JPS59160743A - 螢光によつて検出可能な現象の観察および定量化装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明Ｉｉ、自然のまたは励起による螢光の発生によ
って検出し優る現象の鋭察および走破化全可能にする装
置に関する。この発明は待に、免疫螢光法、すなわち、
生体の反応生成物をその反応を可視化する７種類または
複数種の螢光体で標識することによシ生体の免疫反応を
調べる方法において適用されるが、用途はこれに限らな
い。しかしながら、以下においては、説明の便宜上、上
記用途への適用にそくしてこの発明の説明を行なうこと
とする。

周知のごとく、螢光性とは、可視または不可視放射線を
照射されると光子を発出するある橿の化合物の性質であ
る。共振螢光と叶ばれる現象を除き、放射線の吸収と発
生との間Ｖｃｐけるエネルギー損失のため、螢光子のエ
ネルギーは、入射光子のエネルギーよりも小さく、シた
がって螢光子の波長は入射光子の波長よりも長い。

螢光を発し得る分子を適当な波長の放射線で衝撃すると
、それらの分子の囃子が通常の安定軌道を離れ、励起−
重環を形成して、よシ高いエネルギーレベルに対応する
外側の軌道に移る。励起が止まると、こｔしらの電子は
、螢光子を発しながら元の安定軌道に戻る。

この螢光の寿命はきわめで短かく、励起される分子の性
實および物理的状態によって異なるが。

ナノセカンドゝのオーダーである。連続照射の楊曾てさ
え、螢光現象ｌ″ｉｉ時間数関数的に減少するつさらに
、螢光の一子収【したとえばクロロフィルで３％という
ように少なく、シたがって、励起用放射線の強さ、励起
される分子の濃度＋ｐＨ＋不純物の存否、象よび励起さ
れる分子の種類によって変化するものの、螢光の強さも
また小ざｂｏしノζがって容易に理解できるように、螢
光は逃散度が晶く強さが小さい（しかも連続的に小さく
なってＣｉ＜）ため、螢光現象の観察と定量化はきわめ
て困難である。

合成物、非台成物にかかわシなく、自然的に螢光金兄す
る有機化合偕は多数存在する。植物、動物、混虫等々に
りいても同様である。他方、休々な螢光染料、たとえば
、緑色螢光を発するインチオシアン酸フルオレセイン（
ＦＩＴＯ）、赤色螢光ヲ発するイソチオシアン酸テトラ
メチルローダミン、黄色螢光を発する塩化アミノナンタ
リンスルホニル、ある種の赤色自然螢光が目的現象にと
って不都合なほど強い場合にそれらの自然螢光ケマスキ
ングするための１エバンス・ブルー′などを製造するこ
とも可能である。

現在最も多く用いられている螢光染料はＦＩＴＣで、こ
旧ハ最大波長が青色で弘？！ｎｍ付近でなければならな
い光源によって励起さｔｌ−なければならない。またこ
のＦＩＴＯは、紋犬よλｏ　ｎｍの緑色螢光？ｒ：古光
出するが１発光の波長は乙０θｎｍを超え、したがって
赤色螢光を宛する。

他方、周知のように、生体の免疫反応ｌ−１：１原則と
して自己体の成分以外の、抗原と呼ばれる物質と、それ
を排除するために生体が発生させた抗体または免疫グロ
ブリンとの出合いの結果起こる。

この抗原抗体反応ｒユ、具体的ＶｃＶｉ析ｔｔ３または
凝着として有形化することができ、この凝着は、すでに
抗原抗体反応の定量化のために利用さルている。しかし
ながら１丁べての抗体が凝着性を有すると’ｄ限らず、
また、実際的な理由から、仙の方法によって抗原抗体反
応を定量化することも何昼であると考えしれている。

すなわち、クー７ズがすでに、免投螢ｙｔ法と呼ばルる
方伝τ提唱している。この免疫螢光床に２いては、抗ｌ
＋（とさに抗原）を、螢光体（前記１’ＩＴＯである楊
曾が最を多い）と直接的ｔｆｃ′ｒｉ間接的に結合さぞ
、抗原が抗原と結合したとぎｈその反応を蛍光ＶＣよっ
て確認する。この方法は、ｌ＾屁、速度ともすぐ７して
９９．細菌を培養する必蒙がない。直接法に１いては、
螢光染料を研加した免投皿清に抗原？加える。また聞膚
法においては。

予め用意した。調査対象の抗体と結合し得る１抗体“ま
たは抗グロブリン上に、螢光体を定着させる。

免情螢元反応は、休暇した組織片上において。

＠査Ｘ′グ破でのる細胞を、螢光′を発させない他の細
胞に対して明らかにする。免疫螢光による醸成は。

放射免疫学的標識よりも簡単である。

ある局部（一般にはスライドグラス、ホールスライドの
／りのホールなど）ＶＣ現われる反応または現象に免疫
螢光法を実施するだめの装置としては、螢光を発出させ
ることのできる励起放射線を局部に送るだめの、場合に
よっては少なくとも７つのフィルタと組み合わされた放
射線源と、局部を観察するための観察者の眼と共動する
光学装置と１局部からの螢光のみ？観察者の眼に到達さ
せるための少なくとも１つのチョークフィルタとを具備
した装置が、すでに実用化されている。ＦＩＴＯを用い
る免疫螢光法の場合、放射線源は、たとえば、／、夕Ｘ
　／　０”　ｃｄ／ｙｒ？程度の高い輝度音響し肯色光
を発する１（ＢＯ／　００型の水銀アーク灯である。

放射線源の下流に配置される励起フィルタｌｒｉ。

螢光を発出させるのに有効な放射ｍＪｋ選び、他方。

局部と観察者の眼との間に配直さｒＬるチョークフィル
タは、螢光現象に関係のない放射線を除去する。励起放
射線と発出される螢光の最大波長は互いに接近している
ため、励起フィルタとチョークフィルタの選定は、実際
にはきわめて微妙な問題でめる。

観察用光学装置は、免疫螢光法のために特別に設計さル
た顕微鏡でめシ、したがってこの顕微鏡は、複雑である
。性能が晶い、茜価である、操作しにくい、といった特
徴を有する。この顕微鏡は。

放射線源および励起フィルタの下流において、励起放射
？ｆＭτ肉部へ込シ元出された螢光を観察者の眼へ送る
ための二色＠を具ｖ’Ｍ　シている。さらに。

この明徴鏡は、複数の局部を支持する載物台と。

この載物台に／ｆ固または倍率の異なる複数の対物レン
ズｐよひ接眼レンズθ下において移動６せるだめの魅動
装置とｔ具備している。前記対物しンズ′ｒｉ、観祭対
家物９実謙を与え、接眼レンズは。

拡大きれた虚１！ｊｌ−観察者の１ｌｌｔＶこ与える。

観察者は、自分に好都合な焦点合わせを行なったあと、
削記載物台駆４ＪＪＪ挾置を操１／「することにより、
（ＩＮ２置確定の燻しい）対象物の一部を接眼レンズ’
ｃ　ｍ　して見る。したがって、複数の観察者が同時に
見ることはできず、葦た。焦点合わせは各自が行なわな
ければならない。ざらに、対象、物の場所を確認するこ
とは１通常は不可能である。

一般に、螢光顕微鏡の対物レンズ■倍率はｉ。

ないし≠Ｏ借でめ９．接眼レンスもＩＯないし４０倍で
める５　もし、覗察対象物の坪ｋが／　０”　ｃｄ／ｌ
ｉｔ捏厩でめれば、接眼レンズのｌ１ｔｌ側における照
匿μ数ルクスにすさ°ない。

