JPS6052766A - グルコ−スの定量法 - Google Patents
グルコ−スの定量法Info
- Publication number
- JPS6052766A JPS6052766A JP15976183A JP15976183A JPS6052766A JP S6052766 A JPS6052766 A JP S6052766A JP 15976183 A JP15976183 A JP 15976183A JP 15976183 A JP15976183 A JP 15976183A JP S6052766 A JPS6052766 A JP S6052766A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glucose
- oxygen
- oxidase
- mass spectrometer
- measurement
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は四重種型質量分析計を用いるグルコースの定量
法に関する。詳しくは、定量せんとするグルコースのグ
ルコース酸化酵素を、四重極質量分析計に連なり先端が
ガス透過性膜で覆われ几ガス導入用ゾローグの隔膜上に
取りつけた測定ゾロープを用いるグルコースの定量法に
関する。
法に関する。詳しくは、定量せんとするグルコースのグ
ルコース酸化酵素を、四重極質量分析計に連なり先端が
ガス透過性膜で覆われ几ガス導入用ゾローグの隔膜上に
取りつけた測定ゾロープを用いるグルコースの定量法に
関する。
グルコースの定量法としてはグルコースの酸化酵素を用
いて消費される酸素の量をマノメトリ〜で測定するワー
ルブルグ検圧法、あるいは溶存酸素電極で測定する電極
法が知られている。また最近では固定化したし一アミノ
酸の酸化酵素を溶存酸素電極の検知面上に取りつけて測
定する酸素電極法が用いられている。
いて消費される酸素の量をマノメトリ〜で測定するワー
ルブルグ検圧法、あるいは溶存酸素電極で測定する電極
法が知られている。また最近では固定化したし一アミノ
酸の酸化酵素を溶存酸素電極の検知面上に取りつけて測
定する酸素電極法が用いられている。
これらは正確で優れた方法であるが、前者では酸素の連
続使用が困難なため高価な酵素を測定のたびに使用しな
ければならず、経済的でない上、測定の手間と時間を多
く要する。また酵素を固定化して連続的に使用する後者
の方法では酸化酵素反応によって消費する酸素の測定器
の応答性に制約があり、従ってグルコースの測定速度も
限られたものであった・ 本発明者社上記した実情に鑑み簡便、正確かつ迅速なグ
ルコースの定量法について研究した結果、グルコースの
酸化酵素を四重極質量分析計に連なり先端がガス透過性
膜で覆われたガヌ導入用ゾｑ−プの隔膜上に取りつけた
測定ゾローブを空気通気条件下でグルコースを含有する
被験液に接触せしめ、該被験液に酸素を含む気体を導入
し、該グルコースの濃度と該測定ロープ近傍で消費され
る酸素に対応する四重極型質量分析計の出力電流の減少
値を測定することによって、従来より迅速で、かつ正確
、低コストな測定をし得ることを発見し、本発明を完成
するに至った。
続使用が困難なため高価な酵素を測定のたびに使用しな
ければならず、経済的でない上、測定の手間と時間を多
く要する。また酵素を固定化して連続的に使用する後者
の方法では酸化酵素反応によって消費する酸素の測定器
の応答性に制約があり、従ってグルコースの測定速度も
限られたものであった・ 本発明者社上記した実情に鑑み簡便、正確かつ迅速なグ
ルコースの定量法について研究した結果、グルコースの
酸化酵素を四重極質量分析計に連なり先端がガス透過性
膜で覆われたガヌ導入用ゾｑ−プの隔膜上に取りつけた
測定ゾローブを空気通気条件下でグルコースを含有する
被験液に接触せしめ、該被験液に酸素を含む気体を導入
し、該グルコースの濃度と該測定ロープ近傍で消費され
る酸素に対応する四重極型質量分析計の出力電流の減少
