JPS6019906B2 - ２−アリ−ル−または２−ピリジル−１，２−ベンズイソチアゾリノン−１，１−ジオキシド - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規な２ーアリールー１，２ーベンズィソチァ
ゾＩＪ／ン−１，１−ジオキシド化合物に関するもので
ある。

この新規化合物はプロテアーゼ（ｐｒｏにａｓｅ）、特
にェラスターゼを選択的に阻害し、気腫、リウマチ様関
節炎、他の炎症疾病を治療に有用である。過去に種々の
２ーアリールー１，２−ペンズイソチアゾリノン−１，
１−ジオキシド化合物が製造されている。

ルイスＬ．バムバス、複索環式化合物の化学、第４巻、
第３３０〜３３９頁、インターサイエンス出版（１９５
２王）は２ーフヱニル−、２−（４−ニトロフエニル）
−、２ーフエニルスルホニル−、２一（２一クロロシク
ロヘキシル）一、および２一（２一，３一，および４−
トルイル）一１，２−ペンズイソチアゾリノン−１，１
ージオキシドを開示している。しかしながらこれらの２
ーアリールー１，２ーベンズイソチアゾリノン−１，１
−ジオキシド化合物は本発明の化合物と同一ではなく、
しかもプロテアーゼ、特にヱラスターゼを選択的に阻害
し気瞳、リウマチ様関節炎、他の炎症疾病を治療する方
法における本発明の化合物の活性を有しておらず示唆も
していない。Ｒ．フイシイアおよび日．ファン、、、ベ
ンズイソチァゾロソについて：広範囲の制菌性および制
菌作用活性シリーズ″医薬研究（ＡｒｚｎｅｊｍＭｅｌ
Ｆｏｒｃｈｕｎｇ）第１４巻（１２）第１３０１頁（１
９６山王）には多数のペンズィソチアゾ。

ンを開示している。しかしながらこれらのペンズイソチ
アゾロンは１，１−ジオキシド化合物ではなく、従って
本発明の化合物と同一ではない。さらにその上それらは
、ブロテアーゼ、特にェラスターゼを選択的に阻害し、
気腫、リウマチ様関節炎、他の炎症疾病を治療する方法
における本発明の化合物の活性を有しておらず示唆もし
ていない。ドイツ公開明細書第２６３６５９叫号は一定
のアシルサッカリンおよびかかる化合物でェラスターゼ
を阻害し、気瞳を袷療する方法を開示している。

しかしながらそれらのアシルサツカリン化合物は本発明
の化合物と同一ではなく、しかも本発明の化合物がさら
に安定な化合物であり、治療上価値のあるプロテアーゼ
書活性にさらに高い特異性を提供するものであることは
予期されるものではない。多くの異なったプロテアーゼ
、または蛋白質分解酵素はヒトを含む種々の動物の典型
的な炎症反応で生じる結合組織破壊の開始にそして永続
して包含されるものである。

蛋白酵素は、血液の凝塊の消化、形成および溶解、異種
細胞および生体との免疫反応および精子による卵子の受
精のような種々の生物学的活性に欠くことのできない蛋
白質分解酵素の中で重要な一員である。

蛋白質分解酵素または蛋白質カッティング酵素はその作
用が断片にそれらを分裂させることによって他の蛋白質
に変質したり、あるいは分解することができる蛋白質で
ある。ェラスターゼはプロテアーゼの一種であり、脂肪
族アミノ酸に隣接する蛋白質鎖の中間に結合して作用す
る。

ェラスターゼは天然基質に対して最も広幅なスペクトル
を有することから特に興味深いものである。特に額粒球
のェラスターゼは顎粒球が多くの臨床上重要な炎病疾病
に特徴となる急性炎症に、そして炎症の慢性症状の急性
の病勢悪化に関係することから重要である。額粒球ェラ
スターゼは結合組織のェラスチン（弾性素）、プロテオ
グリカンおよびコラーゲン（勝原質）に作用し、Ｃ５を
活性化して有力な化学戦術因子（ｃｈｅｍｏはｃｔｉｃ
ｆａｃｔｏｒ）Ｃ５ａを放出しそしてキニノーゲンから
キニンを生じることができる。

またェラスターゼは炎症の慢性相において大部分を占め
る細胞タイプの活動性大食細胞の重要な分泌生成物であ
ることが報告されている。プロテアーゼはそれにしっか
りと結合することによって酵素の活性位置を妨げる阻害
剤によって不活性化することができる。

