JPH11513027A - 化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は組み合わせの化学、特に組み合わせライブラリーの合成に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 化合物 本発明は、組み合わせ化学、特に、生活性分子の同定に用いることができる組 み合わせライブラリーの合成に関する。 近年、種々の細胞受容体分子たとえば、細胞表面受容体、酵素または抗体など の作用物質または拮抗物質として薬理活性を有する小分子の産生および同定に対 する要求が増大してきている。歴史的には、薬理活性な分子の同定法は、単一の 化合物の調製とそれに続く生物学的試験を特徴とし、これは時間を要し、また労 力集約的で、非能率的である。 多数のランダムに選択された化合物を生物学的活性に関してスクリーニングす るのに要する時間および費用を低減する研究において、主要化合物を見いだすた めの化合物のライブラリーを得るために固相合成と組み合わせてペプチドまたは ヌクレオチドの使用が開発されてきた。たとえば、ペプチドおよび樹脂間の選択 的に開裂可能なリンカーを提供でき、一定量のペプチドを樹脂から遊離でき、配 列化可能な場合に樹脂に結合したままのペプチドもある状態で可溶形態で分析で きる方法を開示するレブル（Ｌｅｂｌ）ら、インターナショナル・ジャーナル・ オブ・ペプタイド・アンド・プロテイン・リサーチ(Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐ ｒｏｔ．Ｒｅｓ.)、４１、ｐ２０１（１９９３）；ポリスチレンまたはポリアク リルアミド樹脂などの固体支持体上での線状ペプチドの合成法を開示するラム( Ｌａｍ)ら、ネイチャー(Ｎａｔｕｒｅ)、３５４、ｐ８２（１９９１）およびＷ Ｏ９２／０００９１；ブロック上に、９６−ウェルマイクロタイタープレート中 のウェルの配列に対応するように配列された誘導化ポリスチレンピン上でのペプ チドの合成を開示するゲイセン（Ｇｅｙｓｅｎ）ら、ジャーナル・オブ・イムノ ロジー・アンド・マスマティックス(Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍａｔｈ.)、１０２ 、ｐ２５９（１９８７）；および可溶性ペプチドプールを含む抗体または受容体 結合配列を新たに決定する方法を開示するホーテン（Ｈｏｕｇｈｔｅｎ）ら、ネ イ チャー（Ｎａｔｕｒｅ）３５４、ｐ８４（１９９１）およびＷＯ９２／０９３０ ０参照。 「ライブラリー」または「組み合わせライブラリー」なる用語は、個々の化合 物の集まりを意味し、各化合物が共通の中心構造を有し、ライブラリーが異なる 数の独立して変化しうる置換基、官能基または構造エレメントを含む場合、そし てさらにはライブラリーを、独立して変化しうる置換基のそれぞれに関して選択 された化学部分について、これらの置換基のすべての可能な順列を含む化合物が ライブラリー中に存在するようにデザインする。このように、Ｒと表示される中 心構造が、Ｘ、ＹおよびＺと表示される３つの独立して変化しうる置換基を含む 場合に、Ｘがｍ個の異なる化学部分から選ばれ、Ｙがｎ個の異なる化学部分から 選ばれ、Ｚがｐ個の異なる化学部分から選ばれる場合に（ｍ、ｎおよびｐはライ ブラリーの大きさを決定する自然数であり、１から１０００の間；好ましくは１ から１００の間；もっとも好ましくは１から２０の間の範囲である）、ライブラ リーはｍ×ｎ×ｐ個の異なる化合物を含み、すべての可能なＸ、ＹおよびＺの組 み合わせがライブラリーの範囲内の中心構造Ｒ上に存在する。典型的なライブラ リーは、典型的には２ないし１００００またはそれ以上の化合物を含み、１００ ００以上の化合物を含むことが多い。 化合物のライブラリーを合成し、スクリーンすると、個々の活性な化合物を同 定できるようなスクリーニングの結果を解析する方法がなければならない。多く の解析法がありうる。たとえば、ライブラリーを一つの化合物が同定されるまで 複雑さが減少した混合物を再合成する反復法により解析できる。