JPS60190850A - 電気泳動用支持媒体 - Google Patents
電気泳動用支持媒体Info
- Publication number
- JPS60190850A JPS60190850A JP59047557A JP4755784A JPS60190850A JP S60190850 A JPS60190850 A JP S60190850A JP 59047557 A JP59047557 A JP 59047557A JP 4755784 A JP4755784 A JP 4755784A JP S60190850 A JPS60190850 A JP S60190850A
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- JP
- Japan
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- electrophoresis
- support
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- Pending
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44747—Composition of gel or of carrier mixture
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
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- Dispersion Chemistry (AREA)
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- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［発明の分野］
本発明は、゛電気泳動用支持媒体に関するものである。
［９５明の背に（］
緩衝液をしみ込まぜたゲル膜、濾紙などのシート状支持
媒体中において蛋白質、蛋白質分解物、核酸、核酸分解
物などの荷電分子または粒子が電場の影響ドで移動する
現象を利用して、それらの物質の分際を行なうことを骨
子とする電気泳動操作は以前から知られており、特に上
記のような生体高分子物質の分離と同定に利用されてい
る。
媒体中において蛋白質、蛋白質分解物、核酸、核酸分解
物などの荷電分子または粒子が電場の影響ドで移動する
現象を利用して、それらの物質の分際を行なうことを骨
子とする電気泳動操作は以前から知られており、特に上
記のような生体高分子物質の分離と同定に利用されてい
る。
特に最近注目されている遺伝子−１，学において、ＤＮ
Ａなどの核酸のＪλ１ツ（配列の決定のためには電気泳
動操作の実施が必須とされている。この目的における゛
電気泳動操作は一般に、成用性標識が（ｊされたＤＮＡ
あるいはＤＮＡ部分分解物の１！シム特異的切断分解物
混合物を電気泳動用支持媒体の長さ方向に沿って複数種
並行して泳動させる操作が含まれる。そして、その泳動
により得られた複数タリの泳動パターン（電気泳動によ
り支持媒体中に形成されるゾーンの集合体）を相互に対
照比較することにより塩基配列の決定が行なわれる。ず
なわち回−・の分子−星を有する塩ノ、（特異的！ｉ’
Ｊ断分解物は゛Ｉｔ！、気泳動の開始点が回−・であれ
ば、回−の位置に移動するとの゛１１２気泳動の原理を
利用して、それらの対照比較を行なっている。
Ａなどの核酸のＪλ１ツ（配列の決定のためには電気泳
動操作の実施が必須とされている。この目的における゛
電気泳動操作は一般に、成用性標識が（ｊされたＤＮＡ
あるいはＤＮＡ部分分解物の１！シム特異的切断分解物
混合物を電気泳動用支持媒体の長さ方向に沿って複数種
