JPS58116684A - 隣接ジハロゲン化生成物の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般ζこアルケンおよびアルキンから有用な商
業上の製品全製造する酵素的な方法ｌこ関する。さらｆ
こ詳細には、本発明は酵素を便用して反応を行う、アル
ケンおよびアルキンからの隣接ジハロゲン化生成物の改
良された製造方法に関する。

今日、アルケンおよびアルキンからの隣接ジハロゲン化
生成物の製造は工業化学の重要な部分音なしている。上
記生成物溶媒、化学中間体、殺虫剤、単量体としておよ
び他の多くの使途で有用である。エチレン（１）の塩素
化ζこよって製造されるエチレンジクロリド（６）は塩
化ビニル（ＩＩＩ）の製造（こおいてほとんど独占的に
６便われている。（Ｗｅｉｃｓｅ−ｒｍｅｌ、ｅｔ、ａ
Ｌ、Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　　Ｏｒｇａｎｉｃ　　Ｃん
ｅｍｉ−ｓｔｒｙ、１９１−２００（１９７８））。

（４） ｌ　　　　　　　　■　　　　　　■ エチレン（１）の臭素化によって製造されたエチレンジ
プロミド（■）はガソリン中の鉛スカベンジャーおよび
土壌くん蒸剤として使用される。

（Ｌｏｗｅｎｈｇｌｒｎ　ａｔ　ａｔ、　Ｉｎｄｕｓｔ
ｒｉａｌ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ。

８８９−８９１　（１９７５））。

１　　　　　　　　１Ｖ アリルアルコール（Ｖ）の臭素化壷こよって製造される
２、３−ジブロム−１−プロパツール（Ｖｌ）はプラス
チックおよび繊維に火炎防止ジブロムプロピル基を入れ
るための価値ある中間体であり（米国特許第４，１２５
，７２８号サンドラ−（５ａｎｄｌｅｒ）、１９７８）
、反すう動物の飼料効率を増加させる活性成分である（
ルイス（Ｌｅｗｉｓ）ら、米国特許第８．９８４，０８
７号、１９’７６）。

（５） ■　　　　　　　　　　　　　■ アリルアルコール（Ｖ）の塩素化によって製造される２
、８−ジクロル−１−プロノ（ノール（■）はエポキシ
樹脂を製造する出発化合物として特に有用な商業上の製
品であるエピクロルヒドリン（Ｖｆｆｌ）の製造のため
の価値ある中間体である（Ｋａｗａｂｅら、米国特許第
４．１１８，７４６号、１９７８）。

Ｖ　　　　　　■　　　　　　■ アルケンおよびアルキンから隣接ジノ・ロゲン化生成物
全製造する公知方法は典型的をこけ制御された条件下に
アルケンまたはアルキンおよび遊離のハロゲンを反応器
に添加することからなる。これらの方法に遊離のノ・ロ
ゲンを使用するには費用のかかる制御工程および装置を
使用してこの毒性反応体の損失金防止しなければならな
い。遊離のノ・ロゲ／の使用はその製造のために多くの
エネルギ（６） −を必要とするので避けるのが好ましい。

本発明者等はアルケンおよびアルキンから隣接ジハロゲ
ン化生酸物ヲ＃！造する改良方法を開発した。本発明の
酵素的ハロゲン化方法はアルケンおよびアルキンから隣
接ジハロゲン化生成物を製造する現在迄の方法をしのぐ
いくつかの１記利点を有している：元素状ハロゲンより
費用のかからない、危険の少ない無機ハロゲン化物の使
用、すなわち、塩素でなく塩化物イオン；常温の使用；
および標準的またはほとんど標準的常圧の使用。

この酵素的方法は室温で進行することの他に、精製する
心安のない希Ｈ，０，溶液を使用すること全包含する。

このＨｔＱ　＊は直接添加してもよいし、あるいは酵素
的または化学的反応によって反応の場で生成させてもよ
い。これにより濃縮され精製されｆＣＨｔ　Ｏｘの価格
に比べてＨ，０，の価格を低くでき、物質が安全に使用
し易く、、なり、ハロゲン化酵素の寿命が延びる。

したがって、アルケン訃よびアルキンから１１Ｍｍジハ
ロゲン化住成物−ｔＳ造方法全提供することが（７） 本発明の１つの目的である。

遊離のハロゲンを使用せずにこれらの化合物を製造する
ことも本発明の目的である。

アルケンおよびアルキンから所望の生成物全製造する低
価格の方法を提供することもさらζこもう１つの本発明
の目的である。

他の目的ζこついても下記から当業者（こけ明白であろ
う。

一般的ｌこ、本発明の方法は、反応容器擾こ）・ロゲン
化酵素、酸化剤およびハロゲン化物イオン源の混合物を
入れること（こよってアルケンおよびアルキンから隣接
ジハロゲン化生成物を製造する。アルケンまたはアルキ
ンを次いで容器瘉こ入れ、反応混合物と、アルケンまた
はアルキンを所望の隣接ジハロゲン化生成物ｆこ転化す
るに充分な時間接触させる。

不発明はハロペルオキシダーゼとして分類される酵素群
はアルケンおよびアルキン（こ作用して隣接ジハロゲン
化生成物を生成するという発見１こもとついている。こ
れらの生成物は下記構造式：（８） （式中Ｘは塩素、臭素またはヨウ素である。）を特徴と
する。

過去、ハロペルオキシダーゼはアルケンかラノ・ロヒド
リ／ヲ生成しく米国特許第４，２４７．６４１号、Ｎｅ
ｉｄｌｅｍａｎら、１９８１）；アルキンからハロケト
ンおよびアルデヒドを生成する（米国特許出願第２２９
，５５４号、Ｎｅ　ｉ　ｄ　Ｌ　ｅｍａｎら、１９８１
年１月２９日出願）の（こ使用されてきた。

アルケン アルキン しかし、隣接ジハロゲン化生成物は今までハロペルオキ
シダーゼｌこよってアルケンおよびアルキンから製造さ
れたことはなかつｆｃ： （９） アルケン アルキン さら（こ、非常に高レベルのハロゲン化物イオンの存在
下にアルケンおよびアルキン反応全行つことは今まで知
られていなかった。１９８１年１月２７日（こＮｅ　ｉ
　ｄ　ｌ　ｅｍａｎに発行された米国特許第４．２４７
，６４１号および＃　１１　ｉｄ　ｌ　ｅｍａｎ　ｌこ
よって１９８１年１月２９日に出願された米国特許出願
第２２９．５５４号は２１ｍＡｌないし８５ｍＭのハロ
ケン化物濃度範囲でのハロペルオキシダーゼ反応を開示
している。Ｎｅ１ｄｌｅηｔａｎに対して１９７０年９
月１５日発行された米国特許第３．５２８，８８６号は
４ｍＭのハロゲン化物績度でのハロペルオキシダーゼ反
応を開示している。Ｉ＜ｏｌｔｏｎｉｔｓｃｈｅｔ　ａ
ｌ　、　（Ｊ、　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓａｃ、　
９２．４４８９（１０） −４４９Ｏ（１９７２））は４’ｒｍＭのハロゲン化物
濃度でのハロペルオキシダーゼ反応を開示している。し
たがって、ハロベルオキシダーゼが非常に高レベルのハ
ロゲン化物イオン（４００ｍ＆より高レベル）の存在下
にアルケンおよびアルキンから全く異なる有用な生成？
！Ｉｔ生成することは知られていなかった。

本発明によれば、隣接ジハロゲン化生成物の製造方法が
開発された。

ここでアルケンとは下記式で表わされる炭素対炭素の二
重結合を含有する炭化水素を包含するものと広義に定義
される： 式中／＜　”　、　Ｒ２、ＲｈおよびＲ′は各々下記か
らなる群より選択される： 代表的アルケンは次のとおりである： エチレン　　　ＨＨＨＨ プロピレン　　ＣＨ３ＨＨＨ ブテン−Ｉ　　　ＣＪａ　　　　　　　Ｉｆ　　　ＨＩ
Ｉペンテン−Ｉ　　ＣＪｉ７ＨＩｆ　　Ｈオクテン−Ｉ
　　ＣａＨｔｓ　　　　　　ＨＨＨデセン−Ｉ　　　Ｃ
，Ｈ，□　　　　　ＨＩｉＨドデセン−Ｉ　　Ｃ１ｏＨ
ｔＩＨＨＩＩイソブチレン　ｃＨｓ　　　　　　　ＣＨ
，ＨＨシス−ブテン−２ＣＨ，ＨＣＨ８Ｉｉ ｌ、８−ブタジェン　Ｃ＆＝ＣＨＨＨＨｌ　、　４−ヘ
アｊ’シェフ　Ｈ２Ｃ＝Ｃｌ１ＣＨ，ＨＨＨインプレン
　　ＨｔＣＬＣ（ＣＨｓ）　　　ＨＨＨｌ、７−オクタ
ジエンＨ２Ｇ＜ＨＣＣＨＪ４　　ＨＢ　　　Ｈここでア
ルケンとは、Ｒ”、Ｒ”、Ｒ”および／またはＲ４が芳
香族基ｌたは異原子含有基であるが、各置換基が上述の
反応条件で不活性であって通常の反応性炭素対炭素二重
結合全不活性化しないアルケンを広く含む。

