JPS58187193A - 一級アルコ−ルからのアルデヒドの製造法 - Google Patents
一級アルコ−ルからのアルデヒドの製造法Info
- Publication number
- JPS58187193A JPS58187193A JP5345283A JP5345283A JPS58187193A JP S58187193 A JPS58187193 A JP S58187193A JP 5345283 A JP5345283 A JP 5345283A JP 5345283 A JP5345283 A JP 5345283A JP S58187193 A JPS58187193 A JP S58187193A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- alcohol
- chloro
- oxidase
- reaction
- oxidase activity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/24—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carbonyl group
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/04—Oxygen as only ring hetero atoms containing a five-membered hetero ring, e.g. griseofulvin, vitamin C
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
- C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/02—Monosaccharides
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
本発明は、概括的に、−級アルコールから、有益な商品
を製造するための、酵素法に関連する。 より詳細には、反応を効果的に行うため、−素を用いて
、−級アルコールからアルデヒドを生産するための改良
法に関連する。 アルデヒド９の工業的実用性は周知のとおりである。ア
ルデヒドは溶媒、樹脂、染料、重合体の製造中筒体とし
て用いられ、香料及び調味料産業においても使用される
。 今日、アルデヒド９は、以下の式に示す如く、特定の、
良く知られた酸化触媒の存在下、−級アルコールを脱水
素反応せしめる方法を含む数種の方法で製造されている
。 しかしながら、これら触媒を用いる場合、酸化程度が進
んで、対応する酸（Ｒ−Ｃｏ２Ｈ）に変換されるのが一
般の問題点である（米国特許ム４．２２０，８０３．
Ｍａｒｃｉｎｋｏｗｓｋｙ等、１９８０）。又、発し
、−級アルコールの酸化より優先うる揚合さえある（米
国特許Ａ ４，２１８，４０１ 、 ＶＪｙｆｆＩｏｒ
ｅ。 １９８０ ）。又、イ７ジルフルコ−＃（Ｒ：Ｃ６Ｈ３
）は脱水素灰、応を行うのが国難で、容易にエーテルが
形成される（米国特許Ａ４，２２４，２５４ 。 ５ａｕｅｒ等、１９８０）。更に、これら酸化触媒は高
温が必要である（１５０＠〜５００Ｇ）。 従来の触媒脱水木法に比べて、本発明の方法は、生成さ
れるアルデヒドのｌＴｉ１１度に関して、全体として良
好な結果か得られる。又、本発明の方法は、その実施に
おいて、常温で行う事が出来、結果として熱エネルギー
の節約になる。 アルデヒドは又、次式に示す如（、特定の既知オキシダ
ーゼ酵ぷの存在下、−級アルコールを脱水素反応せしめ
て製造する事が出来る。 しかしながら、これら［２を用いる場合、例えば、ＮＡ
ＤＨ及び／又はＮＡＤＰＨの如き高価なコファクターが
消費される。又、二級アルコールの酸化が併発しくケト
ンを生成する）、−級アルコールの酸化よりも優先する
場合さえある（米国特許ム４．２４１，１８４．Ｈｏｕ
等、１９８０ ）。更に、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）が嗣
生し、この副生成物は、酸化＃素のＨ２０□不活性化を
防ぐために消費もしくは分解せねばならない（Ｃｏｕａ
ｅｒｃ等、 Ａｇｒｉｃ。 町り、ｑ畳４４．２２７９（１９８０））。 従来の酵素による脱水素法に比べ、本発明の方法は、萬
価なコファクターを必要としない。その代り、本発明の
方法は、希釈Ｈ２Ｏ２（精製する必要がない）を用いる
ものである。Ｈ２Ｏ２は直接加えるか又は、酵素反応あ
るいは、化学反応で、そのまま（ｉｎ ５ｉｔｕ ）、
発生せしめる事が出来る。 本方法により、鍛縮、純過酸化水素の価格に比べＨ２０
□の価格が低くなり、その使用上の安全性を高め、更に
、酵素の寿命を延は−１゜ したがって、本発明の目的は、−級アルコールからアル
デヒドを製造する方法を提供する事にある。 又、本発明の目的は、二級アルコールの存在下で一級ア
ルコールからアルデヒド°を製造する事である。 更に一級アルコールからアルデヒドを製造するための低
価格の方法を提供する墨も、本発明の目的である。 他の目的は当業者において、以下の記述から明らかにな
ろう。 ごく概括的には、本発明の方法によれば、反応容器中で
一級アルコール及び過酸化水素を混合し、次にクロロパ
ーオキシダーゼを容器中に入れ、十分な時間、上記混合
物と接触せしめて、−級アルコールを、目的とするアル
デヒドに変換する事により、−級アルコールからアルデ
ヒド９を製造する事が出来る。 本発明は、カルダリオマイセス ツマ！（Ｃａｌｄａｒ
ｉｏｍｙｃｅｓ ｆｕｍａｇｏ ） （ＮＲＲＬ １
５２７２ ）から得られるクロロ・ぞ−オキシダーゼは
、％定の一級アルコールをアルデヒドに変換する能力が
あるという発見に基づ（。良好な一級アルコールは、ア
リル（ｃ−ｃ−ａＨ２ｏＨ）、プロノぞルギル（ｃ ＝
ｃ−ａＨ２ｏｎ）及びにンジル（φ−ＣＨ２０）１）
の−級アルコールである。 過去、クロロパーオキシダーゼは、次式に示す如くエタ
ノール（飽和−級アルコール）をアセトアルデヒド（ア
ルデヒド）に酸化する能力がある事が知られていた： （Ｔｈｏｍａｓ等、 Ｊ、Ｂｉｏｊ、Ｃｈｅｍ、 ２４
５． ３１２９及び３１３５（１９７０））。しカルな
がら今まで、他の一級アルコールがクロロノく一オキシ
ダーゼとの反応に適当であるとか、又は良好であると（
・５事が明らかにされなかった。例えば、カタラーゼも
クロロノ（−オキシダーゼもＨ２０□の存在下で一級ア
ルコールを酸化せしめる事が出来るが、本発明の良好な
一級アルコールの反応は、これら二種の酵素から期待出
来るものに対し完全に正反対である。 例えば、カタラーゼは、アリルアルコール（ＣＨ２＝Ｃ
１（−ＯＨ２０Ｈ）よりもエタノール（ＯＨ３−ＯＨ２
０Ｈ）に対して反応性があり、本発明で記述の如くクロ
ロノ−オキシダーゼはエタノールよりもむしろアリルア
ルコールに対して反応性力ｔある。それ故、クロロパー
オキシダーゼがアリル、プロノ署ルギル、ｋ／：）ルの
７級アルコールに対して良好である事は明らかでなかっ
た。又二級又は三級アルコールでなく、特定の一級アル
コールのみｔＪｔクロロノセーオキシダーゼによつ
を製造するための、酵素法に関連する。 より詳細には、反応を効果的に行うため、−素を用いて
、−級アルコールからアルデヒドを生産するための改良
