JPS59161322A - マルチポリマ−合成系用の方法および装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は化学的反応を起す方法および装置に関する。そ
の反応および装置は、固体の重合体支持体（カラ人形Ｖ
Ｃ存在していてもよい）から他の重合体支持体（又カラ
ム形に存在していてもよい）Ｖ？−移される成る種の反
応種の手段によって化学的化合物の合成に基づいている
。本発明の化学反応を実施するだめのこの新規な方法お
よび装置は非常に多方面に１吏用でき、そして自己制御
しながら各種のタイプの化合物の選択的かつ高収率合成
のために１更用できる。

発明の基礎 分−１／ｒ目的のため相体に結合した反応種Ｏ使用は知
られている。Ｒｅｂｅｋ　ｅｔ　ａｌ、　ＪＡＣ８９７
：　２（１９７５）４５４頁およびＲｅｂｅｋ　ｅｔ　
ａｔ。

Ｔｅｔｒａｈｅｄ、ｒｏｎ　８５　蓚７２８−７８７頁
１９７９は中間体検出のため〇三工程テストを記載して
いる。そのテストは不溶性重合体前駆物質から反応性中
間体の発生および第二の固体組上のトラップによるそれ
の検出を意味する。この方法は求核的触媒における中間
体の検出に特に有用である。その同じ原理はメタホスフ
ェート、シクロブタジェンを含む反応シてそしてホスフ
ェート移動反応においてレベソクによって適用された。

成る種のアシル化反応を除いて、レベツクの三工程反応
は再生可能な中間体を示さない。本発明の装置において
実施された反応に原理的に類似しているけれども、レベ
ソク等は、合成目的のための適用性に適面することなし
に少量の反応体を使用する分析反応を記載している。さ
らにレベツクの場合に、２つのポリマーは一諸に混合さ
れるか又は、焼結ガラスフリットによって分離され、そ
してその形成された反応性中間体は一つのポリマーから
別ＱポリマーＶＣ移る。この系では本発明の系において
行なわれる反応のモニターおよび自動化はできない。

本発明の目的は有機化合物の合成に広く適用可能な方法
を提供することである。

′　　　　　　　有機化合物の自動的な合成および回収
用の装置を提供することが本発明の別の目的である。

本発明のこれらのおよび他の目的は各々異なつた反応種
を運ぶ第１および第２のポリマー支持体の使用によって
達成される。特に選択された中間反応体を含む溶剤中の
液体媒体はその中間体との反応によってその第１の電合
体支持体から反応種を除去しそしてそのように除去され
たその反応種をその第２の支持体の反応種と反応させ、
同時に初期中間反応体を再生させるためその支持体間に
循環される。その第２の支持体がその反応生成物で適宜
蓄積されるまで、その循環を続けるっその時、中間反応
体の循環を中止し、そしてその反応生成物を分離しそし
てその第２の支持体から回収される。その得られた反応
生成物はその第１の支分坏からの初期反応体および中間
反応体を含まず、そのため選択的および高収率合成が達
成される。

その第２のポリマー支持体上のその初期反応生成物は、
それ自体ぞのポリマー支持体からその反応生成物を分離
することなしに、新規な反応種として開用できる。新し
い第１のポリマー支持体／反応種は、第２のポリマー支
持体上の新規な反応種に加えるために最初の第１のポリ
マー支持体の代わりに使用できる。例えばポＩＪ　ｄプ
チド又はポリヌクレオチドのような長鎖生成物は本発明
の方法によって合成できる。

本発明の方法はその生成物の自：’；ｒｈ喪造を可能に
する装置において実施されることが好ましい。この装置
において、その二つのポリマー支持体は、各々その中間
反応体が循環する個々Ｑカラムに置かれる。その中間反
応体の相対的な存在を感知できるセンサーがその第２の
ポリマーカラムの入口および出口に個々に置かれる。同
一内容の中間反応体がその第２ｖカラムの入口および出
口で感知される時、こねは第２のカラムへの中間体の蓄
積の完了および次の合成工程又は分離および回収用の開
始を示す。マイ゛クロコンピユータ−が七Ｃう方法を完
了させるため適用なノくルブを閉鎖させることによって
完了の指示に反応するために設けられる。

そのセンサーその中間反応体の０度の定量分析を行なう
ことができ、それによって収率の連続的直接記録を実施
できる。

好ましい具体例の詳細な記載 本発明は以下の反応 Ｂ十α−Ａ−Ｂ−Ａ＋α によって普通に合成可ｔｉヒである有機化合物Ｂ−Ａの
合成に適用できる。本発明の方法において、しかしなが
らＢは】Ｊｎ常結合基りによって反応性ポリマー■に化
合的結合によって結合されており、セしてＡは結合基α
′　の手段によって反応性ポリマー■に化学的結合によ
って結合されている。

■−αＬｈ　　と反応して、α−Ａを形成する中間反応
体αは、α−Ａが結合されているポリマー（第１カラム
）に供給され、そＯ中間体化合物α−Ａを形成する。そ
の中間体化合物α−ＡはＢが結合されているポリマーに
循環される。そこで中間体化合物α−Ａは■−Ｌ−Ｂと
反応し■−Ｌ−Ｂ−Ａおよび初期反応体αを形成する。

その再生でれた初期αはそれから第１Ｖ）カラムに循環
され他のポリマーの■−α／ａ基と反応し、そしてその
反応が完了しそしてかつその第１カラムが実質上からＫ
Ｚるか又は第２カラムが実質上一杯になるまでその手順
を継続する。

この時点で最終目的物Ｅ−Ａは第２カラムから分離およ
び回収される。

このような方法を実施するための装置は、第１図に示さ
れる、この装置において、その第１のポリマーで支持さ
れた反応住（■−α′−Ａ）はカラム１０内に充填され
、そしてその第２のポリ々−で支持された反応種（［Ｆ
］−Ｌ−Ｂ）はカラム１２に充填される。ポンプ１４は
中間体化合物αおよびα−Ａを含む溶剤を矢印の方向に
チューブ１６．１８を通してカラム１ｏおよび１２間を
循環させる。