そのような芳香族基または異原子基を有する代表的アル
ケンは次のとおりである： アルケン　　　　ＲＩ　　　　　　ＢＲＲ＠　　　　Ｒ
４アクリル酸メチル　　ＣＨ，Ｏ，ＣＨＨＩｉ塩化アリ
ル　　　ＣＩＣＨｔ　　　　Ｅ　　　ＨＨ臭化アリｋ　
　　　ＢｒＣＨ２ＨＨＨ アリルアルコール　ＨＯｃＨ宜　　　ＨＨＨ−オール ８−ブテン−１ｆｉＯ（ＣＨｔ）ｔ　　　ＨＨＨ−オー
ル ４−ペンｆン−ＨＯ（ＣＨ，）、　　ＨＨＨｌ−オール スチレン　　　Ｃ，Ｈ，ＨＨＨ （１３） Ｒ基は連絡して環状基を形成することが可能である。代
表的環状アルケンは２−シクロヘキセン−１−オール（
ＩＸ）である。

■ 本発明の方法ｌこ有用なアルキンは下記式で表わされる
炭素対炭素三重結合を有する炭化水素として広く定義さ
れる； Ｒ’−Ｃ＝Ｃ−Ｒ” （式中Ｂ　Ｉ　、！：Ｒ１は各々下記からなる群より選
択される）： （１４） アセチレン　　　　　　ＨＨ メチルアセチレン　　　　　ＣＨｓ　　　　　　Ｈエチ
ルアセチレン　　　　　ＣＨ，ＣＨｔ　　　Ｈｌ−フェ
ニル−１−プロピン　　Ｃ，Ｈ，ＣＨ。

プロパルジルアルコール　　　　ＨＯＣＨｔ　　　　　
Ｈ２−ブチン−１，４−ジオール　　ＨＯＣ佑　　　　
ＨＯｃＨ。

８−ブチン−１−オール　　　ＨＯ（ＣＨ２）ｔ　　　
Ｈ本発明はハロペルオキシダーゼ酵素全使用する。

そのような酵素はカルダリオマイセス・フマゴ（ＣａＬ
ｄａｒｉｏｍｙｃｇｓ　ｆｗｍａｇｏ　）から得られる
り０／Ｌ／ペルオキシダーゼ、藻から得られるブロムペ
ルオキシダーゼ、乳から得られるラクトペルオキシダー
ゼ、甲状腺から得られる甲状腺ペルオキシダーゼ、白血
球から得られるミエロペルオキシダーゼおよびホースラ
ディツシュ（ｈｏγ５ｅｒａｄｉｓｈ）から得られたホ
ースラディツシュペルオキシダーゼである。これらのハ
ロペルオキシダーゼのめるものは市販されている。

好捷しいハロペルオキシダーゼは所望の生成物に依存す
る。特定の・・ロペルオキシダーゼが使用できるハロゲ
ン化物は下表のとおりである：ハロベルオキシダーゼ　
　　　　ハロゲン化物ミエロペルオキシダーゼ　　　　
Ｃ１／−、ＢＴ−９Ｅクロルペルオキシダーゼ　　　　
ＣＦ−、Ｉｌｒ　、１−ラクトペルオキシダーゼ　　　
　　　Ｂｒ、ｒブロムペルオキシダーゼ　　　　　　Ｂ
ｒ、Ｉ−甲状腺ペルオキシダーゼ　　　　　　　　　「
便宜上、本発明の種々の態様を好適ペルオキシダーゼで
あるカルダリオマイセス・フマゴ（Ｃａｌｔｉａｒｉｏ
ｍｙｃｅｓ　ｆｕｔｎａｇｏ）から得られたりＣ１／ｌ
／ペルオキシダーゼの使用に関連付けてｉ［ｆコ、ｌ。

かし排他的でなく記載する。微生物力ルダリオマイセス
・フマゴ（Ｃａｌｄａｒｉｏｒｎｙｃｅｓ　ｆｗｔｎｎ
ｇｏ）はツアペック−ドックス（Ｃｚａｐｇｋ−Ｄｏｚ
　）培地中で室温で３〜１０日従来方法で静置または振
とう深部培養して生育させる。このハロゲン化酵素、す
なわちクロルペルオキシダーゼは静置条件下に生育され
た微生物の気菌糸パッドの水性ホモジネートからあるい
は静置または振と９深部培養条件下に生育された微生物
のｐ液から調製される。クールペルオキシダーゼ全調製
する詳細な説明は下記文献にある二 （１）Ｕ、Ｓ、Ｐａｔｅｎｔ　Ａ６４１２４７１６４１
１ｓｓｕｅｄｔｏ　Ｎｅｉｄｌｅｍａｎ、　ｅｔ　ａｌ
、＊　ｏｎ　Ｊａｎｕ、ａｒｙ　２７．２４Ｌ　　１７
６８−１７６８、（１９６６）；ａｎｄ　（８）　Ｃｏ
ｏｎｅＩＢ　ｅｔ　ａｌ、＊　Ｂｉｏｔｅｃｈ、　ｐｉ
ｏｅｎｇ、　１−６゜１０４５−１０５８、（１９７４
）。

ハロゲン化酵素は不動化した形でも使用できる。

酵素不動化方法は当業者ζこ周仰であり、広範囲の有機
又は無機支持体の１つと酵素溶液または酵素含有細胞の
懸濁液とを反応させることからなる。

これら支持体としてはポリアクリルアミド、エチレン−
マレイン酸共重合体、メメクリル酸全ベースとする重合
体、ポリペプチド、スチレンをベースとする重合体、ア
ガロース、セルロース、デキ（１７） ストラン、多孔性ガラスピーズ、アルミニウムまたはチ
タンの水酸化物がある。この形の酵素は安置、寿命、有
用性および回収性が増す。不動化酵素全使用する反応は
カラムまｆＣｉｔ、反応タンク中で行える。

ハロゲン化酵素の他ζこ、酸化剤が反応混合物中に必要
である。好適酸化剤、すなわち過酸化水素は混合物ζこ
直接１度ｌこ加えるか、あるいは連続してゆっくりと添
加する。他に、過酸化水素生成酵素系全便用すること番
こよりゆっくりと反応の場で生成させる。そのような酵
素系は当分野において周知であり、Ｄ−グルコース存在
下のグルコース−１−オキシダーゼ、Ｄ−グルコース存
在下のピラノース−２−オキシダーゼｌたはグルコース
−２−オキシダーゼ、Ｄ−およびＬ−メチオニン存在下
のＤ−およびＬ−アミノ酸オキシダーゼ、メタノール存
在下のメタノールオキシダーゼおよびヒスタミン存在下
のジアミンオキシダーゼである。

過酸化水素生成系はハロゲン化酵素と同様に不動化され
ない状態又は不動化された状態で存在する。

（１８） 過酸化水素はアントラキノンまたはインプロピルアルコ
ール酸化方法のような化学反応によっても生成される。

過酸化水素はアルケンまたはアルキンに対して好１しく
は約０．５　：　１ないし約５０：１のモル比、もつと
も好１しくけ約１＝１以下のモル比で存在する。好適モ
ル比は反応の間に平均的に存在させる過酸化水素の量に
依る。実際のモル比は通常、反応の間（こ変化し、ある
時は上記範囲より大きくまたは小でくなることもあろう
。他の適当な酸化剤はメチル、エチルまたはブチルペル
オキシドのような有機ペルオキシドである。

無機ハロゲン化物源も反応混合物ζこ必要である。

ハロゲン化物イオン源は水溶性ハロゲン化物のいずれで
もよい。好適ハロゲン化物イオン源はアルカリ金属であ
るナトリウム、カリウムおよびリチウムの塩化物、臭化
物およびヨウ化物である。ハロゲン化物イオンは４００
７？ＬＡ／より大きい濃度で存在する。

反応は約２．２〜約８６０のｐＨ範囲で行なわれる。

この反応のｐＨは緩衝剤の使用によって望ましい範囲内
（こ相持するのが好葦しい。適当な緩衝剤はナトリウム
ｔｙｃはカリウムのリン酸塩、グルコン酸塩、クエン酸
塩、フマール酸塩および酢酸塩をペースとする系である
。緩衝以外の他の適当な技−両全使用してｐＨ制御およ
び調節してもよい。

反応は水性媒体中で行なわれる。不発明の方法（こよっ
て転化できるアルケンおよびアルキンのいくつかは水性
媒体中で実質的に不溶であるが、反応のために充分な基
質溶解度を与える混合条件、あるいは他の分散様式下に
反応が充分ζこ生じる。

この反応は所望ならばあるいは必要ならば基質溶解度を
増大させるため（こ、低級脂肪族アルコール、ジオキサ
ン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドまた
はグリセリンを官有する水溶液のような水性有機溶媒混
合物の存在下に６行なわれる。

反応は好気条件下、１５℃〜約５０℃、好ましくは２０
℃〜約３０℃の温度範囲で行う。

前述の如く、反応混合物の各成分、すなわち、アルケン
又はアルキン、ハロゲン化酵素、酸化剤、ハロゲン化物
イオン源、および緩衝剤を水または混成水性または有機
媒体中で単ζこ混合し、一定時間、たとえば約８０秒な
いし約１時間振とうしてジハロゲン化生成物を得る。