法に関連する。 アルデヒド９の工業的実用性は周知のとおりである。ア
ルデヒドは溶媒、樹脂、染料、重合体の製造中筒体とし
て用いられ、香料及び調味料産業においても使用される
。 今日、アルデヒド９は、以下の式に示す如く、特定の、
良く知られた酸化触媒の存在下、−級アルコールを脱水
素反応せしめる方法を含む数種の方法で製造されている
。 しかしながら、これら触媒を用いる場合、酸化程度が進
んで、対応する酸（Ｒ−Ｃｏ２Ｈ）に変換されるのが一
般の問題点である（米国特許ム４．２２０，８０３．
Ｍａｒｃｉｎｋｏｗｓｋｙ等、１９８０）。又、発し
、−級アルコールの酸化より優先うる揚合さえある（米
国特許Ａ ４，２１８，４０１ 、 ＶＪｙｆｆＩｏｒ
ｅ。 １９８０ ）。又、イ７ジルフルコ−＃（Ｒ：Ｃ６Ｈ３
）は脱水素灰、応を行うのが国難で、容易にエーテルが
形成される（米国特許Ａ４，２２４，２５４ 。 ５ａｕｅｒ等、１９８０）。更に、これら酸化触媒は高
温が必要である（１５０＠〜５００Ｇ）。 従来の触媒脱水木法に比べて、本発明の方法は、生成さ
れるアルデヒドのｌＴｉ１１度に関して、全体として良
好な結果か得られる。又、本発明の方法は、その実施に
おいて、常温で行う事が出来、結果として熱エネルギー
の節約になる。 アルデヒドは又、次式に示す如（、特定の既知オキシダ
ーゼ酵ぷの存在下、−級アルコールを脱水素反応せしめ
て製造する事が出来る。 しかしながら、これら［２を用いる場合、例えば、ＮＡ
ＤＨ及び／又はＮＡＤＰＨの如き高価なコファクターが
消費される。又、二級アルコールの酸化が併発しくケト
ンを生成する）、−級アルコールの酸化よりも優先する
場合さえある（米国特許ム４．２４１，１８４．Ｈｏｕ
等、１９８０ ）。更に、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）が嗣
生し、この副生成物は、酸化＃素のＨ２０□不活性化を
防ぐために消費もしくは分解せねばならない（Ｃｏｕａ
ｅｒｃ等、 Ａｇｒｉｃ。 町り、ｑ畳４４．２２７９（１９８０））。 従来の酵素による脱水素法に比べ、本発明の方法は、萬
価なコファクターを必要としない。その代り、本発明の
方法は、希釈Ｈ２Ｏ２（精製する必要がない）を用いる
ものである。Ｈ２Ｏ２は直接加えるか又は、酵素反応あ
るいは、化学反応で、そのまま（ｉｎ ５ｉｔｕ ）、
発生せしめる事が出来る。 本方法により、鍛縮、純過酸化水素の価格に比べＨ２０
□の価格が低くなり、その使用上の安全性を高め、更に
、酵素の寿命を延は−１゜ したがって、本発明の目的は、−級アルコールからアル
デヒドを製造する方法を提供する事にある。 又、本発明の目的は、二級アルコールの存在下で一級ア
ルコールからアルデヒド°を製造する事である。 更に一級アルコールからアルデヒドを製造するための低
価格の方法を提供する墨も、本発明の目的である。 他の目的は当業者において、以下の記述から明らかにな
ろう。 ごく概括的には、本発明の方法によれば、反応容器中で
一級アルコール及び過酸化水素を混合し、次にクロロパ
ーオキシダーゼを容器中に入れ、十分な時間、上記混合
物と接触せしめて、−級アルコールを、目的とするアル
デヒドに変換する事により、−級アルコールからアルデ
ヒド９を製造する事が出来る。 本発明は、カルダリオマイセス ツマ！（Ｃａｌｄａｒ
ｉｏｍｙｃｅｓ ｆｕｍａｇｏ ） （ＮＲＲＬ １
５２７２ ）から得られるクロロ・ぞ−オキシダーゼは
、％定の一級アルコールをアルデヒドに変換する能力が
あるという発見に基づ（。良好な一級アルコールは、ア
リル（ｃ−ｃ−ａＨ２ｏＨ）、プロノぞルギル（ｃ ＝
ｃ−ａＨ２ｏｎ）及びにンジル（φ−ＣＨ２０）１）
の−級アルコールである。 過去、クロロパーオキシダーゼは、次式に示す如くエタ
ノール（飽和−級アルコール）をアセトアルデヒド（ア
ルデヒド）に酸化する能力がある事が知られていた： （Ｔｈｏｍａｓ等、 Ｊ、Ｂｉｏｊ、Ｃｈｅｍ、 ２４
５． ３１２９及び３１３５（１９７０））。しカルな
がら今まで、他の一級アルコールがクロロノく一オキシ
ダーゼとの反応に適当であるとか、又は良好であると（
・５事が明らかにされなかった。例えば、カタラーゼも
クロロノ（−オキシダーゼもＨ２０□の存在下で一級ア
ルコールを酸化せしめる事が出来るが、本発明の良好な
一級アルコールの反応は、これら二種の酵素から期待出
来るものに対し完全に正反対である。 例えば、カタラーゼは、アリルアルコール（ＣＨ２＝Ｃ
１（−ＯＨ２０Ｈ）よりもエタノール（ＯＨ３−ＯＨ２
０Ｈ）に対して反応性があり、本発明で記述の如くクロ
ロノ−オキシダーゼはエタノールよりもむしろアリルア
ルコールに対して反応性力ｔある。それ故、クロロパー
オキシダーゼがアリル、プロノ署ルギル、ｋ／：）ルの
７級アルコールに対して良好である事は明らかでなかっ
た。又二級又は三級アルコールでなく、特定の一級アル
コールのみｔＪｔクロロノセーオキシダーゼによつ
【酸
化される事も今まで明らかにされなかった。
、 、本発明に関連して用いられる「−級
アルコー？−ル」は、次の構造式： Ｒ−ＯＨ２０１（
（Ｒ＆−！、炭イし水素）で表わされる。代表的な一級
アルコールＲ−ＯＨ２０Ｈを次表に示す。 一級アルコール Ｒ アリルアルコール ＯＨｗａＨ クロチルアルコール ＣＨ３ＣＨ＝ＣＨ６−プテン
ー１−オール ａＨ２＝ｃｉ−ｔａＨ２シンナミルアル
コール φ０Ｈ−Ｃ；Ｈ２−ブテンー１．４−ジトル
ＨＯＣＨ２ＣＨ−ＣＨプロ／ぞルギルアルコール
ＧＨ三Ｇ２−ブチン−１，４−ジオール ＨＯ
ＣＨ２Ｃ三Ｃインジルアルコール φ フェネチルアルコール φＣＨ２本発明はハロパ
ーオキシダーゼ＃索を用いて構成される。微生物カルダ
リオマイセ子 乙二！（Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ
ｆｕｍａｇｏ）（ＮＲＲＬ １５２７２）から得られ
るクロロ、ｅ−オキシダーゼは本発明の方法に使用出来
るハロパーオキシダーゼである。礫類より得られるゾロ
モノ−オキシダーゼ、ミルクより得られるラフトノモー
オキシダーゼおよびセイヨウワサビよ？得られるセイヨ
ウワサビパーオキシダーゼは本発明の方法に使用出来な
い。 微生物力ルダリオマイセス フマゴ （Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ ｆｕｍａｇｏ）（ＮＲ
ＲＬ １５２７２）又はカルダリオーｑイ＊ｘ ７
−ｒｉ（ＧａＬａａｒｉｏｍｙｃｅａｆｕｍａｇｏ）（
ＮＲＲＬ １５２７２）から得られるクロロノーオキ
シダーゼと類似のクロロ／＜−オキシダーゼ活性を有す
る微生物変異株はツア堅ツクート０ツクス（Ｇｚａｐｅ
ｋ−Ｄｏｚ）培地中、室温で３〜１０日間常法に従い静
置培養、振と５培養、深部培養を行って増殖スる。酵素
、クロロパーオキシダーゼは、静置培養で得られた微生
物の菌体のホモゲネート又は、静置培養、振と５培養で
得られた微生物の培養ｆ液から製する。クロロノーオキ
シダーゼの製造の詳細は、次の文献及び特許に記載され
ている。 （１）米国特許４４．２４７．６４１ 、 Ｎｉｅｄｌ
ｅｍａｎ等に対し１９８１年１月２７日発行； （２） Ｍｏｒｒｉｓ等、 Ｊ、ＢｉｏＪ、Ｃｈｅｍ
、 ２４１．１７６３（１９６６）。 （３） Ｃｏｏｎｅｙ等、 Ｂｉｏｔｅｃｈ、 Ｂｉ
