JPS604158A - ペプチド又はアミノ酸の水溶性アシル化誘導体、その製造方法及び施用方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、４プチド又はアミノ酸の新規な水溶性アシル
化誘導体とその製造並びに施用に関する。

周知のように、グ０テアーゼ（又にペプチダーゼ）の比
色分析又はけい光分析による定量（ｄｏｓａｇｅ　）　
には、Ｎ末端が、アセチル基、ベンゾイル基、ｔ−ブチ
ルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルｄ？ニル基
、グルタリール基、スクシニル基、トシル基等によって
置換され、Ｃ末端がニトロアニリド基、グーメトキシー
コーナフチルアミン、アミノ−７−メチル−９−クマリ
ン、α−ナフチルアミン、β−ナフチルアミン、３−ア
ミノーワーエチルーカルバゾール、インドリルアミン、
３−アミノ−Ｓニプロモインドール等によってアミド化
されるか又はα−もしくはβ−ナフトール、ナフトール
Ａｓ−’Ｄ（３−オキシ−２−す７トエ酸、コーメトキ
シアニリド）等によってニスカル化された、ペプチド又
はアミノ酸の種々の誘導体が用いられる。これらの誘導
体は、酸素組織化学的方法によってプロテアーゼ及びペ
プチダーゼをそのまま可視化するために使用し得る（　
Ｚ−Ｌｏｊｄａ、　Ｒ，Ｇｏｓｓｖａｕ及びＴ、Ｈ，５
ｃｈｌｅｂｌｅｒ　。

（／９７９）、Ｓｐｒｌｎｇｅｒ　−Ｖｅｒｌａｇ、　
Ｂｅｒｌｉｎ、　ｐｐ３３９参照）。これらの誘導体は
一般に、はとんど水に溶けないため、有機溶剤中に予め
溶解させた後、得られた溶液を、緩衝液中において希釈
することが必要である。基質の溶解度が低いため、プロ
テアーゼ及びペプチダーゼの定量法の感度が低下し、組
織化学的方法による可視化の可能性を制限する。

ペプチド又はアミノ酸の成る種の誘導体が酸素の胆害剤
として作用し、特に薬物として、例えばそｔらの酸素の
自害基質として使用され得ることも知られている。この
場合にも、前記の誘導体をｍ、ｉし、過当なガレノ式の
形（ｆｏｒｍｅ　ｇａｌＪｎｌｑｕｅ）とし、ガラス管
内又は生体内において使用することは、それらが水に離
俗なため、困難になる。

ドラッグ（活性？ｌｌ賀）をペプチドに結合させて、ド
ラッグの生体内の移動を容易にし、又は遅延効果を与え
るための、プレドラッグを得ることも知られているが、
これらが水に１＃溶なことは、プレドラッグの調製及び
効果に対して屡々ハンプキャップになる。

これらのプレドラッグは、活性のドラッグの標的（例え
ば腫ようの細胞又は病源体の微生物ンによって分泌され
る特異性プロテアーゼに対する良好な基質をペプチドが
形成する場合に有用である。

それは、この場合においてドラッグが標的の環境におい
てのみ放出されるため、ドラッグの効力にとって有利で
あるためである。

本発明は、ペプチド、アミノ酸又はＣ末端基が変更され
たペプチドもしくはアミノ酸の誘導体の水溶性のアシル
化誘導体であって、Ｎ末端基がポリヒドロキシアルカノ
イガ基によってアシル化されたことを特徴とする水浴性
アシル化６導体を提供する。

ポリヒドロキシアルカノイル丞は、一般に、３〜１０個
の炭素原子と、少くとも２個のヒドロキシル基とを有し
ている。

本発明は特に、前述した置換基−ＸをＣ末端基に有する
アミノ酸又はペプチドの前記アシル化誘導体にも向けら
れている。

？リヒドロキシアルカノイル基（ＰＨＡと略記される月
１１好ましくは、式Ｒ、−（ＣＨＯＨ）ｍ−Ｃｏ−に対
応し、ここにＲ１はＨ−又はＣＨ３−を表わし、ｍは整
数２〜７を表わす。

本発明は、次の一般式（１） （上式において、Ｒ，、ｍは、ｔｆｉＪ述した意味を有
し、Ｒはアミノ酸の側鎖を表わし、ｎは整数／〜１０を
表わし、Ｘは活性基、例えば式（１）の誘導体に発色、
けい光又は桑理学的活性を付与し得る置換基を表わし、
ｎが／よシ大きければ、置換基Ｒは式（１）の同一の化
合物において１４なり得る）をＭする新規な誘導体を提
供する。

本発明による化合物の例としては、 Ｒ、−（ＣＨＯＨ）ｍ−Ｃｏ−がジヒドログロビオニル
基、エリトロノイル基、トレオノイル基、リボノイル基
、アラビノイル基、キシロノイル基、リフソノイル基、
グルコノイル基、ガラクトノイル基、マンノノイル基、
グリコへブトノイル基、グリコオクトノイル基等を表わ
し、Ｒが左旋性又は左確性アミノ酸の側鎖特に左旋性（
Ｌ、糸〕のアミノ酸、勾にセリン、トレオニン、アスパ
ラギン、プロリン、グルタミン、グリシン、アラニン、
バリン、システィン、これらのもののＳ置換体、メチオ
ニン、ロイシン、インロイシン、フェニルアラニン、ｐ
−二トロフェニルアラニン、チロシン、こレラノものの
０置換体、リシン、オルニチン、アルギニン、トリプト
ファン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン
岐のアリール又はアルキルのｒ−エステル、及びグルタ
ミン酸のアリール又はアルキルのδ−エステル、′の中
から選ばれたし糸のアミノ酸が皐けられる。

式（１）において、Ｘは、アミンＲ２−ＮＨ２から誘導
された基Ｘｔ＝−ＮＨ−Ｒ２、例えばｐ−ニトロアニリ
ン、α−ナフチルアミン、ρ−ナフナルアミン、グーメ
トキシ−β−ナフチルアミン、アミノ−７−メチル−グ
ークマリン、アミノ−７−ドリフルオロメチルーグーク
マリン、アミノ−７−ニトロ−９−オキサ−２−ベンゾ
ジアゾール−／、３゜アミノ−３−エテル−９ｌ−刀ル
バゾールを我わｊ−か、又はアミノ化ドラッグＲ、−Ｎ
Ｈ２から誘導され７’Ｃｍ　Ｘ２＝　−Ｎ）（−Ｒ，、
例えばダウノルビシン、プロマイシン、アト“リアマイ
シン、プリマキン、クロロキン等を茨わ丁か、又は式（
Ｉ）の−２ｆテドに薬理学的活性を付与し得る別の活性
基ｘＢ　を表わし、ここにｘ３　は特に酵素の阻害活性
を保存したり改善したりする蕗、例えは−１１、−０）
１．−Ｃｌ−１２Ｃ６゜−〇−アルキル、−０−Ａｒ（
Ａｒ　なアリール基例えばｔｆｍｇれでもよいフェニル
［タリエばニトロフェニル基を表わす）、 又は−ＮＨ−Ａｔｋ　−Ｈｇ−Ｃ１（ＡＡｋはアルキレ
ン基である）を表わす。

式（１）の誘導体のうちで、以下に限定的にでなく列挙
した連鎖を含むものは、以下の酵素に対して、基質（自
害基質も含む）として使用することができる（なお、こ
こに示した連鎖は、最／ＪＳ限度であり、基ＰＨＡとペ
プチドとの間に７〜３個の他のアミノ酸を挿入すること
は可能である）。

