JPS5885815A - 安定化インシユリン製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は物理的に安定化された新規なイ、ンシ。

リン溶液に関し、さらにその様な安定化インシーリン溶
液の製造方法に関する・ 液体媒体、たとえば水にａＳさ昨たインシュリンは、室
温で数年間貯蔵する事が出来、そして該製剤はその期間
中安定である。しかしもしもインシーリン溶液を約８０
℃に加熱するならば、該インシユリンは、二、三分以内
で変性し、その結果は熱変性又は熱重合と称される。も
しもインク。

リン溶液が、熱変性が生じない又は実質的に生じない温
度よりもより低い温度、たとえば４１℃で二、三日振と
うされるならば、他の種類の重合が生起し、この種の重
合は本発明において界面非共有重合と呼ばれる。

インク、リン製造業者、薬局及び患者は通常インク、リ
ン製剤を約５℃で保存し、従って、明らかにその様な製
剤においては界面重合は起こらない。しかし輸送及び運
搬中に咳製剤は時折必然的に振とうせられる。

最近インシュリンの連続注入の鳥の待ちはこび６Ｔ能又
は埋め込み可能なシステムを開発する為の努力が着実に
なされている。本質的には、連続的インシュリン排出用
の装置の機械的部分は、貯蔵器、／ンデ輸送システム及
びインク、リンを患者に送る為の適当なカテーテルの様
な部材を含んでなる０もしもインシュリン溶液が注射器
によって供給されるならば、注射器はインシュリン貯蔵
器として作用する。

Ｆｍ業的に入手可能な溶液状態にあるインク、リンを、
その様なシステムにおく場合不幸にもインシユリンは体
温で界面重合を受ける傾向を示す事が見出され、機械部
分及び輸送カテーテルの両方を損なう事がわかった。イ
ンシュリン浴液のこの特性は、連続的インク、リン装置
をさらに開発す　′る事及び臨床的応用への主な障害ど
なる事が判明した。

連続的供給装置におけるどの様なタイプにおいても、明
らかにインク、リン溶液は界面重合をもたらす運動にゆ
だねられる。この点に関し従来技術のインシュリン製剤
の一般的欠点については、文献たとえばＤｉｍｂ＠ｔｏ
ｌｏｇｉａ　１９（１９８０）　１ないし９において充
分記載されている。

この問題を解決する島、グルタミン酸又はアス・譬ライ
ン酸を含有する酸性インシュリン溶液を使用する事が提
案されている（　Ｄ−１ｍｂ＠ｔ・■３０（１９８１）
　。

８３参照）。しかしながらインク、リンは酸性において
、体温以下でさえ化学的に不安定である〇さらに、非イ
オン界面活性剤を含有するインシュリン製剤を使用する
事が提案されている（ドイツ特許出願第、Ｐ２，９５２
，１１９参照）。しかし非イオン界面活性剤は皮下投与
用として意図された医薬においては望ましくないものと
して考えられる◎本発明は以上の欠点を解消し、本発明
はインシュリンを溶解した新規な製剤を提供するもので
あシこの製剤においてインシユリンは通常のインシュリ
ン製剤に関する場合よりも、連続的インシュリン供給装
置において行きわたっている条件の下で非共有重合を妨
書する事が実質的によシ少ない傾向にある。

とこにおいて鳶ろくべき事に少なくとも一種のリン脂實
がインシュリン溶液中に存在する場合、叔ｍ液は界面重
合に対し安定化されている事が見出され九〇本発明にお
けるインシュリン溶液中に存在するリン１１１［は、次
の一般式Ｉ：Ｈ−Ｃ）Ｉ−ＯＲ’ ０Ｈ−ＯＲ“　　　　　　　（１） Ｈ−ＣＨ−０−Ｐ（０）　（ｏＨ）−ｏｆｔ”（式中Ｒ
′及びＲ“は同−又は異っておシ、それツレ水素、アル
キルカルがニル、アルキニルカル−ニル、アルカジェニ
ルカル−ニル、アにカトリエニルカル？ニル又ハアルカ
テトラエニルカル？ニルであり、Ｒ′及びＲ“の双方と
もは水素でないａｔ−条件とし、さらにＲ″は親水基た
とえば２−゛（トリメチルアンモニオ）エチル、２−ア
ミノエチル、２−カルＩキシー２−アξノエチル、２．
３−ジヒドロキシデミビル又は２，３，４，５．６−チ
トラヒドロキシシクロヘキシルである） で表わされる０上記のアルキルカルゲニル、アルケニル
カル〆ニル、アルカジェニルカル−ニル。