免疫螢光法の場合のように、前記のような技法を用いて
反応音調べたいときは、特殊な標本を゛準備しなければ
ならず、こｈはきわめて厄介な作業である。免疫螢光法
の場合は、まず、載物台上に患者の抑液または生体組織
片を置く。たとえば患者血清中の抗体を探す場ＩハＦＩ
ＴＣなどで標識した抗グロブリン血清、および予め用意
した試験抗原？用いる。抗グロブリン血清を滴定し、す
なわちその希釈度全確定して、最大螢光量金与えるべき
最大希釈度を用いるか、もしくは、当該血清が高い滴定
値金有すれば、すぐ下の希釈度を用いる。患者血清につ
いても、段階的な様々の濃度の希釈液を用意することに
ニジ、抗原抗体反応の強さおよびその経時変化の、一種
の近似的定量化が可能となる。すなわち、高い希釈度に
おいても抗体が発見されれば、それ全もって、患者血清
中に多量の抗体が存在していると推論することができる
。またもし、観察後数週間を経たとき、反応がよシ高い
希釈度においてプラスであれば、疾病は進行中であると
推論することができる。

ここで注意すべき点は、特定の疾病の検査に有効な希釈
度を予め知るためには、経験を待たなければならない、
という点である。したがって、同一の疾病においてさえ
、検査所ごと、あるいは検査者ごとに、用いる希釈度が
異なる場合がある。

かくして、確認可能なのは、被検査者が疾病にかかつて
いるか否か、および疾病が悪化、快方のいずれに向かっ
てい−るかということだけである。したがって、免疫螢
光法ρための従来公知の装置を、抗体の真に精確な定量
化が可能なように改良することは、きわめて有益なこと
である。

他方、前述したように、標本は、スライドグラスまたは
ホールスライドのホール内に載せられ、これらのスライ
ドグラスが、顕微鏡の載物台に載せられ、かつ、ホール
の順次検査が可能なように対物レンズの下で移動させら
れΣ。これは、特に、様々な希釈度で検査を行ない、反
応の陰性への移行全確定し、明度が低く色も鮮明でない
像を観察するようなときは、忍耐を要する面倒な作業と
なるほか、評価を人間の眼に頼るため、結果はきわめて
主観的なものにならざる全得ない。

実際、検査者が反応の色、光度、陽性％陰性を決定する
のは、自己の視覚による。また１滴定量の変わりやすい
血清を、ときにきわめて高い希釈度で扱うため、かすか
に陽性または陰性であるような反応の場合は、調べるべ
き像の光度がきわめて低いことかあシ、ここから様々な
問題が出て来る。

免疫螢光法において識別すべき色は、照度約／−ないし
／Ｑ−４ルクスにおけるＦＩＴＯの緑、エバンス・ブル
ーの赤、およびローダミンの赤であることが最も多い。

免疫螢光法において問題となる最初の視覚的要因は、日
中の自然照明（１０ｃｄ／ｍ’　　以上）における肉眼
の感度曲線は緑色において最高部を示し、この最高部は
、周囲輝度が低下するにつれて青色の方へ移動するとい
う、プルキンエ現象である。

さらに、あらゆる波長に対する肉眼の感度は、一般に周
囲輝度の低下とともに低下する。かぐして、日中は強さ
が等しいと主観的に知覚されるコ種類の光線、たとえば
緑色光線と赤色光線も、暗い場所では、緑色光線の方が
赤色光線、１１）強いという印象を与える。肉眼は、輝
度が変わらない限シ、λつの色を有効に比較することが
できない。

輝度が増大すれば、緑は黄味を帯び、赤はオレンジがか
つて見える。この結果、免疫螢光反応の観察においては
、緑色螢光を見逃がす惧れはないが、低照度では、ある
程度明瞭さが失われ、赤色の可視性が悪くなる。緑色と
赤色の螢光が混ざる場合は、緑色が赤色ニジも多いと、
肉眼には緑色しか見えなくなったシ、緑色が黄味音帯び
て見えｆｃりすること示ある。緑と赤の量が等しい場合
は、存在しないはずの黄が見えることがある。

他方、肉眼は、その細胞どうしが及ぼし合う抑制効果に
よシ、錯覚を起こすことがある。たとえば、一方が明か
るく、他方が暗い隣接する２つの領域の場合はコントラ
ストが誇調され、境界はニジ暗い黒とよシ明かるい白で
縁どられる。肉眼はこのように輪郭を補強するのである
。同様に、たとえば緑で縁どられた赤を凝視してから白
または灰の地（パックグラウンド）全党ると、その地の
上に赤で縁どられた緑の幻像が現われる。さらに。

黒に対する色感は、輝度に応じて変化する。

周知のように、視力は、あらゆる波長について同じぶり
に低下するのではなく、たとえば、／ないし２ルクスよ
り下では、緑エリも赤に対しての方が良いが、１０−４
ルクスでは、緑に対しても赤に対しても悪くなる。≠０
０倍の顕微鏡を用いた場合、人間の眼が分離して知覚で
きる２点間の最小距離はコないし３μｍであシ、視力／
　０／／　／の眼が知覚できるλ点間の最小距離は、理
論的には０．２６μｍである。

さらに、輝度が低い場合、肉眼の能力は時間とともに変
化する。眼の円錐細胞は、輝度がｌないしθ、ｉｃｄ／
ｒｒ？　　のとき、最大の効率に達するまで、７ないし
１０分の時間音、要する。上記よりも低い輝度では、円
錐細胞は適応するの全やめ、代わって枠体が働く。その
場ば、感度は上がるが、視力は大幅に下がる。この結果
、検査の際は眼を適応させるのに時間がかかるだけでな
く、視覚もきわめて不充分でおる。

最後に、肉眼は疲労とともに能力が落ちる。

かくして、免疫螢光法の笑施には多くの問題があり、真
に精確な定量化を行なうことは難しい。

しかしながら、この方法は、人間および動物の医病の診
断、追跡および調食、ならびに生物学的、病理学的な研
究の進歩を可能にしているという点で、かなり有益なも
のである。

免疫螢光法全効果的に適用できる用途は、なかでも、黒
穂病、ある種の髄膜炎、百日咳およびプルセラ症、ある
棟の糸状菌症、ジフテリア、ある種の肺炎、大腸菌感染
症、サルモネラ菌およびシグラ菌感染症、トキソプラズ
マ症、とストプラズマ症、単核白血球増多症、出血性敗
血症、レプトスピラ症、リステリア病、旋虫病症、結核
、梅毒、連鎖状球菌感染症、ブドウ球菌症、縁膿凶症、
淋病、マラリア、ジストマ症、住血吸虫病等々全引き起
こす細菌およびを生成の検出である。さらに免疫螢光法
は、抗体、抗残、抗皮、ヘルペルビールスなどのビール
ス等の検出、ならびに）ＩＬＡテストの芙施に用いるこ
とができる。

また、この発明の主要な目的は、免疫螢光法のための従
来公知の装置の前述のような欠点を除去し、かつ、免疫
螢光法によって得られる結果の賃金向上させかつ同法の
実施を簡単化することによって免疫螢光法のあらゆる可
能性を有効に利用することを可能にする装置を提供する
ことにある。

この主要な目的は、免疫螢光反応の真に精確な定量化が
可能になるよう、特に人間の眼に頼ること金やめ、装置
全自動化することによって達成される。

上の目的のため、この発明によれば、螢光によって検出
可能でありかつ限定された局部に現われる現象の観察お
よび定量化全目的とした、場合によっては前記螢光を発
生させる励起放射線全前記局部へ送るための励起フィル
タと組み合わされた放射線源と、前記局部の光学的観察
のための装置と、励起放射線の遮断全目的としておシか
つ局部からの螢光線の進路上に配置させた少なくとも１
つのフィルタとを具備している装置は、前記光学観察装
置および螢光線の波長に応じて選ばれた少なくとも２′
）の異なるカラーフィルタを介して前記局部を精査する
可変利得型撮像管と、この撮像管によってとらえられた
個々のカラー映像に対応する電気信号？記憶するための
記憶装置と、これらの記憶装置を出た電気信号を同時に
復原するための装置と、前記撮像管の出力信号の振幅が
、撮像管の残像を無視し得なくなる閾値エリも常に大き
な値に維持されるよう撮像管の利得を変動させるための
装置と全具備していること全特徴とする。