値を測定することによって、従来より迅速で、かつ正確
、低コストな測定をし得ることを発見し、本発明を完成
するに至った。
グルコースの酸化酵素はグルコース全酵素によって酸化
して、一方四重極型質量分析計は、近年簡便かつ安価な
質量分析計として実験用のほかに現場用のガスセンサと
しても着目され、製鉄工業（炉のガスモニター）、医療
（呼吸モニター）など種々の分野で利用されている。四
重極型質量分析計は、分子ｆｆ１３００程度（理論的に
は６００ ）までのガスの瞬時迅速測定に用いられる。
して、一方四重極型質量分析計は、近年簡便かつ安価な
質量分析計として実験用のほかに現場用のガスセンサと
しても着目され、製鉄工業（炉のガスモニター）、医療
（呼吸モニター）など種々の分野で利用されている。四
重極型質量分析計は、分子ｆｆ１３００程度（理論的に
は６００ ）までのガスの瞬時迅速測定に用いられる。
本発明では四重極部質量分析計の持つガスの迅速測定性
を利用し、グルコースの酸化酵素によって生じる酵素の
消費による出力電流の変化を測定して、グルコースのａ
度を測定するものである。
を利用し、グルコースの酸化酵素によって生じる酵素の
消費による出力電流の変化を測定して、グルコースのａ
度を測定するものである。
本発明による効果としては
（１）選択性が良く、高精度で、かつ安価に測定ができ
る。
る。
（２）従来法の測定所要時間は１分〜数分であるのに対
して本発明によるそれは数十秒以下と極めて迅速な測定
ができるので、莫大な試料数を短時間の間に処理するこ
とが可能になシ、微生物のスクリーニング作業などの大
幅な効率化が進められる。
して本発明によるそれは数十秒以下と極めて迅速な測定
ができるので、莫大な試料数を短時間の間に処理するこ
とが可能になシ、微生物のスクリーニング作業などの大
幅な効率化が進められる。
本発明で使用する酵素には、アスペルギルスニガーやバ
チルスアマガナキエンス由来の市販のグルコースの酸化
酵素、要はグルコース全酵素により酸化する酵素であれ
ば、いずれも本発明で用いることができる。
チルスアマガナキエンス由来の市販のグルコースの酸化
酵素、要はグルコース全酵素により酸化する酵素であれ
ば、いずれも本発明で用いることができる。
本発明に使用する測定用プローブは第１図に示すように
ステンレスチューブの先端に細孔を有する膜の支持体（
５）（焼結金属、パンチング・メタルなど）ｙｋ取付け
、テフロン、シリコーンなどのガス透過性を有する隔膜
（１）でおおったものでグルコースの酸化酵素を水に溶
解したもの（２）を、ミリポア・フィルター濾紙片、ナ
イロン・メツシュ等の担体（３）に塗布し、これを例え
ばセロファン膜等のような酵素を透過しない微細孔を有
する膜（４）で覆って８１図の如く隔膜（１〕上に取り
付けることによって容易に作成することができる。また
上記の酵素１ｋ例えばコラ−ダンまたはアクリルアミド
・ｒル等で固定化した固定化酵素を用いても同様に作成
することができる。
ステンレスチューブの先端に細孔を有する膜の支持体（
５）（焼結金属、パンチング・メタルなど）ｙｋ取付け
、テフロン、シリコーンなどのガス透過性を有する隔膜
（１）でおおったものでグルコースの酸化酵素を水に溶
解したもの（２）を、ミリポア・フィルター濾紙片、ナ
イロン・メツシュ等の担体（３）に塗布し、これを例え
ばセロファン膜等のような酵素を透過しない微細孔を有
する膜（４）で覆って８１図の如く隔膜（１〕上に取り
付けることによって容易に作成することができる。また
上記の酵素１ｋ例えばコラ−ダンまたはアクリルアミド
・ｒル等で固定化した固定化酵素を用いても同様に作成
することができる。
ここに酵素の保持層（２）を掩うための微細孔を有する
薄膜（４）としては１本発明で用いる酵素を通過せず、
酸素を自由に通過させる薄膜（４）であれば何でもよく
、例えばセロファン、動物性半透膜等の透析膜等の上記
の条件を満足するものであればすべて使用することがで
きる。尚固定化酵素膜を用いた場合は上記の薄膜（４）
は不要である。
