JPS585675B2 - 酸性ホスフアタ−ゼ分析用試薬 - Google Patents
酸性ホスフアタ−ゼ分析用試薬Info
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は酸性ホスファターゼの濃度を分析する試薬およ
び方法に関するものである。
び方法に関するものである。
本出願人は先行技術（特公昭５５−２７８００）におい
て、動物に見られる酵素α−アミラーゼおよび植物に見
られる酵素β−アミラーゼの濃度を分析する試薬および
方法を開示した。
て、動物に見られる酵素α−アミラーゼおよび植物に見
られる酵素β−アミラーゼの濃度を分析する試薬および
方法を開示した。
本発明により、この先行技術による発明の原理を利用し
、かつ試薬系に部分的修正を加えることによって、酸性
ホスファターゼの濃度を定量的に分析できることがわか
った。
、かつ試薬系に部分的修正を加えることによって、酸性
ホスファターゼの濃度を定量的に分析できることがわか
った。
この酸性ホスファターゼ（ａｃｉｄ ｐｈｏｓｐｈａｔ
ａｓｅ）は動物臓器、植物、細菌などに存在する酵素で
あって、例えば、血液中に存在してリン酸塩エステルか
らリン酸塩を遊離する際の触媒作用をする酵素である。
ａｓｅ）は動物臓器、植物、細菌などに存在する酵素で
あって、例えば、血液中に存在してリン酸塩エステルか
らリン酸塩を遊離する際の触媒作用をする酵素である。
酸性ホスファターゼを分析する従来の方法は、例えば酵
素法の場合では、分析試料に存在するグルコースを分析
する前に除去しなければならず、従って長時間を要した
り、また定性的な分析はできるが正確な定量をする方法
がなかった。
素法の場合では、分析試料に存在するグルコースを分析
する前に除去しなければならず、従って長時間を要した
り、また定性的な分析はできるが正確な定量をする方法
がなかった。
従って、本発明の目的は酸性ホスファターゼの濃度を分
析する前記先行技術の欠点を解消した新しい試薬を提供
することにある。
析する前記先行技術の欠点を解消した新しい試薬を提供
することにある。
本発明のもう１つの目的は迅速、簡単、信頼性があり、
かつ再現性のあるところの酸性ホスファターゼの濃度を
分析する試薬および方法を提供することにある。
かつ再現性のあるところの酸性ホスファターゼの濃度を
分析する試薬および方法を提供することにある。
これらの目的は、次の反応に基き水溶液中の酸性ホスフ
ァターゼの濃度を測定する動力学（または反応速度論）
的方法に基づいて達成される。
ァターゼの濃度を測定する動力学（または反応速度論）
的方法に基づいて達成される。
そして、望ましい実施態様では次の反応も含まれる：上
式および以後の明細書に示す略号は以下に説明する、ま
た水溶液中の酸性ホスファターゼの濃度はＮＡＤＨの生
成速度（または率）を測定することにより決定する：
略号 ｐｏ４＝ ：リン酸塩イオン ＭＰ ：マルトース・ホスホリラーゼ（ｍ
ａｌｔｏｓｅ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ） β−Ｄ−ＧＩＰ：β一Ｄ−グルコース−１ーリン酸塩 β一ＰＧＭ ：β一Ｄ−ホスホグルコムターゼ （ｐｈｏｓｐｈｏｇｌｕｃｏｍｔａｓｅ）Ｇ−１−６−
ｄｉＰ：Ｄ−グルコース−１・６−二リン酸塩 Ｇ−６−Ｐ：グルコース−６−リン酸塩 ６−ＰＧ：６−ホスホグルコネート （ｐｈｏｓｐｈｏｇｌｕｃｏｎａｔｅ） Ｇ６ＰＤＨ ：グルコース−６−リン酸塩脱水
素酵素 ６ＰＤＨ ：６−ホスホグルコネート・脱水
素酵素 （ｐｈｏｓｐｈｏｇｌｕｃｏｎａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ） ＮＡＤ ：β−ニコチンアミドーアデニン
・ジヌクレオチド （ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ一 ａｄｅｎｉｎｅ ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）ＮＡＤＨ
：ＮＡＤの還元型 酸性ホスファターゼ分析用試薬は反応（Ｉ）の出発原料
である有機リン酸塩および前記の５つの反応をさせるの
に必要な全ての成分（酸性ホスファターゼは除く）、即
ちマルトース、ＭＰ、β一ＰＧＭ、およびＧ６ＰＤＨを
含む。
式および以後の明細書に示す略号は以下に説明する、ま
た水溶液中の酸性ホスファターゼの濃度はＮＡＤＨの生