第１のセンサー２０はカラム１２への入口に配置され、
そして第２のセンサー２２はカラム１２からの出口に配
置夜される。これらのセンサーはそこを通るその溶液の
化学的又は物理的性質を測定する。これらのセンサー２
ｏおよび２２は、検出器２４に個々のアウトプットを提
供し、検出器２４はそのアウトプットを比較する。セン
サー２０および２２からのアウトプットが実質上同じで
ある時、これはカラム１２ではもはや反応は起らずそし
てそのためカラム１２での反応は完了したことを示す。

検出器２４はマイクロコンピュータ−のようなコンピュ
ーター２６に信号を送る。

このような比較がカラム１２におけるその反応の完了を
示す時、そのマイクロコンピュータ−がポンプ１４を停
止させるコントロール信号を発生させ、そしてもし所望
ならば白駒的に図示されていない手段によってカラム１
２からその反応生成物の分離および回収のようなその方
法の次の工程を開始させる。

センサー２０，２２は定ψ分析が可能である時、収率の
連続的な直接的記載がコンピューター２６ＶＣよって計
算でき、直接的収率が得られる時いっても反応は終る。

本発明のその方法を実施させる場合、その反応可能なポ
リマー■および■は同じであっても良く又は異なっても
良く、そしてα′又はＢ或いはＬ基が個々に受は入れら
れる化学的に変性ポリマーからなる。このようなポリマ
ー支持体物質は、当業界で公知であり、例えばｔｓｉａ
ｔｈｗｒ、Ｎ、ｉ（、、ｅｔ　ａｔ。

”　Ｐｏｌｙｍｅｒｓ　ａｓ　Ａｉｄｓ　　ｉｒＬＯｒ
ｇａｎ、ｉｃ　Ｃｈ、ｅｍ、１ｓｔｒｙ’。

Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ　　１９８０およびｇ′
ＰｏｌｙｒｎｅｒｉｃＳ１Ｌｐｐｏｒｔ−Ｍａｔｅｒｉ
ａｌｓ″の第二章又はＡｋｅｌａｈ。

Ａ、、ｅｔ　ａｌ、”Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ、ｏｆ　
ｐｗｎｃｔｉｏｎｉｚｅｄＰａｌ’／ｍｅｒｓ　　ｉｎ
　　Ｏｒｇａｎ、ｉｃ　　Ｓ’／ｎｔｈｅｓｉｓ″Ｃｈ
ｅｒｎ、’　１ｌｅｖ、。

１９８１．８１．５５７−５８７（引例の内容はいずれ
も本発明に含まれる）ＶＣ記載されている。

このような支持物質は当業界で仰られているように導入
されるべき官能基に依存して選択できる。

好ましいこのようなポリマー１ま、スチレンベースポリ
マー、シリカ、ポリアクリルアミドＦＡ　４体、セルロ
ース、セファデックスＣ３ｅｐｈａｔｉｅｘ）等である
。

本発明に従って合成可能である化合物Ｂ−Ａは、普通に
反応（１）　Ｋよって合成可能であるすべての化合物を
含む。このような反応は、アシル化、加燐酸反応亜４ｎ
化反応、アルキル化反応、水素化反応等を含む多くの異
なった反応タイプに適用できる。その反応タイプは、求
電子的、求核的又は遊離基である。

「マツチメーカ（ｒｎａｔｃｈｎｕｘｋｅｒ）Ｊとして
矧られた中間体反応体として普通の反応式（１）におい
て使用可能な基又はイオンが使用できる。適用可能なこ
のような化合物又はイオンは反応のタイプに依存しそし
て多くの実施例が下記の実施例において提供される。そ
の反応タイプに依存してαはアニオン又はカチオンであ
ることが理解されるべきである。αがアニオンである時
、そのカチオンは通常水素原子であり、しかしアルカリ
金属イオン又は他の適当なカチオンであっても艮い。そ
のカチオンが水素である時、αは通常下記の実施例およ
び特許請求の範囲において完全化合物として示され、そ
れは、例えば ろヨ 青である。αがカチオンである時、ノ〜ロゲンのような
アニオンが１吏用できる。

単純化のため、第１カラムでの一般的反応は以下に示さ
れる： ■−α／ａ＋α→■−α′＋α−Ａ　　　　（ＩＩ）第
２カラムでの一般的反応は次のように示され、　　　　
る： ■−Ｌ−Ｂ＋α−Ａ→■−Ｚ、−Ｂ−Ａ＋α　（［［Ｄ
第１カラムにおけるポリマー上でイオンがＡを置換し、
そして第２カラムにおけるそのポリマー中ＯＡによって
置換される時、それらは同じイオンであり、通常水素、
金属又はハロゲン原子であり、そして本発明の理解を複
雑にしないようにこれらの一般式の反応式によって示き
れていないことが理解されるべきである。

勿論、時々αはＡと錯体を形成し、そしてそのポリマー
中にイオンを残さない中性であっても艮い。

その結合基α′はαと同じであっても良い基である。

このような基を選択する場合に合致すべき唯一の要件は
、その反応条件で■から離れない程度に十分に強い化学
結合によって■に耐着可能であるということである。さ
らに、それはＡと反応可能であり、α′とＡとの間に結
合を持った化合物■−α／ａを形成し、それはαによっ
て分裂可能である。安定な反応条件下でその反応体とそ
の反応生成物との間での平衡が達成できるように、新鮮
なαが連続的にカラムに循環され、そして形成されたα
−Ａが連続的にそこから除去されるにつれてこれはα′
　とＡとの間の十分に分裂可能な結合を表わす。しかし
ながら、結合基α′は不動でありそしてそのカラムにお
いてトラップされる。