かくして、この発明によれば、観察される螢光現象を不
動化させ、かつ同一現象の異なる色の固定像を順次別々
に送信し次いでそれら葡重ね合わせることによって当該
螢光反応を分析および再現することができるという事実
を利用することによシ、螢光現象の観察お（μ定量化に
固有の２つの難問、すなわち効率が低く螢光が逃散しや
すいという問題から来る欠点を解決することかできる。

注目すべき点として、この発明による装置においては、
前述し１ζごとく真に精確な定量化全行なえない人間の
肉眼に頼らずに済む。さらに、この発明による装置は１
つの撮像管しか必要としていないため、各点ごとに別々
のカラー映像全党べきに重ね合わせることができ、また
％複数の撮像管を使用するカラーテレビジョン装置にお
ける撮像管の特性のバラツキに帰因する諸欠点が解決さ
れている。

この発明による装置においては、もし可能ならば、前記
撮像管がさらに前記局部を直接精査することに工り撮像
管の焦点合わせのために用いられる局部の白黒映像金与
えるように構成されていることが望ましい。このように
すれば、精細度の高い白黒映像に、Ｊ：す、個々のカラ
ー映像の観察のあいだ撮＠管の光電陰極上に発光ビーム
が精確に集束するよう、光学観察装置の焦点合わせ全行
なうことができる。

他方、撮像管の残像効果全最少限に抑えるため、４ｆ＾
像管が、連続して配置されたカラーフィルタを介して行
なわれる２回の精査の間、お工び／またばｌっのカラー
フィルタを介しての精査６と前記白黒映像を与えるため
の精査との間、遮蔽またはブロックされるようにすれば
有利である。

このためには、白黒における直接精査に対応する少なく
とも１つの窓部と、カラーフィルタと、不透明部分とを
有するディスクを設け、このディスクが、前記窓部、フ
ィルタお工び不透明部分が前記撮像管へ送られる螢光ビ
ーム金次々に横切るよう回転させると実際的である。

前記ディスクは、モータによって駆動されるが、もちろ
んこのモータは、この発明による装置の他の部分、およ
び特に個々のカラー映像に対応する信号の記憶と同期化
されている。このような同期化全少なくとも部分的に達
成するには、ディスクのマーク、たとえば窓部と共働す
る電子光学装置の工うな固定子ンサ會設けると有利であ
る。

螢光ビームの進路上に７個−１′たは複数のチョークフ
ィル′りが存在するにもかかわらず、励起放射線の一部
は、撮像管に達してしまう。また、この不都合を避ける
ため、かつ励起放射線の前記部分の干渉の仕方がカラー
映像別に異なることを考慮して、各カラー挟体について
パックグラウンドのレベル？ｉｌ−個別にｍｌｉ？ｌＬ
％かつ、これらの個別制御が撮像管の振幅利得・のすべ
ての値について正確となるよう、これらの個別制御が撮
像管の利得に応じて行なわれるようにする。

他方１周知のように、光域（光っている領域）の照度は
、一般に、その縁辺部、１１も中央部においての方が高
いが、この現象は、光の強さが大きいほど顕著に現われ
、その逆も真である。この結果、観察される像のノ々ツ
クグラウンドに対応する信号波形は、光域そのものの実
際の照度分布に対応せず、ドーム形となる。この不都１
を避けるため、この発明においては、撮像管の利得に応
じて制御され、かつ、撮像管の出力信号のドーム形底部
を消失させるための逆ドーム刑信号を発生させる装置を
設ける。

言うまでもなく、このドーム効果は空間的であって細的
ではないので、像の水平方向と垂一方向の両方において
逆ドーム形信号による補正全行なうと有利である。

さらに、前記記憶装置の下加にノ々ツクグラウンド除去
装置金設けることが望ましい。かがるパックグラウンド
除去装置は、映僑信号の積分と整形、ならびにその結果
得られた信号の実際信号からの減算全可能にする。

得られたカラー信号の純粋度をさらＩＣ高めるためには
、第１のカラーフィルタを出た信号から第一のカラーフ
ィルタを出た信号の減算、お↓ひ第２のカラーフィルタ
を出た信号から第１のカラーフィルタを出た信号の減算
を行なう装置ａ＋設けると有利である。このようにすれ
ば、得られた差の各々は、一方の色の、フィルタが完べ
きでないために除去されなかった部分を完全に除去され
た他方の色に厳密に対応する。

したがって−１これらの信号差は、観察対象である現象
の定量化のためのデータとして利用することが中きる。

最後に、人工像によるすべての影箒葡取ジ在くため、そ
のための装置金膜ける。かかる装置ば、各人工像をそれ
自体の一部を介して除去すること全可能にする遅延装街
、波高値制限装険、垢幅装ｆ！＝ｔならびに加算およｄ
／または減算装置に裏って構成することができる。

以下において、この発明の特殊なｌ実施態様を示す添付
の図面全参照しなカドら、発明の詳細な説明全行なう。

ｖ；７図において、この発明による撮像装＠は、高輝度
光源２全具備してお９、この光源は、コンデンサ３と糾
みばわされて、励起フィルタｊ？ｆ−通過する平行な光
紗のビーム１１．’（ｚ発出する。フィルタｊでろ過さ
れたビーム≠は、二色鏡７に衝突する。二色鏡ｔは、ビ
１−．ムグをりＱ偏向させて、対物レンズ７へ、送る。

対物レンズは、螢光発出現象・が籾、われる局部♂にビ
ームを集中させる。この局部は、載物台ＩＯ上に支持さ
れたスライドタの一部またはホールスライド、りの７つ
のホールであってよい。ホールスライドタが検食すべき
ホールｒ全多数有する場舒は、載物台ｉｏ金対物レンズ
７に対して移動させる機構金膜け（第り区１ないし第１
、／図珍照）、それによって、ホールｒが順次対物レン
ズ７の下に来るようにする（第３図の機構３７参照）。

局部ｒの現象によって発生させられた螢光は、対物レン
ズ７によって平行ビーム／ｌに形成さね１、ビーム弘の
反射部分とともに二色鏡６へ送られる。

二色鏡ｔは、ビーム≠の反射剖１分を光源２の方へ偏向
させる。螢光ビーム／ｌは、次に、チョークフィルタ／
、２およびレンズ／３奮迫過する。場仔によっては、第
２の二色鏡が、ビームｌ／の一部金、観察者の眼が覗く
ことのできる１そ眼レンズ／夕の方向へ偏向させる。

ビーム／／は、局部ｒの保全撮像管／７の九電陰極上に
形成する。モータ２０によって軸ｌりの周ｐを回転させ
られるディスク／ｒが、撮像管／７へ送られるビーム／
／の進路上に配置ｑされている。

ここで注意すべき点は、第１図において見る限シ、要素
認なめしｌ！は、免疫螢光法において従来便用さｎてい
る形式の顕微鏡全構成しており。

この発明か関わるのは、要素／７ないし一部のみである
、という点でおる。また、この発明は、二色努ｌ≠およ
び４シ限レンズｌｊなしでも実施できる。

さらに、第１ト″７．１の装置は１局部どがビーム弘の
反射部分によって照明されるように構成されている。も
ちろん、このよう外構成は絶対的なものではなく、たと
えば、Ｗ射ではなく透過によって局部ざを検イｊ；する
ことも可能で、その場舒ば、要素／２．／３お工ひ１７
ないし２０をれ吻合１０に関して対物レンズ７の反対τ
１（：に配置する。

第１図の装置全ＦＩＣＴＫよる免疫螢光法に用イ６　場
６、局Ｑ（Ｉ　ｇ　Ｋ　！ｒＯ，０００ないし１００，
０００ルクスのｉゼ（２度ヲ与えることのできる市販の
光源）ＩＢＯｔＯｌｉｔ　ＩＪＯ／　００−４７ｊげＨ
Ｂ　Ｏ２０Ｏｆ用いれば、ＦＪ”　Ｑ出螢光の歩留りは
／／１００ないしｉ／ｉ、ｏｏｏであるので、ビーム／
／は数百ルクスの照度を与えることかできる。丑た、励
起フィルタ！は、市販のＢＧ／、２゜ＬＰグどθ゛、ｉ
：たはＫＰゲタＯのなかから選ぶことかできる。これら
のフィルタは、青色（４’ｊＯｎｍと、ｔ　００ｎｍの
曲）において最大励起を与え、かつＪ−００ｎｍｋ超え
る九綴をきわめて大きく減衰させること全目的とする。