アルケンについての反応は下記式で衣わされる：アルキ
ンζこついての反応は下記式によって表わされる： 本発明による反応で得られる生成物はガスクロマトグラ
フィー（ＧＣ）ζこよって火炎イオン化検出（ＦＩＤ）
ｋ使用して定量できる。反応混合物の（２１） ５１１ｅ　’？ｒ：ｒナノクスーＧＣＣ８Ｕ　〜ｌＬ］
ｔＪメ７シュ）全充填した１８０６ｍ（６フイート）Ｘ
４止のコイルを巻いであるガラスカラムを備エタバリア
ン（Ｖａｒｉａｎ）　３７　Ｕ　ＩＪ　Ｇ　Ｃに注入し
た。カラムでの流速は４０ｍ１１分のヘリウムにセント
シた。このカラム温度は各実施例に特定した温度で一定
であ６ように操作した；注入温度は２４０℃Ｉｃセント
シ、検出器の温度も２４．０　℃にセットした。

生成物はガスクロマトグラフィーーマスス４クトメ）　
ｌ−ＣＧＣＭＳ）ＩＣよって同定した。反応混合物１０
１ｔｅをテナソクス（Ｔｅｎａｘ）−Ｇ　Ｃ（８（Ｊ　
〜１（）Ｏメツシュ）充填した１８（ＪＧｍ（６フイー
ト）×４＋ｒｎｍのコイルを巻いたガラスカラムをＩｌ
ｔたフイニガ７　（Ｆｉｎｎｉｇａｎ）　４　Ｕ　２１
　Ｇ　Ｃ１ｖｆ　Ｓ　ＶＣ注入した。カラムの中の流速
はｄ　ｔ）　ｍｌ　／分のヘリウムにセントした。カラ
ム温度は各実施例の特定温度と等温になるように操作し
た；注入温度は２４０℃にセットし；ジェットセパレー
ターは２４０℃にセットした。マスス硬りトロメーター
げ７　ＩＪｅＶ電子１＃軍イオン化で操作した。

（２２） 下記例は本発明を説明するもので、限定するものではな
い。

例　　　ｌ 塩化カリウム（１，７ｒ；最終濃度２２９０ｍ＆）、ｐ
Ｈ；３．５のリン酸カリウム緩衝液（４，１＋、ｖ；　
８　％溶液　１８７＋ｄ；最縮濃度１２ｍＡ（）および
アリルアルコール（７０ｍｇ；最終濃度１２　ｍＭ：ｌ
１ＯｃＲｃＨ＝ＣＨ２；ウィスコンシン州ミルウオーキ
、アルドリッチ・ケミカル・カンパニーより市販）を常
温常圧で２５ｒｎｔパイレツクスフラスコ中で混合した
。

次いでハロぼルオキシダーゼ酵素であるクロルペルオキ
シダーゼ（０，４ｍｌ　）を加えた。最終の試薬の添カ
ロ後１５分で反応を完了した。

クロルイルオキシダーゼは下記のように製造した： カルダリオマイセス・ツマｄ　（ＣｏＬｌｄａｒｉｏｍ
’／ｃｅｓｆｕｍａｃｔｏ）Ａ’ｌ’ＣＣ１ｔＳ８’１
８（ＡＴＣＣより自由分譲されている。）の気菌糸パッ
ドをバレイショ寒天斜面で生育させた。スライスしたバ
レイショ（２１）　（Ｊ　ｆ　）を蒸留水（５０ｔ）祷
）中で４０分間ゆで、　　した。　　した溶液にグルコ
ース（２１？）と寒天（２Ｏｒ）を蒸留水（５０（Ｊ　
ｍＡ　）にとかした溶液を加えた。ｐＨを６．８に調節
１−１溶液を蒸留水で１リツトルにした。培地を１２１
”Ｃで１５分間滅菌した。

上記微生物を上記方法によってＳＮしたバレイショ寒天
斜面に接種し、約−週間室温で生育させた。次いで該微
生物を使用して大豆−グルコーｌ。

培地（５ｔＪ　ｍＡ　）に接種した。大ヴーグルコース
培地はｌ　ｌットルの蒸留水に抽出工程の大豆粉（３０
Ｖ）、グ＃：７−ス（８０？　）およびＣａＣＵｓＣ？
　？　）全添）Ｊｌ】することによって製造した。この
培地は１２１℃で８０分間滅菌し、次いで冷却後微生物
を接種した。

微生物を２５℃でロータリーシェーカー上で４〜５日間
生育させた。この培養物の５　Ｉｎｌを使用して１１１
０成の変性゛ツア被ツクードックス培地を含有ｆ６５０
０ｄエルレンマイヤーフラスコ［８ｍ（−た。このツア
ペック−ドックス培地は１リツトルの蒸留水にＮａＮ０
ｓＣ８ｆ　）、ＫＨ２ＰＯａ　（ｌ　ｆｆ　）、ＫＣｅ
（０，５ｙ　）、Ａ４ｇＳＣｈ・７Ｈ２（Ｊ　（Ｕ　、
５　ｆ　）　、ＦｅＳＯ４・’ＩＨ，Ｏ（１０／１＆　
）およびグルコース（４０ｆ）を添加することによって
製造した。この培地を１２１℃で２０分滅菌後に微生物
を接種した。

この微生物は室温で５〜７日間靜置装置下に生育させた
。形成した黒い気菌糸パッドを集め、蒸留水ですすぎ、
−１０℃のフリーザー中に貯蔵して次の使用に備えた。

ハロゲン化酵素は６気菌糸パツド（上記方法によって製
造）を６０１の酸洗浄済の砂と（３Ｑｍｌの蒸留水で２
分間バーチスＣＶｉｒｔｉｓ）　４５ホモジナイダー中
で粉砕することによって調製した。４スモジネートを冷
いうちに遠心分離し、上清溶液を・・ロゲン化酵素であ
るクロルイルオキシダ−ゼ源として使用した。

ＲＥクロルペルオキシダーゼ上清ヲワットマン４１Ｐ紙
を通して室温で濾過した。このＰ液をロータリーフイル
ムエノ（ボレーターで減圧下に低温（〈８５℃）で約１
０倍に濃縮した。この濃縮物を水浴中で０℃に冷却し、
あらかじめ冷却してお（２５） いた（０°Ｃ）エタノールケエタノールが４５〜（ｖ／
Ｖ）となるまで添加した。この混廿物を１５分間激しく
攪拌し、次いで一１０℃（１５ｏｕｏｆ）でソルバ＃　
（５ｏｒｖａｌ　）　ＲＣ−５スーパ〜スピード（５ｕ
ｐｅｒｓｐｅｅｄ）中５５−８４０−夕−で１５分間遠
心分離した。黒い沈澱物を捨てた。この遠心分離された
ものを０℃に冷却し、あらかじめ冷却しであるエタノー
ルをさらに加えてエタノールの割けを６５％（Ｖ／ｖ）
とした。この混合物を３０分間０℃でゆっくり攪拌し、
次いで前述のようにして遠心分離した。遠心分離したも
のを捨て、クロル波ルオキシダーゼ活性を有する沈澱物
をｌ　ｍｌの０．０５Ｍリン酸カリウム溶液（ｐＨ７）
に溶解させた。

この酵素溶液を一２０℃で貯蔵した。

各生成物を火炎イオン化検出（ｆ　ｌ　ａｍｅ　１ｏｎ
ｉｚα−１１ｏｎ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｃＦＩＤ）　）
を使用してガスクロマトグラフィーにより定量した。反
応混付物５μｅを、テナツクスＣＴｅｎａｘ）−Ｇ　Ｃ
（８０／メソシュ）を充填した６フイートＸ４１１１の
、コイルを巻いたガラスカラムを備えたパリアン（Ｖａ
ｒｉαｎ）３７＋）０ＧＣに注入した。このカラム？通
る流速をヘリウム４．　Ｑ　ｎｔｌ　／分にセットした
。カラム温度を１９０℃の等（話にし；注射温度金２４
１１　Ｃにセットし；検出４の温度も２４０℃にセント
した。

各生成物をガスクロマトグラフィーマススペクトロメ）
　ＩＪ−ＣＧＣＭＳ）で同定した。反応混合物１０　ｔ
ｉｌｌ　ｋ、’Ｔナツクスー　ＧＣ（８０〜１００メツ
シユ）　ｋ光ｊ１４した６フイートＸ４隨の、コイルを
巻いたガラスカラムを備えたフイニガン（Ｆｉｎｎｉ−
ｇａｎ）４０２１　ＧＣＭＳに注入した。カラムを通る
流速をヘリウム８０１１１７分にセットした。カラム温
度を１９０℃の等温にし、注入温度は２４０℃にセット
し、ジェットセパレーターも２４０℃にセットした。マ
ススペクトロメーターを７０　ｅＶ電子衝撃イオン化で
操作した。

４つの生成物が検出された。

主生成物はＧＣ保持時間６分で、２，３−ジクロル−１
−プロパツールを示すマススにクトルを示した：分子質
量イオンは検出されず；主断片質量イオンは質量９２お
よび９４（強度８：１；分子イオンからのＨＣｌの欠損
）、および質ｔ６２および６４（強度８　：　１　；　
ＣＨｚ＝ＣＨＣｇ＋イオン）であった。この生成物はア
ルドリッチ・ケミカル・カンパニーより市販の２．８−
ジクロル−１−プロパツールの標準サンプルのものと同
一のＧＣ保持時間および質量スペクトルを示した。