本発明において使用できる反応および反応体の例は下記
の実施例において示される。実施例１−２４の概略は表
１に示される。

本発明の反応が実施できる適する溶剤は、無水クロロホ
ルム、エタノール、エーテル、アセトン、塩化メチレン
、水、ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、酢酸エ
チル、テトラヒドロフラン。

トルエン等である。αおよびα−Ａ用の溶剤でありそし
て反応体および反応生成物のいずれとも反応しない溶剤
が使用できる。

本発明はポリペプチドの自動化された製造用に荷Ｙｃ適
する。不発明によるポリペプチド合成の一般式は第２図
および第３図に示きれる。第１のカラムＢＯＶ（おいて
アミノ酸を會むポリマー供与体が充填され、それはポリ
被ブチドの形成における構成単位として使用のため第２
のカラムに移動されることが望ましい。そのアミノ酸は
、ポリペプチド合成において一般に知られているｔ−ブ
トギシ力ルボニル（ＢＯＣ）又はベンゾキシカルボニル
（Ｚ）のような普通のＮ−末端ブロッキング剤によって
停止される。その第２のカラム３２はポリマー受容体が
充填されている。そのマツチメーカーαをざむ溶剤はポ
ンプ８４で等３６を辿ってカラム３０に送られ、そこで
αはアミノ酸店の幾分かと反応してＢｏｃＡＡを形成し
始める。この化合物はチューブ３８およびＵＶセルであ
るバストセンサー４０を通ってカラム８２ＹＣ循環され
る。そこでそのアミノ喰はそのポリマー受容体と反応し
て初期のマツチメーカーαを再生し、そのαはカラム８
０ＹＣ再循環される。カラム３２への入口でＵＶセル４
０によって感じられた１ｌｏｃＡＡ−α　を含むその溶
液は、ＵＶセル４２によって感んじられたカラム３２の
出口でのαの溶液とは異なったＵＶ％性を有するので、
そのＵＶ検出器４４およびマイクロコンピュータ−は反
応を継続させる。

最後に第３図において示されるように、カラム３２中の
ポリマー受容体はアミノ酸で匍和され、そしてそこでは
もはや反応は起らない。これが起る時、カラム３２を出
る溶液はカラム３２を入るｆ８にと同じである。ＵＶセ
ル４０および４２によって感んじられたこれらのＧ液の
密度は検出器４４ＩｆＣよって検出され、そしてマイク
ロコンピュータ−４６は、その合成が第２の工程に入ら
せるプロセスコントロールを活性化する。この工程にお
いて、Ｎ−末端保機基（稟２図および第３図において示
さ警ｔたようなりｏｃ）はカラム８２におけるそのポリ
マーから除去され、セしてカラム８０は図示されていな
い新しいカラム８０’によって置換され、カラム３０′
はカラム３２の代りにすでにｔＪｌのアミノ酸に結合さ
れるべき異ったアミノ醒を含む。検出器４４が反応の完
了を検出するまで、その同じマツチメーカー溶液が上述
と同じ方法で循環される。そのＢｏｃ　保護基は再びカ
ラム８２Ｐこおけるそのポリマーから除去され、そして
そのポリマー受容体上に蓄積されるべき次のアミノ酸を
含むポリマー供与体が置換され、そのポリマー受容体は
２つのアミノ酸の釦である。所望Ｏポリにプチドがカラ
ム３２におけるポリマー支持体上に形成されるまでこの
方法を続ける。ポリペプチドは普通の技術によってポリ
マーから外端されて、所望のポリペプチドを得ることが
できる。

第３＋７０　（Ｌ６１０　０ｋａｒｒｗ、ｒ、ＡＩ−、
ｅｔ　ａｌ、Ｃｈｅｒｎ。

Ａｂｓ、５８−８０５１．９（１９６８）またはＬｌｏ
　３’　ｄ　＊　Ｗ−Ｇ　、ｔ　ｅ　ｔ　ａ　ｌｎ　Ｊ
−Ａｐ　ｐＬ　−Ｐｏ　ｌ　ｙＢ、ＳｃＺ　−＃　７　
＃２０２５（１９６８）の方法に従って２チル４％架橋
したポリスチレンに結合できる。

第２のポリマーとして、 １当量と■−ａｎ、ｃｇ　　（メリフィールドポリマー
）１尚量とを５０℃で６時間ＤＭＦ／メタノール（１：
１）中で混合することによって作られる。

■は２チ架橋ポリスチレンである。

第１のポリマーは第１のカラム上に置かれ、第２のポリ
マーは第２０カラム上に置かれる。水溶剤中でｑ■　は
第１のカラムに循環される。七Ｊ の第１のカラムでそのポリマーとの反応後、Ｃ〜Ｂｒ２
が形成されそれはそれから＠２カラムＶＣ循環する。第
２カラムでそのポリマーとの反応される。

それからそのサイクルは繰返され、それは室温および常
圧で行なわれる。第２カラムの入口および出口に設置さ
れた紫外線センサーはその宕削中への入口でのその薬品
の！震度がその出口でのそれと回しになった時、その第
２■カラムは引和されカリ加水分解ＩＣよってそのポリ
マーから離れる。

実施例２ 実施例１の方法はその第１のカラムのそのポリだ。それ
は実施例１に示されたように同じ公知の方法で作られる
。

実施例３ 実施例１の方法は第１０ポリマー上に臭累（Ｂｒ２）の
代わりにヨウ素（Ｉ２）を匣用して繰返えであった。

実施例４ 第１ＱカラムにおいてＦｒｅｃｈｅｔ、Ｊ、、ｅｔ　ａ
ｌ。

Ｊ、Ａｉａｃｒｏｒｎｏｌ、Ｓｃｉ、Ｃｈｅｍ、、Ａ−
１１ｔ　５０７　（１９７７）第２のカラムにおいて実
施例１に記載されたよう作られた。ＣＨ，ＯＲ層剤中で
実施例１のように　　０ ＨＯＣＣＩ−１ｃｃＨ３がＨＢｒ／Ａｃ０Ｉｉによって
そのポリｈ、ｒ マーから離れた。