ブルカトリエニルカルがエル及びアルカテトラエニルカ
ル−ニル基は約８ないし２２個の炭素原子から成り、そ
して本発明の−ａｍにおいてはそれらは約１２ないし２
２個の炭素原子を含有する。

かくして本発明は、水、＃！聯したインシユリン、。

式Ｉで表わされ仝一種又は二種以上のりン脂質及び所望
により亜鉛塩、保存剤９等張化剤、緩憤剤及びインシュ
リン溶液に添加剤として知られている生理学的に許容で
きる化合物等を含んでなる。

式！で表わされる化合物の好ましいす１クラスは％　Ｒ
’及びＲＩ′がおのおのアルキルカルが二λである化合
物である・式！で表わされる化合物のさらに好ましいサ
グクラスｕ、Ｒ”が２−（トリメチルアンモニオ）エチ
ルであり、その様な化合物はレシチンとして知られてい
る。さらに好ましい物は、たとえばＲ′及び８“が各々
約８ないし１６個の炭素原子又は約１２ないし１６個の
炭素原子を有するアルキルカルｔニルで６Ｌ　−Ｆして
ＢＩＮが２−（トリメチルアンモニオ）エチルである様
な化合物である。式Ｉで表わされる化合物の最も好まし
いサブクラスは、Ｒ’及びＲ“の各々がオクタノイルで
ある化合物でおる。式■（式中Ｒ′及びＲ“の各々はオ
クタノイルである）で表わされる化合物は、それらがリ
ポソームを形成すると思われず、そしてさらにそれらが
よシ低い濃度でたとえば１６０μｌ／ｌｌ以下でミセル
を形成するとは思われない蓼から好ましい物である。

インク、リン溶１＆を安定にする為の必要な式Ｉで表わ
されるリン脂質の量は、インク−リン溶液の好ましくは
約１０ないし２００μ７７７ｍ１の範囲にあり、さらに
好ましくＦｌ、１０ないし１００μｆｌ／ｌｎｌ、好ま
しく、は約２５ないし７５μＶ官、最も好ましくは約３
０ないし５０μｌ／／ｉｔｌの範囲にある・本発明のイ
ンシーリン溶液中に溶解したインク、す／の磯ｆは、１
Ｉｌｌあた夛約５ないし１０００国際単位（１，Ｕ、）
の範囲にあるか、又はそれ以上である・後で述べる実ｍ
例に従りて得られるいくつかの安定化インシュリン溶液
は、す４ソームを含む事が出来る。しかしながらその様
なりＩソームはインク、リンを冷加する前にそれら祉形
成されてしまうのでインシユリンを含有しそうにない。

もしもり４ソームが本発明のインク、す／溶液中存在す
るならば、インク、リンは本質的にその様なリーソーム
の外側にあε蓼が好ましい。ここでごく「本質的に」と
は、インク、りンの好ましくは９〇−以上最も好ましく
は９９−以上がリーソームの外側にある事を意味する。

従来技術、たとえばヨーロッー＋＊畦出願第３２，６２
２における様なインシユリンを含むリポソームは目的に
おいて本発明の実施から区別出来、さらに本発明のイン
シュリン溶液においてりＩソーム小胞の内側にインシユ
リンが存在する事は全く偶発的であるとぎう理由から区
別できる。

