JPH11507349A

JPH11507349A - 局所適用アンドロゲンまたはＴＧＦ−βによるシェーグレン症候群の眼の治療

Info

Publication number: JPH11507349A
Application number: JP9501837A
Authority: JP
Inventors: サリバン，デービッド，エー．
Original assignee: ザスキーペンズアイリサーチインスティテュート，インコーポレイテッド
Priority date: 1995-06-07
Filing date: 1996-06-04
Publication date: 1999-06-29
Also published as: AU699185B2; ES2191757T3; EP0831868A1; AU6103296A; EP0831868B1; CA2224463A1; WO1996040183A1; DE69626013T2; DE69626013D1; EP0831868A4; US5688765A

Abstract

(57)【要約】治療量のアンドロゲンもしくはアンドロゲン類似体または治療量のＴＧＦ−βを含む調製物の目の眼球表面または目の近傍領域への局所適用が、シェーグレン症候群の乾燥眼症状の慢性または急性徴候を軽減させる方法として開示される。ＴＧＦ−βの涙液レベル増加の測定が、アンドロゲンまたはアンドロゲン類似体による局所治療の治療効果をモニターする診断検査として開示される。

Description

【発明の詳細な説明】名称局所適用アンドロゲンまたはＴＧＦ−βによるシェーグレン症候群の眼の治療政府の権利本発明をもたらした研究の一部は、国立予防衛生研究所のグラント番号EY0561 2号により政府の支援を受けて実施された。したがって、アメリカ合衆国政府は本発明に関して一定の権利を有する。技術分野本発明は、特にシェーグレン症候群で出現する乾性角結膜炎（ＫＣＳ）の治療に関する。発明の背景眼の前方の涙液層は角膜の完全性の維持、微生物の侵襲に対する防御および視力の保全に必須の役割を果たす（１）。これらの機能はそれぞれ、涙液層構造の安定性、浸透圧および／または組成に完全に依存する。この涙液層は、下部のムチン基層、実質的な中央の水性成分および上部の脂質層を含む（１、２）。涙液層の変動、欠乏または消失は、角膜上皮の難治性の乾燥、角膜の潰瘍および穿孔、感染症の増加傾向、重篤な全くの視力障害および失明に繋がる可能性がある（２、３）。世界中で数え切れないほどの人々が涙液層の機能不全に罹患しているが、これは総称的に乾性角結膜炎（ＫＣＳ）、または簡単に乾燥眼と診断されている（１、２）。これらの涙腺異常は４つのカテゴリーに分類することができる：（ａ）水性涙液欠乏、これは乾燥眼状態に最もしばしばみられる原因であり、涙腺疾患から発生し、自己免疫疾患、先天性無涙症、麻痺性低分泌または外分泌管閉塞を含む；（ｂ）ムチン欠乏、これは種々の結膜瘢痕化状態（例えばスティーベンズ−ジョンソン症候群、トラコーマ、類天疱瘡、熱性および化学火傷の他ビタミンＡ欠乏症）で観察される；（ｃ）脂質異常、これは眼瞼炎症の間に発生することがある（例えば慢性眼瞼炎）；および（ｄ）眼瞼機能低下（１）。世界的なＫＣＳの最も大きな１つの原因は、トラコーマが蔓延している国々を除けばシェーグレン症候群である（２）。この症状（これは第二の最も普通の自己免疫疾患である（７、１４））は、殆ど例外なく女性に発生し、主要涙腺および付属涙腺への潜行性で進行性のリンパ球浸潤、腺房組織および分泌管組織の免疫仲介性破壊並びにその結果としての持続性のＫＣＳの発生を特徴とする（７−１０）。原発性シェーグレン症候群（これは患者集団の約５０％が罹患する）では、この疾患はまた唾液腺の免疫的破壊および重篤な口内乾燥症を伴う。二次的なシェーグレン症候群では、この疾患は別の疾患を伴う。これらは最も普遍的にはリューマチ様関節炎で、次に全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）、強皮症、多発性筋炎、多発性結節性動脈炎、ハシモト甲状腺炎、慢性肝胆管疾患、慢性肺線維症、高グロブリン血症性紫斑病、レイノー現象（２、１１）である。シェーグレン症候群の進行中に、自己免疫疾患の余病は、外分泌腺および粘膜腺の濾胞性リンパ球性腺炎、胆管硬変、硬化性胆管炎、膵炎、萎縮性胃炎、間質性腎炎、間質性肺炎、末梢血管炎、Ｂ細胞リンパ腫、種々の中枢および末梢神経系並びに骨格筋合併症をもたらす（１２、１３）。シェーグレン症候群の病因は多数の因子の相互反応によるかもしれない。これらは、遺伝性、内分泌性神経性、ウイルス性および環境的起源を含む（１５、１６）。しかし、潜在的原因は、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）および／またはサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の初発感染および再活性化に関係しているかもしれない（１７−２０）。これらのヘルペスウイルスはシェーグレン症候群患者の涙腺および唾液腺に存在し（１７−２０）、不適切なＨＬＡ− ＤＲ発現、Ｔヘルパー／インデューサー細胞活性化、Ｂ細胞過活性およびこれら影響を受けている組織で明らかな自己抗体産生を誘発するかもしれない（８）。しかし、ヘルペスウイルス、またはレトロウイルスの作用がシェーグレン症候群の原因であるか、または単に付随現象であるかは不明である（２３−２５）。現在のところ、シェーグレン症候群は、制御されるべき、未だ治療法のない臨床的には付加逆な自己免疫疾患であると考えられている（１０）。学術文献では、エストロゲン（４）、シクロスポリンＡ（６）またはグルココルチコイド（２６）の全身的もしくは局所的投与はこの疾患の眼の症状を軽減するかもしれないと提唱されている。しかしながら、他の研究によれば、そのような医薬の接触は効果がないか（２７−２９）、さらに実際この疾患を進行させ、および／または増幅させる可能性がある（２８、３０）。実際、エストロゲンの作用はシェーグレン症候群の病因に含まれるかもしれない（３０、３１）。他の者たちは、涙液刺激物質（例えばブロモヘキシン（３２）またはイソブチルメチルキサンチン（３３））は、眼の症状を改善するかもしれないと提唱している。これらの薬剤の効果は主観的で（３４）、タキフィラキシーに感受性で（４）、および／または機能的で対応する涙腺組織の要求によって限定されるかもしれない（４、３５）。また全身的なアンドロゲン治療は、有望なシェーグレン症候群およびその付随障害のための有望な治療を提供するかもしれないと提唱されている。この提案は、自己免疫疾患は、エストロゲンは女性で疾患の重篤度を増し、アンドロゲンは男性の自己免疫余病を抑制するという性的二分を通常示すという発見に基づいている（１５、１６、３６−３８）。実際、全身的アンドロゲン療法は、ＳＬＥ、甲状腺炎、多発性関節炎および重症筋無力症の動物モデルで自己免疫発現を効果的に減少させるために用いられ（１５、３８−４３）、ヒトでも特発性血小板減少性紫斑病でも同様に用いられた（４４）。しかし、原発性または二次性シェーグレン症候群またはＳＬＥの患者に全身的にアンドロゲンを投与することによっては、これら疾患の種々の末梢症状を修正することは出来ないこともまた研究によって明らかにされた（４９、５４、５５、６２）。さらに、シェーグレン症候群の女性患者の全身的アンドロゲン治療は、これらの患者を起こりえる望ましくない副作用に曝す。これらの副作用は、男性化、月経不順（無月経を含む）、肝機能不全、浮腫、血液異常、行動変化、および代謝変調を含む。同様に、男性の長期的な全身性アンドロゲン治療は、多数の潜在的な副作用によって、危険性のあるものとして特徴付けられる。これらの理由から、最近の報告は、全身的アンドロゲン療法は、シェーグレン症候群の多発性免疫機能不全の治療には不適切であることを示唆している（６３）。他の者は、抗ウイルス化合物は、シェーグレン症候群の眼の病状について新しい治療的試みを代表するかもしれないと提唱している。研究者らは、そのような化合物は、涙腺組織のウイルス（例えばＥＢＶおよび／またはＣＭＶ）誘発感染（これは腺の免疫関連機能不全をおそらく悪化させる）と対抗するうえで効果があるかもしれないと推測している（１７、１９、２０）。この戦略の潜在的効果はしかし推測の域を出ない：現在の科学的な情報は、これらのウイルスがシェーグレン症候群の病的変化または進行に直接巻き込まれるということを確実に示したというわけではない（２３−２５）。したがって、シェーグレン症候群におけるＫＣＳの管理のために現在処方される治療方針は、人工涙液代替物の頻繁な適用で、これは眼の前方表面に潤滑さを与える（３、４、５、９、１０）。残念ながら、この療法は治療にはならないし、この固有の眼の免疫病変および結果として生じた不快な失明の虞のある疾患を軽減しない（３）。発明の要旨本発明の特徴は、一般にシェーグレン症候群におけるＫＣＳの管理についての新規な試み、アンドロゲンまたはアンドロゲン類似体の治療量を含む調製物の眼への適用である。この治療方法は、窮迫を引き起こすシェーグレン症候群の眼の症状を軽減し、しかも全身的治療の発生の可能性のある、望ましくない副作用に患者を曝すことがない。本発明の１つの特徴は、乾性角結膜炎の症状を治療する方法であるが、これは、有効量のアンドロゲンまたはアンドロゲン類似体を医薬的に許容できる物質中に含む治療剤を提供し、当該治療剤を局所的に患者の眼の表面または眼の近傍に投与することを含む。好ましくは、この物質は燐酸緩衝食塩水または担体物質（例えばヒアルロン酸塩）で、アンドロゲンまたはアンドロゲン化合物は、通常と異なる構造特色をもつか；またはこの化合物はテストステロン、４，５α−ジヒドロテストステロン、１７β−ヒドロキシ−５α−アンドロスタン、または１９−ノルテストステロン誘導体であるか；またはこの化合物は窒素置換アンドロゲンである。本発明のまた別の特徴は、該治療薬剤がＴＧＦ−βを含む同様な治療方法である。本発明の特徴はまた、ＴＧＦ−βによる涙液増加レベルの測定で、これは、アンドロゲン類似体による局所療法の治療効果をモニターする診断用検査を提供する。本発明の特徴はまた、本発明の方法に用いられる治療組成物である。本発明の他の特徴および利点は、以下の好ましい実施例の説明および請求の範囲から明瞭となろう。好ましい実施態様の記載本明細書で考察するように、種々のアンドロゲン化合物は、シェーグレン症候群の動物モデルで涙液分泌組織のリンパ球浸潤の規模を顕著に減少させる。涙液分泌組織における自己免疫の出現に対するアンドロゲン作用の本質は固有で涙腺特異的であるようにみえる。このホルモンの作用はまた、全身的系統的な抗炎症機能と連動していないようである。これら新規な発見を基に構成した本発明の方法は、シェーグレン症候群を処置するための古典的治療方法、投与されるいずれの治療薬もこの疾患の全ての局面を制御することが可能でなければならないという考えを否定する。アンドロゲンと類似する溶解特性をもつステロイドホルモン（例えばグルココルチコイド）は、適用後に隣接する眼の組織に迅速に到達する（７８）ので、それに代わって涙腺の炎症を抑制するために、したがってこの疾患による眼の衰弱性徴候を治療するためにアンドロゲンまたはアンドロゲン類似体の治療量を局所的に眼に適用することが提唱される。治療用アンドロゲンの局所適用によって、全身投与による望ましくない副作用を経験することなくシェーグレン症候群の最悪の眼の症状が軽減される。さらに、アンドロゲンによって誘発される涙腺炎症抑制は形質転換性増殖因子β（transforming growth factor- β（TGF-β）、強力な免疫抑制化合物）の誘発によって仲介できたので、ＴＧＦ −βの局所適用はまた同じ効果を有するはずである。過去１０年間、内分泌系は免疫発現において重大な調節的影響を示すことがますます認識されるようになってきた（１５、１６、３８、３７、４５、６４、６５−６８、６９、７０−７６）。この内分泌腺制御の正確な正常は細胞特異的、組織特異的の両方であるようにみえる（４５）。したがって、標的によって、ホルモン作用の結果は免疫機能の刺激であり、拮抗作用であり、また抑制であるかもしれない。さらにまた、免疫系における個々のホルモンの影響は、しばしば一般化されない。むしろ、実際は内分泌腺の影響は、種々の組織の免疫活性において強化され、弱められ、または全く影響を誘発しないかもしれない（４５）。