成速度（または率）を測定することにより決定する：
略号 ｐｏ４＝ ：リン酸塩イオン ＭＰ ：マルトース・ホスホリラーゼ（ｍ
ａｌｔｏｓｅ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ） β−Ｄ−ＧＩＰ：β一Ｄ−グルコース−１ーリン酸塩 β一ＰＧＭ ：β一Ｄ−ホスホグルコムターゼ （ｐｈｏｓｐｈｏｇｌｕｃｏｍｔａｓｅ）Ｇ−１−６−
ｄｉＰ：Ｄ−グルコース−１・６−二リン酸塩 Ｇ−６−Ｐ：グルコース−６−リン酸塩 ６−ＰＧ：６−ホスホグルコネート （ｐｈｏｓｐｈｏｇｌｕｃｏｎａｔｅ） Ｇ６ＰＤＨ ：グルコース−６−リン酸塩脱水
素酵素 ６ＰＤＨ ：６−ホスホグルコネート・脱水
素酵素 （ｐｈｏｓｐｈｏｇｌｕｃｏｎａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ） ＮＡＤ ：β−ニコチンアミドーアデニン
・ジヌクレオチド （ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ一 ａｄｅｎｉｎｅ ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）ＮＡＤＨ
：ＮＡＤの還元型 酸性ホスファターゼ分析用試薬は反応（Ｉ）の出発原料
である有機リン酸塩および前記の５つの反応をさせるの
に必要な全ての成分（酸性ホスファターゼは除く）、即
ちマルトース、ＭＰ、β一ＰＧＭ、およびＧ６ＰＤＨを
含む。
この試薬系は１つの混合体として提供されかつ使用でき
る、或は複数の試薬から成る１セットとして提供される
。
る、或は複数の試薬から成る１セットとして提供される
。
そして各試薬は１種類以上の成分を含み本発明の酸性ホ
スファターゼの分析に使用する時に全てを混合する。
スファターゼの分析に使用する時に全てを混合する。
前記試薬系の全ての成分は１つの混合体として安定であ
るし、複数よりも１つの試薬混合体の方が作業がし易い
ので該試薬系は１つの混合体として提供されることが望
ましい。
るし、複数よりも１つの試薬混合体の方が作業がし易い
ので該試薬系は１つの混合体として提供されることが望
ましい。
次に酸性ホスファターゼ分析用試薬を用いた場合の各反
応について具体的に説明する。
応について具体的に説明する。
上記（Ｉ）の反応において有機リン酸塩は酸性ホスファ
ターゼによって加水分解されてリン酸塩イオンになる。
ターゼによって加水分解されてリン酸塩イオンになる。
この反応に用いる有機リン酸塩はいずれも使用可能であ
るが、β−グリセロ・リン酸塩、フエニル・リン酸塩、
ｐ−ニトロフエニル・リン酸塩、α−ナフチル・リン酸
塩、アデノシン−３７−モノリン酸塩、チモールフタレ
イン・モノリン酸塩、およびフェノールフタレイン・モ
ノリン酸；塩が望ましく、α−ナフチル・リン酸塩が最
適である。
るが、β−グリセロ・リン酸塩、フエニル・リン酸塩、
ｐ−ニトロフエニル・リン酸塩、α−ナフチル・リン酸
塩、アデノシン−３７−モノリン酸塩、チモールフタレ
イン・モノリン酸塩、およびフェノールフタレイン・モ
ノリン酸；塩が望ましく、α−ナフチル・リン酸塩が最
適である。
本発明による酸性ホスファターゼの動力学的分析におい
ては、溶液に存在する酸性ホスファターゼの量が反応速
度を制限する必要がある。
ては、溶液に存在する酸性ホスファターゼの量が反応速
度を制限する必要がある。
従って、この試薬における他の成分が適量存在する必要
がある。
がある。
次に、酸性ホスファターゼ分析用試薬において生ずる第
２反応（■）について説明する。
２反応（■）について説明する。
第１反応（Ｉ）で生成したリン酸塩イオン（ＰＯ４＝）
は酵素触媒であるマルトース・ホスホリラーゼ（ＭＰ）
を使用してマルトースと反応してグリコールとβ一Ｄ−
グルコースー１−リン酸塩ヲ生成スる。
は酵素触媒であるマルトース・ホスホリラーゼ（ＭＰ）
を使用してマルトースと反応してグリコールとβ一Ｄ−
グルコースー１−リン酸塩ヲ生成スる。
この反応（９）に用いるマルトースは二糖類の１つで麦
芽糖ともいわれるものであって、麦芽中に多量に含まれ
る酵素β−アミラーゼによってデンプンが糖化される際
に生じるものである。
芽糖ともいわれるものであって、麦芽中に多量に含まれ
る酵素β−アミラーゼによってデンプンが糖化される際
に生じるものである。
また、デンプンなどグルコースから成る多糖類はα−ア
ミラーゼによってα−マルトースになる（このことに関
