを通って試薬ビン４に
送られたＮ２ガスの圧力により、試薬ビン４から流路１
１ｈ、ボーＩ・ｌＯｂ、共通ボート１０１１、三方ニア
ツク１２、三方コツ１、り１３、流路１４　ａ　、　１
４　ｂを通って試薬（不活性化剤）が反応器１　ｆｉ　
、　１６にそれぞれ送り込まれる。このとき、双方コッ
ク１５は実線位置、すなわちＦＦ、Ｅｒ）にして、１−
バー また、操作ツマミにより共通ボー１−１０ｈをボート１
０Ｃに合わせると、試薬ビン５が反応器１６．１６と接
続され、同様にＮ２ガスの圧力により試薬ビン５から試
薬（縮合剤／溶剤■溶液）が反応器＋　６　、、１６に
送り込ｙｐれる。さらに、共通ボート１０１１をボー１
−１０７１に合わ・けると試薬ビン６から試薬（不活性
化助剤／溶剤■溶液）が、またボート１０ｅに合わせる
と溶剤ビン７から溶剤■が、またボー１〜ｌＯｆに合わ
せると試薬ビン８から試薬（脱保護剤／溶剤■）が、ま
たボート１０　ｇに合わせると溶剤ビン９から溶剤■が
それぞれ反応器１６．１６に送り込まれる。

なお、反応器１．６　、１６から排液するには、双方コ
ック１５を点線位置、すなわちＢＬＯＷにして、コック
１−６　ａ　、　１６　ａを開く。

」二連のように、−個の装置ツマミによって流路１１ｂ
〜ｌ１ｇを切換えることができ、各流路に設けた多数の
コックを開閉操作する従来の装置に比して誤操作を少な
くすることができると共に、自動化も容易に行なえる。

しかし、一つの縮合工程において六方切換弁１０の動作
をみると、共通ボート１０ｈを、ボート１０ｇ−”１０
ｄ→１０ｂ→Ｌｏｇ→１０ｅ→１０ｆ−４］　Ｏｅ−］
　Ｏｇ−”１０　ｃの順に切換えるようになっている（
なお、ボート１０ｂ〜１０ｇを切換えるとき１旦ボート
１０ａに切換えてから行なう）。すなわち、六方切換弁
１０　（ツマミ）の正転、反転を繰り返す必要があり、
しかもボート１０ｂ→１０ｇに切換えるときには二つの
ボート１０　ｃ　ｔ　１０　ｄを通り越し、またボー）
１０ｇ−１０ｅに切換えるときには一つのボート１０［
を通り越す。

このため、双方切挨弁１０を動作するモータの制御が複
雑となる問題があった。

本発明は」二記事情に鑑みてなされたもので、その目的
とするところは、誤操作を少なくすることができる十に
、自動化に際に制御が簡ｔｌｊに行なえるポリヌクレオ
チド合成装置を提供することである。

すなわち、本発明は、反応器と、ポリヌクレオチド合成
反応に必要な試薬、溶剤等が充填された試薬ビン、溶剤
ビンと、入口側に該試薬ビン、溶剤ビンと接続される複
数の試薬、溶剤ボートを有し、出口側に該反応器に接続
される共通ボートを有して、各試薬ビン、溶剤ビンと反
応器とを接続する流路を操作ツマミを回転操作すること
により切換える切換弁と、不活性ガスの圧力により各試
薬ビン、溶剤ビンから試薬、溶剤等を反応器に送り込む
給液手段とを具備し、かつ前記入口側の複数の試薬、溶
剤ボーＩ・を給ａＦＭ作−＋ｉに配置して、前記操作ツ
マミを一回転させたとき一つの縮合工程におげろ給排液
操作が完了するように構成してなることを特徴としてい
る。

したがって、本発明によれば、従来の装置のよ・）な誤
操作を更に少なくすることができ、しかも自動化に際に
切換ブｔの制御が簡単に行なえる。

以下、本発明の実施例を図面を参照して説明する。

第２図は本発明の合成装置の一例を示す総体斜視図、第
３図は同合成装置のフローシートである。

本実施例の合成装置によると、装置本体への前面パネル
Ｐの一端部側（第２図左側）の上部には凹部Ｐ＋が設け
られていて、該凹部Ｐ１内には反応器２０．２０が装備
されている。これら反応器２０．２０は、第３図に示す
ようにシヱカー４６のアーム４６ａに支持されている。