キモトリプシン： ＰＨＡ−Ｌ−Ｐｈｅ−Ｘ ＰＨＡ−野Ｔｙｒ　−Ｘ ＰＨＡ−Ｌ−Ａｔａ−Ｌ−Ａｔａ−計ＰｈＪ−ＸｐＨＡ
−Ｇｔｙ−ａｔｙ−Ｌ−Ｐｒｏ−５ｐｈｔ−ｘトリプシ
ン： ＰＨＡ（７Ａｒｇ−ｘ ＰＨＡ−計Ｌｙｓ−Ｘ ｐ＋Ａ−計ｐｈＪ−計Ｖａｔ−に−Ａｒｇ−ＸＰ）（Ａ
−Ｌ−Ｐｒｏ−ｊＩ５ｈＪ−計Ａｒｇ−ＸＰ）（Ａ−野
Ｐｈ’−計Ｓｅｒ　−計Ａ　ｒ　ｇ−ＸＰＨＡ−計Ｖａ
ｔ（−Ｌｅ　ｕ−Ｇｔｙ−Ｌ−Ａ　ｒ　ｇ−Ｘトロンビ
ン又はプラスミン： ＰＨＡ（−Ｐｈｓ’７ｐＶａｔ−１ニ−Ａｒｇ−ＸＰＨ
Ａ−ＧｔｙＬ−Ｐ、ｒ　ｏ−Ｌ−Ａ　ｒ　ｇ−Ｘｆラス
ミン： ＰＨＡ（、１ｔｅ−：ＰｈＪ−計ＩＪｓ−ＸＰＨＡ−Ｌ
ｙＰｈＪ−ＰＡｔａ−１，−Ｌｙｓ　−ＸＰＨＡ−：Ｐ
ｈＪ一旦−Ｖａｔ−ｊニアＡｒｇ−Ｘエラスターゼ： ＰＨＡ−１，−Ａ７ａ−−Ａｔａ（７Ａｔａ　−ＸＰＨ
Ａ７ｊ、７Ａｔａ−Ｌ−Ａｔａ　−２ｐ　ｒ　ｏ−１，
”Ｖａｔ−ＸＰＨＡ−計Ａｔａ−Ｌ、−Ａｔａ−Ｌ−Ｐ
　ｒ　ｏ　−計Ａｔａ　−Ｘｐ＋Ａ−Ｌ−Ａｚａ−Ｌ−
Ａｚａ−Ｌ−ｐｒｏ−Ｌ−ｐｈＪ−ｘＰＨＡ−ＰＡＬａ
−１（Ｍａ　−計Ｐ　ｒ　ｏ−５ｒａｔｌ　ｔ−ｘカテ
プシンＢ： ＰＨＡ（７ＰｈＪ−野Ｖａｔ−ｉＡｒｇ−Ｘカテズシン
Ｄ： ｐ＋Ａ−Ｌ−Ａｒｇ−ａｚｙ−ｐ−ｐｈＪ−４−ｐｒｏ
−ｘｐ＋Ａ−ｐＡｒｇ−ｑ−ｐｈＪ−７計ｐｒｏ−ｘＰ
ＨＡ−Ｌ−Ａｔａ　−１，−Ａ　ｒ　ｇ−計Ａ　ｒ　ｇ
−ＸカテプシンＧ： ＰＨＡ−Ｌ７Ａｔａ−Ｌ−Ａｔａ−Ｌ７Ｐ　ｒ　ｏ−１
，−Ｍ４　ｔ　−ＸＰＨＡ（−Ｐｈ≦−４−Ｌｅｕ−１
，−Ｐｈｅ−Ｘノ９　ノ母　イ　ン　： ＰＨＡ−Ｌ−Ａｒｇ　−Ｘ フィシン又は中性ペプチターゼ ＰＨＡ−Ｇｔｙ−Ｇｔｙ（ｙＬｅ　ｕ−Ｘコラゲナーゼ
： ＰＨＡ−Ｇｔｙ−（−Ｐ　ｒ　ｏ−Ｌ、−Ａｔａ−Ｇｔ
ｙ−ＬニーＰ　ｒ　ｏ−ＸＰＨＡ（ニーＰ　ｒ　ｏ−Ｌ
、−Ａｔａ−Ｇｔｙ−４−Ｐ　ｒ　ｏ　−Ｘウロキナー
ゼ又はプラスミノーゲンの活性化剤：ＰＨＡ−Ｇａｙ−
Ｇｔｙ−！ニーＡｒｇ−ＸＰＨＡ逃−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｐｈ
ｅ−Ｌ−Ａｒｇ−ＸＰＨＡ−Ｌ−Ｐｈｊ−Ｇｔｙ−Ｇｔ
ｙ−：Ａｒｇ　−Ｘカリクレイン又はプラスミノーゲン
の活性化剤：ＰＨＡ（−Ｐｒｏ−４中ｈＪ（；Ａｒｇ−
ＸＸの因子： ＰＨＡ７ｊ、７１ｔｅ　−ＧＡｙ−Ｇｔｙ−Ｌ、−Ａｒ
ｇ−Ｘリポポリサッカライドにより活性化されたリムル
スポリ７エムスのグロテアーゼ二 ＰＨＡ−計Ｖａｔ−Ｌ−Ｌｅ　ｕ−Ｇｔｙ−！、−Ａ　
ｒ　ｇ−Ｘ以上に示したベグチド誘導体において、各々
のアミノ酸は、その普通の記号によシ示されている。

本明細簀に示された式に２いて、一般に、各々のアミノ
酸は、そのＮ末端基金左側に１またＣ末端基を右側にそ
れぞれもつものと想定されている。

以上に示した基質において、Ｘは、Ｘ２又はＸ。

によって表わした全ての値を取ることができ（その場合
生成物は、医薬として利用し得る）、またＸ、によって
表わした全ての値を取ることができる（その場合生成物
は、屋電のために特にオＵ用し得る）。

式（Ｉ）を有する誘導体のうちで、以下に限定的にでな
く示したものは、抗腫よう性のブレドラッグとして使用
し得る。これらの誘導体は、腫よう細胞によって分泌さ
れるグロテアーゼの作用の下に、腫よう細胞の近辺にの
み活性物置を放出するというオＵ点を備えている。