特に、サブライ ブラリーはそれ自身スクリーンできる。たとえば、１００成分のメインライブラ リーが活性である場合、１０成分の１０サブライブラリーをスクリーンできる。 この方法はサブライブラリーにおいて置換基の１つ、すなわち導入する最後の置 換基を同定でき、一定に保つことができるので有利である。しかし、この方法は 時間がかかるという大きな欠点を有する。 ライブラリーの解析後、望ましい生物学的活性を有する１つの化合物、または 比較的少数の化合物を通常同定する。この化合物は別の構造的に関連したライブ ラリーまたは単一の化合物の調製のためのリードとして働くことができる。ライ ブラリーをビーズ上で合成する場合、ビーズの集合を通常スクリーンし、生物学 的活性が検出される場合には、単一のビーズをスクリーンし、活性化合物を同定 する。 生物学的に活性な化合物の複雑な混合物からの同定は時間がかかり、困難があ る。したがって、効率的に医薬上活性なライブラリーとして調製された化合物を 同定する改良法が必要とされる。 この問題についての一法は、化学的「標識」をライブラリーの構築中の各合成 段階で導入することにより合成ビーズを「標識する」概念である。特定の合成ビー ズ上の化学的標識の性質はしたがってそのビーズの合成歴を決定し、構造決定を 容易にする。たとえば、カー（Ｋｅｒｒ）ら、ジャーナル・オブ・アメリカン・ ケミカル・ソサイエティーＪ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ.)、１１５、ｐ２５ ２９（１９９３）［エドマン（Ｅｄｍａｎ）配列化により「解読」できるペプチ ドコーティングストランドの使用を開示する］、およびオールマイヤー（Ｏｈｌ ｍｅｙｅｒ）ら、プロシーディングズ・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・ サイエンシズ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ）、９０、ｐ１０９２２ （１９９３）（電子捕捉キャピラリーガスクロマトグラフィーにより「解読」で きる分子標識を開示する）参照。標識ビーズを用いた化合物同定についての重要 な要件は、化合物がスクリーニング工程の間中ずっと原ビーズと結合または会合 したままでなければならないことである。 あるスクリーニング法は、生物学的に活性な化合物の可溶性混合物からの分離 に依存する。たとえば、チュー（Ｃｈｕ）ら、ジャーナル・オブ・アメリカン・ ケミカル・ソサイエティ（Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ.）１１７、ｐ５４ １９（１９９５）はもっともしっかりと受容体に結合するこれらのリガンドの組 み合わせライブラリーからの分離に関するアフィニティーキャピラリー電気泳動 の使用を開示する。このようなスクリーニング法において、化合物のその原ビー ズとの以前の結合、したがって「標識」中に含まれていた構造的情報が失われる。 化合物を単一の合成ビーズから同定するのに質量分析を用いることができるこ とも確立されている。たとえば、チェン（Ｃｈｅｎ）ら、ジャーナル・オブ・ア メリカン・ケミカル・ソサイエティ（Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ.）１１ ６、ｐ２６６１(１９９４）、およびスタンコバ（Ｓｔａｎｋｏｖａ）ら、ドラ ッグ・デベロプメンツ・リサーチ(Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．Ｒｅｓ.)、３３、ｐ１４ ６（１９９４）参照。しかし、多数の化合物が組み合わせライブラリー中に存在 する場合、多くの化合物が同一の公称分子量を有する確率は高い。このことが、「 マスリダンダンシー」と称する現象につながり、これは化合物が分子量だけでは 区別できないことを意味する。マスリダンダンシーは高分解能で分子量を測定す ることにより軽減でき、最終的には、同一の実験式を有する化合物だけが区別で きない。 