この背景を考えるならば、選択されたホルモン（例えばアンドロゲン）の全身的投与は、多面的な自己免疫疾患（例えばシェーグレン症候群またはＳＬＥ）において全ての免疫的欠陥を修正できるわけではないことは驚くに当たらない。しかも、もし適切な内分泌療法が対応する特異的な組織に向けられるならば、ホルモン作用は、その特定の組織に局在する免疫的病変を安全に、且つ効果的に軽減することができるであろう。シェーグレン症候群の最悪の眼の窮迫を引き起こす症状を解除するための、対応する標的組織は涙腺である。眼の表面またはその近くに局所的に適用された脂肪親和性の調節性ホルモンは、シェーグレン症候群患者の付属涙腺組織および主要涙腺組織に直接作用し、これら組織の疾患に関連した腺の炎症を抑制することができる。この効果は、全身的ホルモン活性とは完全に独立しているであろう。この免疫内分泌相互作用の目的は：（ａ）隣接する涙腺組織のリンパ球浸潤を減少させ、それによって腺房細胞および分泌管細胞の免疫仲介性破壊並びにそれらのリンパ球圧迫を軽減し；（ｂ）付属および／または眼瞼涙腺が基本的な涙液量を分泌することを可能にし；さらに（ｃ）これらホルモンの全身的接触と平行する副作用を避けることである。実際、局所的なアンドロゲン治療は涙腺組織の機能的領域を産出し、それによって涙液の排出を増強しさらに乾燥眼の問題を修正する。この薬剤戦略は以前には提唱されたことがなかった。これは、多分に免疫機能におけるアンドロゲンの作用メカニズムは、胸腺および視床下部−下垂体軸からの因子によって仲介されるかまたはそれに補助されるか、そうでなけらばリンパ球に対する直接の影響を伴うと考えられたからである（３７、６５、６８、７７）。アンドロゲンの眼への局所適用は、シェーグレン症候群の免疫病理学的症状を軽減させることができる。眼の局所的適用療法の正当性のために必要な極めて重要なことは、アンドロゲンはシェーグレン症候群の涙腺の免疫病変を抑制するということを示すことである。さらに、このアンドロゲン作用は涙腺組織を標的とし、一般化された全身的な影響とは独立していることを示すことが重要である。下記に提示する実施例において、これら３つの基準は全て満たされることを示している。すなわち、アンドロゲンはシェーグレン症候群の涙腺の免疫病変を確かに抑制し、アンドロゲン作用は涙腺組織を標的とし、さらにアンドロゲン作用は一般化された全身的効果とは独立している。実施例Ｉシェーグレン症候群のＭＲＬ／Ｍｐ−ｌｐｒ／ｌｐｒマウス（４７）の涙腺免疫病変におけるアンドロゲンの影響以下の実験の目的は、アンドロゲン療法が、シェーグレン症候群の開始後涙腺における自己免疫疾患の進行を抑制するかまたは反対にするかを決定することであった。この実験では最後まで成獣の雌のＭＲＬ／Ｍｐ−ｌｐｒ／ｌｐｒ（ＭＲＬ／ｌｐｒ）マウス（これはシェーグレン症候群（５０、５１）とＳＬＥ（７９、８０）の両方の動物モデルである）を用いた。ヒトの場合のように、これらのマウスの涙腺組織は、血管周囲および管の周囲領域に広範囲な多数の濾胞性リンパ球浸潤、顕著な腺の破壊および明瞭な線維症を含んでいる（５０、５１）。生理的レベルまたは超生理的レベルのテストステロンを局所的ではなく全身的に投与した。なぜならば、マウスの涙腺の場所へは眼の表面から到達できないからである。結果は、アンドロゲンは雌のＭＲＬ／ｌｐｒマウスの涙腺の自己免疫発現に顕著な影響を与えることを示した。１７日または３４日間のテストステロンの投与は、涙腺組織のリンパ球浸潤を劇的に減少させ、このホルモン作用は時間依存性で、浸潤物のサイズと範囲の両方において著名な減少をもたらした。さらにまた、ホルモン療法は、腺房上皮および分泌管上皮の炎症誘発破壊を逆行させるようであった。興味深いことには、テストステロンの生理的用量と超生理的用量との間で、実験結果に顕著な相違はなかった。対照的に、偽薬処置マウスの涙腺では、実験の経過中にリンパ球浸潤は段々増加していった。テストステロン療法はまた、下顎骨下の腺の免疫病変を顕著に減少させたが、この影響の程度は涙腺組織で認められたものより小さかった。実施例ＩＩシェーグレン症候群のＮＺＢ／ＮＺＷＦ１マウスモデル（４８）の涙腺免疫病変におけるアンドロゲンの影響この実験の目的は、別の自己免疫のシェーグレン症候群の動物モデル（ＮＺＢ／ＮＺＷＦ１〔Ｆ１〕マウス）（５２、５９）を用いることによって、涙腺疾患に対するアンドロゲン治療の効果を評価することであった。ヒトの場合のように、このマウス株（これは基本的なＢ細胞欠陥を示す）の涙腺は密なリンパ球凝集塊を有し（５０、５２）、この凝集塊は専らＢおよびヘルパーＴ細胞を含んでいる（５８）。さらにまた、このネズミの疾患は腺房組織および分泌管組織の濾胞性崩壊並びに明瞭な眼球表面の乾燥を伴う。対照的に、ＭＲＬ／ｌｐｒモデルの免疫機能不全は異なる病因を持つようで、Ｔ細胞細胞の基本的な免疫調節疾患を伴う（４７）。自己免疫の雌のＦ１マウスを全身的に賦形剤または種々の濃度のテストステロンで、病気の開始後０、１７、３４または５１日間処置した。繰り返せば、ホルモン治療のための全身的ルートはＦ１マウスの涙腺組織は眼球表面から到達することができないので用いた。結果は、実験経過中にコントロールマウスではリンパ球浸潤の程度は劇的に増加することを示した。しかし、テストステロン投与は、涙腺におけるリンパ球蓄積の顕著な時間依存性の減少を誘発した。アンドロゲン療法の３４から５１日後、リンパ球浸潤の程度は、偽薬処置組織のそれと比べて２２から４６倍抑制された。このホルモンの影響は、濾胞性浸潤の数、個々の濾胞の範囲および涙腺標本当たりのリンパ球浸潤尾総量の減少を伴った。一定の群では、テストステロンとの接触はまた、処置前に同じマウスで測定されたものと比べて涙液量の上昇を刺激した。殆ど例外なく、生理的および超生理的テストステロン治療のＦ１マウスの涙腺自己免疫発現の影響は、実質的に同じ自己免疫疾患の抑制であった。実施例ＩＩＩシェーグレン症候群のアンドロゲン療法の効果：ＭＲＬ／ｌｐｒマウスの涙腺のリンパ球集団とＩａ発現におけるホルモンの影響先の実験は、アンドロゲン処置は、シェーグレン症候群のマウスモデルの涙腺におけるリンパ球浸潤を劇的に削減することを示した。この実験の目的は、このアンドロゲン作用が、涙腺組織において特定のリンパ球集団またはクラスＩＩ抗原（すなわちＩａ）発現の選択的抑制を伴うか否かを決定することであった。実験の最後まで、自己免疫の雌のＭＲＬ／Ｍｐ−ｌｐｒ／ｌｐｒマウスに、疾患の開始後０、１７または３４日間偽薬またはテストステロン含有化合物を全身的に投与した。結果は、アンドロゲンとの接触は、ＭＲＬ／ｌｐｒマウスの涙腺の炎症細胞集団に定量的および定性的影響の両方を与えることを示した。したがって、偽薬ではなくテストステロンの治療は、Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、サプレッサー／細胞毒性Ｔ細胞、Ｉａ陽性リンパ球およびＢ細胞の総数の急激な減少を誘発した。アンドロゲン投与はまた、Ｂ２２０+（すなわちおそらく未成熟Ｔ）細胞の涙腺における濃度を、その頻度と同様顕著に減少させた。他の観察（４５、４７、４８、５６）と比較するとき、これらの発見は、テストステロンの抗炎症性活性は、固有で涙腺特異的である可能性を提唱する。第一に、涙腺組織のアンドロゲン誘発免疫抑制は、末梢リンパ節には及ばないが（５６、５７）、このことは、このステロイドホルモンは、全身的または粘膜部位へのリンパ球移動またはそこでの増殖における一般的な抑制を引き起こさないことを示唆している。第二に、テストステロンとの接触は、ＭＲＬ／ｌｐｒマウスの下顎骨下の腺のリンパ球浸潤の程度を減少させるが（４７）、このホルモンの影響の性質は涙腺で認められたものとは異なり、アンドロゲンおよび薬剤に対する唾液腺の濾胞性浸潤の全体的な感受性は、涙腺組織で認められたものとは全く異なるようにみえる（４７）。第三に、アンドロゲンは、涙腺の免疫機能に対して顕著な制御を示すが、必ずしも唾液腺または全身組織に対してはそうではない（４５）。実施例ＩＶシェーグレン症候群のＭＲＬ／ｌｐｒマウスモデルの涙腺自己免疫疾患におけるステロイドと免疫抑制剤の影響以下の実験の目的は、他のステロイドホルモンまたは免疫抑制剤は、涙腺の自己免疫におけるテストステロンの効果を繰り返すことができるか否かを決定することであった。雌のＭＲＬ／ｌｐｒマウスを疾患の開始後２１日間、全身的な賦形剤、ステロイドまたは免疫抑制化合物で処理した。この実験で調べた医薬は以下を含む：（ａ）テストステロン、これは涙腺の炎症を顕著に減少させることが示された；（ｂ）１９−ノルテストステロン、弱い男性化活性をもつ同化アンドロゲン；（ｃ）ダナゾール、合成ステロイドで、ヒトのある種の免疫疾患の治療に用いられ（８１）、ＭＲＬ／ｌｐｒまうすで特定の末梢免疫欠陥を減少させることが分かっている（６０）；（ｄ）１７β−エストラジオール、女性の性ステロイドで、シェーグレン症候群の眼の疾患の有望な治療として仮定されている（４）；（ｅ）非アンドロゲン性合成ステロイド、これはＦ１マウスの唾液腺のリンパ球浸潤を明瞭に抑制し、他の全身的自己免疫欠陥を修正する；（ｆ）シクロスポリンＡ、抗炎症性物質で、ＭＲＬ／ｌｐｒマウスの特異的な末梢免疫機能不全を軽減し（６１）、シェーグレン症候群の涙腺疾患およびＫＣＳの有効な治療剤として提唱されている（６）；（ｇ）デキサメタゾン、有望な抗炎症性グルココルチコイドで、シェーグレン症候群の涙腺の免疫病変に対する可能性のある治療剤として提唱されている（２６）；および（ｈ）シクロホスファミド、免疫抑制剤で、ＭＲＬ／ｌｐｒマウスの全身および唾液腺部位の種々の自己免疫余病を減少させる。比較実験の結果は、同化アンドロゲン、１９−ノルテストステロン、またはシクロホスファミドの投与によって、涙腺組織の濾胞性浸潤範囲、濾胞の数および浸潤リンパ球の％におけるテストステロンの抑制効果は再現されたが、エストラジオール、ダナゾール、非アルドステロン性合成ステロイド、シクロスポリンＡまたはデキサメタゾンによる治療では再現されなかった。さらに、テストステロン、１９−ノルテストステロンおよびシクロホスファミドは、デキサメタゾンと同様、下顎骨下の腺のリンパ球浸潤を減少させた。しかし、いずれのアンドロゲンも、脾臓並びに頚の上部および腸間膜リンパ節を含むリンパ組織の重大な炎症には緩衝しなかった。アンドロゲン単独処置はまた、涙腺による涙液中への総蛋白およびＩｇＡの排出の増加を促進した。細菌のコロニー形成、ウイルス付着、寄生虫の外寄生およびカビもしくは毒素により誘発される障害に対して眼の表面を保護する（４８）これら抗体は、典型的にはシェーグレン症候群の粘膜部位では減少する（５３）。これらの発見を総合すれば、アンドロゲンまたはその同化性類似体は、シェーグレン症候群の動物モデルの涙腺で自己免疫発現を抑制し、該涙腺の組織機能を高めることが分かる。アンドロゲンの作用はまた、全身的影響とは別個に組織特異的反応を示しているようで、したがって眼に局所的に適用することの正当性が得られる。シクロフォスファミド（全身投与により涙液組織のリンパ球浸潤を減少させる唯一の非アンドロゲン）は、その作用態様のためにヒトでの局所投与が適切であるとは考えられていない。細胞ＤＮＡの直接的修飾によって自己免疫作用を抑制すると考えられているこのアルキル化剤は、活性を得る前に肝臓で先ず代謝される必要がある。したがって、シクロフォスファミドは局所適用の場合には抹消で機能することができない。ＴＧＦ−βの眼の局所適用はシェーグレン症候群の免疫病理学的症状を緩和させることができる自己免疫を発症した涙液分泌組織の免疫病理学的病巣のアンドロゲンにより誘発される抑制、およびそれと平行する腺機能の改善はアンドロゲンと上皮細胞との相互作用によって仲介されるが、この相互作用は続いて涙腺の上皮性サイトカインの発現および／または活性の変化を惹起するであろう。この仮説が正しいとすれば、（ａ）上皮細胞は涙腺におけるアンドロゲン作用の標的細胞であり、アンドロゲンレセプターは上皮細胞内に局在するが涙液分泌組織の他の細胞（例えばリンパ球）には存在しないということ、および（ｂ）アンドロゲンは、涙腺で抗炎症性サイトカインの発現を増加させるか、または炎症性前駆ペプチドの活性を低下させることが予想される。したがって、この仮説を主張するために、アンドロゲンレセプター蛋白およびｍＲＮＡの存在、局在場所および／または細胞内分布を特定する実験を種々の種並びに自己免疫のＭＲＬ／ｌｐｒマウスの雌雄で実施するとともに、涙液分泌組織のサイトカインレベルに対するアンドロゲンの影響を調べる実験を行った。