ＰＨＡ−３，−ＡＬａ−１＝−Ａｔａ−１，−−Ｐｒｏ
他−Ａｔａ−アドリアマイシンＰＨＡ−Ｌ−ＡＡａ　−
Ｌ　−Ａｊａ　−Ｌ−Ｐ　ｒ　ｏ−Ｌ−Ｍａ７−ダウノ
ルビシンＰＨＡ７ｐＰｈＪ７：ＶａＬ（、−Ａｒｇ（−
Ｌｅｕ−ダウノルビシンＰ）（Ａ一旦−Ｐｈｊ−古−Ｖ
ａｔ−基−Ａｒｇ−アドリアマイシンＰＨＡ−１５Ｐｈ
ｅ−Ｌ−Ｖａｔ（−Ａｒｇ７ｊ、、−Ｌｅｕ−アドリア
マイシンｐｈＡ−４−ｐｈ＆−１ニーＡｚａ−ｐＬｙｓ
−ダウノルビシンＰＨＡ−Ｌ、−Ｐｈ６−Ｌ７Ａｊａ逃
−Ｌｙｓ−Ｌ、−Ｌｅｕ−ダウノルビシンＰ）−ＩＡ−
Ｌ−Ｐｈ　ｅ　ウ「／’ｕａａ−Ｌ−Ｌ　ｙ　ｓ−７ド
リアマイシンＰＨＡ（−Ｐｈ６−Ｌ、−Ａｔａ−ＬｙＬ
ｙｓ−μ−ＬｅＬｌ−／”）’リアマイシンＰＨＡ−Ｇ
Ｌｙ−Ｇｔｙ（−Ａｒｇ−ダウン）ｖ　ヒシ７ＰＨＡ−
Ｇｔｙ−Ｇｔｙ−１：〜Ａｒｇ７ｊ、−Ｌｅ　ｕ−ダウ
ノルビシンＰＨＡ−Ｇｔｙ−Ｇｔｙ−！ニーＡｒｇ−ア
ドリ′アマイシンＰＨＡ−Ｇｔｙ−Ｇｔｙ−１，−Ａ　
ｒ　ｇ−１，−Ｌｅ　ｕ−アドリアマイシンＰＨＡ−Ｌ
−−Ｐｒｏ−１ニーＰｈ６−Ｌ、−Ａｒｇ−ダウノルビ
シンＰＨＡ−ＬＡＰ　ｒ　ｏ−Ｌ−Ｐｈ　６−Ｌ−Ａ　
ｒ　ｇ−Ｌ−Ｌｅ　ｕ−ダウノルビシンＰＨＡ（７Ｐｒ
Ｏ他−Ｐｈ４（、−Ａｒｇ−７１’＋７７−／　イシン
ＰＨＡ−１−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｐｈ４逃−Ａｒｇ−Ｌ、−Ｌ
ｅｕ−アトリアマイシン抗薔生虫性プレドラッグとして
使用可能な式中の′ｅｊ尋体としては、限屋的にでなく
、以下の化合物が挙けられる。

ＰＨＡ−Ｌ７Ｖａｔ一旦−Ｌｅ　ｕ−ＧＡｙ−Ｌ−Ａ　
ｒ　ｇ−プリマキンＰＨＡ−Ｌ！７Ｖａｔ−Ｌ、−Ｌｅ
　ｕ−Ｇｔｙ−１，＝Ａ　ｒ　ｇ−クロ０キンＮ　末！
位置にポリヒドロキシアルカノイル基を有する式（１）
の新規な誘導体が水又は緩衝液中に非常な高濃朋で溶解
することが・本発明に従って見出された。従って、これ
らの誘導体（プロテアーゼ又はペプチダーゼの基質）を
有機溶剤に予め溶解させる必要ｉ’１．ない。これらの
誘導体のため、プロテアーゼ及びペプチダーゼの検出方
法の感度が著しく改善されるうえに、以下に応用例日に
示すように、成る支えられたグログアーゼについてより
良いペプチド基質を簡単に定めることができる。芙際に
、加水分解速度が置くなるためには一遊離基質のｍ度を
できるだけ高く、例えばミノ・エリス定数よりも十分に
高くする必要がある。グログアーゼ及びペプチダーゼの
場合、この定数は、／ｍＭの大きさオーダーである。基
質は、難溶性の場合、凝縮物の分散の形で緩衝液中に存
在し、有効濃度（凝集しない基質）は、ミノ・エリスの
定数よりも相当に低い。また、本発明による非常に水溶
性の誘導体は、スクシニル基又はグルタリル基によって
Ｎ末端基が置換された誘導体と反対に、溶解化置換基に
基づく電荷をほとんど有さない。

本発明による誘導体の調製も、非常に簡単でちゃ。

ＰＨＡの活性エステル又はラフ・トンとの反応によって
、ペプチド又はアミノ酸のα−アミン基を置換し、次に
アミノ酸又は−！！プチドのα−カルがキシル基を、適
宜の活性基で置換すればよい。

本発明は、前述した新規な水溶性アシル化誘導体の製造
方法も提供し、この製造方法は、アミノ酸、ペプチド又
はＣ末端基が変更されたそれらのものの誘導体の７つを
、ポリヒドロキシアルカノイル酸から誘導されたアシル
化剤によるＮ末端基のアシル化反応にかけることを特徴
とする。

本発明は、式（１）を有する新規な誘導体の製造方法も
提供し、その性徴は、式 （上式においてｎ、ＲＸＸは前述した意味を有する） によって示さｈる４フ０チド又峰アミノ酸の誘導体を出
発物質として使用し、式 ％式％ （上式においてＲ，、ｒｒ＋は前述した意味を有するン によって示されるポリヒドロキシアルカノイル酸の活性
誘導体と、式（Ｉｔ）によって示される化合物を反応さ
せ、式 に工って示される化合物とし、所望ならばこの化合物を
既知の方法によって式Ｉの他の任意の誘導体に転化させ
ることを特徴とする。

一般に、式ｌの化＠物は、（置換基Ｘの異なる）式Ｉの
別の化合物に、例えは”　Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎＥｎｚ
ｙｍｏｌｏｙｙ　”　−Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ　Ｅｎ
ｚｙｒｎｅｓ　％　％にＶｏｌ、／９、ｔｔｓ、ｇＯの
ような専門的な研究に記載された従来の方法により転化
させる。

出発物質であるペプチドは、市販品でもよいが、既知の
ペプチド合成法（例えは、Ｅ、Ｇｒｏｓｓ及びＪ、Ｍｅ
ｌｎｈｏｆｆｅｒ　（／　９７９　）　、Ｔｈｅ　Ｐｅ
ｐｔｉｄｅｓ　：Ａｎａｌｙｓｉｓ、　５ｙｎｔｈｅｓ
ｉｓ、　ｂｉｏｌｏｇｙ、　ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓ
ｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　Ｖｏｌ、　ｌ　、ｌ、■以
下）に従って合成してもよい。

本発明による調製方法は、その特別の実施の態様におい
て、次の特徴を、単独にか、又は組合せとして備えてい
る。

ポリヒドロキシアルカノイル酸の活性誘導体は、式（Ｉ
Ｉ）のべ末端基をアシル化することのできる誘導体であ
る。この活性誘導体の例には、前記の酸に対応する２ク
トン又はこの酸の活性エステル例工ｔ−１’Ｎ−ヒドロ
キシスクシニミドのエステルがある。

一弐■の化合物（Ｘ＝ＯＨ）を式Ｉの誘導体（Ｘ　１−
Ｘ−ＮＨ−Ｒ２又ｆｌ　−ＮＨ−Ｒ，’ｌｒ表わス）ニ
転化させるには、ベンゾトリアゾール−／−イルーオキ
シ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムへキサ７／
Ｉ／オロホスフエート（又はＢＯＰ　）のような結合剤
の存在下に、アミンＲ２−ＮＨ２又はＲ、−Ｎｉｌ　２
を反応させる。

本発明は、アミノ酸、ペプチド、Ｃ末端基が変更された
アミノ酸及びＣ末端基が変更されたペプチドの中から選
ばれた化合物の水溶性誘導体としての、Ｎ末端基がポリ
ヒドロキシアルカノイル基によってアシル化された前記
化合物の（Ｎ末端）アシル化誘導体の使用も提供する。