また、前面パネルＰには、第１図に示す六方切換弁１０
に相当する十六方切換弁２１　（第３図。

第４図、第５図ａ、ｂ参照、本発明の特徴部分）ノ操作
ツマミ２２が装備されている。

装置本体への側面には凹ｒＩｌ（八１　、△、が設りら
れていて、下刃の凹部Ａ１に（：ｒ不活性化剤上不活性
化助剤を充填した試薬ビン２３がセソ１−され、また」
一方の四部Ａ２には脱保護剤（脱ｌ・リチル剤）／溶剤
■溶液を充填した試薬ビン２４と溶剤■を充填した溶剤
ビン２５と溶剤■を充填した溶剤ビン２６とがセノｌ−
されている。

本実施例では、第１Ｆ！！１４１″、示す試薬ビン５　
（縮合剤／溶剤■溶液）が省略され、不活性化剤と不活
性化ｎＪｒ剤とは上述の如く同し試薬ビン２３内に充填
されている。

また、装置本体への内部には、第３図に示すように、小
型の窒素ボンへ２７と、ディストリビフータ−２８と、
六方コック２つと、前述の十六方切換弁２１等が装備さ
れている。

窒素ボンベ２７のＮ２ガスは、流路２９ａを通ってディ
ストリビブ、−ター２８に送られ、゛ここで分流された
後、流［ｉ’８２９ｂ’、　２９ｃ　、　２９’（＋’
、　２９ｅをｊ１１ッて試薬ビン２３，２４と溶剤ビン
２５゜２６に送られる。このＮ２ガスの圧力により各ビ
ン２３〜２６から反応器２０．２０に試薬、溶剤が送ら
れる。

試薬ビン２３，２４、溶剤ビン２５．２６と反応器２０
．２０との間に十六方切換弁２１が設けられている。

次に本発明の特徴部分であるこの十六方切換弁２１を第
４図及び第５図ａ、ｂを参照して詳細に説明する。

十六方切換弁２１は、弁本体３０と、該弁本体３０に回
転自在に装備された回転部３１とから構成されている。

弁本体３０には、入口側のボート３０ａ〜３０ｐと出口
側の共通ポート３０Ｑが配設されている。

一方、回転部３１の外周面には周溝３１ａと縦溝３１ｂ
とが形成されていて、回転部３１を回転させることによ
り、：Ｊ１３通ボート３０（ｌが該周溝３１ａと縦溝３
１ｂを介してボート３０ａ〜３０ｐに順次連通される。

共通ボート３０ｑは、流ｒｌｆＩ３２　ト該流路３２　
ニ設けた三方コック３３を介して反応器２０．２０の上
部と接続されている。

ボート３０ａ〜３０ｐのうち、試薬、溶剤ボー）３０ａ
、３０ｃ、３０ｅ、３０ｉ、３（ｌｊ、３０に、３０ｍ
、３Ｏｏ＆よ流Ｗ８３４　ａ　〜３４　（＋を介して試
薬ビン２３，２４、溶剤ビン２５　’、　２６と接続さ
れ、またガスボー１−３０　ｂ　、　３０　ｄ　、　３
０ｆ、３０ｈ、３０Ｊ、３０７！、’３０ｎ、３０ｐは
流路３４６を介してディストリビブ６−ター２８に接続
されている。

試薬、溶剤ボート３０　ａ　、　３０　ｃ　、　３０　
（１−は給液操作順に配置され、そしてこれらの間にガ
スボート３０ｂ、３０ｄ、３Ｏｆ・・・と給？＃、停止
に１部３０ｒがそれぞれ配置されている。

したがって、回転部３１を一回転させると、試薬ビン２
４から脱保護剤／溶剤Ｔ−Ｎ２ガスー給液停止に一・・
・−溶剤ビン２５から溶剤■−・Ｎ２ガス−給液停止の
順で給液操作が行なわれる。すなわち、一つの縮合工程
における給排液操作を完了することができる。

給液停止に部３０「は、第１図に示す二方コツタ０ １２の作用をするものであり、本発明ではこの三方コッ
ク１２が省略されている。

ボート３０ｇは、流路３４ｆを介して真空ポンプ３５と
接続されている。このボート３０ｇに切換えると、反応
器２０．２０が真空ポンプ３５に接続されて、共沸脱水
を行なうことができる。

装置の自動化に際しては、回転部３１にステッピングモ
ータあるいはサーボモータを連結して、制御装置に組込
んだプログラムに従ってモータをシーケンス制御する。

このとき、試薬、溶剤ボー）３０ａ　、３０ｃ　、３０
ｅ・・・は給液操作順に配置されているため、第１図に
示す装置のようにボートを一つあるいは二つ通り越すよ
うなことがなく、モータの制御が節ｆｌｔとなる。なお
、ドラム式のシーケンサ−を使用して一夕を駆動しても
よい。