薄膜（４）としては１本発明で用いる酵素を通過せず、
酸素を自由に通過させる薄膜（４）であれば何でもよく
、例えばセロファン、動物性半透膜等の透析膜等の上記
の条件を満足するものであればすべて使用することがで
きる。尚固定化酵素膜を用いた場合は上記の薄膜（４）
は不要である。
第１図に於て、（１）は測定プローブの隔膜（シリコー
ン膜）、（２）は酵素保持層、（３）は担体、（４）は
透析膜（セロファン膜）、（５）は細孔を有する支持体
、（６）は測定７’ｏ−ゾ本体（ステンレスチューブ）
、（７）は四重極型質量分析針へガスを移送する導管（
飼えば、ステンレスチー−ブ）を示す。
ン膜）、（２）は酵素保持層、（３）は担体、（４）は
透析膜（セロファン膜）、（５）は細孔を有する支持体
、（６）は測定７’ｏ−ゾ本体（ステンレスチューブ）
、（７）は四重極型質量分析針へガスを移送する導管（
飼えば、ステンレスチー−ブ）を示す。
第２図に示す定量システムのセットは本発明の実施態様
の１つである。第２図の（７）は測定グローブ、（９）
は７０−セル、 （８）、（８’）はゴム・やッキング
、（１０）は空気吹込口、（１１）はバッファー液注入
口、（１２）はサンプル注入口、（１３）は四重極型質
量分析計、（１４）はレコーダー、（１５）は導管（ス
テンレスチー−ブ）を夫々示す。この第２図のシステム
に従って本発明の測定法を以下に説明する。
の１つである。第２図の（７）は測定グローブ、（９）
は７０−セル、 （８）、（８’）はゴム・やッキング
、（１０）は空気吹込口、（１１）はバッファー液注入
口、（１２）はサンプル注入口、（１３）は四重極型質
量分析計、（１４）はレコーダー、（１５）は導管（ス
テンレスチー−ブ）を夫々示す。この第２図のシステム
に従って本発明の測定法を以下に説明する。
まず最初にバッファー注入口（１１）から一定の流量で
、吹込口（１ｏ）から酸素を含有する気体を吹込みなが
らフローセル（９）内に流踵四重極型質景分析８１の電
流出力をレコーダー（１４）に記録する。サンプルを注
入口（１２）から注入時間５〜３０秒間で１０〜３０秒
間隔を置いて順次注入する。
、吹込口（１ｏ）から酸素を含有する気体を吹込みなが
らフローセル（９）内に流踵四重極型質景分析８１の電
流出力をレコーダー（１４）に記録する。サンプルを注
入口（１２）から注入時間５〜３０秒間で１０〜３０秒
間隔を置いて順次注入する。
このサンプル液はバッファー液で適当に希釈され７ｏ−
セル（９）内に達する。７０−セル（９）内ではサンプ
ル中のグルコースがグルコース酸化酵素により酸化され
酸素が消費される。この酸素濃度の変化は隔膜（１）ｖ
ｉ−通って四重極型質量分析計の酸素に対応する質量数
（３２など）の電流出力を減少させ、レコーダー（１４
）に記録される。
セル（９）内に達する。７０−セル（９）内ではサンプ
ル中のグルコースがグルコース酸化酵素により酸化され
酸素が消費される。この酸素濃度の変化は隔膜（１）ｖ
ｉ−通って四重極型質量分析計の酸素に対応する質量数
（３２など）の電流出力を減少させ、レコーダー（１４
）に記録される。
該電流出力の減少１直とグルコースの濃度Ｃの間には良
好な直紡性が認められるのでこの関係を用いて被験液の
グルコースの濃度をめることができる。
好な直紡性が認められるのでこの関係を用いて被験液の
グルコースの濃度をめることができる。
測定時の条件については、酸化酵素の種類により異なる
が、概ね測定の、ＩＩは４〜７、温度は一２０〜４０℃
の範囲が良く、サンプルと測定プローブとの接触時間は
５〜３０秒間で充分であり、通常２０秒でほぼ飽和１直
に達する。基質の測定ａ度範囲はＯ〜１０ Ｍであり、
広い範囲の測定が可能で、該電流出力の減少匝と濃度Ｃ
の直綴性は非常に良好である。
が、概ね測定の、ＩＩは４〜７、温度は一２０〜４０℃
の範囲が良く、サンプルと測定プローブとの接触時間は
５〜３０秒間で充分であり、通常２０秒でほぼ飽和１直
に達する。基質の測定ａ度範囲はＯ〜１０ Ｍであり、
