JPS59160746A - 尿素の分析方法及び装置 - Google Patents

尿素の分析方法及び装置

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JPS59160746A
JPS59160746A JP3453583A JP3453583A JPS59160746A JP S59160746 A JPS59160746 A JP S59160746A JP 3453583 A JP3453583 A JP 3453583A JP 3453583 A JP3453583 A JP 3453583A JP S59160746 A JPS59160746 A JP S59160746A
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JP
Japan
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urea
sample
membrane
ammonia
urease
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JP3453583A
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Hiroyuki Miyagi
宮城 宏行
Kenji Yasuda
健二 保田
Teruaki Kobayashi
映章 小林
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Hitachi Ltd
Original Assignee
Hitachi Ltd
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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/001Enzyme electrodes
    • C12Q1/005Enzyme electrodes involving specific analytes or enzymes
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/483Physical analysis of biological material
    • G01N33/487Physical analysis of biological material of liquid biological material
    • G01N33/493Physical analysis of biological material of liquid biological material urine
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/5308Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for analytes not provided for elsewhere, e.g. nucleic acids, uric acid, worms, mites
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    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/62Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving urea

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔発明の利用分野〕 本発明は、溶液、特に血液等の生体液中の尿素を定量す
るのに適する分析方法及び装置に関する。
〔従来技術〕
従来、血液中の尿素を分析するには、同道化ウレアーゼ
膜をアンモニウムイオン心極またはアンモニアガス成極
に潰せた形の尿素成極、あるいは、習気伝導度直極を挿
入した容器中に試料を注入し、更にランアーゼ溶成を亦
加して伝導度の変化量を測定する方法などが用いられて
いる。前者の尿素纜、函を用いる方法は共存+vJ質の
妨害がめること、あるいは応答が遅いなどの問題がのる
。一方、云導度藏極方式は、直線性、応答性は良いが、
高価な酵素試薬を使い捨てにするため分析コストが高い
などの問題がある。
〔発明の目的〕
本発明の主たる目的は、応答性に優れ、かつ分析コスト
の安価な尿素の分析方法及び分析装置を提供することで
ある。
〔光明の4要〕 、上記し之目的を達成するために、本発明では固定化ク
ンアーゼ、漢と畦気伝導度鑞極r用いる新規な尿素の分
析方法を考案した。将に、亀気伝導度庚出膳の妨害とな
る生体液中のシ屏貞成分を排除する目的かり、耕)lL
なるウレアーゼ、鍵を用いることとした。
〔兆例の犬、4例〕 本発明による尿素の分析方法を第1図に示す実施夕1]
を用いて詳7洲に説明する。
第1図の太桶列は速成ポンプ3,4、試料圧入部5、酵
