JPS5984160A - 免疫分析用試薬および免疫分析方法 - Google Patents
免疫分析用試薬および免疫分析方法Info
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- JPS5984160A JPS5984160A JP19511682A JP19511682A JPS5984160A JP S5984160 A JPS5984160 A JP S5984160A JP 19511682 A JP19511682 A JP 19511682A JP 19511682 A JP19511682 A JP 19511682A JP S5984160 A JPS5984160 A JP S5984160A
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- enzyme
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/554—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being a biological cell or cell fragment, e.g. bacteria, yeast cells
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の技術分野〕
この発明は、試料中の特定の抗原または抗体を定量分析
するための試薬および免役分析方法に関する。
するための試薬および免役分析方法に関する。
従来の免疫分析方法として、たとえば、ラジオアイソト
ープで標識した抗体（または抗原）と生体より採取した
試料中の抗原（または抗体）との抗原抗体反応を利用し
て試料中の特定の抗原（または抗体）を定量分析するラ
ジオイムノアッセイ法や、酵素で標識した抗体（または
抗原）と生体より採取した試料中の抗原（または抗体）
との抗原抗体反応により抗原抗体結合物を得、その抗原
抗体結合物に標識した酵素による酵素反応を利用して試
料中の特定の抗原（または抗体）を定量分析するエンザ
イムイムノアッセイ法等がある。
ープで標識した抗体（または抗原）と生体より採取した
試料中の抗原（または抗体）との抗原抗体反応を利用し
て試料中の特定の抗原（または抗体）を定量分析するラ
ジオイムノアッセイ法や、酵素で標識した抗体（または
抗原）と生体より採取した試料中の抗原（または抗体）
との抗原抗体反応により抗原抗体結合物を得、その抗原
抗体結合物に標識した酵素による酵素反応を利用して試
料中の特定の抗原（または抗体）を定量分析するエンザ
イムイムノアッセイ法等がある。
しかしながら、前記ラジオイムノアッセイ法は、放射性
物質を利用するので設備が大かがりになるという欠点が
あり、また、ラジオイムノアッセイ法およびエンサイム
イムノアッセイ法のいずｈにおいても、十分な検出感度
に達するまでには数時間から数十時間を要して分析に長
時間を禦するという欠点がある。
物質を利用するので設備が大かがりになるという欠点が
あり、また、ラジオイムノアッセイ法およびエンサイム
イムノアッセイ法のいずｈにおいても、十分な検出感度
に達するまでには数時間から数十時間を要して分析に長
時間を禦するという欠点がある。
この発明は前記事情に鑑みてなされたものであり、極め
て短い分析時間で試料中の抗原や抗体を分析することの
できる免疫分析用試薬およびその免役分析用試薬を用い
た免役分析方法を提供することを目的とするものである
。
て短い分析時間で試料中の抗原や抗体を分析することの
できる免疫分析用試薬およびその免役分析用試薬を用い
た免役分析方法を提供することを目的とするものである
。
前記目的を達成するためのこの発明の概要は、袖体活性
Ｃ二より細胞溶解作用を受ける細胞ＪＭに、この細胞膜
を抗原とする抗体を結合すると共）二、内部に酵素また
は酵素と特異的に反応する基質を収容する細胞、および
