JPS58106441A - 生化学試料中のクロモゲンの測定法 - Google Patents
生化学試料中のクロモゲンの測定法Info
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- JPS58106441A JPS58106441A JP20594381A JP20594381A JPS58106441A JP S58106441 A JPS58106441 A JP S58106441A JP 20594381 A JP20594381 A JP 20594381A JP 20594381 A JP20594381 A JP 20594381A JP S58106441 A JPS58106441 A JP S58106441A
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
- G01N21/314—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry with comparison of measurements at specific and non-specific wavelengths
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- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
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- G01N21/314—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry with comparison of measurements at specific and non-specific wavelengths
- G01N2021/3148—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry with comparison of measurements at specific and non-specific wavelengths using three or more wavelengths
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
この発明は血清などの臨床生化学試料中のクロモゲン成
分、特にヘモグロビン、ビリルビン及び乳ビ成分の測定
法に関する。
分、特にヘモグロビン、ビリルビン及び乳ビ成分の測定
法に関する。
一般に臨床生化学試料として血清が多用されているが溶
血があると赤血球中のヘモグロビンが血清中に溶出し、
また血球中の他の成分も血清中に混入することになる。
血があると赤血球中のヘモグロビンが血清中に溶出し、
また血球中の他の成分も血清中に混入することになる。
血球中にはＬＤＨ（乳酸脱水素酵素）等の酵素が多情
に含まれているから、溶血した血清は生化学試料として
不適となることが多々ある。 また黄痘の患者の血清に
はビリルビンが多情に含まれその址が黄痘症状の指標と
なる。 従って、血清中のヘモグロビンやビリルビンの
量が簡便にかつ正確に測定できれば臨床分野の検査にお
いて価値ある情報が得られる。 また上記２成分以外の
乳ビ成分を含めて血清中のクロモゲン成分の測定を簡便
かつ正確に行えれば、血清中の他の成分（例えば比濁法
にエフ測定される項目としてβ−リボ蛋白などがある）
の分析をクロモゲン成分の分析結果で補正してより正確
に行うことができる。 この発明はクロモゲン成分のヘ
モグロビン、ビリルビン及び乳ビ成分が可視光域での吸
収スペクトルを異にすることを利用し、少なくとも三つ