天然に生じるプロテアーゼ阻害剤はそれらを包含する範
囲内であらゆる蛋白質を破壊するので生体の安寧に極め
て重大な制御または防御機構要素を形成する。天然に生
じる酵素阻害剤は、結合基質に極めて類似している結合
範囲に配置を展開している。それが阻害剤がしっかりと
酵素に結合する理由の一部分である。（ストラウドい蛋
白質カッティング蛋白質系−Ｓｃｉ．Ａｍ．１９７仏王
７月、第７４〜８８頁）。ヒトの血清中のａ，一抗トリ
プシン、糟蛋白質はトリプシン、キモトリプシン、プラ
ズミン、カリクレイン、ェラスターゼおよびトロンゼン
を包含する広幅阻害スペクトルを有する。血清ね，一抗
トリプシン中の著しい減少は肺気腫と連合している（ェ
リックソン、Ｓ．い肺気種およびａ，一抗トリプシン欠
乏″ Ａｃね．Ｍｅｄ．Ｓｃａｎｄ．１９６４年、１７
５、１９７）。その後の研究がこの観察を確立し拡大し
ている（モールス等日肺閉済症に対するａ，一抗トリブ
シンレベルの関連についての共通性研究″医学ニューイ
ングランドジャーナル、第２９２巻、Ｎｏ．６、第２７
８頁、１９７３王、２月６日）。気瞳は実験動物におい
て蛋白質分解酵素、パパィンの気管支樹枝状構造に階霧
注入法によってそしてさらに最近では大の多形核に富ん
だ白血球均等質によって実験的に誘発されている（マス
等、い実験気腫の誘発″呼吸疾病のアメリカ報告書第１
０母蓋、第３８４頁、１９７２王）。病理学上の変化は
ヒトの腕気腫と同様でありそしてかなり似ている。また
気管内に滴下したェラスターゼは腕胞管および腕砲を有
する腕弾性素において著しい変質を生じる（ジョハンソ
ン等、”肺の構造と作用におけるェラスターゼ、勝原酵
素およびハパィンの比較″ＡｍｅｒＲｅｖＲｅｓｐＤｊ
ｓ ｌ９７１年、第１０２蓋、第９０８頁）。気腫を誘
発するハパインはハムスターにおいてヒトのａ，一抗ト
リプシン（ＨＡＡＴ）を阻害する。ハパィンはＨＡＡＴ
によって阻害されない少しの蛋白質分解酵素の一つであ
るから、ＨＡＡＴが露出に続いてハムスターの肺に侵入
する多形核（ＰＭＮ）白血球および腕胞大食細胞によっ
て放出されるェラスターゼ様酵素を阻害することによっ
て作用することを見出している（マルトラナ等、”ヒト
のａ，一抗トリプシンによるハムスターにおける気腫誘
発パパィンの阻害″Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌ．第５２巻、Ｎｏ．３、第７５８〜７５
９頁、１９７４王およびカプラン等いェラスターゼを有
する気腫の誘発″実験と臨床医学雑誌第８２蓋、蛇．３
、第３４９〜３５６頁、１９７２王９月）。

ェラスターゼ阻害剤は気腫中の多形核（ＰＭＮ）白血球
および肺胞大食細胞によって放出されるヱラスターゼ様
酵素の制御に使用することができる。類リウマチ関節炎
において抗原／抗体複合体は骨液中に炎症部分に化学戦
術上引き付けられるそして細胞質封入体として白血球中
に試明される（オロンスキー等、いヒトの白血球から軟
骨ムコ多糖類を分解する中性プロテアーゼの放出″実験
医学雑誌、第１総巻、第４６１〜４７２頁、１９７３王
）。

多形核白血球（ＰＭＮ）は免疫反応体または微生物を食
作用するために急性炎症浸出液に入り込む。食作用中Ｐ
ＭＮ酵素はしばしば細胞外に放出される。細胞外放出が
宿王の阻害剤を圧倒するだけ十分な程度に生じる場合、
ＰＭＮ物質によって製造される組織損傷はそれらの有益
な効果をかなり減少してしまう。ヒトにおける中性蛋白
質分解活性の大部分は通常弾性素様酵素に属している（
ジャノフ、い‘ヒトの白血球額粒のアラニンｐ−ニトロ
フェニルェステラーゼ活性″生化学ジャーナル、第１１
２巻：第１５７〜１５９頁、１９６乎王）。従ってプロ
テアーゼ、特にェラスターゼ、阻害剤は種々の炎症疾病
および症状の過程で生じる、それらの疾病および症状が
免疫学的発生であってもあるいはなくても組織損傷およ
び浮腫のような望ましくない症状を制御するために使用
することができる。組織の損傷および望ましくない症状
は組織損傷および望ましくない症状の直接関係のある原
因作用物質であるプロテアーゼ、特にェラスターゼを放
出する炎症部位で特定の細胞によって媒介される。従っ
てプロテアーゼ、特にヱラスターゼ、阻害剤は気腫、リ
ウマチ様関節炎および種々の炎症疾病、例えば気管支炎
の治療に有用である。しかしながら、本発明の新規な２
−アリール−１，２ーベンズイソチアゾリノンー１，１
ージオキシド化合物で得られる重要な改良点は特定のプ
ロテアーゼおよびェラスターゼの選択的または特異的阻
害であり、一方他のプロテァーゼおよびェラスターゼは
実質上そのまま残っている。

特に本発明の新規な阻害剤はヒトのＰＭＮ（多形核白血
球）ェラスターゼおよび牛のキモトリプシンの優れた阻
害を示し、一方豚のバイクレアチンェラスターゼ、牛の
トリプシンおよびほとんどの場合、以下に更に詳細に示
される通りヒトのＰＭ肘カテブシンＧの阻害にほとんど
示さない。〔阻害剤の研究においてヒトのプロテァーゼ
およびェラスターゼとの活性の予言として動物のプロテ
アーゼおよびェラスターゼの使用は（酵素学方法、第幻
１巻、アカデミックプレス、１９７位王）に包含される
構造中アミノ酸組成物の高い程度で同族関係および相似
性があるため十分認められる。〕ＰＭＮ（多形核白血球
）ェラスターゼを阻害し、一方トリプシンを阻害しない
本発明の新規な阻害剤の能力は治療上価値がある。