本発明は、ライブラリー中の各化合物がこの特定の化合物の同定物として働く 独自の分子量を有するという原則に基づく。本発明は生物学的に活性な化合物の 同定法、特に、単一の生物的に活性なビーズ由来の化合物の同定法を提供する。 この方法の標識合成ビーズに比較しての利点は、まず第一に、本発明は標識化学 反応に適合する必要がなく、また追加的な非生産的合成段階を導入する必要がな いので組み合わせライブラリーの合成に用いる化学反応の性質にいかなる制限も 加えず、第二に、本発明を用いることにより、化合物は、必要ならばビーズと結 合することなく同定できることである。標識が必要でないという事実は、明らか に有利である。別の利点は、高分解能質量分析に頼ることなくその公称質量によ り化合物を同定する能力である。もちろん、同定する必要がなくても、フラグメ ンテーションパターンの高分解測定および分析を更なる配置の証拠について用い ることができる。 本発明は組み合わせによりつくられた化合物ライブラリーにおけるマスリダン ダンシーの制御法であって、化合物をその分子量により同定することからなる方 法を提供する。 好ましくは、分子量は質量分析により測定する。好ましくは、前記方法を単一 のビーズ由来の化合物を同定するのに用いる。 ２またはそれ以上の化合物が同一の公称分子量を有する場合、本発明により塩 素と臭素原子の天然の同位体分子量パターン、または他の人工的に同位体を豊富 にした原子または分子の取り込みを可能にし、さらにその範囲および有用性を広 げることが可能になる。本発明の方法によりデザインされた構造は、その公称質 量および同位体パターンを測定することにより明瞭に特徴づけることができるこ とは当業者には明らかである。 本発明をさらに詳しく説明する。 １．発明の背景 本発明は以下の観察に基づく選択法による。連続した自然数が以下に例示する ようにｃ列およびｒ行の表に並んでいて、２組の数字を、セット１が全部同じ列 から選ばれた数字を含み（最大のセットサイズｒ）、セット２がそれぞれ異なる 列から選択した数字を含む（最大セットサイズｃ）ように選択されている場合、 それぞれのセットから選んだいかなる数字の組の足し算によっても、他の同じよ うな対になった組み合わせによりできる合計と異なった合計が得られ、最大（ｒ ×ｃ）の独自の組み合わせができる。 実施例１．１ １００自然数の列（ｃ＝１０，ｒ＝１０） この表から選択できる最大の組は それぞれ１０の数字を含み、このようなセ ット２つ、すなわち、イタリック体のセット１（同じ列）と、太文字のセット２ （異なる列）の対の合計を以下に示す。これを見ると、全ての合計は独自である こと は明らかである。 この特定の選択について、１００の独自の値は１２ないし１８８の範囲にある 。また同じ数値（この場合２３）が両セットに存在しうることは明らかである。 実施例１．２ ７８自然数の列（ｃ＝１３、ｒ＝６） この表は、列（ｃ）数を変更する効果を表す。すなわちｃが変わると、特定の 列内の配列中の数字が変わる。この観察例の意味を以下に説明する。 この１３×６表から選択した２組の対の和を以下に示し、５ないし１４５の範 囲の７８個に独自の値が得られる。 ２．組み合わせライブラリー置換基の選択への方法の適用 組み合わせライブラリーは数字の位置に置換基（すなわちＲ−基）を有する共 通の「中心」構造を有する関連する化合物の混合物と定義される。 個々のライブラリ中では、すべての成分は同じ中心構造を有するが、１または それ以上の位置に異なる置換基を有する。このように、ジペプチドのライブラリ ーにおいて、共通の中心構造はペプチド主鎖骨格であり得、異なるＲ−基はアミ ノ酸側鎖を表す。 典型的な非ペプチドライブラリーにおいて、共通の中心構造は複数置換された 環系、たとえばパラ−ジアニリドで、おそらく異なるアシル化剤由来の種々のＲ 基を有する。 前記方法は、異なる列数の表上にみられる置換基の公称分子量のマッピングに よる置換基選択に応用できる。このようにして得られたチャートは列数に等しい 「周期数」を有すると定義される。