、細胞内の酵素または基質と特異的に反応する基質また
は酵素を有することを特徴とするものであり、また、抗
原または抗体を有する試料、および、前記試料中の抗原
または抗体と抗原抗体反応をする抗体または抗原と補体
とを混合して、生ずる抗原抗体反応により前記袖体の一
部を消費した後に、補体活性により細胞膜ＰＩ’（作１
１１を受ける＊ｌｌｌ Ｉ厄ＩＩｓ、 ！−１この卸１
胞膜を抗原とする抗体を結合するど共に、内部に酵素ま
たは酵素と債異的に反応する基質を収容する細胞、およ
び、＊、ｌｌｌ Ｊｌｉ’ｌ内の酵素または基質と特異
的に反応する基質または酵素を有する免疫分析用試薬、
および、前１１−１抗原抗体反応の終了した混合物を混
合して、前Ｍｊ４袖体の残部による細胞溶解作用により
細胞膜を溶が１することにより生ずる酵素反応の生成物
を定量することによって、試料中の抗原または抗体を定
おすることを特徴とするものである。
Ｃ二より細胞溶解作用を受ける細胞ＪＭに、この細胞膜
を抗原とする抗体を結合すると共）二、内部に酵素また
は酵素と特異的に反応する基質を収容する細胞、および
、細胞内の酵素または基質と特異的に反応する基質また
は酵素を有することを特徴とするものであり、また、抗
原または抗体を有する試料、および、前記試料中の抗原
または抗体と抗原抗体反応をする抗体または抗原と補体
とを混合して、生ずる抗原抗体反応により前記袖体の一
部を消費した後に、補体活性により細胞膜ＰＩ’（作１
１１を受ける＊ｌｌｌ Ｉ厄ＩＩｓ、 ！−１この卸１
胞膜を抗原とする抗体を結合するど共に、内部に酵素ま
たは酵素と債異的に反応する基質を収容する細胞、およ
び、＊、ｌｌｌ Ｊｌｉ’ｌ内の酵素または基質と特異
的に反応する基質または酵素を有する免疫分析用試薬、
および、前１１−１抗原抗体反応の終了した混合物を混
合して、前Ｍｊ４袖体の残部による細胞溶解作用により
細胞膜を溶が１することにより生ずる酵素反応の生成物
を定量することによって、試料中の抗原または抗体を定
おすることを特徴とするものである。
先ず、この発明に係る凭投・分析用試薬は、補体活性に
より細胞溶解作用を受ける細胞膜に、この細胞膜を抗原
とする抗体を結合すると共（二内部に酵素（または基質
）を収容する細胞、および、細胞、内に収容した酵素（
または基質）とｌ特異的（＝反応する基η（または酵素
）を有する、 細胞膜を抗原とする抗体を結合し、内部に酵素（または
基質）を収容することのできる細胞としては、動物たと
えば羊の赤Ｊｆｎ球を好適に用いることができる。。
より細胞溶解作用を受ける細胞膜に、この細胞膜を抗原
とする抗体を結合すると共（二内部に酵素（または基質
）を収容する細胞、および、細胞、内に収容した酵素（
または基質）とｌ特異的（＝反応する基η（または酵素
）を有する、 細胞膜を抗原とする抗体を結合し、内部に酵素（または
基質）を収容することのできる細胞としては、動物たと
えば羊の赤Ｊｆｎ球を好適に用いることができる。。
なお、他の動物の赤面球あるいは赤ｎｌ′１球以夕ｔの
動物細胞であっても、細胞膜に、細胞膜を抗原とする抗
体を結合し、また、細胞内に酵素（または基質）を収容
することができれは、この発明Ｃ二おＣノる却１胞とし
て使用することができる。
動物細胞であっても、細胞膜に、細胞膜を抗原とする抗
体を結合し、また、細胞内に酵素（または基質）を収容
することができれは、この発明Ｃ二おＣノる却１胞とし
て使用することができる。
細胞内に収容する酵素は、たとえは酸化還元酵素たとえ
はグルコースオキシクーゼ、ウリカーゼ、グリセロール
オキシターゼ、およびコレステロールオキシターゼ、脱
水素酵素たとえは乳酸脱水素酵素、ブドウ抛脱水素酵素
およびグルタミン酸脱水滓酵素、脱炭酸酵素たとえばグ
ルクメートデカルボキシグーゼ、ウレアーゼ、ピルベー
トデカルボキシダーゼ、加水分解酵素たとえばアスパル
ターゼ、アテノシンデアミナーゼ、ヌクレオシダーゼ、
クレアチン・アミジノヒドラーゼ、アルカリホスファタ
