JPS60118192A - 全培養醗酵ブロスからのテイコマイシンa2の抽出 - Google Patents
全培養醗酵ブロスからのテイコマイシンa2の抽出Info
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- JPS60118192A JPS60118192A JP59213254A JP21325484A JPS60118192A JP S60118192 A JPS60118192 A JP S60118192A JP 59213254 A JP59213254 A JP 59213254A JP 21325484 A JP21325484 A JP 21325484A JP S60118192 A JPS60118192 A JP S60118192A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
本発明は、適当な水混和性溶剤により全培養醗酵液から
ティコマイシンA2 を抽出する方法に関する。国際的
非独占名称(INN)に関する世界保健機構ハンドブッ
クに定められた命名法により、1テイコマイシンA2”
(Teichomycin A2)と云う名は、抗生
物質因子のためのごく最近の名称として2テイコプラニ
ンA2 ”(Teicoplanin A、 )に変更
された。 アメリカ特許44,239,751に抗生物質ティコマ
イシンA2 が、Actinoplanes teic
homy−ceticus nov、sp、 ATCC
31121菌の培なにより得られると記載されている。 ティコマイシンA2 は、抗生物質因子ティコマイシン
A、lティコマイシンA21ティコマイシンA3+およ
びこの菌によりつくられる抗生物質8327因子Bおよ
び抗生物質8327因子Cの混合物のうちの一種である
。また、アメリカ特許、%4,239,751に抗生物
質因子の分離法について記載されている。このアメリカ
特許A4,239.751に記載の方法では、まず醗酵
液をr過し菌糸セルケーキを残して、菌糸セル体を除去
させる。ついで、沢過した醗酵液を抗生物質が溶解する
ハロゲン化C1〜c4 炭化水素あるいはC4〜C6ア
ルカノールのような水不混和性有機溶剤と混合する。そ
の後、水不混和性有機溶剤を高速度の遠心分離により沢
過醗酵液から分離し、元の容量の約1/10〜1/20
まで濃縮し、冷却後、沈でん物(抗生物質)が生成する
迄静置させる。沈でん物はr過により回収する。更に菌
糸ケーキをアセトン水溶液で抽出することにより追加の
生成物を回収する。アセトンを蒸留後、水相を沢過醗酵
液のための前述と同じ処理をおこなう。 簡単に云えば、本発明によってティコマイシンA2 は
、醗酵液/溶剤液中にティコマイシンA2を蓄積させる
ために菌糸体を含有する醗酵液と有効量の水混和性溶剤
とを混合すること;蓄積ティコマイシンA2 を含有す
る醗酵液/溶剤液を菌糸体から分離するとと;およびテ
ィコマイシンA2を醗酵液/溶剤液から沈でん分離する
ことから成る方法により菌糸体を含有するActino
plancsteichomyceticusの全培養
醗酵液あるいはティコマイシンA2 をつくるいかなる
同じような微生物の全培養醗酵液からも抽出されるので
ある。このために有用な水混和性溶剤は、アセトン、ア
セトニトリル、ジメチルスルホキシド、n−プロパツー
ル、メチルエチルケトン、あるいはこれらの溶剤の混合
物である。 本発明の抽出法は、前述の有効量の溶剤とティコマイシ
ンA2 を含有するActinoplanes tej
−chom7ceticus の培養醗酵液とを混合す
ることに実施される。溶剤および醗酵液を有効時間充分
に接触させることによりティコマイシンA2 が溶剤/
醗酵液混合液中に蓄積させる。ついで、分離および精製
により、この液からティコマイシンA2を回収する。 本発明では、ティコマイシンA、ヲ含有スるActin
oplanes teichom7ceticus の
全培養醗酵液を使用する。醗酵液/溶剤液中にティコマ
イシンA2 を蓄積させるために使用する水混和性溶剤
は、アセトン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド
(DMSO)、 n−プロパツール、メチルエチルケト
ン(MEK)およびこれらの溶剤の混合物である。 Actinoplanes teichomyceti
cus の醗酵によるティコマイシンA2 の製造につ
いては、参照のアメリカ特許、<64,239.751
に記載され−でいる。セル体、水性の培養基およびティ
コマイシンA2 を含有する全培養醗酵液は、醗酵終了
後本発明に従って処理される。 本発明の実施に使用される溶剤は、アセトン。 アセトニトリル、DMSO,n−プロパツールするいは
MEKである。また、これらの溶剤の混合物も使用され
る。溶剤の使用量は、溶剤と醗酵液との総量に基き5〜
80容量チ、即ち溶剤/醗酵液比は1719〜4/1で
ある。1o〜6o容量チの溶剤を使用するのが好適であ
る。好適な溶剤は、アセトンおよびn−プロパツールで