昼施例５ 第２カラムのそのポリマーの代りに実施例１および４に
おける方法に従って作られた Ｏ−Ｏｏ−０Ｈ２ｏｃｃＨ＝を便用して実施例４の方法
が繰返えされた一ｆ：ｔ７）最終生成物　　１１１１０
ＣＣＨＢｒＣ＆Ｂｒ が実施例４のように解離した。

そして循環マツチメーカーとしてＣＭ、ＯＲ中の用して
作られた。その最終生成物１１０ＣＣＨＦＣ１−１，は
実施例４および５において解離した。

ＨＮＯｓと〃・ら作られた浴液とを混合することによを
使用しそして（実施例１において詳細に記載された製造
方法に同じように作られた）第２カラムＨ 繰返された。マツチメーカーとしてＣｆ１ｔ　Ｃ１１２
中のの最終生成物　ＨＯＣＣＩＩＮＨＢＯＣはアルカリ
加水ｌｋ 分解によってそのポリマーから解離した。

実施例８ 第１カラムにおいて、下記の反応式 が充填された。この反応式における出発物質は（１９７
２）Ｉｃ従って作られた。第２カラムにおリマーは５０
℃６時間ＤＭＦ／メタノール（１：用１−て作されぞし
てｊ３ｕＬｉでそのポリマーを処理した。そのマツチメ
ーカーとしてｃ１１２Ｃｅ２甲のＮＯま た時、画壇を停止しそして最終生成物ｈｏｃｃｌｌｉ３
ｕｇｔＩｉ２ はＨＢｒ／ＡｃＯＨによりそのポリマーから解離した。

実施例９ 下記の手順 ｒ ニオケル出発ポＩＪ−ｑ−はｆｆａｌｌｅｎｓｌｅｂｅ
ｎ、Ｍ、Ｌ、。

Ａｎｇｅｗ６Ｍａｃｒｏｍｏ１．Ｃｈｅｍ、ｍ８１　＃
　１４３（１９７８）に従って作られた。実施例１と同
じポリマーが第２カラムは充填された。マツチメーカー
として水は 終生酸物がそこに記載されたように解離した。

１４６９−１４８７頁（１９８２）に従って作らされた
。実施例において記載されたようにＨ Ｏ れた■−ＣＩｉ２０　ＣＣＨＮＨＢ　ＯＣが第２カラム
ｔｃ充填φＨ２ Ｒ 使用された。最終生成物　Ｈ６ＣＣｆ１ＮＨＢＯＣ÷Ｈ
・ ギ が実施例１のようにそのポリマーから＋ａ７４Ｇされた
。

四条孔質の中和ＶＣよって作られた 実施例１に記載されたように をＨＢｒ／ＡｃＯＨで解離した。

実施例１２ ＪＡｃＳ、９９．４１６５（１９７９）において記載さ
れたように作られた。

は２％袈・向ポリスチレンである。実施例１に記載され
たように４−品ＣＭ２０Ｂ、およびＰＣＨ，Ｃｌを使用
して作られた■−ＣＨｚ　ＱＣＣ＆　ＣＨｓ　　が第２
カラムシこ充填された。マツチメーカーはＴＨＦ中のそ
の反応生成物はぞのポリマーから分離の必要はないが、
しかしそのポリマー自体他の方法（例えば捉廁例８と類
似の方法）においてポリマー反応性種として有用であっ
た。

８　、１８０　、１９７５　；　ｌ１ａｒｒｉｓｏｎ、
Ｃ９Ｒ０，ｅｔ　ａｌ。

従って作られｒａ−ｃｏｏＨが第１カラムに充填された
。２５℃でＣＪｉ２ＣＴｏ中でピリジンを添加し填した
。使用したマツチメーカーはジオキサン中のＣｌｌ３Ｃ
Ｏ（Ｈｌであった。その最終生成物中の加水分解によっ
てポリマーから解離した。

実施例１４ 下記の反応式 ■−φ−８Ｏ２０Ｍｅに従って作られたポリマーυ 実施例１と同じようにＣ書６　ｃ　ｏｃＨ２ＮＨＢｏ　
ｃおよび■Ｃ＆　ＣＡ’を使用して作られたヱヒＣ１１
２０ＣＣＨ２Ｎ＆を第２カラムに充填し、そして５０チ
ＴＦＡ／ＣＨＣｌ。

で１５分間室温で処理しＢｏｃ　　基を除去した。使用
したマツチメーカーはＤＭＦ中のＩ−であった。

分解によりそのポリマーから解離した。

実施例１５ 以下の反応式 を第１カラムに充填した。市販のポリマー５ｅｐｈａｒ
ｏｓｅ　　又は　５ｅｐｈａｄｅｔである■−ＯＲを第
２カラムに充填したこのようなポリマーと可溶およびｈ
Ｌ　Ｗｉｌｃｈｅｋ　　ｉｚｘ　Ｆｅｂｓ　　Ｌｅｔｔ
ｅｒｓ　、　Ｖ。

１５４、Ａ１（１９８８）によってなされた。その使用
したマツチメーカーはメタノール中のその反応の完了後
第２カラムにおいて得られたポリマーは■−０−ＣＭで
あり、それはそれ自体さらに反応用の出発物質として使
用できる。

実施例１６ 以下の反応式 ％式％ は第１カラムに充填した。この反応は（Ｈｏｆｌｔｔ。

Ｇ、ｅｔ　　ａｌ、Ａｎｇｅｗ、Ｃｈｅｒａ、、Ｉｎｔ
、Ｅｄ、Ｅｎｇ、１７　。

５６９−５８３（１９７８）によって溶液中でなされた
。この反応の出発物は実施例１５のように作られた。実
施例１４のように作られた■−ＣＨ，ＯδＣｌＩ２　Ｎ
Ｈ，は第２カラムに充填された。