」二連の回転部３１は、一端部側（第５図すの左側）が
細径となるようにテーバ状に形成され、かつ弁本体３０
とこの回転部３１との間には、回転部３Ｉをその一端部
側に付勢するスプリング３６が介在されている。したが
って、弁本体３０と回転部３１との間に隙間が生じる才
？それがなく、各ボート３０ａ〜３０ｐが互いに連ｊｍ
することなくシールされる。また、ボート３０ａ〜３０
ｐと共通ポート３０　ｑも周？Ｆｊ３　］　ａ、　ｉＪ
Ｍ３１　ＩＩＩノ外で連通ずることなくシールされる。

また、弁本体３０の一端面１ｌＩｌｌに番、１、クリッ
ク機構３７が設りられている。このクリック機構３７は
、回転部３１の一端部に固定されて弁本体３０の一端面
に摺接する円板３８と、弁本体３０の一端面に設りた孔
３０′内に挿入されてスプリング３９の弾撥力に、１．
り円板３８の摺接面側に付勢されるボール４０とから構
成されている。円板３８の摺接面には、各ボート３０ａ
〜３０．と給液停止部３０「とにλ１応して凹部３８ａ
が設けられていて、該凹部３８Ｈにボール４０が係合す
ることにより回転子３１の位置決めがなされる。

前述の六方コック２９は、第６図ａ、ｂに示すように、
コック本体４１と、該コック本体４１に回動自在に装備
された回転部４２とから構成されている。

１ コック本体４１にはボー１−４１　ａ〜４１ｆが設けら
れ、また回転部４２には該ボート４１ａ〜４１ｆを互い
に連通させる周溝４２ａ〜４２ｄが設けられている。

ボート４］ａ　〜４１ｆと反応器２０．２０との接続関
係は、第３図に示すようになっている。すなわち、ボー
１□　４１　ａ　、　４１　ｄは流路４３ａ、４３ａを
介して反応器２０．２０の上部と接続され、またボート
ｌｊ　Ｉ　ｃ　、　４１　ｆは流路／１３ｂ、４３ｂを
介して反応器２０．２０の底部と接続されている。また
、ボー１−４　ｌ　ｂ　、　４１　ｅは流路４３ｃ。

４３ｃを介して廃液タンク４４．４４と接続されている
。

第３図に示す実線状態、すなわちＦＥＥＤ状態では周’
／Ｒ４２ａ、４２ｃを介してボート４１ａと４１ｂ、ボ
ート４１　ｄと４１ｅが連通しており、ボート４１ｃ、
４１ｆは閉じている。回転部４２を回転させて、周溝４
２ａ〜４２ｆを同図の点線位置に移動さゼると、周溝４
．２　ａ　、　４２　Ｃを介してボート４．　］　ｂと
４１ｃ１ボート４１ｄと４１ｆ３ ２ が連通し、ボー１’　４　］　ａ　、イ１ｄは閉し、Ｔ
３　Ｌ　（”）Ｗ状態となる。

なお、この六方コック２９にもクリック機構４５が設け
られている。このクリック機構４５は、周溝４２ａ〜４
２ｄを第３図の実線位置と点線位置に位置決めする夕１
に、該実線位置と点線位置の中間に位置決めする。この
中間の位置でば、ボート４１ａへ・４１ｒは全閉となる
。

六方コック２９ば、第１図に示ず六方コック１５と反応
器＋６，１６の二ｔツク１６ａ、ＩＧａとを兼用したも
のである。したがって、反応器２０゜２０にはコックが
装備されζいない。この六方コック２９の回転部４２に
十六方切換弁２１の場合と同様に、ステッピングモータ
等を連結して、制御装置に絹込んだプログラムに従って
モータを駆動することにより、自動化することができる
。

なお、前面パネルＰには、六方コック２９の操作ツマミ
４７と、三方コック３３の操作ツマミ４８と、シェカー
４６のタイマー装置（図示ゼず）の操作ツマミ４９と、
ディストリビュータ−２８４ に接続されたＮ２ガス圧力剖５０と、電源スイツチ５１
等が装備されている。

また、凹部Δ１　、Ａ２の天井部分には、詳細に図示し
ないが、ビン２３〜２６の口部の取付部２３ａ〜２６ａ
が設けられている。

第７図は反応器２０の拡大断面図である。同図によると
、反応器本体５５と、上下栓体５６，５７とから構成さ
れている。

上下栓体５６，５７ば、そのフランジ部５６ａ。

５７ａを反応器本体５５の上下端部に設けられたフラン
ジ部５５ａ　、５５ｂにクリップ等の固定手段で固定す
ることにより反応器本体５５に取付けられる。

反応器本体５５はガラスからなり、その上下開口部内に
端部５５　ｃ、　、　５５　ｄが形成されていて、これ
ら段部５５ｃ、５５ｄに当接するまで上下栓体５６．５
７の幹部５６ｂ、５７ｂが嵌挿されている。