ある。 本発明は、室温で常圧で実施するのが有利である。混合
は、主として醗酵液と溶剤とが充分に接触されるような
ゆるやかな攪拌によりおこなわれる。醗酵液のpnは、
水沫に臨界的ではない。酸性のpHが好ましく、醗酵液
のpHが3〜4であるのが特に好ましい。醗酵液のI)
Hは酸あるいは塩基を添加することにより調整可能であ
る。適凸な酸は、H2BO3,HCl、酢酸およびギ酸
である。 適当な塩基は、アルカリ金属塩基、例えばNa01−I
あるいはKOHである。 抽出工程を実施する場合、前述の溶剤の有効I汁をティ
コマイシンA2 を含有するActinoplancs
teichom7ceticusの全培養醗酵液と、醗
酵溶/溶剤混合液中にティコマイシンA2 を蓄積さぜ
るための有効時間の間混合する。溶剤と醗酵液との混合
割合は臨界的でない。溶剤を醗酵液へ添加するのが好ま
しい。有効混合時開は、通常2〜60分である。 混合終了後、醗酵液/溶剤液を遠心分離あるいはf過に
より菌糸体から分離させる。菌糸ケーキから分離した醗
酵液/溶剤液(今後”遊離分〃と記述する)を例えば元
の容積の約1/2〜1/10まで濃縮し、冷却後沈澱が
生成する迄静置する。ついでティコマイシンA2 を含
有する沈でん物を沢過により遊離分から回収する。別の
方法では、酸沈でんにより遊離分からティコマイシンA
2 を回収することもできる。 本発明の好適な態様においては、アセトンあるいはn−
プロパツールをティコマイシンA2 を含有するAct
inoplanes teichom3’ceticu
s の全培養醗酵液へ添加する。この場合のアセトンあ
るいはn−プロパツールは、混合物の20〜50容量チ
である。混合物は、アセトンあるいはn−プロパツール
と醗酵液と充分に混合させるため、攪拌あるいは振とう
により2〜60分間よく混合させる。醗酵液/溶剤液は
、遠心分離あるいは沢過により菌糸体から分離される。 遊離分を元の容量のl/2〜1/lOまで濃縮すること
によりティコマイシンA2 を遊離分から分離し、冷却
後洗でんが生成する迄静置させる。沈でん物はティコマ
イシンA2 であり、これはr過のような標準的′な分
I#11法により回収される。 本発明の実施を以下の実施例に」:り説明するが、これ
はその範囲を限定するものではt
ティコマイシンA2 を抽出する方法に関する。国際的
非独占名称(INN)に関する世界保健機構ハンドブッ
クに定められた命名法により、1テイコマイシンA2”
(Teichomycin A2)と云う名は、抗生
物質因子のためのごく最近の名称として2テイコプラニ
ンA2 ”(Teicoplanin A、 )に変更
された。 アメリカ特許44,239,751に抗生物質ティコマ
イシンA2 が、Actinoplanes teic
homy−ceticus nov、sp、 ATCC
31121菌の培なにより得られると記載されている。 ティコマイシンA2 は、抗生物質因子ティコマイシン
A、lティコマイシンA21ティコマイシンA3+およ
びこの菌によりつくられる抗生物質8327因子Bおよ
び抗生物質8327因子Cの混合物のうちの一種である
。また、アメリカ特許、%4,239,751に抗生物
質因子の分離法について記載されている。このアメリカ
特許A4,239.751に記載の方法では、まず醗酵
液をr過し菌糸セルケーキを残して、菌糸セル体を除去
させる。ついで、沢過した醗酵液を抗生物質が溶解する
ハロゲン化C1〜c4 炭化水素あるいはC4〜C6ア
ルカノールのような水不混和性有機溶剤と混合する。そ
の後、水不混和性有機溶剤を高速度の遠心分離により沢
過醗酵液から分離し、元の容量の約1/10〜1/20
まで濃縮し、冷却後、沈でん物(抗生物質)が生成する
迄静置させる。沈でん物はr過により回収する。更に菌
糸ケーキをアセトン水溶液で抽出することにより追加の
生成物を回収する。アセトンを蒸留後、水相を沢過醗酵
液のための前述と同じ処理をおこなう。 簡単に云えば、本発明によってティコマイシンA2 は
、醗酵液/溶剤液中にティコマイシンA2を蓄積させる
ために菌糸体を含有する醗酵液と有効量の水混和性溶剤
とを混合すること;蓄積ティコマイシンA2 を含有す
る醗酵液/溶剤液を菌糸体から分離するとと;およびテ
ィコマイシンA2を醗酵液/溶剤液から沈でん分離する
ことから成る方法により菌糸体を含有するActino
plancsteichomyceticusの全培養
醗酵液あるいはティコマイシンA2 をつくるいかなる
同じような微生物の全培養醗酵液からも抽出されるので
ある。このために有用な水混和性溶剤は、アセトン、ア
セトニトリル、ジメチルスルホキシド、n−プロパツー
ル、メチルエチルケトン、あるいはこれらの溶剤の混合
物である。 本発明の抽出法は、前述の有効量の溶剤とティコマイシ
ンA2 を含有するActinoplanes tej
−chom7ceticus の培養醗酵液とを混合す
ることに実施される。溶剤および醗酵液を有効時間充分
に接触させることによりティコマイシンA2 が溶剤/
醗酵液混合液中に蓄積させる。ついで、分離および精製