２つの副生成物はＧＣ保持時間７分と８分であって、ク
ロルプロパンジオールを示す質量スにりｌ・ルを示した
。７分の保持時間を有する生成物はｌ−クロル−２，８
−プロパンジオールと同定された：分子質量イオンは検
出されず；主断片質量イオンは質量７９およびｓｌ（強
ｉ８：ｌ；分子イオンよりＣＨ，ＯＨの欠損）、質ｔａ
ｌｃ分子イオンよりＣＭ、Ｃ１ｌの欠損）であった。保
持時間８分の生成物は２−クロル−１，３−プロパンジ
オールと同定された：分子質量イオンは検出されず；主
断片質量イオンは質量９２および９４（強度８：ｌ；分
子イオンよりＨ，Ｏの欠損）、および質量６２お、ｌ：
び６４（強度３　：　ｌ　；　ＣＨ２＝ＣＩＩ　Ｃｅ十
イオン）であった。

第三の副生成物はＧＣ保持時間１分であり、アクロレイ
ンを示す質量スペクトルを示した：分子質量イオンは質
量５６；主断片質量イオンは質量５５（分子イオンから
のＨの欠損）であった。

得られた生成物は下表にまとめである：生成物　　　　
　縮収率（％） ＣＨ２ＣＨＣＨ２５ １ ＣＢ−ＣＨ＝　ＣＨｌ　　　　　　１ 総収量＝５．４ダ さらに主生成物、すなわち２．３−ジクロル−■−プロ
パツールを、その反応混合物にｐＨがｌＯより犬になる
壕で石灰を添加することによりエピクロロヒドリンに転
化した。エピクロルヒドリンの同定は標準試料（アルド
リッチ・ケミカル・（２９） カンパニー）とガスクロマトグラフィーマススイクトロ
メトリーを比較することによって確認された。

また、主生成物２．８−ジクロル−１−プロパツールも
、その水性反応混合物ＶＣフラボバクテリウム（Ｆｌａ
ｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）　４１ｆ全細胞を添Ｖ口する
ことによって１９８１年１月２７日にＮｅ１ｄｌｅｒｔ
ｒｎｎ等に与えられた米国特許第４，２４７，６４１号
１１ｃ示されるとおりにエピクロルヒドリンに転化した
。

例　　　２ この実施列は反応物中のハロゲン化物のレベルをコント
ロールすることによってジハロ生成物対ハロヒドリンの
比をコントロールすることを示す。

（１）　　４化カリウムの代りに臭化カリウムを使用し
、（２）　　クロルイルオキシダーゼの代りにラクトぜ
ルオキシダーゼ（シグマ・ケミカル・カンパニー（ミズ
ーリ州、セントルイス）より市販、カタログ／１６Ｌ−
７１２９；反応物当り　０．５　ｍｂ　）を使用し、（
３）緩衝液のｐＨｔｌ−８，５でなく６．５に調整した
こと以外は例１の方法を繰返した。各反応物中（３０） の臭化カリウムの最終一度は各々１７　ｍＭ　Ｘ４２；
（ｍｌｖｌおよび９３８９　ｍＭであった。

ＧＣおよびＧＣＭＳによる生成物の分析は例１に概略が
示しである。

生成物の１つはＧ　Ｃ保持時間１６分であって、２．３
−ジブロム−１−プロパツールのマススペクトルを示し
た二分子上に２つの臭素原子を示す質量２１６．２１８
および２２０（強度１：２：ｌ）における分子質量イオ
ン；１８７および１８９、および１８６およびＩ８８（
両方とも強度１：１１各々分子イオンからのＢｒおよび
ｌｌＢｒの欠損）、および１０６および］０８（強度１
　：　１　；　Ｃｆｈ＝Ｃｆｌ−Ｂｒ＋イオン）におけ
る主断片イオン。この生成物は２，８−シブロム−１−
プロパツール（アルドリッチ・ケミカル・カン、ベニ−
よシ市販）の識準試料と同一のＧＣ保持時間およびマス
スペクトルを示した。

他の２つの生成物はｌ　ｌＪ分および１２分のＣ，Ｃ保
持時間を有し、ブロム−プロパンジオールを示すマスス
ペクトルを示した。ＧＣ保持時間が１．　ｌ）分でろ６
生成物はｌ−ブロム−２，８−プロパンジオールである
と同定され、分子イオンハ侯出されず、主萌片質量イオ
ンは質［１２８および１２５（強度ｌ：１、分子イオン
よりＣＨ２０１１の欠損）、および質量６１（分子イオ
ンよりＣｌＩ２１１ｒの欠損）であった。ＧＣ保持時間
が１２分である生成物は２−ブロム−１，８−プロパン
ジオールと同定され、分子電量イオンは検出せず、主断
片イオンは質量１８６および１８８（強度１：１；分子
イオンよりＨ，Ｏの欠損）、および質１１ｆ）６訃よび
１０８（強度１　：　１　；　Ｃｆ１２＝Ｃ１ｉ−１１
ｒ＋イオン）であつｆｃ。

反応混ｄ物中のハロゲン化物漉度に応じて得られろ生成
物を下表に１とめた： 総収量（％） Ｃｆｂ　ＣＨＣ＆　　１８　　（５５９ＢＣＨ２−ＣＨ
−ＣＨ，４８１９１ ＣＨ２’　ＣＨ−ＣＨｔ　　８９　１６　　１総収ｚ　
　　　５．１ｍ９１１．９ｍ９２０．８Ｉｎ９さらに、
生成物２．８−ジブロム−１−プロパツールを石灰また
はフラボバクテリウムＣＦｌａｖｏ−ｂａｃ　ｔ　ｅγ
ｉ　ｕｓ）種全細胞を添加することによって実施例１に
おけろようにエピブロムヒドリンに転化した。エピブロ
ムヒドリンの同定は標準サンプル（アルドリッチ・ケミ
カル・カンパニーよシ市販）とガスクロマトグラフィー
マススペクトルを比較することによって行なわれろ。

例　　　８ （１）　　臭化カリウムを単一のレベル（最終濃度８８
８９嬬）のみ添加し、（２）　　β−Ｄ−グルコ−（３
３） ス（２５ｉ＃）およびグルコース−１−オギシダーゼ（
ｌＪ、Ｕ　５　ＩＩＩｔ　；シグマ・ケミカル・カンパ
ニーより市販、カタログ／１６Ｇ−６５ＬＩＵ）を添〃
目することによって過酸化水素を反応の場で生成させた
以外は例２の方法を繰返した。この反応を２時間行なわ
せだ。

得られた生成物は下表のとおシである：生成物　　　総
収量Ｃ％） ＣＴｏ　ＣＨＣＨ２２ 総収量＝１２．２Ｉす 例　　　４ （］）　　ヨウ化ナトリウムを単一のレベル（１，２ｆ
；最終濃度８　ｉｌ　０　ｍＭ　）になるまで添加し、
（２）　　ラクト役ルオキシダーゼの代りにホースラデ
イノンユ（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ）　Ａｚルオキシダ
ーセ（２ｈＱ　；　、／りマ・ケミカル・カンパニー↓
す市販、カタログｙ１６Ｐ−ｄ　８７５　）を使用した
以外は例８の方法を繰返した。

３つの生成物を検出した。ＧＣカラム温度を２２０℃に
等温にセットしだ。

１つの生成物はＧＣ保持時間２８分であり、２．８−シ
ョート−１−プロパツールを示すマスス慇りトルを示し
た二分子質量イオンは検出されず；主断片質量イオン：
質ｔ２５４（Ｉ２＋イオン）、質量１８５（分子イオン
よりＩの欠損）、質量１２７　（Ｉ＋イオン）、質量５
７（分子イオンからＨＩ２の欠損）。

他の２つの生成物はＧ　Ｃ保持時間４分および６分であ
り、ヨードプロパンジオールを示す質量ス被りトルを示
した。保持時間４分の生成物は］−ヨード−２，８−プ
ロパンジオールと同定された：分子質量イオン：質量２
０２；主断片質量イオン：質ｉ１７１　（分子イオンか
らのＣＨ２０Ｈの欠損）および質量７５（分子イオンか
らのＩの欠損）。

保持時間６分の生成物は２−ヨード−１，８−プｏ　ハ
フジオールと同定されだ：分子′ｆ童イオン：質量２０
２：主断片質量イオン：實ｉｉ１５４　（分子イオンよ
りＣＨ，ＯＨ十〇Ｈの欠損）、質量１２７（Ｉ＋イオン
）および質量７５（分子イオンからのＩの欠損）。

分子状ヨウ素（Ｉ２）も形成された。

得られた生成物は下表にまとめである：生成物　　　　
総収量（％） 総収量−８，１９ 例　　　５ 塩化カリウムの代シに臭化カリウム（４ｆ；最終濃度８
８８９１７１Ａ／）を使用した以外は例１の方法を繰返
した。下記ヒドロキシ含有アルケン會便用して反応を行
なわせた；８−ブテン−１−オール：８−ブテン−２−
オール；および４−−２ンテンー１−オール（各々８．
６．８．６および１Ｏ０８■；最終濃度１２　ｍＭ　：
アルドリツチ・ケミカル・カンパニーより市販） ８−ブテン−１−オール（ＨＯＣＨｔＣＨ２ＣＨ２＝Ｃ
Ｈ２）については、８つの生成物が検出された。ＧＣカ
ラム温度は２００℃の等温にしだ。

主生成物はＧＣ保持時間１５分であり、■、２−ブロム
ー４−ブタノールを示す質量スペクトルを示した二分子
質量イオンは検出せず；主断片質量イオンは質量１８５
．１８７および１８９（強度１：２：１；分子イオンか
らＢｒの欠損）および質量１３８および１３５（強度１
：１；分子イオンから＆Ｏ＋Ｚ？　ｒの欠損）である。