上下栓体５６，５７は前述の試薬、溶剤等と反応せず、
かつ弾性変形可能な材料、例えばフロロシリコンゴム、
フン素ゴム、六フッ化プロピレンー四フン化エチレン共
■合体等から形成されている。

幹部５６ｂ、５７ｈの外径は、上下開口部の内径よりも
若干太き（設定されていて、幹部５６ａ。

５７ａの外面が上下開口部の内面に密着して気密及び水
蜜性が保持されている。

上栓体５６に番よ、原料を注入するためのコック５８が
設けられ”ζいる。また、第８ｒＸＩに示すように、流
路３２が接続される通路５６ｃと流路４３ａが接続され
る通路Ｓ６ｄがそれぞれ形成されている。

また、下栓体５７には、流路４３ｂが接続される通路５
ＬＣが形成されている。

なお、幹部５６ｂ、５７ｂに設けた周溝５６′ｂ＊５７
’　ｂに０リングを取付けるようにしてもよい。

次に上記合成装置を使用してＤＮＡを合成する操作を説
明する。

まず、反応器２０．２０にヌクレオシドを結杏５ させたサポート（シリカゲル等）を充填し、また試薬ビ
ン２３．２４、溶剤ビン２５．２６を取付部２３ａ〜２
６ａにセットする。そして、溶剤■でサポートを膨潤さ
せる。

このようにして準備操作が終了したら、脱トリチルを行
なう、この説トリチル工程（Ｉ）では、十人切換弁２１
の共通ボー）３０ｑをボート３０ａに切換えて試薬ビン
２４から脱保護剤／溶剤■溶洩を反応器２０．２０に送
り込む。所定量に達したら、ボート３０ｂに切換える。

すると、Ｎ２ガスが流路３２に残っている脱保護剤／溶
剤Ｉ熔液を反応器２０．２０に送り込む８次いで、給液
停止部３０「に切換える。この後、シェカー４６を動作
し、所定時間経過後、六方コック２９をＢＬＯＷにする
（第３図の点線状態）、そして、ボート３０ｂに切換え
て、Ｎ２ガスの圧力により反応器２０．２０から脱保護
剤／溶剤■熔液を流路４３ｂ、ボート４１ｃ、４１ｂ、
４１ｅ、４１ｆ。

流路４３ｃを通して廃液タンク４４．４４に排液する。

排液が終了したら、ボート３０ｃに切換え、７ ６ 六方コック２９をＦＥＥＤにする（第３図の実線状態）
。

次いで、溶剤ｉにより洗浄を行なう。この洗浄工程（Ｉ
Ｆ）で、十六方切換弁２１を、ボーＩ・３０ｃｍ”３０
ｄ→３０「の順に切換えて、溶剤ビン２５から溶剤Ｉを
流路３２に残さずに反応５２０゜２０送り込む、そして
、シェカー４６を所定時間動作後、六方コック２９をｎ
　Ｌ　ｏ　ｗにし、次いで十人切換弁２１をボー１−３
　（ｌ　ｄ→３０「に切換えて、溶剤ｉを排液し、その
完了後に六方コック２９をＦＥＥＤにする。

脱トリチル工程（夏）、洗浄工程（ＩＴ）は、必要によ
り複数回繰り返してもよい。

この後、溶剤■により洗浄を行なう、この洗浄工程（Ｉ
ｆｆ）では、十六方切換弁２１を、ボート３０ｅ→３０
ｆ→３０ｒの順に切換えて、溶剤ビン２６から溶剤■を
流路３２に残ずことなく反応器２０．２０に送り込む、
そして、シェカー４６を所定時間動作後、六方コック２
９をＲＬ　ＯＷにし、次いで十六方切換弁２１をボート
３０ｆ−”３０ｒ１日 に切換えて、溶剤■の排液完了後に六方コック２９をＦ
　ＥＥＤ　４コする。

この洗浄工、Ｔ’、’　（旧）も必要により複数回繰り
返してもよい。

このようにしてから、原料注入を行なう。この原料注入
工程（１ｖ）では、コック５８　（第７図参照）を開い
て、反応器２０，２Ｑの上部から下記の構造式に示ずモ
ノマー塩を溶剤■で’／’８　ＷＬ／た原料溶液を注入
する。

、記 １ ＤＭＴｒ・（Ｒ１）（ＩＢ〜０−Ｐ−０°Ｎ’Ｈ（Ｒ２
＞０−φＣｐ ここで、Ｒ１は保護基（ヘンジイル基など）、Ｒ２はア
ルキル基であり、またＢはアデニン（Ａ）、グアニン（
Ｇ）、シ１−シン（Ｃ）、チミン（Ｔ）等の核酸ｊＬ１
基である。