により、この液からティコマイシンA2を回収する。 本発明では、ティコマイシンA、ヲ含有スるActin
oplanes teichom7ceticus の
全培養醗酵液を使用する。醗酵液/溶剤液中にティコマ
イシンA2 を蓄積させるために使用する水混和性溶剤
は、アセトン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド
(DMSO)、 n−プロパツール、メチルエチルケト
ン(MEK)およびこれらの溶剤の混合物である。 Actinoplanes teichomyceti
cus の醗酵によるティコマイシンA2 の製造につ
いては、参照のアメリカ特許、<64,239.751
に記載され−でいる。セル体、水性の培養基およびティ
コマイシンA2 を含有する全培養醗酵液は、醗酵終了
後本発明に従って処理される。 本発明の実施に使用される溶剤は、アセトン。 アセトニトリル、DMSO,n−プロパツールするいは
MEKである。また、これらの溶剤の混合物も使用され
る。溶剤の使用量は、溶剤と醗酵液との総量に基き5〜
80容量チ、即ち溶剤/醗酵液比は1719〜4/1で
ある。1o〜6o容量チの溶剤を使用するのが好適であ
る。好適な溶剤は、アセトンおよびn−プロパツールで
ある。 本発明は、室温で常圧で実施するのが有利である。混合
は、主として醗酵液と溶剤とが充分に接触されるような
ゆるやかな攪拌によりおこなわれる。醗酵液のpnは、
水沫に臨界的ではない。酸性のpHが好ましく、醗酵液
のpHが3〜4であるのが特に好ましい。醗酵液のI)
Hは酸あるいは塩基を添加することにより調整可能であ
る。適凸な酸は、H2BO3,HCl、酢酸およびギ酸
である。 適当な塩基は、アルカリ金属塩基、例えばNa01−I
あるいはKOHである。 抽出工程を実施する場合、前述の溶剤の有効I汁をティ
コマイシンA2 を含有するActinoplancs
teichom7ceticusの全培養醗酵液と、醗
酵溶/溶剤混合液中にティコマイシンA2 を蓄積さぜ
るための有効時間の間混合する。溶剤と醗酵液との混合
割合は臨界的でない。溶剤を醗酵液へ添加するのが好ま
しい。有効混合時開は、通常2〜60分である。 混合終了後、醗酵液/溶剤液を遠心分離あるいはf過に
より菌糸体から分離させる。菌糸ケーキから分離した醗
酵液/溶剤液(今後”遊離分〃と記述する)を例えば元
の容積の約1/2〜1/10まで濃縮し、冷却後沈澱が
生成する迄静置する。ついでティコマイシンA2 を含
有する沈でん物を沢過により遊離分から回収する。別の
方法では、酸沈でんにより遊離分からティコマイシンA
2 を回収することもできる。 本発明の好適な態様においては、アセトンあるいはn−
プロパツールをティコマイシンA2 を含有するAct
inoplanes teichom3’ceticu
s の全培養醗酵液へ添加する。この場合のアセトンあ
るいはn−プロパツールは、混合物の20〜50容量チ
である。混合物は、アセトンあるいはn−プロパツール
と醗酵液と充分に混合させるため、攪拌あるいは振とう
により2〜60分間よく混合させる。醗酵液/溶剤液は
、遠心分離あるいは沢過により菌糸体から分離される。 遊離分を元の容量のl/2〜1/lOまで濃縮すること
によりティコマイシンA2 を遊離分から分離し、冷却
後洗でんが生成する迄静置させる。沈でん物はティコマ
イシンA2 であり、これはr過のような標準的′な分
I#11法により回収される。 本発明の実施を以下の実施例に」:り説明するが、これ
はその範囲を限定するものではt
【い。
(実施例1)
Actinoplanes teichomyceti
cus の全培養醗酵液(pH=6.B 〜7)のサン
プル(各3 me ) fr:、醗酵液とアセトニトリ
ルとの全混合物に基き20〜60容量チとなるようなア
セトニトリル量と混合した。サンプルを5分間連続攪拌
後、遠心分離し、その遊離分は、つぎのカラム: カラム: Dupont ZORBAXo4.6mmX
25Crr1. ODS流速’ 1.8 ”/min 溶斉し24.5/75.5 アセトニトリル10担3ギ
酸アンモニウム pH6,。 吸着’254mm を用いた標準高圧、液体クロマトグラフィ(1−IPL
C)によりティコマイシンA2 を測定した。結果なつ
ぎに示す。 アセトニトリル(容量%) ティコマイシンA2(H9
AI)50 235 40 263 30 269 20 254 対照(溶剤なし)98 (実施例2) Actinoplanes teichomyceti
cus の全培養醗酵液のサンプルからティコマイシン
A2 を抽出するため、実施例1と実質上同様の操作を
用い、本発明のいくつかの水混和性溶剤を使用して実施
した。醗酵液のpHは6.0であった。結果を以下に示
す。 対 照(溶剤なし) 124 20チ アセトニトリル 683 20% アセトン ろ17 30% アセトン ろ66 40チ アセトン 692 50% アセトン 303 20% n−プロパツール 32B 60% n−プロパツール 445 40% n−プロパノ−fi/487 50褒 n−プロパツール 618 10% MEK” ’ 215 15% MEK* 256 20% MEK” 325 25% MEK” ’ 379 * MEKはメチルエチルケトン 前述の実施例】および実施例2のティコマイシンA2