本発明のインク、リン溶液は非経口投与を目的としてい
るけれども、す４ソームの中にインク、リンを被包する
為の基本的な理論的解釈は経口投与にある・その中にイ
ンシユリンを含有するり４ソーム〇一つの目的は、好ま
しくない化学的攻撃、たとえばもしもインシユリンが経
口投与された場合に冑の中でインシユリンが化学的に分
解される事がらインシユリンを保護することにある。そ
の中にインシュリンを含有するりＩソームに関する文献
は、界面重合に対してインシュリン溶液の物理的安定性
に関係するものではない。その中にインク、リンを含Ｍ
する公知のリポソームにおいて、す４ソームとインシユ
リンの重量比は、たとえば１：０．０１ないし１：０．
００１の範囲にあシ、−力木発明のインシュリン溶液に
対してはその重量割合は約１＝５ないし１　：　１００
００好ましくは約１：１０ないし１：１０００の範囲に
ある。

ドイツ公開公報第２，６５２，６３６は両親媒性の構造
を有する保−用化合物の添加によシ鋭敏なタンパクを安
だ化する方法に関する。本発明とは逆に、上記公開公報
による安定化は水との接触を防止する島に鋭敏なタンパ
クを包み込む事によって得られる・さらに該ドイツ公開
公報中の用語の説明によればインシユリンは鋭敏なタン
／量りとは考えられていない。

本発明の一つの目的はインシュリンを水と接触した状態
に保持する事でめシ、すなわち溶液中においてインシユ
リンが他の界面と接触するととを防止する事にある・ 本発明のインシュリン溶液は、好ましくはウシ科動物、
ツタ又は人、インシユリンを含有する〇好ましいａ樟に
よれば、本発明のインク、すｙ溶液は亜鉛を含有す、る
＠しかしながら亜鉛の量昧沈殿が生じない様な量を選ぶ
べ龜である。界面重合に対しての良好な安定性は、イン
シーリン溶液において得られ、とのインシュリン溶液に
おいてインシユリンに使用可能な亜鉛イオ７のモル濃匿
及びヘキサマーインシュリンとして計算されたインシュ
リンのモル濃度との比が、約１．５ないし４．６、好ま
しくは約３ないし４．５、さらに好ましくは約３．６な
いし４．３の範８にあるｅ好ましい亜鉛塩れ酢酸亜鉛又
は塩化亜鉛のごとき可溶性亜鉛塩である。もしも本発明
のイレシーリｙｆ＃液が九とえはグリシンもしくはヒス
チジンの様なアミノ酸、又はたとえばクエン酸の様なヒ
ドロキシカルが７酸の様なインシュリンと一体を形成す
る化合物を含有するならば、全亜鉛浸度の一部のみがイ
ンシュリンによって使用されうる。

本発明のインク、リン溶液の製造する具体的な態様によ
れば、インシュリン、たとえば、結畠性亜鉛インシュリ
ン、たとえばｒ″単成分ｊイイン。

リン（英国特許第１，２８５，０２３）参照のごとき高
度に精製されたインシュリンを、たとえば塩酸のごとき
酸の存在下、水に溶解する事を含んでなる◎保存剤、た
とえばフェノール、クレゾールのごときアルキルフェノ
ール、又はメチルＰ−ヒドロキシベンゾエートの水溶液
を別ＫＲ製し、所望によりさらに塩化ナトリウム又はグ
リセロールのごとき！張化剤を含有せしめる。さらに、
保存剤浴液は緩衝剤たとえばオルトリン酸ナトリウム、
クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム又はＴＲＩ（トリ
ス（ヒドロキシカル）アミノメタン）全含有できる。次
いで、所望Ｋ・より、得られた保存剤溶液ｔ−酸酸性イ
ンシーリン液液添加し、引き続き塩基たとえば水ば化ナ
トリウムを添加して一値を中性に調整する。本発明の内
容において、中性とは約６．５ないし８の範囲にある１
値を意味するものと理鳴されたい。式！で表わされるリ
ン脂質を、溶液もしくＦｉミコロイド液としてのインク
。

リン溶液に絵加されるが、これらの溶液もしくはコロイ
ド溶液は式Ｉで表わされるりン脂貿を水に溶解もしくは
ａｍさせ次いで所望によりインク。

リン溶液と混合する前に超音波処理に該Ｓ濁液をふする
事によって製造される＠所望によシリン脂質溶液は緩衝
剤及び保存剤を含有する。リン脂質中で混合後、インク
、リン製剤の１値を中性ＫＭび調整する。最後に、得ら
れたインシュリン溶液を水を添加して計算した容量に仕
上け、次いで線通によシ滅劇し、次いで引き＃＆き殺菌
バイヤルに無菌的に移し次いでシールする。