実施例５涙液分泌組織におけるアンドロゲンレセプターの存在、局在場所およびホルモン調節アンドロゲンが涙腺で免疫発現を調節するメカニズムが、ホルモンと特異的アンドロゲンレセプターとの初期結合を必要とすることは疑いがない。アンドロゲンレセプターは、アンドロゲンの既知活性の殆ど全てを仲介するようで、リガンド活性化転写因子のステロイド／甲状腺ホルモン／レチン酸類に属する（９０− ９６）。他の組織のアンドロゲンレセプターの局在場所は、ＳＶ４０大型Ｔ抗原のそれと同種である核標的シグナルのために主に核内である（９７−９９）。この核標的シグナルは、ＤＮＡ結合ドメインの直ぐ後に続くレセプターのヒンジ領域に存在する（９３）。レセプターへのアンドロゲンの結合に続いて、このホルモンレセプター複合単量体は特定の標的遺伝子の制御領域でアンドロゲン応答成分と結合し、典型的には別のアンドロゲン結合複合体と二量体を形成し、さらに、適切なサイレンサーおよび組織特異的基本的プロモーター成分と結合して遺伝子転写を調節する（９０、９１、９３、９４、９６）。このアンドロゲン活性は種々の組織におけるｍＲＮＡ産生の変化および最終的には蛋白合成の変化をもたらす（１００−１０３）。そのような蛋白同化の変化はアンドロゲンの主要な作用のようである（９０、１０４）。しかしながら、標的遺伝子転写のアンドロゲン誘発調節のために必要される重要な前提条件は、その組織におけるアンドロゲンレセプターの存在と局在場所である（９０）。実際多くの研究によって、ステロイド（例えばアンドロゲン）に対する組織の生理学的な反応性は、当該ステロイドのレセプター蛋白の濃度とともにその関連ｍＲＮＡの量ときわめてしばしば正比例することが示された（９０、１０５、１０６）。したがって、涙腺に高親和性と特異性を有するアンドロゲンレセプターが存在するか否かを決定するために、種々のトリチウム付加ステロイドと若い成獣ラット、精巣摘出または卵巣摘出ラットから得た涙液分泌組織のサイトゾルを用いて平衡結合法を実施した。この分析によって、アンドロゲンに対してただ１種類の飽和可能な高親和性の特異的結合部位が、ラットの雌雄の両方の涙液分泌組織に存在することが明らかになった。これらの発見をさらに発展させるために、高親和性アンドロゲン結合部位が、ラット涙腺の腺房上皮細胞内に特異的に局在するか否かを調べるために実験を行った。精巣摘出ラットの涙液分泌組織からその末端に向かって腺房上皮細胞を分離し、サイトゾルの調製のために処理し、トリチウム付加ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）結合部位について調べた。この実験によって、これらの細胞内に高親和性アンドロゲンレセプターが存在することが示された。アンドロゲンレセプターｍＲＮＡが多様な種の涙液分泌組織に存在するか否かを決定するために、以下の実験を実施した。ＲＮＡを雄および／または雌のマウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギおよびヒトの涙腺とともに、ラットの脾臓（陰性コントロール）、ラットの前立腺およびヒトの前立腺ＬＮＣａＰ細胞（陽性コントロール）から分離し、続いて逆転写によってｃＤＮＡを生成し、さらにポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって特異的プライマーで増幅し、ラットアンドロゲンレセプターｃＤＮＡの32Ｐ標識フラグメントとのサザンブロットハイブリダイゼーションを実施するために処理した。増幅ｃＤＮＡ生成物のサイズは、１．５％アガロースゲルの隣接レーンで泳動させた一連の分子量をもつ標準物質との比較によって算出した。この結果は、検査した全ての種から得た涙腺は、ラット前立腺組織およびヒト前立腺ＬＮＣａＰ細胞で認められたものと同一のただ１種の−１，２７３ｂｐバンドのアンドロゲンレセプターｍＲＮＡを含むことを示した。さらに、これと同じＲＴ−ＰＣＲの結果は、”ヒト特異的” オリゴマーのプライマーがヒト涙液分泌組織、ＬＮＣａＰ細胞およびラット前立腺由来のｍＲＮＡの増幅に用いられた場合に認められた。比較のために、アンドロゲンレセプターｍＲＮＡの存在についてヒトおよび／またはラット涙腺をリボヌクレアーゼ保護アッセイとともにノザンブロット技術を用いて調べる実験もまた実施した。前者の実験では、ヒト涙腺生検標本（ｎ＝５人の男性、１人の女性）、ＬＮＣａＰ細胞とともにラット涙液分泌組織、前立腺および脾臓組織から全ＲＮＡを分離し、続いて32Ｐ標識ヒトまたはラットアンドロゲンレセプターリボプローブとハイブリダイズさせた。結果は、ヒトおよびラットの涙腺の両方でアンドロゲンレセプターｍＲＮＡは存在し、そのサイズは前立腺のアンドロゲンレセプターのｍＲＮＡのそれと同等であることを示した。ラット組織を用いたリボヌクレアーゼ保護実験では、アンドロゲンレセプターｍＲＮＡは脾臓では検出されなかったが、一方、Ｇ−３−ＰＤＨｍＲＮＡは全てのラットの涙液分泌組織、前立腺および脾臓サンプルで明らかであった。比較のために、アンドロゲンレセプターｍＲＮＡはラットの涙液分泌組織に存在し、その分子サイズ（〜１０ｋｂ、ノザンブロットによる）は、前立腺（アンドロゲン標的器官）で認められたものと同一であることもまた明らかにされた（１０７）。多様な種の涙腺の構造と機能の両方のアンドロゲンによる調節の内分泌的基礎を調べるために、次のような目的で実験を実施した：（ａ）涙腺のアンドロゲンレセプターの細胞分布を決定する；（ｂ）これら結合部位の腺内含有量に対する性と内分泌学的環境の影響を調べる。無傷、精巣卵巣摘出または模擬手術を施した雌雄の成獣ラット、マウスまたはハムスターから、さらに精巣摘出してから生理学的レベルのテストステロンもしくは擬似化合物に曝したラットから涙腺を得た。アンドロゲンレセプターの細胞内局在は免疫ペルオキシダーゼプロトコルを用いて調べた。この方法では、ラットアンドロゲンレセプターに対する精製ウサギ多クローン性抗体を一次抗体として用いた。涙腺での発見によって以下のことが示唆された：（ａ）アンドロゲンレセプターは、上皮細胞のもっぱら核内に局在し、（ｂ）これら結合部位の細胞分布または核内濃度は、雌と比較して雄の腺ではるかに強く、（ｃ）精巣摘出によってアンドロゲンレセプターの免疫化学的発現は激減し、擬似手術ではそのような激減は認められず、（ｄ）精巣摘出ラットへのテストステロン投与は、擬似手術後にテストステロンに曝した腺と比較してアンドロゲンレセプター量の著名な増加をもたらす。全体として、これらの発見は、性と内分泌系はラットの涙腺内のアンドロゲン結合部位の分布に顕著な影響を与える可能性を明らかにした。さらにまたこれらの結果は、アンドロゲンによるそれら自身の涙腺レセプターのアップレギュレーションを示唆する。涙腺のアンドロゲンレセプター蛋白のアンドロゲンによる制御および性に関連する相違が、アンドロゲンレセプターｍＲＮＡの発現における変動に付随するか否かを調べるために以下の実験を実施した。精巣摘出および卵巣摘出Sprague-Da wleyラットに擬似薬またはテストステロン含有ペレットの皮下挿入を７日間実施した。これらの動物とともに無傷の雌雄および擬似手術を実施した雌雄から涙腺を得て、続いて半定量逆転写（ＲＴ）−ＰＣＲによるアンドロゲンレセプターｍＲＮＡの測定のために処理した。全てのアンドロゲンレセプターｍＲＮＡ測定値は、同じＲＮＡサンプル中のβ−アクチン含有量によって標準化した。この実験の結果は、アンドロゲンレセプターｍＲＮＡレベルは、雄と比較して雌の涙液分泌組織で顕著に高くなることを示した。さらに、これらの発見は、精巣摘出は涙液分泌組織のアンドロゲンレセプターｍＲＮＡ含有量を増加させ、そしてアンドロゲン処理はそれを減少させることを示した。したがって、涙腺におけるＡＲｍＲＮＡ発現に対する性とアンドロゲン曝露の影響は、ＡＲ蛋白で認められたものと反対である。このタイプのＡＲ自己調節はまた、ある種の生殖組織で他の研究者らによって見出された。上記の発見は、アンドロゲンレセプター蛋白およびｍＲＮＡは多数の種の涙液分泌組織に存在すること、さらにこれらの結合部位は高い親和性を有し、アンドロゲンに特異的で上皮細胞のもっぱら核内に局在することを明らかにした。これらの結果をさらに発展させるために、アンドロゲンの免疫抑制作用を仲介する可能性がある、自己免疫の涙液分泌組織内の細胞標的を特定するために新たな実験を実施した。さらに、これらの自己免疫の涙腺におけるアンドロゲンレセプターの内分泌調節を調べた。賦形剤、ステロイドホルモンまたは免疫抑制剤に対して、ＭＲＬ／ｌｐｒマウスの雌の成獣を発症後種々の時間間隔で全身的に曝した。処置の直前または直後に涙腺を採取しさらに処理して、免疫ペルオキシダーゼおよび画像分析によりアンドロゲンレセプターの細胞分布と核内濃度を決定し、アンドロゲンレセプターｍＲＮＡレベルを調べた。これらの発見で以下の事柄が明らかにされた：（ａ）アンドロゲンレセプターは、ＭＲＬ／ｌｐｒマウスの涙液分泌組織の腺房および分泌管上皮細胞のもっぱら核内に存在する。（ｂ）アンドロゲンレセプターは腺に浸潤する広範囲のリンパ球集団では検出されない。（ｃ）テストステロン投与は、涙液分泌組織内のアンドロゲンレセプター含有細胞の数とともに上皮細胞の核内のアンドロゲンレセプターの濃度の顕著な増加を誘発する。（ｄ）ホルモン作用はステロイド特異的である、すなわちアンドロゲン類似体の投与はアンドロゲンレセプターの蓄積を促進するが、エストロゲン、グルココルチコイドまたはシクロフォスファミドでは促進されない。（ｅ）アンドロゲンはそのレセプターｍＲＮＡの量を自己調節する。（ｆ）アンドロゲンレセプターの濃度は、アンドロゲン療法の中止後顕著に減少する。これらの結果は、上皮細胞は、涙液分泌組織でアンドロゲン標的細胞であり（リンパ球は標的細胞ではない）、自己免疫の雌のマウスの涙腺でアンドロゲン関連免疫抑制と機能強化を仲介するらしいことを示す。これらの発見はまた、アンドロゲンはＭＲＬ／ｌｐｒの涙液分泌組織でそれら自身のレセプター蛋白の発現を増加させ、さらにそれらのレセプターｍＲＮＡ含有量を減少させることを示す。要約すれば、これらの結果は、上皮細胞（リンパ球ではなく）は、自己免疫涙液分泌組織でのアンドロゲン標的細胞であること、アンドロゲンは、これらの細胞でそれら自身のレセプター蛋白の発現をアップレギュレートさせることを示している。さらに以下のことが示唆される：（ａ）特異的、高親和性で飽和可能なアンドロゲン結合部位がラット涙液分泌組織に存在する。（ｂ）これらのレセプターの局在場所は、非自己免疫マウス、ラットおよびハムスターの涙腺のもっぱら上皮細胞内である。（ｃ）アンドロゲンレセプターのｍＲＮＡはヒトおよび他の多数の種の涙液分泌組織に存在する。（ｄ）涙腺におけるアンドロゲンレセプター蛋白およびｍＲＮＡの出現は性とアンドロゲンによって顕著な影響を受ける。（ｅ）アンドロゲンはラットの涙腺の上皮細胞に直接作用し、これらのホルモンの作用は、細胞をアンドロゲンレセプター、転写および翻訳拮抗物質に曝すことによって抑制できる（１０８、１０９）。実施例６涙腺の自己免疫疾患における上皮細胞ＴＧＦ−βの役割自己免疫疾患は、自己寛容、自己反応性免疫細胞の増殖、プロトオンコジーンの活性化および宿主の損傷に対する免疫応答遺伝子の発現を常に伴う（１１０− １１２）。しかしながら、自己免疫疾患のまた別のそして極めて重要な特色は、サイトカインの不適切な分泌である（１１１、１１２）。広範囲の細胞（例えば免疫、上皮、内皮および神経細胞(１１２−１１６)）によって産生されるこれらのペプチドは、”免疫系のホルモン”と呼ばれ（１１７）、免疫学的防御において通常不可欠の役割を果たす（１１２、１１８）。しかしながら、サイトカインの不均衡な産生と遊離は、特定の抗原に対する寛容の亜型、ＴおよびＢ細胞のエフェクター機能の活性化、プロトオンコジーン、クラスＩＩ抗原および細胞内粘着分子発現の刺激、炎症過程の促進並びに標的細胞（例えば上皮細胞）の破壊をもたらすかもしれない（１１０、１１２、１１７−１２０）。これらの作用を有すると仮定するならば、サイトカインは”自己免疫疾患の仲介物”としても関与しているであろう（１２１）。現時点では、多数のサイトカインが自己免疫疾患に関与しているようで（１１１、１１２、１１７−１１９、１２２）、さらに眼の炎症性疾患の病因および／また発症に深く関係しているように思われる（１２３、１２４）。最近の研究によって、シェーグレン症候群の患者の外分泌組織における重篤な免疫学的病巣の発生と存続（１２５）について、さらに本疾患で生じる腺分泌の顕著な減少（１２６）についてサイトカインの関与が示唆された。