並行して泳動させる操作が含まれる。そして、その泳動
により得られた複数タリの泳動パターン（電気泳動によ
り支持媒体中に形成されるゾーンの集合体）を相互に対
照比較することにより塩基配列の決定が行なわれる。ず
なわち回−・の分子−星を有する塩ノ、（特異的！ｉ’
Ｊ断分解物は゛Ｉｔ！、気泳動の開始点が回−・であれ
ば、回−の位置に移動するとの゛１１２気泳動の原理を
利用して、それらの対照比較を行なっている。
１、かじながら、実際の電気泳動操作においては同一の
分子−量を有する物質であってもそれらの泳動位置の相
違に基づいて泳動距離が不均一になる現象が発生しやす
い。Ｖなわち、荷電物質の移動速度（すなわちゾーンの
移動部さ）は一般に中央部よりも両側部の方が低くなる
傾向があり、このため一定時間経過後の泳動パターンは
、第１図に例示したように、両側部におけるゾーンの移
動距離が 中央部におけるゾーンの移動距離よりも１υ
〈なったパターンとなりやり−い。なお第１図は。
分子−量を有する物質であってもそれらの泳動位置の相
違に基づいて泳動距離が不均一になる現象が発生しやす
い。Ｖなわち、荷電物質の移動速度（すなわちゾーンの
移動部さ）は一般に中央部よりも両側部の方が低くなる
傾向があり、このため一定時間経過後の泳動パターンは
、第１図に例示したように、両側部におけるゾーンの移
動距離が 中央部におけるゾーンの移動距離よりも１υ
〈なったパターンとなりやり−い。なお第１図は。
支持媒体１１上にて出発点１２から電気泳動させてス１
１られたゾーン１３、】３°の泳動パターンを模式的に
示すものである。この現象はスマイリング効果と呼ばれ
、ＤＮＡなどの塩基配列の決定操作のように複数の泳動
列を対照比較する上程を含む操作において（１１られる
に；果の精度の低Ｆを引き起す大きなｌｉ’、（囚どな
っている。
１られたゾーン１３、】３°の泳動パターンを模式的に
示すものである。この現象はスマイリング効果と呼ばれ
、ＤＮＡなどの塩基配列の決定操作のように複数の泳動
列を対照比較する上程を含む操作において（１１られる
に；果の精度の低Ｆを引き起す大きなｌｉ’、（囚どな
っている。
Ｆ記のスマイリング効果の発生の上な原因としては、支
持媒体中に発生した熱（ジュール熱）の側面縁部からの
放熱による中央部と側面部との温度差の発生が挙げられ
る。すなわち、支持媒体中の中央部では発生したジュー
ル熱は］風下表面からのみ放熱するが、側面部では更に
側面縁部かもの放熱が加わる。なお、これらの放熱を補
うための熱の幅方向に９１）った移動も発生孝−るが、
この熱の移動についても、支持媒体の中央部は両側から
の熱の流入により放熱が補償されやすいが、両側面では
一方の側から熱の流入があるのみとなり放熱の補償が不
充分となる。これらの理由により、側面部の温１■は中
央部の温１Ｎに比較して低くなる傾向がある。従ってス
マイリング効果の発生を防止するために従来では、支持
媒体の表面全体に放熱板を旧設して温度差の発生を抑制
するなどのｔｌ大も行なわれているが、そのような工夫
ではスマイリング効果の充分な防１１−は困建であり、
また放熱板を付設確−る１１業も煩雑である。
持媒体中に発生した熱（ジュール熱）の側面縁部からの
放熱による中央部と側面部との温度差の発生が挙げられ
る。すなわち、支持媒体中の中央部では発生したジュー
ル熱は］風下表面からのみ放熱するが、側面部では更に
側面縁部かもの放熱が加わる。なお、これらの放熱を補
うための熱の幅方向に９１）った移動も発生孝−るが、
この熱の移動についても、支持媒体の中央部は両側から
の熱の流入により放熱が補償されやすいが、両側面では
一方の側から熱の流入があるのみとなり放熱の補償が不
充分となる。これらの理由により、側面部の温１■は中
央部の温１Ｎに比較して低くなる傾向がある。従ってス
マイリング効果の発生を防止するために従来では、支持
媒体の表面全体に放熱板を旧設して温度差の発生を抑制