本発明は又、本発゛明のインシュリン溶液の製造方法を
４含むものであシ、この方法はインシユリンを式Ｉで表
わされる化合物と及び所望によシ亜鉛塩、保存剤１等張
化剤及び緩衝剤と水の存在下で混合する事を％ＩＫとす
る。

式！で表わされるその様な化合物４公知でｌｈ＃）そし
て式１で表わされる残プの化合物は公知化合物の製造に
準じて製造できる。

本発明を実施する島のさらＫｌ’Ｐ細は、以下の実施例
によって行なわれるが、この実施例が本発明の範囲を無
理に制限する屯のと解釈してはならない。実施例で用い
走インシ、リン出発物質は、１吋窒３ＩｃＩｈたり２−
＝８ないし３５μ２亜鉛を含有していた。安定性因子の
測定は次の記載から明らかである： 界面重合に対するインシュリン溶液の安定性を測定する
為に、以下の方法による強制的条件下で、該溶液を安定
性試験に姿ねた： それぞれｆムのキャップをそなえかつ試験サンプル（１
０ａｊ）を含有するバイアル（１２，５ａ／溶積）を、
４１＋／−０，１℃に保持された水浴中で全体が浸漬さ
れた振盪台（ＨＥＴＯ，デンマークから入手される）上
に垂直に置いた・振動台を、１１００ｒｐの振動数及び
５０−の振幅を持って水平方向の振動運動に費ねた◎ 試験試料の乳白光を、ｒ　Ｆ１ｇｅｈ＊ｒ　ＤＲＴ　１
０００ネフロメーターＪ　（Ｆｌｓｅｂ＠ｒ、カナダか
ら得られる）ｔ−用いて一定時間間隔で観察した。’ｆ
ｌ１４りが１０ネ７ｏメ一ターＦａ濁度単位（ＮＴυ）
を越える重合に１界面重合が生じたものと見なした。

式Ｉで表わされる化合物が対象試料に添加されていない
事を条件として試験試料と同様の方法で調製した対象サ
ンプルについての界面重合時間に対する試験試料の界面
重合時間の割合として、安定性因子を計算した。

実施例１ ５００１１Ｉｙの半合成ヒトインシュリンを０．０４５
Ｎ塩ｅＲＩＱａｕ４ｃ溶解し次いで蒸留水３００ｄに溶
解した３　５９ｗＩｇのメチルＰ−ヒ＃ｐｃＩキシベン
ゾエートを添加した。さら［４７６Ｉｖの酢酸ナトリウ
ム三水和物、２．４６１の塩化ナトリウム及び蒸留水１
５ＩＬＩＫｆＩ！鳴した０、　２　Ｎ水酸化ナトリウム
溶液４．７３ｊｌｊを倍加した。９１１９のシミリスト
イル、Ｌ−アルファーホスファチジルーフリンを、蒸留
水に溶解した塩化ナトリウム７０ダ、酢酸ナトリウム１
３．６ｍｇ及びメチルＰ−ヒドロキシベンゾエート１０
■の溶液ＩＱａＪ中に懸濁した０超音波浴中で２時間超
音波処理に委ねられたスラリー中にチッソを泡だてた。

得られたコロイド溶液を１攪拌しながらインシュリン溶
液に添加した。０．２Ｎ塩酸又は０．２Ｎ水酸化ナトリ
ウムを用いてｐＨ値を７．４５に調整し、次いで蒸留水
を加え全量を３５０−とした。得られたインシュリン溶
液の安定性因子は１２５以上であ、りた。