したがって、シェーグレン症候群の患者の唾液腺は、健常なコントロールにおける場合の量と比較して、腺房上皮細胞におけるインターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−６および腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）のｍＲＮＡレベルの顕著な増加、ＣＤ４細胞におけるＩＬ−２、ＩＬ−１０およびＴＮＦ−ｍＲＮＡ含有量のかなりの増加、さらに唾液におけるＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１０およびＴＦＮ−濃度の顕著な上昇を示す（１２７）。唾液腺の全生検材料の分析によって、これらサイトカインのｍＲＮＡ発現の変化とともにＩＬ−１βおよびＴＧＦ−βｍＲＮＡの変化もまた立証された（１２８−１３０）。涙腺では、シェーグレン症候群患者の生検材料のＲＴ−ＰＣＲによる限定的評価によって、ＩＬ−１β、ＩＬ−６およびＩＦＮ−ｍＲＮＡ量の上昇が明らかにされた（１２８、１３１）。興味深いことには、サイトカイン回路系におけるこれらの変化によってシェーグレン症候群の炎症過程だけでなく、この疾患に付随する眼球乾燥および口内乾燥についてもまた説明できるかもしれない。したがって、サイトカイン誘発性リンパ球浸潤は、炎症組織の神経支配を顕著に衰退させるかもしれない（１３２）。さらにまた、ある種のサイトカイン（例えばＩＬ−１β）は、アドレナリン作動性およびコリン作動性神経による伝達物質の遊離を直接抑制し（１３３）、それによって上皮細胞による液の分泌の神経制御に干渉するかもしれない（１２６）。シェーグレン症候群におけるサイトカインのこの異常な発現が、部分的には性ステロイドの影響によるものであっても不思議はない。この仮説を支持する事柄として、シェーグレン症候群の病理発生、加速および進行に関与する可能性があるエストロゲン（３０、３１）は、前炎症性サイトカイン（例えばＩＬ−１およびＴＮＦ−α）の産生を高めることが知られている（１３４）。逆に、アンドロゲン(これは多くの自己免疫疾患の徴候を減少させる(１６、３７、１３５))は、免疫抑制性サイトカインの産生を誘発するかもしれない。実際、サイトカイン合成の性ステロイド調節は、自己免疫疾患の発生で認められる明瞭に区別される性的二形を説明すると考えられている（１２２）。実際、シェーグレン症候群の雌のマウスモデルの涙腺における自己免疫疾患をアンドロゲンが抑制する主要メカニズムは、上皮細胞のサイトカイン産生の制御によるものと考えるのはもっともなことであろう。このことを支持するものとして、上記で述べたように涙液分泌組織におけるアンドロゲンの抗炎症作用はリンパ球を介してではなくてむしろ上皮細胞を仲介しているということ、さらにまた、他の組織の上皮細胞は多くのサイトカイン（例えばＴＧＦ−β）を分泌しており（１３７）、さらにシェーグレン症候群の腺炎症では活発な細胞性参加体として外分泌部位で役立っている（１３８）ことが知られている。さらに下記で述べるように、アンドロゲンは、涙腺で免疫抑制性サイトカイン（ＴＧＦ−β１）のｍＲＮＡおよび蛋白レベルを増加させる。このサイトカインはシェーグレン症候群で保護的な役割を果たすと考えられ、ＴＧＦ−βｍＲＮＡの発現増加は、シェーグレン症候群患者の唾液腺における炎症低下と相関性を有する（１２９）。対照的に、ＴＧＦ−β１が存在しない場合は、涙腺および唾液腺の両方への重度のリンパ球浸潤が生じる（１３９）。したがってこの仮説を調べるために、アンドロゲンによって誘発されるシェーグレン症候群の涙腺炎症抑制を仲介するかまたは関与する可能性がある上皮細胞サイトカインを特定する実験を実施した。最初の疑問は、涙腺の上皮細胞は、この組織での免疫機能の外分泌性調節に関与する可能性があるサイトカインを発現するか否かであった。高ストリンジェンシー条件でＲＴ−ＰＣＲ法を用いて実施したこれらの実験によって、ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３、ＩＬ −６、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１αｍＲＮＡは、雌雄のラットの涙腺とともに分離涙腺腺房上皮細胞において常に検出されるであろうことが示された。これらの実験の当然の帰結として、自己免疫マウスの涙腺は抗炎症性サイトカインとともに前炎症性サイトカインを含むか否かもまた調べた。高ストリンジェンシー条件でＲＴ−ＰＣＲ法を用いて実施したこれらの実験によって、ＩＬ−１α、ＩＬ− １β、ＩＬ−２レセプター、ＩＬ−６、ＴＧＦ−βおよびＴＮＦ−αのｍＲＮＡは、自己免疫の雌のＭＲＬ／ｌｐｒマウスの涙腺で常に検出されるであろうことが示された。これらの増幅生成物の正体は、アガロースゲル電気泳動、分子量測定およびいくつかの陽性コントロール（例えばＭＲＬ／ｌｐｒの脾臓組織、Ｐ３８８Ｄ１マクロファージおよびClontechのキットコントロール由来のｃＤＮＡ）によって確認した。これらの発見を得て、次に涙腺における免疫抑制性サイトカインＴＧＦ−β１のｍＲＮＡおよび蛋白レベルはアンドロゲンによって制御され、性によって影響を受けるか否かを決定する実験を実施した。第一の実験系では、無傷、精巣もしくは卵巣摘出または擬似手術を施した雌雄のラットとともに擬似薬処理もしくはテストステロン処理した精巣摘出ラットから全ＲＮＡを分離した。このように分離した後、ＴＧＦ−β１およびβ−アクチンｍＲＮＡをアガロースゲル電気泳動、ＲＴ−ＰＣＲ、サザンハイブリダイゼーション、オートラジオグラフィーおよびデンシトメトリーによって調べた。コントロールの目的で、全てのＴＧＦ−β １の測定値をβ−アクチンの測定値で標準化した。実験の結果以下の事柄が明らかになった：（ａ）雌のラットのそれと較べて、ＴＧＦ−β１ｍＲＮＡレベルは無傷の雄の涙液分泌組織で極めて高かった。（ｂ）精巣摘出は涙腺のＴＧＦ−β １ｍＲＮＡ含有量を減少させるか、または影響を与えなかったが、一方、卵巣摘出は常にＴＧＦ−β１ｍＲＮＡ量に影響を与えなかった。（ｃ）擬似薬処理コントロールの腺と較べたとき、アンドロゲン処理は精巣摘出ラットの涙液分泌組織でのＴＧＦ−β１ｍＲＮＡ発現を顕著に増加させた。これらの結果は性は涙腺のＴＧＦ−β１ｍＲＮＡレベルに影響を与え、アンドロゲンはそれを調節することを示している。第二の実験系では、アンドロゲン曝露によって自己免疫マウスの涙液分泌組織のＴＧＦ−β１蛋白の含有量は顕著に増加するか否かが調べられた。したがって、発症とそれに続く擬似薬、テストステロンもしくはシクロフォスファミド処理の後で、雌のＭＲＬ／ｌｐｒマウスから涙液分泌組織を得た。続いて、蛋白の酸抽出と市販のアッセイによるＴＧＦ−β１レベルの分析のために腺を処理した。実験の結果は、擬似薬コントロールの組織の蛋白レベルと比較したとき、アンドロゲン（シクロフォスファミドではなく）投与は、雌のＭＲＬ／ｌｐｒマウスの涙液分泌組織のＴＧＦ−β１総蛋白量を顕著に上昇させることを示した。全体として、これらの発見は、シェーグレン症候群の外分泌組織の炎症で主要な役割を果たすと考えられているサイトカインのｍＲＮＡは、正常ラットおよび自己免疫マウスの涙液分泌組織に存在することを示している。さらに、これらの結果は、アンドロゲンは、ＴＧＦ−β１ｍＲＮＡおよび蛋白の涙腺での蓄積を促進することを明示している。ＴＧＦ−β１は、ＴおよびＢ細胞増殖抑制、細胞毒性Ｔ細胞増殖、通常的およびリンホカイン活性化細胞殺、内皮へのＴ細胞粘着、マクロファージ機能並びにＩＬ−１、ＴＮＦおよびＩＦＮ−ｇ産生を含む重要な免疫抑制活性を順次発現させることが知られており、さらにシェーグレン症候群の外分泌腺で炎症をダウンレギュレートさせると考えられている（１２９、１３９、１４０）。結果として、アンドロゲンによって誘発されるＴＧＦ−β１の増加は、リンパ球浸潤を抑制し、涙腺でのＩＬ−１およびＴＮＦ−α産生を減弱させるように作用することができるであろう。したがって、これらのホルモン作用は、シェーグレン症候群の際の涙液分泌組織における自己免疫疾患のアンドロゲン関連抑制について機構上の説明を提供するであろう。さらに考慮すべきこととして、涙腺のアンドロゲンによるＴＧＦ−β含有量の上昇は、涙液分泌組織によるＴＧＦ−βの分泌強化および涙液中のＴＧＦ−β濃度の増加を確かにもたらすであろうということに注目することは重要である。ＴＧＦ−β（例えばＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２）が涙液中で検出されるとすると、涙液中のこの後者のアンドロゲン関連作用の測定（市販アッセイキットまたは慣用的に調製されるアッセイキットを用いる）は、乾燥眼の治療について局所的に適用されるアンドロゲンの効能をモニターする理想的な診断テストとして役立つであろう。用途シェーグレン症候群または涙腺の他の自己免疫疾患をもつ患者へのアンドロゲンまたはその類似体の局所適用は、付属涙腺組織および主要涙腺の眼瞼葉（これは眼球表面に隣接している）における免疫病理学的欠陥を直接抑制することができる。最も適切な治療用化合物の選択は、与えられたホルモンの免疫活性、潜在的な副作用および投与形態によって左右される。例えば、局所的テストステロンは涙腺の炎症を減少させるうえで極めて有効であろうし、そのメチル化類似体は、眼内圧のようなパラメーターについて有害な副作用を持たないように思える（８７）。しかし、医薬としてのテストステロンの利用は禁忌を示すかもしれない：種々の末梢組織におけるこのホルモンの代謝は、エストロゲンへの芳香族化を伴うかもしれず（８６）、これは進行中の自己免疫疾患を悪化させるかもしれない。さらに、投与に関しては、アンドロゲンが担体賦形剤（例えばヒアルロン酸塩）と複合体を形成することができる場合は、窒素付加類似体が考えられよう。したがって、雌のＭＲＬ／ｌｐｒマウスの涙腺自己免疫疾患発現を抑制する、種々の修飾および／または同化アンドロゲンの効力を比較した。動物に疾患の開始後６週間、全身的に賦形剤または指定のアンドロゲンを投与した。このテストで調べたアンドロゲンは以下を含む：（ａ）テストステロン；（ｂ）ジヒドロテストステロン（またアロジヒドロテストステロン、アンドロスタノーロン、スタノロン、５α−ジヒドロステストステロンとも呼ばれる）；（ｃ）フルオキシメステロン；（ｄ）スタノゾロール；（ｅ）ノルテストステロンプロピオネート；（ｆ）デヒドロエピ−アンドロステロン（アンドロゲン前駆体、アンドロステノロン、デヒドロイソアンドロステロン、ＤＨＥＡ、トランスデヒドロアンドロテロンとも呼ばれる）；（ｇ）オキサンドロドン；（ｈ）メチルジヒドロテストステロン（メチルアンドロスタノロンとも呼ばれる）；（ｉ）オキシメトロン；（ｊ）５α−アンドロスタン−１７β−オル−３−オキシム；（ｋ）５α −アンドロスタン−１７α−オル−３−オン−アセテート；（１）２，（５α） −アンドロステン−１７β−オル；（ｍ）５α−アンドロスタン−２α−メチル −１７β−オル−３−オン；および（ｎ）メチルテストステロン。アンドロゲン性化合物のこの特異的な群の免疫活性を比較する正当性は以下の通りである：第一に、これらのホルモンは、ビダ（Vida）が開示したように（８８、この文献は参照により本明細書に含まれる）、主要な構造的サブクラスを代表している。このサブクラスは、（ａ）通常と異なる構造的特徴を有するアンドロゲン性化合物（例えば１７α−メチル−１７β−ヒドロキシ−２−オキサ−５α −アンドロスタン−３−オン、またはオキサンドロロンとも呼ばれる）；（ｂ）テストステロン誘導体（例えばメチルテストステロン）；（ｃ）４，５α−ジヒドロテストステロン誘導体（オキシメトロン）；（ｄ）環Ａの未飽和を含む１７ β−ヒドロキシ−５α−アンドロスタン誘導体でテストステロン誘導体は除く（例えば２，（５α）−アンドロステン−１７β−オル）；（ｅ）１９−ノルテストステロン誘導体（例えば１９−ノルテストステロンプロピオネート）を含む。一定の構造的特性はより最適な免疫抑制特性を付与する可能性があり、これは、ヒトに使用する特定のアンドロゲンを選択するための利点であろう。第二に、標準物（典型的にはテストステロン）と比較して、これらのアンドロゲンは以下の特徴を有する化合物を含む：（ａ）はるかに大きい同化活性と結合された強化アンドロゲン活性（例えば男性化）を有する（例えばフルオキシメステロン）；（ｂ）アンドロゲン性効果は変化なく同化作用は増強（例えばオキシメトロン、ジヒドロテストステロン）；（ｃ）アンドロゲン能は減少し同化活性は変化無し（例えば１９−ノルテストステロンプロピオネート）；および（ｄ）同化活性の増強によって平行してアンドロゲン性能は減少（例えばオキサンドロロン、スタノゾロール）。