広い範囲の測定が可能で、該電流出力の減少匝と濃度Ｃ
の直綴性は非常に良好である。
酸素を含有する気体とは空気、酸素ガス及び両者の混合
気体等がある。
気体等がある。
使用するバッファー液としては、クエン酸、フマル酸、
コハク酸等の有機酸バッファー、又はピリジン−塩酸バ
ッファーが用いられる。特にクルラムフェニコール０．
１１／ｉｔ、ホワ酸ソーダ（Ｎａ２Ｂ４０７・１０Ｈ２
０）と酢酸（それぞれ２０Ｊｉ’＃）＝に含有したホウ
酸・酢酸バッファーは望ましいものである。
コハク酸等の有機酸バッファー、又はピリジン−塩酸バ
ッファーが用いられる。特にクルラムフェニコール０．
１１／ｉｔ、ホワ酸ソーダ（Ｎａ２Ｂ４０７・１０Ｈ２
０）と酢酸（それぞれ２０Ｊｉ’＃）＝に含有したホウ
酸・酢酸バッファーは望ましいものである。
第２図では空気通気条件にするため酸素を含有する気体
を用いているが、別にこれに限定されるものではなく、
要は溶存酸素が共存していれば良いのであって、予め溶
存酸素を飽和させた／Ｊツファー液を用いても良い。以
上の条件で使用した場合、連続使用で１力月以上活性が
持続される。アスペルギルスニガー由来の酵素を用いて
ｐＨ６，０で３０℃の温度で測定して見たところ、次の
第１表に示すように、グルコース’ｅ１００％とした場
合、１％以上の感度を示すものは見当らない。
を用いているが、別にこれに限定されるものではなく、
要は溶存酸素が共存していれば良いのであって、予め溶
存酸素を飽和させた／Ｊツファー液を用いても良い。以
上の条件で使用した場合、連続使用で１力月以上活性が
持続される。アスペルギルスニガー由来の酵素を用いて
ｐＨ６，０で３０℃の温度で測定して見たところ、次の
第１表に示すように、グルコース’ｅ１００％とした場
合、１％以上の感度を示すものは見当らない。
第４表 グルコース・センサーの選択性以上のように本
発明方法はグルコースに対する選択性が良く、かつ高精
度でグルコースの濃度が測定できる。又従来法に比較し
てその測定１時間が数十分から数十秒以下に短縮するこ
とができるので、微生物のスクリーニング作業などの大
幅な効率化が進められる。しかも使用する測定機器も比
較的安価である等の点で優れた方法である。従って従来
より迅速でかつ簡便で正確に、グルコース？定量する方
法を提供するものである。
発明方法はグルコースに対する選択性が良く、かつ高精
度でグルコースの濃度が測定できる。又従来法に比較し
てその測定１時間が数十分から数十秒以下に短縮するこ
とができるので、微生物のスクリーニング作業などの大
幅な効率化が進められる。しかも使用する測定機器も比
較的安価である等の点で優れた方法である。従って従来
より迅速でかつ簡便で正確に、グルコース？定量する方
法を提供するものである。
実施列中組成を示すチは特記なき限り１１％を示す。
実施例１
アスペルギルスニガー由来のグルコースオキシダーゼ（
ベーリンガー・マイハイム社製グレードＩｆ ） ２９
’ｔ−少量の水に溶かしペースト状とし、径１０ｍｍの
ナイロン・メツシュに塗りっけ、これ？セロファン膜（
４）を用いて、第１図のように四重種型質量分析計に連
らなり、先端がガス透過性膜（シリコーン膜）（Ｅ５０
３６型、ラジオメーター社、デンマーク）でおおわれた
ガス導入用プローブのシリコーン膜（１）上に取９つけ
た。
ベーリンガー・マイハイム社製グレードＩｆ ） ２９
’ｔ−少量の水に溶かしペースト状とし、径１０ｍｍの
ナイロン・メツシュに塗りっけ、これ？セロファン膜（
４）を用いて、第１図のように四重種型質量分析計に連
らなり、先端がガス透過性膜（シリコーン膜）（Ｅ５０
３６型、ラジオメーター社、デンマーク）でおおわれた
ガス導入用プローブのシリコーン膜（１）上に取９つけ
た。
この測定プローブを用いて、第２図に示すフローセル（
９’）Ｃ容ＭＯ，５ｍ１）にゴム・パッキング（８、８
’ ） ｔ−介して挿入し、第２図のような測定システ
ムを組立てた。
９’）Ｃ容ＭＯ，５ｍ１）にゴム・パッキング（８、８
’ ） ｔ−介して挿入し、第２図のような測定システ