本発明は、薬理学的活性を有する前記アシル化誘導体、
特に式Ｉにおいて、Ｘ　＝　ＮＨ−Ｒ，（ここにＲ５は
アミノ化ドラッグ（活性物置）の残基を表ｔ）ｊ）？６
るか３１ＸＨ１Ｈ％　ＯＨ％　ＣＨ２Ｃｌ　％−〇−ア
ルキル、−０−Ａｒ（Ａｒ　はアリール基例えハフェニ
ル又はニトイフェニルの如キ置換フェニルを表わす）、 又は−Ｎ）（−Ａｔｋ−Ｈｇ−ＣＡ　（ＡＬｋはアルキ
レン基を表わす）の中から選ばれた基ｘ３　を表わす誘
導体の水溶性薬物としての使用も提供する。

本発明は式Ｉの少くとも−の化合物を活成成分として、
場合によっては適当な賦形剤と共に含有した医薬用組成
物を提供する。

式（１）の化合物がプレドラッグである場合、活性ドラ
ッグと同じ治療上の指示をもった活性ドラッグの通常の
用量に対応する用量において使用される。

一般にプレドラッグの彷性は、対応したドラッグの毒性
よりも低い。

本発明の薬物が酢素阻害物である場合、これらの薬物は
、腫ようの増殖及び転移形成を阻止するための処置剤と
して特に使用される。有効用ｍ、は一般に０．／〜／θ
■／にりである。

本発明による薬物は、全ての適当な形態において投与さ
れる。しかし一般に経口投与は不適である。

本発明による薬物は、特に、注射可能な浴液、生理的血
清中に希釈すべき凍結乾燥粉末、筋肉又は皮膚に適用す
べき乳液又は溶液、エーロゾルとして加圧状眸にした浴
液などの形にＷ＾１↓することができる。

次に本発明を限定的でない例によって説明する。

例／　エラスターゼの基質 既知のペプチド合成法に従って合成したペプチドＬ−Ａ
ｈａ　−Ｌ−Ａｔａ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ａｈａ　７６９
モルを、（Ｎ−トリメチルベンジルアンモニウムメトキ
シドの形の）Ｎ−トソメチルペンジルアミン（２ミリモ
ル）の存在下に、ジメチルスルホキシド（ＳｒｔＬｌ）
に溶解させた。この浴液に、グルコノ−δ−ラクトン（
２ミリモル）を加えた。得られた溶液を／、り時間ＳＯ
Ｃにおいて攪拌した。

溶剤系（ＣＨＣｔ、／ＣＨ，Ｏ）（／）−１２０／ＣＨ
，Ｃｏ２１−１　、容積比ｇ：乙：／：／）円において
、シリカを充填した塔（３×３θ偲）内のクロマトグラ
フィーにより、ＰＨＡ−ペプチドを精製した。ＰＨＡ−
ペプチド含有溶液を蒸発乾固させた。残留物（油）を９
℃でＮ−ジメチルホルムアミド（３μ）中に吸収させた
。

アミン全除去した乾燥Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｄ
）中のＰＨＡ−ペプチド浴液（／ミリモＩＬ／）に１ヒ
ドロキシ−／−ベンゾトリアゾール（７６９モル）、ジ
シクロへキシルカルデジイミド（７６９モル）及びＡ、
Ｅ、Ｃ（アミノ−３−エチル−９−カルバゾール）（／
ミリモルンを絵肌した。得られた溶液をグＣ″′ｃ２肋
間、次に２Ｓ℃で７ｇ時間攪拌した。ジシクロヘキシル
尿素の沈殿を早めるために溶ｇを９℃で７時間冷却し、
次にｐ過によって、ジシクロヘキシル尿紮ヲ除去した。

凶−ジメチルホルムアミドを一３ＯＣで減圧下に蒸発さ
せた。ＰＨＡ（、−Ａｔａ（７Ａ＃−ＬｙＰ　ｒ　ｏ−
Ｌ、−Ａ７ａ　−ＡＥＣを、溶剤糸ＣＨＣｔ、　／　Ｃ
Ｈ３０Ｈ／　ＣＨ，Ｃｏ２Ｈ、ｇ　Ｏ：３０：、ｒ（容
積比）内において平衡させたシリカゲルの４：　（３Ｘ
　３θａｎ　）　ｆｔ用いてクロマトグラフィーによシ
精製した。３弘Ｑ　ｎｍの吸収によって、ＰＨＡ−Ｌ、
−Ａｔａ４−Ａ７ａ−Ｌ−Ｐｒｏ−１５Ａｔａ　−ＡＥ
Ｃｆ検出した。

このものの純度を薄層クロマトグラフィによって確認し
た。化合物を含有するフラクションを濃龜乾燥させた。

残留物を水２罰中に吸収させ、溶液を凍結乾燥した（効
率ｇＯｐ１００）、。

ＰＨＡ−ｊ７／１ｕａａ（７Ａｔａ−県−Ｐ　ｒｏ一旦
−Ａ７ａ−ＡＥＣのその他の特徴は次の通シであった。

赤外線分光分析による特性帯（ｃｍ−’　）、ヒ１゛ロ
キシルー３３コ０；アミド１−／ｈグ０；アミドＤ−／
！ｆ；３３：芳香族基、／ゲタθ。紫／Ａ糾分光分析に
よる最大吸収、３弘Ｏｎｍ；最小吸収３　／　３　ｎｍ
０けい光分桁分、太励起波長３１１．２ｎ止だ太放出波
長３ワ０ｎ四ｐ１１３〜ワの緩衝液又は蒸留水において
のＰＨＡ−ＬニーＡｔａ−Ｌ、−Ａｔａサ−Ｐｒｏ−Ｌ
−Ａｔａ　−ＡＥＣ（Ｄ　溶解ｉａ、ｇＯη／〃、ｆよ
シも高かった。

例２　エラスターゼの基質 既知のペプチド合成法によって、ペプチド旦−Ａｔａ−
！ニーＡｔａ−１ニーＰ　ｒ　ｏ−Ｌ７Ｖａｔ−ＯＦ３
ｚｔ　を合成した。ここにＢｚｔは、ベンジルエステル
誘導体を示すだめの慣用記号である。ペンジルエスオＡ
／基は、ペプチド合成の間ペプチドのＣ末端を保護し、
クロマトグラフィーによる精製工程の間ペプチド訪導体
を簡単に検出できるようＶＣ選定した。

ペプチドＬ−Ａｔａ　−Ｌ−Ａｔａ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−
Ｖａｔ−ＯＢｚｔ、　ＨＣＬ（２ミリモル）ヲ、ツメチ
ルスルホキシド（３ｍ６）に溶解させた。仁の溶液にト
リエチルアミン（Ａミリモル）とグルコノ−δ−ラクト
ン（６ミリモル）とを添加した。得られた溶液を３０Ｃ
で７５時間攪拌した。

溶剤糸ＣＨＣｔ３／　ＣＨ３０Ｈ／　ＣＨ３Ｃｏ２Ｈ（
、ダ０；２θ：／、容積比）によって十でｔ工させたシ
リカゲルの塔（３×３０ｃｍ）において、ＰＨＡ−ペゾ
ナドー０Ｂｚｔ　をｎ製した。ＰＨＡ−ペプチド含有フ
ラグシコンを採取した。溶剤は減圧下に蒸発させた。

残留物（油）を、水７０％を＠不するメタノールＣＡｍ
１）中に吸収させ、ノやラシクウム炭坪；（ｐｄ１０％
）２００グの存在乍にグ時間水素添）ＪＤ分解に付した
。反応混合′４ｆ／Ｊを濾過し、蒸発乾固させた。