ーゼ、酸性ホスホターゼ、転移酵素たとえはピルビン師
キナーゼ、クレアチンキナーゼ、アスパラギン酸アミノ
トランスフェラーゼ、異性化ＴｉＤ素たとえばグルタミ
ン酸ラセマーゼ、アラニンラセマーゼ、あるいは前記各
種の酵素を混合したものが挙げられる。また、ＩＩＩ
Ｊｌｉｊ、内（二酵素を収容する前杆として、そのよう
な酵素を含有する微生物を細胞内に収容するものであっ
てもよい。細胞内に前記酵素を収容するかわりに前記し
た各種の酵素と特異的に反応する基質を収容してもよい
。
はグルコースオキシクーゼ、ウリカーゼ、グリセロール
オキシターゼ、およびコレステロールオキシターゼ、脱
水素酵素たとえは乳酸脱水素酵素、ブドウ抛脱水素酵素
およびグルタミン酸脱水滓酵素、脱炭酸酵素たとえばグ
ルクメートデカルボキシグーゼ、ウレアーゼ、ピルベー
トデカルボキシダーゼ、加水分解酵素たとえばアスパル
ターゼ、アテノシンデアミナーゼ、ヌクレオシダーゼ、
クレアチン・アミジノヒドラーゼ、アルカリホスファタ
ーゼ、酸性ホスホターゼ、転移酵素たとえはピルビン師
キナーゼ、クレアチンキナーゼ、アスパラギン酸アミノ
トランスフェラーゼ、異性化ＴｉＤ素たとえばグルタミ
ン酸ラセマーゼ、アラニンラセマーゼ、あるいは前記各
種の酵素を混合したものが挙げられる。また、ＩＩＩ
Ｊｌｉｊ、内（二酵素を収容する前杆として、そのよう
な酵素を含有する微生物を細胞内に収容するものであっ
てもよい。細胞内に前記酵素を収容するかわりに前記し
た各種の酵素と特異的に反応する基質を収容してもよい
。
ただし、酵素を収容した細胞を有するメ・、疫分断用試
薬を長期間（：わたって保存しておくと、酵素が失活し
てしまうことがあるので、細胞内に収容するのは酵素よ
りも基質であるのが好ましい。
薬を長期間（：わたって保存しておくと、酵素が失活し
てしまうことがあるので、細胞内に収容するのは酵素よ
りも基質であるのが好ましい。
細胞内（二収容する酵素（または基質）の量としては、
Ｋ（ｌ施膜に結合する抗体と反応する抗原の量１ｎ１／
ゴ〜１μｔ ／ｍｅに対し十分に過剰な量たとえば酵素
活性値に換算して１００Ｕ／ｍ１以上、好ましくは５０
０ Ｕ／ｍｅ〜１０００Ｕ／’−である。このように残
存袖体活性に対して細胞内のｉｔ？素（または基η）開
が大過剰であるので、この発明の免疫分析用試薬を用い
た免疫分Ｉ目ｉｌｌ定を船時間のうしく二行なうことが
できる。
Ｋ（ｌ施膜に結合する抗体と反応する抗原の量１ｎ１／
ゴ〜１μｔ ／ｍｅに対し十分に過剰な量たとえば酵素
活性値に換算して１００Ｕ／ｍ１以上、好ましくは５０
０ Ｕ／ｍｅ〜１０００Ｕ／’−である。このように残
存袖体活性に対して細胞内のｉｔ？素（または基η）開
が大過剰であるので、この発明の免疫分析用試薬を用い
た免疫分Ｉ目ｉｌｌ定を船時間のうしく二行なうことが
できる。
細胞たとえば羊の赤血球の細１１ｆｆｌ Ｂ＠ Ｅ、こ
の細胞膜を抗原とする抗体たとえ１羊赤血球抗体を抗原
抗体反応により結合し、赤血球内に酵素たとえはグルコ
ースオキシターゼをＩｌｙ 拍した細胞の＾１．’、ｉ
＃は、たとえは次のようにして行なうことができる。
の細胞膜を抗原とする抗体たとえ１羊赤血球抗体を抗原
抗体反応により結合し、赤血球内に酵素たとえはグルコ
ースオキシターゼをＩｌｙ 拍した細胞の＾１．’、ｉ
＃は、たとえは次のようにして行なうことができる。
羊赤ｎｏ球抗体が結合した羊赤廂球（市販品）を入手し
、常法である透析法によって赤ｎｎ球内から細胞液等を
排出すると共に、赤血球内に酵素であるグルコースオキ
シターゼを刺入する。封入するグルコースオキシターゼ
の量としては、全赤面球につき５００〜１０００’Ｕ／
ｍｅであるのが好ましいが、これに限ること１：ｒ、
＜ 、後述の免疫分析方法の必要に応じて適宜に決定す
ることができる。
、常法である透析法によって赤ｎｎ球内から細胞液等を
排出すると共に、赤血球内に酵素であるグルコースオキ
シターゼを刺入する。封入するグルコースオキシターゼ