二色’６３は　ビーム／／の黄色波長分音撮像管１７の
方へ通過させ、反射ビーム弘の青色光線全光源λへ送り
返すために設けられている。二色鏡ｔの作用は、チョー
クフィルタ／２（＊とえばＬＰ！２０の名称で知られる
形式のもの）によって補強される。チョークフィルタ／
２は、青色を蓮断して、波長が！００ｎｍより大きい光
線しか通過させず、すなわち高域フィルタとして作用す
る。たとえばＯＰ　Ｔ　ＯＶ　Ａ　Ｒ型のレンズ／Ｊ−
は、対物レンズ７の像焦点をずらして、検体に↓シ均一
な照度を寿えることを目的上する。第２図に示すごとく
、ビーム／／の光ＷｆｆＮ　’に透過させない黒色材料
で作られたディスク／ｌは、その周縁部に、大きな切欠
き部２／と、赤色フィルタ２２および緑色フィルタ２３
を有する。切欠き部２／およびフィルタ２２．．２３は
、ディスク／ｒがモ□−ター！Ｏによって矢印Ｆの方向
に回転させられるとき、順次撮像管／７の真下に来るよ
うに配置されている。切欠き部２１の端部２／ａは、デ
ィスク７ｇの不透明部分λ≠によってフィルタ、２．２
から外部されている。同様に、フィルタ、２−および２
３は、ディスク／ざの不透明部分２夕に１って互いから
分Ｐ１′１されており、ディスク／どの不透明”ｌｔ分
、２乙は、切欠き部、２／の始端とフィルタ２３との間
に配置されている。不透明部分２≠、２ｊおよび！乙の
目的は、２回の測定の間において撮像管／７を咀藪し７
て除荷し、かつ撮像管の固有残ｆ久効果全部分的に避け
ることにある。残像抑制効果は、２回の１ｌｌｌｌ定の
あいだ撮像管の動作ケ停止させることによっても得ら几
る。

／′ ５／ 、／ 最後に、ディスク／ｇＶＣは窓または反射帯（一般的に
は“トラック”と呼ぶ）、、２７　、．２ざお−２よひ
、２９が設けられており、ディスクが回転する除、以下
に述べる同期化のために固定電子光学装置３０．３／お
よび３．２と共鋤できるようになっている（岨３図も参
照のこと）。

かぐして、グイス；７／ざ〃島回転丁ゐＶこつルて、以
下のシーケンスが順次起こる。

ｌ　切欠き部、２／が撮像管／７の下におる限ジ、撮像
管は、最良の精細度、感度ふ・よび光景のもとに螢光帯
ｇを観察し、また、螢光帯の白黒映像？チンピスクリー
ン３３Ｃ第３図にも参ｊ（αのこと）の上に与えること
ンパできる。撮像管／７とテレビスクリーンＪ３との接
続は、白黒映像信号予処理装置３　％Ｂの挿入ｒＭに、
通フ０周波帯の制限なしで眠像ケーブル３グによって災
現さｎる。この局部ざの白熊観察／−タンスのあいだ、
撮像管／７が発生させる信号は強い（あるいは少なくと
も他のシーケンスにおいて発生する信号より強い）ので
、手動的にせよ自動的にせ工、このシーケンスで像の焦
点合わせ全行なうと有利である。手動ＶＣよる焦点合わ
せは、操作者がスクリーン３３上の白黒映像を観察しな
がら行なう。自動魚点合わせの場合は、予処理装置３Ｓ
ＮＢから白黒映像信号を受は敗って、載物台１０を対物
レンズ７に対して移動させる機構３７を作動ざぜる従来
公知の任意（１）形式による自動調整装置３ｚを設ける
。機構、？７は、他の載物台／対物レンズ相対移動およ
びディスク／ざを駆動するモータ２０を制御するための
推令信号（＋−電子光学装置、？ｏから受は収る。

載物台／対物レンズ相対移動の制御に必要な自動装置の
実施例については、後に詳述する。

）、不透明部分コｔが撮像管／７の下に来ると、撮像管
は、ビーム／／を受は敗らなく′ｆＸ、り、除荷と残像
効果の抑制とそ可能にする一定レベルの黒色を受は敗る
。

３、　赤色フィルタ２２が撮像管／７の下に位置してい
るあいだ、撮像管は局部どの赤色像または赤色フィール
ドを受は敗る。

４ｔ　　赤色フィルター、２ツには不透明部分βＳが続
いているので、撮像管／７は、赤色フィールドに続いて
一定レベルの黒色？受は敗る。

ｊ　次に、緑色フィルタ、２３が不透明部分、２ｊ−に
続いて撮像管／７の下に来るので、！ｉｌ像管に局部ど
の緑色像または緑色フィールドを受は取る。

６、　最仮に、不一１刃６６分ノ乙が林巴フィルターＪ
に続いてＪノ′ｒＬ像管／７の下に入り、新たに一定レ
ベルの黒色を撮像管に与える。不透明ｇ５ｙ５）　−２
１に続いて、切欠越部、２／が再び撮９冒／７の下に入
り、こうして新しいザイクルが始まる。

赤色フィルタ２ノによる局ｇ１；ざの観察（ｌｊ’Ｊ　
ｉｉｌ：第３項）のあいだ、撮像管／７か発する映像信
号は、装置３錐　で予処理さｎてから、ダｊモ色メモ’
Ｊ　３ｇＢに記憶さルる。同様に、緑色フィルタ２．３
ＶＣよる局部どの観薪（前記耀５項）のあいだ、撮像管
／７が発する映像信号は、装置、３５ｖで予処理さ扛て
から、緑色メモリ３ざＶに記憶ざｎる。もし可能ならば
、メモリ３♂　および３ざＶば、”更Ａｉｒ　Ｌ＋シメ
モリ”であることが望ましい。

かくして、ディスク／ｇが／回転するたひに、連続下る
緑色および赤色映像信号ｅ　ｔｖ＋時信号に変換するこ
とができる。記憶された緑色像訃よひ赤色像の一方の各
点葡他方の像の対応する点に重ね合わせるためＫは、ノ
つのメモリ３ざＲおよびＪざＶから同時に；ρＣみ敗る
だけで充分である。こうして、Ｊりのメモリ３ざＲお工
ひ３ｇ〜、７Ｊ）らの市時机ケ収りにより、緑色像と赤
色像ｋｍね会わせることができる。メモリ３ざ、および
３♂Ｖへの緑色ｆ、に３よひ赤色像の記憶は、電子光学
装置、３／Ｖｃより、ディスク７ｇの回転と同期化さｎ
る。メモリ３ざ几および、３ざ、の出力端子茫カラーテ
ンビジョン受像ｈ１．Ｊ！　３９　ＶＣ従））シするこ
とにより、受像機３りのスクリーン上に局１’ｉｉ”ど
のカンー吠像を得ることができる。同様に、前記出力端
子をビデオテープレコーダクＯＶＣ接続すｎば、・前記
カン−映像を録画することができる。

かくして、この発ＩＪＪによるシステムに訃いてｔよ、
ＪＪｉＱ像管／細管７個および赤色全カバーすることが
できるため、各色ごとに専用のＪＪ＋ｔ’像管を用いる
テレビジョンカメラにおいてはＱ、ｒ：けらルない京な
ジ合いおよび特性バラツキの山１題が発生しない。

第３図の実施例では、局部どの螢光を分解するために２
色（緑色および赤色）しか用いないが、ディスク／ざ上
に第３の色、たとえば青色のフィルタを設け、そｎｌ第
３のメモリと組み合わせることができるのは、百うまで
もない。こうじて、可視スペクトルの全体を分解できる
よ’ｒＶｃ−Ｔルば、紫外励起のある種の場合において
有効である。