したがって、この分析は、男性化よりもはるかに大きい同化活性をもつアンドロゲンを同定し、シェーグレン症候群の眼の症状の治療に利用できるはずである（例えばオキサンドロロンは、メチルテストステロンの３２２％の同化活性をもち、２４％のアンドロゲン性活性をもつ（８８））。もちろん、同化効果それ自体は、涙腺の自己免疫症状のアンドロゲン抑制に関与しない可能性もある。しかし、ＭＲＬ／ｌｐｒマウスの１９−ノルテストステロンに関する結果は、この同化アンドロゲン（涙腺で極めて低いアンドロゲン性活性を有する（８８））は、涙腺のリンパ球浸潤を軽減することにおいてテストステロンと等しく有効であった。第三に、これらの化合物は、窒素置換アンドロゲン、５α−アンドロスタン−１７β−オル３−オキシム（これはジヒドロテストステロン（非常に有望なアンドロゲン）の３−ケトン基に対する窒素誘導体の置換によって製造される）（８８）を含む。この置換はアンドロゲン活性を抑制しないで（８８）、局所適用用にヒアルロン酸塩へのステロイドの結合を許容するかもしれない。興味深いことには、種々の他の窒素付加アンドロゲンは、同化活性は増強しているが、アンドロゲン性活性は減少していることが示された。これらの化合物は、典型的には３−置換を含むが、ステロイド環状構造には窒素は取り込まれていない。これはアンドロゲン作用を消失させるようにみえる（８８）。代表的化合物の効果のテスト結果、全ての種類のアンドロゲン（経口的であれ、修飾または同化類似体であれ）が、程度は種々であるけれども、涙腺自己免疫疾患の発現抑制に有効であった。さらに別のルーチンな検査によって、特定の適用のための最適な治療化合物を決定することができる。滴剤（例えば遊離ホルモンまたは賦形剤物質との複合体）または軟膏の形で投与できるアンドロゲン療法は、アンドロゲン／細胞相互作用のメカニズムと持続時間を考えれば、頻繁な適用を必要としないはずである。特定の化合物の投与は、医薬的に許容できる物質中で、眼球表面または眼の隣接領域に対してルーチンな方法で行われるであろう。許容できる物質は、緩衝溶液（例えば、燐酸緩衝食塩水）または不活性な担体化合物を含む。至適用量および投与態様は、容易に慣用的なプロトコルで決定できる。この治療は、（ａ）隣接涙腺組織のリンパ球浸潤を減少させ、それによって腺房細胞および分泌管細胞の免疫仲介性破壊並びにそれらの細胞のリンパ球圧迫を軽減し、（ｂ）付属涙腺および／または眼瞼涙腺が基本量の涙液を分泌することを可能にし（わずか０．１μｌ／分（正常の１／１０）の涙液分泌速度によって良好な条件下で安定な涙液層を維持することができると概算される（１））、さらに（ｃ）外因性の涙液刺激に反応して表面容積を高めることができる機能的涙腺組織の利用可能な領域をつくることができる。アンドロゲンの局所投与は、これらホルモンとの全身的接触と平行する多数の副作用を回避するであろう。これら副作用は、男性化、月経不順（例えば無月経）、肝機能不全、浮腫、血液異常、行動変化および代謝変調を含む。さらに、治療による涙液の基本的分泌増加は、シェーグレン症候群または他の自己免疫患者集団における視力補助器（例えばコンタクトレンズ）の使用を可能にする。ＴＧＦ−βの処置では滴下形態または注射により局所的に投与する。特定の化合物の投与は、緩衝溶液（例えば燐酸緩衝食塩水）または不活性担体化合物を含む医薬的に許容可能な物質の状態で、眼の眼球表面または隣接領域に日常的な方法によって実施されるであろう。投与されるＴＧＦ−βの用量（好ましくは１０ｐｇから１０ｍｇ、より好ましくは１０ｎｇから１０μｇ）は、製剤および薬剤送達方法にしたがって最適なものが決定され、投与態様は通常の方法によって容易に決定することができる。このＴＧＦ−β処置は隣接する涙液分泌組織のリンパ球浸潤を抑制し、したがって免疫反応によって生じる腺房および管の上皮細胞の破壊を軽減する。本発明を好ましい実施例と合わせて詳述している間に、通常の技術を有する者は、前述の記載によって種々の変更、同等物の置き換え、さらに本明細書中の組成物および方法に対するその他の変更を実施することができるであろう。したがって、特許によって付与される保護は添付の請求の範囲およびその同等物に含まれる定義によってのみ限定されるであろう。参考文献１．F．J．Holly，涙液層の生理学: Internat．Ophthalmol．Clin．27:2-6(19 87)．２．J．P．Whitcher，乾燥眼の臨床診断: Internat．Ophthalmol．Clin．27:7 -24(1987)．３．D．W．Lamberts，乾性角結膜炎"角膜、学術的基礎と臨床"("The Cornea． Scienntific Foundations & Clinical Practice")より(G．Smolin & R．A．Thof t 編)、293-308ページ、リットル、ブラウンアンドカンパニー、ボストン、マサチューセッツ(1983)．４．M．A．Lemp，乾燥眼管理の最近の進展：Ophthalmology 94:1299-1304(198 7) ５．A．J．Lubniewski & Ｊ．D．Nelson，乾燥眼と眼球表面疾患の診断と管理：Ophthalmol．Clin．N.A.，3:575-594(1990)．６．R．Kaswan，シクロスポリン滴剤: 乾燥眼のための有望な解決: Res．Prev ．Blindness Writers Seminar，18-20 ページ(1989)．７．K．F．Tabbara，シェーグレン症候群"角膜、学術的基礎と臨床"("The Cor nea．Scienntific Foundations & Clinical Practice")より(G．Smolin & R．A ．Thoft 編)、309-314 ページ、リットル、ブラウンアンドカンパニー、ボストン、マサチューセッツ(1983)．８．H．M．Moutsopoulos & N．Talal，シェーグレン症候群の免疫異常"シェーグレン症候群臨床と免疫局面"("Sjoegren's Syndrome．Clinical and Immunol ogical Aspects")より(N．Talal，H．M．Mounsopoulos & S．S．Kassan編)、258 -265 ページ、Springer Verlag、ベルリン(1387)．９．N．Talal & H．M．Moutsopoulos，シェーグレン症候群の治療"シェーグレン症候群臨床と免疫局面"("Sjoegren's Syndrome．Clinical and Immunologic al Aspects")より(N．Talal，H．M．Mounsopoulos & S．S．Kassan編)、291-295 ページ、Springer Verlag、ベルリン(1987)．１０．M．C．Kincaid，シェーグレン症候群の眼"シェーグレン症候群臨床と免疫局面"("Sjoegren's Syndrome．Clinical and Immunological Aspects")より (N．Talal，H．M．Mounsopoulos & S．S．Kassan編)、25-33 ページ、Springer Verlag、ベルリン(1987)．１１．T．E．Daniels & N．Talal，シェーグレン症候群の診断と区別的診断" シェーグレン症候群臨床と免疫局面"("Sjoegren's Syndrome．Clinical and I mmunological Aspects")より(N．Talal，H．M．Mounsopoulos & S．S．Kassan編 )、193-199ページ、Springer Verlag、ベルリン(1987)．１２．T．T．Daniels T．B．Aufdemorte & J．S．Greenspan，シェーグレン症候群の組織病理学"シェーグレン症候群臨床と免疫局面"（"Sjoegren's Syndro me．Clinical and Immunological Aspects"）より(N．Talal，H．M．Mounsopoul os & S．S．Kassan編)、41-52ページ、Springer Verlag、ベルリン(1887)．１３．E．L．Alecander，原発性シェーグレン症候群の神経筋合併症"シェーグレン症候群臨床と免疫局面"("Sjoegren's Syndrome．Clinical and Immunolog ical Aspects")より(N．Talal，H．M．Mounsopoulos & S．S．Kassan編)、61-82 ページ、Springer Verlag、ベルリン(1987)．１４．T．E．Daniels，ナットシェルにおけるシェーグレン症候群：Shoegren' s synndrome Foundation Inc．Report，ポートワシントン、ニューヨーク(199 0)．１５．N．Talal & S．Ansar Ahmed，性ホルモンと自己免疫疾患: ショートレビュー．Int．J．Immunotherapy 3:65-70(1987)．１６．S．Ansar Ahmed，W．J．Penhale & N．Talal，性ホルモン、免疫応答と自己免疫疾患: Am.J.Pathol．121:531-551(1985)．１７．J．C．Burns，サイトメガロウイルスの持続感染．シェーグレン症候群の病因: Med．Hypotheses 10:451-460(1983)．１８．R．I．Fox，G．Pearson & J．H．Vaughan，シェーグレン症候群患者の唾液腺生検標本のエプスタイン−バーウイルス関連抗原とＤＮＡの検出：J．Imm unol. 137:3162-3168(1986)．１９．S．C．Pflugfelder，S．C．G．Tseng，J.S．Pepose，M．A．Fletcher， N．Klimas & W．Feuer，水性涙液欠乏の患者のエプスタイン−バーウイルス感染と免疫機能不全：Ophthalmology 97:313-323(1990)．２０．J．S．Pepose，R．F．Akata，S．C．Pflugfelder & W．Voigt，シェーグレン症候群患者の涙腺生検標本の単核球表現型と免疫グロブリン遺伝子の再配列：Ophthalmology 97:1599-1605(1990)．２１．J．E．Green，S．H．Hinrichs，J．Vogel & G．Jay，ＨＴＬＶ−１ｔａｘ遺伝子移入マウスの外分泌腺疾患類似シェーグレン症候群：Nature，341:72-7 4(?)．２２．R．F．Garry，C．D．Fermin，D．J．Hart，S．S．Alexander，L．A．Do nehower & H．Luo-Zhang，ＨＩＶと抗原的に関連するヒト嚢内Ａ型レトロウイルス粒子：Science 250:1127-1129(1990)．２３．R．Fox，エプスタイン−バーウイルスとヒト自己免疫疾患：可能性と陥穽：J．Vir．Meth．21:19-27(1988)．２４．R．N．Maini，シェーグレン症候群とリューマチ様関節炎"シェーグレン症候群臨床と免疫局面"("Sjoegren's Syndrome．Clinical and Imnlunologica l Aspects")より(N．Talal，H．M．Mounsopoulos & S．S．Kassan編)、165-176 ページ、Springer Verlag、ベルリン(1987)．２５．P．J．W．Venables，C．G．Teo，C．Baboonian，B．E．Griffin，R．A ．Hughes & R．N．Maini，健常者とシェーグレン症候群患者の唾液腺生検標本のエプスタイン−バーウイルスの持続性：Clin．Exp．Immunol．75:359-364(1989) ．２６．K．F．Tabbara & R．A．Frayha，原発性シェーグレン症候群患者の隔日ステロイド療法：Annals Ophthalmol.，15:358-361(1983)．２７．E．Prijot，L．Bazin & B．Destexhe，乾性角結膜炎のホルモン療法：B ull．Soc．Belge Ophthalmol.，162:795-800(1372)．２８．A．A．Drosos，F．N．Skopouli，K．Galanopoulou，R．C．Kitpidou & H．M．Moutspoulos，原発性シェーグレン症候群患者のシクロスポリンＡ療法：１年経過時の結果：Scand．