異なる種類の試薬（たとえば、Ｒ−ＣＯＣｌ 、Ｒ−ＮＣＯ）について異なるチャートが得られる。置換基の組の選択は、以下 の３つの規則に従わなければならない。 規則１ セット１およびセット２は同じ周期数のチャートから選択しなければ ならない。 規則２ セット１の要素はすべて同じ列から選択しなければならない（そして 異なる数でなければならない）。 規則３ セット２の要素はすべて異なる列から選択しなければならない。基の 残りの部分は一定の質量を付加し、ライブラリーの中心構造の一部と見なされる ので、決して必要でないが単に試薬の異なるＲ−基、すなわちＲ−ＣＯＣｌ、Ｒ −ＮＣＯ、Ｈ₂ＯＣＨ（Ｒ）ＮＨ₂のＲをマップするのが好都合である。Ｃｌおよ びＢｒを含有する基の場合、最低の同位体重量（それぞれ３５または７９）のみ を用いる。 実施例２．１ スモールデータセット：天然のアミノ酸 アミノ酸ではこの方法の特徴を説明するのに都合の良い大きさのデータセット ができる。親アミノ酸の標準的３文字コードにより表される１９アミノ酸側鎖( プロリンを除く)をチャート１中にその分子量に関して並べる。 チャート１ アミノ酸側鎖、周期数１０ 規則は列からの選択を要するので、できたチャートは質量数を無視し、列を圧 縮することによりずっと簡素化できる。同重体グループを同じ線上に示す（Ｇｌ ｎ／ＬｙｓおよびＬｅｕ／Ｉｌｅ）−明らかに、各ペアから１つだけ選択される 。 チャート２ アミノ酸側鎖、周期数１０ セット１（同列）は最高４個の基（たとえば、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｈｉｓ、Ｐｈ ｅ）を含み、セット２（異なる列）は最高８個（たとえば、Ｇｌｙ、Ｌｙｓ、Ｖ ａｌ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ）を含む。したがって、合計３ ２個の独自のジペプチドが生じうる。この操作を１６列の表について繰り返すと 、チャート３ができる(簡素化後)。 チャート３ アミノ酸側鎖、周期数１６ この場合、最高５（セット１）×９（セット２）＝４５個の独自の公称重量の ジペプチドが得られる。 前記チャートからいくつかの一般的視点が観察される： ・置換基の選択は、同じ列から選択されるセット１についてもっとも制限され る。チャート２の場合、１つの列において４個の置換基を選択するのに１とおり しかない。すなわち、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ(１列)。３個の置換基だ けが必要な場合、７通りが可能である。たとえば、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｐｈｅ（１ 列）またはＣｙｓ、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ(７列)。 ・異なる列からの選択についての順列の数は相当であり、チャート２の場合、 ４×２×２×３×４×１×１×２＝３８４である。 ・列の最初の数を変えると、全く異なる組の置換基が並ぶ(たとえば、チャー ト２においてＡｌａ、Ｔｈｒ、Ｍｅｔ、チャート３においてＡｌａ、Ｓｅｒ、Ｃ ｙｓ)。 実施例２．２ 非ペプチドライブラリーへのより大きなデータセットの応用 非ペプチドライブラリーは通常非オリゴマーであり、多くの置換基を有する中 心構造からなることが多い。典型的には、置換基は類似の試薬のセット由来であ る。たとえば、Ｒ¹およびＲ²基の一方または両方は酸塩化物試薬Ｒ¹ＣＯＣｌお よびＲ²ＣＯＣｌ由来である。 多数の酸塩化物が化学文献において知られており、多くは市販されている。チ ャート４はその公称分子量に関して周期数１０のチャート上に本発明の方法にし たがって配列された酸塩化物の小選択範囲のＲ基を示す。基は同重基と区別する ための文字を後に付けたその公称重量で区別する。組み合わせライブラリーにお いて使用するための置換基のセットを選択するためのチャート４の使用を以下に 例示する。 