の量としては、全赤面球につき５００〜１０００’Ｕ／
ｍｅであるのが好ましいが、これに限ること１：ｒ、
＜ 、後述の免疫分析方法の必要に応じて適宜に決定す
ることができる。
免役分析用試薬中の基質（または酵素）は、前記細胞中
に収容された酵素（または基質）と特異的に酵素反応を
する前述の基質（または酵素）を使用することができる
。基質 （または酵素）の量としては、細胞内に収容さ
れている酵素（または基質）に対応する量でよい。
に収容された酵素（または基質）と特異的に酵素反応を
する前述の基質（または酵素）を使用することができる
。基質 （または酵素）の量としては、細胞内に収容さ
れている酵素（または基質）に対応する量でよい。
以上のようにして調製して得た、補体活性により細胞溶
解作用を受ける細胞膜に、この細胞膜を抗原とする抗体
を結合すると共に内部に酵素（または基質）を収容する
細胞を含有する緩衝液と基質（または酵素、）とを混合
すると、この発明に係る免疫分析用試薬を得ることがで
きる。
解作用を受ける細胞膜に、この細胞膜を抗原とする抗体
を結合すると共に内部に酵素（または基質）を収容する
細胞を含有する緩衝液と基質（または酵素、）とを混合
すると、この発明に係る免疫分析用試薬を得ることがで
きる。
次に、以上のようにして得られる免疫分析用試薬・を用
いた免疫分析方法について述べる。
いた免疫分析方法について述べる。
分析の手１１１４としては、先ず、試別たとえば患者よ
り採取した加液より分肉１１シた血清と、拙清中の測定
対象である抗原（または抗体）と抗原抗体反応がｉｊｌ
能Ｃある抗体（または抗原）と、袖体たとえはモルモッ
トのπｎ情とを混合する。第１図１１示すように、血清
中の抗原１と試薬とし℃添加した抗体２とで抗原抗体反
応が生ずる。このとき、試薬として加えられた補体６の
一部が、抗原抗体反応の生成物により消費される。なお
、混合するモルモットＪ（ｎ清中の補体量は、抗原抗体
反応により消費される貝よりも多いことを吸する。
り採取した加液より分肉１１シた血清と、拙清中の測定
対象である抗原（または抗体）と抗原抗体反応がｉｊｌ
能Ｃある抗体（または抗原）と、袖体たとえはモルモッ
トのπｎ情とを混合する。第１図１１示すように、血清
中の抗原１と試薬とし℃添加した抗体２とで抗原抗体反
応が生ずる。このとき、試薬として加えられた補体６の
一部が、抗原抗体反応の生成物により消費される。なお
、混合するモルモットＪ（ｎ清中の補体量は、抗原抗体
反応により消費される貝よりも多いことを吸する。
次いで、前記抗原抗体反応が行なわれた混合液と、この
発明に係る免疫分析用試薬とを混合する。
発明に係る免疫分析用試薬とを混合する。
混合すると、免役分析用に塾生の細胞は抗原抗体反応Ｃ
二従って、既に、抗原である細胞ＰＩＡＳ上に抗体７を
結合しているので、モルモツ） ｌ１ｆｌ ？’Ａ中の
残存袖体３が活性化され、残存袖体６の細胞溶解作用に
より、抗体７を結合する細胞膜５が破壊され、内部（二
１１人されていた酵素６が細胞、外（二放出される。放
出された酵素６と免役分析用試薬中の基慣８とが酵素反
応することにより反応生成物９が得られる。次いで、こ
の反応生成物を適宜の手段（二より定量する。定鯖手段
としては、たとえは反応生ｈｋ２物がイオンであるとき
（二はイオン乱、極を、反応生成物が過酸化水素である
ときには過１１り化水素ｒｌｉ、 極を使用する電気化
学的手段を採用することができ、また、反応生成物と他
の試薬とを反応させて反応液を呈色させ、反応液の吸光
度を測定する分光分析的手段を採用することもできる。
二従って、既に、抗原である細胞ＰＩＡＳ上に抗体７を
結合しているので、モルモツ） ｌ１ｆｌ ？’Ａ中の
残存袖体３が活性化され、残存袖体６の細胞溶解作用に
より、抗体７を結合する細胞膜５が破壊され、内部（二
１１人されていた酵素６が細胞、外（二放出される。放
出された酵素６と免役分析用試薬中の基慣８とが酵素反