気腫、リウマチ様関節炎および他の炎症疾病および症状
の破壊相におけるＰＭ肘ェラスターゼの役割は既に上記
に詳細に記載している。他方トリプシンは、ヒトの代謝
において、その正常な作用を阻害しないため望ましい種
々の本質的な役割を有する蛋白質処理過程加水分解の重
要な分類の成分である（シャウ、”類縁標示によって作
用する合成プロテアーゼ阻害剤″蛋白酵素および生物学
的制御、コールドスプリングハーバーラボラトリ、第４
５５〜４６５頁の第４５９頁において、１９７３王）。
さらにその上合成阻害剤の望ましい特性間にプロテアー
ゼの一種または少量に対して特異性があることは十分理
解される（パワーズ等、顎粒球ェラスターゼとカテプシ
ン（Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ）Ｇの合成阻害剤″ ヒトの多
形核白血球の中性プロテアーゼ、第２２１〜２３３ １
９７８年、コーェン、腕気腫におけるェラスターゼ阻害
剤補欠療法の評価に対する作用グループの報告、第８〜
９頁、１０月１７〜１８ １９７群王、ベセスダマリー
ランド、ラーセンおよびショウ、”種々の出発（ｄｅｐ
ａｒｔｉｎｇ）グループを利用する試薬によるキモトリ
プシンの活性部位処方アルキルイピ薬剤化学雑誌、第１
９巻、Ｎｏ．１１、第１２８４〜１２８６頁、１９７６
王、ゥオングおよびシャゥ、ぃ活性部位処方スルホニル
化によるトリプシン様プロテアーゼの不活性イゼ生化学
と生物物理学の記録、１７６、第１１３〜１１８頁、１
９７６王、アベレスおよびマィコツク、１１自殺酵素不
橋性斉ｕ″ケミカルリサーチ報告書、第９巻、肋．９、
１９７母王、ケットナーおよびシャウ日アルギニンク。
ロメチルケトンのべプチドの合成″生化学、第１７巻、
Ｎｏ．２２、第４７７８〜４７８３頁、１９７８年、ア
オヤギ、い微生物発生の蛋白質分解酵素阻害剤の構造と
活性″微生物により産出した生物活性べプチド、チャプ
ター７、第１２９〜１４０頁、ハルステツドプレス、１
９７母王、およびクーンおよびセニア、肺、第１５９蓋
、第１９１頁、１９７洋王）。特定の新規な２ーアリー
ルー１，２ーベンズィソチアゾＩＪノンー１，１−ジオ
キシド化合物はプロテアーゼ、特にェラスターゼを阻害
し、気瞳、リウマチ様関節炎および他の炎症疾病を治療
する方法に有用である。ごれらの方法は治療上有効量の
式：〔式中、Ｒは‘ａ｝ （式中、ｎは１〜５である；および×は（１’フルオロ
｛２’ニトロ、但しＸがニトロのみの場合はｎは２で
なければならないそしてＸは２，４−または３，５−ジ
ニトロでなければならない 糊トリフルオロメチル‘４
）シアノ ｔ５｝Ｃ，〜３アルコキシカルボニル【６｝
カルボキシル；および（７’Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ，〜３アル
キル）スルフアミルから独立して選択される。

）または（ｂ）（式中、ｍは１または２であり、そして
Ｙはシアノまたはニトロである）である〕を有する化合
物の投与からなるものである。

好ましい態様において、ｎは１または２であり、Ｙはニ
トロまたはシアノである。さらに好ましい態様において
、ｎは２であり、Ｘはニトロ、トリフルオロメチル、ま
たはシアノである。

そしてｎは５であり、Ｘはフルオロである。ブロテアー
ゼ、特にェラスターゼを阻害し、それ故気膳、リウマチ
様関節炎および他の炎症疾病を治療するために有用であ
る本発明の各化合物は次の新規化合物である：２−（２
，４ージニトロフエニル）一１，２−０ ペンズイソチ
アゾリノンー１，１ージオキシド２−（２，３，４，５
，６ーベンタフルオロフヱニル）一１，２ーベンズイソ
チアゾリノン−１，１−ジオキシド２−（２ーニトロー
４一トリフルオロメチルフエニル）−１，２ーベンズイ
ソチアゾリノンー１，１−ジオキシド２一（２ーシアノ
ー４ーニトロフエニル）一１，２ーベンズイソチアゾリ
ノンー１，１−ジオキシド２−（４ーニトロー５ートリ
フルオロメチルフエニル〉一１，２ーベンズイソチアゾ
リノンー１，１ージオキシド２−（２，４ージシアノフ
エニル）一１，２ーベンズイソチアゾリノンー１，１ー
ジオキシド２−（３，５−ジニトロフエニル）一１，２
ーベンズイソチアゾリノン−１，１ージオキシド２−（
３−ニトロピリド−２ーイル）一１，２−ペンズイソチ
アゾリノンー１，１．−ジオキシ‐ド２一（５ーニトロ
ピリドー２ーイル）一１，２ーベンズイソチアゾリノン
ー１，１ージオキシド２−（５−シアノピリド−２ーイ
ル）一１，２−ペンズイソチアゾリノン−１，１ージオ
キシド２−（３，５−ジニトロピリド−２−イル）一１
，２−ペンズイソチアゾリノン−１，１−ジオキシドま
た本発明は、プロテアーゼ、特にェラスタ−ゼーを阻害
し、気腰、リウマチ様関節炎および他の炎症疾病を治療
し、かかる治療を必要とする患者に式１の化合物の治療
上有効量を投与することからなる新規な方法に関するも
のである。