２つの副生成物はＧＣ保持時間９およびｌＯ分テアリ、
ブロム−ブタンジオールを示す質量スペクトルを示した
。９分の保持時間を有する生成物はｌ−ブロム−２，４
−ブタンジオールと同定された；分子イオンは検出され
ず；主断片質量イオンは質量１５０および１５２（強度
１：１；分子（３７） イオンから１１２０の欠損）および質量１２８および１
２５（強度１：ｌ；分子イオンからのＣＨＤＩｐＨの欠
損）であった。保持時間１０分の生成物は２−プロムー
１，４−ブタンジオールと同定された。

８−プｆ　７−２−　オ＃　ＣＣＨｓＣＨＣＯＨ）ＣＭ
−ＣＨ２）については８つの生成物が検出された。ＧＣ
カラム温度は２００℃の等温にセットした。

主生成物はＧＣ保持時間１４分であって、■、２−ジブ
ロムー８−ブタノールを示す質量ス被りトルを示した：
分子イオンは検出されず、主断片質量イオンは質量２１
５．２１７および２１９（強度１　：　２　：　］、　
；分子イオンからのＣＰｌＢの欠損）、質量１８５．１
８７および１８９（強度ｌ：２：］；分子イオンからの
ＣＨｓ　ＣＨ−ＯＨの欠損）、質ｇ　４．５　（ｃｔｔ
、ｃＨ＝ｏＨ＋イオン）であった。

２つの副生成物はＧＣ保持時間８分および９分であり、
ブロムブタンジオールを示す質量ス被りトルを示す。保
持時間８分の生成物はｌ−ブロム−２，８−ブタンジオ
ールと同定した二分子イオンは検出されず、主断片質量
イオンは質ｉ１５８（３８） および１５５（強度１：ｌ：分子イオンからのＣＨ，（
Ｄ欠損）、質［１２１３および１２５（強度１：ｌ；分
子イオンからのＣＨ３ＯＫ−ＯＨの欠損）および質量４
５　（Ｃｌｌ５Ｃｆｌ＝ＯＫ＋イオン）であった。

保持時間９分の生成物は２ブロム−１，８−ブタンジオ
ールと同定された。

４−−２ンテンー１−オール（ＨＯＣＩＩ２ＣＩＩＣＨ
２ＣＨ＝ＣＨ，）については、８つの生成物を検出した
。ＧＣカラム温度は２００℃の等温にセットした。

主生成物の１つはＧＣ保持時間１８分であり、１．２−
ブロム−５−−′−２ンタノールを示す質＝縫スにクト
ルを示した：分子質量イオンは検出されず、主断片質量
イオンは質量１６５および１６７（強度ｌ：１；分子イ
オンからのＨＢｒの欠損）および質量１４７および１４
９（強度１：ｌ：分子イオンからの＆　Ｏ＋　Ｂ　ｒの
欠損）であった。

他の２つの生成物はＧＣ保持時間１２分および１３分で
あって、ブロム啄ンタンジオールヲ示ス質量ス（クトル
を示した。保持時間１２分金有する生成物はｌ−ブロム
−２，５−−２ンタンジオールと同定された：分子イオ
ンは検出されず；主断片質量イオンは質量１６４および
１６６（強度ｌ：１；分子イオンからのＨ２０の欠損）
、質量１２３および１２５（強度１：ｌ：分子イオンか
らのＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＱＨの欠損）であった。保持時
間１８分の生成物は２−ブロム−１，５−−′−！！ン
タンジオールと同定１〜だ。

下記表は得られた生成物をまとめたものである：生成物
別線１１７率 （ｎ＝Ｈ：　ｎ＝　１　） （ｎ＝ＣＨｓ　：　ｎ　＝　０　） （４１） （％） １５　　　　　　　　１８．８〜 ８　　　　　　　　１８．７り ５１　　　　　　　　　８．２１１り 例　　　６ アリルアルコールの代りに２−ブテン−１，４−ジオー
ル（１０，５η；最終濃度１２　ｍＭ；ＨＯＣＨ２（Ｉ
Ｉ＝ＣＨＣＨ２０Ｈ；アルドリッチケミカルカンパニー
より市販）を使用した以外は例１の方法を使用した。

１つの生成物が検出された。ＧＣカラム温度を２１０℃
に等温にセットした。

この生成物はＧＣ保持時間１２分であり、２．８−ジク
ロル−１，４−ブタンジオールを示す質量ス波りトルを
示した：分子質量イオンは検出されず；主断片装置イオ
ンは質量１２８および１２５（強度３：ｌ；分子イオン
からのＣ８の欠損）、および質量１０５および１０７（
強度８：１；分子イオンからのＣｅ　＋　Ｈ２０の欠損
）であった。

下表は得られた生成物音まとめたものである：生成物　
　　　　縮収率（％） °例　７ 臭化カリウム（４１；最終濃度３３８９　ｍＭ）を塩化
カリウムの代りに使用した以外は例６の方法を繰返した
。

３つの生成物が検出された。ＧＣ温度を２１０℃の等温
にした。

主生成物はＧＣ保持時間１９分であって２．８−ジブロ
ム−１，４−ブタンジオールを示す質量スＲクトルを示
した：分子質量イオンは検出されず；主断片質量イオン
は質１１１Ｊ８．２１ＪＯおよび２０２（強度１：２：
１；分子イオンがらのＣｌＩ２０ＨおよびＯｆｆの欠損
）、質量１６７および１６９（強度ｌ：１；分子イオン
からのＢγの欠損）、および質−ｌＩ１４９および１５
１（強度ｌ：１；分子イオンからのＢｒおよびｌＩ２０
の欠損）。

副生成物の１つはＧＣ保持時間１８分であり、２−ブロ
ム−１，８，４−ブタントリオールを示す質駄ス被りト
ルを示した二分子質量イオンは検出されず；主断片質量
イオンは質量１５８および１旬５（強度１：１；分子イ
オンからＩ７）　Ｃ１１２０Ｈの欠損）および質量１２
Ｂおよび１２５（強度１：１；分子イオンからｏ　ＣＤ
　（Ｏｆｆ　）　ＣＨｚ　ＯＩＩノ欠損）。

もう１つの副生成物は４−ヒドロキシ−２−ブテン−１
−アル（ＨＯＣＨ２Ｃｆ１＝ＣＨＣＪＩＯ）と同定され
た。

得られた生成物は下表に１とめた： 生成物　　　　　　　縮収率（％） ＣＨ２−ＣＨ−ＣＨ−ＣＨｚ　　　　　　　ｕ　ａＨ ＣＨ２−Ｃ，Ｈ＝ＣＨＣＨＯ２ 総収量＝１４□、２η （４４） 例　　　８ この実施例は反応物中のハロゲン化物のレベルをコント
ロールすることによってジハロ−生成物対ハロヒドリン
の比をコントロールすることを示す。

臭化カリウム（６０ｒｎ９および４９５６ｍ９；最終濃
度５１　ｍＡＩおよび４２００　ｍＡ（）、ｐＨ３，５
のリン酸カリウム緩衝液（１０１，０，Ｉ　Ｍ　）　、
過酸化水素（４，ＩＩＱ；最終濃度１２ｍＡ／）および
アリルクロリド（９１ダ；最終濃度１２　ｍＡ（；　Ｃ
ｅＣｌｌ２ＣＨ−ＣＨ２；アルドリッチ・ケミカル・カ
ンパニーヨリ市販）をいっしょに常温常圧で２５ａパイ
レツクスフラスコ中で混合した。ハロペルオキシダーゼ
酵素であるクロルぜルオキシダーゼ（Ｕ、４ｒｎ／）ｆ
：次いで加えた。最後の試薬の添加後１５分で反応を完
γした。

ＧＣとＧＣＭＳによる生成物の分析は例１に概略したと
おりである。ＧＣカラム温度は１９０℃の等温にセット
した。８つの生成物が検出された。

生成物の１つはＧＣ保持時間１５分でろり、（４５） １．２−／ブロムー８−クロルプロパンを示ス’Ｒ量ス
々クトルを示した二分子質鯖イオンは検出されず；主断
片質量イオンは質量１８５．１８７および１８９（強度
１：２：ｌ；分子イオンからＣＨ２Ｃｅ（Ｄ欠損）、質
量１５５．１５７おｆび１５９（強度８：４：１；分子
イオンからのＢｒの欠損）、質量７５および７７（強度
８：１；分子イオンからのＨＢ　ｒ　ｚの欠損）、質量
９３および９５（強度１　：　１　；　ＣＨ２＝Ｂｒ＋
イオン）および質量４９および５１（強度ｉ３　：　１
　；　ＣＨ２＝Ｃ，ｅ＋イオン）。

２つの生成物はＧＣ保持時間９分および１１分であり、
ブロムクロルプロパツールを示す質量スペクトルを示し
だ。１１分の保持時間を有する生成物は２−ブロム−１
−クロル−８−プロパツールと同定した二分子質量イオ
ンは質ｉ１　”７２．１７４および１７６（強度８：４
：１）であり分子−ヒの１つの臭素原子および１つの塩
素原子の存在を示し；主断片質量イオンは質１１８６お
よび１３８（強度１：ｌ；分子イオンからのＨＣＥの欠
損）、質量１１Ｊ　６および１０８（強度ｌ：１、＋ ＣＨ２＝ＣＨ−Ｂｒ　　イオン）、質量４９および５１
（強度８　：　１　；　Ｃ１１ｔ＝Ｃ（１＋イオン）。