するなどのｔｌ大も行なわれているが、そのような工夫
ではスマイリング効果の充分な防１１−は困建であり、
また放熱板を付設確−る１１業も煩雑である。
し発明の要旨」
本発明は、 一枚の支Ｉ″１′媒体１−で多独の゛市気
ＩＡ！動列を形成さける電気泳動操作船ごおいで発生し
やすいスマイリング効果の防止もしくは低減をｆｑ能に
する１［！：気泳動川用持媒体を提供するごどを＋Ｅな
ｌｌ’１的とするものである。
ＩＡ！動列を形成さける電気泳動操作船ごおいで発生し
やすいスマイリング効果の防止もしくは低減をｆｑ能に
する１［！：気泳動川用持媒体を提供するごどを＋Ｅな
ｌｌ’１的とするものである。
本発明は、泳動方向に泊った両側部の厚さが中央部の厚
さよりも厚くされ（いることを特徴ど確る電気泳動用支
Ｊ′ｆＤ、Ｙ、体を４１供４るｔｌのυある。
さよりも厚くされ（いることを特徴ど確る電気泳動用支
Ｊ′ｆＤ、Ｙ、体を４１供４るｔｌのυある。
なお、本発明においで支持媒体の両側部どは、支持媒体
のイ］効（１）域、場なわら複数の電気泳動列が形成さ
れる全帯域、の両側部を意味ジーるものであり、必ずし
も支持媒体自体の両側部ｚ 、（ｇ味４−るとは限らな
い。
のイ］効（１）域、場なわら複数の電気泳動列が形成さ
れる全帯域、の両側部を意味ジーるものであり、必ずし
も支持媒体自体の両側部ｚ 、（ｇ味４−るとは限らな
い。
［発明の詳細な記述Ｊ
以下に本発明を添伺図面を参１ｊｊｊ ｌ、ながら説明
確−る。
確−る。
本発明が提供する１し気泳動用媒体は、−上述のように
、泳動方向に沿った両側部のＪγさが中央部の厚さより
もＪ′！＜されている構成を有しており、このような４
１η＋＆と寸−ることによりスマイリング効果の発生の
＋：Ｂ；＜因とみられているＬ［イ側部からの放熱を補
う充分な早のシ。〜ル熱が支持媒体の両側部に発生し、
また更に両側部の断面の１１さが厚くなることにより泳
動物質の泳動通路が大きくなることから、両側部の泳動
物質の泳動速度が−１、甘し、これによりスマイリング
効果の防１トあるいは低減が実現する。
、泳動方向に沿った両側部のＪγさが中央部の厚さより
もＪ′！＜されている構成を有しており、このような４
１η＋＆と寸−ることによりスマイリング効果の発生の
＋：Ｂ；＜因とみられているＬ［イ側部からの放熱を補
う充分な早のシ。〜ル熱が支持媒体の両側部に発生し、
また更に両側部の断面の１１さが厚くなることにより泳
動物質の泳動通路が大きくなることから、両側部の泳動
物質の泳動速度が−１、甘し、これによりスマイリング
効果の防１トあるいは低減が実現する。
本発明の゛上気泳動用支持媒体は、たとえば、第２Ｈに
示したような形状をとることできる。すなわち、この支
持り、■体２１の長さ方向および幅方向の形状は、ｔＪ
Ｓ１図に示されているような従来より用いられでいる支
持媒体と同様であるが、その幅方向の断面は、その断面
形状が中央部伺近に直線部分を右する円弧状の凹みを示
すように構成されており、これにより、泳動方向に泊っ
た両側部の厚さよりも中央部の厚さが薄くされている。
示したような形状をとることできる。すなわち、この支
持り、■体２１の長さ方向および幅方向の形状は、ｔＪ
Ｓ１図に示されているような従来より用いられでいる支
持媒体と同様であるが、その幅方向の断面は、その断面
形状が中央部伺近に直線部分を右する円弧状の凹みを示
すように構成されており、これにより、泳動方向に泊っ
た両側部の厚さよりも中央部の厚さが薄くされている。
この第２図の支持媒体２１を用い、支持媒体の両面をカ
ラス板、プラスナックフィルムなとの−Ｍ１の挟持用支
持体（千の一力もしくｉ」双方を、ｒｉＡ支持媒体のＩ
’／みう）イ１１をｈｌｉう、ＩうなｐＪみ分イ１１を
イｉ４るノ［ぞ状、たとえば、中央部伺近に厚さ 疋の
部分があり、その両側に曲絆状、直線状、円弧状なとの