ｏｅｎｇ、 １６．１０４５（１９７４）。 酵素は、固定形を用いる事が出来る。酵素固定化法は当
業者にとって一般的であり、例えば、酵素溶液又は酵素
を含む１細胞の懸濁液を広範囲の有機又は無機担体と反
応せしめる。これらの担体は、ポリアクリルアミド、エ
チレン−マレイン酸共重合体、メタアクリル基部のポリ
マー、ポリ４プチド、スチレン基部のポリマー、アガロ
ース、セルローズ、デキストリン、多孔性がラスビーズ
、及び水酸化アルミニウム又はチタニウムである。 この形での酵素は安定性が補強され、寿命と有効性が嬌
長し回収率が良い。固定酵素を用いた反応は、管中又は
反応タンク中で行う事が出来る。 本反応混合物中には、酵素の他に、酸化剤が必要である
。良好な酸化剤、過敏化水素を混合物にあるいは、過酸
化水素発生酵素系を用いて、そのまま反応系内で発生さ
せる。このような酵素系は、当業者間では良く知られて
おり、例えば、Ｄ−グルコース存在下でのグルコース−
１−オキシダーゼ：Ｄ−グルコース存在下でのピラノー
ス−２−オキシダーゼ；Ｄ及びＬ−メチオニン存在下で
のＤ−及びＬ−アミノ酸オキシダーゼ：ヒスタミン存在
下でのジアミンオキシダーゼである。過酸化水素発生系
はハロ、ｅ−オキシダーゼ酵素と同様に、非固定形又は
固定形で存在せしめる。過酸化水素は例えばアンスラキ
ノン酸化工程の如き化学反応によっても発生出来る。 存在せしめる過酸化水素は、−級アルコールに対し、モ
ル比で約α５：１から５０＝１の範囲が良好であり、最
も好適なモル比は約１：１又はそれ以下である。好適な
モル比は反応中の過酸化水素の平均存在比を表わしてい
る。一般に正確なモル比は反応中に変化し、特定の時間
においては、上述の範囲を越えるか、又は、その範囲を
下まわる。 本反応はｐＨが約２．８〜７．０の範囲で行う。反応の
ｐＨは緩衡剤を用いて、好適な範囲にとどめるのが良い
。好適な緩衝剤は、リン酸ナトリウム又はカリウム、ク
エン酸ナトリウム又はカリウム、酢酸ナトリウム又はカ
リウムである。ｐＨの制御及び調節は、緩衝化の他の適
当な方法を用いる事が出来る。 本反応は水溶媒中で行う。本方法によりアルデヒド０に
変換出来る一級アルコールが、水溶媒に、実質的に不溶
の場合でも、反応を行うための十分な基質嬉解性が得ら
れる混合又は他の懸濁方法１１Ｃより反応を行う事が出
来る。 反応温度は一約１５Ｃ〜５０ｃの範囲で反応を行うが、
約２０ｉＣ〜３０ｃが好適である。 前述の如く、反応混合物の組成物、すなわち、−ｉｌ
ｆ ／ｌ／ コー ル、クロロ・ｅ−オキシダーゼ、４
酸化水素、緩衝剤を水中で単に混合し、例えば約６０秒
〜１時間攪拌し、アルデヒド９を得る。 −級アルコールの反応は次式で表わされる。 本発明による反応で得られる生成物はガスクロマトグラ
フィー−マススイクトロメトリ−（ＧｃＭｓ）で同定、
定置する。反応混合物１０μｌを、テｔ、ｙクベ（Ｔｅ
ｎａｘ）−Ｇ Ｏ（８０／ １００メツシユ）を充てん
した、６の流速はヘリウム６０鴫吻に調節する。カラム
温度は、定温を用い、（各実施例に記述する温度）注入
温度を２４０Ｃとし、ジェットセ・ぞレータ−は２４０
Ｃにする。マススはクトロメーターは７０ ｅＶ、
電子衝撃イオン化法で行う。 次の実施例は本発明を例示するものであり本発明の態様
を限定するものではない。 実施例 １ 本実施例は一級アルコールからアルデヒドを製造する方
法を例示する。 ｐＨ３，０及びｐＨ７，０でのリン酸緩衝液（１０ＩＬ
Ｉ、Ｑ、５Ｍ）、過酸化水素（４，ＩＩｖ、Ｓｕｌ液１
６７戸ｌ；最終的に１２ｍＭ）及びはンジルアルコール
（１ａｗ９；最終的に１２ｍＭ；φＣＨ２０Ｈ；Ａｌｄ
ｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａ１社、 Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ
、 ＷＬ より購入）を２５１１７のＰｙｒｅｘフラス
コ中、室温、常圧でｉｔする。次Ｋ、ハロパーオキシグ
ーゼ、クロロパーオキシダーゼ（Ｑ、１ｉｕ）を加える
。この後１５分間反応を行う。 クロロパーオキシダーゼは、以下の如く製造す・る。 カルダリオマイセス フマゴ（Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃ
ｅｓ些翌駐）（ＮＲＲＬ １５２７２）の菌体をポテ
ト寒天培地で培養する。薄切りボテ）（２００，１を蒸
留水（５ＱＱｄ）中で４０分間煮沸し、１遇する。 蒸留水（５ＱＱａｊ）中に溶かしたグルコース（２１ｇ
）及び寒天末（２ＯＮ）の溶液を上述１過液に加える。 ｐＨを６．８にし、蒸留水を加えて全量１リツトルにす
る。この培地を１２１Ｃで１５分間滅菌する。 上述の方法で作製したポテト寒天培地に微生物を接種し
、室温で１週間培養する。この微生物な大豆−グルコー
ス培地（５Ｑ＋ｗｊ）４ｃ接種する。１リツトルの蒸留
水に、数取過程の大豆粉末（６０Ｉ）、グルコース（３
０ｊｌ）、ＣａＧＯｓ （７Ｉｌ）を加えて大豆−グル
コース培地を調製する。培地を１２１Ｃで６０分間滅菌
し、冷却後微生物を接種する。 ツク−ドックス培地１００−を入れ、上述培養物５−を
入れる。ツアはツクート９ツクス（Ｃｚａｐｅｋ−Ｄｏ
ｘ ）培地は、蒸留水１リツトルにＮ ａ ＮＯａ （
３ｊ’ ）、ＫＨ２ＰＯ４（１１１）、ＫＣＩ（α５．
ｆ）、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０（Ｑ、５Ｍ）、ＦｅＳＯ４
−７Ｈ２０（１０ｍ９）、グルコース（４０ｇ）を加え
て１２１Ｃで２０分間滅菌する。 室温で５〜７日間靜置装養する。成長した黒色菌体を取
り、蒸留水で洗浄し、後の使用のため、フリーザー中に
一１０Ｃでプラスチック容器に入れて保存する。 ハロゲン化酵素は、上述の如く調製した菌体保存物６コ
を、６０ｇの酸洗浄砂、６０３１１７の蒸留水とバーチ
ス（Ｖｉｒｔｉａ） ４５ホモゲナイザー中で粉砕して
製造する。ホモゲネートを冷却遠心分離し、ハｐゲン化
１１１１１素、クロロパーオキシダーゼの源として用い
る。 最終的なり０ロバ−オキシダーゼ上清を室温でワットマ
ン（Ｗｈａｔｍａｎ ）１１１紙で１遇する。１液ヲロ
ータリーフイルムエバポレーターにて減圧下３５Ｃ以下
で１０倍に濃縮する。濃縮液を水浴中ＯＣに冷却し、あ
らかじめ冷却した（ＤＣ）エタノールを加えて４５ ’
１ （ｖ／ｖ ）エタノール濃度にする。混合物を１５
分間はげしく攪拌し、次に、ツルパル（５ｏｒｖａｌ
） ＲＣ−５ｘ−パースシートｉ（５ｕｐｅｒｓｐｅｅ
ｄ）を用い、５５−３４０−タＩｃて、−１０Ｃで１５
分間遠心分離（１５，０００，９，）する。黒色沈澱を
除き、上清に、あらかじめ冷却したエタノールを６５％
エタノール（ｖ／ｖ）になるまでＯＣで加える。混合物
をＤＣで６０分間ゆっくり攪拌する。これを上述の如く
遠心分離する。 上清を除き、クロローゼ−オキシダーゼ活性を有する沈
澱を［１０５Ｍリン酸カリウム（ｐＨ７）１社中に溶か
し、この酵素溶液を一２ＤＣで保存する。 生成物を、ガスクロマトグラフィー−マススペクトルメ
） ｙ −（ＧＣＭＳ ）で同定及び定量する。 反応混合物１０μ遭をテナックス（Ｔｅｎａｘ） −Ｇ
Ｏ（８０／１００メツシユ）を充てんした６フイート×
４ｎのコイル状ガラスカラムを装備したフイ二ガン（Ｆ
ｉｎｎｉｇａｎ） ４０２１ＧＣＭＳに注入する。カラ
