JPS6053848A - フイブリノゲン定量用試薬 - Google Patents
フイブリノゲン定量用試薬Info
- Publication number
- JPS6053848A JPS6053848A JP16207883A JP16207883A JPS6053848A JP S6053848 A JPS6053848 A JP S6053848A JP 16207883 A JP16207883 A JP 16207883A JP 16207883 A JP16207883 A JP 16207883A JP S6053848 A JPS6053848 A JP S6053848A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reagent
- fibrinogen
- measurement
- salting out
- blood plasma
- Prior art date
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- Granted
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は血漿中のフィブリノダン量を塩析法により測定
するための定量用試薬に関する。
するための定量用試薬に関する。
血漿中のフィブリノデン量の増減は各種疾患と密接な関
係がある。量的に血漿フイブリノグンが高値を示す症例
として急性感染症、悪性腫瘍また心筋梗塞、脳血管障害
、動脈硬化などの循環器疾患およびネフローゼなど多岐
に亘り、低値を示すものとしては先天性の無フィブリノ
デン面症、低フィブリノケ゛ン血症および後天性のもの
として播種住血管内凝固症候群（ＤＩＣ） 、重症肝障
害などがある。従って血漿フィブリノダンの測定は各種
疾病の診断および予後の判定の指標として臨床上重要視
されてきている。
係がある。量的に血漿フイブリノグンが高値を示す症例
として急性感染症、悪性腫瘍また心筋梗塞、脳血管障害
、動脈硬化などの循環器疾患およびネフローゼなど多岐
に亘り、低値を示すものとしては先天性の無フィブリノ
デン面症、低フィブリノケ゛ン血症および後天性のもの
として播種住血管内凝固症候群（ＤＩＣ） 、重症肝障
害などがある。従って血漿フィブリノダンの測定は各種
疾病の診断および予後の判定の指標として臨床上重要視
されてきている。
血漿フィブリノダン欝の測定法としては１１重針法 ２
．チロシン法 ３．紫外部吸光法 ４免疫比濁法 ５．
−元免疫拡散法 ６．トロンビン時間法 ７゜塩析法な
ど種々の方法が用（ρられて（ハるが、日常検査として
多く行なわれているのは５．−元免疫拡散法と６．トロ
ンビン時間法である。これらは共通して検査のための一
検体当りの試薬が高価であること、また−元免疫拡散法
では測定結果が得られるまでに長時間を要し、トロンビ
ン時間法においては測定のために特殊な機器を要すると
いった不便さがある。
．チロシン法 ３．紫外部吸光法 ４免疫比濁法 ５．
−元免疫拡散法 ６．トロンビン時間法 ７゜塩析法な
ど種々の方法が用（ρられて（ハるが、日常検査として
多く行なわれているのは５．−元免疫拡散法と６．トロ
ンビン時間法である。これらは共通して検査のための一
検体当りの試薬が高価であること、また−元免疫拡散法
では測定結果が得られるまでに長時間を要し、トロンビ
ン時間法においては測定のために特殊な機器を要すると
いった不便さがある。
塩析法はこれら各種の方法のうちでも迅速かつ正確に測
定できるため日常検査として有利な方法として知られて
いるが、一定濃度の塩により析出したフィブリノグンの
濁度によりその敗をめるこの方法は、脂質、ビリルビン
、ヘモグロビンなどフィブリノケ°ン以夕Ｉの物質の干
渉を受けることおよび定１性において、特に低値（６０
ｍり／ｄｌ以下）領域では誤差が大きく、実質的には測
定不可（２） 能であるという欠点を有していた。しかし、干渉物質の
影響については界面活性剤の添加あるいはブランク試薬
の設定により、改善されることが判っているが、低値領
域における測定誤差の大きい点については依然として問
題を残していた。
定できるため日常検査として有利な方法として知られて
いるが、一定濃度の塩により析出したフィブリノグンの
濁度によりその敗をめるこの方法は、脂質、ビリルビン
、ヘモグロビンなどフィブリノケ°ン以夕Ｉの物質の干
渉を受けることおよび定１性において、特に低値（６０
ｍり／ｄｌ以下）領域では誤差が大きく、実質的には測
定不可（２） 能であるという欠点を有していた。しかし、干渉物質の
影響については界面活性剤の添加あるいはブランク試薬
の設定により、改善されることが判っているが、低値領
域における測定誤差の大きい点については依然として問
題を残していた。
本発明者は塩析法による定量性の欠点を解消すべく鋭意
研究検討した結果、塩析用試薬にカゼインを添加するこ