J．Rheum．Suppl．61:246-249(1986)．２９．M．Nasu，O．Matsubara & H．Yamamoto，涙腺の死後リンパ球浸潤率：自己免疫疾患と非自己免疫疾患との比較：J．Pathology，143:11-15(1984)．３０．H．Carlsten，A．Tarkowski，R．Holmdahl & L．A．Nilsson，エストロゲンはＳＬＥ−傾向のＭＲＬ１ｐｒ／１ｐｒマウスで強力な疾患促進物質である：Clin．Exp．Immunol．80:467-473(1990)．３１．S．A．Ahmed，T．B．Aufdemorte，J．R．Chen，A．I．Montoya，d．Oli ve & N．Talal，エストロゲンは自己抗体の発生を誘発し、正常マウスで唾液腺リンパ球浸潤を促進する: J．Autoimmunity 2:543-552(1989)．３２．K．Frost-Larsen，H．Isger & R．Manthorpe，ブロモヘキシンで治療したシェーグレン症候群: 任意抽出臨床実験: Br．Med．J．1:1579-1581(1878)．３３．J．P．Gilbard，S．R．Rossi，K．G．Heyda & D．A．Dartt，涙液分泌刺激と３−イソブチル−１−メチルキサンチンによる乾燥眼の治療: Arch．Opht halmol．109:672-676(1991)．３４．R．Manthorpe，S．H．Petersen & J．U．Prause，原発性シェーグレン症候群患者の治療におけるムコソルバン： Acta Ophthalmol.(コペンハーゲン)6 2 :537-541(1984)．３５．N．J．Kriegbaum，M．von Linstow，P．Oxholm & J．U．Prause，乾性角結膜炎の進行と原発性シェーグレン症候群の治療に対する応答の追跡調査: Sc and．J．Rheumatol.，18:193-196(1989)．３６．E．S．Raveche & A．D．Steinberg，自己免疫における性ホルモン．"下垂体機能と免疫"("Pituitary Function and Immunity")より(I．Berczi編) 283-301 ページ、CRCプレス、Boca Raton、フロリダ(1986)．３７．S．A．Ahmed & N．Talal，性ホルモンと免疫系−第２部動物データ: Bailliere's Clin．Rheum.，4:13-31(1990)．３８．J．R．Roubinian，N．Talan，J．S．Greenspan，J．R．Goodman & P．K ．Siiteri，生存における去勢と性ホルモン治療の影響、抗核酸抗体とNZW/NZW F 1マウスの糸球体腎炎: J．Exp．Med.，147：1568-1583(1978)．３９．K．A．Melz，W．A．Boegel & A．D．Steinberg，ニュージーランドマウスの治療実験．VII．種々の月齢のNZW/NZW F1の雌のアンドロゲン治療の成功: A rthritis Rheum.，23:41-47(1980)．４０．J．L．Nelson & A．D．Steinberg，性ステロイド、自己免疫と自己免疫疾患．"ホルモンと免疫"("Hormones & Immunity")より、(I．Berczi & K．Kovac s編)、93-119ページ、MTP プレスリミテッド、ランカスター、英国(1987)．４１．H．L．Shear，D．Wofsy & N．Talal，MRL/Mp-+/+マウスの免疫クリアランスと自己免疫疾患における去勢と性ホルモンの影響: Clin．Immunol．Immunop athol.，26:361-369(1983)．４２．S．Ansar Ahmed，P．R．Young & W．J．Penhale，ラットの慢性自己免疫甲状腺炎におけるテストステロンの有益な影響: J．Immunol．136:143-147(19 86)．４３．J．B．Allen，D．Blatter，G．B．Calandrea & R．L．Wilder，ラットのストレプトコッカス細胞壁誘発多発性関節炎の重篤度における性ホルモンの影響: Arthritis Rheum.，26:560-565(1983)．４４．Y．S．Ahn，W.J．Harrington，S．R．Simon，R．Mylvagnam，L．M．Pal l & A．G．So，特発性血小板減少性紫斑病の治療用ダナゾール: N．Engl．J．Me d.，308:1396-1399 1983)．４５．D．A．Sullivan，眼の分泌免疫系におけるホルモンの影響、"神経内分泌−免疫ネットワーク"("The Neuroendocrin-Immune Network")より、（I．Berc zi編）、199-238 ページ、CRC プレス、Boca Raton、フロリダ(1990)。４６．T．T．MacDonald，S．J．Challacombe，P．W．Bland，C．R．Strokws， R．V．Heatly，A．Mci Mowat編、"粘膜免疫学の進歩"("Advances in Mucosal Im munology"1-948 ページ、Kluwer Academic Publishers、ロンドン、英国(199 0)．４７．H．Ariga，J．Edwards & D．A．Sullivan，MRL/Mp-1pr/1prマウスの涙腺の自己免疫発現のアンドロゲン制御: Clinical Immunol．& Immunopathology 53 :499-508(1989)．４８．A．C．Vendramini，C．H．Soo & D．A．Sullivan，シェーグレン症候群マウスモデル(NZW/NZW F1)の涙腺組織の自己免疫疾患のテストステロン誘発抑制 Invest．Ophthalmol．Vis．Sci．32:3002-3006(1991)．４９．A．Bizzarro，G．Valentini，G．Di Marinto，A．Daponte，A．De Bell is & G．Iacono，クラインフェルター症候群付随自己免疫疾患の臨床および免疫特色におけるテストステロン療法の影響: J．Clin．End．Metab.，64:32-36(198 7)．５０．R．W．Hoffman，M．A．Alspaugh，K．S．Waggie，J．B．Durham，& S． E．Walker，MRL/1およびMRL/nマウスのシェーグレン症候群: Arthritis Rheum．27 :157-165(1984)．５１．D．A．Jabs，E．L．Alexander & W．R．Green，自己免疫MRL/Mpマウスの眼の炎症: Invest．Ophthalmol．Vis．Sci．26:1223-1229(1985)．５２．H．S．Klessler，シェーグレン症候群の実験室用モデル: Am．J．Patho l.，52:671-678(1968)．５３．H．Calenligi，E．Kansu，S．Ruacan & K．Eratalay，シェーグレン症候群の分泌免疫系と粘膜の免疫組織学: Adv．Exp.Biol．Med．216B:1641-1648(1 987)．５４．A．A．Drosos，E．Vliet-Dascalopoulou，A．P．Andonopoulos，V．Gal anopoulou，F．N．Skopouli & H．M．Moutsopoulos，原発性シェーグレン症候群におけるナンドロノンデカノエート(デカ−デュラボリン):二重盲検試験: Clin ．Exp．Rheum．6:53-57(1988)．５５．R．J．Hene，A．Kruize，L.Karter，F．H．J．Gmelig & H．Y．Oei，原発性シェーグレン症候群（ＰＳＳ）におけるアンドロゲン性ステロイド、ナンドロンの臨床効果の欠如: Clin．Exp．Rheum．9:338(1991)．５６．A．D．Steinberg，J．B．Roths，E．D．Murphy，R.T．Steinberg & E． S．Raveche，ＭＲＬ／Ｍｐ−ｌｐｒ／ｌｐｒマウスの自己免疫疾患における胸腺摘出またはアンドロゲン投与の効果：J．Immunol．125:871-873(1980)．５７．J．E．Brick，S．E．Walker & K．S．Wise，コウシ胸腺の核抽出物（ＣＴＥ）およびＭＲＬ−ｌｐｒとＭＲＬ−＋／＋マウスのＤＮＡに対する自己抗体のホルモン制御：Clin．Immunol．Immunopathol.，46:68-81(1988)．５８．DA．Jabs & RA．Prendergast，シェーグレン症候群のネズミモデル: In vest．Ophthalmol．Vis．Sci．29:1437(1988)．５９．R．L．Jonsson，A．Tarkowski，K．Backman & L．Klareskog，ＮＺＢ× ＮＺＷＦ１マウスの唾液腺炎の免疫組織学的性状：Clin．Immunol．Immunopatho l.，42:93-101(1387)．６０．K．M．Connolly，V．J．Stcher，B．W．Synder，E．Bohnet & G．O．Po tts，自己免疫疾患のＭＲＬ／ｌｐｒマウスモデルにおけるダナゾールの効果: A gents Actions，25:164-170(1988)．６１．J．D．Mountz，H．R．Smith，R．L．Wilder，J．P．Reeves & A．D．St einberg，ＭＲＬ−ｌｐｒマウスのＣＳ−Ａ治療：自己抗体の産生にも拘らず免疫病変は改善する：J．Immunol．138:157-163(1987)．６２．R．A．Hazelton，A．B．McCruden，R．D．Sturrock & W．H．Stimson，全身性紅斑性狼瘡における免疫応答のホルモンによる操作: 同化ステロイド、１９−ノルテストステロンの薬剤の試み：Annals．Rheum．Dis．42:155-157(1983) ６３．R．Lahita，性ホルモン、シェーグレン症候群および免疫応答: The Moi sture Seekers Newsletter 8:1(1991)．６４．J．Comsa，H．Leonhardt & H．Wekerle，免疫応答のホルモン強調: Rev ．Physiol．Biochem．Pharmacol．92:115-191(1982)．６５．C．J．Grossman，性ステロイドによる免疫系の調節: Endocr．Rev.，5: 435-455(1984)．６６．A．Munck，P．M．Guyre & N．J．Holbrook，ストレスにおけるグルココルチコイドの生理学的機能と薬理作用に対する関係: Endocr．Rev.，5:25-44(19 84)．６７．H．O．Besedovsky，A．E．del Rey & E．Sorkin，免疫−神経内分泌の相互作用：J．Immunol．135:750-754(1985)．６８．I．Berczi，下垂体機能と免疫: 1-134 ページ、CRC プレス、Boca Rat on、フロリダ(1986)．６９．I．Berczi & K．Kovacs，ホルモンと免疫、1-332 ページ．MTP プレスリミテッド、ランカスター、英国(1387)．７０．B．D．Jancovik，B．M．Markovic & N．H．Spector，神経免疫相互作用 : Ann．N．Y．Acad．Sci．496:ニューヨークアカデミーサイエンス、ニューヨーク(1987)．７１．D．A．Weigent & J．Blalock，神経内分泌と免疫系との間の相互作用: 共通のホルモンと受容体: Immunol．Rev．100:79-108(1987)．７２．S．Freier 編、"神経内分泌免疫ネットワーク"("The Neuroendocrine-I mmune Network")、1-266 ページ、CRC プレス、Boca Raton，フロリダ(1990) ７３．J．W．Hadden，K．Masek，G．Nistico編、"中枢神経系、神経内分泌と免疫系間の相互作用"("InteractionsAmong Central Nervous System，Neuroendo crine and Immune Systems")、1-464 ページ、ピタゴラプレス、ローマ(1989)．７４．R．Ader，D．L．Felten，N．Cohen編、"精神神経免疫学"("Psychone ur oimmunology")第二版、1-1248ページ、アカデミックプレス、サンディエゴ、カリフォルニア(1991)．７５．