規則２を用いたセット１の選択（同列からの選択） チャート４を見ると最高１０個の異なる公称重量の基が７列から選択されるこ とがわかる。たとえば、２７ａ、５７ａ、６７ａ、７７ａ、８７ａ、１０７ａ、 １１７ａ、１２７ａ、１３７ａおよび１４７ａ。多くのより小さい組をチャート ４のこの列および他の列から選択できる。 規則３を用いたセット２の選択（異なる列からの選択） チャートにおける列の数なので（周期数＝１０）、チャート４の異なる列から 最大１０個の基を選択できる。たとえば、７１ａ、１０２ａ、８３ａ、１７４ａ 、１４５ａ、１３６ａ、１２７ａ、７８ａ、６９ａおよび１７０ａで表示される 基を含む組み合わせなど、このような組を多数選択できる。 適当な中心構造と組み合わせて、前記セット１および２から１０×１０＝１０ ０個の異なる公称質量の化合物が得られる。 チャート４ 酸塩化物置換基の選択、周期数１０ ３．方法の範囲を広げるための同位体パターンの使用 ２つの化合物が同じ公称質量（Ｍ）を有するが、異なる数のＣｌおよびＢｒ原 子を含む場合、これはそのＭ＋２、Ｍ＋４などの同位体パターンにより区別され る。したがって、選択規則を以下のように拡張する。 規則４ 規則２および３のいずれか（両方でない）をそれぞれ規則５および６ と置き換える。 規則５ セット１の要素は同じ列から選択しなければならず、同位体パターン （すなわちＣｌ、Ｂｒ数）が異なると仮定して、同じ質量でありえる。 規則６ セット２の要素は、各列から選択されたすべての要素が異なる同位体 パターン（すなわち、異なるＣｌ、Ｂｒ数）を有すると仮定して、いずれかの列 から選択しなければならない。 実施例３．１ セット１を拡張するための規則５の適用 チャート４の７列を見ると、重量１１７の３つの基（すなわち、１１７ａ、１ １７ｂおよび１１７ｃ）はすべて、それぞれ０、１および３個の塩素原子を含む ので包含されることがわかる。同様に、それぞれ０および１個の塩素原子を有す る基も包含される。対照的に、１２７ａと１２７ｂの基は、同重で、その同位体 含量によって区別できないので、両方とも包含されない。修飾セット１ａは１３ 個の基、すなわち、２５ａ、５７ａ、６７ａ、７７ａ、８７ａ、１０７ａ、１１ ７ａ、１１７ｂ、１１７ｃ、１２７ａ、１３７ａ、１４７ａおよび１４７ｂを含 む。セット２と組み合わせて、この修飾したセットで１３×１０＝１３０の区別 可能な化合物ができる。 実施例３．２ セット２を拡張するための規則６の適用 チャート４の１列を見ると、基１１１ａおよびすでに選択した基７１ａはそれ ぞれ０および１個の塩素原子を含むので１１ａを７１ａに加えて用いることがで きることが明らかになる。同様に、５列において、基１２５ａ（塩素１個）、１ ４５ｂ（塩素２個）および１５５ａ（臭素１個）を添加でき、７列から同様に１ １７（塩素１個）および１１７ｃ（塩素３個）を添加できる。修飾セット、セッ ト２ａは１６個の基、すなわち、７１ａ、１１１ａ、１０２ａ、８３ａ、１７４ ａ、１４５ａ、１２５ａ、１４５ｂ、１５５ａ、１３６ａ、１２７ａ、１１７ｂ 、１１７ｃ、７８ａ、６９ａおよび１７０ａを包含する。セット１と組み合わせ て、この修飾セットは１０×１６＝１６０の区別可能な成分をもたらす。 ４ さらなる範囲への方法の拡張 今まで記載した規則により、選択される２組の置換基が得られ、これを組み合 わせると、独自の「自己コード化」産物が得られる。大きさ１０の組は容易に達 成され、最高２０までの種々のセットサイズも非現実的でない。ライブラリーが ３つの可変部位を有する中心構造を含む場合、これは、第三の置換基のセットを 自由に選択し、生成物を別のサブライブラリーとして保存することにより得られ る。すなわち第三の変数をそのサブライブラリーにより決定する。ほとんどの分 析系がある種の分画（たとえばウェル中）または拡散（たとえばメラノフォアプ レート上）を含むので、サブライブラリーの混合により、このようなことを行う うちで失われる構造情報に比べてほとんど得るものはない。セット３がセット１ および２と同様の大きさである場合、１０００（１０×１０×１０）ないし８０ ００（２０×２０×２０）成分の範囲の自己コード化ライブラリーがデザインで きることは明らかである。 