形状でＪｌさが漸減する部分がある挟持用支持体どする
）で密着挟持し、この支持媒体のド嬬部を常法に従って
電極に接触している層内液中に浸漬し、かつ、支持媒体
２１の１．端部を常法により電極に接触しｒいるｈ ｆ
Ｆｌ液に接触させることによって、電気泳動が実ｈｆ５
．される。泳動開始点２２から泳動を開始した一１電物
質は一定時間後に泳動パターンを小すが、この支持媒体
２１を用いた市４気泳動において現われる泳動パターン
は、第２図の２３．２３゛に示されているような直線も
しくは直線類似のパターンを示ず。穆−なわら、未発Ｉ
Ｊ＋の支持媒体を用いて電気泳動を実施した場合には、
従来より問題となっていたスマイリング効果の発生が防
１１−されるか、あるいは少なくともその低減が実現す
る。
ラス板、プラスナックフィルムなとの−Ｍ１の挟持用支
持体（千の一力もしくｉ」双方を、ｒｉＡ支持媒体のＩ
’／みう）イ１１をｈｌｉう、ＩうなｐＪみ分イ１１を
イｉ４るノ［ぞ状、たとえば、中央部伺近に厚さ 疋の
部分があり、その両側に曲絆状、直線状、円弧状なとの
形状でＪｌさが漸減する部分がある挟持用支持体どする
）で密着挟持し、この支持媒体のド嬬部を常法に従って
電極に接触している層内液中に浸漬し、かつ、支持媒体
２１の１．端部を常法により電極に接触しｒいるｈ ｆ
Ｆｌ液に接触させることによって、電気泳動が実ｈｆ５
．される。泳動開始点２２から泳動を開始した一１電物
質は一定時間後に泳動パターンを小すが、この支持媒体
２１を用いた市４気泳動において現われる泳動パターン
は、第２図の２３．２３゛に示されているような直線も
しくは直線類似のパターンを示ず。穆−なわら、未発Ｉ
Ｊ＋の支持媒体を用いて電気泳動を実施した場合には、
従来より問題となっていたスマイリング効果の発生が防
１１−されるか、あるいは少なくともその低減が実現す
る。
また、泳動方向に沿った両側部の厚さがが中央部のＪｌ
さよりもＪｌ〈されでいることを特徴とするｉ［無法動
用支持媒体のト端部は必ｆしも、第２図に示されている
ような直線である必要はなく、たとえば、第３図に示さ
れＣいるように中央部が突出した円弧（中央部（＝Ｊ近
に直線部分を有する）の形状にあってもよく、このよう
な形状にある支持媒体を用いた場合には、両側部の泳動
方向の電位勾配が中央部における電位勾配よりも大きく
なるため、スマイリング効果の防１１−おるいは低減の
ためには更に有効である。
さよりもＪｌ〈されでいることを特徴とするｉ［無法動
用支持媒体のト端部は必ｆしも、第２図に示されている
ような直線である必要はなく、たとえば、第３図に示さ
れＣいるように中央部が突出した円弧（中央部（＝Ｊ近
に直線部分を有する）の形状にあってもよく、このよう
な形状にある支持媒体を用いた場合には、両側部の泳動
方向の電位勾配が中央部における電位勾配よりも大きく
なるため、スマイリング効果の防１１−おるいは低減の
ためには更に有効である。
また、本発明の電気泳動用支持媒体の断面形状は、その
ト１４側部に」１面が直線の凸部を示すように構成され
ていてもよく （たとえば第４ａ、４ｂ、４０図に示さ
れた断面形状）、また４ｄ図に示されているような形状
をとることもできる。すなわち、支持媒体の厚さの変化
は連続的であっても段階的であっても良い。さらにまた
、支持媒体の幅が短い場合には、ｆ５４ｅ図に示されて
いるように中央部が突出した通常の円弧の形状にあって
もよい。
ト１４側部に」１面が直線の凸部を示すように構成され
ていてもよく （たとえば第４ａ、４ｂ、４０図に示さ
れた断面形状）、また４ｄ図に示されているような形状
をとることもできる。すなわち、支持媒体の厚さの変化
は連続的であっても段階的であっても良い。さらにまた
、支持媒体の幅が短い場合には、ｆ５４ｅ図に示されて
いるように中央部が突出した通常の円弧の形状にあって
もよい。
なお、本発明の電気泳動用支持媒体の断面は長さ方向に