１更用したマツチメーカーはその溶剤はクロロホルムに
変わったけれども実施例１５と同じであった。

分解によってそのポリマーから解離した。

実施例１７ 実施例１６において使用したその同じ出発物質とトリチ
ルクロライドとを２５℃でクロロホルム中で反応させる
ことによって作られたポリマーφ 実施例１に記載した を第２カラムに充填した。使用したマツチメーカーはＣ
Ｂ’ＣＩ！ｓ　中において実施例１５と同じであつψ カリ加水分解によってそのポリマーから解離した。

実施例１８ 以下の式 を第１カラムに充填した。実施例１’ｌ）第２カラムで
使用した同じポリマーを第２カラムに充填した。そのマ
ツチメーカーは実施例１７における同じ浴剤中Ｏ同じ化
合物であった。その最終生成物Ｉｆｓ はアルカＩＪ　）ＪＤ水分解によりそのポリマーから解
離した。

実施例１９ クロロホルム中で実姉例１５と同じ化合物とｇ ムに充填した。実施例１７の第２カラムにおいて開用し
た同じポリマーを第２カラムに充填した。

そのマツチメーカーはＥｔ　３　Ａ’／ＣＢ　に’　ｌ
ｓ中のＭｌｊ ってそのポリマーから解離した。

実施例２０ クロロホルム中で実施例１５と同じ出発物質とｅ ｔ”ｖｌ　ｅ　０−Ｐ−０１ｖｉ　ｇとを反応させるこ
とによって作らＡグｅｏ’　　　ゝＯＭｅ ムに充填した。第２カラム中のポリマーそのマツチメー
カーおよび浴剤は実施例１９と同じであつはアルカリ加
水分解！ｃよってそのポリマーがら解離した。

実　施　夕１］２１ 下記０式 プロパツール中２４時間 が第１カラムに：ｆ、填された。実施例１４においてカ
ラム・に充填した。そのマツチメーカーはイソブとでそ
のポリマーから解離した。このタイプの反応はＬｅｏｎ
ａｒｄ、、Ｎ、、ｅｔ　ａｌ　ｉｎ　Ｊ、００Ｃ−２８
（１９６Ｂ）３０２１により溶液中でなでれた。

この実％布例はどのようにしてエンケファリン（ｅｒＬ
ｋｅｐｈａｌ　？ニル）が本発明の手段によって合成で
きる力・を示す。エンケファリンは宿造式％式％ チドである。第４図に示す装置でそれは作られた。

カラム５０に第１のポリマー供与体■−０Ｐｈ　ｅ　１
３ｏ　ｃがｆｊｆかれた。こ■ポリマーはＷｅ’／　ｇ
ａｎｄ、Ｆ、ｅｔａｌ、Ｚ、Ｎａｔｖ、ｒｅｆｏｒｓｃ
ｈ、、、２２　ｂ　、１０８４（１９６７）に従って対
称無水物（ＢｏｃＰｈｅ）２０を最初作ることによって
作られた。この対称無水物はα′が例− きる。この反応は例えば次式 のようｌ’ｉ：１　：　１　：　３のモル比でトリエチ
ルアミン又はピリジンの存在において行なわれる。同じ
出発物質は第１図の架間にょうな製置の第１カラム’、
（クロロスルホン化ポリスチレン（■−８Ｏ２Ｃ１りを
置き、そして第２カラムにα′が上述のようなものであ
る■−α′Ｈをｉｚ　＜こと）Ｃよって又作ることがで
きる。Ｎ−保護アミノ酸［・リエチルーアンモニウム力
ルポキシレートｓｆ＋　２　当ｉｔ　ヲ５℃〜＋２０℃
で２時間七〇カラムの間を循環させた。そのカルホキシ
レー）　＋３は■５ｏ２Ｃｅ　の作用で脱水され高収率
で対称無水物を形成した。そのように形成されたこれら
の無水物はその場で■−α′Ｈと反応して所望の飽和さ
れたポリマー■−α′−ＡＡＢｏｃ（式中ＡＡはＰｈｅ
のような所望なアミノ酸である）を与えた。解離きれた
ＢｏｃＡＡＯＨは存在する過剰のＰ−８ｏ２Ｃ１！　に
よって対称無水物に転換された。両方の場合において、
ポリマーニトロフェノール１ｇ当り保護されたアミノ酸
０．５〜１−５ｍｅｑの蓄積が達成できた。

そのカラム５２および５４はＰｈｅＯ代わりに単にアミ
ノ酸を使用し、（Ｂ）じ反応式によってアεノ酸ポリマ
ー■−〇〇！’／ＢＯＣおよびＰ　ＯＴ’！ｒ（２，６
−ジクロロ−〇Ｂｚ）ＢＯＣで各々蓄積された。

単純な実施例における第２カラムＶこ対応するカラム５
６はポリマー受容体■−Ｌ　ｅ　ｕＮＩｉ２で容積され
た。このポリマーはＩｌ、Ｂ、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、
Ｊ’、Ａｍ、ｅｒ。

Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、、　８５　、２１４９　（１９Ｇ　
８　）に従つ゛りて作られ得る。

別法としてジメチルホルムアミド中でクロロポルム１ｍ
ｅｑ／ｊＪを含む２チ架橋クロロメチル化ポリスチレン
（■−Ｃｌｉｚ　Ｃｅ　　２　ｇと’　　Ｊ−＜ｏｃＬ
ａｌｔＯＱ’ｓ２．２ｍｅｑとを反応させることによっ
てｉ”ｆＥられた。