本発明の方法に従うプロテアーゼ、特にェラス３ターゼ
の阻害および気腫、リウマチ様関節炎および他の炎症疾
病の治療は無毒性の製薬上認められる担体中の式１の化
合物またはそれらの混合物を患者に経口的に、直腸に、
非経口的にまたは局所的に投与することによって達成さ
れる。

３無毒性の製薬上認められる担体は具体的には
固体または液体のいずれかである。典型的な固体担体は
乳糖、コーンスターチ、ゼラチン、タルク、ステアリン
酸、ステアリン酸マグネシウム、白陶土、白糠、寒天、
ペクチンおよびアラビアゴムで４ある。典型的な液体損
体は、ピーナッツ油、オリーブ油、ゴマ油および水であ
る。同機に迫体または希釈剤は、グリセリルモノステア
レートまたはグリセリルジステアレートのような時間遅
延物質を単独でまたはワックスとともに包含することが
できる。本発明の治療上有用な組成物の異なった製薬品
は配剤として利用することができる。

具体的には、固体担体を使用する場合には、組成物は、
錠剤、カプセル剤、散剤、トローチ剤またはロゼンジの
形態を採ることができ標準の製薬技術によって製造する
ことができる。液体担体を使用する場合には、製剤は軟
ゼラチンカプセル、シロップ剤、水剤、乳剤または懸濁
液剤の形であり、あるいは液体はェアロゾルまたは噴霧
器によって頃霧することができる。坐薬は式１の化合物
を室温で固体の適当な無刺織賦形剤を混合することによ
って通常の方法によって製造することができる。かかる
賦形剤の好例はカカオバターおよびポリエチレングリコ
ールである。局所適用のためのゲル剤、ローション剤お
よびェアロゾルスプレー剤は通常の方法で製造すること
ができる。活性化合物はプロテアーゼ、特にヱラスター
ゼを阻害するために十分な治療上有効な量で投与される
。

気腫の治療はェラスターゼの阻害が症状の進行を阻止す
る一条件である。従ってェラスターゼを阻害するために
必要な活性化合物量は気腫を治療するために必要な量で
ある。活性化合物は単独でまたは製薬組成物として活性
化合物を１日当り体重ｌｋ９当り約１．０〜１００の９
（１日当り患者に対して５０の９〜５．０夕）、好まし
くは１日当り体重ｌｋ９当り約１．５〜１５の９の量で
投与するのが有利である。日用量は一回または数回用量
で与えることができる。本発明の治療方法は上記に例示
した通りの無毒性の製薬上認められる坦体と混和した式
１の化合物を患者（ヒトまたは動物）に投与することか
らなるものである。

好ましい用量範囲が与えられるがあらゆる特定患者に対
する用量レベルは使用される特定化合物の活性に依存す
る。また、薬剤の作用を加減する他の多くの要素は薬剤
の治療上の使い方、例えば体重、性、食事、投与時間、
投与ルート、緋池の割合、薬剤配合、反応感度および特
定の疾病の苦しさについて当業者による処方せんに採用
される。また本発明は式： （式中、Ｒは上記と同様の意味を有する。

）を有する新規な化合物に関するものである。好ましい
化合物は、ｎが１または２でありＹが＊ニトロまたはシ
アノである化合物である。

さらに好ましい化合物はｎは２であり×がニトロ、トリ
フルオロメチルまたはシアノであり、そしてｎが５であ
り×がフルオロである化合物である。なお、さらに本発
明は、次の等式によって示される一連の反応を実施する
ことによって新規な式１の化合物を製造する方法に関す
るものである：式中Ｒは上記と同様の意味を有し、Ｈａ
ｌはクロロ、ブロモまたはヨード、好ましくはクロロで
ある。

第一反応段階において、２，２′ージチオジ安息香酸二
硫化物はチオニルクロリドのような酸塩化物を製造する
ために薬剤で処理する。

使用することができる他の薬剤は、三ハロゲン化リン、
五ハロゲン化リン、オキシ三ハロゲン化リンおよびホス
ゲンを包含する。好ましくはハロゲン化チオニルがそれ
自身でまたは不活性溶媒中で使用される。不活性溶媒は
、トルェン、キシレンおよび特にベンゼンのような炭化
水素であることができる。２，２′ージチオジ安息香酸
およびチオニルクロリドとの混合物は反応が実質的に完
了するまで蝿拝しながら還流される。

第二反応段階では、ハロゲン化がメチレンクｏリド、ク
ロロホルムおよび四塩化炭素のような塩素化炭化水素ま
たはベンゼンのような炭化水素から選択される不活性溶
媒中で行なわれる。

ハロゲン化剤は、クロロコハク酸ィミド、Ｎーブロモコ
ハク酸ィミド、ｔ−ブチル次亜塩素酸のような有機次亜
塩素酸塩、液体臭素または好ましくは塩素ガスであるこ
とができる。ハロゲン化は約０〜１００００の温度で、
好ましくは包囲温度で行なわれる。反応時間は臨界的で
はなく、反応は好ましくは実質的に完了するまで行なわ
れる。圧力は臨界的ではなく、ハロゲン化は一般に開放
系で大気圧で行なわれる。製造される２−ハロチオベン
ゾイルハラィドは結晶化および炉週によるなどの通常の
方法で回収される。第三反応段階では２−ハロチオベン
ゾィルハラィドは式：Ｒ−Ｎ比 （式中Ｒは上記に定義した通りである。