ムを組立てた。
バッファー液としては、ｐＨ６，０、ホワ酸−酢酸パッ
ファ（２０，９／ｊｌ’のＮａ２Ｂ４Ｏ７・１０Ｈ２０
及び酢酸を含む）′を第２図の（１１）から５ ｍｌ
／ ｍｌｎの流量で流入させ、（］０）から空気を１．
θノ／ ｍｉｎの流量で吹込んでフローセル（９）内を
通し、測定プローブ（７）は、そこでの酸素の消費量を
測定するためステンレスチューブ（１５）ｅ介して四重
種型質量分析計（１３）、さらには記録計（１４）に接
続した。測定中、フローセル（９）内の温度は３０℃に
保った。サンプルは％８Ｘ１０−３Ｍのグルコース水溶
液及びその希釈液を順次１ｄ／ｍ１ｎの速度で、注入時
間１０秒で（１２）から注入した。このサンプルは、バ
ッファーに！り希釈され、フローセル（９）Ｋ流入する
と同時に、四重極型質量分析創（１３）は指示をしはじ
め、２０秒後には出力電流の減少が飽和レベル近傍に達
し、第３図のようなピークが記録された。第３図中の各
ピークの高さとグルコース濃度の間には第４図の関係が
見られ、濃度０−１０””Ｍの間で非常に良好な直線性
を得ｆＣ。
ファ（２０，９／ｊｌ’のＮａ２Ｂ４Ｏ７・１０Ｈ２０
及び酢酸を含む）′を第２図の（１１）から５ ｍｌ
／ ｍｌｎの流量で流入させ、（］０）から空気を１．
θノ／ ｍｉｎの流量で吹込んでフローセル（９）内を
通し、測定プローブ（７）は、そこでの酸素の消費量を
測定するためステンレスチューブ（１５）ｅ介して四重
種型質量分析計（１３）、さらには記録計（１４）に接
続した。測定中、フローセル（９）内の温度は３０℃に
保った。サンプルは％８Ｘ１０−３Ｍのグルコース水溶
液及びその希釈液を順次１ｄ／ｍ１ｎの速度で、注入時
間１０秒で（１２）から注入した。このサンプルは、バ
ッファーに！り希釈され、フローセル（９）Ｋ流入する
と同時に、四重極型質量分析創（１３）は指示をしはじ
め、２０秒後には出力電流の減少が飽和レベル近傍に達
し、第３図のようなピークが記録された。第３図中の各
ピークの高さとグルコース濃度の間には第４図の関係が
見られ、濃度０−１０””Ｍの間で非常に良好な直線性
を得ｆＣ。
一方、ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムＡＴ
ＣＣ１３８６９ｆｔ第２表の培地を用いて３０℃で通気
攪拌培養を行なった。
ＣＣ１３８６９ｆｔ第２表の培地を用いて３０℃で通気
攪拌培養を行なった。
第２表 培地組成（ｐｉ（７，０）
経時の培養液＋ｔ−２０倍希釈しサンプルＡ、Ｂ。
Ｃ，Ｄを調製した。
これらのサンプル′Ｉｔ第２図のシステムに従い、ピー
ク値を読み取り標準濃匪液で作った校正直線からグルコ
ースの濃度をめた。その結果は、第３表に示す如くであ
り、各サンゾルについて従来の酵素電極法、又はワール
ブルグ検圧法で測定した直と良く一致しでいた。
ク値を読み取り標準濃匪液で作った校正直線からグルコ
ースの濃度をめた。その結果は、第３表に示す如くであ
り、各サンゾルについて従来の酵素電極法、又はワール
ブルグ検圧法で測定した直と良く一致しでいた。
第３表 グルコースの分析結果１
また、各々の方法についての測定に要する時間は本発明
の方法が１２０本／時間であるのに対し、酵素電極法は
４０本／時間、ワールプルグ検圧法では平均１０本以下
／時間でオ、：）た。
の方法が１２０本／時間であるのに対し、酵素電極法は
４０本／時間、ワールプルグ検圧法では平均１０本以下
／時間でオ、：）た。
第１図は本発明の方法に用いる四重靴型質量分析計に連
らな９、先端がガス透過性膜でおおわれたガス導入用ゾ
ロープの隔膜上に酵素？取り付けた測定デａ−プの構造
説明図、図中（１）シリコーン膜又はテフロン膜、（２
）酵素保持層、（３）担体、（４）透析膜、（５）細孔
を有する膜の支持体、（６）測定グローブ本体（ステン
レス）、（７）四重極型質蓋分析計にガスを移送する導
管を示す。 第２図は本発明の方法に使用する定量システムセットの
一轢様を示す。図中、（７）測定用プローブ、（８）