応することにより反応生成物９が得られる。次いで、こ
の反応生成物を適宜の手段（二より定量する。定鯖手段
としては、たとえは反応生ｈｋ２物がイオンであるとき
（二はイオン乱、極を、反応生成物が過酸化水素である
ときには過１１り化水素ｒｌｉ、 極を使用する電気化
学的手段を採用することができ、また、反応生成物と他
の試薬とを反応させて反応液を呈色させ、反応液の吸光
度を測定する分光分析的手段を採用することもできる。
反応生成物の定量により、血液試料中に含有されている
抗原を定量することができる。つまり、酵素反応の生成
物を定量することにより、細胞外に放出された酵素の州
を知ることができる。そして、残存袖体の消ｉｔ￥は、
前記酵素量より知ることができる。また、第１図中の第
１式の反応により消費される袖体招は、第１式の反応を
起こさせるためのモルモット面消と免疫分析用試薬との
混合（二より、２ｉ！２式の反応（二従って放出される
６１累溺゛から前記酵素量を差し引くことによって、知
ることができる。また、第１式における抗原、抗体およ
び袖体は化学用論的に反応する。したがって、第１式で
消費される抗原または抗体の相と第３式により生成する
酵素反応生成物量とをあらかじめ実験により求め、検に
線を作成しておくと、浸度未知の抗原あるいは抗体を有
する試料につき、この発明の免疫分析方法を適用すると
、酵素反応生成物の定知により、試料中の抗原あるいは
抗体を定量することができる。しかも、Ｉ…胞内に収容
した酵素量は大過剰であるので、この発明（二係る免疫
分析方法によると、従来方法では数１０時間も要してい
た分析を、５〜１０分程度で行なうことができる。
抗原を定量することができる。つまり、酵素反応の生成
物を定量することにより、細胞外に放出された酵素の州
を知ることができる。そして、残存袖体の消ｉｔ￥は、
前記酵素量より知ることができる。また、第１図中の第
１式の反応により消費される袖体招は、第１式の反応を
起こさせるためのモルモット面消と免疫分析用試薬との
混合（二より、２ｉ！２式の反応（二従って放出される
６１累溺゛から前記酵素量を差し引くことによって、知
ることができる。また、第１式における抗原、抗体およ
び袖体は化学用論的に反応する。したがって、第１式で
消費される抗原または抗体の相と第３式により生成する
酵素反応生成物量とをあらかじめ実験により求め、検に
線を作成しておくと、浸度未知の抗原あるいは抗体を有
する試料につき、この発明の免疫分析方法を適用すると
、酵素反応生成物の定知により、試料中の抗原あるいは
抗体を定量することができる。しかも、Ｉ…胞内に収容
した酵素量は大過剰であるので、この発明（二係る免疫
分析方法によると、従来方法では数１０時間も要してい
た分析を、５〜１０分程度で行なうことができる。
免疫分析方法の実験例
あらかじめＭＪｕしたα−ＦＰ含有量既知の試料Ｌ１．
２ｒｎｅと抗α−ＦＰ含有液０．２ ｍｌ！と袖体含有
液０．２幻ｅとを混合して′５７℃で１０分間抗抗原体
反応を生へせ゛しめ、その後に免疫分析用試薬０．２
ＷＩｌ、を加えた結果、細胞外（二放出されたグルコー
スオキシタ゛−ゼの作用により免疫分析用試薬中のグル
コースが醇化されて生ずる過酸化水素を過酸化水素電極
で宇部した。
２ｒｎｅと抗α−ＦＰ含有液０．２ ｍｌ！と袖体含有
液０．２幻ｅとを混合して′５７℃で１０分間抗抗原体
反応を生へせ゛しめ、その後に免疫分析用試薬０．２
ＷＩｌ、を加えた結果、細胞外（二放出されたグルコー
スオキシタ゛−ゼの作用により免疫分析用試薬中のグル
コースが醇化されて生ずる過酸化水素を過酸化水素電極
で宇部した。
過酸化水素電極より出力される牝、ｂπＲｔ１と試崖」
中のα−Ｆ”ＰＪｔとの関係を第２図に示す。また、ラ
ジオイムノアッセイ法（ＲＩＡで示す）によりＭ１１液
試料中のα−ＦＰ定Ｊｎ結果とこの発明に係る免疫分析
方法（不法と示す）（二よるσ−丁゛Ｐ定量結果とは、
第３図に示すよう（二、きわめて良い相関メ１１ある。