の波長における吸光度を測定しこの測定値に基づいて演
算させることを基本原理とするものである。 すなわち
この発明は、生化学試料の、可視光域の８波長λ１、Ａ
２及びＡ３における吸光度を測定し、得られた各吸光度
測定値Ａλ１．Ａλ２及びＡ＾３について下記連立方程
式：％式％ 〔式中、εＨλ１、εＨλ２及びε■λ、はそれぞれク
ロモゲン成分であるヘモグロビン（Ｈ）のＡ１、Ａ２及
びＡ３ の波長における分子吸光係数； εＢλ１、Ｃ
Ｂ４及びεＢλ３はそれぞれクロモゲン成分であるビリ
ルビン（Ｂ）のＡ１、Ａ２及びＡ３の波長における分子
吸光係数； εＴλ１、εＴλ２及びεＴλ、はそれぞ
れクロモゲン成分である乳ビ成分（ηのＡ１、Ａ２及び
Ａ３の波長における分子吸光係数；ｂｌ、ｂ２及びｂ３
はそれぞれ試料の吸光度Ａλｌ、Ａλ２及びＡλ３測定
特定時ル長＋ ＣＨ，ＣＢ及びＣＴはそれぞれ試料中
のヘモグロビン、ビリルビン及び乳と成分の各濃度〕を
演算してＣＨ，Ｃｎ及びＣＴを算出し、試料中のクロモ
ゲン成分のヘモグロビン、ビリルビン及び乳ビ成分の各
濃度を測定することを特徴とする生化学試料中のクロモ
ゲンの測定法を提供するものである。
に含まれているから、溶血した血清は生化学試料として
不適となることが多々ある。 また黄痘の患者の血清に
はビリルビンが多情に含まれその址が黄痘症状の指標と
なる。 従って、血清中のヘモグロビンやビリルビンの
量が簡便にかつ正確に測定できれば臨床分野の検査にお
いて価値ある情報が得られる。 また上記２成分以外の
乳ビ成分を含めて血清中のクロモゲン成分の測定を簡便
かつ正確に行えれば、血清中の他の成分（例えば比濁法
にエフ測定される項目としてβ−リボ蛋白などがある）
の分析をクロモゲン成分の分析結果で補正してより正確
に行うことができる。 この発明はクロモゲン成分のヘ
モグロビン、ビリルビン及び乳ビ成分が可視光域での吸
収スペクトルを異にすることを利用し、少なくとも三つ
の波長における吸光度を測定しこの測定値に基づいて演
算させることを基本原理とするものである。 すなわち
この発明は、生化学試料の、可視光域の８波長λ１、Ａ
２及びＡ３における吸光度を測定し、得られた各吸光度
測定値Ａλ１．Ａλ２及びＡ＾３について下記連立方程
式：％式％ 〔式中、εＨλ１、εＨλ２及びε■λ、はそれぞれク
ロモゲン成分であるヘモグロビン（Ｈ）のＡ１、Ａ２及
びＡ３ の波長における分子吸光係数； εＢλ１、Ｃ
Ｂ４及びεＢλ３はそれぞれクロモゲン成分であるビリ
ルビン（Ｂ）のＡ１、Ａ２及びＡ３の波長における分子
吸光係数； εＴλ１、εＴλ２及びεＴλ、はそれぞ
れクロモゲン成分である乳ビ成分（ηのＡ１、Ａ２及び
Ａ３の波長における分子吸光係数；ｂｌ、ｂ２及びｂ３
はそれぞれ試料の吸光度Ａλｌ、Ａλ２及びＡλ３測定
特定時ル長＋ ＣＨ，ＣＢ及びＣＴはそれぞれ試料中
のヘモグロビン、ビリルビン及び乳と成分の各濃度〕を
演算してＣＨ，Ｃｎ及びＣＴを算出し、試料中のクロモ
ゲン成分のヘモグロビン、ビリルビン及び乳ビ成分の各
濃度を測定することを特徴とする生化学試料中のクロモ
ゲンの測定法を提供するものである。
この発明の測定法によれば簡便且つ正確に血清などの生
化学試料中のクロモゲン成分を分析できる。 その結果
、臨床試料としての適否の判定、生化学試料中のクロモ
ゲン以外の成分の分析値の補正やレート分析法において
検体ごとに異なるレート測定範囲の修正が可能となる。
化学試料中のクロモゲン成分を分析できる。 その結果
、臨床試料としての適否の判定、生化学試料中のクロモ
ゲン以外の成分の分析値の補正やレート分析法において
検体ごとに異なるレート測定範囲の修正が可能となる。
この発明の測定法を行う装置は生化学試料について可視
光域の三つの波長における吸光度を測定する部分と、得