、 （８’ ）コ９ムノ母ツキング、（９）フローセル
、（１０）ｆｆ累を含有する気体吹込口、（１１）−々
ツファー液注入口、（１２）サンプル注入口、（１３）
四重靴型質量分析計、（１４）レコーダー。 第３図は実施例１のグルコース水溶液及びその希釈液の
注入時間１０秒、洗滌時間２０秒とした時の四重靴型質
量分析計の電流出力を示すグラフ、縦軸は電流出力の減
少呟（Ｘｌ０−９Ａ ） （Ａ ）、横軸は時間（分）
を示す。 第４図は第３図中のピークの高さくＡ）と、グルコース
液濃度との関係を示すグラフ。縦軸は出力電流の減少ｆ
ＩＫ （Ｘｌ０−９Ａ ）、横軸はグルコース液度（Ｘ
ｌ０−５Ｍ ） ｆｆｉ示す。 特許出願人味の累株式会社
らな９、先端がガス透過性膜でおおわれたガス導入用ゾ
ロープの隔膜上に酵素？取り付けた測定デａ−プの構造
説明図、図中（１）シリコーン膜又はテフロン膜、（２
）酵素保持層、（３）担体、（４）透析膜、（５）細孔
を有する膜の支持体、（６）測定グローブ本体（ステン
レス）、（７）四重極型質蓋分析計にガスを移送する導
管を示す。 第２図は本発明の方法に使用する定量システムセットの
一轢様を示す。図中、（７）測定用プローブ、（８）
、 （８’ ）コ９ムノ母ツキング、（９）フローセル
、（１０）ｆｆ累を含有する気体吹込口、（１１）−々
ツファー液注入口、（１２）サンプル注入口、（１３）
四重靴型質量分析計、（１４）レコーダー。 第３図は実施例１のグルコース水溶液及びその希釈液の
注入時間１０秒、洗滌時間２０秒とした時の四重靴型質
量分析計の電流出力を示すグラフ、縦軸は電流出力の減
少呟（Ｘｌ０−９Ａ ） （Ａ ）、横軸は時間（分）
を示す。 第４図は第３図中のピークの高さくＡ）と、グルコース
液濃度との関係を示すグラフ。縦軸は出力電流の減少ｆ
ＩＫ （Ｘｌ０−９Ａ ）、横軸はグルコース液度（Ｘ
ｌ０−５Ｍ ） ｆｆｉ示す。 特許出願人味の累株式会社
Claims (1)
- 四重種型質量分析計に連なり、先端がガス透過性膜で覆
われたガス導入用グローブの隔膜上に、グルコース酸化
酵素を取りつけた測定ゾロープとグルコースを含有する
被験液とを接触せしめ、該被験液に酸素を含む気体を導
入し、グルコース濃度と該測定ゾロープ近傍で消費され
る酸素に対応する四重極型質量計の出力電流の減少値と
の間の比例関係を利用して該グルコースの濃度をめるこ
とからなるグルコースの定量法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15976183A JPS6052766A (ja) | 1983-08-31 | 1983-08-31 | グルコ−スの定量法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15976183A JPS6052766A (ja) | 1983-08-31 | 1983-08-31 | グルコ−スの定量法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6052766A true JPS6052766A (ja) | 1985-03-26 |
Family
ID=15700684
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15976183A Pending JPS6052766A (ja) | 1983-08-31 | 1983-08-31 | グルコ−スの定量法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6052766A (ja) |
-
1983
- 1983-08-31 JP JP15976183A patent/JPS6052766A/ja active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4467811A (en) | Method of polarographic analysis of lactic acid and lactate | |