撮像管／７は、きわめて高い感度を示さなけｎばならず
、ざらに、その感度を広範囲にわたって変化させること
かで＠なけｎはならない。また、この撮像管は、ビジコ
ンに内蔵されている辿常の解像器の他に、電子増倍器を
内蔵していると有利である。そのような撮像管で必れば
、利得は／、！；　００ないしλ、ｓｏｏと大きく、し
かも−子種倍器の加速電圧に応じて町菱である。たとえ
（げ、ノクチコンタｔＳＳ、ノクチコンタ５５５′およ
びスーパーノクテコンという商品名で知らｎるＪｉａ像
管を用いたところ、いず汎も良好な結果が得らｎた。こ
れらの撮像管の場合、電子増倍器の加速電圧は、たとえ
（ｒ：：　、：ｐ；ｏ　ｏｏＮ　／ｌ／　）なイ（、ｑ
、ｏｏｏｙＲルトの範囲てン化し、かくして、感度は／
対グｏ。

の割合で変化する。こ扛らの撮像管は、直径コ、Ｓ喘の
九電陰極上に形成１九た照度／　０−’ルクスの像孕分
解することができる。

以下の続開から明ら〃為な工うに、熾ばｔ・／７のム；
度＆Ｊ７．）λぐして相離に制御さｎｌこの感度のｊニ
ア１Ｊ御によって、相確な足飢化のために心安な様々な
補正もｆｔｆｉｌ仰ざｔ″Ｌゐ。

しかしながら、上に述べた形式の可変高感度撮像′ｉ（
・ま残像力弓ｉ１５い・ので、弱い信号は増幅さル過ぎ
るのに強い信、号ｔりほとんど影響を受けないという欠
点がある。

この残像の最も著しい効果は、７つのフィールドが走査
さ江ているあい・だ、先行フィールドが依然として消去
されないという点にある。実験によｔＬば、この効果が
無視できないほど有害となるのは、撮像管／７の出力信
号の強さが、下方Ｂ、ｅ　１ｕ　％たとえば、２ｊｎＡ
より弱いときだけである。ところで、撮像管／７の出力
信号の最大強度は、この下方閾値より数倍大きしくたと
えば約！；００ｎＡ）ので、撮像管／７の電子増倍器の
加速電圧を調節することにより、閾値が下方へ越えられ
ないようにすることができる。＠、？図に示すように、
この発明による装置は、撮９ＩＣ管１７の極昼圧すなわ
ち撮啄管の電子増倍器の利得を調節する装ばグ／２具備
している。この装置ダ／の操作は、要素ダコの操作によ
って手動で行なうことができるが、その場合、操作者は
、インジケータｑ３によって与えらｎる撮像管／７から
の映像信号の振幅の指示に従って要素弘コの位置を調節
する。場合によっては、装置ｑ／の調節を、撮像管／７
の出力信号を受は敗る装置を弘を介して自動的に行なえ
るようにすることもできる。かくして、撮像管／７の出
力信号の強さが減少して前記下方閾値に近うねたとき、
そｎ　’ｉ　、電子増倍器の加速電圧の手動調節ま７Ｃ
は自動調節によって増大させることができる。

さらに、実験によルば、二色鏡ｌおよびフィルタ７．２
の存在にもかかわらず、励起光源コから発する一定４で
の光が撮像管／７ｖＣ到達し、照度数百分の／ないし数
十分の／のパンクグラウンド奮形成する。ｔた、信号レ
ベルが低い場合は、有効信号の値が前記パックグラウン
ドの値よりも低くなる惧ｔＬがある・したがって、定量
化を実際上大町Ｉｊ’ｔ　ＶＣｆるこの現象會防止する
ことが必要である。

しかし／１：がら、フィルタの滅べ鮨は成長に゛こニジ
て４’Ｓ’ｔ　；ｂ　（Ｊ４ｔｕ訃よび灯３図参照）の
で、パックグラウンドの（ｉｉｌ　ｆよ、赤色フィール
ドと緑色フィールドとでは異なる。したがって、山風、
赤色、および緑色ごとの個別ｔｊ’ｌｉ御が必要でるる
。こルらの個別制御は、たとえば、本質的には増幅Ｅ、
１）でりる音種′信号予処理装置３　ｊ　　’、　３．
Ｓ’Ｂおよび、？すＢ ＶＣおいてイ」なわｔＬる。ｊｔｌ、らの制御によって
、緑色および赤色の一！信号を、赤色フィールドおよび
緑色フィールドのための・対応するゼロレベルにおいて
均等Ｖこすることができる。しかしながら、このような
個別制御は、撮像管／７の電子増倍器の決定さｔｌ、た
ある増幅レベルについてしか有効でない。ところで、上
に見たように、電子増倍器の増幅レベルは必ず変化させ
なけｔｌ−ばならない。また、白黒、赤色および緑色の
各／ぐソクグ２ウンドに対して行なわルる補正の大きさ
ｒ、撮像管／７の利得に結びつける必要もある。第３図
において明らかなように、撮像管／？の電子増倍器の面
圧制御装置ｌ／−／は、装置３　’％Ｂ　、　３　、ｊ
Ｂおよび３　ｊ　ｙの各利得を詠隊管ｔグの利得に追に
さぜωラインダグ４を介して、白黒、赤色ふ・よひ緑色
の各ノぐツクグ２つ／ドの補正の大きさ七も制御する。

他方、周知のように、緑で囲”ｆ’　ｆ’した光輝部域
の照度は、縁辺部よりも中央部ＶＣかいての方がと５ぐ
、し１こかって、当該部域における照度は、部域を横切
ってドーム状に変化する。

嬉弘図お工ひ第Ｓ図は、こルらの現象を図ｂ・トしたも
のである。第を図において、曲線（Ａ）は、局部ざが受
は取る光の波長λ（ｌＰ位：ｎｍ）に応じて局部♂の照
度Ｅ（ｊＦＬ位二ルクス）が低減する模（φを示す。こ
の低減の程度は、緑色よりも赤色の方が大きい。さらに
、局部ざの幅りの方向における照度Ｅの変化を見ると、
この局部のパックグラウンドけ、ドームＤの形を示して
おり、このドームから螢光発出現象の尖頭Ｐが現わｎる
。

このドーム効果に対処するため、この発明（（工／）装
置ｈ　ドームを逆さにした形状を示す信号ＡＤを発生さ
せる装＠ｑＳを具備している。この信号発生装ｒＩＬり
、５Ｉｌ−３：、’Ｂ　号Ａ　Ｄ　カ撮像ｔ　／　７　
”　利得に適した形になるよう、撮像管オＵ得制御製直
弘／に接続さｎている。信号ＡＤは、ライン４ｔ≦によ
って予処理装置３　ｊ　ＮＢ　、　Ｊ　ｊＢおよび３Ｊ
ｖに送られ、それらに訃いて、撮像管／しからの信号り
十Ｐ　Ｋ　；’ＩＩＩえられる。この結果、ドーム効果
は消失する（第、５−　ｂ図参照）。他方、装置ｔ／の
働きにより、２イン１１．４ＺＡｉ介して、上に述べた
ごとく緑色信号と赤色信号を同じレベルにすることがで
さる（附５ｃ図参照）。

もちろん、ドーム現象は空間的であって線的ではないの
で、装置９５は、水平方向のみでなく垂直方向に赴いて
も補正を与える。

メモリ３ざ几および３ざＶにおいて読与収られた赤色お
よび緑色信号は、パックグラウンド自動補正装置弘％お
よび４ｔ≦Ｖ、および場合によっては人工像防止装置５
２Ｂおよびｊ　−？Ｖ　ｋ介して（第３図参照）、減算
器ｑ７および＋、ｒに送られる。減算器ｔ７およびａ　
ｇ　Ｉｒｘ　、そルぞれ信号凡−ｖＸ信号Ｖ−几勿出力
し、とｎらの信号は、電子光学装置３２によって制御さ
れる計算診、フタへ送られ、次いでディスプレイ装置Ｊ
Ｏへ、さらにコンピュータ〔図示せず）へと送らｎる。