られた吸光度測定値に基づいて前記連立方程式を演算し
てクロモゲン成分であるヘモグロビン（Ｈ）、ビリルビ
ン（Ｂ）及び乳と成分（Ｔ）の濃度を算出する部分とで
構成され、例えば高滓自動生化学分析装置ＣＬ−８０形
を用いることができる。
光域の三つの波長における吸光度を測定する部分と、得
られた吸光度測定値に基づいて前記連立方程式を演算し
てクロモゲン成分であるヘモグロビン（Ｈ）、ビリルビ
ン（Ｂ）及び乳と成分（Ｔ）の濃度を算出する部分とで
構成され、例えば高滓自動生化学分析装置ＣＬ−８０形
を用いることができる。
次にこの発明の測定法について詳しく説明する。
まず血清試料について６５０ｎｍ、５７５ｎｍ 及び４
５０ ｎｍにおける吸光度Ａｓ５ｏ 、Ａ１１７５及び
Ａ４６゜を測定する。 第１図に４００〜７００ ｎｍ
の範囲におけるＨ、Ｂ及びＴ各成分の吸光度曲線（それ
ぞれ１，２及び８）と８成分混合液の吸光度曲線（４）
を示したがＢ成分は５５０ｎｍ以上では殆んど吸光しな
い。 従って上記の測定した各吸光度は下記の式によっ
て表すことができる。
５０ ｎｍにおける吸光度Ａｓ５ｏ 、Ａ１１７５及び
Ａ４６゜を測定する。 第１図に４００〜７００ ｎｍ
の範囲におけるＨ、Ｂ及びＴ各成分の吸光度曲線（それ
ぞれ１，２及び８）と８成分混合液の吸光度曲線（４）
を示したがＢ成分は５５０ｎｍ以上では殆んど吸光しな
い。 従って上記の測定した各吸光度は下記の式によっ
て表すことができる。
Ａ１１５０ ”ＡＨａｓｏ ＋ＡＴ６５０ −
−−− ａＡ５ｒｓ ＝ＡＨ１１７５＋ＡＴｓｙｓ
−−＝−ｂＡ４５Ｇ ＝ＡＨ４５０＋ＡＢ４ＳＯ
＋ＡＴ４６Ｇ−−−・ｃ〔式中、ＡＨｓｓｏとＡＴｌ１
５０はそれぞれ６５０ｎｍにおけるＨ成分とＴ成分の吸
光度ｉ Ａ Ｈｇ２Ｆ２とＡＴｓｙｓはそれぞれ５７５
ｎｍにおけるＨ成分とＴ成分の吸光度ｉ Ａ Ｈ４ｇｏ
、 Ａ Ｂ２Ｓ３及びＡ Ｔ４１１Ｇはそれぞれ４５
０ｎｍにおけるＨ、Ｂ及びＴ各成分の吸光度〕そして各
成分の一定波長における吸光度は、各成分の分子吸光係
数、吸光度測定時のセル長、各成分の濃度の積で表され
、例えばＡ■ａｌＩＯについては次のとおりである。
−−− ａＡ５ｒｓ ＝ＡＨ１１７５＋ＡＴｓｙｓ
−−＝−ｂＡ４５Ｇ ＝ＡＨ４５０＋ＡＢ４ＳＯ
＋ＡＴ４６Ｇ−−−・ｃ〔式中、ＡＨｓｓｏとＡＴｌ１
５０はそれぞれ６５０ｎｍにおけるＨ成分とＴ成分の吸
光度ｉ Ａ Ｈｇ２Ｆ２とＡＴｓｙｓはそれぞれ５７５
ｎｍにおけるＨ成分とＴ成分の吸光度ｉ Ａ Ｈ４ｇｏ
、 Ａ Ｂ２Ｓ３及びＡ Ｔ４１１Ｇはそれぞれ４５
０ｎｍにおけるＨ、Ｂ及びＴ各成分の吸光度〕そして各
成分の一定波長における吸光度は、各成分の分子吸光係
数、吸光度測定時のセル長、各成分の濃度の積で表され
、例えばＡ■ａｌＩＯについては次のとおりである。
ＡＨ６５Ｇ＝εＨ＠５０°ｂ１°Ｃｌ
（式中εＨａｓ ＯはＨ成分の分子吸光係数；ｂｌはセ
ル長； Ｃ１ｌは■１１式の濃度） 従って前記ａ、ｂ及び０式は次のように表すことができ
る。
ル長； Ｃ１ｌは■１１式の濃度） 従って前記ａ、ｂ及び０式は次のように表すことができ
る。
Ａ＠ｓＯ＝ε１ｌａｓｏ°ｂ１’ｃｏ＋εＴ６５０６ｂ
１０ＣＴ −・・・・・−ａＡ５７５−＝εＨ５
７６・ｂ２・Ｃ１ｌ＋εＴ５７．・ｂ２・ＣＴ
・・目・・・−・・・・・・・ｂＡ ａ ｓ ｏ−εＨ
４５０”ｂａ ・Ｃ１＋εＴ５７−ｂａ・ｃＢ十εＴ４
５０’ｂ３’ Ｃｒ−−ｃ（式中ε＋ＩａａｏとεＴａ
ａｏは６５０ｎｍＫおけるＨとＴ成分の分子吸光係数：
εＨ５７５とεＴ５７５は５７５ ｎｍにおける１１
とＴ成分の分子吸光係数；εＨ４５Ｑ ％εＢ４５０及
びεＴ４ｓｏは４５０ｎｍＶＣおけるＩＩ、Ｂ及びＴ成
分の分子吸光係数； ｂｌ 、 ｂ２及−びｂａはセル
長； ＣＨ−ＣＢ及びＣ１・はＩＩ、Ｂ及びＴ成分の＃