なお、モノマー塩の代わりにダイマー塩を使用してもよ
い。

次いで、原オ！１中の水分を減圧共沸脱水する。この脱
水工程（Ｖ）では、■方１ツク２９を仝閉にする。そし
て、−１六方切換弁２ノをボート３０　ａに切換えて、
真空ポンプ３５を動作させる。これにより、反応器２０
．２０内が減圧されて、原事１から溶剤■中に熔解した
水分がノＩ：沸脱水される。

脱水が終了したら、ボート３０）Ｉに１３ＴＩ換えてＮ
２ガスを充填する。この後、給液停止に１部３０ｒに切
換え、六方コック２９をＦＩ）：ＩＥＩ）にする。

この後、縮合する。この縮合工程（■）では、反応器２
，０　、２０の」二部から縮合剤／溶剤■熔液を注入し
、シェカー４６を動作し、またヒータ（図示せず）によ
り反応器２　（１、２０を加温する。

縮合反応終了後、シェカー４６、ヒータの動作を停止す
る。そして、六方コック２９をＢＬＯＷにし、十六方切
接弁２１を、ボー１−３０ｈ７−３Ｏｒに切換えてＴＩ
Ｉ液する。排液完了後に六方コック２９をＦＩＥＩ’：
ｒ）にする。

次いで、溶剤■で洗浄する。ごの洗浄工程（■）では、
十六方すＪ換弁２１を、ボー１−３０１−３０９ ｊ、−”３Ｏｒの順に切換えて行な。操作内容は洗浄工
程（ｆｆｌ）と同しである。

この洗浄工程（■）も必要により複数回繰り返してもよ
い。

次いで、キャンピングをする。このキャンピング工程、
（Ｖ＃）では、十六方切換弁２１を、ボート３０に−”
３　Ｑ　７！−３Ｏｒの順で切換えて、試薬ビン２３か
ら不活性化剤、不活性化助剤／溶剤■熔液を流路３２に
残ずこと反応器２０　、、２０に送り込む。次いで、シ
ェカー４６を所定時間動作後、六方コック２９をＢ　Ｌ
　ＯＷにし、十六方切換弁２１をボート３０ｅ−”３０
　ｒに切換えて排液する。

排液完了後に六方コック２．９ｆ、Ｆ　Ｅ　Ｅ　ｐにす
る。。

次いで、溶剤■で洗浄する。この洗浄工程（ＩＸ）では
、十六方切換弁２１を、ボー１−３０　ｒｎ−”３．　
Ｏｎ　−、：３　Ｑ　ｒの順に切換えて行な。操作内容
は洗浄工程（ＴＩＩ）と同じである。　、・ 次いで、溶剤Ｉで洗浄する。この洗浄工程（Ｘ）では、
十六方切換弁２１を、ボート３０　、ｏ　−”　３０Ｔ
）＝３Ｏｒの順に切換えて行な、操作内容は洗浄１ ０ 工程（Ｉｎ、）と同じである。　− なお、洗浄工程（■）、（Ｘ）は必要により複数回繰り
返してもよい。

」二連の工程（Ｔ）　、’　（ｎ）　、（、！Ｉ）　、
、（ＴＶ）　。

（■）　、（ｒＸ）　、（、Ｘ）　＆４必要により複数
回繰り返すが、この、とき六方ニドツク２９のみを操作
して行なうようにしてもよい。例えば、工程（■）を繰
り返す場合、ボート３０、ｃに合わせたままで、六方コ
ック２９を、Ｆ　Ｅ、Ｉ”、Ｄ−＋Ｂ　Ｌ　ＯＷ−＋Ｆ
　ＥＥＤ−ＢＴ、ＯＷｐ順で切換え操作する。これによ
り、操作回数を削減することが可能となる。

このように王、ｆ！ｉ！、、、、（Ｉ　）〜（Ｘ）を繰
り返すことにより、ヌクレオチド鎖を１１０次縮合する
。

本実施例では、第１図に示ず三方コック１２、や反応器
１６　、．１６のコックＬ６ａ、＋６ａを十六方切換弁
２１、六方コック２９で兼用しているため、弁操作回数
を減らずことができる。

例えば、溶剤■で洗浄する場合、第１図に示す装置では
、■双方切換弁１ｏのボートを１０ｇに切換える、■三
方コンク１２を閉−開−閉操作ず、２２ る、■ボートを１０ａに切換える、■三方コック１２を
閉−開−閉操作する、■六方コンク１５をＦＥＥＤ　→
ＢＬＯＷにする、■コック１６ａを閉−開−閉操作する
、■六方コンク１５をＢ■−ｏｗ→ＦＥＥＤにする。