実施例２ ９．６５．９の１タインシユリンを、０．０２Ｎ塩酸４
００ｄにｆｉｊ解し次いで５．０ＩＯ結晶性フエノール
及び４０ｊｌの無水グリセロールを添加し、さらに蒸留
水を加え全量を２２００ａｃＪとした。０．２Ｎ水酸化
ナトリウムを用いて１値を７．４５に調整した。１２５
■のジステアロイル、Ｌ−アルファー”ホス７丁デジル
弓リンを２ｄのエタノール（９６−）中でおだやかに加
熱することによシ溶解し、次いで皮下注入器から７０℃
の温度を有する蒸留水１００ｊＬｊ中に激しく゛攪拌し
ながら注入した。得られた不透明溶液を、高エネルギー
超音波プローブによる超音波処理に１５分間委ね、そし
て得られたコロイドｍｇｔ攪拌しなからインシュリン溶
液に添加し次いで蒸留水を加え全量ｔ２５００ｊ１ｊと
した゛。所望により一値ｔ７．４５に再調整した。

安定性因子は３０以上でＴｏ−＞た。

実施例３ないし８ 実施例１で記載した方法と同様にしてインシュリ／Ｓ液
を製造し九〇ただし使用したり／脂質はレシチンであり
、ことにおいて疎水性部分すなわちＲ′及び′Ｒ＃−同
じでおりそして第１真に記載されるものである。得られ
た緒果轢第１真に示すＯ第ｉ表 ３　　ミリストイル　　　ゲタ　　　１２０以上４　　
バルミトイル　　　　１夕　　　　１０４５　　ステア
ロイル　　　グメ　　　１１７以上６　２ウロイル　　
ヒト　　　１３３以上７　　　ミリストイル　　　ヒト
　　　１３３以上８　　パルばトイル　　　ヒト　　　
　７５実施例９ 実施？ｌＪ　１で伸べた方法と同様にしてインシュリン
溶液を製造した。ただし使用したリン脂質は卵レシチン
であり、そして使用したインシュリンはブタインシー」
ンであった。安定性因子は９６でＴｏ−ｖたＯ 実施例１０ないし１４ 実施例１で記載した方法と同様にしてインシュリン浴液
を製造した。ただしプタインシ、リンを、第ｎ表で記載
する精製濃度を与える量で添加した。

得られた結果を第■表で示す。

第１表 １０　　　　　　２’０　　　　　１２０以上１１　　
　　　　　４０　　　　　１２０以上１２　　　　　１
００　　　　　９７ １３　　　　　２００　　　　　７９ １４　　　　　５００　　　　　５３ 実施例１５ １．５０Ｊｌのブタインク、リンを、０．２Ｎ塩酸の６
．５ｄに溶解し、次いで水を添加し全量を５０ｄとし九
〇１．０ＩＯメチル↑−ヒドロキシベンゾエート及び１
．７８＃のリン酸ナトリウムを９００ａｕの蒸留水に溶
解し、次いでインシュリン溶液を加えた。０．２Ｎ水酸
化ナトリウム溶液を用いて、−ｆｆｉ’に７．４５に調
整した〇実施的２°で伸べた方法ｉ同様にして得られた
コロイドジオリストイル、Ｌ−アルファーホスフγチジ
ルコリン溶液を蒸留水と共に加え全量を１０００ａｊと
しリン脂質の最終濃度５０μＩＩ／ＩＬｌを得た。安定
性因子は３０以上であった。

実施例１６″ 実施例１５と同様にしてインシュリン溶液を得た。ただ
し最終溶液Ｉｆｉｌａｕに対し２０１．Ｕ、インシュリ
ンを含有していた。安定性因子は１７以上であった。

実施ガ１７ 実施例１５と同様にしてインシュリン溶液を得た。ただ
し最終インシュリンｍｔＬは５００　Ｉ　、Ｕ、／ｄで
アシ、そして最終のシミリストイル、Ｌ−アルファーホ
ス７７　ｆ　’）ルコリンｔｔＦｉｓｏβＩ／Ｍｌテあ
った。安定性因子は３０以上であった◇実施？ＩＪ１８
ないし２０ 実施ガ２に記載した方法と同様にしてインシュリン溶液
を得た。ただし第１Ｉｌ費に記載する最終濃ｆを得るた
めに、シミリストイル、Ｌ−アルファーホス７アチノル
コリ″／を使用した。得られた結果を第ｍ表に示す。