おいて全て回−である必要はなく、たとえば、第５図（
斜線部５）Ｌよ支持体ｊ３よびスベーリを表す）に示し
たように、支持媒体の両端部はその断面を従来のものと
同一の中なる長方形とし、本発明に従う構成は、その両
端部以外の部分にのみ適用されていてもよい。
おいて全て回−である必要はなく、たとえば、第５図（
斜線部５）Ｌよ支持体ｊ３よびスベーリを表す）に示し
たように、支持媒体の両端部はその断面を従来のものと
同一の中なる長方形とし、本発明に従う構成は、その両
端部以外の部分にのみ適用されていてもよい。
本発明において使用する上気泳動用の支持媒体には特に
制限はなく、たとえばｆカ紙、セルロースアセテート膜
、デンプンゲル１１り、ポリアクリルアミドゲル膜など
の公知の支持媒体を用いることができる。４．′？に好
ましいのは、ポリアクリルアミドゲルｊ１ジである。
制限はなく、たとえばｆカ紙、セルロースアセテート膜
、デンプンゲル１１り、ポリアクリルアミドゲル膜など
の公知の支持媒体を用いることができる。４．′？に好
ましいのは、ポリアクリルアミドゲルｊ１ジである。
また、泳動方向に沿った両側部の厚さが中央部の厚さよ
りも厚くされている電気体りＪ用支持奴体は、たとえば
、通常の支持媒体の加Ｃにより製造することができる。
りも厚くされている電気体りＪ用支持奴体は、たとえば
、通常の支持媒体の加Ｃにより製造することができる。
ただ１７、支持媒体自体は比較的薄いものであるため、
その加工には細心の注意か必要となる。従って、支持媒
体としてポリアクリルアミドゲル膜のようなゲル膜を用
いる場合には、ガラス板、プラスナックフィルムなどの
支持媒体挟持用支持体あるいは他の板状物の表面の両側
部にデ＝−プ状スペーりを、そして中央部に適当な形状
のシート状スペーサを、装置して形成したモールド１−
にケル形成液を導入し、ゲル化させることにより本発明
に従う電気泳動用支持媒体をＰ４製してもよい。
その加工には細心の注意か必要となる。従って、支持媒
体としてポリアクリルアミドゲル膜のようなゲル膜を用
いる場合には、ガラス板、プラスナックフィルムなどの
支持媒体挟持用支持体あるいは他の板状物の表面の両側
部にデ＝−プ状スペーりを、そして中央部に適当な形状
のシート状スペーサを、装置して形成したモールド１−
にケル形成液を導入し、ゲル化させることにより本発明
に従う電気泳動用支持媒体をＰ４製してもよい。
未発ＩすＩの電気泳動用支持媒体の製造に際して、両側
部の厚さと中央部の厚さどの間の好ましい差は実験的に
定めることができる。たとえばまず従来と同様な長方形
の支持媒体を用意し、それを用いて所定の条件にて電気
泳動を行なう。そして、そこに現われた泳動パターンが
らスマイリング効果の程瓜、１なわち中央部におりる泳
動距離と両側部における泳動距離どの差を考慮し−Ｃ１
同一の原＃１から両側部の厚さが中央部の厚さよりも厚
い支持媒体を調製して、同一の条ｒ＋にて再度電気泳動
を行なう。そしてそこに現われた泳動パターンのスマイ
リング効果が無視できる程度であれば、その断面形状を
所ｑＩの形状とする。スマイリング効果の低減が不完／
、１であるす１９合、あるいは逆スマイリング効果（ｉ
＋＋４側部にＪ３りるゾーンの移動距ｉか、中東部にお
＋するゾーンの移動ｈ１１門よりも長くなったパター
ン）が発生した場合番ご１」、１１１爪、その程度を考
慮して断面形状を変え、同様な方法により調整を行なう
。
部の厚さと中央部の厚さどの間の好ましい差は実験的に
定めることができる。たとえばまず従来と同様な長方形
の支持媒体を用意し、それを用いて所定の条件にて電気
泳動を行なう。そして、そこに現われた泳動パターンが
らスマイリング効果の程瓜、１なわち中央部におりる泳
動距離と両側部における泳動距離どの差を考慮し−Ｃ１
同一の原＃１から両側部の厚さが中央部の厚さよりも厚