度〕この８元連立方程式をこの発明の装置で演算するこ
とによってＣＨｌＣＢ及びＣＴが算出される。
１０ＣＴ −・・・・・−ａＡ５７５−＝εＨ５
７６・ｂ２・Ｃ１ｌ＋εＴ５７．・ｂ２・ＣＴ
・・目・・・−・・・・・・・ｂＡ ａ ｓ ｏ−εＨ
４５０”ｂａ ・Ｃ１＋εＴ５７−ｂａ・ｃＢ十εＴ４
５０’ｂ３’ Ｃｒ−−ｃ（式中ε＋ＩａａｏとεＴａ
ａｏは６５０ｎｍＫおけるＨとＴ成分の分子吸光係数：
εＨ５７５とεＴ５７５は５７５ ｎｍにおける１１
とＴ成分の分子吸光係数；εＨ４５Ｑ ％εＢ４５０及
びεＴ４ｓｏは４５０ｎｍＶＣおけるＩＩ、Ｂ及びＴ成
分の分子吸光係数； ｂｌ 、 ｂ２及−びｂａはセル
長； ＣＨ−ＣＢ及びＣ１・はＩＩ、Ｂ及びＴ成分の＃
度〕この８元連立方程式をこの発明の装置で演算するこ
とによってＣＨｌＣＢ及びＣＴが算出される。
又、６５０ｎｍを主波長とする６ ５０ ｎｍと７５０
ｎｍとの２波長測定、５７５ｎｍを主波長とする５７５
ｎｍと６５０ｎｍとの２波長ｆｌｌ１１定、４５０ｎｍ
を１１１ 主波長とする４５０ｎｍと５００ｎｍとの２波長測定Ｉ
ｃ Ｊ： ル吸九度測定値のＡ ｓｓｏ −ｔｓｏ ｓ
Ａ ６７１１−ａｓｏ、Ａ ４１１０−５（Ｉｇ Ｖ
Ｃ基づいて演算することもｔｉＪ来る。
ｎｍとの２波長測定、５７５ｎｍを主波長とする５７５
ｎｍと６５０ｎｍとの２波長ｆｌｌ１１定、４５０ｎｍ
を１１１ 主波長とする４５０ｎｍと５００ｎｍとの２波長測定Ｉ
ｃ Ｊ： ル吸九度測定値のＡ ｓｓｏ −ｔｓｏ ｓ
Ａ ６７１１−ａｓｏ、Ａ ４１１０−５（Ｉｇ Ｖ
Ｃ基づいて演算することもｔｉＪ来る。
更に、１個のセル中の試料に複数の波長光を照射して吸
光度を測定する多波長光度側による方法や、８個のセル
中の試料にそれぞれ異なった波長を照射して吸光度’ｔ
６＋１１定する方法でも、この発明の方法を実施出来
る。
光度を測定する多波長光度側による方法や、８個のセル
中の試料にそれぞれ異なった波長を照射して吸光度’ｔ
６＋１１定する方法でも、この発明の方法を実施出来
る。
次に１（、Ｂ及びＴの標準液とこれらＨ，Ｂ及びＴを含
有する混合溶液を調製しこの発明の装置で混合溶液中の
Ｈ，Ｂ及びＴの各濃度を測定した試験結果を示す。
有する混合溶液を調製しこの発明の装置で混合溶液中の
Ｈ，Ｂ及びＴの各濃度を測定した試験結果を示す。
（１）試料
Ｈがｏ、 １〜６ｆ／ａ、Ｂが０．１〜０．５ ｔｑ
／ ａ、Ｔが８〜１５ｕ（クンケル単位；ポリスチレン
ラテックス０．５０μｍ）の各種濃度の混合液を作製し
た。 この溶液’ｉ５０倍容蓋のトリス緩衝液（ｐＨ７
，５）で希釈したものを測定用試料とした。
／ ａ、Ｔが８〜１５ｕ（クンケル単位；ポリスチレン
ラテックス０．５０μｍ）の各種濃度の混合液を作製し
た。 この溶液’ｉ５０倍容蓋のトリス緩衝液（ｐＨ７
，５）で希釈したものを測定用試料とした。
（２）分析装置
高滓自動生化学分析装［ＣＩ、−８０形を用いた。
（３）分析結果
分析結果は下記表に示したが調製濃度と測定値とは極め
て↓〈一致している。
て↓〈一致している。
第１図は血清試料の吸光度曲線を示すグラフである。
（Ｉト・ヘモグロビンの吸光度曲線、
（２）・・・ビリルビンの吸光度曲線、（３１・・・乳
ビ成分の吸光度曲線及び（４）・・・ヘモグロビン、ビ
リルビン及び乳ビ成分混合液の吸光度曲線。
ビ成分の吸光度曲線及び（４）・・・ヘモグロビン、ビ
リルビン及び乳ビ成分混合液の吸光度曲線。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、生化学試料の、可視光域の８波長λ１、λ２及びス
３における吸光度を測定し、得られた各吸光度測定値Ａ
λ１．Ａλ２及びＡλ３について下記連立方程式： ％式％ 〔式中、εＨλ１、εＲλ２及びεＨλ、はそれぞれク