第ｍ表 査号　　（μｍ／／Ｉｄ＞　　　因子 １８１１．３ １９　　　１０　　　１．８ ２０　　　　　　５０　　　　　　３３以上実施例２１ ジオクタノイル、Ｌ−アルファーホスファチジルコリン
を蒸留水に溶解し、次いで最終濃度３０μ７７７ａｔを
得るための十分な量で、インシュリン溶液に添加したが
、この溶液は５Ｊ！施ｆｌｉ１におけると同様の方法で
製造した。安定性因子は、６３　゛以上てらった。

実施的２２ ３．６５Ｊ’の半合成ヒトイン゛シ、リンを、１００１
１１の０．０２Ｎ塩酸及び２．０Ｉの結晶性フェノール
に溶解した。１６ｇの無水グリセロール及び４−亜゛　
鉛を有する塩化亜鉛溶液０．３−を添加し次いで、さら
に蒸留水を加え、全量を９００ｄとした。

、０．２Ｎ水酸化ナトリウム溶液を用いてμ値を７．４
５に調整した。５０ダのジオクタノイル、Ｌ−アルファ
ーホス７゛アチジルコリンを蒸留水に溶−し、次いで、
該溶液に加えた。蒸留水を添加し全量を１０００ａ７と
した。安定性因子は６５でありた。