）を有する化合物と反応させる。これらの化合物間の反
応、分子内環化はベンゼンのような炭化水素、ジェチル
エーテルまたはテトラヒドロフランのようなエーテル、
ジメチルホルムアミドのようなアミドまたはメチレンク
ロリド、クロロホルムまたは四塩化炭素のようなハロゲ
ン化炭化水素である中性溶媒中で行なわれる。反応は炭
酸ナトリウムのようなアルカリ金属炭酸塩、炭酸カルシ
ウムのようなアルカリ士類金属炭酸塩、重炭酸ナトリウ
ムのようなアルカリ土類金属車炭酸塩トリェチルアミン
またはピリジンのような第三級アミンである緩和な塩基
の存在下で行なわれる。包囲温度で液状である緩和な塩
基はまた溶媒として過剰に使用することができる。反応
は０〜１５０ｑＣで、好ましくは包囲温度で行なわれる
。反応時間は臨界的ではなく、そして反応は好ましくは
実質的に完結するまで行なわれる。圧力は臨界的ではな
く、反応は一般に開放系で大気圧で行なわれる。製造さ
れる２−アリールー１，２ーベンズイソチアゾリノンは
、結晶化および炉週によるなどの通常の方法で回収され
る。第四および最終反応段階では、２‐ァリール‐１，
２−ペンズィソチアゾリノンを酸化し式１の化合物を製
造する。

この酸化は過酸化水素または過マンガン酸カリウムのよ
うな適当な酸化剤で完了され、あらゆるアルカノール酸
溶媒中、包囲温度から１２０こ０までの温度で行なわれ
る。次の実施例は、本発明の化合物および組成物が製造
される方法を具体的に示すものである。部は特にこわれ
ない限りすべて重量部で示される。実施例 １２−（２
，４ージニトロフエニル）一１，２一ペンズイソチアゾ
リノン−１，１−ジオキシドＡ．２一（２，４−ジニト
ロフエニル）−１，２−ペンズイソチアゾリノンピリジ
ン３０の‘中の２，４−ジニトロアニリン５．３５夕（
０．０２９モル）の縄梓懸濁液に四塩化炭素２０地中の
２−クロロチオベンゾイルクロリド６．０夕（０．０２
９モル）溶液を添加した。

温度を５０００に上昇させ、添加がすべて完了した後、
沈殿が生じた。１時間後、温度を室温に下げ沈殿を炉過
して除去した。

この沈殿を水と混合し不溶性のゴム状物質を生成した。
ゴム状物質を水で洗浄した後、生成物を水の添加によっ
てアセトンで結晶化させ生成物２．５タｍ．ｐ．１８８
〜１９０午０を得た。Ｂ．２一（２，４−ジニトロフエ
ニル）−１，２ーベンズイソチアゾリノンー１，１ージ
オキシド氷酢酸１３の【および９０％過酸化水素２．０
机【溶液に２一（２，４−ジニトロフヱニル）一１，２
−ペンズイソチアゾリノン２．０夕を添加した。

温度が１００ｏｏになるまで温度を徐々に上昇させ、そ
こで１時間維持した。冷却後、混合物を水２０の【で希
釈し、沈殿を炉週で除去した。沈殿を水をゆっくりと添
加してジメチルホルムアミド５Ｍとアセトン５泌で結晶
化した。最終生成物の収量は８００の９、ｍ．Ｐ．２２
５〜２２６℃であった。実施例２〜１９ ２，４ージニトロアニリンを等量の適当な置換アニリン
に置き換えた以外は、上記実施例１の操作に従い、以下
の表１に記載した２一Ｒ−１，２一ベンズイソチアゾロ
ンおよび２−Ｒ−１，２−ペンズイソチアゾリノン−１
，１ージオキシドを製造した：表【 実施例 Ｒ ｍ．ｐ．（℃）ｍ．ｐ．（℃）
２，３，４，５，２ ６−ペンタフル １３１−１３
３ １６５‐１６７オロフエニノレ３ ２，４−ジニ
ト １８８一１９０２２５一２２６ロフコこニノレ４
字子〆ラフ三竺オ岳１７８−１７９１４９−１５０５
２ーシアノー４一 ２２１−２２２ ２４７−２４８
ニトロフエニル２‐ニトロ‐４ ６ −トリフルオロ １７３‐１７４ １９６−１９
７メチルフエニル７ ４−エトキシカル １５２−１
５３ １３５−１３６ボニルフヱニル２‐トリフルオ ８ ロメチル‐４‐ １３６−１３９ １８４‐１８７
ニトロフエニル３−トリフルオ ９ ロメチル−４− １７１‐１７２ １８２‐１８
３ニトロフエニル１０ ４‐力ルボキン ２７５−２８
５ ２３６−２３８フエニル４‐（Ｎ，Ｎ‐ １１ ジメチルスルハ １９１−１９２ １９３−１９
５ミルフエニル１２ ２，４ジシアノ ２３９一２４
０２７５−２７６フエニノレ１３ ２−シアノフエ
１８２一１８３ ２０９‐２１２１４ ３ーシアノフ
エ １８３−１８４ １７３一１７４１５ ２−メト
キシカル １１０−１１１ ２１９一２２１ボ中−ノレ
フエーノレ・６ 卓；）ラフ三竺オ辛１３１−１３３１
０３−１０４１７ ３，５−ジニト ２４５−２４６
１７５−１７６ロフエニル実施例 １８ ２−（５−ニトロピリド−２ーイル）−１，２−ペンズ
イソチアゾリノンー１，１ージオキシドＡ２ークｏｏチ
オベンゾイルクロリド 櫨拝器を備えた反応フラスコに２，２−ジチオジベンゾ
イルクロリドジサルハイド２０夕と四塩化炭素１６０叫
を添加した。