９分の保持時間を有する生成物はｌ−ブロム−８−クロ
ル−２−プロパツールと同定された二分子質量イオンは
質量１７２．１７４および］７６（強度８：４：１）で
あり、分子−Ｆの１つの臭素原子および１つの塩素原子
の存在を示し；主断片質稍イオンは質量１２Ｂおよび１
２５（強度１：ｌ；分子イオンからＣＭ、　Ｃ８の欠損
）および質量７９および８１（強度８：ｌ；分子イオン
からのＣＤ、Ｂｒの欠損）。

反応混合物中のハロゲン化物の濃度に応じて得られた生
成物を下表に−まとめた： 総収率（％） Ｃ＆　　ＣＨＣＨ２４８２ 総収量　　　　８．５■　　１８．８１ｎ９例　　　９ アリルクロリドの代漫にアリルプロミド（１４，４■；
最終濃度１２　ｍＭ　；　Ｂ　ｒＣＨｔ＝Ｃ＆　：アル
ドリツチ・ケミカル・カンパニーよシ市販）を使用した
以外は例８の方法を繰返した。

８つの生成物が検出された。ＧＣカラム温度を１９０℃
の等温にセットした。

生成物の１つはＧＣ保持時間８１分であり、１．２．３
−）リプロムプロパンを示す質量スペクトルを示した二
分子質量イオンを検出せず；主断片質量イオンは質量１
９９．２０１および２（）８（４８） （強度１：２：ｌ；分子イオンからのＢｒの欠損）、質
ｔ１１９および１２１（強度１：ｌ；分子イオンからの
ｆｌＢｒ、の欠損）および質量９８および９５（強度１
　：　１　；　ＣＨ，＝Ｂｒ＋イオン）であった。

この生成物はアルドリッチ・ケミカル・カンパニーより
市販の１．２．３−トリブロムプロパンの標準試料と同
一の質量スペクトルを示した。

他の２つの生成物は各々１４分と１６分のＧＣ保持時間
を有し、ジブロムプロパノール類ヲ示す質量ス被りトル
を示した。保持時間１６分の生成物は２，８−ジブロム
−１−プロパノールト同定された二分子質量イオンは検
出されず；主断片質量イオンは質量１Ｂ？および１８９
（強度１：１；分子イオンからのＢＴの欠損）、質量１
８６および１３８（強度１：ｌ；分子イオンからのｆｌ
Ｂｒの欠損）、質量１０６および１０８（強度ｌ：１；
ＣｆＬ＝ＣＨｚ？ｒ＋イオン）および質量５７（分子イ
オンからのＨＢｒ、　　の欠損）。保持時間１４．分の
生成物は１．８−ジブロム−２−プロパツールト同定さ
れた。

（４９） 反応混合物中のハロゲン化物濃度に応じて得られる生成
物を下表に１とめた： 生成物　　　　総状率（％） ＣＨ２−ＣＨ−ＣＨｚ　　　２　　　７７総収量　　　
８．８Ｉｎ？１０．７ｒｖ例　　　ＩＯ アリルアルコールの代υにスチレン（■２η；最終濃度
１２　ｍｕ　；Ｃａ　Ｈ５−ＣＨ＝ＣｌＩ２　；　７　
Ａ／　）”す７ｆ−ケミカル・カンパニーより市販）を
使用した以外は例１の方法を使用した。

２つの生成物を検出した。ＧＣカラムの温度を２１０℃
の等温にセットした。

生成物の１つはＧＣ保持時間■ｏ分であり、１．２−ジ
クロル−１−フェニルエタンを示す質量ス４りｌ・ルを
示した二分子質量イオンは質重１７４、■７６および１
７８（強ＩＪｊｌＯ：６：ｌ）であって分子上に２つの
塩素原子を示し；主断片質量・イオンは質１１８９およ
びｈ口（強度３：１；分子イオンよシＣｅの欠損）、質
量１２５お°よび１２７（強度８：１；分子イオンよ勺
のＣＨ２Ｃｅの欠損）であった。

もう１つの生成物はＧＣ保持時間１２分であって、２−
クロル−１−フェニルエタノールヲ示ス實量ス被りトル
を示しだ：分子質−冴イオンは質量１５６および１５８
（強度３：１）であって分子上に１つの塩素原子を示し
；主断片質量イオ：／は質量１２０（分子イオンよりＨ
ｃｅの欠損）および質−１１０７（分子イオンより（Ｉ
Ｉ２Ｃｅの欠損）であった。

碍られた生成物を下表にまとめた： 生成物　　　　総状率（チ） 例　　　１１ この実施例はさらに反応物中のハロゲン化物の濃度をコ
ントロールすることによってジハロ生成物対ハロヒドリ
ンの比をコントロールすることを示している。

臭化プロミド（４７ｍｇおよび４９５６ＩＱ、各々最終
濃度４０　ｍＭおよび４２００　ｍＭ　）およびｐＨ８
，５のリン酸カリウム緩衝液（１０ｄ、０．ＩＭａｔ常
温常圧で５０１ｎｔのパイレックスフラスコ中でいっし
ょに混合した。エチレン（ＣＨ，＝ＣＨ２；ニューシャ
ーシー州リントバーストのマテソン・ガス・プロダクツ
（Ｍａｔｈｅｓｏｎ　Ｇａｓ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）よ多
重板）、すなわちガス状アルケンをゆつ〈シ（５２） （１０ｄ／分）連続して反応混合物に通気した。

１５分後、ハロイルオキシダーゼ酵素であるクロルぜル
オキシダーゼ（０，４ｍｌ　）　ｋ次いで添加した。

最後に過酸化水素（４，１１Ｑ；最終濃度１２　ｍＭ）
をカロえた。反応はこの最後の試薬を添加後１５分で完
了Ｌ−だ。

ＧＣおよびＧＣＭＳによる生成物の分析は例１に述べで
あるとおシである。ＧＣカラム温度は１７０　’Ｃの等
温にセットした。２つの生成物が検出された。

生成物の１つはＧＣ保持時間７分で１．２−ジブロムエ
タンを示す質量スペクトルを示した：分子質量イオンは
質量１８６．１８８および１９０（強度１：２：ｌ）で
あって分子上に２つの臭素原子を示し；主断片質量イオ
ンは質１）１１１Ｊ７およびｌ　Ｕ　９　（強度１：１
；分子イオンからのＨｒの欠損）、および質量９８およ
び９５（強度１：にＣＨ２＝　Ｂ　ｒ＋イオン）であっ
た。この生成物は１．２−ジブロムエタンの標準試料（
アルドリッチ・ケミカル・カンパニーより市販）と同一
のＧＣ保持（５３） 時間および質量スにクトル金示した。

他の生成物はＧＣ保持時間５分で２−ブロムエタノール
を示す質量スペクトルケ示した二分子質量イオンは質量
１２４および■２６（強度ｌ：１）であって分子上に１
つの臭素原子を示し；主断片質量イオンは質量１２Ｂお
よびＪ２５（強度ｌ：１；分子イオンからのＨの欠損）
および質量９８および９５（強度１　：　１　；　ＣＨ
２＝Ｂｒ＋イオン）であった。

反応物中のハロゲン化物の濃度に応じて得られる生成物
は下表のとおりである゛ 総状率（チ） １ ＣＨ２Ｃ１’ｂ　　　　１　　　　６５総収量１２．７
　ｍｇ　　　８．２ｍｇ例　　　１２ 臭化カリウムの代りに塩化ナトリウム（２８Ｉｎｙおよ
び２２ｔＪ４’、夕、各々最終濃度４０および８８（川
ｍｕ）ｋ使用した以外は例１１の方法を繰返した。

２つの生成物が検出された。ＧＣカラム濃度は１７０℃
の等温にセットした。

生成物の１つはＧＣ保持時間２分であり、■、２−ジク
ロルエタン金示すｉｔス被クりルを示した二分子質量イ
オンは實曖９８、ＩＬＪＵおよび１０２（強度Ｉ　Ｕ　
：　６　：　１　）であって分子上の２つの哩素原子を
示し、主断片質量イオンは質量６２および６４（強度８
：１：分子イオンよりＨＣｅの欠損）、および質量４９
および５１（強度８　：　１　；　Ｃ１１２＝Ｃｅ＋イ
オン）であった。この生成物は１．２−ジクロルエタン
の標準試料（アルドリッチ・ケミカル・カンパニーより
市販）と同一のＧＣ保持時間および質量ス被りトルを示
した。

他の生成物はＧＣ保持時間８分であり、２−クロルエタ
ノールを示す質量スイクトル全示した：分子質量イオン
は質量８０および８２（強度８：１）であって分子上に
１つの塩素原子を示しており；主断片質量イオンは質量
４ｇおよび５１（強度３　：　ｌ　：　ＣＨ２＝Ｃ１ｌ
＋イオン）　オヨＵ　質重４４（分子イオンからのＨＣ
ｌ！の欠損）であった。

反応混合物中のハロゲン化物の濃度に応じて得られる生
成物は下表に１とめた： 総状率（％） ＣＨ２−ＣＨｔ　　　９９　　５７ 総収量　　　　６．５＃１１ｉ＋４．２１ｎ９例　　　
１３ エチレンの代りにプロピレン（ＣＨｓ　Ｃ，Ｈ＝に’Ｈ
２：マテソン・ガス・プロダクツより市販）を使用し、
臭化カリウムの代りに臭化リチウム（８４ダおよび３６
１０Ｉｎｇ、最終濃度４０　ｍＭおよび４２００ｍＡＩ
）ｆｒ使用した以外は例１１の方法を繰返した。