これに対し、本実施例では、前述の如く、■十六方切換
・弁２１のボー１−を３０ｅ→３０ｆ→３０「の順に切
換える、■六方コンク２９をＦＥ’　Ｅ　Ｄ→ＢＬＯＷ
にする、■ボートを３０ｆ→３’Ｏｒに切換える、■六
方コック２９をＢＬＯＷ−ＦＥＥＤにする。

すなわち、本実施例では、弁操作回数を３回減らずこと
ができる。　′ 第９図は、十六方切換弁２１の他め実施例を宗している
。同・実施例では、回転部３１をスプリング５２の１ｌ
ｌｉ！　ｔＢｔ力に抗して同図に示す矢印Ｂ方向に押圧
し゛て、縦溝３４ｂをボート３０　ａ　〜’３　ｏ’ｐ
に合わ′什たときにのみ、これらボート３０ａ〜３０ｐ
が共通ボート３０Ｑと連通ずる。すなわち、回転部３１
を押圧している間゛、試薬、溶剤、Ｎ２ガスを反応器２
０．２０に供給することができる。

なお、第９図中５３は、回転部３１０回転を円滑にする
ベアリン・グーである。

第１０図しｌ六方コック２９の１（―わりに二連三方コ
ック５４を使用した場合を示している。この゛一連二三
方ツク５４では、ボー１□　５４　ａ　、　５４　ｂが
流路４３ｂ、４ａｂを介して反応器２０．２０の底部に
接続され、またボー１５４　ｃ’　、　５４　ｄが流路
４３Ｃ，，１３Ｇを介して廃液タンク４４．４４に接続
されている。同図の実線状態でばＦ　Ｆ、　Ｆ　Ｄ、点
線状態でｔｊ：Ｂ１、ＯＷになっている。

同実施例によれば、前述の実施例よりも更に弁操作回数
を減らすことができる。例えば、溶剤■で洗浄する場合
、■十六方切換弁２１のボートを３０ｅ→３Ｑｆ＝３’
Ｏｒの順で１切換える、■二連三方コック５４をＦ　Ｅ
　ｌ’：　Ｄ→Ｂ’＋、　ｏｗ−＋’Ｆ　ＩＥ　Ｅ　１
１にする。すなわち、弁操作回数を前述の実施例よりも
２回減らずことができ、第り図に示ず装置の場合とでは
５回減らすことができる。このため、合成操作時間を短
縮することができる。なお、こ３ の実施、例では、反応器２０　、２０内に液が半分位い
送り込まれと内圧がｌ　ｋｇ　／　ＣＴａとなり、液を
送り込むためのＮ２ガスの圧力とほぼ等しくなるので、
いちいち給液停止部３Ｏｒに切換えなくても、内圧によ
り給液が自動的に停止し、弁操作回数を更に減ら・ずこ
・とが可能となる。

上述の二連三方コック５４ば、第１１図ａ、ｂに示すよ
うに、本体６０と回転部６１とクリック機構部６・２と
から構成されている”。本体６０には前・述のボート５
４ａ〜５４″ｄが形成され、また回転部６．１の周面に
はこれらボート５４ａ〜５４”ｄを連通ずる溝６１ａ、
６１ｂが形成されている。

なお、前述の十六方切換弁２１．は、第１２図ａ。

ｂに示すよう゛に構成してもよい。この場合、弁本体３
０の端面中央部に共通ボー１〜３０ｑが形成されている
と共に、これを囲むように試薬、溶剤ボー４・３０ａ、
３０ｃ・・・が形成され、また弁本体３０の周面にガス
ボート３°Ｏ’ｂ、３．Ｏｄ・パ・が放射状に形成され
ている。回転部３１には、共通ボート３０ｑとボー）３
０ａ〜３０ｐとを連通ずる連通５ ４ 溝３１’ｃがその端面から周面にかけて形成されている
゛。

第１３図ば１−六方切換弁２１の代わりに２咽の六方切
換弁６３．６４を使用し′た場合を示している。

一方の六方切換弁６３には前述のボート３０　ａ〜３０
ｐのうち前半のボー＋−３ｏａ〜３０ｈが給液操作順に
配置され、また他方の六方切換弁６４には後半のボート
３０１〜３０ｐが同じく給液操作順に配置されている。

また、これら双方切−介６３．６４にはそれぞれ共通ボ
ート３０ｑが配置されている。

この実施例では、一方の六方切換弁６３の切換操作によ
り前述の構成（■）〜ＣＶｒ）を行なった後、他方の六
方切換弁６４の切換操作により工程（■）〜（Ｘ）を行
なう。