七の反応はそのポリマー”ＰＫ＜の馬を混合することに
よって又は別々のカラム中に各々を置きそして２時間カ
ラムＦＨＪに溶剤ジメチルホルムアミドを循環妊せるこ
とによって実シｍきれた。七のポリマーに共有結合して
いる１３ｏｃＬｅｒｂ訝査１．８　ｍｅｑ以上は９０チ
以上の収率で得られた。そのポリマーはそｔＬｎ＞ら５
０　％　ＴＦＡ　（ＣＦ３ＣＯ０１ｉ）７：＋２０分間
処理され、そしてＣＢＣｌ２３、Ｅ　ｔ　ＯＨ／ＣＨＣ
ｅｓ　オよびＣ１ｌ　Ｃｌｓ　で洗浄された。そのポリ
マーはクロロホルム中５％Ｅｔ３Ｎの溶液で中和され、
乾燥ＣＨＣ＃３で洗浄され、所望のポリマー、Ｈ−Ｌ　
ｅ　ｕ−０−Ｃ１１２−■が得られた。

そのカップリング反応は、表２の立授に従ってバルブＶ
１〜Ｖ９をセットしそして表２に示されたようにポンプ
５８をイ・■作することＩＣよって表２に示ざノ″？、
た手順に従って進行する。入口６８から■椿品ＩＣＣＨ
Ｃｅｓ）はカラム５０、ぞれからＵＶセル６０、カラム
５６およびＵＶセル６２を通ってｆ：Ｖ）系にポンプで
送られそして７４でそＯ系から排出される。

ステップ２において、マンチメーカー、イミダゾール（
入口６８での／ｌ６５）は１．５分充填され、それから
ぞライミダゾールをカラム５０．ＵＶセル６０、カラム
５６．ＵＶセル６２に循環させそしてカラム５０Ｖこも
どすためバルブＶ８を変更する。ＵＶセル６０および６
２によって検出されたイミダゾールの量がＵＶ検出ＣＧ
　６４　Ｖｃよって検出された量と同じになるまで、こ
れを継続する。それからそのＵＶ検出器はコンピュータ
ーに信号を送り、その手順の次の工程に進行させる。こ
のステップにおいて、バルブＶ２およびＶ８はスウィッ
チされ、そして薬品１　（ＣＨＣ１！３　）はその系に
入りカラム５６を洗浄する。４分間その薬品ＤＭＦ（ジ
メチルスルホキシド）を同じカラムを洗浄するため使用
される。

次のステップ８において、窒素ガスがｉ’　Ｆ　Ａカラ
ム７０およびカラム５６を通して入り、そのポリマーか
らＢａＯ苓を除去する。そのＢａＯ秘が完全に除去され
るまで、２０分間窒素循環を続ける。

その系は工程８．９，１０ｂよひＩｌｌ’ζ従って洗浄
されそしてその系はエンヵファリンの合成用にポリペプ
チド鎖中に次のアミノ酸をほくための準備が完了する。

これをするためシて表２のすべての工程は、パルプ２は
常にポジション１にあリーｆ−シてパルプ３は工程１．
２および８においてポジション２１Ｃあって繰返光され
る。これはそのマツチメーカーがカラム５２および５６
間ＶＣ循猿させる。

表２Ｖ′ｃよるこの第２操作の開始時に、カラム５６は
■−Ｃ１ｈ　−０−Ｌ　ｅ　ｗ−Ｐ　ｈ　ｅ−１ｌで充
填される。

表２の第２工程の終点で、バルブ２および８をスウィッ
チしてそのグリシン基はその・鎖に加わり、そのためカ
ラム５６中のそのポリマーは■−Ｃ１ｉ２−０−Ｌｅｒ
Ｌ−Ｐｈ’ｅ−ＧｌｙＨである。

表２の第８工程は別のＧｉｙ基を加えるために繰返され
、そしてバルブ２および３は常にポジション１にあり、
そしてパルプ２は２４１〜３工程ではポジション２ＹＣ
ある点を除いて常にポジションＩＶであるようにして表
２の手順は繰返される。その表２の第４回での＠５工程
の終点で、カラム５６中のそのポリマーはペンタ被ブチ
ド ■−ＣＨ，−０−Ｌｅ１Ｌ−Ｐｈｅ−Ｇ１９−Ｇｌｙ−
Ｔｙｒ（ＯＢｚ（り−１３ｏｃであるらこの時点でＢａ
Ｏ基の除去前に溶剤メタノール中Ｄトリエチルアミン（
図示せず）は４８時間カラムを通って循環され、十分な
収率で解離された生成物Ｂｏｃ−Ｔ’／ｒｃＯＢｚｅ）
　−Ｇｉｙ−Ｇｌ’ｔ−Ｐｈｅ−ＬｅｌＬ−ＯＣＨ３；
５：得た。その保＠被ブチドエン力ファリンはアミン酸
分析２よびＨＰＬＣ（高圧液体クロマトグラフィ）で確
認され、そして分類の合成によって製造された化合物と
同一であった。

、　　　　　　　　瀉４図に示された装置は単一のハウ
ジングの中に収容され、すべてコンピューターによって
コントロールされている。ポリマーカラムのべ択によっ
て適当なポリペプチドは本実施例と頃似の方法でこのよ
うな装置を期用して自動的に合成きれる。

実施例２３ 実砲例２２と類似の方法でオリゴヌクレオチドが本発明
の方法および装置に従って合成できる。

これは亜ｇ′１ｒｖ、化（ｐｈｏｓｐｈｉｔｙｌａｔｉ
ｏｎ）又はｍ　’：’４１’ｉａ化反応によって行なわ
れる。亜燐酸化において第１カラムは下記のようなポリ
マーで兄’ＥＬ’Ｇれる：（式中ベース２は保護ヌクレ
オチドベース残基そしてＤＭＴはジメトキシトリチルで
ある）。第２カラムにおいて下記のようなポリマーが充
填はれる： （式中そのポリマーはシリカであり、そしてベース１は
保護ヌクレオチドベース残基である。そのマツチメーカ
ーは １ であった。反応の児了時に３ｊｌカラムにおいてそのポ
リマーは式 を有していた。このジヌクレオチドはさらに延長して使
用でき父は燐残基の１２での酸化の後解離できる。