ム中の流速はヘリウム６０紅／分に調節しジェットセパ
レーターは２３０ｔｌｌ’にする。マススはクトロメー
ターは７０θＶ、電子衝撃イオン化法で行う。 生成物のＧＯの保持時間は８分て、マススペクトルはベ
ンズアルデヒド０の性質を示す。すなわち分子イオン１
０６、主フラグメントマスイオン１０５（分子イオンよ
りＨ脱離）、同じ＜７７（φ１イオン）。本生成物は標
品はンズアルデヒド（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａ
１社より購入）のＧＯ保持時間及びマススはクトルト一
致。 以下に得られた生成物の収量を示す。 実施例 ２ 本実施例はアリル、プロノセルギル、インジルの一級ア
ルコールが本発明の方法に用いる好適な一級アルコール
である事を示す。 緩衝液ｐＨ５，０にする以外、実施例１の方法に従う。 以下の一級アルコールを用い（最終的に１２ｍＭ；全て
、Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ 社より購入）以
下の結果を得る。 一級アルコール基質 ０Ｈ３０Ｈ，ＯＨエタノール ０Ｈ１ｑＨ＝ｃＨＧＨ２０Ｈクロチルアルコールφ０Ｈ
＝ＣＨＣＨＯＨシンナミルアルコール０Ｈ，＝ＣＨＧＨ
，０Ｈ２０Ｈ３−ブテン−１−オールＨＯＣＨＣＨ＝Ｃ
ＨＧＨ２０Ｈ２−ブテン−１，４−：）オールＨＣ？”
ＣＯＨＯＨプロパルギルアルコールＨＯＣＨ２Ｃ三〇Ｇ
Ｈ，ＯＨ２、−ブチン−１，４−：）オールφ０Ｈ２０
Ｈ，ＯＨ２−フェネタノールこれらの生成物はＡｌｄｒ
ｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社より購入アルデヒド生成物
収量□□＝：＝＝□□□□□ ＯＨＧＨＯアセトアルデヒド Ｑ、１
１１９０Ｈ１ＣＨ＝ＧＨＣＨＯクロトンアルデヒド
２．３φＣＨ＝ＣＨＣＨＯシンナムアルデ
ヒド ５．２ＧＨ＝（１：ＨＣＨ２ＣＨＯ
３−ブテン−１−アール ［１，６ＨＯＣ
Ｈ２ＧＨ−Ｃ，ＨＣ，ＨＯ４−ヒト９０キシ−２−ブテ
ン−１−アール ６．６Ｈα＝ｃｃＨｏ プ
ロｌセルギルアルデヒ）” ｔ３ＨＯＧＨ
，Ｃ三ＧＧＨＯ４−ヒドロキシ−２−ブチン−１−アー
ル ｔ５φＯＨＣＨＯフェニルアセトアルデヒド
ｚ２、した標品とＧＯ保持時間及びマススイクト
ルで一致した。 実施例 ３ 本実施例は、本発明におけ一過酸化水素の半連続添加法
を示す。 ４．１ηの過酸化水素を４回（各々６％溶液を１６７μ
ｌ°加える）１５分間毎に加える事以外実施例１の方法
を用いる。アリルアルコール（７呼。 １２ ｍＭ、 ０Ｈ２＝ＧＨＣＨ，ＯＨ，Ａｌｄｒｉｃ
ｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社より購入）を−級アルコールと
して加える。 生成物のＧＯ保持時間は、カラム温度１６０Ｃ１定温で
２．９分であり、アクロレインのマススはクトルパター
ンである、分子マスイオン５６：主フラグメントマスイ
オン５５（分子イオンよりＨの脱離）を示す。本生成物
は標品のアクロレイン（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃ
ａｌ 社より購入）とＧＯ保持時間、マススはクトル共
に一致する。 以下に生成物の収量を示す。 添加 Ｃ）１２−ｃＨ−ＧＨＱ ２．２１１＆ ４．１ｙ
５．９ｑ ＆２１１１１＆実施例 ４ 本実施例においては、二級アルコールの存在下で一級ア
ルコールの選択的酸化を例示する。二種のアルコール基
質ニー級アルコールは２−フェネタノール（φＣＨ２Ｃ
Ｈ２０Ｈ；１２ｍＭ）； 二級アルコール、１−フェ
ネタノール（φ０Ｈ（ＯＨ）ＯＨ８；１２ ｍ Ｍ 、
Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社より購入）を反
応混合物中に加える事以外、実施例２の方法に従う。 −級アルコール（２−７エネタノール）０）−”４化さ
れる。 ゛以下に生成物の収量を示す。 基 質 生成物 収量 φＣＨ２ＣＨ２０Ｈφ０Ｈ２ＧＨＱ ２．２〜
実施例 ５ 本実施例においては、反応系中で、そのまま過酸化水素
をゆっくりと酵素的に発生せしめる方法を示す。 以下に示す方法以外は実施例１の方法を用いる。 すなわち １）リン酸カリウム緩衝液をｐＨ６，０に調節する。 ２）反応系中でそのまま過酸化水素を酵素的に発生せし
めるー。 反応混合物に、β−Ｄ−グルコース（１０ｍＭ）及び、
グルコース−１−オキシダーゼ（Ｑ、ｉｄ；シグマケミ
カル（Ｓｉｇｎｍ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ）社より購入、
カタログ番号Ｇ−６５００）あるいはピラノース−２−
オキシダーゼ（Ｑ、１ｍ；米国特許４．２４６，３４７
に記載の方法で製造する）を加える。反応はオキシダー
ゼ酵素を添加、６０分稜に終了する。 以下に生成物の収量を示す。 φＣＨＯ８，０１Ｊ９６．１■ グルコース−１−オキシダーゼを用いた場合グルコース
の酸化生成物はＤ−グルコノ−δ−ラクトンでありピラ
ノース−２−オキシダーゼの場合はＤ−グルコソンであ
る。 以上、本発明は酵素反応により、−級アルコールからア
ルデヒドを製造する方法を示している事が理解されよう
。本方法で用いた酵素は微生物在ルダリオマイセス 乙
−ｑ −／ （Ｇａｌｄａｒｉｏｎ＋ｙｃｅｓ ｆ’ｕ
ｍａｇｏ）（ＮＲＲＬ １５２７２）から得られるク
ロロパーオキシダーゼである。木酢３（’−ｉ遊離又は
固定形で用いる事が出来る。アルデヒドを製造するのに
用いる一級アルコールはアリル、フロパルギル及びベン
ジルの一級アルコールが好適である。 既知の酵素的脱水素法と異なり、本発明の方法は、高価
な補因子を必要としない。加うるに、本方法は常温で実
施出来、結果として従来の方法に比べ、主要な熱エネル
ギーの節約になる。本方法は又、二級アルコール存在下
での一級アルコールの選択的酸化が可能である。 ここに記述して示した方法に加え、本発明において種々
、変更出来る事は前述の記載から、当業者にとつく明ら
かになろう。このような変更は特許請求の範囲内である
。 ４，２１８，４０１ Ｃ，Ｅ、 Ｗｙｍｏｒｅ
＆／８０４．２２０，８０ Ｓ Ａ、
Ｅ、 ＭａｒｃｉｎｋａＷＢｋｙ、 Ｊ、 Ｐ、 Ｈｅ
ｎｒｙ ９／８０４．２２４，２５４ Ｗ、５ａｕｅ
ｒ、 Ｗ、Ｆｌｉｅｇｅ、 ＣＤｕｄｅｋ、 ９／
８ＯＮ、Ｐｅｔｒｉ ４．２４１．１８４ ＣＴ、 Ｈａｕ、 Ｒ，Ｎ、 Ｐ
ａｔｅＬん１．Ｌａ５ｋｉｎ ＩＺ／１０４．２４６，
３４７ Ｓ、Ｌ、Ｎｅｉｄｌｅｍａｎ、 Ｗ、Ｆ、Ａｍ
ｕｎ、 １／８１Ｊ、 Ｇｅｉｇｅｒｔ ４．２４７，６４１ Ｓ、Ｌ、Ｎｅｌｄｌｅｍａｎｅ
Ｗ、Ｆ、Ａｍｏｎ、 １，４３１Ｊ、 Ｇｅｉｇ
ｅｒｔ その他 １、 Ｒ＋Ｇｏｕｄｅｒｃ及びＪ、 Ｂａｒａｔｔｉ
、 Ａｇｒｉｃ、 Ｂｉｏｌ。 Ｃｈｅｗ ４４．２２７９（１９８０）２、Ｊ、尤Ｔｈ
ｏｍａｓ、 Ｄ、ＦＬＭｏｒｒｉｓ及＄Ｌ Ｐ、 Ｈａ
ｇｅｒ。 Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｗ ２４５．３１２９及び３
１３５（１９７０） ３、 Ｄ、Ｒ，Ｍｏｒｒｉｓ及びり、 Ｐ、 Ｈａｇ
ｅｒ、 Ｊ、 Ｂｔｐｔ、 Ｃｈｅｍ々４１． １７６
＋（１９６６） ４、 Ｃ，Ｌ、Ｇｏｏｎｅｙ及びＪ、 Ｈｕｅｔｅｒ