場合によっては、とｉらの信号は、カラーテレビジョン
、スタリー／Ｓ／においてカラー画像２与える。

第を図に示すごとく、パックブラウンＦ自動補正装置グ
ＡＥＬおよびダ・ｌＶはそｎぞｎ１積分器Ｓノ、整形器
Ｊ３、場合によって設ける増＠器Ｓ４１．．２よひ減算
器ｊｊとを具備している。減算器５６は、ｓ、２−ｓａ
−ｓａミラインら信号を受信するとともに、メモリ３ざ
□またはＪざＶから直微信号勿受信する。

装置ｑ６几およ゛び一６ｖをこのように構成するのは、
観察される螢光現象（陪Ｓ図の尖頭Ｐ）が観察局部どの
総面積と比べて小ざく、たとえば、局部の総面積数ｌｌ
ｌｌ１１２のうち数μｍ２　Ｌか占めな、いことを考慮
しＣのことである。また、積分器５２によって行なわ１
する。全信号の積分の結果、有効信号Ｐは消失して、ノ
々ツクグラウンドのみが与えらノＬる。

しかしながら、累７１！Ｉ積分を避けるためには、フィ
ールドとフィールドとの間ＶＣおいて積分器Ｓコの動作
を休止さぜる必要が必るが、°これに制御装置５１を介
して行なわれる。積分器Ｓコによりて積分さ一１′Ｌ、
た信号は、整形器５３へ送らｎる。整形器Ｓ３は、均一
な連続電圧を与えるが、この電圧は、場合によっては増
幅器ｊ４’によって増幅さｎてかう、赤色信号用または
緑色信号用の減算器、５Ｊ−ｊ／Ｃおいて減算を受ける
。

理論的には、信号は装置ダｚ８およびｑ〜を出るとき、
赤色または緑色となっていなければならない。しかしな
がら、フィルタの性能が完全でないため、赤色信号には
緑色が、緑色信号には赤色が残っている。また、装置ダ
ｔ、およびグｔＶの下流において減算器ｔ７およびりｇ
を介してＲ−１およびＶ−Ｒという減算と行なうのは、
上記の不都合を避けるためである。こうして、減算器を
出た信号Ｒ−Ｖは、局部ざに含まれる赤色を表わし、信
号Ｖ−Ｒｔｌ′ｉ、局部ざに含ｉｎる緑色を衣わす。

したがって、スクリーン５／上のカラー画像は、局部、
ｒＩ７：ｌ理論像である。

他方、メモリ３ｇ几および３　ｇＶｆ＜出た信号は、観
察したい対象物の実際と対応しない干渉信号で（る人工
像を會んでいることがある。たとえば、免疫螢光法の場
合、標本上に見えるが調介対象の反応には関わりのない
あらゆる物が人工像となる。

こｎらは、たとえば清浄が不充分なスライドグラスに付
着している油脂分、ｐ過が不充分な緩衝液の凝塊、等々
であり、しばしば、対象反応の諸要素よりも明かるくま
た面積も大きな信号を発生させる。

第♂ａ図において、ＡＴは、有効信号Ｐの間に混入した
人工像である。メモリ３ざ几および３ざＶの記憶容量に
限りがあるため、この人工偉人Ｔはすでに波高値を８の
レベルに制限されている。

人工像の残存部分ＡＴｉ除去できるよう、この発明によ
る装置は、そｎぞｎメモリ３ざ１．および３ざＶ　から
信号を受は敗って、補正した信号を減算ｙ；：ｙ　’ｉ
’　７わよひ４ｔざに送る装置Ｓ２ＲおよびＳツＶを具
備している。

第７図に示すように、人工像抑制装置Ｓノ、まｆＣはｊ
　−５ｆは、ｄつの平行なルートラ宮んでいる。

一方（Ｑ　ルー　トな、が処綴３゛２．ツクの加箕語５
ざおよびＳ９全含んでおり、他方のルートは、場合によ
って設ける増φ′１゛１器１０、波毘値リミッタに／、
倒立用増幅器ｔ）および遅延線１３勿含んでいる。

倒立用増幅器ｔノの出力端と７Ｍ算器Ｓ♂との間、訃よ
び遅延ｊ＋：’Ｉｉ乙３と〃目算器♂９との間には、接
続線ｔｑおよび乙５〃：それぞｎ設けら扛ている◇以下
において、第ｇｂ図ないし第ｇｇ図を参照しながら、装
置！　％および、３．２ｙの機能を説明丁心。

波亮値すミンタに／は・、人工＠ＡＴのうち、有ｕｉ号
ｐのＶペルＳと最大レベルＳ（メモリ、？ｌ？Ｂおよび
一？ｇｖ　の記憶容針ｅこよって決まる）との間ＶＣ位
旧、′ｊ−る部分＆、４（５除去して、その部分から孤
立信号金つくる（第ｇｂ図参照）。信号ＡＴのこの部分
乙ｔは、倒立用ｊ・ρ幅器２ノによって増重および倒立
ざｎで、倒立φａ子形信号ｚ７となる（第ざ０図参照）
。

倒立φＵ子形信号乙７ば、υ：１算器Ｓどにおいて、遅
に線Ｓ７Ｖζよって辷延させらルた信号ΔＴ＋Ｐ（（加
算され、こうして、信＋′３ＡＴの前部ｔざは前Ｍ＊Ｉ
ＦＪ子形１山号１ｔＣよって除去ｄルリ（−シざｄ１コ
よびζ；τざ８図参照）。このとき残っているのｔよ、
信号ＡＴの後部に７だけである。

しかしながら、第ざ０図の信号は、７１１１算器、ｓｙ
（・て訃いて、遅延１象ｔ３によって遅延させらａた倒
′ｉ帽子形部分６７に７７［］　３＊さル、こうして後
部ｔ７に除去さｒしるＣ第どｆ図）。

したがつ°乙装置Ｓ２Ｒおよび５初の出立端においては
、信号Ａ　Ｔ　＋　Ｐの有効部分、すなわち尖頭波Ｐし
か残っていな■（第ざ８図）。

カラー眠像の録画に関しては、ビデオテーゾレコーダｑ
Ｏは、様々な刀ノー信号にム己録できるものであルば従
来公知のいかなる形式のものでもよい。また、偶数番（
またｔよ奇数層・）のフィールド？赤色、緑色の一万の
色に、奇数番（または偶数番）のフィールドを他方の色
ＶＣ割り当てるようにすｎＶユ、毎ｊルな白黒ビデオテ
ープレコーダを用いることもできる。

前述したｊ９に；′対物レンズに対する載物台１０の移
動、特にＸお工びＹ方向における移動は、電子光学装置
に工つて副輪ざ１’Ｌ心。こｎに心安な目動株ＪＩ’ｔ
の簡単な′−）ミ施怒様栄第７ａ図、第７ｂ図および第
１０図に示すが、この実施独様においては、補助載物台
７Ｑが設けられており、この補助載り台は、検を１−べ
きスンイドグラス７コを固定するためのス２イ１ら伎持
装置２／と連動する。ｊｔＤ助載物台７０は、第７０図
において見た場合、操作者の左側（右側でもよい）に、
可動補助プレート？Ｑ（第１Ｏ図、第１／ａ図および第
１／ｂ図参照）？挿入できるガイド・７３および７３′
ケ具ｔ１ｉＪシている。前記可動補助プレート７ダの前
方移ｊｂＪは、ストン、０７　ａｔによって制限さ几て
いる。補助載物台７０は、光の反射または透過によって
動作するフォトダイオードおよび発光ダイオード（ＬＥ
Ｄ）によって構成さ′ｔ″Ｌだ電子光学装置を収納した
上部ピンクスフＳと下部ボックス７乙（第９図参照）と
の間に挿入さルている。上ｈ（Ｓボ′ツクスフＳの前部
には、小径のシリンダ７７が固定さｎており、このシリ
ンダ７７は、その内部の上端ＶＣＬ　ＥＤを、下端にレ
ンズを具備している。こうして、光点７ざ７７へ可動匍
助グレート７ダのイメージホール７ｇ′上に現わ′ｔ″
Ｌ／）ようになっている。＠＠１０図に訃いて、可動補
助ゾＶ−ト７グは、顕微鏡下にはかルだスライドグラス
フコの実際のホールと同様のホールの可視像７ｇ′と、
一定数の反射要素７り吐たはＬＥＤ型光源によってイム
号送信全可能ＶＣするみぞ穴とを含んでいる。前記信号
（・′ユ、７」ンツクス７ｚＫ収容さｆ′したフォトダ
イオード（図示せず）によって捕集される。このような
構ｂｉ、ｉｃ　、！：り、あらゆる組み合わせによる移
動が可能となっている。各要素の配置については、様々
な配置が可能である・が、所望の計画に沿った市Ｉ単な
配置でなければならない。