実施例２４ 〃口＠酸反応においてその第１カラム中のポリマーは Ｒ である。第２カラム中のポリマーは実＠　ｊｌｌｌ　２
８と同じである。そのマツチメーカー分子は、Ｕ である。ジヌクレオチド＠酸塩トリエステルである最終
生成物はさらに延長−して使用されるか又は普通の方法
で解離される。第１のポリマー用に与えられた式中Ｒお
よびＲ′はブロックされたヌクレオチド残基である。

実施例１〜２４における、■−α′、■＝α′−Ａ１め
ると表１のようになる。

実施例２５ 第１カラムはｌｌｗｂｒｎｓｔｅｉｎ、、Ａグ、ｅｔ　
ａｌ、ＴｅｔｒａんＣ−（１９７２）に従って作られた
５チ架橋したポリ（８，５−ジエチルスチレン）スルホ
ニルクロライドからなるポリマーカップリング剤で充填
された。第２カラムはＰｌｖ、ｓ、Ｒ，ｃ、ｅｔ　ａｔ
、Ｎｕｃｌ、Ａｃ１ｄ１１ｅｓ、、Ｖｏｌ、２，７７８
頁に従ってポリマー酸クロライド（０，２％架橋したポ
リスチレン上）および５′−ジメトキシトリチルチシジ
ンから作られたヌクレオチド−３′−エステルからなる
ポリマー受容体で充填された。

５′−採機モツマ− ｈｉｅ （式中ＲはＯ−クロロフェニルであり、そしてベースは
チミンである）がそのポリマーカップリング剤およびポ
リマー受容体ポリマー床を通してピリジン溶敢中で循環
された。−昼夜循環の後、そのポリマー受容体は完全に
洗浄し、そしてそのジヌクレオチドを稀水酸化アンモニ
ウムでそのポリマーから解離した。その得られた５′〜
ジメトギシートリチルーＴｐＴは高子液体クロマトグラ
フィで確認された。収率は１０〜８０％であった。

上記の方法は広範囲な反応ＶＣ適用できることはアシル
化反応ではα′は Ｏような広範囲の基から選択でき、セしてαはＣ１１ｓ
　Ｃ＆　ＳＲ／Ｅｔ、Ｈの任意のものであってもよい。

呵２カラムにおいて、Ｂはアミノ酸又は被ブチド又は他
のヌクレオチドであっても良い。しかしながらα（α、
ＡおよびＢは上記の実施例によって限定されない。

本発明の方法の利点特にペプチド合成の利点は、α−Ａ
１　例えばアシルイミダゾールの過・用量は普通の合成
に比べて少ないということである。３０％＋ルｅｑ（ミ
リ当ｔ）の過剰は普通の反応に１００〜５００％と比較
して使用される。さらにα−Ａの過剰ｔ（その３０％ｒ
ｎｅｑ）は新しい■−α′を〕１ｕすことによって回収
できる。

追加の利点は、２種の溶剤を卵えること１′こよる浴剤
に関する偉大な経済性であり、ｍ刑はＭ液中で過剰の化
合物の７０〜９５弼を除去することができる。普通の方
法では最終８０〜３５チを除去するために、メリフィー
ルドアプローチにおいて溶（す８〜３０容量が必要であ
る。本発明においてポリマータイプ■ようなトラップを
通して溶剤の循環によって大量の溶剤が節約される。例
えば中和工程において塩基性樹脂にその弓削を循環させ
ることによってＢＯＣ基の切断の後鍋Ｊ’ｌ”ＦＡを除
としてＴＦＡの大部分を除去する。その溶剤を節約する
ことによって環境汚染が少なくなる。

不ゾ６明の第２カラムυ入口および出口で使用したセン
サーはα−Ａの濃度を定量するために目盛りされていて
も艮い。それがため、ン写４］の容量によって増加され
た２つのセンサーの濃度の相違は０−Ｂに付着した薬品
の量に反射して■−ＢＡを形成する。それがため、直接
的な収率が得られる。

これは連経してなされる。

不発明の範囲を離れることなしに多くの変化が軒並であ
る。本発明は図面および発明の詳細な説明において限定
されない。

木明訓書ＩｃＩ史用された記号の説明は次の通りである
。

ｏｃＡＡ Ｔ−フ用・キシカルボニルＣＢｏｃ）ＶＣよってブロッ
クはれたＮ末端であるアミノ［Ｆ　（ＡＡ　）である。

Ｐｈｅ・−・フェニルアラニン Ｇｌｙ・−・グリシン Ｌａ　ｕ・−・ロイシン Ｇ　ｌｙ グリシンがカルボニル基によってそのポリマーにつなが
っているもの ＯＢｚ　および０Ｂｚｌは同じでありＯは酸素であり％
　ＢｚｌおよびＢｚはベンジルである。