中のα−Ｆ”ＰＪｔとの関係を第２図に示す。また、ラ
ジオイムノアッセイ法（ＲＩＡで示す）によりＭ１１液
試料中のα−ＦＰ定Ｊｎ結果とこの発明に係る免疫分析
方法（不法と示す）（二よるσ−丁゛Ｐ定量結果とは、
第３図に示すよう（二、きわめて良い相関メ１１ある。
したがって、第２図に示すグラフを検月線として、σ−
Ｆ’Ｐ含有量未知の血液試料につきこの発明σ）免疫分
析方法によりσ−ＦＰを精度よく、力１つ迅ｊ車嘔二定
、惜することができることが裏伺けられる。
Ｆ’Ｐ含有量未知の血液試料につきこの発明σ）免疫分
析方法によりσ−ＦＰを精度よく、力１つ迅ｊ車嘔二定
、惜することができることが裏伺けられる。
この発明によると、抗原抗体反応と酵素反応とを絹み合
わせて、試料中の抗原あるいは抗体を、酵素反応生成物
の定置をするだけで、迅速力１つ正確）二定量すること
ができる。
わせて、試料中の抗原あるいは抗体を、酵素反応生成物
の定置をするだけで、迅速力１つ正確）二定量すること
ができる。
第１図はこの発明（二係る免疫分析方法の原理を示す説
明図、第２図はこの発明に係る夕で、疫分析方法におけ
る酵素反応生成物の生産値を検知する重積より出力され
る箱、流仙と試料中の抗原量との相関を示すグラフ、お
よびＨｔ ３ ｖと１はラジオイムノアッセイ法の分析
結兇とこの発明に係る免疫分析方法の分相結果との相関
を示すグラフである。 １・・・抗原、 ２・・・抗体、 ６・６′・・・袖体
、４・・・抗原抗体反応生成物、 ５・・・細Ｊｌｉ’
１．膜、６・・・酊紫、 ７・・・抗体、 ８・・・、
４：ＪＪＪ、 ９・・・酵素反応生成物。 第 １ 図 ９ 第２図 ベーＦＰ ｎ（１／ｎ＃ メーＦＰ 不 三大 ％式％）
明図、第２図はこの発明に係る夕で、疫分析方法におけ
る酵素反応生成物の生産値を検知する重積より出力され
る箱、流仙と試料中の抗原量との相関を示すグラフ、お
よびＨｔ ３ ｖと１はラジオイムノアッセイ法の分析
結兇とこの発明に係る免疫分析方法の分相結果との相関
を示すグラフである。 １・・・抗原、 ２・・・抗体、 ６・６′・・・袖体
、４・・・抗原抗体反応生成物、 ５・・・細Ｊｌｉ’
１．膜、６・・・酊紫、 ７・・・抗体、 ８・・・、
４：ＪＪＪ、 ９・・・酵素反応生成物。 第 １ 図 ９ 第２図 ベーＦＰ ｎ（１／ｎ＃ メーＦＰ 不 三大 ％式％）
Claims (6)
- （１）補体活性により細胞溶解作用を受ける細胞膜に、
この細胞膜を抗原とする抗体を結合すると共に、内部に
酵素または酵素と特異的喀：反応する基質を収容する細
胞および、細胞内の酵素または基質と特異的（二反応す
る基質または酵素を有することを％徴とする免疫分析用
試薬。 - （２）前記酵素が、酸化酵素、脱水素酵素、脱炭酸酵素
、加水分解酵素、転移酵素および異性化醇分Ｍ醇素、転
移酵素および異性化酵素よりなる肝より選ばれる１ｆ１
１！以上の酵素と特異的に反応するものであることを特
徴とする＠ ｌ′ｒ ｍｆ＋求の範囲第１項に１載の免
疫分析用試薬。 - （３）前記酵素が、前記細胞内に収容された微生物によ
り産生さλするものであることを特徴とする特許請求の
範、Ｖｌ＋第１項（二記載の免疫分析用試薬。 - （４）抗原または抗体を有する試料、および、前記試料
中の抗原または抗体と抗原抗体反応をする抗体または抗
原と補体とを混合して、生ずる抗原抗体反応により前記
補体の一部を消費した後に、補体活性Ｃ二より細胞溶解
作用を受ける細胞膜（二、この細胞膜を抗原とする抗体
を結合すると共（＝、内部ζ二酵素または酵素と特異的
に反応する基質を収容する細胞および、細胞内の酵素ま
たは基質と特異的に反応する基質または酵素を有する免
疫分析用試薬、および、前記抗原抗体反応の終了した混
合物を混合して、前記補体の残部（二よる細胞溶解作用
により細胞膜を溶解すること（二より生ずる酵素反応の
生成物を定刻することによって、試料中の抗原または抗
体を定囲することを各機とする免疫分析方法。 - （５）前記酵素が、酸化還元酵素、脱水素酵素、脱炭酸