中心構造が４つの可変部位を含む場合、更なるコード化段階、すなわちコード されたセット１、２および３、サブライブラリーとしてセット４が必要である。 置換基の第三組の選択は以下の規則７にしたがってなされる。 規則７ ＣｌおよびＢｒを含有する基をセット１および２から除く。各要素が 異なる数のＣｌおよびＢｒ原子または同位体パターンにより区別可能な他の原子 を含むと仮定するとセット３の要素は自由に選択しなければならない。 実施例４．１ チャート４に対する規則７の適用 未修飾の１０の置換基セットである、前記規則２および３により選択されたセ ット１およびセット２はどちらも塩素化または臭素化基を含まないので適してい る。セット３に関して可能な選択は、６９ｂ（ハロゲン０）、１１１ａ（塩素１ 個）、１４５ｂ（塩素２個）、１１７ｃ（塩素３個）および１１５ａ（臭素１個 ）を含む。適当な中心構造と組み合わせて、セット１、２および３によりその公 称質量および同位体質量パターンにより区別可能な合計１０×１０×５＝５００ 成分が得られる。 規則７の適用により、セット３はほとんどハロゲン化された基を含有するよう になる。しかし、人工的に同位体豊富にした置換基を含有する別の試薬を取り込 むことができる。たとえば、ＣＨ₃ＣＯＣｌおよびＣＤ₃ＣＯＣｌを混合すること により、公称質量(Ｍ)１５で同位体質量Ｍ＋３の置換基メチル基が得られる。 状況によっては、特により小さなライブラリーの場合には、前記規則のいずれ かからわずかに逸脱していてもマスリダンダンシーがないかまたはほとんどない ライブラリーが得られる。 ５．選択法の数学的表現 前記のようなチャートを用いた選択法の図式的表現に加えて、選択規則１ない し３を数学的に説明する。 この方法では用いたすべての数値（分子量、周期数、倍数および余り）は整数 でなければならない。 周期数、Ｐは図式法における列数に対応する。 選択則を以下のように表す。 規則１ セット１およびセット２はそれぞれ規則２および規則３における同じ Ｐの値を用いて選択する。 規則２ セット１の要素は、すべての要素が異なる分子量を有し、Ｐで割った 場合にこれらの重量のそれぞれが同じ余り（ｒｅｍ）を生じるように選択する。 規則３ セット２の要素は、すべての要素が異なる分子量を有し、Ｐで割った 場合にこれらの重量のそれぞれが異なる余り（ｒｅｍ）を生じるように選択する 。 記載した方法は数学的形態で表すことができるので、適当なアルゴリズムによ りこの方法をコンピュータープログラムに組み込むことができる。この方法のこ のようなコンピューターによる実施は本発明の範囲内であり、別の態様において 、本発明はそれぞれ独自の分子量または同位体パターンを有する化合物の組み合 わせライブラリーを構築する試薬のコンピューターベースの選択方法であって、 ａ）試薬のデータベースからの、望ましい化学変換に適した試薬の選択； ｂ）各試薬構造内の置換基の区別および各置換基の分子量および同位体パター ンの計算； ｃ）その分子量にしたがった置換基の本明細書に記載した手順にしたがった図 式中へのマッピング；および ｄ）マニュアル選択または本明細書に記載した規則にしたがった自動化プロセ スによるチャートからの試薬の選択、およびそれに続く組み合わせライブラリー のマニュアルまたは自動化合成の実施のための実験的ワークシートへの試薬の移 行；の段階からなる方法を提供する。 さらに別の態様において、本発明は前記方法、規則またはアルゴリズムを用い て合成したライブラリー、化学ライブラリーの合成のための方法、規則またはア ルゴリズムの使用を提供する。 以下の実施例で本発明を説明する。 実施例５ １４０の区別可能な成分を有するライブラリーの合成および分析（ Ｅ５） 説明１：ポリマー−結合Ｎ（アルファ）−ＦＭＯＣ−Ｎ（イプシロン）−ＢＯ Ｃ−（Ｓ）−リシン （Ｄ１） Ｎ（アルファ）−ＦＭＯＣ−Ｎ（イプシロン）−ＢＯＣ−（Ｓ）−リシン（２ １．５ｇ、４４．８ミリモル）のＤＣＭ（２５０ｍｌ）中溶液を、１，３−ジイ ソプロピルカルボジイミド（５．