を多く含量している遊離分液からティコマイシンA2
を分離するため処理した。遊離分液を元の容量の172
〜1/10まで濃縮し、冷却後、沈でんが生成する迄静
置した。ティコマイシンA2を含有する沈でん物を遊離
分から沢過により回収した。 ついで、本発明の操作により回収したティコマイシンA
、を抗生物質のような公知の用途に供した。
cus の全培養醗酵液(pH=6.B 〜7)のサン
プル(各3 me ) fr:、醗酵液とアセトニトリ
ルとの全混合物に基き20〜60容量チとなるようなア
セトニトリル量と混合した。サンプルを5分間連続攪拌
後、遠心分離し、その遊離分は、つぎのカラム: カラム: Dupont ZORBAXo4.6mmX
25Crr1. ODS流速’ 1.8 ”/min 溶斉し24.5/75.5 アセトニトリル10担3ギ
酸アンモニウム pH6,。 吸着’254mm を用いた標準高圧、液体クロマトグラフィ(1−IPL
C)によりティコマイシンA2 を測定した。結果なつ
ぎに示す。 アセトニトリル(容量%) ティコマイシンA2(H9
AI)50 235 40 263 30 269 20 254 対照(溶剤なし)98 (実施例2) Actinoplanes teichomyceti
cus の全培養醗酵液のサンプルからティコマイシン
A2 を抽出するため、実施例1と実質上同様の操作を
用い、本発明のいくつかの水混和性溶剤を使用して実施
した。醗酵液のpHは6.0であった。結果を以下に示
す。 対 照(溶剤なし) 124 20チ アセトニトリル 683 20% アセトン ろ17 30% アセトン ろ66 40チ アセトン 692 50% アセトン 303 20% n−プロパツール 32B 60% n−プロパツール 445 40% n−プロパノ−fi/487 50褒 n−プロパツール 618 10% MEK” ’ 215 15% MEK* 256 20% MEK” 325 25% MEK” ’ 379 * MEKはメチルエチルケトン 前述の実施例】および実施例2のティコマイシンA2
を多く含量している遊離分液からティコマイシンA2
を分離するため処理した。遊離分液を元の容量の172
〜1/10まで濃縮し、冷却後、沈でんが生成する迄静
置した。ティコマイシンA2を含有する沈でん物を遊離
分から沢過により回収した。 ついで、本発明の操作により回収したティコマイシンA
、を抗生物質のような公知の用途に供した。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、(a)醗酵液/溶剤液中にティコマイシンA2を蓄
積させるために菌糸ケーキを含有する醗酵液と有効量の
水混和性溶剤を混合すること; (b) 蓄積ティコマイシンA2 を含有する醗酵液/
溶剤液を菌糸体から分ガtすること;および (c) fイコマイシンA2 を醗酵液/溶剤液から沈
でんおよび分離するとと: から成ることを特徴とする菌糸体を含有する全培養醗酵
液からティコマイシンA2 を抽出する方法。 2、水混和性溶剤が、アセトン、n−プロパツール、ア
セトニトリル、メチルエチルケトン。 ジメチルスルホキシドあるいはそれらの混合物である特
許請求の範囲第1項記載の方法。 3、溶剤が、醗酵液/溶剤液の5〜80容量チである特
許請求の範囲第1項記載の方法。 4、水混和性溶剤が、酸性醗酵液と混合される、特許請
求の範囲第1項記載の方法。 5、醗酵液の酸性がpH3〜4にセットされている特許
請求の範囲第4項記載の方法。 6゜醗酵液の酸性が、硫酸、塩酸、酢酸あるいはギ酸を
用いて所望のpHK調整される特許請求の範囲第4項記
載の方法。 7、醗酵液と水混和性溶剤との混合が少なくとも2分間
実施される特許請求の範囲第1項記載0方法。 8、蓄積ティコマイシンA2 を含有する醗酵液/溶剤
液が、遠心分離により菌糸体から分離される特許請求の
範囲第1項記載の方法。 9、蓄積ティコマイシンA2 を含有する醗酵液/溶剤
液が、沢過により菌糸体から分離される特許請求の範囲
第1項記載の方法。 10、沈でんティコマイシンA2 が、r過により醗酵
液/溶剤液から分離される特許請求の範囲第1項記載の
方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US06/540,266 US4696817A (en) | 1983-10-11 | 1983-10-11 | Extraction of teichomycin A2 from whole culture fermentation broth |
US540266 | 1983-10-11 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS60118192A true JPS60118192A (ja) | 1985-06-25 |