ＰＨＡ、＝−’！ｆチドーＯＨ（７６９モル）を）゛ク
ージメチルホルムアミド（２ｍｌ　）に溶かした。この
溶液に、ヒドロキシ−／−ベンゾトリアゾール（７６９
モル）、ジシクロヘキ゛ジルカルボッイミド（７６９モ
ル）及びアミノ−３−エチル−カルバゾール（７６９モ
ル）を添加した。溶＃を不活性葵囲気中で、コ時間グ℃
、次に／ざ時間２ＳＣで攪拌した。次にジシクロヘキシ
ル尿素の完全な沈殿を早めるために、浴液を作動し、次
にジシクロヘキシル尿素を涙去した。Ｎ−ジメチルホル
ムアミドを−ｊｔ−を中にて蒸発させた故、溶剤系Ｃ＋
ＣＺ。

／　Ｃ１−１，ＯＨ／　Ｃ１−１，Ｇｏ。ＨｇＯ：３０
：ＳＣ容槓比〕により平衡させたシリカゲルの塔（３×
３０　ｃｒｔｉ　）を用いて、クロマトグラフィーによ
ｐ、Ｆ）ＨＡ−ペン°ツード−ＡＥＣを精製した（効率
、ｇａｐ　／θ０）。

ＰＨＡ−Ｌ−Ａｔａ−Ｌ−Ａｔａ　−Ｌ−Ｐ　ｒ　ｏ−
Ｖａｔ−ＡＥＣは、例／に示すように、ＰＨＡ基、ペプ
チド結合及びＡＥＣ基に幻応するｑ＋性を治していた。

例３　キモトリジシンの基質 Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸［Ｌ−ｐｈ６
−　ＯＣＨＨ（、ｔ　（２ミリモル）を、ジメチル３　
） スルホキシド（３ｍｌ　）に溶かした。この溶液に、グ
ルコノ−ｇ−ラクトン（乙ミリモル）とＮ−トリエチル
アミン（６ミリモル）とを添加した。得られた溶液を５
０　Ｃで／左時間攪拌した。浴剤系（ＣＨＣ４，／ＣＨ
３０Ｈ／Ｈ２０／ＣＨ，Ｃｏ２Ｈ，ｇ　！乙：／：ハ容
積比）において平衡させたシリカダル充填塔（３Ｘ　３
０　ｃｍ　）を用いて、クロマトグラフィーにより、Ｐ
ＨＡ　−Ｌ　−Ｐｈ４−　ＯＣＨ，を精製した。次に、
７２時間２Ｎソーダ液を添加してｐＨ／　０　、５に調
節したメタノール／水溶液（／：／、容積比）内におい
て、ＰＨＡ　−Ｌ　−ｐｈ４−　ＯＣＨ，をけん化した
。溶剤系ＣＨＣｔ、／ＣＨ３０Ｈ／ＣＨ，Ｃｏ２Ｈ／Ｈ
２０、乙；Ａ＝乙：／において平衡させたシリカゲル充
填塔（３×３０ｃｒｎ）によってＰＨＡ　−Ｌ　−ｐｈ
６−　ＯＨをギｈ製した。

次に例／に示した条件の下に、ＰＨＡ　−Ｌ　−ｐｈ６
−０Ｈ（７６９モル）をＡＥＣにより置換した。

ＰＨＡ　−Ｌ　−Ｐｈ５−ＡＥＣは、例／に示したよう
に、′ＰＨＡ基、Ｐｈｅ及び八εＣの芳香核並びにアミ
ド結合に対応する特性を有していた。

男！　コラゲナーゼの基質 例／と同様にして、ベグチドし−Ｐｒｏ　−Ｌ　−Ａｔ
ａ　−Ｇｔｙ　−Ｌ　−Ｐｒｏ　−０Ｂｚｔ、ＨＣＬ（
既知のペグチド合成法に従って合成したもの）ｉ、ＰＨ
Ａ−Ｌ−Ｐｒｏ　−Ｌ　−Ａｔａ　−Ｇｔｙ　−Ｌ　−
Ｐｒｏ−ＡＥＣに転化した（効率４０　ｐ１０θ）。

ＰＨＡ　−Ｌ　−Ｐｒｏ−占−Ａｔａ　−Ｇｔｙ　−Ｌ
　−Ｐｒｏ　−八ＥＣは、例／に示したように、ＰＨＡ
基、ペゾチド結合及びＡＥＣ基に対応する特性を有して
いた。

例Ｓ　コラゲナーゼの他の基質 誘導体ＧＡｙ　−Ｌ　−Ｐｒｏ　−Ｌ　−ＡＡａ　−Ｇ
ｔｙ　−Ｌ　−Ｐｒｏ　−０Ｂｚｔ、　ＨＣＬ（既知の
ベグチド合成法に従って合成したもの）を、同様にして
、誘導体ＰＨＡ−Ｇｔｙ　−Ｌ　−Ｐｒｏ　−Ｌ　−Ａ
Ａａ　−Ｇｔｙ　−Ｌ　−Ｐｒｏ　−ＡＥＣに転化させ
た（効率乙θ％）。

ＰＨＡ　−Ｇｔｙ　−Ｌ　−Ｐｒｏ　−Ｌ　−Ａｔａ　
−ＧＡｙ　−Ｌ　−Ｐｒｏ　−Ｐｒｏ　−ＡＥＣは、例
／に示したように、ＰＨＡ基、ペグチド基及びＡＥＣ基
に対応する特性を有していた。

例６　ｆレドラッグ（ｐｒｏｄｒｏｇｕｅ　）例２に記
載したようにして調製したＰＨＡ−１−Ａｈａ　−Ｌ　
−Ａｔａ　−Ｌ　−Ｐｒｏ　−Ｌ　−Ｖａｔを、ＡＥＣ
の場合と同じ条件の下に、ダウノルビシンに結合させ°
た。

誘導体ＰＨＡ　−Ｌ　−ＡＡａ　−Ｌ　−Ａｔａ　−Ｌ
　−Ｐｒｏ　−Ｌ−Ｖａｌ−ダウノルビシンは、赤外ｉ
ｒ！１１！分光分析、吸収分析及びけい光分析によって
、基ＰＨＡ　、ベグチド基及びダウノルビシンのアグリ
コンに対応する特性を有することが確められた。

ブレドラッグとして利用可能な瀦導体ＰＨへ−玉−Ａｔ
ａ　−Ｌ−Ａｔａ　−Ｌ−Ｐｒｏ　−Ｌ−Ｖａｌ　−Ｌ
　−Ｌｅｕ−ダウノルビシンを同様に′して調製した。

例７：７″ルドラッグ 同様にして、誘導体ＰＨＡ−ｌ−ＡＡａ−ｌ−Ａｔａ−
Ｌ　−Ｐｒｏ　−Ｌ　−Ｖａｔ−アドリアマイシン及び
ＰＨＡ　−Ｌ−Ａｈａ　−Ｌ　−Ａｔａ　−Ｌ　−Ｐｒ
ｏ　−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ　−Ｌｅｕ−アドリアマイシンを
、例乙に示したダウノルビシンの誘導体として調製した
。