しては前記特公昭５５−２７８００を参照されたい）。
ミラーゼによってα−マルトースになる（このことに関
しては前記特公昭５５−２７８００を参照されたい）。
マルトース・ホスホリラーゼはマルトースと無機リン酸
塩との反応の触媒作用をする酵素である。
塩との反応の触媒作用をする酵素である。
この酵素は試薬１１当り国際単位（ＩＵ）で少なくとも
約２００、しかし約２０００が望ましい。
約２００、しかし約２０００が望ましい。
マルト−ス・ホスホリラーゼの望ましい原料は微生物で
ある乳酸短稈菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅ
ｖｉｓ（ＡＴＣＣ ８２８７））の菌株であり、これは
ベツクマン・インストルメント社で培養され、その酵素
は普通の方法で該菌株から抽出、精製する。
ある乳酸短稈菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅ
ｖｉｓ（ＡＴＣＣ ８２８７））の菌株であり、これは
ベツクマン・インストルメント社で培養され、その酵素
は普通の方法で該菌株から抽出、精製する。
この酵素の他の原料類としては髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅ
ｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）、ナイセリア・ペ
ルフラバ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｐｅｒｆｌａｖａ）の
菌株および他の乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ）菌
株がある。
ｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）、ナイセリア・ペ
ルフラバ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｐｅｒｆｌａｖａ）の
菌株および他の乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ）菌
株がある。
上記第３反応における酵素、β一ＰＧＭ（β−ホスホク
ルコムタ−セ）はβ一Ｄ−グルコース・リン酸塩のグル
コース−６−リン酸塩への転化に触媒作用をする。
ルコムタ−セ）はβ一Ｄ−グルコース・リン酸塩のグル
コース−６−リン酸塩への転化に触媒作用をする。
β一ＰＧＭは、反応（Ｉ）の酸性ホスファターゼが速度
限定成分のままであるように試薬１１当り少なくとも約
１００（ＩＵ）存在する必要がある。
限定成分のままであるように試薬１１当り少なくとも約
１００（ＩＵ）存在する必要がある。
人間の血清中の酸性ホスファターゼを分析する時には試
薬１１当り約５００（ＩＵ）のβ一ＰＧＭが望ましい。
薬１１当り約５００（ＩＵ）のβ一ＰＧＭが望ましい。
β一ＰＧＭの原料は乳酸短桿菌（ＡＴＣＣ ８２８７）
が望ましい。
が望ましい。
それは普通の方法で培養、精製される。
他の原料としては髄膜炎菌、ナイセリア・ペルフラバお
よびユーグレナ・グラシリス（Ｅｕｇｌｅｎａ ｇｒａ
ｃｉｌｉｓ）等がある。
よびユーグレナ・グラシリス（Ｅｕｇｌｅｎａ ｇｒａ
ｃｉｌｉｓ）等がある。
グリコース−１・６−ニリン酸塩（Ｇ−１・６−ｄｉＰ
）がβ一ＰＧＭの副因子として作用するために酵素系に
存在することが望ましい。
）がβ一ＰＧＭの副因子として作用するために酵素系に
存在することが望ましい。
β−ＰＧＭの活性のためにβ型のＧ−１・６−ｄｉＰを
要するが、この副因子のα型も作用すると考えられる。
要するが、この副因子のα型も作用すると考えられる。
Ｇ−１・６−ｄｉＰの濃度は試薬１１当り少な《とも約
ｏ．ｏ１ｇ、最適には約０．０７５ｇが望ましい。
ｏ．ｏ１ｇ、最適には約０．０７５ｇが望ましい。
また、Ｍｎ＋２、Ｍｇ＋ ２、Ｃｏ＋”、Ｚｎ＋２また
はＮｉ＋２からなる類から選択の２価の陽イオンがβ一
ＰＧＭの副因子として作用するために酵素系に存在する
ことが望ましい。
はＮｉ＋２からなる類から選択の２価の陽イオンがβ一
ＰＧＭの副因子として作用するために酵素系に存在する
ことが望ましい。
Ｚｎ＋２、やＮｉ＋２よりもＭｎ＋２、Ｍｇ±２または
ｃｏ＋２が望ましい。
ｃｏ＋２が望ましい。
これら陽イオンの濃度は試薬１１当り少なくとも約１ミ
リモル、しかも８．４ミリモルが望ましい。
リモル、しかも８．４ミリモルが望ましい。