′このように、ボート３０ａ〜３０ｐを二つの六方切換
弁６３，６４に分けて配置することにより、各ボート３
０ａ”３０ｐ間の間隔を広げることができてシール性を
確保することが容易で、弁の゛信頼性を向上させること
ができる。

第ｉ４Ｉ！ｌ　ａ　ｔ　１）はこれら六方切換弁６’３
’、６４を６ 示している。基本的な構成は第１２図ａ、ｂに示す十六
方切換弁２１と同じであるが、ボー）３０ａ〜３０ｐ間
の間隔が広くなっている。

第１５図は六方コック２９の代わりに八方コツクロを使
用し・Ｎ２ガスでバブリングできるようにした場合を示
している。同図によると、八方コツクロ５のボート６５
ｇ、６５ｈには流路３４ｅがら分岐した分岐流路６６が
接続されていて、この分岐流路６６にはバブリングに必
要な量のＮ２ガスを流すオリフィス６７が設けられてい
る。なお、ボート６５ａ〜６５ｆは六方コック２９の場
合と同様にして反応器２０．２０廃液タンク４４．４４
に接続される。

この実施例によると、八方コツクロ５をＦＥＥＤにした
とき（実線状態）、オリフィス６７を通った少量のＮ２
ガスが反応器２０．２０の底部から吹き込まれてバブリ
ングが行なわれる。したがって、シェカー４６を省略す
ることができる。

なお、分岐流路６６にブツシュバルブを設けて、このブ
ツシュパルプを押圧している間バブリングするようにし
てもよい。１ 第１６図ば−に述の八方コツクロ５を示している。

同図によると、本体６８に上述のボー１−６５　ａ〜６
５ｈが放射状に配置されていて、その中心部に回転部６
９が回転可能に設けられている。そして、この回転部６
９の周面にボー１−６５　ａ〜６５ｈを互いに連通ずる
周溝６９ａ〜６９ｄが形成されている。

第１７図は前述の十六方切換弁２１の代わりに十三方切
換弁７０を使用した場合を示している。

この実施例では、前述のボート３０　ｃ、　、　３０　
ｄ　、　３０ｍ、３０ｎを省略している。この理由は、
塩トリチル工程で使用する脱保護剤と、キャッピング工
程で使用する不活性化剤、不活性助剤がそれぞれ溶剤１
と溶剤■に溶解するためである。すなわち、前述の実施
例では、脱１−リチル工程Ｈ）の後に、反応器２０．２
０内に残っている脱保護剤（脱トリチル剤）を除去する
ために溶剤１で洗浄を行なう洗浄工程（ＩＩ）を設けて
いるが、この洗浄工程（１１）のすぐ後に溶剤■で洗浄
を行なう洗浄工程（ＩＩＩ）を設置Ｊているので、洗浄
工程（ＩＩ）を省略しても洗浄工程（ＩＩＩ）で脱保護
剤を熔解除去することができる。ま７ た、キャッピング工程（■）の後に、反応器２０゜２０
内に残っている不活性化助剤を除去するために溶剤■で
洗浄を行なう洗浄工程（ＩＸ）を設けているが、この洗
浄工程（Ｉりのすぐ後に溶剤量で洗浄を行なう洗浄工程
（Ｘ）を設けているので、洗浄工程（ＩＫ）を省略して
も洗浄工程（Ｘ）で不活性化剤、不活性化助剤を溶解除
去することができる。

第１８図ａ、ｂは上述の十三方切換弁７０を示している
。基本的な構成は第１２図ａ、ｂに示す十人切換弁２１
と同じであるが、ボート３０ａ〜３０ｐ間の間隔がボー
ト３０ｃ　、３０ｄ　、３０ｍ、３Ｏｎを省略した分だ
け広くなっており、ボート３０ａ〜３０ｐのシール性を
確保することが容易で、弁の信頼性を向上させることが
できる。

上記実施例では、いずれも反応器２０を二本装備した場
合を示したが、これに限定されず、一本あるいは三本以
上装備してもよい０反応器２０を一本あるいは三本以上
装備した場合には、六方コック２９、八方コツクロ５の
構成が異なっ°ζくる。

また、原料をコック５８を開いて反応器２０に注９ ２日 人するようにした場合を示したが、例えば原料を溶剤で
溶解した原料溶液をビンに充填して、これをＮ２ガスの
圧力により反応器２０に送り込むようにしてもよい。

本発明の合成装置は上述のようにＩ）ＮＡを合成する場
合に限定されず、ＲＮＡ　（リボ核酸）の合成にも使用
できる。

以上説明したように本発明によれば、各試薬ビン、溶剤
ビンと反応器とを接続する流路を一個の操作ツマミを回
転操作することにより切換える切換弁の入口側の試薬、
溶剤ボートを給液操作順に配置して、操作ツマミを一回
転させたとき一つの縮合工程における給排液操作が完了
するように構成したので、弁操作が非常に簡単となり、
誤操作を少なくすることができる。