例ｇ １０１にして、ブレドラッグとして使用可能なｆ粋合物 アマイシン ルビシン アドリアマイシン ＰＨＡ　−Ｌ　−ｐｈ６−　Ｌ　−Ｐｒｏ　−Ｌ−へｒ
ｇ　−Ｌ−ダウノルビシン を　調製　し　ｌこ。

例り 同様にして、ブレドラッグとして使用可能なｆヒ合物Ｐ
ＨＡ−占−Ｖａｌ　−Ｌ　−Ｌｅｕ　−Ｇｌｙ　−Ｌ　
−Ａｒｇ−グリマキンを調製しプＣ０ 応用例 ａ）動的定量 光路／ｌｙｎについて３’ｌＯｎｍに対する光学濃度θ
、／を得るために、ｏ　、ｏｓＭ＋−リスーＨＣｔ緩衝
液（ｐＨｇ−ｇ）に、ベグチ）’　ＰＨＡ　−Ｌ　−Ａ
Ａａ　−Ｌ　−Ａｔａ　−Ｌ　−ＡＡａ　−Ｌ　−Ｐｒ
ｏ　−Ｌ　−Ａｊａａ−ＡＥＣを溶解させた（４１．３
×１０−５Ｍ）。得られた溶液を３７Ｃとし、けい光光
度計の凹部にペグチド溶Ｗ／ｍｌ当シエラスターゼ溶液
１０μｔ（／　、　０〜１００ｔｔ？／ｍ））を添加し
た。試料室の湯度を一定の３７Ｃとしたけい元・分光光
度計に、凹部をそのまま導入した。励起波長３３２ｎｍ
、放出波長ダ乙Ｏｎｍ　であった。放出信号を３分間記
録した。

得られた曲線の勾配から酵素活性を定めた。

エラスターゼ／　Ｏｎｇ−１５０ｎＰ　１／θｏ　ｎｇ
−１２０θｎｆ　％　５θＯｒ＃’及び／　ｐｆ　に対
応する勾配の値を線図上にグロットした。この条件の下
に測定したけい光の強度は、反応環境に添加した酵素量
に比例していた。

ｂ）従来の定量 光路／ｃｍについて３　’ｌ　Ｏｎｍ　に対する光学濃
度０．７を得るために、緩衝液トリス−ＨＣ１０．０５
．９１１ｇ、ざに、ペグチドＰＨＡ−上−ＡＡ？Ｉ＝−
Ａｔｅ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ａｔａ−ＡＥＣｆ溶解させた
。こ９溶液をシリコンｆヒ溶抑管中に分散させた（７本
の管について／　ｍｅ　）。各々の智に、エラスターゼ
θ／θ、　５　／　／　／　２　／　５　／　／　Ｏｎ
　Ｐ　’に含有するｐＨｇ、　ｇのトリス−ＨＣ，を緩
衝液中のエシスターセ°溶液１０μＬｔＺ≦刀ｕ　Ｌ、
た。管を３０分１ぽ１３７Ｃに保った。塩［ヒペンズア
ミジニウム（’ｌ　ＯｍＭ）を含有したＮ−ジメチルホ
ルムアミド０．３ｍｌを加えて反応を停止させた。グＱ
　ｎｍ　でけい光の強度を測定した。励起波長は３５２
　ｎｍ　であった。得られた強度を白色強度で修正し、
エラスターゼ濃度の関数として線図にグロットした。こ
の条件の下に、修正されたけい光強度は、エラスターゼ
濃度に比例していた。このように、／ｒｎｌ当り／ナノ
グラムという低い濃度、又は７０ピコモルの（イ）度、
又は／０．２×７Ｑ（Ｊ／ｍｌを実証することができた
。

Ｃ）ミバエリス（Ｍｌｃｈａｅｌｉｓ）の定数ダ、２×
／θ　Ｍ〜ダ、３×１０　Ｍの濃度にペプテドを存在さ
せたエラスターゼの活性の測定（１０ｎＶＩｌｌ）によ
シ、被プチドＰＨＡ−４，−Ａ／、ａ−Ｌ。

Ａｌａ　−Ｌ、　−Ｐｒｏ　−Ｌ　−Ａｈａ　−ＡＥＣ
に対応するミバエリス定数を定めた。３θ分後に３７Ｃ
で得たけい光強度を用いて、ラインライ−パーク（Ｌｌ
ｎｅｗｅａｖｅｒ　−Ｂｕｒｃｋ　）　の線し１會作図
した。

得られた直線により、ミバエリス定数を０．３ｍＭと定
めることができた。

定量原理は次の辿シである。

を生虫が感染した赤鹿球を表面活性！Ｉ／Ｉ質により溶
Ｍ　（Ｉｙｓ６　）　させた。このｉ容＃　ｉｔ勿（ｌ
ｙｓａｔ）に誘導体ＰＨＡ−ペプチソル−ＡＥＣを加え
、３７Ｃで４１３分間溶液を培養Ｌ７た。次に、寄生虫
のプロテアーゼによシ放出されたＡＥＣを酢酸エチルに
よって抽出し、はい元スペクトル分析によって放出ＡＥ
Ｃを定量した（　Ｍ、　Ｍｏｎｓｌｇｎｙはが、Ｔｈｅ
　ＥＭＢＯＪ、、　／、　、３０３−３θＡ　（１９ｇ
２））。

この方法を膠々のペプテドに第１」用した結朱、透導体
ＰＨＡ　−Ｌ　−Ｖａｌ　−Ｌ　−Ｌｅｕ’　−ＧＡｙ
　−Ｌ　−ＡｒＰ−ＡＥＣに存在するペプテドが、寄生
虫のプロテアーゼによシ最も容易に加水分解される被ブ
チトノ長、質であることが見出された。

これらの実験に使用した表面活性物質はグルココノイル
アミドデカンであった。

Ｃ，プレドラッグの性質 例えばペプテドＰＨＡ　−Ａ／、ａ　−Ｌ−へ７ａ　−
Ｌ　−Ｐｒｏ　−Ｌ　−Ｖａｔ−Ｌ　−Ｌｅｕ−アドリ
アマイシンは水に可溶である。このものは、白廂球エラ
スターゼ又は腫ようを伽とするプロテアーゼにより加水
分獲ｒされ、活性ドラッグであるＬ−Ｌｅｕ−７１’　
＋７７マイシンを放出する。プレドラッグは正当な細胞
（リンパ球）又は肺よう細胞［ｃｅｌｌｕｌｅ＝、　ｌ
ｅｕｃｅｍｌｑｕｅｓ　Ｌ／１２１０又はｃｅｌｌｕｌ
ｅｓｄｅ　ｃａｒｃｌｎｏｍｅ　ｈａｌｍｏｎａｉｒｅ
　ｄｏ　Ｌｅｗｉｓ　（ＬＬＣ）］には浸透しない。そ
の反対に、プロテアーゼの作用によって放出された活性
ドラッグＬ　−Ｌｅｕ　−アドリアマイシンは膜ようｒ
出胞内に浸透してこれらの細胞を死滅させる。

ペプテドＰＨＡ　−Ｌ　−Ｐｈ５−　Ｌ　−Ｐｒｏ　−
Ｌ　−Ａｉ’ｇ　−Ｌ　−Ｌｅｕ−アドリアマイシンは
水に可溶である。このものは、トリプシン及びグラズミ
ンにより加水分解され、活性ドラッグＬ　−ＬＯＵ−７
）’　ＩＪ　７−＝ｒイシンを放出する。このプレドラ
ッグは腫よう細胞に対して、前述しンでプレドラッグと
同様のふるまいを示す。