３つの生成物が検出された。ＧＣカラム温度を１７０℃
の等温にセットしだ。

生成物の１つはＧＣ保持時間１０分で１．２−（５６） ジブロムプロパンを示す實凌スＲクトル？示した：分子
實１イオンは實１７２ＵＵ、２０２および２［）４（強
ＩＪｊｌ：２：１）で分子上に２つの臭素原子ケ示して
おり；主断片質量イオンは１２１および１２３（強度１
：ｌ；分子イオンからのＨｒの欠損）および質吐９３お
よび９５（強度１：１；Ｃ１１２＝Ｂｒ＋イオン）。こ
の生成物は１．２−ジブロム−フロパン標準試料（アル
ドリッチケミカルカンパニーより市販）と同一のＧＣ保
持時間および質量スペクトルを有していた。

他の２つの生成物は谷々Ｇ　Ｃ保持時間７．８と８２分
で、プロピレンブロムヒドリンを示す質量スペクトルを
示した。７．８分の保持時間を封する生成物は主生成物
たるブロムヒドリンであってｌ−ブロム−２−プロパツ
ールと同一であす；分子質量イオンは質量１３８および
１４０（強１蜆１：１）であって分子上に１つの臭素原
子を示し；主断片質量イオンは質量１２８および１２５
（す、酌Ｗ１：ｌ；分子イオンからのＣｌｌ３の欠損）
、嘗址４、５　ＣＣＩ−ｂｃＩｉ＝０１１＋イオン〕で
あった。８．２分の保持時間を有する生成物は２−ブロ
ム−１−プロパツールと同定された。

反応混合物中のハロゲン化物濃度に応じて得られる生成
物は下表にまとめだ： 総収量（チ） Ｂｒ　Ｂｒ １ ＣＨｓＣＨ−ＣＨ２１６９ 総収綾　　　１４．２＃ｊ１υ、８＋１り例　　　１４ ヒドロキシを有するアルケンの代りにプロパルジルアル
コール（６，７η；最終濃度１２　ｍＡＩ：ＨＯｃＨ２
ｃ＝　ＣＨ；アルドリッチ・ケミカル・カンパニーより
市販）を使用した以外は例５の方法を繰返した。

１つの生成物が検出された。ＧＣカラム温１ｔ１９０℃
の等温にセットした。

この生成物はＧＣ保持時間１５分で１，２−ジブロム−
１−プロイン−８−オールケ示す實鼠スペクトル金示し
た：分子質量イオンは２１４．２１６および２１８（強
度１：２：ｌ）であって、分子上に２つの臭素原子を示
し；主断片實址イオンは１８５および１３７（強度１：
ｌ；分子イオンよりＢｒの欠損）であった。

得られた生成物は下表に１とめである：総収量　　　　
　　　　７．５＋＋ｙ 例　　　１５ プロパルジルアルコールの代りに８−ブチン−１−オー
ル（８４ｈｒｇ：最終濃度■２γｎＭ　；ＨＯＣＨ２Ｃ
＆ＣミＣＨ；アルドリッチ・ケミカル・カンパニーよシ
市販）を使用した以外は例１４の方法を使用した。

１つの生成物が検出された。ＧＣカラム臨度を２１Ｊ　
ｔ１℃に等温にセットした。

生成物はＧＣ保持時間１４分であって、■、２−ジブロ
ム　ｌ−ブテン−４−オールを示す質量ス４クトルを示
した：分子質量イオンは質ｔ２２８．２８０および２８
２（強度１　：２　：１）であって分子上の２つの臭素
原子を示し；主断片質量イオンは質量１９８．２　ｔ）
　０オヨヒ２０２　（強度１：２：ｌ；分子イオンから
のＣＨｚＯの欠損）および質量１４９および１５１（強
度１：１；分子イオンからのＢｒの欠損）であった。

得られた生成物は下表に１とめである：総収量−９，１
Ｍ９ 例　　　１６ プロパルギルアルコールの代シに２−ブチン−１，４−
ジオール（１０，８ｍ９　；最終濃度１２ｍＡＣＨＯＣ
Ｈ２ＣＥ　ＣＣＨｘ　ＯＨ；アルドリッチケミカルカン
パニーより市販）を使用した以外は例１４の方法を１吏
用した。

２つの生成物が検出された。ＧＣカラム温度を（６０） ２１０℃の等温にセットした。

主生成物はＧＣ保持時間１７分であって、２．３−ジブ
ロム−２−ブテン−１，４−ジオールを示す質量スにク
トルを示した二分子質量イオンは質量２Φ４（，２４６
，２４８（強度１　：　２　：　１．　）で心って分子
上の２つの臭素原子を示し；主断片管量イオンは質量２
２６．２２８．２８０（強度１：２：１；分子イオンか
らのＨ，０の欠損）および質量１４？および１４９（強
度１：１；分子イオンからのＢ　ｒ　十Ｈｔ　Ｑの欠損
）であった。

副生成物は４−ヒドロキシ−２−ブチン−１−アールＣ
ＨＯＣＨｔＣＥＣＣＨＯ）と同定された。

下表に得られた生成物を１とめた： Ｈ （Ｊｌ、ＣＥ　Ｃ−ＣＨＯ２ 総収量８．９ｍｇ 例　　　１７ （６１） ２−ブテン゛−１，４−ジオールの代りに１−フェニル
　ｌ−プロピン（１４，１ｍ９；最終濃度１２ｍＡｌ　
；ＣＪＩｓ　Ｃ＝ＣＣＨ＊　；アルドリッチケミカルカ
ンパニーより市販）を使用した以外は例６の方法を繰返
した。

２つの生成物を検出した。ＧＣカラム温度を２２０°Ｃ
の等温にセットした。

１つの生成物はＧＣ保持時間９分で１．２−ジクロル−
１−フェニル−１−プロ波ン’ｒ　示ｆ　’Ｊｌ　ｔス
Ｒクトルを示しだ二分子質量イオンは質量１８６．１８
８および１９０（強度１０：６：１）であって分子上に
２つの臭素原子を示し；主断片質量イオンは質量１１５
　（分子イオンからのＨＣｌ１２　　の欠損）であった
。

他の生成物はＧＣ保持時間１２分で１．１−ジクロルエ
チルフェニルケトンを示ｆ’Ｒ量ス！り）ルを示しだ：
分子質量イオンは検出されず；主断片質量イオンは質量
１６６および１６８（強度８：ｌ；分子イオンからのＨ
ＣＩＩの欠損）、質量１０５　（ＣｎＨｓＣ＝Ｏ＋イオ
ン）および質量７７（Ｃ６Ｈｓ−’イオン）であった。

反応混合物中のハロゲン化物の濃度に応じて得られる生
成物を下表に徒とめだ； 生成物　　　総収率（１ １ ＣａｌｌｙＣＣＣＣｅ）２（ＪＪＩｓ　　　　　５７総
収量　８．’１ｍ９ 例　　　１８ エチレンの代りにメチルアセチレン（ＣＢ３Ｃ＝Ｃｊｌ
：マテソンガスプロダクツより市販）を使用した以外は
例１１の方法を繰返した。

４つの生成物が検出された。ＧＣカラム湿度を１７０℃
の等温にセットした。

１つの生成物はＧＣ保持時間９分で１．２−ジブロム−
■−プロペンを示す質量スペクトルを示した：分子質量
イオンは質量１９８．２１ＪＯおよび２０２（強度１：
２：１）であって分子上の２つの臭素原子を示し；主断
片質量イオンは質量１、１９および１２１（強度１：１
；分子イオンからのＢＴの欠損）であった。

もう１つの生成物はＧＣ保持時間７分であり、ブロムア
セトンを示す質量スペクトルを示した二分子質量イオン
は１１６および■８８（強度１：１）であって分子上の
１つの臭素原子を示し；主断片質量イオンは質量９Ｂお
よび９５（強度１：１　ｐ　ＣＨ２＝Ｂｒ＋イオン）お
よび質量５７（分子イオンからのＢＴの欠損）であった
。

他の２つの生成物はＧＣ保持時間１８分および１７分で
あって、ジブロムアセトンを示す質量ス波りトルを示し
た。保持時間１８分の生成物は１．１〜ジブロムアセト
ンと同定された：分子質量イオンは質量２１４．２１６
および２１８（強度１：２：１）であって分子上の２つ
の臭素原子を示し；主断片質量イオンは質量１７１．１
７Ｂおよび１７５（強度１：２：１；分子イオンからの
ＣＨ３ＣＯの欠損）および質ｆ＋　８　ＣＣＨ，Ｃ三〇
＋イオン）であった。保持時間１７分の生成物は１．８
−ジブロムアセトンと同定された二分子質（６４） 量イオンは質量２１４．２１６および２Ｊ８（強度１：
２：１）であって分子上の２つの臭素原子を示し；主断
片質蓄イオンは質量１２１および１２３（強度１　：１
；分子イオンからのＣＨ，Ｂｒの欠損）および質量９Ｂ
および９５（強度１：ｌ；Ｃ１１２＝ｌｌｒ＋イオン）
であった。