すでに見たように、免役螢光法においては、きわめて短
時間で観察および示針化ヶ行なうことが必要であり、ま
た、同一点を２度観察および定量化することは避けなけ
ｎばならない＠したがってまず、たとえば試料採取から
始めることができる。

（７’ＣとＬｕ）ｉｏ個（４）ホールを有するスライド
グラスの場合における完全な自動サイクルは、次のよう
にして行なうことができる。

補助グレート７弘上の光点７ｇＴ／Ｃよって始点が固足
さル、装置がＣ手動によって）作動し始めると、載物台
１０が移動し、載物台／ディスクユニットが、上部”電
子光学？クラス”７ｓからの信号によって固定さｎる。

電子光学ボックス７ｓ自体は、正方形要素７り（嬉７０
図および嬉／／ａ図）の最初の縁部に訃ける光の反射１
ｃよって作動させらｎる。スライドグラス７２上の最初
の局部（観察域）ｇｏがホー／Ｌ−ざσの内側にきちん
と入るように載物台１０が固定されると、自動または手
動、による焦点合わせが行なわれる。ところで、ホール
ざび上の局部ざＯは、補助プレート７４ｔの可視像７ｇ
″上の光点と位置的に対応している。

焦点合わせを手動で行なう１８合（・ま、操作者がパル
スを送る。

自動焦点合わせの場合は、シーケンスの開始と計数器お
よびディスプレイ装置の帰零葡指令する）ぐルスが自動
的に送らルる。ディスク／ざは、停止させら′ｎたとき
、電子光学装置３０により、フィルタボルダの出ｉ＋Ｊ
訃工ひ日熱瓦にシーケンス（ディスク１０のトラック２
り）の始端において固定さｎる。ディスク／ざは、シー
ケンス開／を指令パルス′ｆ：受は敗ると始動し、載物
台がＸ方向に４多動する。載物台１０は、赤色、次いで
緑色が記憶されると再ひ固定ざル、さらに、この過程が
終了丁０と、ディスクＩＱから信号を受は敗った電子光
学装置の働きにより、再び自動的に始動する。

７ざ′のようなイメージホールの全体は、スライドグラ
ス７２の実隙のホールを可視色する装置を栴成し、また
、７７のような要素の全体は、スライドクラス７２の各
局部に対応する位置における停止および読み収りを制御
する装置を構成する。こルらの装には、ディスク／ざの
電子光学装置３゜およびＸ方向移動のための電子光学装
置７５と共働する。

かくして、たとえば、連続するまたは連続しない１０個
の試料を観察および定量化することができる。１０番目
のホール内の試料のあと、計算機は／りの信号を発信す
るが、この信号は、メモリへの記憶蛍中断させ心ととも
に、矢のホールの始端まで撮像管／７を゛ブロック”す
る。次のホールの始端が来ると、上と同じサイクルが開
始し、こｎが、第１列の５つのホールについて繰ジ返さ
れる。第１列が終わると、ボックス７を内に配置さｎた
電子光学装置が、補助グレート７グ（第１／ｂ図参照）
の下面によって支持さｎた反射トラックざ／ＶｃｘりＸ
方向走査の終了音確認し、こうして、載物台の下列（第
２列）・までのＹ方向移動を可能にする。第２列では・
、Ｘ方向移動が、たとえば逆方向において繰り返さｎる
。この第２のＸ方向移動サイクルが終′わると、前記電
子光学装置が走査終了を指示する反射トラックｇコ全検
出し、こうして、反射マークざ３との共働において、ス
ライドグラス７コの初期位置復帰を可能にする。

したがって、トラックざ／、ｇ２、およびマークｇ３は
、電子光学装ｆｉ？４と共働してＹ方向移＠装置を構成
する。

この発明によるシステムを用いれば、結悉の定量化が可
能であるが、そのいくつかの例を以下に示す。級仝積偏
り方法についてＶユ〕−でに述べ、電だ、操作の都合上
、標本数が１０個ｔＶ限らルていることも丁でに見た。

したがって、計算機は、信号の振幅に対応する連続する
７０個の値を、（ｖ−Ｒ）のグラス部分ｐよび（Ｒ−〜
ｆ）のプラス部分を賢わす、補正後の“ピーク”値′ま
たは積分値として記憶する。　　　　　　　　　°゛た
とえばもし、検査子べき血清の／／、Ｓ’０　、　／／
１００、／／、２００．、／／１１００．　　／／Ｊｆ
００．／／／１００゜／／３．２００　、　／／ｌダ０
０・・・・・・の希釈液を連続するボールに入ルてトキ
ンゾンズマ症の７゛丙定を行なう場合、計算機は、７つ
のポールに収容δれ１こ０希釈度の７つに対応する７０
個の１本の平均ず胆を与える　Ｏ 靜／２図は、ある滴定（Ｃついて得ら′ｎた曲線の一般
的傾向を示すが、希釈度？対数目盛で横軸にとり、信号
（４−Ｒ）および（Ｒ−１の強さを直線目盛で縦軸にと
っである。図から明らかなように、＋ＣＶ−ａ）は急下
降し、＋（Ｒ−Ｖ）は急上昇している。

コ本の！ＩＩ線の欠点〔ユ、プラスの最後の希釈度にほ
ぼ対応するが、こ−ｎは当該血清の滴定量に対応してい
る。

特殊な場合、たとえば１１、ｊ定を行なわないＨＬａグ
ループの決定の場合は、別の定量化方法が必要となる。

そのような場合は、まず、そ几ぞれ＋（Ｖ−Ｉｔ）、＋
、（几−Ｖ）を発する要素の面積を測定し、次に計算機
によって、全領域に対するこれらの面積の比を決定する
ことができる。

また、場合によっては・、第１の振幅測定法と第２の面
積測定法を組み合わせて、よ“シ信頼度の高い結果を得
ることもできる。

以上において、この発明の詳細な説明ケ特殊な／実１ｉ
Ａ態様にそくして行なったが、特に一部の装置または機
能ｔＣ関して他の１旬等の技術と置き換えることによフ
、上述した実施態様ｉｃ様々な変更を加え得ることは言
うまでもない。

