JPS60192260A - 安定化パ−オキシダ−ゼ標識抗ヒトＩｇＧ（γ） - Google Patents

安定化パ−オキシダ−ゼ標識抗ヒトＩｇＧ（γ）

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JPS60192260A
JPS60192260A JP4792484A JP4792484A JPS60192260A JP S60192260 A JPS60192260 A JP S60192260A JP 4792484 A JP4792484 A JP 4792484A JP 4792484 A JP4792484 A JP 4792484A JP S60192260 A JPS60192260 A JP S60192260A
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phenol
buffer
gamma
labeled anti
serum albumin
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Akira Fujiwara
明 藤原
Shoichiro Okawa
昭一郎 大川
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Denka Seiken Co Ltd
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Denka Seiken Co Ltd
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    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531—Production of immunochemical test materials
    • G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
    • G01N33/535—Production of labelled immunochemicals with enzyme label or co-enzymes, co-factors, enzyme inhibitors or enzyme substrates

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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は抗原又は抗体などの免疫反応体の検出及び測定
％にエンザイムイムノアッセイＶこ利用されるパーオキ
シダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ（ｒ）の液状安定化のものを
得んとするものである。
一般にパーオキシダーゼ標識抗ヒ）　ｔｇＧ　＜ｒ）ｕ
これを免疫学的検出法に応用することにより免疫反応を
酵素活性に由来する基質の色調変化によって肉眼検出で
き、更に比色法によって定量的検出も出来る有用な物質
である。
然しなからパーオキシダーゼ標識抗ヒ）ＩｇＧ（γ）は
液状とした場合、極めて不安定であり、常温において放
置すると分解をおこして使用できないものとなる、従っ
て通常−２０Ｃの如き低温度にて凍結して保存している
ものであるがこのような温度に保存することはその使用
並に貯蔵において碓めて困難な作業を要するものであり
、パーオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ（ｒ）を使用した
免疫学的検出法の普及並に市場性において著し−制限を
うけているものである。
本発明はかかる現状に鑑み鋭意研究を行った結果、パー
オキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ（γ）の液状にした場合
の安定化に成功したものである。
即ち本発明ハノヤーオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧＣ１
）に緩衝液とフェノール又は牛血清アルブミンの何れか
一方又は両者との混和液を添加したものである。
本発明において緩衝液に添加するフェノール又は牛血清
アルブミンの添加量において、フェノールを０．１係以
下又は牛血清アルブミン５％以下と限定した理由は夫々
の限定量を超えた場合には、仙れも・ぐ−オキシダーゼ
標識抗ヒトｒｇＧ（ｒ）の液状物が懸濁して蛋白が変質
し使用にたえないものとなるためである。
なお緩衝液としてはトリス（ヒドロキシメチル）アミノ
メタン、ジェタノール、トリエタノール、リン酸、酢酸
等を使用するものである。
次Ｖこ本発明の実施例について説明する。
実施例（１） パーオキシダーゼ標識抗ヒ）ＩｇＧ（ｒ）に第１表に示
す如き緩衝液並に緩衝液にフェノール又は牛血清アルブ