、 Ｂｉｏｔｅｃｈ、 Ｂ】ｏｅｎｇ。 １６．１０４５（１９７４）。 ％許出１ｊ人 シータス・コーポレー ジョン（外
４名）
化される事も今まで明らかにされなかった。
、 、本発明に関連して用いられる「−級
アルコー？−ル」は、次の構造式： Ｒ−ＯＨ２０１（
（Ｒ＆−！、炭イし水素）で表わされる。代表的な一級
アルコールＲ−ＯＨ２０Ｈを次表に示す。 一級アルコール Ｒ アリルアルコール ＯＨｗａＨ クロチルアルコール ＣＨ３ＣＨ＝ＣＨ６−プテン
ー１−オール ａＨ２＝ｃｉ−ｔａＨ２シンナミルアル
コール φ０Ｈ−Ｃ；Ｈ２−ブテンー１．４−ジトル
ＨＯＣＨ２ＣＨ−ＣＨプロ／ぞルギルアルコール
ＧＨ三Ｇ２−ブチン−１，４−ジオール ＨＯ
ＣＨ２Ｃ三Ｃインジルアルコール φ フェネチルアルコール φＣＨ２本発明はハロパ
ーオキシダーゼ＃索を用いて構成される。微生物カルダ
リオマイセ子 乙二！（Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ
ｆｕｍａｇｏ）（ＮＲＲＬ １５２７２）から得られ
るクロロ、ｅ−オキシダーゼは本発明の方法に使用出来
るハロパーオキシダーゼである。礫類より得られるゾロ
モノ−オキシダーゼ、ミルクより得られるラフトノモー
オキシダーゼおよびセイヨウワサビよ？得られるセイヨ
ウワサビパーオキシダーゼは本発明の方法に使用出来な
い。 微生物力ルダリオマイセス フマゴ （Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ ｆｕｍａｇｏ）（ＮＲ
ＲＬ １５２７２）又はカルダリオーｑイ＊ｘ ７
−ｒｉ（ＧａＬａａｒｉｏｍｙｃｅａｆｕｍａｇｏ）（
ＮＲＲＬ １５２７２）から得られるクロロノーオキ
シダーゼと類似のクロロ／＜−オキシダーゼ活性を有す
る微生物変異株はツア堅ツクート０ツクス（Ｇｚａｐｅ
ｋ−Ｄｏｚ）培地中、室温で３〜１０日間常法に従い静
置培養、振と５培養、深部培養を行って増殖スる。酵素
、クロロパーオキシダーゼは、静置培養で得られた微生
物の菌体のホモゲネート又は、静置培養、振と５培養で
得られた微生物の培養ｆ液から製する。クロロノーオキ
シダーゼの製造の詳細は、次の文献及び特許に記載され
ている。 （１）米国特許４４．２４７．６４１ 、 Ｎｉｅｄｌ
ｅｍａｎ等に対し１９８１年１月２７日発行； （２） Ｍｏｒｒｉｓ等、 Ｊ、ＢｉｏＪ、Ｃｈｅｍ
、 ２４１．１７６３（１９６６）。 （３） Ｃｏｏｎｅｙ等、 Ｂｉｏｔｅｃｈ、 Ｂｉ
ｏｅｎｇ、 １６．１０４５（１９７４）。 酵素は、固定形を用いる事が出来る。酵素固定化法は当
業者にとって一般的であり、例えば、酵素溶液又は酵素
を含む１細胞の懸濁液を広範囲の有機又は無機担体と反
応せしめる。これらの担体は、ポリアクリルアミド、エ
チレン−マレイン酸共重合体、メタアクリル基部のポリ
マー、ポリ４プチド、スチレン基部のポリマー、アガロ
ース、セルローズ、デキストリン、多孔性がラスビーズ
、及び水酸化アルミニウム又はチタニウムである。 この形での酵素は安定性が補強され、寿命と有効性が嬌
長し回収率が良い。固定酵素を用いた反応は、管中又は
反応タンク中で行う事が出来る。 本反応混合物中には、酵素の他に、酸化剤が必要である
。良好な酸化剤、過敏化水素を混合物にあるいは、過酸
化水素発生酵素系を用いて、そのまま反応系内で発生さ
せる。このような酵素系は、当業者間では良く知られて
おり、例えば、Ｄ−グルコース存在下でのグルコース−
１−オキシダーゼ：Ｄ−グルコース存在下でのピラノー
ス−２−オキシダーゼ；Ｄ及びＬ−メチオニン存在下で
のＤ−及びＬ−アミノ酸オキシダーゼ：ヒスタミン存在
下でのジアミンオキシダーゼである。過酸化水素発生系
はハロ、ｅ−オキシダーゼ酵素と同様に、非固定形又は
固定形で存在せしめる。過酸化水素は例えばアンスラキ
ノン酸化工程の如き化学反応によっても発生出来る。 存在せしめる過酸化水素は、−級アルコールに対し、モ
ル比で約α５：１から５０＝１の範囲が良好であり、最
も好適なモル比は約１：１又はそれ以下である。好適な
モル比は反応中の過酸化水素の平均存在比を表わしてい
る。一般に正確なモル比は反応中に変化し、特定の時間
においては、上述の範囲を越えるか、又は、その範囲を
下まわる。 本反応はｐＨが約２．８〜７．０の範囲で行う。反応の
ｐＨは緩衡剤を用いて、好適な範囲にとどめるのが良い
。好適な緩衝剤は、リン酸ナトリウム又はカリウム、ク
エン酸ナトリウム又はカリウム、酢酸ナトリウム又はカ
リウムである。ｐＨの制御及び調節は、緩衝化の他の適
当な方法を用いる事が出来る。 本反応は水溶媒中で行う。本方法によりアルデヒド０に
変換出来る一級アルコールが、水溶媒に、実質的に不溶
の場合でも、反応を行うための十分な基質嬉解性が得ら
れる混合又は他の懸濁方法１１Ｃより反応を行う事が出
来る。 反応温度は一約１５Ｃ〜５０ｃの範囲で反応を行うが、
約２０ｉＣ〜３０ｃが好適である。 前述の如く、反応混合物の組成物、すなわち、−ｉｌ
ｆ ／ｌ／ コー ル、クロロ・ｅ−オキシダーゼ、４
酸化水素、緩衝剤を水中で単に混合し、例えば約６０秒
〜１時間攪拌し、アルデヒド９を得る。 −級アルコールの反応は次式で表わされる。 本発明による反応で得られる生成物はガスクロマトグラ
フィー−マススイクトロメトリ−（ＧｃＭｓ）で同定、
定置する。反応混合物１０μｌを、テｔ、ｙクベ（Ｔｅ
ｎａｘ）−Ｇ Ｏ（８０／ １００メツシユ）を充てん
した、６の流速はヘリウム６０鴫吻に調節する。カラム
温度は、定温を用い、（各実施例に記述する温度）注入
温度を２４０Ｃとし、ジェットセ・ぞレータ−は２４０
Ｃにする。マススはクトロメーターは７０ ｅＶ、
電子衝撃イオン化法で行う。 次の実施例は本発明を例示するものであり本発明の態様
を限定するものではない。 実施例 １ 本実施例は一級アルコールからアルデヒドを製造する方
法を例示する。 ｐＨ３，０及びｐＨ７，０でのリン酸緩衝液（１０ＩＬ
Ｉ、Ｑ、５Ｍ）、過酸化水素（４，ＩＩｖ、Ｓｕｌ液１
６７戸ｌ；最終的に１２ｍＭ）及びはンジルアルコール
（１ａｗ９；最終的に１２ｍＭ；φＣＨ２０Ｈ；Ａｌｄ
ｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａ１社、 Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ
、 ＷＬ より購入）を２５１１７のＰｙｒｅｘフラス
コ中、室温、常圧でｉｔする。次Ｋ、ハロパーオキシグ
ーゼ、クロロパーオキシダーゼ（Ｑ、１ｉｕ）を加える
。この後１５分間反応を行う。 クロロパーオキシダーゼは、以下の如く製造す・る。 カルダリオマイセス フマゴ（Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃ
ｅｓ些翌駐）（ＮＲＲＬ １５２７２）の菌体をポテ
ト寒天培地で培養する。薄切りボテ）（２００，１を蒸
留水（５ＱＱｄ）中で４０分間煮沸し、１遇する。 蒸留水（５ＱＱａｊ）中に溶かしたグルコース（２１ｇ
）及び寒天末（２ＯＮ）の溶液を上述１過液に加える。 ｐＨを６．８にし、蒸留水を加えて全量１リツトルにす
る。この培地を１２１Ｃで１５分間滅菌する。 上述の方法で作製したポテト寒天培地に微生物を接種し
、室温で１週間培養する。この微生物な大豆−グルコー