Ｃ０７Ｋ　７１００　６４６４−４Ｈ Ｇ　０１　Ｎ　３３１５２　８３０５−２Ｇ３３／６８
　８３０５−２　Ｇ ／／Ｃ０７Ｋ　９９：００ ０発　明　者　ロジエ・メール フランス国４５１００オルレアン・ アレ・ド・ジエン１１

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ｆｉ＋　ペプチド、アミノ酸、父はＣ末端基が変更さｎ
   たペプチドもしくはアミノ酸の誘導体の水溶性アシル化
   誘導体であって、Ｎ末端基がポリヒドロキシアルカノイ
   ル基によってアシル化さｎたことを特徴とする水溶性ア
   シル化誘導体。 （２１ポリヒドロキシアルカノイル基が３〜ＩＯ個の炭
   素原子及び少くともコ個のヒドロキシル基を有すること
   を特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載の水浴性ア
   シル化誘４体。 （３）　ペプチド又はアミノ酸に発色、けい光又は薬理
   学的活性を付与し得る置換基−ｘｌｃ末端基が有するこ
   とｆ特徴とする特許請求の範囲第（１）項又は第（２１
   塙記載の水溶性アシル化誌導体。 （４）　ジヒドロキシグロビオニル、エリトロノイル、
   トレオノイル、リビノイル、アラビノイル、キシロノイ
   ル、リキソノイル、グルコノイル、ガラクトノイル、マ
   ンノノイル、グリコヘプトノイル及びグリコオクトノイ
   ルから成る群中よりポリヒドロキシアルカノイル基を選
   んだことを特徴とする特許請求の範囲第ｆｉｌ〜（３１
   項のいずｎか１項記載の水溶性アシル化誘導体。 （５）式 （上式においてＲ１は、−Ｈ又ｉｊ　−ＣＨ，ｆ表わし
   ２ｍは軽数２〜７を表わし、Ｒはアミノ酸の側鎖を表わ
   し、ｎは整数ｌ〜／θｆ表わし％Ｘは式（１）の誘導体
   に、発色、けい光又は薬理学的活性を付与し得る瞳換暴
   ヲ表わし、但しｎがｌに等しい場合に置換基Ｒは式（１
   ）の同一の化合物において異なっていてもよい） によって示さｎること全特徴とする特許請求の範囲第ｆ
   ｉｌ〜１４１項のいず匹か７項記載の水浴性アシル化誘
   導体。 ＋６１　Ｒ７５（、セリン、トレオニン、アスノｆ　ラ
   キン。 プロリン、グルタミン、グリシン、アラニン、バリン、
   システィンもしくはそｎらのＳ−置換誘導体、メチオニ
   ン、ロイシン、インロイシン。 フェニルアラニン、ｐ−ニトロフェニルアラニン、チロ
   シンもしくはそ扛らのＯ置換誘導体、リシン、オルニチ
   ン、アルギニン、トリシトファン、アス／ぞラギン酸、
   グルタミン酸、アスｔ４ラギン酸のアリールもしくはア
   ルキルのｒエステル及びグルタミン酸のアリールもしく
   はアルキルのδエステル、の中から選ばｎたアミノ酸側
   鎖を表わすことを特徴とする特許請求の範囲第（６）項
   記載の水溶性アシル化誘導体。 （７）　基Ｘが、芳香族アミンＲ２−ＮＨ２から誘導さ
   ｎた基−ＮＨ−Ｒ２、アミノ化ドラッグＲ，−ＮＨ２か
   ら誘導さｎた基−ＮＨ−Ｒ３，又は、前記ペプチドもし
   くはアミノ酸に薬理学的活性を付与し得る活性基Ｘ、會
   表わすことを特徴とする特許請求の範囲第（３１〜（６
   １項のいずｒしか７項記載の水溶性アシル化誘導体。 （８）　芳香族アミンｔｉｐ−ニトロアニリン、α−ナ
   フチルアミン、β−ナフチルアミン、４−メトキシ−β
   −ナフチルアミン、アミノ−７−メチル−ダークマリン
   、アミノ−７−トリフルオロメチル−弘−クマリン、ア
   ミノ−７−ニトローダーオキサーコーペンゾジアゾール
   ー／１３及びアミノ−３−エチル−９−カルバゾールか
   ら成る群中よ？）選んだこと全特徴とする特許請求の範
   囲第（７）項記載の水溶性アシル化誘導体。 （９）　アミン化ドラッグＲ３−ＮＨ２を、ダウノルビ
   シン、プロマイシン、アドリアマイシン、プリマキン及
   びクロロキンから成る群中より選んだことを特徴とする
   特許請求の範囲第（７）項記載の水溶性アシル化誘導本
   。 ｎｏ　基ｘ３が、基−Ｈ、−ＯＨ、−ＣＨ２Ｃ４，−０
   −アルキル、−０−Ａｒ（ここにＡｒは、置換さ几てい
   てもよいアリール基ｆ表わす）。 又は−ＮＨ−Ａｔｕ−＋＋ｇ−ＣＬ　（ここにＡｔｋは
   アルキレン基を表わす）ことを特徴とする特ｒｆＩＩｌ
   ｆ求の範囲第（７）項記載の水溶性アシル化誘導体。 ｏｎ　以下の化合物 −ＰＨＡ−Ｌ−ｐｈｄ−ｘ −ＰＨＡ−Ｌ−Ｔｙｒ　−Ｘ ／”／ −ＰＨＡ−Ｌ−ＡＬａ−Ｌ−ＡＩ！ａ−Ｌ−Ｐｈｅ　−
   Ｘ−ＰＨＡ−Ｇｌｙ−ＧＡｙ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｐｈｅ
   −Ｘ−ＰＨＡ７ｊ５Ａｒ　ｇ−Ｘ −ＰＨＡ−１−Ｌｙｓ　−Ｘ −ＰＨＡ−＋５Ｖａｔ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｔｙ−Ｌ７Ａｒ
   　ｇ−Ｘ−ＰＨＡづニアＰｈｊ−１−Ｖａｔ−計Ａｒｇ
   −Ｘ−ＰＨＡ−Ｇｔｙ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｘ−
   ＰＨＡ−Ｌ−Ａｔａ−Ｌ−ＡｔａすＬｙｓ　−ｘ−ＰＨ
   Ａ−１，−ＡＬａ−！−ＡＬａ−Ｌ７Ａｔａ　−Ｘ−Ｐ
   ＨＡ−Ｌ−Ａｔａ−↓−Ａｔａ−計Ｐｒ　ｏ−Ｌ、−Ｖ
   ａｔ−Ｘ−ＰＨＡ−！−ＡＬａ−ｐＡＬａ−Ｌ−Ｐ　ｒ
   　ｏ−１５Ａｔａ−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ５Ａｔａ−Ｌ−＾ｔ
   ａ−Ｌ−Ｐ　ｒ　ｏ−１５Ｐｈ　４−Ｘ−ＰＨＡ−計Ａ
   ７ａ−Ｌ−Ａｔａ−計Ｐｒｏ（、−Ｍｅｔ　−Ｘ−ＰＨ
   Ａ−計Ｐｈｅ−！−Ｖａｔ−計Ａｒｇ−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ
   −Ａ　ｒ　ｇ−Ｇｔｙ−↓−Ｐ　ｈ　ｃＧさ−ｐ　ｒ　
   ｏ−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ−Ａｒ　ｇツタｐｈｅ堆−ｐｒ　ｏ