ミンを添加し、これを５００倍に希釈した溶液を３０℃
に貯蔵した。
第１表 比較例品（１）　５ｍＭ　’）ン酸緩衝液（ｐＨ８，０
）本発明品（１）　Ｏ，Ｏｌ　％フェノール人＃）５ｍ
Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８，０） 本発明品（２）１％牛血清アルブミン入り５ｍＭ　リン
酸緩衝液（ｐＨ８，０） 不発明品（３）０．０１％フェノール及び１％牛血清ア
ルブミン入り５ｍＭ　’）ン酸緩衝液（ｐＨ８，０） 斯くして得た本発明品及び比較例品とについてその性能
を試みるために貯蔵日数とパーオキシダーゼの活性度を
測定した。なお活性度は３０　ｍＭオルトフェニレンジ
アミン０．０２％過酸化水素水嵩下に３Ｎ硫酸を添加し
４９０　ｎｎｍ１５７０ｎにおける分光度を測定したも
のである。
おこすことなく優れた安定性を示した・実施例（２） ノ９−オキシダーゼに０．０１％フェノール及び１係牛
血７ｎアルブミンと第２表に示す如く種にの緩衝液との
混和液を添加し、その溶液を３０しに貯蔵した。
４２　表 不うら明品（３）　５ｍＭリン酸緩衝液（ｐ１４８．ｏ
）本発明品（４）　’　１０ｍＭ　）リス（ヒドロキシ
メチルンアミノメタン（ｐＨ７，０） 不発明品（５）１０ｍＭジェタノールアミン（ｐ１４７
．０） 本発明品（６）　１０ｍＭトリエタノールアミン（ｐＨ
７，０） にして貯蔵日数とパーオキシダーゼの活性度をの緩衝液
を使用するもすべて優れた安定ｔ！＋、を示した。
実施例（３） パーオキシダーゼ標識抗ヒ）ＩｇＧ（γ）に０．０１チ
フエノール及び１％牛血清アルブミン入り５−リン酸緩
衝液（ｐ１４８．０）を添加しこれを５００倍に希釈し
た本発明品ＶＣついてこれをエンザイムイムノアッセイ
による人皿中風珍ＩｇＧ　抗体の測定に［６用し４℃に
おける安定性を４９０　ｎｎｍ１５７０ｎの分光測定に
エリ調べた。
なおエンザイムイムノアッセイによる不発明パーオキシ
ダーゼ水浴液の他、風疹ウィルス固定マイクロプレート
、３０ｍＭオルトフェニレンジアミン、０．０２％過酸
化水素、３Ｎ？を酸を使用し人血清として予研法による
）ＩＩ価１２８の風疹抗体陽性人血清ｒ使用した。
その結果は第３図に示す通りである。
実施例（４） パーオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ（ｒ）に０．０１係
フエノール及び１％牛血清アルブミン入り５ｍＭリン酸
緩衝液（ｐｊ（８，０）を添加しこれを５００倍に希釈
した本発明品をエンザイムイムノアッセイによる人血中
風疹ＩｇＧ抗体の測距に応用した。なおエンザイムイム
ノアッセイによる風疹ＩｇＧ抗体の測矩は実施例（３）
に承す如（４９０ｎｍ１５７０　ｎｍの分ブ０測定にエ
リ行ったものであり、人血清５６例Ｖこついて予ω１法
によるＨ　Ｉ価との相関性を検討し、本発明品の免疫学
的検出法の応用効果を調べた。
その結果は第４図に示す通りである。
以上詳述した如く本発明によればパーオギシダーゼ標識
抗ヒトＩｇＧ（γ〕を液状のま１長期間安心して保存す
ることが出来るから抗原や抗体の免役反心体の検出及び
測距に極めて有用に利用することが出来る。
【図面の簡単な説明】
第１図乃至第４図は本発明安定化パーオキシクーゼ標識
抗ヒ）ＩｇＧ（γ）の性能を示すものであり第１図乃至
飢３図は経過日数と分光度との関係曲線図、第４図はＨ
Ｉ価と分光度との相関図である。

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. （１）　パルオキシダーゼ標識抗ヒ）ＩｇＧ（ｒ）に緩
    衝液とフェノール又は牛血清アルブミンの倒れか一方又
    は両者との混和液を添加したことを特徴とする安定化パ
    ーオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ（ｙ）。
  2. （２）Ｍ衝液にフェノールｏ、　ｉ　ｔｉｂ以下又は牛
    血清アルブミン５％以下の何れか一方又は両者を添加す
    ることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の安定化
    ・や−オキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ（７）ｃ＋
  3. （３）　緩衝液としてトリス（ヒドロキシメチ／Ｉ／）
    アミノメタン、ソエタノール、トリエタノール、リン酸
    、酢酸の内から選定することを特徴とする特許請求の範
    囲第１項記載の安定化パーオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇ
    Ｇ（ｒ）。
JP4792484A 1984-03-13 1984-03-13 安定化パ−オキシダ−ゼ標識抗ヒトＩｇＧ（γ） Granted JPS60192260A (ja)

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