ス培地（５Ｑ＋ｗｊ）４ｃ接種する。１リツトルの蒸留
水に、数取過程の大豆粉末（６０Ｉ）、グルコース（３
０ｊｌ）、ＣａＧＯｓ （７Ｉｌ）を加えて大豆−グル
コース培地を調製する。培地を１２１Ｃで６０分間滅菌
し、冷却後微生物を接種する。 ツク−ドックス培地１００−を入れ、上述培養物５−を
入れる。ツアはツクート９ツクス（Ｃｚａｐｅｋ−Ｄｏ
ｘ ）培地は、蒸留水１リツトルにＮ ａ ＮＯａ （
３ｊ’ ）、ＫＨ２ＰＯ４（１１１）、ＫＣＩ（α５．
ｆ）、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０（Ｑ、５Ｍ）、ＦｅＳＯ４
−７Ｈ２０（１０ｍ９）、グルコース（４０ｇ）を加え
て１２１Ｃで２０分間滅菌する。 室温で５〜７日間靜置装養する。成長した黒色菌体を取
り、蒸留水で洗浄し、後の使用のため、フリーザー中に
一１０Ｃでプラスチック容器に入れて保存する。 ハロゲン化酵素は、上述の如く調製した菌体保存物６コ
を、６０ｇの酸洗浄砂、６０３１１７の蒸留水とバーチ
ス（Ｖｉｒｔｉａ） ４５ホモゲナイザー中で粉砕して
製造する。ホモゲネートを冷却遠心分離し、ハｐゲン化
１１１１１素、クロロパーオキシダーゼの源として用い
る。 最終的なり０ロバ−オキシダーゼ上清を室温でワットマ
ン（Ｗｈａｔｍａｎ ）１１１紙で１遇する。１液ヲロ
ータリーフイルムエバポレーターにて減圧下３５Ｃ以下
で１０倍に濃縮する。濃縮液を水浴中ＯＣに冷却し、あ
らかじめ冷却した（ＤＣ）エタノールを加えて４５ ’
１ （ｖ／ｖ ）エタノール濃度にする。混合物を１５
分間はげしく攪拌し、次に、ツルパル（５ｏｒｖａｌ
） ＲＣ−５ｘ−パースシートｉ（５ｕｐｅｒｓｐｅｅ
ｄ）を用い、５５−３４０−タＩｃて、−１０Ｃで１５
分間遠心分離（１５，０００，９，）する。黒色沈澱を
除き、上清に、あらかじめ冷却したエタノールを６５％
エタノール（ｖ／ｖ）になるまでＯＣで加える。混合物
をＤＣで６０分間ゆっくり攪拌する。これを上述の如く
遠心分離する。 上清を除き、クロローゼ−オキシダーゼ活性を有する沈
澱を［１０５Ｍリン酸カリウム（ｐＨ７）１社中に溶か
し、この酵素溶液を一２ＤＣで保存する。 生成物を、ガスクロマトグラフィー−マススペクトルメ
） ｙ −（ＧＣＭＳ ）で同定及び定量する。 反応混合物１０μ遭をテナックス（Ｔｅｎａｘ） −Ｇ
Ｏ（８０／１００メツシユ）を充てんした６フイート×
４ｎのコイル状ガラスカラムを装備したフイ二ガン（Ｆ
ｉｎｎｉｇａｎ） ４０２１ＧＣＭＳに注入する。カラ
ム中の流速はヘリウム６０紅／分に調節しジェットセパ
レーターは２３０ｔｌｌ’にする。マススはクトロメー
ターは７０θＶ、電子衝撃イオン化法で行う。 生成物のＧＯの保持時間は８分て、マススペクトルはベ
ンズアルデヒド０の性質を示す。すなわち分子イオン１
０６、主フラグメントマスイオン１０５（分子イオンよ
りＨ脱離）、同じ＜７７（φ１イオン）。本生成物は標
品はンズアルデヒド（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａ
１社より購入）のＧＯ保持時間及びマススはクトルト一
致。 以下に得られた生成物の収量を示す。 実施例 ２ 本実施例はアリル、プロノセルギル、インジルの一級ア
ルコールが本発明の方法に用いる好適な一級アルコール
である事を示す。 緩衝液ｐＨ５，０にする以外、実施例１の方法に従う。 以下の一級アルコールを用い（最終的に１２ｍＭ；全て
、Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ 社より購入）以
下の結果を得る。 一級アルコール基質 ０Ｈ３０Ｈ，ＯＨエタノール ０Ｈ１ｑＨ＝ｃＨＧＨ２０Ｈクロチルアルコールφ０Ｈ
＝ＣＨＣＨＯＨシンナミルアルコール０Ｈ，＝ＣＨＧＨ
，０Ｈ２０Ｈ３−ブテン−１−オールＨＯＣＨＣＨ＝Ｃ
ＨＧＨ２０Ｈ２−ブテン−１，４−：）オールＨＣ？”
ＣＯＨＯＨプロパルギルアルコールＨＯＣＨ２Ｃ三〇Ｇ
Ｈ，ＯＨ２、−ブチン−１，４−：）オールφ０Ｈ２０
Ｈ，ＯＨ２−フェネタノールこれらの生成物はＡｌｄｒ
ｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社より購入アルデヒド生成物
収量□□＝：＝＝□□□□□ ＯＨＧＨＯアセトアルデヒド Ｑ、１
１１９０Ｈ１ＣＨ＝ＧＨＣＨＯクロトンアルデヒド
２．３φＣＨ＝ＣＨＣＨＯシンナムアルデ
ヒド ５．２ＧＨ＝（１：ＨＣＨ２ＣＨＯ
３−ブテン−１−アール ［１，６ＨＯＣ
Ｈ２ＧＨ−Ｃ，ＨＣ，ＨＯ４−ヒト９０キシ−２−ブテ
ン−１−アール ６．６Ｈα＝ｃｃＨｏ プ
ロｌセルギルアルデヒ）” ｔ３ＨＯＧＨ
，Ｃ三ＧＧＨＯ４−ヒドロキシ−２−ブチン−１−アー
ル ｔ５φＯＨＣＨＯフェニルアセトアルデヒド
ｚ２、した標品とＧＯ保持時間及びマススイクト
ルで一致した。 実施例 ３ 本実施例は、本発明におけ一過酸化水素の半連続添加法
を示す。 ４．１ηの過酸化水素を４回（各々６％溶液を１６７μ
ｌ°加える）１５分間毎に加える事以外実施例１の方法
を用いる。アリルアルコール（７呼。 １２ ｍＭ、 ０Ｈ２＝ＧＨＣＨ，ＯＨ，Ａｌｄｒｉｃ
ｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社より購入）を−級アルコールと
して加える。 生成物のＧＯ保持時間は、カラム温度１６０Ｃ１定温で
２．９分であり、アクロレインのマススはクトルパター
ンである、分子マスイオン５６：主フラグメントマスイ
オン５５（分子イオンよりＨの脱離）を示す。本生成物
は標品のアクロレイン（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃ
ａｌ 社より購入）とＧＯ保持時間、マススはクトル共
に一致する。 以下に生成物の収量を示す。 添加 Ｃ）１２−ｃＨ−ＧＨＱ ２．２１１＆ ４．１ｙ
５．９ｑ ＆２１１１１＆実施例 ４ 本実施例においては、二級アルコールの存在下で一級ア
ルコールの選択的酸化を例示する。二種のアルコール基
質ニー級アルコールは２−フェネタノール（φＣＨ２Ｃ
Ｈ２０Ｈ；１２ｍＭ）； 二級アルコール、１−フェ
ネタノール（φ０Ｈ（ＯＨ）ＯＨ８；１２ ｍ Ｍ 、
Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社より購入）を反
応混合物中に加える事以外、実施例２の方法に従う。 −級アルコール（２−７エネタノール）０）−”４化さ
れる。 ゛以下に生成物の収量を示す。 基 質 生成物 収量 φＣＨ２ＣＨ２０Ｈφ０Ｈ２ＧＨＱ ２．２〜
実施例 ５ 本実施例においては、反応系中で、そのまま過酸化水素
をゆっくりと酵素的に発生せしめる方法を示す。 以下に示す方法以外は実施例１の方法を用いる。 すなわち １）リン酸カリウム緩衝液をｐＨ６，０に調節する。 ２）反応系中でそのまま過酸化水素を酵素的に発生せし
めるー。 反応混合物に、β−Ｄ−グルコース（１０ｍＭ）及び、
グルコース−１−オキシダーゼ（Ｑ、ｉｄ；シグマケミ
カル（Ｓｉｇｎｍ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ）社より購入、
カタログ番号Ｇ−６５００）あるいはピラノース−２−
オキシダーゼ（Ｑ、１ｍ；米国特許４．２４６，３４７
に記載の方法で製造する）を加える。反応はオキシダー