ロモゲン成分であるヘモグロビン（■）のλｌ、＾２及
び ′λ３の波長における分子吸光係数； εＢλ１
、εＢλ２及びεＢλ３はそれぞれクロモゲン成分であ
るビリルビン（Ｂ）のλ１、λ２及びλ１の波長におけ
る分子吸光係数； εＴλ１、ετλ２及びεＴス、は
それぞれクロモゲン成分である乳と成分（Ｔ）のλｌ、
＾２及びλ３の波長における分子吸光係数；ｂｌ、ｂ２
及びす、はそれぞれ試料の吸光度Ａλ１、Ａλ、及びＡ
＾３測定時のセル長；ＣＩ ＣＢ及びＣＴはそれぞれ
試料中のヘモグロビン、ビリルビン及ヒ乳ビ成分の各濃
度〕 を演算してＣＨ，ＣＢ及びＣＴを算出し、試料中のクロ
モゲン成分のヘモグロビン、ビリルビン及び乳と成分の
各濃度を測定することを特徴とする生化学試料中のクロ
モゲンの測定法。 ２、血清試料について可視光域の長波長６５０ｎｍ付近
、中波長５７５ｎｍ付近及び短波長４５０ｎｍ付近にお
ける吸光度を測定することによって血清試料中のクロモ
ゲンを測定する特許請求の範囲第１項記載の測定法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20594381A JPS58106441A (ja) | 1981-12-18 | 1981-12-18 | 生化学試料中のクロモゲンの測定法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20594381A JPS58106441A (ja) | 1981-12-18 | 1981-12-18 | 生化学試料中のクロモゲンの測定法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58106441A true JPS58106441A (ja) | 1983-06-24 |
Family
ID=16515280
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20594381A Pending JPS58106441A (ja) | 1981-12-18 | 1981-12-18 | 生化学試料中のクロモゲンの測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58106441A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0258150A2 (en) * | 1986-08-29 | 1988-03-02 | Measurex Corporation | System for measurement of traveling webs |
| CN106644970A (zh) * | 2016-09-30 | 2017-05-10 | 华南理工大学 | 一种利用紫外‑可见分光光度法同时测定溶液中亚甲基蓝和二价铜离子的三波长光谱方法 |
-
1981
- 1981-12-18 JP JP20594381A patent/JPS58106441A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0258150A2 (en) * | 1986-08-29 | 1988-03-02 | Measurex Corporation | System for measurement of traveling webs |
| CN106644970A (zh) * | 2016-09-30 | 2017-05-10 | 华南理工大学 | 一种利用紫外‑可见分光光度法同时测定溶液中亚甲基蓝和二价铜离子的三波长光谱方法 |
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