R．Ader，D．Felten，N．Cohen，脳と免疫系との間の相互作用:Annu．R ev．Pharmacol．Toxicol．30:561-602(1990)．７６．R．H．Stead，J．Bienenstock & A．M．Stanisz，粘膜免疫の神経ペプチドによる調節: Immunol．Rev．100:333-359)1987)．７７．E．J．Golsteyn & M．J．Fritzler，レビュー: 正常な免疫過程と自己免疫における胸腺−視床下部−下垂体−性腺軸の役割：J．Rheum．14:982-990(1 987)．７８．内科医のデスクリファレンス、46版、メディカルエコノミクスデータ、モントバレ、ニュージャージ(1992)．７９．B．S．Andrews，R．A．Eisenberg，A．N．Theofilopoulos，S．Izui，C ．B．Wilson，P．J．McConahey，E．D．Murphy，J．B．Roths & F．J．Dixon，偶発的なネズミの狼瘡様症状: いくつかの下部における臨床的免疫病理的症状：J．Exp．Med.，149:1198-1215(1978)．８０．A．N．Theofilopoulos & F．J．Dixon，全身性紅斑性狼瘡のネズミモデル: Adv．Immunol．37:269-390(1985)．８１．J．A．Gelfand，R．J．Sherins，D．W．Alling & M．M．Frank，ダナゾールによる遺伝性血管性浮腫の治療: New Eng．J．Med.，295:1444-1448(1976) ．８２．R．Jonsson，A．Tarkowski & K．Backman，ＭＲＬ／Ｍｐ−ｌｐｒ／ｌｐｒマウスの自己免疫疾患の唾液腺炎における免疫調節治療の効果：Agents Act ions，25:368-374(1988)．８３．H．R．Smith，T．M．Chused & A．D．Steinberg，ＭＲＬ−ｌｐｒ／ｌｐｒマウスのシクロホスファミド誘発変化：細胞組成、免疫機能および疾患への影響：Clin．Immunopathol．30:51-61(1984)．８４．M．Shiraki，M．Fujiwara & S．Tomura，ＭＲＬ／ｌマウスにおけるシクリホスファミドの長期投与．Ｉ．免疫学的異常と狼瘡腎炎の発生における影響：Clin．Exp．Immunol．55:333-339(1984)．８５．R．R．Bartlett，S．Popovic & R．X．Raiss，ＭＲＬ／ｌｐｒマウスにおける自己免疫の発生とこのネズミの疾患における薬剤の効果：Scand．J．Rheu matol.(補遺)、75:290-299(1988)．８６．J．D．Wilson & D．W．Foster 編、"内分泌学のウィリアムズのテキスト"("Williams Textbook")、WB Saunders Company、フィラデルフィア(1985) ８７．P．A．Knepper，J．A．Collins & R．Frederick，ウサギの眼のＩＯＰとＧＡＧｓにおけるデキサメタゾン、プロジェステロンおよびテストステロンの効果：Invest．Ophthalmol．Vis．Sci．26:1093-1100(1985)．８８．J．A．Vida，"アンドロゲンと同化薬剤"("Androgenns and Allabolic A gents")、アカデミックプレス、ニューヨーク(1969)．８９．C．Cavallero，去勢ラットの眼窩外涙腺を用いたアンドロゲンけんていにおける種々のステロイドの相対的有効性: Acta Endocrinol.(コペンハーゲン) 、55:119-131(1967)．９０．Clark JH，Schrader WT，O'Malley．Mechanism of action of steroid hormones（ステロイドホルモンの作用メカニズム）、Wilson JD，Foster DW編： Williams Textbook of Endocrinology（ウィリアムの内分泌学）、WB Saunders 刊、フィラデルフィア、pp35-90(1992) ９１．Trapman J，Ris-Stalpers C，van der Korput JAGM，Kuiper GGJM，Fab er PW，Romijin JC，Mulder E，Brinkmann AO．The androgen receptor:functional structure and expression in transplanted human prostate tumors and pros tate tumor cell lines（アンドロゲンレセプター：移植ヒト前立腺腫瘍の機能的構造と発現および前立腺腫瘍細胞株）、J．Ster．Biochem．Mol．Biol．37:83 7(1890) ９２．Quarmby VE，Yarbrough WG，Lubahn DB，French FS，Wilson EM．Autol ogous down-regulation of androgen receptor messenger ribonucleic acid(アンドロゲンｍＲＮＡの自系ダウンレギュレーション)、Mol．Endocr．4:22(1990) ９３．Simental JA，Sar M，Lane MV，French FS，Wilson EM．Transcription al activation and nuclear targeting signals of the human androgen recept or（ヒトアンドロゲンレセプターの転写活性化と核標的シグナル）、J．Biol.Ch em．266:510(1991) ９４．Wahli W，Martinez E．Superfamily of steroid nuclear receptors:po sitive and negative regulators of gene expression(ステロイドの核レセプターの上科：遺伝子発現の陰性および陽性調節物)、FASEB J 5:2243(1991) ９５．Evans RM．The steroid and thyroid hormones receptor superfamily( ステロイドおよび甲状腺ホルモンレセプター上科)、Science 240:889(1988) ９６．Beato M．Gene regulation by steroid hormones（ステロイドホルモンによる遺伝子調節）、Cell 56:335(1989) ９７．Sar M，Lubahn DB，French FS，Wilson EM．Immunohistochemical loca lization of the androgen receptor in rat and human tissues（アンドロゲンレセプターのラットおよびヒトの組織での免疫組織学による存在場所の決定）、 Endocr．127:3180(1990) ９８．Takeda H，Chodak G，Mutchnik S，Nakamoto T，Chang C．Immunohisto chemical localization of androgen receptors with mono- and polyclonal an tibodies（単および多クローン性抗体を用いたアンドロゲンレセプターの免疫組織学による存在場所の決定）、J．Endocr．126:17(1990) ９９．Prins GS，Birch L．Immunocytochemical analysis o fandrogen recep tor along the ducts of the separate rat prostate lobes after androgen wi thdrawal and replacement（アンドロゲン使用中止と補充後の個々のラット前立腺葉の管上のアンドロゲンレセプターの免疫細胞化学的分析）、Endocr．132:169( 1993) １００．Myal Y，Robinso DB，Iwasiow B，Tsuyuki D，Wong P，Shiu RPC．Th e prolactin-inducible protein（PIP/GCDFP-15）gene: cloning，structure an d regulation(プロラクチン誘発蛋白(PIP/GCDFP-15)遺伝子：クローニング、構造および調節)、Mol.Cell.Endocr．80:165(1991) １０１．Zeitler P，Argente J，Chowen-Breed JA，Clifton DK，Steiner RA ．Growth hormone-releasing messenger ribonucleic acid in the hypothalamu s of the adult male rat is increased by testosterone（雄ラットの成獣の視床下部の成長ホルモン遊離ｍＲＮＡはテストステロンによって増加する）、Endo cr．127:1362(1990) １０２．Quarmby VE，Beckman WC，Wilson EM，French FS．Androgen regulat ion of c-myc messenger ribonucleic acid levels in rat ventral prostate( ラット腹側前立腺のc-mycｍＲＮＡレベルのアンドロゲン調節)，Mol．Endocr．1 :865(1987) １０３．Persson H，Lievre CA，Sode rO，Villar MJ，Metsis M，Olson L，R itzen M，Hokfelt T．Expression of b-nerve growth factor receptor mRNA in Sertoli cells downregulated by testosterone(テストステロンによるダウンレギュレーションを受けたセルトリ細胞のｂ−神経増殖因子レセプターｍＲＮＡの発現)、Science 247:704(1990) １０４．Mooradian AD，Morley JE，Korenman SG．Biological actions of an drogens(アンドロゲンの生物学的作用)、Endocr．Rev．8:1(1987) １０５．Quarmby VE，Kemppainen JA，Sar M，Lubahn DB，French FS，Wilson EM．Expression of recombinant androgen receptor in cultured mammalian c ells(培養哺乳類細胞での組換えアンドロゲンレセプターの発現)、Mol.Endocr．4 :1399(1990) １０６．Dong Y，Poellinger L，Gustrafsson JA，Okret S．Regulation of g lucocorticoid receptor expression: evidence for transcriptional and post translational mechanisms(グルココルチコイドレセプターの発現調節：転写および翻訳後機構の証拠)、Mol．Endocr．2:1256(1988) １０７．Rocha FJ，Wickham LA，Pena JDO，Gao J，Ono M，Lambert PW，Kell eher RS，Sullivan DA．Influence of gender and the endocrine environment on the distribution of androgen receptors in the lacrimal gland（涙腺のアンドロゲンレセプター分布に対する性と内分泌的環境の影響）、J．Steorid B iochem．Mol．Biol．46:737(1993) １０８．Lambert RW，Kelleher RS，Wickham LA，Vaerman JP，Sullivan DA． Neuroendocrinimmune modulation of secretory component production by rat lacrimal，salivary and intestinal epithelial cells(ラットの涙腺、唾液腺および腸上皮細胞による分泌成分産生の神経内分泌免疫調整)、Invest．Ophthal mol．Vis．Sci．35:1192(1993) １０９．