   −Ｘ−Ｐ　ＨＡ−Ｌ−Ａ　ｔａ−Ｌ−Ａ　ｒ　ｇ−Ｌ−
   Ａ　ｒ　ｇ　−Ｘ−ＰＨＡ−１，−Ａｔａ−Ｌ−Ａｔａ
   −Ｌ−Ｐ　ｒ　ｏ−１，−Ｍｅ　ｔ　−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ
   −Ｐｈｊ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｐｈ　ｅ−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ
   −Ａｒｇ−ｘ −ＰＨＡ−Ｇｔｙ−Ｇｔｙ−Ｌ−Ｌｅ　ｕ　−Ｘ−ＰＨ
   Ａ−Ｇｔｙ−Ｌ−Ｐｒ　ｏ−計Ａｔａ−Ｇｔｙ−Ｌ７Ｐ
   ｒ　ｏ　−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ−Ｐｒ　ｏ−Ｌ−Ａｔａ−Ｇ
   ｔｙ−１ニーＰｒ　ｏ　−Ｘ−ＰＨＡ−Ｇｔｙ−Ｇｔｙ
   （−Ａｒｇ−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｐｈ≦辿７
   Ａ　ｒ　ｇ−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ−Ｐｈ　４−Ｇｔｙ−Ｇｔ
   ｙ（７Ａ　ｒ　ｇ−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ−Ｐ　ｒ　ｏ−！−
   Ｐｈ　ａ−計Ａｒｇ−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ−Ｉ　Ｌｅ　−Ｇ
   ｔｙ−Ｇｔｙ−Ｌ−Ａ　ｒ　ｇ−Ｘ−ＰＨＡ−Ｌ７Ｖａ
   ｔ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｔｙ−計Ａｒｇ−Ｘ（ここにＰＨＡ
   は、ポリヒドロキシアルカノイル基を表わし、Ｘは特Ｉ
   ｌｒ′ｌ：請求の範囲第（３）、（５１及び（７）〜ｉ
   １１項のいずｎか−に示した意味を有する）の中から選
   ばｎたものであることを特徴とする特許請求の範囲第（
   ７）〜［１１項のいずｎか７項記載の水浴性アシル化誘
   導体。 ａ’ａ　以下の誘導体 ルビシン リアマイシン ノルビシン リアマイシン −ＰＨＡ−Ｌ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｖａｔ−Ｌ−Ａｒｇ−ダウ
   ノルビシン−ＰＨＡ−Ｌ−ＰｈイーＬ−Ａ　ｔａ　−上
   −Ｌｙ　ｓ−ダウノルビシ／−ｐＨＡ−Ｇｔｙ−Ｇｔｙ
   −Ｌ５Ａｒ　ｇ−＃ウノルビシンーＰＨＡ−ＧＬｙ−Ｇ
   ｔｙ−計Ａ　ｒ　ｇ　−１−Ｌｅ　ｕ−タウノルビシン
   ーＰＨＡ−Ｇｔｙ−Ｇｔｙ−Ｌ７Ａ　ｒ　ｇ−アドリア
   マイシン−ＰＨＡ−Ｇｌｙ−Ｇｔｙ−Ｌ−Ａ　ｒ　ｇ−
   ｙ−Ｌｅ　ｕ−アドリアマイシン−ＰＨＡ−）−Ｐｒ　
   Ｏ−！−Ｐｈｅ−圭Ａｒ　ｇ−＃ウノルビシンーＰｉ−
   ＩＡ−１ニーＰｒ　ｏ−Ｌ７Ｐｈ　ｅ−Ｌ−Ａｒ　ｇ−
   計Ｌｅｕ−ダウノルビシン−Ｐ　ＨＡ−Ｌ−Ｐ　ｒ　ｏ
   −１５Ｐ　ｈ　ａ−Ｌ−Ａ　ｒ　ｇ−アドリアマイシン
   −ＰＨＡ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ、−Ｐｈｅ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ
   −Ｌｅｕ−アドリアマイシン−”ＰＨＡ−計Ｖａｔ−Ｌ
   −Ｌｅｕ−Ｇｔｙ−ｙ−Ａｒｇ−プリマキン−ＰＨＡ−
   １，−Ｖ　ａ　１−Ｌ−Ｌｅ　ｕ−Ｇｌｙ−１，−Ａ　
   ｒ　ｇ−りｒｈロキンの中から選ばまたものであること
   を特徴とする特許請求の範囲第（９１項記載の水浴性ア
   シル化誘導体。 （Ｉ３　アミノ酸、−２プチド又はＣ末端基が変更さ【
   たそ１らのものの誘導体を、ポリヒドロキシアルカノイ
   ル酸から誘導さｌｒｌ、たアシル化剤によるＮ末端基の
   アシル化反応にかけること全特徴とする特許請求の範囲
   第（１）〜ｕ３項のいずｎか１項記載のアシル化誘導体
   の製造方法。 ａ４１式Ｈ−（ＮＨ−ＣＨ−Ｃｏ）ｎ−Ｘ　（ＩＩ）（
   上式において、ｎ、Ｒ及びＸは、特許請求の範囲第１３
   １．１５１及び（７）〜ｉ［６項のいずｎか−に示した
   意味を有する） によって示さｎるペプチド又はアミノ酸の酵導体會、出
   発物質として使用し、式 ％式％（） （上式においてＲ，、ｍは前述した意味を有する）によ
   って示さｎるポリヒドロキシアルカノイル酸の活性誘導
   体と１式（ＩＩ）によって示さ扛る化金物を反応させ、
   式 によって示さｎる化合物とし、所望ならばこの化合物を
   、既知の方法によって、式（１）の他の任意の誘導体に
   転化させることを特徴とする特許請求の範囲第（１３項
   記載の製造方法。 αタ　活性誘導体が前記ポリヒドロキシアルカノイル酸
   のＮ−ヒドロキシスクシニミドのエステル又はラクトン
   であることｔ％徴とする特許請求の範囲第１項記載の製
   造方法。 ０８　″ｅプチド、Ｃ末端基が変更さルたアミノ酸及び
   Ｃ末端蚕が変更さ牡たペプチドの中から選ばｎた化合物
   の水溶性誘導体としての、Ｎ末端基がポリヒドロキシア
   ルカノイル基によってアシル化さｎた前記化合物の（Ｎ
   末端）アシル化誘導体の使用。 Ｑ７）　水溶性誘導体が特許請求の範囲第１２１〜［３
   項のいずルか−に示さｎたものであることケ特ダ４とす
   る特許請求の範囲第００項記載の使用。 αδ　式■の化合物〔式においてＸ　＝　ＮＨ−Ｒ，、
   Ｒ。 はアミノ化ドラッグの残基全表わし、又ｉｘは。 −Ｈ、−ＯＨ、−ＣＦ４２Ｃ１、−０−アルキル、−０
   −Ａｒ（Ａｒ　は場合によって置換されたアリール茫）
   、又は−ＮＨ−Ａｔｋ−）（ｇ−’Ｃ，ｔ　（Ａｒｋは
   アルキレン基）の中から選ばれた基ｘ３　を表わす〕の
   、水浴性薬物としての、特許請求の範囲第（１１１９項
   に従う使用。 αＩ　％許請求の範囲第α枠項記載の水浴性薬物の少く
   とも一つを活性成分として含有したことを特徴とする医
   薬用組成物。