酵素、加水分解酵素、転移酵素および異性化酵素よりな
る群より選ばれる１釉以上であり、前記基質が、酸化振
元酵素、脱水素酵素、脱炭酸酵素、加水分解酵素、転移
酵素および異性化酵素よりなる群より選ば」する１釉以
上の酵素と特異的に反応するものであることを特徴とす
る特許請求の範囲第４項にＦ戦の免疫分析方法。 - （６）前記６ゲ素が、前ｆｔｅ ＃ｌ細胞内収容された
微生物により産生されるものであることを特徴とする％
ｆｒ趙求の範囲第４項に記載の免役分析方法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19511682A JPS5984160A (ja) | 1982-11-05 | 1982-11-05 | 免疫分析用試薬および免疫分析方法 |
| EP83107664A EP0103139B1 (en) | 1982-08-11 | 1983-08-03 | Reagent composition for immunoassay and immunoassay using the same |
| DE8383107664T DE3381055D1 (de) | 1982-08-11 | 1983-08-03 | Reagenszusammensetzung fuer immuntest und dieselbe verwendender immuntest. |
| US07/062,383 US4820634A (en) | 1982-08-11 | 1987-06-15 | Immunoassay method and immunoreactive cell reagent |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19511682A JPS5984160A (ja) | 1982-11-05 | 1982-11-05 | 免疫分析用試薬および免疫分析方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5984160A true JPS5984160A (ja) | 1984-05-15 |
Family
ID=16335755
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19511682A Pending JPS5984160A (ja) | 1982-08-11 | 1982-11-05 | 免疫分析用試薬および免疫分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5984160A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0560758A (ja) * | 1991-08-30 | 1993-03-12 | Ishizu Seiyaku Kk | 補体結合反応の測定にリポソームを用いる免疫測定方法 |
| CN110763846A (zh) * | 2019-11-07 | 2020-02-07 | 苏州普瑞斯生物科技有限公司 | 一种补体C3c的检测试剂盒及制备方法 |
-
1982
- 1982-11-05 JP JP19511682A patent/JPS5984160A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0560758A (ja) * | 1991-08-30 | 1993-03-12 | Ishizu Seiyaku Kk | 補体結合反応の測定にリポソームを用いる免疫測定方法 |
| CN110763846A (zh) * | 2019-11-07 | 2020-02-07 | 苏州普瑞斯生物科技有限公司 | 一种补体C3c的检测试剂盒及制备方法 |
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