以下永白

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、亜鉛、保存剤９等張化剤及び緩衝剤を所望により含
   んでなる１１１１１！理的に安定化されたインク。 リン溶液であって、次の一般式： ％式％ （１） ） （式中、ＲＩ及びＲ“は同じであるか又は異りており、
   それぞれ独立に水素、アルキルカルがニル。 アルキニルカルがニル、アルカジェニルカルＩエル、ア
   ルカテトエニルカルＩニル又はアルカテトラエニルカル
   がニルであるが、Ｒ′及びＲ＃の双方ともが水素でない
   事ｉ条件とし、そしてＲＩ＃は蛎水基を表わす） で表わされるリン脂賞を、安定化する島の割合で含有す
   る事°を特徴とする、前記溶液。 ２、前記填水基が、２−（）リメテルアンモエオ）エチ
   ル、２−アきノエチル、２−カルがキシ−２−７２ノエ
   チル、２．３−−）ヒドロキシプロピル又ｌｌ１２，３
   ．４，５．６−インタヒドロキシシクロヘキシルである
   、特許請求の範囲一１項記載のインシュリン溶液０ ３、インシュリンがリポソーム外に本質的にある、前記
   特許請求の範囲第１項又は第４項記載のインシュリン溶
   液◎ ４、　　前記アルキルカルがニル、アルケニルカル１Ｎ
   ニル、アルカジェニルカルがニル、アルカトリエニルカ
   ル？ニル及ヒアルカテトラエニルカルがニル基が約８〜
   約２２個の炭１ｓ原子を含有する、％ｔｌｆ１１Ｍ京の
   範囲第１項から第３項までのいずれかの記載のインク、
   リン溶液・ ５、前記基が約１２ない〔約２２個の縦索原子を特徴す
   る特許請求の範囲第４項記載のインク１りン溶液◎ ６、前記Ｒ′およびＲ“がそれぞれアルキルカルがニル
   を表わす、”特許請求の範囲第１項から第５項までのい
   ずれかに記載のインシ、リン溶液＠７、前記Ｒ″が２−
   （）リメテルアンモニオ）エチルである、特許請求ＯＳ
   Ｓ第１項から第６項までのいずれかに記載のインシュリ
   ン溶液０８、前記Ｒ′及びＲ”がそれ七九約８ないし約
   １６個の炭素原子を含有するアルキルカルがニルである
   、特許請求の範囲第７項記載のインシュリン溶液０ ９、Ｒ′及びＲ“がそれぞれ約１２ない°し約１６個の
   炭素原子を含有するアルキルカルビニルである、特許請
   求の範囲第８項記載のインシュリン溶液０ １０、前記Ｒ１及びＲ“がそれぞれオクタノイルである
   、特許請求の範囲第１項からＩｓ９項までのいずれかく
   記載のインシュリン溶液。 １１、前記溶液中の式！で表わされるリン脂質の１１１
   度が、約１０ないし約２００μ紗譬の範囲にある、特許
   請求の範囲第１１Ｘから第１０項までのい−ｊｔｌゆに
   ユ、。イｙ　’ｓｒ　、　ＩＪ””　Ｊｙ諮よ。 １２、前記濃度が、約１０ないし約１００μｌ／ｋｄの
   範囲ＫＴｏる、特許請求の範囲第１１項記載Ｏイイン、
   リン溶液。 １３、前記濃度が、約２５ないし約７５μＶυの範囲に
   ある、前記％ｆＩｆｉｓ求の範囲第１２項記載のインシ
   ュリン＃液。　　　　　′ １４、前記濃度が、約３０ないし約５０μｍ１／ｌｉｔ
   の範囲にある、特許請求の範囲第１３項記載のインク、
   リン溶液。　　　　　゛ １５、前記式■で表わされるりン脂貿及びインクニリン
   の重量比は、約１：５、ないし約１　：　１００００の
   範囲にある、特許請求の範囲第１１項から第１４ＸＪ４
   ｔでのいずれかに記載のインシュリン製剤。 １６、前記重量比が、約１＝１０ないし約１　：　１０
   ００の範囲にある、前記特許請求の範囲第１５項記載の
   インク、リン製剤。 １８、インシユリンに利用出来る亜鉛イ１オンのモル表
   置とインシユリンをヘキサマーとして計算した場合のイ
   ンシユリンのモル１１１７［との比が、約１６５ないし
   約４．６の範囲に−ある一１特許請求の範囲第１７項記
   載のインク、リン溶液。 １９、前記比が約３ないし約４．５の範囲にある、特許
   請求の範囲第１８項記載のインシュリン溶液◎２０、前
   記比が約３．６ないし約４．３の範囲にある、特許請求
   の範囲４１９項記載のインシュリン溶液・２１、次の一
   般式（■）： Ｈ−ＣＨ−ＯＲ’ ＝ＣＨ−０ｆｆ“　　　　　　　（Ｉ）。 Ｈ−Ｃ１（−０−Ｐ（０）（ＯＨ）−０Ｒ／”（式中、
   に′及びＲ“は同じであるか又は異っており、それぞれ
   独立に水素、アルキルカルがニル。 アルキニルカル−ニル、アルカジェニルカルがニル、ア
   ルカトリエニルカルーニル又扛アルカテトラエニルカル
   ゲラルであるが、Ｒ’及びＲ″の双方ともが水素でない
   事を条件とし、そしてＢ１１１は親水基を表わす０） で表わされる化合物及び所属によシ亜鉛塩、保存剤１等
   張化剤及び緩衝剤を水の存在化、インク１りンと混合す
   る事を特徴とする、インク、りン溶液の製造方法。 ２２、インシュリンを添加する前に、前記混合物を超音
   波処理に付する、特許請求の範８第２１項記載の方法。 囚、保任剤１等張化剤及び緩衝剤を所望によシ含んでな
   るインシュリン溶液の安定化方法でありて、次の一般式
   Ｉ： Ｈ−ＣＩ−ＯＲ’ Ｃ１（−ＯＲ“　　　　　　　　（１）Ｈ−ＣＨ−０−
   Ｐ（０）（ＯＨ）−ＯＲ”（式中、Ｒ’及びＲ“は同じ
   であるか、父は異りておシ、それぞれ独立に水素、アル
   キルカル−ニル、アルキニルカルがニル、アルカジエニ
   ルカルゲニル、アルカトリエニルカル−ニル又はアルカ
   テトラエニルカルがニルであるが、Ｒ’及びＲ“の双方
   ともが水素でない手を条件とし、そしてＢｌ／／は親水
   基を表わす） で表わされるリン脂貿管、好ましくは水溶液（該水溶液
   は、会費ならば超音波処理されている）中で、前記イン
   シュリン溶液に添加する事を特徴とする、前記方法〇