JPS5934684B2 - マロタス．リパンダス．ミユ−エル．アルグより抗癌活性物質の製造方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はトウダイグサ科の樹木、マロタス、リパンダス
、ミューエル、アルダから腹水型腫瘍Ｓａｒｃｏｍａｌ
８０Ｍこ対して著明な増殖抑制作用を有する新規な２
種の抗癌活性物質ＡＫ−３Ａ（仮称）とＡＫ−３Ｂ（仮
称）を抽出して単離精製するその製造方法に関するもの
である。

本発明者等は植物から得られる生理活性物質につき多年
に渡り鋭意研究してきたが、先に雨期に採集されたトウ
ダイグサ科のマロタス、リパンダス、ミューエル、アル
ダから次式（１）で示されるヒスタミン様生理活性物質
（特願昭４８−１２４０２８号）の抽出方法を確立した
が今回新たに乾期に採集された同樹木、樹皮、木質部か
ら腹水型腫瘍Ｓａｒｃ−ｏｍａ１８０Ａに対して著明な
増殖抑制作用を有する新規な２種の抗癌活性物質ＡＫ−
３ＡとＡＫ−３Ｂを抽出して単離精製するその製造方法
を完成させたのである。

以下に本件発明で得られるＡＫ−’３ＡとＡＫ−３Ｂの
物理化学的性質を示すが、これと同一の物理化学的性質
を示す化合物は今だ報告されていなＧ）。

抗癌物質ＡＫ−３Ａは融点１８７−１８９°の白色板状
結晶で元素分析の結果は窒素を含まず炭素、酸素、水素
からなる中性な化合物であり、分析結果次の値が得られ
る。

Ｃ：６５．１７％ Ｈ：６．３０％ Ｎ ０％ 紫外線吸収スペクトル（エチルアルコ・−ル溶媒中）は
２１０Ｂｍ以上に吸収極太を示さない。

赤外線吸収スペクトルは第１図（ＫＢｒ錠剤）に示すご
とく３４５．０ｃｍ−１，１７６８ＣｒＩＬ−１゜１７
３０ｃＩＴｌ−１，１５０３ＣＩｒＬ−１，１１６０ｃ
ｒＩＬ ”。

８７５ＣＩｎ−１等に吸収を示す。

又核磁気共鳴吸収スペクトルは第２図（重クロロホルム
溶媒中）に示すごと＜１．１δ、３．７δ。

４．５δ、５．５δ、６．５δ、７．５δ等に吸収を示
す。

更に、この物質は、メタノール、エタノール、アセトン
、エーテル、酢酸エチルエステル、クロロホルム、ジオ
キサン、ピリジン、ベンゼン等の溶媒に溶解し冷水に難
溶である。

抗癌物質ＡＫ−３Ｂは、融点１１８−１２０゜の白色針
状結晶で、元素分析の結果は窒素を含まず炭素、酸素、
水素からなる中性な化合物であり、分析の結果次の値が
得られる。

Ｃ：６２．８３％ Ｈ： ６．１０％ Ｎ： ０％ 紫外線吸収スペクトル（エチルアルコール溶媒中）は２
１０Ｂｍ以上に吸収極太を示さない。

赤外線吸収スペクトルは第３図（クロロホルム溶媒中）
に示すごと＜ ３４７０ｃｍ ” 、Ｌ７５０ｃｒ／
ｌ’ 。

１７２７ｃ／ＴＬ、１５０４ＣｒｒＬ、８７３ｃｒｒ１
等に吸収を示す。

又核磁気共鳴吸収スペクトルは第４図（重クロロホルム
溶媒中）に示すごとく、■、１δ、３．７δ。

５．５δ、６．４δ、７．５δ等に吸収を示す。

又この物質はメタノール、エタノール、アセトン、エー
テル、酢酸エチルエステル、クロロホルム、ジオキサン
、ピリジン、ベンゼン等の溶媒に溶解し冷水に難溶であ
る。

従って、本件発明で得られた両物質は、式（Ｉ）で示さ
れる物質とは、融点（２０１〜２０２° ）、元素分析
値（Ｃ：６９．４７％、Ｈ：６．１３％、０：２４．３
６％）、赤外線吸収スペクトル、核磁気共鳴スペクトル
等において、その物理・化学的性質に相違を示すことが
確認された。

本発明で得られた物質ＡＫ−３ＡとＡＫ−３Ｂはマウス
の腹腔内に移植した腹水腫瘍Ｓａｒｃｏｍａ１８０Ａの
増殖に対して表■に示す様に著明な抗癌活性を示した。

抗癌活性は国立ガンセンターの星らの方法（Ｃｈｅｍ、
Ｐｈａｒｍ、Ｂｕｌｌ 、１７ （４）８４８−８５０
（１９６９））により判定した。

すなわち腹水型腫瘍Ｓａｒｃｏｍａ１８０Ａを体重２０
〜２３グラムのｄｄ系マウス（雌性１群６匹）の腹腔内
に移植して２４時間後から１日１回、５日間にわたり、
ＡＫ−３ＡならびにＡＫ−３Ｂを各々腹腔内に連続投与
して７日後に殺し、腹水量を測定し、さらに細胞比を求
めて総細胞容積を算出し、あわせて腫瘍成長率（Ｔ／Ｃ
％）を求めｔモなお試料は０．５％ＯＭＣに懸濁し０．
０５ｍｌ／１０ ｇ体重になる様に濃度調製して投与し
た。

それらの結果を表Ｉに示す。（抗癌活性は、Ｔ／Ｃ３’
ｏＭ ６５−４１％を＋、４０−１１％を廿、１０−０
％を１廿とする） 本発明を実施するに際しては、マロタス、リパンダス、
ミューエル、アルダの葉、樹皮、または木部等３〜１０
〜に熱水又は有機溶媒を適当量例えば２〜４倍量加え、
室温または水溶中で５時間〜１ケ月間にわたり抽出処理
する。