塩素ガスを４０分間反応混合液に通過させ、その後、反
応混合液を炉過し、溶媒を除去し生成物を結晶化した。
次いで生成物を四塩化炭素で再溶解させ８物‘まで希釈
した。Ｂ．２一（５−ニトロピリドー２ーイル）−１，
２−ペンズイソチアゾＩＪノン反応フラスコに２−アミ
ノ−５−ニトロピリジン４１夕、ピリジン１５の‘およ
び段階Ａで製造した２ークロロチオベンゾイルクロリド
溶液２０泌を添加した。

次いで四塩化炭素２０瓜【を添加し、反応混合液を燭拝
しながら１５分間６０ｏＣに加熱した。反応混合液を徐
々に冷却し、生成した沈殿を炉過で分離し、７夕、ｍ．
ｐ．３１７〜３１８ｏＣを回収した。Ｃ‐２−（５−ニ
トロピリド−２−イル）−１，２ーベンズイソチアゾリ
ノンー１，１−ジオキシド反応フラスコに、段階Ｂで製
造した２−（４−ニト。

ピリド−２−イル）−１，２−ペンズイソチアゾリノン
２夕、酢酸１３机【および９０％過酸化水素溶液２の上
を添加した。反応混合液を１００００に徐々に加熱し、
次いでゆっくりと冷却させ、その後水を添加して反応混
合液を炉過した。生成物３００の９はｍ．ｐ．２７５〜
２７７０を有した。次いで生成物をアセトンで結晶させ
ｍ．ｐ．２７９〜２８０００を有することがわかった。
実施例１９〜２１ 実施例１８で使用した２−アミノー５−ニトロピリジン
を以下の表０で説明する化合物を製造するために必要な
適当な２ーアミノピリジンの等量に置き換えた以外は上
記の実施例１８の操作に従った。

表ロ 実施例 Ｒ ｍ．Ｐ．（℃）ｍ．ｐ．（℃）１
９ ３−ニトロピリ ２２４−２２５ ２１６−２１
９ド‐２‐イル２。

ミニさまキラリ３０２−３０３２４９−２５０３，５−
ジニト２１ ロピリド−２− ２３９−２４０ ２２４
−２２６イル上記に記載した通り、本発明の２−アリー
ル−１，２ーベンズイソチアゾリノンー１，１−ジオキ
シド化合物を酸化剤として具体的には酢酸中の過酸化水
素を使用して相当する２ーアリール−１，２−ペンズィ
ソチアゾリノン化合物の酸化によって製造した。

使用される本発明の２ーアリールー１，２−ペンズイソ
チアゾＩＪ／ン−１，１ージオキシド化合＊物を製造す
る他の方法【１適当な置換ァニリンをｏ−スルホ安息香
酸環状無水物と反応させ、そして■ボリリン酸中１８０
〜滋ぴ○の温度で段階‘１１の生成物を加熱させる段階
からなり、希望する生成物を得ることからなるものであ
る。

これらの反応は次の図式で具体的に示される：式中Ｒは
さらに上記で記載したのと同様の意味を有する。

なおさらに本発明の２ーアリールー１，２−ペンズィソ
チアゾリノンー１，１ージオキシド化合物の他の方法は
‘１’オキシ塩化リンの存在下で適当に置換したァニリ
ンをｏースルホ安息香酸環状無水物とともに加熱し‘２
）塩酸中で段階【１１の生成物を還流させる段階からな
り希望する生成物を得るものである。

これらの反応は次の図式で具体的に示される：次の実施
例は、上記の製造方法が実施される方法を具体的に示す
ために提供するものである。

実施例 ２２２−（２，３，４，５，６−ペンタフルオ
ロフエニル）−１，２ーベンズイソチアゾリ／ンー１，
１−ジオキシド温ジオキサン７５必中のｏースルホ安息
香酸環状無水物１０夕（０．０５４モル）溶液に２，３
，４，５，６ーベンタフルオロアニリン１０夕（０．０
鼠モル）を添加した。

すぐに沈殿が生じた。蒸気浴上で１虫時間暖めた後、反
応混合液を室温に冷却し次いで沈殿をエーテルで洗浄し
て塩１４夕（７５％収率）を得た。塩３夕とポリリン酸
１５の‘の混合液を２０ぴ０に加熱したシリコン浴中に
浸潰した。７分後、溶液を少し冷却し水５０の‘で希釈
した。

沈殿を炉過して除去した。このかさで数回操作した後、
合わせた沈殿の重量は３．０夕（１６％収率）を有した
。これを水約７の‘の緩慢な添加によってアセトン４０
叫から再結晶させた。全収率は１５％（２．８夕）であ
り生成物のｍ．ｐ．は１６８〜１６９ｑｏであった。実
施例 ２３ ２一（４ーフルオロフ工二ル）一１，２ーベンズイソチ
アゾリノンー１，１−ジオキシドＡＮ一〔２−（４ーフ
ルオロフエニル）一１，２−ペンズィソチァゾ‐ルー３
（が）‐ィリデン〕ベンゼンアミンーＳ，Ｓージオキシ
ドオキシ塩化リン３５私中のｏースルホ安息香酸環状無
水物５．５２夕（０．０３モル）の懸濁液にｐーフルオ
ロアニリン６．７３夕（０．０６モル）を５分間にわた
って添加した。