い支持媒体を調製して、同一の条ｒ＋にて再度電気泳動
を行なう。そしてそこに現われた泳動パターンのスマイ
リング効果が無視できる程度であれば、その断面形状を
所ｑＩの形状とする。スマイリング効果の低減が不完／
、１であるす１９合、あるいは逆スマイリング効果（ｉ
＋＋４側部にＪ３りるゾーンの移動距ｉか、中東部にお
＋するゾーンの移動ｈ１１門よりも長くなったパター
ン）が発生した場合番ご１」、１１１爪、その程度を考
慮して断面形状を変え、同様な方法により調整を行なう
。
次に本発明を実施例および比較計１により説Ｉ！＋１
する。
する。
［比較例１に
１枚の無色透明のポリ］−チレン云レフタレ−トシ−１
−（縦３７ｃｒｎ、横２０ｃｔｎ、厚さｌ ８０ Ｉｔ
ｍ）のそれぞれの表面にグロー放電処理（２００Ｖ、ｉ
、ＯＡ）を施し、表面を親水化した一幻の支持体を得た
。
−（縦３７ｃｒｎ、横２０ｃｔｎ、厚さｌ ８０ Ｉｔ
ｍ）のそれぞれの表面にグロー放電処理（２００Ｖ、ｉ
、ＯＡ）を施し、表面を親水化した一幻の支持体を得た
。
以１、のようｔ、＝、 １．、、−ｃ Ｊ・く面を第１
１木１ト、シｋ 枚の支１１Ｉ体−１−の両側部に、ポ
リエチレンジレフタレ−１−テ、−プ（両面に４ｒｅ
７．剤層が１１設されたもの、帽１０ｍｍ、接着剤層を
含めた全Ｊ７０ 、５ ｍｍ、）を貼り付けてスペーー
リ゛とした。次いで、この支持体の上にアクリルアミド
９．５ｇ、ＢＩＳ （Ｎ、Ｎ’−メチレンビスアクリル
アミト）０．５ｇ、アガロース（ゲル化温度３６°Ｃ５
低電気侵透度タイプ）０．３ｇ、ポリアクリルアミド２
．５ｇ、リン酸水木二づトリウ１、・−二本ｊ１！３
、５８ ｇ、リン酸二水素すトリウム・−水１１１０
、３３ ｇ 、および５ＤＳ（ドデシル硫酸すトリウム
）０．ｌＯｇからなる１００ｍ１の水溶液に、用台開始
剤としてベルオクソ二硫酸アンモニウ７、’（５屯−１
−％水溶液）１、．３ｍｌ、’１’ＥＭＥＩ）（Ｎ、Ｎ
、Ｎ’ 、Ｎ’−デＩ・ラメチルエチレンジアミン）
３３ｐＬｌを加えたゲル化液を流延し、ゲル化させるこ
とにより厚さ０．５ｍｍのポリアクリルアミドゲル膜を
形成した。次いで、このゲル１模の一方の端部に１７個
のリンプル注入川スロットを均等の間隔を置いて形成１
．だのり、ゲル＋＋ｑの１、に残りの支持体を屯ね、ス
ベーりで貼着して電気泳動用支持媒体を肖だ。
１木１ト、シｋ 枚の支１１Ｉ体−１−の両側部に、ポ
リエチレンジレフタレ−１−テ、−プ（両面に４ｒｅ
７．剤層が１１設されたもの、帽１０ｍｍ、接着剤層を
含めた全Ｊ７０ 、５ ｍｍ、）を貼り付けてスペーー
リ゛とした。次いで、この支持体の上にアクリルアミド
９．５ｇ、ＢＩＳ （Ｎ、Ｎ’−メチレンビスアクリル
アミト）０．５ｇ、アガロース（ゲル化温度３６°Ｃ５
低電気侵透度タイプ）０．３ｇ、ポリアクリルアミド２
．５ｇ、リン酸水木二づトリウ１、・−二本ｊ１！３
、５８ ｇ、リン酸二水素すトリウム・−水１１１０
、３３ ｇ 、および５ＤＳ（ドデシル硫酸すトリウム
）０．ｌＯｇからなる１００ｍ１の水溶液に、用台開始
剤としてベルオクソ二硫酸アンモニウ７、’（５屯−１
−％水溶液）１、．３ｍｌ、’１’ＥＭＥＩ）（Ｎ、Ｎ
、Ｎ’ 、Ｎ’−デＩ・ラメチルエチレンジアミン）
３３ｐＬｌを加えたゲル化液を流延し、ゲル化させるこ
とにより厚さ０．５ｍｍのポリアクリルアミドゲル膜を
形成した。次いで、このゲル１模の一方の端部に１７個
のリンプル注入川スロットを均等の間隔を置いて形成１
．だのり、ゲル＋＋ｑの１、に残りの支持体を屯ね、ス
ベーりで貼着して電気泳動用支持媒体を肖だ。
上記の支持媒体を用い、トリス（ヒドロキシメチル）ア
ミノメタン１．０５ｇ、ホウ酸０．５５ｇおよびＥ Ｌ
） −Ｉ’ Ａ ” ２Ｎ ａ ９３ ＩＩ！ ｇに水
を加えて１００ ｍ ｌとした水溶７ｔＸをＦＱ ＩＦ
Ｉ ｆｌＦとし、−ごリソル石製、ＩＬ気泳動装置を用