上記第４反応はグルコース−６−リン酸塩がβ一ニコチ
ンアミドーアデニン・ジヌクレオチドおよびＧ６ＰＤＨ
と反応して６−ホスホグルコネートとＮＡＤＨを生成す
る。
ンアミドーアデニン・ジヌクレオチドおよびＧ６ＰＤＨ
と反応して６−ホスホグルコネートとＮＡＤＨを生成す
る。
ＮＡＤＯ量は、酸性ホスファターゼを速度限定成分に保
つのに十分な量でなくてはならない。
つのに十分な量でなくてはならない。
ＮＡＤの濃度は試薬１ｌ当り約１〜１０ミリモル最適に
は約２．５ミＩＪモルが望ましい。
は約２．５ミＩＪモルが望ましい。
β−ニコチンアミドーアデニン・ジヌクレオチド・リン
酸塩（ＮＡＤＰ）は酸性ホスファターゼ分析用試薬にお
けるＮＡＤと置換できる。
酸塩（ＮＡＤＰ）は酸性ホスファターゼ分析用試薬にお
けるＮＡＤと置換できる。
グルコース−６−リン酸塩・脱水素酵素（Ｃ−６−ＰＤ
Ｈ）もこの反応が速度限定反応でないように試薬１１当
り少なくとも約５００（ＩＵ）望ましくは５０００（Ｉ
Ｕ）の濃度で存在する必要がある。
Ｈ）もこの反応が速度限定反応でないように試薬１１当
り少なくとも約５００（ＩＵ）望ましくは５０００（Ｉ
Ｕ）の濃度で存在する必要がある。
Ｇ−６−ＰＤＨの原料は連鎖状硝子状球菌（Ｌｅｕｃｏ
ｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ（ＡＴＣＣ
１２２９１））が望ましいが、他の原料も可能である。
ｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ（ＡＴＣＣ
１２２９１））が望ましいが、他の原料も可能である。
酸性ホスファターゼ分析用試薬の望ましい実施態様にお
いては分析の一部として次の第５反応を用いることが望
ましい： この第５反応の目的は生成されるＮＡＤＨＯ量を増すこ
とによって分析の感度および精度を上げることである。
いては分析の一部として次の第５反応を用いることが望
ましい： この第５反応の目的は生成されるＮＡＤＨＯ量を増すこ
とによって分析の感度および精度を上げることである。
６−ＰＤＨの濃度は試薬１１当り少なくとも約２００（
ＩＵ）、そして最適には７００（ＩＵ）存在する必要が
ある。
ＩＵ）、そして最適には７００（ＩＵ）存在する必要が
ある。
この酵素の原料は連鎖状硝子状球菌（ＡＴＣＣ１２２９
１）が望ましく、これから酵素が通常の周知方法で培養
そして精製されるが、他の原料からも得ることができる
。
１）が望ましく、これから酵素が通常の周知方法で培養
そして精製されるが、他の原料からも得ることができる
。
酸性ホスファターゼ分析におけるｐＨは約４〜７以下、
最適には約５〜６に保つことが望ましい。
最適には約５〜６に保つことが望ましい。
本試薬はｐＨが４〜７以下でかつ試薬に適合した非リン
酸塩緩衝剤で緩衝化できる（詳細は後述する）。
酸塩緩衝剤で緩衝化できる（詳細は後述する）。
ＮＡＤＨの生成速度および該速度の酸性ホスファターゼ
濃度への転化は周知方法で行なう。
濃度への転化は周知方法で行なう。
例えば、分光光度測定法によって、温度約１５℃〜５０
℃、波長約３００〜３７０ｎｍでＮＡＤＨの生成による
光の吸収度変化を測定する。
℃、波長約３００〜３７０ｎｍでＮＡＤＨの生成による
光の吸収度変化を測定する。
約３４０ｎｍの波長、温度約３７℃が望ましい。
吸収度の変化率を波長３４０ｎｍ、温度３７℃で測定し
たら、次式を用いて計算する。
たら、次式を用いて計算する。
≦ΔＡ一吸収度の変化／分
Ｖｔ一全反応体積
Ｖｓ一酸性ホスファターゼを含む試料の体積６．２２一
波長３４０ｎｍにおけるＮＡＤＨの吸収係数（ミリモル
） 前述の酸性ホスファターゼの動力学的分析では酸性ホス
ファターゼの量が速度を制限する必要がある。
波長３４０ｎｍにおけるＮＡＤＨの吸収係数（ミリモル
） 前述の酸性ホスファターゼの動力学的分析では酸性ホス
ファターゼの量が速度を制限する必要がある。
有機リン酸塩は酸性ホスファターゼによって加水分解さ
れてリン酸塩イオンになる。
れてリン酸塩イオンになる。
次にリン酸塩イオンの遊離速度は、この発明の共役酵素
反応を利用して生成するＮＡＤＨ，ＮＡＤＰＨ、或はそ
の混合体の割合を測定して決定される。
反応を利用して生成するＮＡＤＨ，ＮＡＤＰＨ、或はそ
の混合体の割合を測定して決定される。
酸性ホスファターゼ分析におけるｐＨは約４〜７以下、
望まし《は約４５〜６、最適には約５〜６に保つことが
望ましい。