反応は発熱し澄明な溶液を生じた。この溶液を２時間還
流下で加熱し、次いで過剰のオキシ塩化リンを真空中で
除去した。濁った残澄を炉過できる固体を生成するまで
氷水１５０の‘で糟拝した。炉過で固体を分離し、次い
でクロロホルム７５泌に溶解し雲点までエーテルで希釈
した。溶液をケィソウ士で炉適し、その後石油エーテル
を炉液に添加し、最終生成物の結晶が生じた。Ｂ．２−
（４ーフルオロフ工二ル）一１，２−ペンズイソチアゾ
リノンー１，１−ジオキシド上記段階Ａで製造した化合
物の混合液を燈拝し濃塩酸６０肌と共に還流下で２．虫
時間加熱した。

常に固体が存在していることがわかった。冷却後固体を
炉遇して除去した。本発明の新規な２−アリールー１，
２ーベンズィソチアゾリノン−１，１ージオキシド化合
物によって提供されるプロテアーゼ、特にェラスターゼ
の選択的阻害を各々プロテアーゼとェラスターゼに関し
て評価し、前述のバムバスの関連化合物とドイツ公開明
細書第２６３６５９ｙ号のアシルサツカリンの阻害活性
と比較した。

それらの結果並びに使用した操作を次の実施例で説明す
る。実施例 ２４ 操作 ヒトのＰＭＮエラスターゼー 試薬： Ｎートリス（ヒドロキシメチル）メチル一２−アミノェ
タンスルホン酸０．２ｈＭＮ−ｔ−ボックスーアラニル
ーアラニループロリルーアラニル−ｐ−ニトロアニリド
コ欧ｃ−ＡＡＰＡＮ基質を製造するために固体（ｍ．ｗ
．５５０）をまず１０．０の【ＰＭＳＯ中に溶解した。

次いでｐＨ７．５の緩衝液を最終容量１００の‘に添加
した。ェラスターゼ活性を含有するヒトの多形核白血球
（ＰＭＮ）の粗抽出物使用直前にＤＭＳＯ中に溶解した
試験される阻害剤分析操作： クベット中０．２ｈＭＢｏｘ一ＡＡＰＡＮの１．０の‘
に阻害剤を含有または有しないＤＭＳＯＯ．０１〜０．
１の‘を添加した。

混合した後、試験化合物の存在によりいかなる自然加水
分解をも検出するために４皿ｈ山で定量した。次いでＰ
ＭＮ抽出物を添加し４１仇ｈ山で△ＯＤ／分を測定し記
録した。ギルホード２４０またはべツクマンＤＢ−Ｇ分
光光度計を使用した。結果：結果はコントロールの△Ｏ
Ｄ／分中％減少で示されると同じく試験化合物によって
生じた％阻害として得られた。

次いでｍ則を％阻害曲線から出した。注解： 粗ＰＭ皿抽出物中のェラスターゼ活性は一つの製剤から
他のものへと変化することができる。

各新しし、バッチのコントロールを操作し分析操作で添
加した容量は活性に従って調節した。豚のパンクレアチ
ンェラスターゼ 試薬： Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−２−アミノェ
タンスルホン酸０．２ｈＭＮ−ｔ一Ｂｏｘーアラニルー
アラニルーブロリルーアラニル一ｐーニトロアニリド＝
Ｂｂｃ−ＡＡＰＡＮ基質を製造するためにまず固体（ｍ
．ｗ．５５０）をＤＭＳＯＩＯ．０の【に溶解した。

次いでｐＨ７．５の緩衝液を最終容量１００の‘に添加
した。精製した豚のパンクレアチンェラスターゼの溶液
（ＰＰＥ）（ワーシィソトンｗｏれｈｊｎｇｔｏｎ）試
験される阻害剤を使用直前にＤＭＳＯ中に溶解した。分
析操作：クベツト中０．２ｈＭＢｏｘ−ＡＡＰＡＮＩ．
０の‘に阻害剤含有または含有しないＤＭＳＯＯ．０１
〜０．１の‘を添加した。

混合した後、試験化合物の存在によりいかなる自然加水
分解をも検出するように４Ｍｈムで定量した。次いでＰ
ＰＥ抽出物０．０５の‘を添加し４１血。で△ＯＤ／分
を測定し記録した。ギルフオード２４０またはべックマ
ンＤＢ−Ｇ分光光度計を使用した。結果： コントロールの△ＯＤ／分の％減少によって示されると
同じく試験化合物によって生じた％阻害として結果を得
た。

次いでＩＤ弧を％阻害曲線から出した。注解： 粗ＰＰＥ抽出物中のェラスターゼ活性は一つの製剤から
他のものまで変化させることができる。

各新しし、バッチのコントロールを操作し、分析操作で
添加した容量は活性に従って調節した。キモトリプシン
： 試薬： ０．０即位２ＨＰ０４／ＫＨ２Ｐ０４緩衝液、ｐＨ７．
弦ーキモトリプシン（ワーシントン、３×結晶化、凍結
乾燥した）０．００１ＭＨｃｌ中１００ムタ／の上で（
１：１０に希釈した重量１の９／泌）０．２ｈＭＮーア
セチルーアラニルーアラニループロリルーフエニルアラ
ニル−ｐーニトロアニリド＝Ａｃ−ＡＡＰＰｈＮ基質を
製造するために固形（Ｍ．ｗ．５６６）をまずＤＭＳＯ
ＩＯ．０机に溶解した。