い−Ｃ印加電圧１０００ Ｖ（ＤＣ）に−（ｉｉＨｆＩ
方式によりｊ Ｌ＋ １、フェノールブルー（ＣＡＳ
Ｒｅｇｉｓｔｒｙ Ｎｏ、 ［１１５−３９−９］ ）
の電気泳動を３時間行なっｌ：。
ミノメタン１．０５ｇ、ホウ酸０．５５ｇおよびＥ Ｌ
） −Ｉ’ Ａ ” ２Ｎ ａ ９３ ＩＩ！ ｇに水
を加えて１００ ｍ ｌとした水溶７ｔＸをＦＱ ＩＦ
Ｉ ｆｌＦとし、−ごリソル石製、ＩＬ気泳動装置を用
い−Ｃ印加電圧１０００ Ｖ（ＤＣ）に−（ｉｉＨｆＩ
方式によりｊ Ｌ＋ １、フェノールブルー（ＣＡＳ
Ｒｅｇｉｓｔｒｙ Ｎｏ、 ［１１５−３９−９］ ）
の電気泳動を３時間行なっｌ：。
゛ｌＥ気泳無法の泳動パターンには第１図に示されてい
るようなスー１イリンク効果が現われ、中央部の泳動距
離と両側面部の泳動距鵡とひは約３ｃｍの差があった。
るようなスー１イリンク効果が現われ、中央部の泳動距
離と両側面部の泳動距鵡とひは約３ｃｍの差があった。
（実施例１］
比較例１と同様にし−Ｃ表面を親水化処理１．た一枚の
無色透明のポリエチレンテレフタレートシート支持体（
縦３７ ｃ ｍ、横２０ ｃ ｎ３ Ｊ７．さ１．８０
μｍ）を川、（ｉ： した。
無色透明のポリエチレンテレフタレートシート支持体（
縦３７ ｃ ｍ、横２０ ｃ ｎ３ Ｊ７．さ１．８０
μｍ）を川、（ｉ： した。
一方の支１〜体りの１ｌ１１側部に、ポリニブ−【／ン
デレフタレートデーブ（両面に接着剤層が旧設されたも
の、幅１０ ｍ ｍ、接着剤層を含めた全厚０．５ｍｍ
）を貼り伺けてスペーサーとした。その支持体表面中央
に、同様にして表面を親木化処理した・枚の無色透り１
のポリー■ヂレンデレフタレートスペーリ゛シート（Ｍ
２７ ｃ ｍ、横１．４ ｃ ｍ 、厚さ１８０μｍ
）を接着して中央に台状凸部を右するモールト付き挾持
用支持体をｆ’Ｊた。
デレフタレートデーブ（両面に接着剤層が旧設されたも
の、幅１０ ｍ ｍ、接着剤層を含めた全厚０．５ｍｍ
）を貼り伺けてスペーサーとした。その支持体表面中央
に、同様にして表面を親木化処理した・枚の無色透り１
のポリー■ヂレンデレフタレートスペーリ゛シート（Ｍ
２７ ｃ ｍ、横１．４ ｃ ｍ 、厚さ１８０μｍ
）を接着して中央に台状凸部を右するモールト付き挾持
用支持体をｆ’Ｊた。
次いで、上記の支持体のモールＦ内に比較例１と同様に
してゲル形成液を流延し、ゲル化させてポリアクリルア
ミドゲル１１シを形成した。そして、このゲル膜の一方
の端部に１７個の゛リンプル注入用スロン］・を均等の
間隔を置いて形成したのち、ゲル膜の１−に残りの支持
体を屯ね、スペーサで貼着して第５図にボされているよ
うな形状の電気泳動用支持媒体をｆ’ｆた。
してゲル形成液を流延し、ゲル化させてポリアクリルア
ミドゲル１１シを形成した。そして、このゲル膜の一方
の端部に１７個の゛リンプル注入用スロン］・を均等の
間隔を置いて形成したのち、ゲル膜の１−に残りの支持
体を屯ね、スペーサで貼着して第５図にボされているよ
うな形状の電気泳動用支持媒体をｆ’ｆた。
上記の支持媒体を用い、比較例１と同一の条件に−Ｃブ
ロムフェノールブルーの電気泳動を３時間行なった。
ロムフェノールブルーの電気泳動を３時間行なった。
心気泳動後の泳動パターンは第３図に小されているよう
なほぼ直線を示し、スマイリング効果の発生は無視でき
る程度であった。
なほぼ直線を示し、スマイリング効果の発生は無視でき
る程度であった。
第１図は、従来の電気泳動用支持媒体に現われたス１イ
リング効果の状ＬＩＩｊを示ノー栓弐図である。 第２図は、本発明の電気泳動用支持媒体に現われた泳動
パターンを／Ｉ： −４−４会式図ｔｙ；ｔ′する。 第３図は、未発り１の電気泳動用支持媒体の他の例を示
す佼弐図である。 第４ａ、４ｂ、４Ｃ１４ｄ、および４ｅ図は、本発明の
電気泳動用支持媒体の幅方向の断面形状の他の例を示墳
−栓弐図である。 第５図は、本発明の電気泳動用支持媒体の他の例を示す