【図面の簡単な説明】

第１図は、この発明による装置の撮像装置の／実施例を
概略的に示す。 紀ノ１Ｑユ、婦／図に示す撮し装置においてｌｉ」い、
らｎているディスクの／実１＠例の平−１図である。 第３図は、この発明による装置の電子装はの模式図であ
る。 第４図、嬉ｊａ図、第５ｂ図お工び紀ｊｃ図は、撮像管
からの映像信号のＦ−ム補正２しｊ解したものである。 第１図は、カラー信号のパックグラウンドを補正する装
置の模式図である。 第７図および第ｒ図ないしＥｇｇ図は、映像信号からの
人工像の除去を図解したものである。 曜２ａ図および射２ｂ図は、対物し／／ｅＶｃ対する載
物台の移動を制御する装置の実施例の全体図で、前＠は
正面、後者は側面を示している。 第７０図は、載物台の移動を先導する自動装置の実施例
の詳細平面図である。 第１／ａ図および第１／ｂ図は、前記自動先導装置の＄
ＦＩｍグレートの笑１ｍ　％Ｊ　’ｆｔ示し、前苔は上
面図、後者は下面図である。 箒７２図は、この発明による装置ｔトキソプラズマ症に
適用して得らｆＬる曲線を示す。 図中１．２＝放射線源、Ｓ：励起フィルタ、７：光学観
察装置、ざ：局部、／、２＝フイルタ、／７：撮像管、
２２．．２．３・・・カラーフィルタ、３ざ几、ｊ’ｇ
ｖ　：記憶装置　ダ／〜ｌ１９：撮像管の利得を変動さ
せる装置。 図面の浄８（内容に変更なし） 第１図 第 （αつ ９図 （ｂ） 第１１図 （σ）（ｂ） 手続補正書（方式） ％式％ １、事件の表示 昭和５８年　特許願　第１６１２３２号２、発明の名称 螢光によって検ｆｉｌ可能な現象の観察２よび定量化装
置３、補正をする者 事件との関係　　　特許出願人 住所　　　フランス国、ノセリ、リュ・デュ・ドクトウ
ール、ブルーアルデル、６ 氏　名　　　アンリイ・ド・フランス ４、代理人 〒１０５住所　東京都港区西新橋１丁目１番１５号物産
ビル別館　電話（５９１）　０２６１図面の浄書内容に
変更なし 手続補正書（方式） 昭和５９年３月２７日 特許庁長官殿 １、事件の表示 昭和５８年　特許願　第　１６１２３２号定量化装置 ３、補正をする者 事件との関係　　　特許出願人 住　所　　フラン場、パリ、リュ・デュ・ドクトウール
、ブルーアルデル、６ 氏　名　　　アンリイｅド・フランス ４、代理人 明細書の図面の簡単な説明の掴 を「第８図は」と補正します。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ｔ　螢光によって検出可能であシかっ限定された局部（
   ｆ）に現われる現象の観察および定蓋化を目的としてお
   Ｌかっ、場合によっては前記螢光を発生させる励起放射
   線を前記局部（ざ）へ送るための励起フィルタ（りと組
   み合わされた放射線源（２）と、前記局部（１）の光学
   的観察のための装置（７）と、励起放射線の遮断を目的
   としておシかっ局部（♂）からの螢光線の進路上に配置
   きれた少なくとも７つのフィルタ（１２）とを具備して
   Ｐす、かつ、前記光学観察装置（７）および螢光線の波
   長に応じて選ばれた少なくとも、２つの異なるカラーフ
   ィルタ（，２コ、２Ｊ）　′ｆ：介して前記局部（ｒ）
   を精査する可変利得型撮像管（／７）と、この撮像管（
   １７）によってとらえられた個々のカラー映像に対応す
   る電気信号を記憶するための記憶装置（，１，、Ｊ♂Ｖ
   ）と、これらの記憶装置を出た電気信号を同時に復原す
   るための装置と、撮像管（／７）の出力信号の振幅が。 撮像管の残像を無視し得なくなる聞直よりも常に大きな
   匝に維持されるよう撮像管の利得を変動させるための装
   置（μ／→弘）とを具備していることを特徴とする装置
   。 ２　カラーフィルタが少なくとも７つの赤色フィルタ（
   ２，２）と少なくと、も１つの緑色フィルタ、（２ｊ）
   とによって構成されて＾る特許請求の範囲第１項に記載
   の装置。 ３、　撮像管（／２）がさらに局部（１）’ｆｃ直接精
   査することにより撮像管（／７）の焦点合わせのために
   用いられる局部（ざ）の白黒映像を与えるように構成さ
   れている特許請求の範囲第１項萱た′ｒｉ灯λ項に記載
   の装置。 弘　撮像管（１７）か、連続して配置されたカラーフィ
   ルタを介して行なわれる連続した２回の精査の間、およ
   び／または７つのカラーフィルタを介しての精査と白黒
   映像を与えるだめの精査との間。 遮蔽またはブロックされる特許請求の範囲娼／Ｊ４ない
   し嬉３項のいずれか−りに記載の１Ｌよ　白黒におＶす
   る直接精査に対応する少なくとも／りの窓部（コ／）と
   、カラーフィルタ（２２，２３）と。 不透明部分（λ≠１．２ｚ、ｒＡ）とを有するディスク
   （／♂）を具備してｔす、このディスク（／ざ）は、前
   記窓部。 フィルタおよび不透明部分が撮像管（／７）へ送られる
   螢光ビーム（／／）を次々に横切るように回転させられ
   る特許請求の範囲第ｊ項に記載の１Ｌ６　ディスク（／
   ｒ）の回転が記憶装置（−ｔｉｎおよび３ざｙ）にかい
   て谷カラー映像に対応する信号の記憶と同期化されてお
   り、筐だディスク（／了）がシステムの各要素の同期比
   に関与する固定センサ（３０゜３／、３２）と共動する
   特許請求の範囲第５項に記載の１Ｌ Ｚ　各カラー映謙のためのパックグラウンドレベル蘭別
   制＠練ｄを具備しており、またこれらの制御表置が（４
   ４グで介し）撮像管の振幅利得に応じて１ＨＩＩ御さｔ
   Ｌる特許請求の範囲一７項〜第６項のいずれか一つＶこ
   記載の装置。 ざ　ある光感の照度は一般に縁辺部よりも中央部に２い
   ての方が高いというφ゛実を考慮して、撮像管（／７）
   の出力信号のドーム形底部を消去するための逆ドーム形
   信号（ＡＪ））を発生させるための、撮像管の利得ＶＣ
   応じて制（至）される信号発生装置を具備している特許
   請求の範囲第７項〜第７項のいずれか一つに記載の装置
   。 タ　信号元生諌ｍ　（ｅｊ）が家の水平方向、垂直方向
   の両方において逆ドーム杉信号（人Ｄ）を発生する特許
   、ｉｉｉ′求のｉ回部１ｒＪＡにｓｔ　ｇ　（Ｄ　＊　
   ａｔ　。 ｉｏ、映隊信８の積分）よび整形なりひにその結果得ら
   れた信号の実信号からの減算によってパックグラウンド
   を消去するだめの読ｋ　（竺輸および≠ｚｖ）を記憶装
   置（，３１，ｈよび３〜）の下流に具備している特許請
   求の範囲第／魂〜第２項のいずれか−りに記載の１Ｌ ／ｌ　第７のカラーフィルタ（−λ〕を出た信号と嶋−
   〇カラーフィルタ（２３）を出た１ｇ号との間で几−■
   の減算を行ない、また第２のカラーフィルタ（２３）を
   出た信号と第１のカラーフィルタ２２を出た信号との間
   でｖ−Ｒの減算を行なうための肢はＣμ７，４ｔざ）を
   具備している特許請求の範囲娼／項〜妃１０項のいずれ
   か一つに記載の装置。 ｌλ各人工像をでれ自体の一部を介して消去することを
   可能にする遅延装置（ｊ７．Ｊｊ）、波高１直制限装置
   （，４／）、増幅装置（ｔｏ、ｔコ）ならびに加算２よ
   び／またな減算装置によって構成される人工隊消去装置
   を具ｖＷ　している特許請求の範囲第７項〜第７項のい
   ずれか−っに記載の装置。 ／３．　　スライドグラス（７２）の実際ホールを可視
   化するための装置（７ｇ勺と、スライドグラス（７２）
   の局部（ｔｒｏ　）に対応する位置での停止ｐよび読み
   取りのための劃−装置（７？）とによって構成されてお
   シ＆　またＸ方向＃姑のためにはディスク（／ｌ）の電
   子光学装置（３０）および電子光学装置（７りと共動し
   、Ｙ方向移動のためにはぼ子光学装置（７６）と共動す
   る。焦点合わせの段階における載物台（１０）の対物レ
   ンズ（７）に対する移・ｔ　ＯＴ能にする自ｖＪ装置を
   具備している持ｉｆＦ請求の範囲第７項〜第７項のいず
   れか一つに記載の装置。