次いでｐＨ７．５の緩衝液を最終容量１００の‘に添加
した。試験される阻害剤を使用直前にＤＭＳＯ中に溶解
した。分析操作： クベット中０．水Ｍ Ａｃ−ＡＡＰＰ州１．０の‘に阻
害剤含有または含有しないＤＭＳＯ Ｏ．０１〜０．０
５の‘を添加した。

混合した後、試験化合物の存在によりいかなる自然加水
分解をも検出するように４１仇ｈ仏で定量した。次いで
ａ−キモトリプシン溶液０．０１の‘を添加し４皿ｈｏ
で△ＯＤ／分を測定、記録した。ギルフオード２４０
分光光度計を使用した。結果：コントロールの△ＯＤ／
分の％減少によって示されると同じく試験化合物によっ
て生じた％阻害として結果を得た。

次いでＩＤ則を％阻害曲線から出した。注解： この基質とキモトリプシンに対するＫｍは２．３×１０
‐４Ｍである。

上記に記載した通り製造したこの基質は４℃で貯蔵した
場合数日間溶液で安定である。

トリブシン： 参考文献： イアランガー、Ｂ．Ｆ．，ココウイスキー、Ｎ．，コー
ェン、Ｗ．，ふｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ
．第９５巻、第２７１〜２７８頁（１９６１年）。

試薬： ０．０９りＫ２ＨＰ０４／Ｋ比Ｐ０４緩衝液、ｐＨ７．
５トリプシン（ヮーシントン−ＴＲＬ、公結晶化、凍結
乾燥）０．００１ＭＨｃｌ中１．の重量の９／私で１．
位ｈＭＮーベンゾイル−ＤＬーアルギニンーｐ−ニトロ
アニリン（バケム）＝ＢＡＰＡ、基質をＤＭＳＯＩＯの
‘中に固体（Ｍ．ｗ．４３５）を溶解させて製造した。

ｐＨ７．５の緩衝液を全量１００机‘に添加した。阻害
剤を使用直前にＤＭＳＯ中に溶解した。分析操作： クベット中１．皿ＭＢＡＰＡＩ．０泌に阻害剤を含有ま
たは含有しないＤＭＳＯＯ．０１〜０．０５の‘を添加
した。

混合した後、試験化合物の存在によりいかなる自然加水
分解をも検出するように４１仇ｈ山で定量した。次いで
トリプシン０．０１の‘を添加し、４皿ｈ仏で△ＯＤ／
分を測定し記録した。ギルフオード２４０分光光度計を
使用した。結果： コントロールの△ＯＤ／分の％減少により示されると同
じく試験化合物によって生じた％阻害として結果を得た
。

次いでｍ別を％阻害曲線から出した。ヒトのＰＭＮカテ
プシンＧ： 試薬： ０．０８ＭＰＩＰＥＳ緩衝液〔ピベラジンーＮ，Ｎ」ビ
ス（２ーェタンスルホン酸）、モノナトリウム塩、モノ
ハイドレート〕、ｐＨ６．ふ０．２ｍＭ ｔ−Ｂｏｘ一
Ｌ−チロシンーｐーニトロフェニルヱステル＝ＢＴＮＰ
、キモトリプシンー様活性を含有するヒトの多形核白血
球（ＰＭＮ）の精製抽出物、試験される阻害剤を使用直
前にＤＭＳＯに溶解させた。

分析操作：クベツト中０．２ｍＭＢＴＮＰＩ．０泌に阻
害剤を含有または含有しないＤＭＳＯＯ．０１〜０．１
の‘を添加した。

混合した後、試験化合物の存在によりあらゆる自然加水
分解をも検出されるように３４７．５ｍ仏で定量した。
次いでＰＭＮＯ．０１の‘を添加して３４７．５ｈ仏で
△ＯＤ／分を測定し記録した。ギルフオード２４０また
はべックマンＤＢ−Ｇ分光光度計を使用した。結果： コントロールの△ＯＤ／分の％減少によって示されるの
と同じく試験化合物によって生じた％阻害として結果を
得た。

次いでＩＤ５ｏを％阻害曲線から出した。注解： １ 基質を製造するために、固体（ｍ．ｗ．４０２）８
．０ｍ９をまず１０．０泌ＤＭＳＯに溶解した。

ｐＨ６．５の緩衝液を次いで最終容量１００机に添加し
た。ＤＭＳＯの最終濃度は１０％であった。この方法で
製造した基質は３〜４時間室温で安定である。２ ニト
ロフェノールとの反応性に対してすべての活性を試験し
た。

試験化合物がニトロフェノ−ルと反応する場合は試験は
無効である。結 果 ａ．ト。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｒは （ａ） ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ｎは１〜５である；Ｘは（１）フルオロ；（２
   ）ニトロ、但しＸがニトロだけの場合、ｎは２でなけれ
   ばならないそしてＸは２，４−または３，５−ジニトロ
   でなければならない；（３）トリフルオロメチル；（４
   ）シアノ；（５）Ｃ＿１＿〜＿３アルコキシカルボニル
   ；（６）カルボキシル；および（７）Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ＿
   １＿〜＿３アルキル）スルフアミルから独立して選択さ
   れる）または（ｂ） ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ｍは１または２であり、そしてＹはシアノまた
   はニトロである）である。 〕を有する化合物。２ ｎが２であり、Ｘがニトロ、ト
   リフルオロメチルまたはシアノである；あるいはｎが５
   であり、Ｘがフルオロである特許請求の範囲第１項の化
   合物。