ゼ酵素を添加、６０分稜に終了する。 以下に生成物の収量を示す。 φＣＨＯ８，０１Ｊ９６．１■ グルコース−１−オキシダーゼを用いた場合グルコース
の酸化生成物はＤ−グルコノ−δ−ラクトンでありピラ
ノース−２−オキシダーゼの場合はＤ−グルコソンであ
る。 以上、本発明は酵素反応により、−級アルコールからア
ルデヒドを製造する方法を示している事が理解されよう
。本方法で用いた酵素は微生物在ルダリオマイセス 乙
−ｑ −／ （Ｇａｌｄａｒｉｏｎ＋ｙｃｅｓ ｆ’ｕ
ｍａｇｏ）（ＮＲＲＬ １５２７２）から得られるク
ロロパーオキシダーゼである。木酢３（’−ｉ遊離又は
固定形で用いる事が出来る。アルデヒドを製造するのに
用いる一級アルコールはアリル、フロパルギル及びベン
ジルの一級アルコールが好適である。 既知の酵素的脱水素法と異なり、本発明の方法は、高価
な補因子を必要としない。加うるに、本方法は常温で実
施出来、結果として従来の方法に比べ、主要な熱エネル
ギーの節約になる。本方法は又、二級アルコール存在下
での一級アルコールの選択的酸化が可能である。 ここに記述して示した方法に加え、本発明において種々
、変更出来る事は前述の記載から、当業者にとつく明ら
かになろう。このような変更は特許請求の範囲内である
。 ４，２１８，４０１ Ｃ，Ｅ、 Ｗｙｍｏｒｅ
＆／８０４．２２０，８０ Ｓ Ａ、
Ｅ、 ＭａｒｃｉｎｋａＷＢｋｙ、 Ｊ、 Ｐ、 Ｈｅ
ｎｒｙ ９／８０４．２２４，２５４ Ｗ、５ａｕｅ
ｒ、 Ｗ、Ｆｌｉｅｇｅ、 ＣＤｕｄｅｋ、 ９／
８ＯＮ、Ｐｅｔｒｉ ４．２４１．１８４ ＣＴ、 Ｈａｕ、 Ｒ，Ｎ、 Ｐ
ａｔｅＬん１．Ｌａ５ｋｉｎ ＩＺ／１０４．２４６，
３４７ Ｓ、Ｌ、Ｎｅｉｄｌｅｍａｎ、 Ｗ、Ｆ、Ａｍ
ｕｎ、 １／８１Ｊ、 Ｇｅｉｇｅｒｔ ４．２４７，６４１ Ｓ、Ｌ、Ｎｅｌｄｌｅｍａｎｅ
Ｗ、Ｆ、Ａｍｏｎ、 １，４３１Ｊ、 Ｇｅｉｇ
ｅｒｔ その他 １、 Ｒ＋Ｇｏｕｄｅｒｃ及びＪ、 Ｂａｒａｔｔｉ
、 Ａｇｒｉｃ、 Ｂｉｏｌ。 Ｃｈｅｗ ４４．２２７９（１９８０）２、Ｊ、尤Ｔｈ
ｏｍａｓ、 Ｄ、ＦＬＭｏｒｒｉｓ及＄Ｌ Ｐ、 Ｈａ
ｇｅｒ。 Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｗ ２４５．３１２９及び３
１３５（１９７０） ３、 Ｄ、Ｒ，Ｍｏｒｒｉｓ及びり、 Ｐ、 Ｈａｇ
ｅｒ、 Ｊ、 Ｂｔｐｔ、 Ｃｈｅｍ々４１． １７６
＋（１９６６） ４、 Ｃ，Ｌ、Ｇｏｏｎｅｙ及びＪ、 Ｈｕｅｔｅｒ
、 Ｂｉｏｔｅｃｈ、 Ｂ】ｏｅｎｇ。 １６．１０４５（１９７４）。 ％許出１ｊ人 シータス・コーポレー ジョン（外
４名）
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 クロロパーオキシダーゼ、酸化剤及び−級アルコ
ールの反応混合物を反応容器中に調製し、該−級アルコ
ールを反応混合物と十分な時間接触せしめてアルデヒド
に変換することを％徴とする一級アルコールよりアルデ
ヒドを製造する方法。 ２、 ｇ＊化剤が過酸化水素である、％Ｗｆ請求の範
囲第１項の方法。 ３、過酸化水素を反応容器内でそのまま発生せしめる特
許請求の範囲第２項の方法。 ４、クロロパーオキシダーゼ、酸化剤、−Ｍアルコール
の反応をｐＨ約６．０〜ＺＯの範囲内で行う、特許請求
の範囲第１項の方法。 ５、クロロパーすキシダーゼ、酸化剤、−級アルコール
の反応を常温、常圧で、水性媒体中で行う、特許請求の
範囲第１項の方法。 −６，上述のクロロノミ−オキシダーゼを微生物カルダ
リオマイセス７−ｒ ！ （Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅ
ｓｆｕｍａｇｏ）（ＮＲＲＬ １５２７２）又はその
子孫より得る特許請求の範囲第１項の方法。 ７、 クロロ・ミーオキシダーゼを、上述のＬ土！リオ
マイ＋２ 乙−ｑ −／ （Ｇａｌｄａｔｉｏｍｙｃ
ｅａ 聾翌堅）（ＮＲＲＬ １５２７２）又はその子
孫から得られるクロロ−ぞ−オキシダーゼ活性と類似の
クロロ、ｅ−オキシダーゼ活性を有する微生物変異株よ
り得る特許請求の範囲ｖｇ１項の方法。 ｓ、上Ａ−Ｍアルコールカアリルアル＝ｙ −／Ｌ／
；クロチルアルコール：シンナミルアルコール；２−フ
テン−１，４−：）オール：フロ／（ルギルアルコール
：２−ブチン−１，４−：）オール：ベンジルアルコー
ル：フェネチルアルコール：フル７１Ｊ＃フルコール：
２−ピリジルカルビノール；ｍ−メチル（ンジルアルコ
ールより成る群から選出したものである特許請求の範囲
第１項の方法。 ９、上述−級アルコールを二級アルコールの存在下で選
択的に酸化せしめる特許請求の範囲第１項の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US36274682A | 1982-03-29 | 1982-03-29 | |
| US362746 | 1982-03-29 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58187193A true JPS58187193A (ja) | 1983-11-01 |
Family
ID=23427373
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5345283A Pending JPS58187193A (ja) | 1982-03-29 | 1983-03-29 | 一級アルコ−ルからのアルデヒドの製造法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0090652A3 (ja) |
| JP (1) | JPS58187193A (ja) |
| CA (1) | CA1190875A (ja) |
| DK (1) | DK126083A (ja) |
| ES (1) | ES521049A0 (ja) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3604874A1 (de) * | 1986-02-15 | 1987-08-20 | Basf Ag | Verfahren zur herstellung von coniferylaldehyd und mikroorganismus dafuer |
| US5010005A (en) * | 1989-04-28 | 1991-04-23 | Duff Sheldon J B | Bio-oxidation of high alcohols in non-aqueous reaction media |
| ATE194854T1 (de) * | 1992-04-22 | 2000-08-15 | Canon Kk | Verfahren zur biologischen zersetzung von phenol- oder furanverbindungen mit mikroorganismen |
| US6096530A (en) * | 1992-04-22 | 2000-08-01 | Canon Kabushiki Kaisha | Pseudomonas cepacia strain isolated from termite intestines that degrades trichlorethylene and furan compounds |