| US3933593A (en) | Rate sensing batch analysis method | |
| US4065357A (en) | Detection of catalase-containing bacteria | |
| JPS6154410B2 (ja) | ||
| WO1997019345A1 (en) | Microsensor and use of such microsensor | |
| Yao | Flow injection analysis for cholinesterase in blood serum by use of a choline-sensitive electrode as an amperometric detector | |
| US6066249A (en) | Method for calibrating an instrument for measuring electrolytes and metabolites by analysis of blood gases | |
| Okada et al. | NO2 sensor which uses immobilized nitrite oxidizing bacteria | |
| US4045296A (en) | Rate sensing batch analysis method and enzyme used therein | |
| Meyerhoff et al. | Polymer-membrane electrode-based potentiometric sensing of ammonia and carbon dioxide in physiological fluids. | |
| JP2690053B2 (ja) | バイオセンサー | |
| Campanella et al. | New enzyme sensor for sulfite analysis in sea and river water samples | |
| JPS6052766A (ja) | グルコ−スの定量法 | |
| Jaenchen et al. | An Electrochemical Determination of Uric Acid in Sera by a Flow-Through Equipment with and Without Uricase | |
| Warshowsky et al. | Method for Determination of Dissolved Oxygen | |
| Dempsey et al. | Polarographic assay of hydrogen peroxide accumulation in microbial cultures | |
| JPS6052765A (ja) | Ｌ−アミノ酸の定量法 | |
| SU958495A1 (ru) | Способ определени интенсивности дыхани микроорганизмов | |
| JPS62156553A (ja) | 濃度測定装置 | |
| SU992570A1 (ru) | Способ определени глюкозы в растворах | |
| KR100351370B1 (ko) | 카보네이트 이온 선택성 전극으로 구성된 ｌ-말레이트 검출용 바이오센서 및 이를 이용한 l-말레이트 검출방법 | |
| JP2821634B2 (ja) | バイオセンサーによる試料添加式定量方法 | |
| Palleschi | Immobilized dehydrogenase enzymes coupled with a NADH sensor | |
| JPS6025450A (ja) | 物質測定法 | |
| JPS636457A (ja) | 固定化酵素膜の酵素活性試験方法 |