望まし《は約４５〜６、最適には約５〜６に保つことが
望ましい。
その試薬系は、ｐＨが４から７以下でかつ試薬に適合し
た非リン酸塩緩衝剤で緩衝化できる。
た非リン酸塩緩衝剤で緩衝化できる。
そのような非リン酸塩緩衝剤は、例えばクエン酸ナトリ
ウム、マレイン酸水素ナトリウム、およびカコジル酸ナ
トリウムがある（クエン酸ナトリウムは動的、酸性、ホ
スファターゼ試薬系に望ましい緩衝剤である）。
ウム、マレイン酸水素ナトリウム、およびカコジル酸ナ
トリウムがある（クエン酸ナトリウムは動的、酸性、ホ
スファターゼ試薬系に望ましい緩衝剤である）。
酸性ホスファターゼ試薬系を実施例１に示す。
実施例１
酸性ホスファターゼ用分析混合体の成分
以上、開示を目的として本発明の特定の望ましい実施例
を記載したが、発明の意図および範囲内で種々の変更並
びに改良がありうることを理解されたい。
を記載したが、発明の意図および範囲内で種々の変更並
びに改良がありうることを理解されたい。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 下記の（支）、（イ）、（ウ）、（エ）、（イ）、
（カ）および（キ）なる成分からなり、かつ該（ア）、
（イ）、（ウ）、（エ）、（イ）および（カ）なる成分
は、分析される酸性ホスファターゼが反応速度を限定す
るような量で存在することを特徴とする酸性ホスファタ
ーゼ分析用試薬。 （ア）マルトース、 （イ）β−グリセリン・リン酸塩、フェノール・リン酸
塩、ｐ−ニトロフェノール・リン酸塩、α一ナフチル・
リン酸塩、アデノシン−３′一一リン酸塩、チモールフ
タレイン・−リン酸塩、およびフェノールフタレイン・
−リン酸塩から成る群から選択の有機リン酸塩、 （ウ）マルトース・ホスホリラーゼ、 （エ）β−ニコチンアミドーアデニン・ジヌクレオチド
、β−ニコチンアミドーアデニン・ジヌクレオチド・リ
ン酸塩、およびそれらの混合体から成る群から選択の補
酵素、 （イ）グルコース−６−リン酸塩・脱水素酸素、（力）
β一Ｄ−ホスホグルコムターゼ、および（キ）約４．５
〜約６のｐＨを持つ、非リン酸塩含有の緩衝剤。 ２ 前記緩衝剤をクエン酸ナトリウム、マレイン酸水素
ナトリウム、およびカコジル酸ナトリウムから成る群か
ら選択するところの、特許請求の範囲第１項の試薬。 ３ 下記の（７）、（イ）、（ウ）、（エ）、（イ）、
（力）、（キ）および（ク）なる成分からなり、かつ該
（ア）、（イ）、（ウ）、（エ）、（イ）、（力）およ
び（キ）なる成分は、分析される酸性ホスファターゼが
反応速度を限定するような量で存在することを特徴とす
る酸性ホスファターゼ分析用試薬。 （７）マルトース、 （イ）β−グリセリン・リン酸塩、フェノール・リン酸
塩、ｐ−ニトロフェノール・リン酸塩、α−ナフチル・
リン酸塩、アデノシン−３′−−リン酸塩、チモールフ
タレイン・−リン酸塩、およびフェノールフタレイン・
−リン酸塩から成る群から選択の有機リン酸塩、 （ウ）マルトース・ホスホリラーゼ、 （ニ）β−ニコチンアミドーアデニン・ジヌクレオチド
、β−ニコチンアミドーアデニン・ジヌクレオチド・リ
ン酸塩、およびそれらの混合体から成る群から選択の補
酵素、 （イ）グルコース−６−リン酸塩・脱水素酵素、（イ）
β一Ｄ−ホスホグルコムターゼ、 （キ）（ｉ）グルコース１・６−ニリン酸塩、および（
１１）Ｍｎ＋２、Ｍ２＋２、ｃｏ＋２、Ｚｎ＋２、Ｎｉ
＋２およびそれらの混合体から成る群から選択の陽イオ
ンから成る群から選択したβ−Ｄ−ホスホグルコムター
ゼ用の少なくとも１つの副因子、および （２）約４．５〜約６のｐＨを持つ非リン酸塩含有の緩
衝剤。 ４ 前記陽イオンがＭ８＋２、Ｍｎ＋２、ｃｏ＋２およ
びそれらの混合体から選択され、かつ前記グルコース−
１・６−ニリン酸塩が本質的にβ型からなることを特徴
とする特許請求の範囲第３項記載の試薬。 ５ 下記の（ア）、（イ）、（ウ）、（エ）、（２）、
（力）、（キ）および（ク）から成分からなり、かつ該
（７）、（イ）、（ウ）、（エ）、（イ）、（力）およ
び（イ）なる成分は分析される酸性ホスファターゼが反
応速度を限定するような量で存在することを特徴とする
酸性ホスファターゼ分析用試薬。 （７）マルトース、 （イ）β−グリセリン・リン酸塩、フェノール・リン酸
塩、ｐ−ニトロフェノール・リン酸塩、α−ナフチル・
リン酸塩、アデノシン−３７一一リン酸塩、チモールフ
タレイン・−リン酸塩、およびフェノールフタレイン・