反応混合物中のハロゲン化物の濃度に応じて得られる生
成物を下表に１とめた： Ｂｒ　Ｂｒ ＣＨｓＣ＝　ＣＨ１５８ １ Ｃ１ｉ３ＣＣＨ，Ｂｒ　　　　８０　　　　１１ ＣＨ，ＣＣＨＢｒ２４２　　　　４０ １ Ｚ？　ｒ　ＣＨ２ＣＣＨ２Ｂｒ　　　２７　　　　１総
収量　　　　　１３．１１ｎ９８．９９例　　　１９ Ｃ６５） アリルアルコールの代りに２−シクロヘキセン−１−オ
ール（１１，８ダ；最終濃度１２ｍＭ；Ｃ６Ｈ１ｏＯ；
アルドリッチ・ケミカル・カンパニーよシ市販）を使用
した以外は例２の方法を繰返した。

反応物中の臭化カリウムの最終濃度は各々４０ｍＭおよ
び４２００　ｍＭであった。

８つの生成物が検出された。ＧＣカラム温度を２００℃
の等温にセットした。

生成物の１つはＧＣ保持時間８分で、１．２−ジブロム
−８−シクロヘキサノールを示ｔ　質ｔス被りトルを示
した二分子質量イオンは質量２５６．２５８および２６
ｏ（強度１：２：１）であって、分子上の２つの臭素原
子を示しており；主断片質量イオンは質量１７？および
１７９（強度１：１；分子イオンからのＢｒの欠損）、
質量１５９および１６１（強度１：１；分子イオンから
のＢｒ十Ｈ２０の欠損）および質ｔ９７（分子がらＨＢ
ｒ、の欠損）である。

他の２つの生成物はＧＣ保持時間５分で１−ブロム−２
，８−シクロヘキサンジオールおよヒ２−ブロムー１．
８−シクロヘキザンジオールヲ示す質量ス４クトルを示
した二分子質量イオンは検出せず；主断片質量イオンは
質１ｉＬ′１９８および■９５（強度１：１；分子イオ
ンからＨの欠損）、質量１７７および１７９（強度１：
１；分子イオンからＯＨの欠損）、質量１１４（分子イ
オンからのｆｌＢｒの欠損）および質量９７（分子イオ
ンからのＢｒ＋ｌＩ２０の欠損）であった。

反応混合物中のハロゲン化物の濃度に応じて得られた生
成物は下表に１とめた： 総収量（％） 総収量　　　Ｌ　Ｌ８ｍ９　１５．８＃Ｉｐ」［−一親 ｌ）　クロルペルオキシダーゼの代りにラクトペルオキ
シダーゼ（Ｑ、５ｕＡ；シグマ・ケミカル・カンパニー
）を使用し、２）エチレンの代りに１，８−ブタジェン
（ＣＨｚ＝ＣＨＣｆ１＝Ｃｆ１２；マテソンガス（ｌげ
αｔんｅｓｏｎ　Ｇａ５）社よシ市販）を使用した以外
は例１１の方法全使用した。反応はｐｆ１６．５の燐酸
カリウム緩衝液中で行なった。

５つの生成物が検出された。ＧＣカラム温度を最初１７
０　’Ｃにセットし、次いで１０　℃／分の割合で２５
０℃捷で上昇させた。

生成物の１つはＧＣ保持時間は６分で、１．２−ジブロ
ム−８−ブテンを示す質量スペクトルを示した：分子質
量イオンは検出されず；主断片質量イオンは質量１８８
および１８５（強度１：ｌ；分子イオンからのＢｒの欠
損）、質量９８および９５（強度１　：　１　；　Ｃｆ
１２＝Ｂｒ＋イオン）および質量７９および８１（強度
１：１＋Ｚ？ｒ＋イオン）もう１つの生成物はＧＣ保持
時間８分であって１−ブロム−８−ブテン−２−オール
を示す質量ス４クトルを示した二分子質量イオンは検出
されず；主断片質量イオンは質−１４９および１５１（
強度１：１；分子イオンからのＨの欠損）、質量１２８
およびｊ２５（強度１：１；分子イオン力・らのＣ２Ｈ
５の欠損）、質量７１（分子イオンからのＢｒの欠損）
、および質量５７（分子−イオンからのＣＨ２Ｂｒの欠
損）であった。

もう１つの生成物はＧＣ保持時間１０分で、１．２．４
４リプロム−８−ブタノールを示す質量スにクトルを示
した二分子質量イオンは検出されず；主断片質量イオン
は質−［２２９，２８１および２８３（強度１：２：１
；分子イオンからのＢｒの欠損）、質量２１５．２１７
および２１９（強度］：２：ｌ；分子イオンからのＢ　
ｒ　十ｃＨ２Ｑｌｌの欠損）、および質１ｉ１２Ｂおよ
び１２５（強度ｌ：１；分子イオンからのＱ、Ｈ，Ｂｒ
２の欠損）であった。

他の２°つの生成物は各々ＧＣ保持時間７分および８分
で、ジグロムブタンジオールを示す質量ス波りトルを示
した。７分の保持時間を有する生成物が主たる異性体で
１．４−ジブロム−２，８−ブタンジオールと同定され
た：分子質量イオンは検出されず；主断片質駄イオンは
質量Ｉ　Ｉｓ　６および１６８（強度１：１；分子イオ
ンからの１ＩＢｒの欠損）、質量１５８および■５５（
強匣１：ｌ；分子イオンからのＣ１１２Ｂｒ　　の欠損
）、および質量１２８および１２５（強度１　：　１　
；　ＢｒＣＪＩ２ＣＨ＝ＯＨ＋−ｆオン）。

８分の保持時間を有する生成物は１，３−ジブロム−２
，４−ブタンジオールと同定された。

反応混合物中の・・ロゲン化物の濃度に応じて得られる
生成物を下表にまとめだ： 総収率（チ） 本明細書に記載した以外の本発明の柚々の変形は前述の
記載が当業者には明らかとなろう。そのような変形も特
許請求の範囲の範曲内にあるものである。

％　許出ＡＭ　人　　　シータス・コーポレーション化
　理　人　弁理士　　湯　浅　恭　三（外４Ｉ名）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）アルケンおよびアルキンから隣接ジノ・ロゲン化
   生成物を製造する方法でおって、反応容器にノ・ロゲン
   化酵素、酸化剤およびハロゲン化物イオン源の反応混合
   物を入れ、アルケンまたはアルキンを該反応容器に導入
   し、該アルケンまたはアルキンを隣接ジハロゲン化生成
   物に転化するに充分な時間上記アルケンまたはアルキン
   を上記反応混合物と接触させつづけることからなる方法
   。 （２）ハロゲン化酵素が微生物力ルダリオマイセス・フ
   マゴ（Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ　ｆｒｂｍｎｇｏ　
   ）、藻〜乳、甲状腺、白血球およびホースラディツシュ
   （西洋わさび（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ　）　）からな
   る群より選択されたペルオキシダーゼである特許請求の
   範囲第１項記載の方法。 （８）酸化剤が過酸化水素である特許請求の範囲第１ま
   たは２項記載の方法。 （１） （４）上記ハロゲン化物イオン源がアルカリ金属である
   ナトリウム、カリウムおよびリチウムの塩化物、臭化物
   およびヨウ化物からなる群から選択された水溶性ハロゲ
   ン化物である特許請求の範囲第１．２または８項記載の
   方法。 （５）反応がｐＨ約２．２ないし約８．０で行なわれる
   特許請求の範囲第１または４項記載の方法。 （６）過酸化水素が反応混合物中にアルケンまたはアル
   キンに対するモル比的０．５：１ないし約５０：１で存
   在する特許請求の範囲第８項記載の方法。 （７）　　過酸化水素が反応の場で生成される特許請求
   の範囲第８項記載の方法。 （８）ハロゲン化物イオンが反応混合物中４００ｍ　Ｍ
   より昼いレベルで存在する特許請求の範囲第１項記載の
   方法。 （９）ハロゲン化酵素が微生物カリダリオマイセス・フ
   マゴ（Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ　ｆｕｍａｇｏ　）
   、ラクトペルオキシダーゼおよびホースラディツシュ（
   ｈｏｒｅ−ｒａｄｉｓｈ）からなる群より選択されるも
   のであり、酸化剤が過酸化水素であり、ハロゲン化物イ
   オン（２） 源がナトリウム、カリウムおよびリチウムの塩化物、臭
   化物およびヨウ化物からなる群から選択され、反応は水
   性媒体中常温常圧で行う特許請求の範囲第１項記載の方
   法。 （助隣接ジノ・ロゲン化生成物が消石灰との反応（こよ
   りエポキシドに転化される特許請求の範囲第１項記載の
   方法。 （ｎ）隣接ジ・・ロゲン化生成物がノ・ロヒドリンエポ
   キシダーゼによって酵素によりエポキシドに転化される
   特許請求の範囲第１項記載の方法。 （１２）　アルケンがエチレン、フロピレン、アリルク
   ロリド、アリルプロミド、アリルアルコール、２〜ブテ
   ン−１，４−ジオール、２−ブテン−１＝オール、８−
   ブテン−１−オール、４−ペンテン−１−オール、２−
   シクロヘキセン−１−オール、１．８−ブタジェン、ア
   クリル酸メチルおよびスチレンからなる群より選択され
   る特許請求の範囲第１項記載の方法。 （ａアルキンがメチルアセチレン、プロパルジルアルコ
   ール、３−ブチン−１−オール、２−ブチ（３） ノー１．４−ジオールおよび１−フェニル−１−プロピ
   ンからなる群から選択される特許請求の範囲第１項記載
   の方法。