６５ｇ、４４．８ミリモル）およびＤＭＡＰ（ ０．２５当量）で処理した。室温で３０分後、溶液を１００−２００メッシュヒ ドロキシメチルポリスチレン（１０ｇ、１０ミリモル）のＤＭＦ（５０ｍｌ）中 懸濁液に添加した。２．５時間攪拌した後、樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭでよく洗 浄し、乾燥して、標記化合物Ｄ１を得た。 説明２：ポリマー−結合Ｎ（アルファ）−アシル−Ｎ（イプシロン）−ＢＯＣ −（Ｓ）−リシンの混合物 （Ｄ２） １０の別々の実験において、説明１からのポリマー結合リシン誘導体（２２０ ｍｇ、０．１５ミリモル）をＤＣＭ（２×１５ｍｌ）およびＤＭＦ（２×２０ｍ ｌ）で洗浄し、続いて２０％ＤＭＦ中ピペリジン（２×２０ｍｌ）で１および２ ０分間処理した。樹脂をＤＭＦ（２×１５ｍｌ）およびＤＣＭ（２×１５ｍｌ） で洗浄し、続いて４時間、トリエチルアミン(０．４２ｍｌ、３ミリモル)および 第１表に列挙した酸塩化物の１つ（１．５ミリモル）のＤＣＭ（１５ｍｌ）中溶 液で処理した。樹脂をＤＭＦ（２×１５ｍｌ）およびＤＣＭ（２×１５ｍｌ）で 洗浄し、続いてメタノール中スラリーとして合し、ＤＣＭでよく洗浄して、１０ のポリマー結合成分の混合物として標記化合物Ｄ２（２．１４ｇ、約１．５ミリ モル）を得た。 説明３：ポリマー−結合Ｎ（アルファ）−アシル−Ｎ（イプシロン）−アシル −（Ｓ）−リシンの混合物 （Ｄ３） １４の別々の実験において、説明２からのポリマー結合リシン誘導体（１４０ ｍｇ、約０．１ミリモル）をＤＣＭで洗浄し(２×１５ｍｌ)、続いてＤＣＭ（２ ×１５ｍｌ）中３０％トリフルオロ酢酸および２％アニソールで１および３０分 間処理した。樹脂をＤＣＭ(３×１５ｍｌ)、１０％ＤＣＭ中トリエチルアミン（ ２×１０ｍｌ）で洗浄し、続いて４時間、ＤＣＭ（１５ｍｌ）中トリエチルアミ ン（０．２８ｍｌ、２ミリモル）および第２表に列挙した酸塩化物の１つ（１ミ リモル）で処理した。樹脂をＤＭＦ（１５ｍｌ）およびＤＣＭ（３×１５ｍｌ） 、最後にメタノール（１５ｍｌ）で洗浄して、１０のポリマー結合成分それぞれ の１４の混合物として標記化合物Ｄ３を得た。 質量分析によるライブラリー（Ｅ５）の分析 各ビーズを説明３のライブラリーからとりだし、５０％ＤＣＭ（５０ｕｌ）中 ｎ−プロピルアミンで６時間処理した。試薬を蒸発させて、実施例５の個々の要 素を得た。ＬＣ−ＭＳ分析の代表的結果を、検出された分子イオンの帰属と合わ せて第３表に示す。 実施例６ ５０の区別可能な成分のライブラリー（Ｅ６）の合成および分析 説明４：ポリマー結合３−［Ｎ，Ｎ−ジ（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミ ノメチル］ベンジルトリフェニルホスホニウムブロミド（Ｄ４） １５０−２００ｕｍの４−ブロモポリスチレンからバーナード（Ｂｅｒｎａｒ ｄ）およびフォード（Ｆｏｒｄ）の方法［ジャーナル・オブ・オーガニック・ケ ミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ.）１９８３、４８、３２６）により調製し たポリマー結合トリフェニルホスフィン（２．９６ｇ、約５ｍｅｑ）のＤＭＦ（ ２５ｍｌ）中懸濁液をＮ，Ｎ−ジ（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−３−ブロモ メチルベンジルアミン（４ｇ、１０ミリモル）で処理した。混合物を７０℃で４ ８時間加熱し、冷却し、濾過し、ポリマーを交互にトルエン（５０ｍｌ）および ＤＣＭ（５０ｍｌ）(３回)、続いてＤＣＭ（５０ｍｌ）およびエーテル（５０ｍ ｌ）(３回)、最終的に１：１ＤＣＭ／エーテル（５０ｍｌ）およびエーテル（２ ×５０ｍｌ）で洗浄して、標記化合物Ｄ４（４．２１ｇ）を得た。 説明５：ポリマー結合３−［Ｎ−（アミノアシル）アミノメチル］ベンジルト リフェニルホスホニウム塩の混合物 （Ｄ５） ５の別個の実験において、説明４からのポリマー結合ホスホニウム塩（３８５ ｍｇ、０．