【図面の簡単な説明】

・窮１図は不発明装置の概略図、第２図はペプチドの初
期工程において示された不発明による装置の概略図、＠
８ＵＪは、ぜブチドの後工程における４２図の装置の概
略図、第４図はエンケファリンのようなペプチド合成の
装置のａ、略図である。 図面の浄書（内容に変更なし） ＦＩＧ、２ ＦＩＧ、１ Ｂｏｃ　ＡＡ−α（Ｓ）。 第１頁の続き ９／１４５　　　　　　　　７３１１−４８（ゆ発　明
　者　イエチェル・シャイ イスラエル国イエフド・ケレン ・カイエメット６４ ０発　明　者　シメオン・パス イスラエル国キルヤット・オノ ・ハナツシ・ストリート５５ 手続補正書 １、事件の表示 昭和ぷ２年特許願第　／／！σ２２　号２発明の名称 一マノｌ、釘０・ンマー、イ）・へ゛円ミ）１０フ稔；
１・→）ｌ・′□〕１責’５Ｊ６、補正をする者 事件との関係　　　特許出願人 住所 別紙の通りｊい甘ｚり肋か−（、））’）　縣ｙｓ　１
％　Ｊ　Ｎ弓へ１．。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、反応式 ％式％（） によって合成可能である有機化合物Ｂ−Ａを合成する方
   法において、その反応体Ａは結合基α′　の手段によっ
   て第１のポリマー支持体［Ｆ］に結合して′　　　　　
   　　　おり、その反応体Ｂは別の第２のポリマー支持体
   ■に結合しており、そして中ｉｌＪ反応体αは２つのポ
   リマー支持体間に以下のように循環され、αはその第１
   のポリマー支持体に供給され、そこで下記の反応 ■−α／Ａ十α→■−α′＋α−Ａ　　　　（ｆｆ）が
   行なわれ、α−Ａはそれからその第２のポリマー支持体
   に供給され下記の反応 ■−Ｂ＋α−Ａ→■−Ｂ−Ａ＋α　　　（Ｉｌｌ）が行
   なわれ、αはそれから第１のポリマー支持体に丹循環さ
   れ、所望量の■−Ｂ、Ａが形成されるまでその循環を続
   け、その循環をそれから停止しそして合成された化合物
   Ｂ−Ａをその第２のポリマー支持体から分離および回収
   し、 ■および■は同じであっても異なっていても良く、そし
   てα′　基又はＢ基がそれぞれ耐着可能である化学的に
   変性可能なポリマーからなり、αは反応式■において使
   用可能な基であり、α′　はαと同じであっても艮く、
   そして反応条件下でα′　は■から離れることができな
   いように化学的結合によって■に耐着可能であり、そし
   てα′　はＡと反応可能であり化合物■−α／ａを形成
   し、化合物■−α／ａはαによって分裂可能であるα′
   　とＡとの間の結合を有し、そしてＢおよびＡは公昶の
   反応式（１）ＶＣ従って反応することができる基であり
   、Ｂは■ｒｃ離れるように結合可能であり、 反応式（１）は求電子的なアシル化反応ではないことか
   らなる有機化合物Ｂ−Ａを合成する方法。 ２、反応式 ％式％（） によって合成ｏｒ能である有機化合物Ｂ−Ａを合成する
   方法においで、その反応体Ａは結合基α′　の手段によ
   って第１のポリマー支持体■に結合しており、その反応
   体Ｂは別の第２のポリマー支持体Ｏに結合しており、そ
   して中間反応体αは２つのポリマー支持体間に以下のよ
   うに循環され、αはその２ｇ１のポリマー支持体に供給
   され、そこで下記の反応 ■−α／ａ＋α→■−α′＋α−Ａ　　　（１１）が行
   なわれ、α−Ａはそれからその第２のポリマー支持体に
   供給され下記の反応 ■−Ｂ＋α−Ａ−■−Ｂ−Ａ十α　　　　　（Ｉｌｌ）
   が行なわれ、αはそれから第１のポリマー支持体に再循
   環され、所望量のｅ）−Ｂ−Ａが形成されるまでその循
   環を続け、その循環をそれから停止しそして合成された
   化合物Ｂ−Ａをその第２のポリマー支持体から分離およ
   び回収し、 ■および■は同じであっても異なっていても良く、そし
   てα′　基又はＢ基がそれぞれ耐着可能である化学的に
   変性可能なポリマーがらなり、αは反応式ＩＶＣおいて
   使用可能な基であり、α′　はαと同じであっても良く
   、そして反応条件下でα′は■から離れることができな
   いように化学的結合によって■に耐着可能であり、そし
   てα′はＡと反応可能であり化合物■−α／−Ａを形成
   し、化合物■−α／ａはαによって分裂可能であるα′
   とＡとの間の結合を有し、セしてＢおよびＡは公知の反
   応式（１）に従って反応することができる基であり、Ｂ
   は■に離れるように結合可能であり、 Ａは保穫アミノ酸又はヌクレオチドであり、そして循環
   を停止した後そして合成された化合物の分離前に、その
   形成された第２のポリマー上の保獲基を除去しそしてそ
   の第２のポリマー支持体上でその鎖に他のアミノ酸又は
   ヌクレオチドを加えるための全工程を繰返す工程を含む
   ことからなる有機化合物Ｂ−Ａを合成する方法。 ３、第１のポリマーを支持する第１０カラム、第２のポ
   リマーを支持する第２のカラム、前記第１のカラムの１
   端と＠記載２のカラムの１端とを結ぶ’ｂ＜　１の導管
   、前記第１のカラムの他ＯＫ・崗と前記第２のカラムの
   他の端を結ぶ第２の導管、その中を流れる物質の物理的
   又は化学的性質を検出するためＱ前記第１の導管中に配
   置をされプζ第１の検出手段、その４Ｔ４１の検出手段
   はその物理的又は化学的性質に比例してアウトプット１
   ８号を提供し、その中を流れる物質の物理的又は化学的
   性質を検出するための前記第２の２惇管中に配置された
   第２の検出手段、その第２の検出手段はその物理的又は
   化学的性質に比例してアウトプット信号を提供し、前記
   第１および第２の検出手段は、同じ物理的又は化学的性
   質を測定し、ｉｌ＋ｆ記第１記法１第２の検出手段から
   のアウトプット信号を比較しそしてその間の相違に比例
   してアウトプツト１＝号を提供する比較手段、前記カラ
   ムおよび導管内に物質を循環させるだめのポンプ手段そ
   して前記比較手段によって提供されたアウトプット信号
   の１直に基づいて前記ポンプをコントロールするコンピ
   ュータ一手段からなる有機合成のだめの装置。