また、自動化に際しては、多数の電磁弁を使用しなくて
もすみ、例えばステッピングモータ、サーボモータを切
換弁に連結するだけでよく、その制御も簡単であり、自
動化への移行が容易である。

【図面の簡単な説明】

０ 第１図は従来の装置のフローシート、第２図は本発明の
一実施例を示す総体斜視図、第３図は同フローシート、
第４図は第３図のフローシートの９！部の拡大図、第５
図ａ、ｂは十六方切換弁２１の断面図、第６図ａ、ｂば
六方コック２９の断面図、第７図は反応器２０の断面図
、第８図は上栓体５６の断面図、第９図は十六方切換弁
２１の他の実施例を示す断面図、第１０図番才六方コッ
ク２９の代わりに二連三方コック５４を使用した他の実
施例を示すフローシート、第１１図ａは二連三方コック
５４の断面図、同図すは同平面図、第１２図ａは十六方
切換弁２１の他の実施例を示す断面図、同図すは同平面
図、第１３図は十六方切換弁２１の代わりに六方切換弁
を二個使用した他の実施例を示すフローシート、第１４
図ａは同実施例に使用する六方切換弁の断面図、同図す
は同平面図、第１５図はＮ２ガスでバブリングができる
ようにした他の実施例を示すフローシート、第１６図は
同実施例に使用する六方コックの断面図、第１７図は給
液操作を二つ省略した他の実施例に使用する十三方切換
弁の略解図、第１８図ａは同士三方切換弁の平面図、同
図すは同断面図である。 ２０・・・反応器 ２３．２４・・・試薬ビン ２５．２６・・・溶剤ビン ２１．６３，６４・・・切換弁 ３０ａ１３０Ｃ・・・試薬、溶剤ボー１−３０ｂ、３０
ｄ・・・ガスポート ３０「・・・給液停止部 特許出願人　日本ゼオン株式会社 手続補正書（自発） 昭和５８年１０月１３日 特許庁長官　若　杉　和　夫　殿 １、事件の表示　昭和５８年　特許願　第１８１６３７
号２、発明の名称 ポリヌクレオチド蓄Ｈ漬＆ ３、補正をする者 事件との関係　特許１１１願人 住所　東京都千代８１区丸の内２丁目６１１１号名称 一二二　日本ゼオン株式会社 ４、代理人 明細書の「橢許請求の範囲」及び「発明の詳細な説明ｊ
ｑ）欄８、補正の内容　別紙のとおり 補正の内容（特願昭５８−１８１６３７号）１、　特許
請求の範囲を下記の通〕補正する。 記 反応器と、ポリヌクレオチド合成反応に必要な試薬、溶
剤等が充填された試薬ビン、溶剤ビンと、入口側に該試
薬ビン、溶剤ビンと接続される複数の試薬、溶剤ボート
を有し、出口鯛に該反応器に接続される共通ボートを有
して、各試薬ビン、溶剤ビンと反応器とを接続する流路
を操作ツマミ全回転操作することにより切換える切換弁
と、不活性ガスの圧力により各試薬ビン、溶剤ビンから
試薬、溶剤等を反応器に送り込む給液手段とを具備し、
かつ前記試薬、溶剤ボートを給液操作順に配置して、前
記操作ツマミを一回転させたとき一つの縮合工程におけ
る給排液操作が完了するように構成してなることを特徴
とするポリヌクレオチド合成装置。 ２、　明細１１第５頁第６行目記載の「装置ツマミ」を
「操作ツマミ」と補正する。 ３　同第３０頁第９行乃至同貞第１０行目記載の「−個
の操作ツマミ」ヲ「操作ツマミ」と補正する。 特許出願人　日本ゼオン株式会社

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 反応器と、ポリヌクレオチド合成反応に必要な試薬、溶
   剤等が充填された試薬ビン、溶剤ビンと、入口側に該試
   薬ビン、溶剤ビンと接続される複数の試薬、溶剤ボート
   を有し、出口側に該反応器に接続される共１ｍボートを
   有して、各試薬ビン、溶剤ビンと反応器とを接続する流
   路を１間の操作ツマミを回転操作することにより切換え
   る切換弁と、不活性ガスの圧力により各試薬ビン、溶剤
   ビンから試薬、溶剤等を反応器に送り込む給液手段とを
   具備し、かつ前記試薬、溶剤ボートを給液操作順に配置
   して、前記操作ツマミを一回転させたとき一つの縮合工
   程における給排液操作が完了する３１、うに構成してな
   ることを特徴とするポリヌクレオチド合成装置。