３５ｍｅｑ）をＤＣＭで洗浄し（２×２５ｍｌ）、３０％トリフルオ ロ酢酸および２％アニソールのＤＣＭ中混合物（２×２５ｍｌ）で１および３ ０分間処理した。樹脂をＤＣＭ（３×２５ｍｌ）、１０％ＤＣＭ中トリエチルア ミン（２×２５ｍｌ）およびＤＣＭ（２×２５ｍｌ）で洗浄した。樹脂を１−ヒ ドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール(１０９ｍｇ、０．８ミリモル)、１，３ −ジイソプロピルカルボジイミド（０．１３ｍｌ、０．８ミリモル）および第４ 表に列挙したカルボン酸の１つ（０．７５ミリモル）のＤＭＦ（１０ｍｌ）およ びＤＣＭ（３ｍｌ）中溶液に一夜懸濁した。ＤＭＦ（２×２５ｍｌ）およびＤＣ Ｍ（３×２５ｍｌ）で洗浄した後、５種の生成物をＤＣＭ中スラリーとして合し 、濾過し、２０％ＤＭＦ中ピペリジン（２×３０ｍｌ）で１および３０分間処理 した。樹脂をＤＭＦ（２×３０ｍｌ）およびＤＣＭ（３×３０ｍｌ）で洗浄し、 乾燥して、５のポリマー結合成分の混合物として標記化合物Ｄ５（１．８３ｇ、 約１．７５ミリモル）を得た。 説明６：ボリマー結合３−［Ｎ−（アシルアミノアシル）アミノメチル］ベン ジルトリフェニルホスホニウム塩（Ｄ６）の混合物 １０の別個の実験において、説明５からのポリマー結合ホスホニウム塩（１６ ０ｍｇ、約０．１７ミリモル）をＤＣＭ（１０ｍｌ）中に懸濁し、トリエチルア ミン（０．１ｍｌ、０．７ミリモル）および第５表に列挙した酸塩化物の１つ（ ０．３５ミリモル）で処理した。９０分後、樹脂を濾過し、ＤＣＭで洗浄した( ２×２０ｍｌ)。１０の生成物をＤＣＭ中スラリーとして合し、ＤＭＦ（３×３ ０ｍｌ）およびＤＣＭ（２×３０ｍｌ）で洗浄した。樹脂を最後に連続してＤＣ Ｍとエーテルの３：１、１：１および１：３混合物で洗浄し、次にエーテルだけ で洗浄して、５０のポリマー結合成分の混合物として標記化合物Ｄ６を得た。 質量分析によるライブラリー（Ｅ６）の分析 説明６からの個々のビーズを水酸化ナトリウムの１０％水性ジオキサン（５０ ｕｌ）中１０ｍＭ溶液で一夜処理して、実施例６の個々の要素を開裂させた。Ａ ＰＣＩ−ＭＳ分析の代表的結果を、検出された分子イオンの帰属と合わせて第６ 表に示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．組み合わせで合成された化合物ライブラリーにおけるマスリダンダンシー の制御法であって、化合物をその分子量により同定することからなる方法。 ２．分子量を質量分析により測定することを特徴とする請求項１に記載の方法 。 ３．請求項１または２に記載の方法を用いてデザインされ、合成された化合物 のライブラリー。 ４．化学的ライブラリーのデザインおよび合成のための請求項１または２の方 法の使用。 ５．それぞれ独自の分子量または同位体パターンを有する化合物の組み合わせ ライブラリーを構築するための試薬のコンピューターベースの選択法であって、 ａ）試薬のデータベースからの、望ましい化学変換に適した試薬の選択； ｂ）各試薬構造内の置換基の区別、および各置換基の分子量および同位体パタ ーンの計算； ｃ）本明細書において記載した手順にしたがった図式中へのその分子量にした がった置換基のマッピング； ｄ）マニュアル選択または本明細書において定義した規則にしたがった自動化 プロセスのいずれかによるチャートからの試薬の選択と、それに続く組み合わせ ライブラリーのマニュアルまたは自動化合成法の実施のための実験的ワークシー トへの試薬の移行の段階からなる方法。 ６．コンピューターベースの請求項５に記載の方法を用いてデザインし、合成 した化合物のライブラリー。 ７．化学的ライブラリーのデザインおよび合成のための請求項５に記載のコン ピューターベースの方法の使用。 ８．式（Ｅ５）： （式中、Ｒ₁およびＲ₂は実施例５において定義した通りである） の２またはそれ以上の化合物を含むライブラリー。 ９．式（Ｅ６）： （式中、Ｒ₁およびＲ₂は実施例６において定義した通りである） の２またはそれ以上の化合物を含むライブラリー。