抽出処理する際使用する有機溶媒は、クロロホルム、メ
チレンクロリド、エーテル、酢酸エチルエステル、アセ
トン、フロビルアルコール、ブチルアルコール、エタノ
ール、メタノール等が用いられる。

次いで得られた抽出液は濃縮し、これを適当な有機溶媒
、例えば、クロロホルム、アセトン、酢酸エチルエステ
ル、エタノール等で再抽出し濃縮し、直接有機溶媒で、
例えば、エタノール、メタノール、アセトン、クロロホ
ルムで結晶させる。

又は濃縮物を常法に従ってシリカゲル又はアルミナを使
用してカラムクロマトグラフィーを行い分画精製し、溶
出部を濃縮し、有機溶媒で結晶化させる。

例えば直径ＩＱＩ長さ１００Ｃ７′／Ｌの円柱にシリカ
ゲル又はアルミナを１．３〜４に７詰め、抽出濃縮物を
吸着させて、ベンゼン、クロロホルム、エーテル、メタ
ノール等を１０〜１５７用いて、順次展開、溶離すると
、本物質はクロロホルムフラクションからＡＫ−３Ｂ、
ＡＫ−３Ａの順に溶出取得される。

次いで、このフラクションを更に濃縮し、メタノール、
エタノール、アセトンなどの有機溶媒で結晶化を行う。

実施例 ｌ マロタヌ、リパンダス、ミューエル、アルダの樹皮と木
部１０〜を粉砕し２０ｔの容器に入れ、水を１０を加え
た後水浴中に浸し、水浴中に蒸気を吹き込みながら約５
時間力日熱抽出する。

抽出液を蒸発乾固すると茶褐色の泥状物質２５０ｇが得
られる。

次にこの抽出物質にメタノールを加えてメタノール抽出
を行う。

このメタノール抽出液を減圧下で濃縮すると約２１０ｇ
の抽出物が得られる。

さらにこの抽出物質にクロロホルムを加えてクロロホル
ム抽出を行う。

このクロロホルム抽出液を減圧下で濃縮すると約４０ｇ
の抽出物が得られる。

このクロロホルム抽出物を２に７のシリカゲルをつめた
カラム管を使用して、ベンゼン１０ｔ１次いでクロロホ
ルム１２Ａと順次展開溶離していくとクロロホルム溶出
部の前部フラクションからＡＫ−３Ｂが溶離される。

この溶離液を濃縮乾固し、エタノール−水から結晶化し
、エタノールから再結晶すると、融点１１８−１２１°
のＡＫ−３Ｂの白色針状晶が約３００〜得られる。

次いで後部フラクションからＡＫ−３Ａが溶離される。

この溶離液を濃縮乾固し、アセトン−水から結晶化し、
エタノールから再結晶すると、融点１８７−１８９°の
ＡＫ−３Ａの白色板状晶が約９０７７２７得られる。

実施例 ２ マロタヌ、リバンダス、ミューエル、アルダの葉と樹皮
と本部９に５７を粉砕し２０ｔの容器に入れクロロホル
ム１２ｔを加えた後密封した状態で約１ケ月放置する。

抽出液を減圧下に蒸発乾固すると約２００ｇのアメ状物
質が得られる。

この抽出物を約３．５〜のシリカゲルをつめたカラム管
を使用して、ベンゼ゛ン２０を次いでクロロホルム２５
ｔと順次展開溶離していくとクロロホルム溶出部の前部
フラクションからＡＫ−３Ｂが溶離される。

これを濃縮乾固し、エタノールから結晶化し、エタノー
ルで再結晶すると融点１１８−１２１°のＡＫ−３Ｂの
白色針状晶的１．５ｇが得られる。

次いで後部フラクションからＡＫ−３Ａが溶離される。

これを濃縮乾固し、エタノール−水から結晶化し、エタ
ノールで再結晶すると、融点１８７−１８９°のＡＫ−
’３Ａの白色板状晶が約１ｇ得られる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明で得られる物質ＡＫ−３Ａの春物線吸
収スペクトルである。 第２図は、本発明で得られる物質ＡＫ−３Ａの核磁気共
鳴吸収スペクトルである。 第３図は、本発明で得られる物質ＡＫ−３Ｂの赤外線吸
収スペクトルである。 第４図は、本発明で得られる物質ＡＫ−３Ｂの核磁気共
鳴吸収スペクトルである。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 別表記載の特性を示す物質ＡＫ−３Ａ（仮称）ＡＫ
   −３Ｂ（仮称）を含むトウダイグサ科の樹木、マタロス
   、リハンダス、ミューエル、アルダ（Ｍａｌｌｏｔｕｓ
   、ｒｅｐａｎｄｕｓ、Ｍｕｅｌｌ 、−Ａｒｇ、）よ
   り採取された葉、樹皮、木質部を熱水または有機溶媒で
   処理し、前記両物質を含む可溶性成分を抽出した後、該
   抽出液を濃縮乾固し、このものをアルコール系有機溶媒
   または、ケトン系有機溶媒、エステル系有機溶媒、ベン
   ゼン系有機溶媒、ハロゲン化炭化水素系有機溶媒、また
   はこれらの混合溶媒に溶解せしめて、前記両物質を単離
   結晶化せしめるか、または、前記抽出液をカラムクロマ
   トグラフィーで処理し、前記両物質を単離精製すること
   を特徴とするマロタス、リパンダス、ミューエル、アル
   ダより抗癌活性を有するＡＫ−３ＡとＡＫ−３Ｂの製造
   方法。