Family
ID=24154709
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP59213254A Pending JPS60118192A (ja) | 1983-10-11 | 1984-10-11 | 全培養醗酵ブロスからのテイコマイシンa2の抽出 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4696817A (ja) |
EP (1) | EP0137506B1 (ja) |
JP (1) | JPS60118192A (ja) |
KR (1) | KR900004423B1 (ja) |
CA (1) | CA1234387A (ja) |
DE (1) | DE3484702D1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8512795D0 (en) * | 1985-05-21 | 1985-06-26 | Lepetit Spa | Increasing ratio of components of teicoplanin a2 complex |
DK0479086T3 (da) * | 1990-10-01 | 1995-10-23 | Lepetit Spa | Fremgangsmåde til indvinding af teicoplanin |
WO1995011295A1 (en) * | 1993-10-22 | 1995-04-27 | Gist-Brocades N.V. | An improved process to recover an aqueous fermentation broth |
KR100459289B1 (ko) * | 2002-05-30 | 2004-12-03 | 이연제약주식회사 | 발효액으로부터 테이코플라닌a₂의 회수방법 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1496386A (en) * | 1975-03-05 | 1977-12-30 | Lepetit Spa | Antibiotics |
US4169887A (en) * | 1978-02-21 | 1979-10-02 | Pfizer Inc. | Antibiotics produced by species of actinoplanes |
FI73697C (fi) * | 1982-06-08 | 1987-11-09 | Lepetit Spa | Foerfarande foer framstaellning av individuella faktorer 1, 2, 3, 4 och 5 av teikomysin a2. |
GB8307847D0 (en) * | 1983-03-22 | 1983-04-27 | Lepetit Spa | Antibiotics l 17054 and l 17046 |
-
1983
- 1983-10-11 US US06/540,266 patent/US4696817A/en not_active Expired - Fee Related
-
1984
- 1984-09-17 CA CA000463321A patent/CA1234387A/en not_active Expired
- 1984-10-11 KR KR1019840006298A patent/KR900004423B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1984-10-11 DE DE8484112230T patent/DE3484702D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1984-10-11 EP EP84112230A patent/EP0137506B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-10-11 JP JP59213254A patent/JPS60118192A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR850003161A (ko) | 1985-06-13 |
EP0137506A3 (en) | 1987-06-16 |
CA1234387A (en) | 1988-03-22 |
US4696817A (en) | 1987-09-29 |
EP0137506A2 (en) | 1985-04-17 |
DE3484702D1 (de) | 1991-07-18 |
EP0137506B1 (en) | 1991-06-12 |
KR900004423B1 (ko) | 1990-06-25 |
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