とによりいふなる濃度領域においても他物質の干渉を排
除して、フィブリノダンを正確に定量できることを見出
し、本発明を完成した。
研究検討した結果、塩析用試薬にカゼインを添加するこ
とによりいふなる濃度領域においても他物質の干渉を排
除して、フィブリノダンを正確に定量できることを見出
し、本発明を完成した。
塩析法に用いられる塩としては硫酸アンモニウム（ＮＨ
４）２Ｓ０４．硫酸ナトリウムＮａ２ＳＯ４ｒ亜硫酸ナ
トリウムＮａ ２ Ｓｏ ３など周知のものが使われ、
界面活性剤についても同様である。通常は、これらに緩
衝液を加えて試薬を構成する。また、試薬中には、本発
明の目的を損なわない範囲で他の添加剤が加えられてい
てもより。本発明に使用されるカゼイン濃度は試薬総量
に対し、０．０００２〜０．００５重量係の範囲で用い
られるが、好ましくは０．０００４〜０．００１ ｇＩ
−−％の濃度範囲に力、ピインを添加する。
４）２Ｓ０４．硫酸ナトリウムＮａ２ＳＯ４ｒ亜硫酸ナ
トリウムＮａ ２ Ｓｏ ３など周知のものが使われ、
界面活性剤についても同様である。通常は、これらに緩
衝液を加えて試薬を構成する。また、試薬中には、本発
明の目的を損なわない範囲で他の添加剤が加えられてい
てもより。本発明に使用されるカゼイン濃度は試薬総量
に対し、０．０００２〜０．００５重量係の範囲で用い
られるが、好ましくは０．０００４〜０．００１ ｇＩ
−−％の濃度範囲に力、ピインを添加する。
次に実施例により本発明全説明する。
実施例１．検団純の曲線性Ｊ？よび同時再現性（１）塩
析用試薬 （２）測定方法 （２） −１検量線の直線性 塩析用試薬３ ｍｌにフィゾリノケ゛ン惜の異なる血漿
を添加し、３７℃３０分間インキュベートＬ、 戸：各
検体の５５０ ｎｍにおける吸光度を測定する。
析用試薬 （２）測定方法 （２） −１検量線の直線性 塩析用試薬３ ｍｌにフィゾリノケ゛ン惜の異なる血漿
を添加し、３７℃３０分間インキュベートＬ、 戸：各
検体の５５０ ｎｍにおける吸光度を測定する。
（２）−２同時再現性
（２）−１倹騙線の曲線性における測定方法を用いて市
営面漿５０ｔｒｌおよび１００μｅを検体としてそれぞ
れ１０回繰り返し測定する。
営面漿５０ｔｒｌおよび１００μｅを検体としてそれぞ
れ１０回繰り返し測定する。
（３）測定成績
（３） −１検−Ｉ・線のｉ＋ｉ線性
力性カゼイン添加濃度０係線１）、
０．０００２係（曲線２）および０．０００５係（曲線
３〕の各検量線を図１に示した。
３〕の各検量線を図１に示した。
（３） −２同時再現性
（２）−２の結果を下記表１に示した。
ｉ：測定値の単純平均、ＳＤ：標準偏差、Ｃｖ：変動係
数 Ｃ５） 実施例２ 本発明方法と他法との相関 （１）トロンビン時間法との相関 実施例１による塩析用試薬および測定法とトロンビン時
間法との相関を図２に示す。
数 Ｃ５） 実施例２ 本発明方法と他法との相関 （１）トロンビン時間法との相関 実施例１による塩析用試薬および測定法とトロンビン時
間法との相関を図２に示す。
（２）−元免疫拡散法との相関
実施例１による塩析用試薬および測定法と一元免疫拡散
法との相関を図３に示す。
法との相関を図３に示す。
以上実施例で明らかなように、検量線の直線性をみると
カゼイン無添加の場合には、特に低値領域においてｒｉ
、１性に大きなマイナス切片があるために低値での誤差
が大きい。これに対しカゼインをＯ，０Ｏ０５％添加１
１．な場合、そ′！１ぞれのフィブリノダン量に応じた
点を結ぶ検−線はほとんど直線となり、未知量の面漿フ
ィブリノｒンの定量において、特に低値領域の測定をも
可能とすることができた。
カゼイン無添加の場合には、特に低値領域においてｒｉ
、１性に大きなマイナス切片があるために低値での誤差
が大きい。これに対しカゼインをＯ，０Ｏ０５％添加１
１．な場合、そ′！１ぞれのフィブリノダン量に応じた
点を結ぶ検−線はほとんど直線となり、未知量の面漿フ
ィブリノｒンの定量において、特に低値領域の測定をも
可能とすることができた。
検査薬の測定精度の指標としてめられる同時再現性は、
検体量として正常血漿５０μｌを添加し１０回繰り返し
た場合のＣｖは２．５％、また正常血漿１００μｌで実
施した場合の結果はＣＶｏ、７％と非（６） 常に良好な結果が得られた。
検体量として正常血漿５０μｌを添加し１０回繰り返し
た場合のＣｖは２．５％、また正常血漿１００μｌで実
施した場合の結果はＣＶｏ、７％と非（６） 常に良好な結果が得られた。
更に測測定方法と本発明方法とによる同一検体の相関性
についてはトロンビン時間法および一元免疫拡散法との
間の相関係数はそれぞれｒ＝０．９５２（ｎ＝１．９）
およびｒ＝０．９７１と高い相関を示した。
についてはトロンビン時間法および一元免疫拡散法との
間の相関係数はそれぞれｒ＝０．９５２（ｎ＝１．９）
およびｒ＝０．９７１と高い相関を示した。
以上塩析法によるフィブリノダンの定量においてカゼイ
ンを添加することにより、従来本法による最大の欠点と