−リン酸塩から成る群から選択の有機リン酸塩、 （ウ）マルトース・ホスホリラーゼ、 （エ）β−ニコチンアミドーアデニン・ジヌクレオチド
、β−ニコチンアミドーアデニン・ジヌクレオチド・リ
ン酸塩、およびそれらの混合体から成る群から選択の補
酵素、 （支）グルコース−６−リン酸塩・脱水素酵素、（カ）
β一Ｄ−ホスホグルコムターゼ、 （イ）６−ホスホグルコネート・脱水素酵素、および （至）約４．５〜約６のｐＨを持つ非リン酸塩含有の緩
衝剤。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/657,976 US4036697A (en) | 1976-02-13 | 1976-02-13 | Kinetic assay for alpha-amylase |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5639798A JPS5639798A (en) | 1981-04-15 |
| JPS585675B2 true JPS585675B2 (ja) | 1983-02-01 |
Family
ID=24639392
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP55019297A Expired JPS585676B2 (ja) | 1976-02-13 | 1980-02-20 | 無機リン酸塩分析用試薬 |
| JP55019296A Expired JPS585675B2 (ja) | 1976-02-13 | 1980-02-20 | 酸性ホスフアタ−ゼ分析用試薬 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP55019297A Expired JPS585676B2 (ja) | 1976-02-13 | 1980-02-20 | 無機リン酸塩分析用試薬 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4036697A (ja) |
| JP (2) | JPS585676B2 (ja) |
Cited By (2)
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| DE2748036C2 (de) * | 1977-10-26 | 1986-08-21 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur Gewinnung von Maltose-phosphorylase oder/und β-Phosphoglucose-mutase und Verwendung derselben |
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Family Cites Families (1)
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-
1976
- 1976-02-13 US US05/657,976 patent/US4036697A/en not_active Expired - Lifetime
-
1980
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- 1980-02-20 JP JP55019296A patent/JPS585675B2/ja not_active Expired
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6346081U (ja) * | 1986-09-11 | 1988-03-28 | ||
| JPH07665A (ja) * | 1993-06-21 | 1995-01-06 | Hirose Mfg Co Ltd | ミシンの部品 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5639799A (en) | 1981-04-15 |
| JPS585676B2 (ja) | 1983-02-01 |
| JPS5639798A (en) | 1981-04-15 |
| US4036697A (en) | 1977-07-19 |
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