素反応部7、電気伝導度検出器10、纜源増晶器11及
び表示器12から4成される。この実施列でJよ本発明
の理解を深めるために酵素反応部7と磁気云褌度検出6
10を分離して設置した。酵素反応部7は第2図に示す
如く、ウレアーゼ、413を2つの液体流路8,9で挾
みこんだ横置と、よっている。更に、ウレアーゼ膜はガ
ス透過1生支持莫15の一方の面にウレアーゼを固定化
したウレアーゼ固定部14を有する物を用いた。実際に
は、テフロンあるいはポリプロピレンのような撥水性膜
にセルロース母体のウレアーゼ膜を密着させた多層膜で
もよい。ウレアーゼ固定部14に接する第1流路8には
、送液ポンプ4を用いてpH緩衝溶液の如きキャリアー
液2が試料圧入部5を介して供給さnる。−万、ガス透
過1支持莫15に接する第2流路9には、アンモニア吸
収液1が送液示ンブ3で供給され、酵素反応部7の排出
液17は電気伝導度検出器10に導かれる。
被検試料6は試料圧入部5よりキャリアー0.2の中に
圧入され酵素反応部7に運lばnる。該反応部に2いて
ウレアーゼ固定部14に接触する際に、試料中の尿素は
分解さルてアンモニアを生成し、その一部はガス透過性
支持膜15を拡赦し第2流路側のアンモニア吸収液1に
吸収される。試料が導入されない場合のアンモニア吸収
液の眠気伝導度を基準として、試料導入時の亀気云導度
の変化分を計測し、被検試料中の尿素濃度を求める。
本発明の酵素反応部に用いるウレアーゼ膜は第3図の如
き多Ifji iJ逍の物でも艮い。叩ち、ガス透過膜
20の表面にポリエステル、ナイロン、セルロース等の
酵素固尼化に適する支持膜21で、がつその−面にウレ
アーゼ固ポ化部22を有する物なども便利に(圧用でき
る。また、支持膜21の内部にウレアーゼを分数、固定
化した物でもよい。
第1図の実禰列では、酵素反応部7とシ気云導庫凍出器
10を分離して設置したが、第4図にはこれらを一本化
した物を示す。測定セル23に、本発明のウレアーゼ膜
13が設、tきれており、これにアンモニア吸収液を挾
んで対間する位置に覗気伝導度祇極24を設置しである
。この方法によれば、第1図の実施列の場合よシも応答
性、感度の点で潰れたものとすることができる。
本f6明の第1図の夷通例による出力信号の列を第5 
+Aに示す。アンモニア技」区液1としては純水を、ま
た、試料のキャリアー溶液2としてはリン酸緩衝溶液(
、pH7)を用いた。試料は、マイクロフリンジを用い
て試44注入部5より注入した。
溶1夜の凍着は夫々1mtAninに設定した。ピーク
Pt 、 Pa 、 Psは尿素i o mg/dt 
標準溶液の出力であり、P2.P4は20mg/dtの
もノテある。本発明の分析方法によれば、応答が速く、
再現性の良い信号が得られる。
第6図に検量線の例を示すが、広範囲に護り良好な直線
性が得られる。
〔発明の効果〕
本発明の尿素分析法及び分析装置は反応試薬を必要とせ
ず、安価に分析でさる−・ゴかりでなく、装置の4成も
:砥めて簡単である。また、電気伝導度検出器の艮好な
応答性を利用し、精度の高い分析を可能とすることがで
きる。一方、従来の鑞気伝導法の入点である共存イオン
類の妨害はウレアーゼ膜にガス透過性支持膜を利用する
ことにより、完全に排除することができる。
【図面の簡単な説明】
部の他の実施例の断面図、第5図及び第6図は本発明の
効果を示す図である。        ′1・・・アン
モニア吸収液、2・・・干ヤリアー液、3゜4・・・送
液ポンプ、5・・・試料圧入部、6・・・試料、7・・
・酵素反応部、8・・・第1流路、9・・・第2流路、
10・・・電気伝導度検出器、11・・・電源増幅器、
12・・・表示器、13・・・ウレアーゼd、14・・
・ウレアーゼ固定部、15・・・ガス透過1生支持I戻
、16・・・試料廃液、17・・・被検出溶液、2o・
・・ガス透過膜、21・・・支持肩、22・・・ウレア
ーゼ固定化部、23″11i2  図 ′f35 図 15   乙   図 U〜  (勺/dl)

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1、固定化−索漠と眠気伝導度検出器を用いる尿素の分
    析方法において、ガス透過圧支狩7換の−するアンモニ
    アの内、該ガス透過性支持、漢中を拡散し、該被検試料
    と反対側の吸収液に吸収されたアンモニアを吸収液の眠
    気伝導度変化として計測することにより該被検試料中の
    尿素を定量することを荷値とする尿素の分析方法。 2、固定化酵素膜と眠気伝導度検出器を具備する尿素の
    分析装置において、ガス透過性支持膜の一方の表面につ
    Vアーゼを固定化した酵累嗅を挾んで2つの波路ラミ4
    成し、該酵素膜のランアーゼに接する側の流路′に被検
    試料導入部を接続し、ガス透過膜に接する側の流路には
    アンモニア吸収曲液体を導入し、該アンモニア吸収液を
    眠気伝導度・演出器に導くことを時数とする尿素の分析
    装置。
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