なっていた低濃度検体の定叶測定を可能とし、日常検査
として行われる臨床検査において試薬価格の面で経済性
を高めると共に特殊な機器を必要としないためにどこで
も実施でき、更には測定結果を得るまでの時間的問題を
も解消した方法である。
ンを添加することにより、従来本法による最大の欠点と
なっていた低濃度検体の定叶測定を可能とし、日常検査
として行われる臨床検査において試薬価格の面で経済性
を高めると共に特殊な機器を必要としないためにどこで
も実施でき、更には測定結果を得るまでの時間的問題を
も解消した方法である。
図１は、カゼイン添加（本発明）及び無添加（本発明外
）の試薬を用いたフィブリノダン定量の検量線を示した
図である。 図２及び図３は、本発明方法とトロンビン時間法（図２
）及び−元免疫拡散法（図３）との同一検体の定量値相
関を示した図である。 （７） 第１図 フイフ゛リプン量 （ｍψろｌ）
）の試薬を用いたフィブリノダン定量の検量線を示した
図である。 図２及び図３は、本発明方法とトロンビン時間法（図２
）及び−元免疫拡散法（図３）との同一検体の定量値相
関を示した図である。 （７） 第１図 フイフ゛リプン量 （ｍψろｌ）
Claims (1)
- 塩析法によるフィブリノダン定量用試薬において、カゼ
インを添加してなることを特徴とするフィブリノダン定
量用試薬
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16207883A JPS6053848A (ja) | 1983-09-05 | 1983-09-05 | フイブリノゲン定量用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16207883A JPS6053848A (ja) | 1983-09-05 | 1983-09-05 | フイブリノゲン定量用試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6053848A true JPS6053848A (ja) | 1985-03-27 |
| JPH0126026B2 JPH0126026B2 (ja) | 1989-05-22 |
Family
ID=15747662
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP16207883A Granted JPS6053848A (ja) | 1983-09-05 | 1983-09-05 | フイブリノゲン定量用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6053848A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5292664A (en) * | 1991-10-14 | 1994-03-08 | Behringwerke Aktiengesellschaft | Functional test and reagent for determining fibrinogen |
| EP0699909A2 (en) | 1994-09-02 | 1996-03-06 | Nippon Shoji Kaisha, Ltd. | Method for determining fibrinogen and reagent for determination thereof |
-
1983
- 1983-09-05 JP JP16207883A patent/JPS6053848A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5292664A (en) * | 1991-10-14 | 1994-03-08 | Behringwerke Aktiengesellschaft | Functional test and reagent for determining fibrinogen |
| EP0699909A2 (en) | 1994-09-02 | 1996-03-06 | Nippon Shoji Kaisha, Ltd. | Method for determining fibrinogen and reagent for determination thereof |
| US5851836A (en) * | 1994-09-02 | 1998-12-22 | Nippon Shoji Kaisha Ltd. | Method for determining fibrinogen and reagent for determination thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0126026B2 (ja) | 1989-05-22 |
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