| EP0646642A3 (en) * | 1993-09-30 | 1995-08-16 | Canon Kk | Carrier containing microorganism and method for soil remediation using this carrier. |
| KR101356454B1 (ko) | 2013-01-30 | 2014-02-04 | 강원대학교산학협력단 | 불포화 알데히드 화합물의 제조방법 |
| CN105439786A (zh) * | 2014-08-08 | 2016-03-30 | 苏州亚培克生物科技有限公司 | 一种α,β-不饱和羰基化合物的制造方法 |
-
1983
- 1983-03-18 DK DK126083A patent/DK126083A/da not_active Application Discontinuation
- 1983-03-28 ES ES521049A patent/ES521049A0/es active Granted
- 1983-03-29 JP JP5345283A patent/JPS58187193A/ja active Pending
- 1983-03-29 EP EP83301775A patent/EP0090652A3/en not_active Withdrawn
- 1983-03-29 CA CA000424818A patent/CA1190875A/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA1190875A (en) | 1985-07-23 |
| ES8502668A1 (es) | 1984-05-16 |
| DK126083A (da) | 1983-09-30 |
| EP0090652A2 (en) | 1983-10-05 |
| EP0090652A3 (en) | 1984-03-28 |
| DK126083D0 (da) | 1983-03-18 |
| ES521049A0 (es) | 1984-05-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| David | Studies on pyruvate decarboxylase: acyloin formation from aliphatic, aromatic and heterocyclic aldehydes | |
| US4266034A (en) | Method for producing microbial cells and use thereof to produce oxidation products | |
| De Bont et al. | Metabolism of ethylene by Mycobacterium E 20 | |
| JP3590647B2 (ja) | アルコール／アルデヒド脱水素酵素 | |
| JP2008517612A (ja) | キラルアルコールの製造方法 | |
| Hou et al. | Microbial oxidation of gaseous hydrocarbons: production of methyl ketones from their corresponding secondary alcohols by methane-and methanol-grown microbes | |
| US4375515A (en) | Method for producing microbial cells and use thereof to produce oxidation products | |
| Kawaguchi et al. | Stereochemistry of dehydrogenation catalyzed by acyl-CoA oxidase | |
| US4269940A (en) | Microbiological alkane oxidation process | |
| Saha | Purification and characterization of a novel mannitol dehydrogenase from Lactobacillus intermedius | |
| JPS58187193A (ja) | 一級アルコ−ルからのアルデヒドの製造法 | |
| US4503153A (en) | Method for producing aldehydes from primary alcohols | |
| Schön et al. | Pyruvate fermentation in Rhodospirillum rubrum and after transfer from aerobic to anaerobic conditions in the dark | |
| Rivas et al. | Characterization of the nitrate-reducing system of the yeast Torulopsis nitratophila | |
| US4748122A (en) | 2,5-diketo-D-gluconic acid reductase | |
| US4241184A (en) | Secondary alcohol dehydrogenase enzyme and use thereof | |
| Netrusov et al. | ATP-GENERATION COUPLED WITH CI" COMPOUND OXIDATION BY METHYLOTROPHIC | |
| JPH04503755A (ja) | ２―（４―ヒドロキシフェノキシ―）プロピオン酸の発酵による製造方法 | |
| US4902617A (en) | Enzyme and process for producing the same | |
| CA1125682A (en) | Microbiological production of ketones | |
| Hugo et al. | Coenzyme specificity of dehydrogenases and fermentation of pyruvate by clostridia | |
| US5085993A (en) | Coenzyme-independent l-sorbosone dehydrogenase from pseudomonas putida | |
| US4347319A (en) | Microbiological epoxidation process | |
| Hirabayashi et al. | Isolation and properties of α-ketoglutarate dehydrogenase complex from baker's yeast (Saccharomyces cerevisiae) | |
| US4546080A (en) | Manufacture of halogenated ketones and aldehydes |