佼弐図である。 １１．２１：電気泳動用支持媒体 １２．２２：電気泳動の出発点 １３．１３’、２３．２３°：泳動パターン（ゾーン） 特ａ１出層人 富士写１°（フィルム株式会社代理人
弁理士 柳 川 泰 男 第１図 ｖＳ２ト１ 第３図 ［］＝＝ミコ 第４０図 ７二− 第４ｂ図 第４ｄ図 し二ニー 第４ｅ図 ２よ 勢 」 ［！１ ［１ ト
リング効果の状ＬＩＩｊを示ノー栓弐図である。 第２図は、本発明の電気泳動用支持媒体に現われた泳動
パターンを／Ｉ： −４−４会式図ｔｙ；ｔ′する。 第３図は、未発り１の電気泳動用支持媒体の他の例を示
す佼弐図である。 第４ａ、４ｂ、４Ｃ１４ｄ、および４ｅ図は、本発明の
電気泳動用支持媒体の幅方向の断面形状の他の例を示墳
−栓弐図である。 第５図は、本発明の電気泳動用支持媒体の他の例を示す
佼弐図である。 １１．２１：電気泳動用支持媒体 １２．２２：電気泳動の出発点 １３．１３’、２３．２３°：泳動パターン（ゾーン） 特ａ１出層人 富士写１°（フィルム株式会社代理人
弁理士 柳 川 泰 男 第１図 ｖＳ２ト１ 第３図 ［］＝＝ミコ 第４０図 ７二− 第４ｂ図 第４ｄ図 し二ニー 第４ｅ図 ２よ 勢 」 ［！１ ［１ ト
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １０泳動方向に１イ）った両側部の厚さが中央部の厚さ
よりも厚くされていることを特徴とする電気泳動用支持
媒体。 ２゜支持媒体が、その少なくとも一方の表面の幅方向の
断面形状が中央部伺近に直線部分を有する円弾状の凹み
を示すように構成されていることを特徴とする特許請求
の範囲第１項記載の電気泳動用支持媒体。 ３゜支持媒体が、その幅方向の断面形状が両側部にＬ面
が直線の凸部を示すように構成されていることを特徴と
する特１４請求の範囲第１項記載の電気泳動用支持媒体
。 ４゜支持媒体がゲル膜であることを特徴とする特許請求
の範囲第１項ないしは第３項のいずれかのｘｔｔ記載の
′ｉＥ気泳動川支用媒体。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59047557A JPS60190850A (ja) | 1984-03-12 | 1984-03-12 | 電気泳動用支持媒体 |
| US06/710,131 US4650556A (en) | 1984-03-12 | 1985-03-11 | Means for electrophoresis showing reduced smiling effect |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59047557A JPS60190850A (ja) | 1984-03-12 | 1984-03-12 | 電気泳動用支持媒体 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60190850A true JPS60190850A (ja) | 1985-09-28 |
Family
ID=12778482
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59047557A Pending JPS60190850A (ja) | 1984-03-12 | 1984-03-12 | 電気泳動用支持媒体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60190850A (ja) |
-
1984
- 1984-03-12 JP JP59047557A patent/JPS60190850A/ja active Pending
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