Sullivan DA，Bloch KJ，Allansmith MR．Hormonal influence on th e secretory immune system of the eye: androgen control of secretory comp onent production by the rat exorbital gland（眼の分泌免疫系に対するホルモンの影響：ラットの外眼窩腺による分泌成分産生のアンドロゲン制御）、Immu nology 52:239(1984) １１０．Steinberg AD．Concepts of pathogenesis of systemic lupus eryth ematosus(全身性紅斑性狼瘡の病理発生の概念)、Clin．Immunol．Immunopathol ．63:19(1992) １１１．Mountz JD，Gause WC，Jonsson R．Murine models for systemic lup userythematosus and Sjogren's syndrome（全身性紅斑性狼瘡とシェーグレン症候群のためのネズミモデル）、Curr．Opin．Rheumatol．3:738(1991) １１２．Sibbit WL．Oncogenes，growth factors and autoimmune disease（オンコジーン、増殖因子および自己免疫疾患）、Antican Res．11:97(1991) １１３．Goetzl EJ，Sreedharan SP．Mediators of communication and adapt ation in the neuroendocrine and immune systems(神経内分泌系と免疫系における連絡と適応の仲介物質)、FASEB J．6:2646(1992) １１４．Robertson SA，Brannstrom M，Seamark RF．Cytokines in rodent re production and the cytokine-endocrine interaction（ゲッ歯類の生殖におけるサイトカインとサイトカイン−内分泌相互作用）、Opin．Rheumatol．4:585(1 992) １１５．Krueger J，Ray A，Tamm I，Sehgal PB．Expression and function o f i nterleukin-6 in epithelial cells（上皮細胞におけるインターロイキン−６の発現と機能）、J．Cell．Biochem．45:327(1991) １１６．Mantovani A，Bussolino F，Cejana E．Cytokine regulation of end othelial cell function(内皮細胞機能のサイトカイン調節)、FASEB J．6:2591( 1992) １１７．Firestein GS．Cytokines in autoimmune diseases(自己免疫疾患におけるサイトカイン)、Clin．Mol．Asp．Autoimmune Dis．8:123(1992) １１８．Kroemer G，Martinez A．Cytokines and autoimmune diseases(里課員と自己免疫疾患)、Immunol．Immunopath．61:275(1991) １１９．Dinarello CA．Interleukin-1 and tumor necrosis factor: effecto r cytokines in autoimmune diseases(インターロイキン−１と腫瘍壊死因子：自己免疫疾患のエフェクターサイトカイン)、Semin．Immunol．4:133(1992) １２０．Deem RL，Shanahan F，Targan SR．Triggered human mucosal T cell s release tumor necrosis factor-alpha and interferon gamma which kill hu man colonic epithelial cells(誘発されたヒト粘膜Ｔ細胞は、ヒトコロニー上皮細胞を殺す腫瘍壊死因子αとインターフェロンγを遊離する）、Clin．Exp．I mmunol．83:79(1991) １２１．Mountz JD，Edwards CK．Murine models of autoimmune disease(自己免疫疾患のネズミモデル)、Curr．Opin．Rheum．4:621(1992) １２２．Sarvetnick N，Fox HS．Interferon-gamma and the sexual dimorphi sm of autoimmunity(インターフェロンγと自己免疫疾患の性的二形)、Mol．Bio l．Med．7:323(1990) １２３．Wakefield D，Lloyd A．The role of cytokaines in the pathogenes is of inflammatory eye disease(眼の炎症性疾患の病理発生におけるサイトカインの役割)、Cytokine 4:1(1992) １２４．Rosenbaum JR．Cytokines: the good，the bad，and the unknown（サイトカイン：その利益、不利益、未知の部分）、Invest．Ophthalmol．Vis．S ci．34:2389(1993) １２５．Fox RI，Kang HI．Pathogenesis of Sjogren's syndrome （シェーグレン症候群の病理発生）、Rheum．Dis．Clin．NA 18:517(1992) １２６．Sullivan DA．Possible mechanisms involved in the reduced tear secretion in Sjogren's syndrome（シェーグレン症候群における涙液分泌減少の可能なメカニズム）、Proceedings of the IVth Int．Symposium on Sjogren' s Syndrome（第６回シェーグレン症候群国際シンポジウム詳録）、アムステルダム、Kluger Press刊、(1993) １２７．Koh K，Sawada S，Fox RI．High levels of IL-10 and Th1 cytokine mRNA transcript in salivary gland biopsies from Sjogren's syndrome pati ents(シェーグレン症候群患者から得た唾液腺生検材料における高レベルのＩＬ −１０およびＴｈ１サイトカインｍＲＮＡ転写物）、Proceedings of the IVth Int．Symposium on Sjogren's Syndrome（第６回シェーグレン症候群国際シンポジウム詳録）、アムステルダム、Kluger Press刊、(1993) １２８．Saito I，Terauchi K，Shimuta M，Nishimura S，Yoshino K，Takeuc hi T，Tsubota K，Miyasaka N．Expression of cell adhesion molecules in th e salivary and lacrimal glands of Sjogren's syndrome(シェーグレン症候群の唾液腺および涙腺における細胞粘着分子の発現)、J．Clin．Lab．Anal．7:180 (1993) １２９．Dang H，Lazaridis K，Aufdemorte T，McGuff H，Talal N．PCR anal ysis of cytokines produced in salivary glands of Sjogren's syndrome（シェーグレン症候群の唾液腺で産生されたサイトカインのＰＣＲ分析）、Proceedi ngs of the IVth Int．Symposium on Sjogren's Syndrome（第６回シェーグレン症候群国際シンポジウム詳録）、アムステルダム、Kluger Press刊、(1993) １３０．Skopouli FN，Boumba D，Moutsopoulos HM．Cytokine mRNA expressi on in the labial salivary gland tissues from patients with primary Sjogr en's syndrome(pSS)(原発性シェーグレン症候群の患者の口唇唾液腺組織におけるサイトカインｍＲＮＡの発現)、Proceedings of the IVth Int．Symposium on Sjogren's Syndrome（第６回シェーグレン症候群国際シンポジウム詳録）、アムステルダム、Kluger Press刊、(1993) １３１．Ono M，Yoshino K，Tsubota K，Saito I．Subclass expression of I gA in lacrimal glands of patients with Sjogren's syndrome（シェーグレン症候群の患者の涙腺におけるＩｇＡサブクラスの発現）、Lacrimal Gland，Tear Fil m and Dry Eye Syndromes: Basic Science and Clinical Relevance(涙腺、涙液膜および乾燥眼症候群：基礎科学および臨床との関連性)、Adv．Exp．Med．Biol ．(1993) １３２．Konttinen YT，Hukkanen M，Kemppinen P，Segerberg M，Sorsa T，M almstrom M，Roses，Itescu S，Polak JM．Peptide-containig nerves in labia lsalivary glands in Sjogren's syndrome(シェーグレン症候群の口唇唾液腺におけるペプチド含有神経)、Arth．Rheum．35:815(1992) １３３．Collins SM，Hurst SM，Main C，Stanley E，Khan I，Blennerhasset t P，Swain M．Effect of inflammation of enteric nerves．Cytokine-induced changes in neurotransmitter content and release(腸の神経の炎症の影響、神経伝達物質含有量と遊離におけるサイトカイン誘発変化）、Ann．NY Acad．Sc i．664:415(1992) １３４．De M，Sanford TR，Wood GW．Interleukin-1，interleukin-6 and tu mornecrosis factor alpha are produced in the mouse uterus during the est rous cycle and are induced by estrogen and progesterone(インターロイキン −１および６並びに腫瘍壊死因子は発情サイクル時にマウスの子宮で産生され、エストロゲンおよびプロジェステロンによって誘発される)、Dev．Biol．151:29 7(1992) １３５．Homo-Delarche F，Fitzpatrick F，Christeff N，Nunez EA，Bach JF ，Dardenne M．Sex steroids，glicocorticoids，stress and autoimmunity(性ステロイド、グルココルチコイド、ストレスおよび自己免疫)、J．Ster．Bioche m．Mol．Biol．40:613(1991) １３６．Nagy E，Berczi I，Sabbadini E．Endocrine control of an immunor egulatory cytokine of the submandibular gland（下顎腺の免疫調節サイトカインの内分泌制御）、ハンスセライ(Hans Selye)神経内分泌学シンポジウム、ブダペスト、p.51(1992) １３７．Suemori S，Ciacci C，Podolsky DK．Regulation of transforming g rowth factor expression in rat intestinal epithelial cells(ラット腸上皮細胞における形質転換増殖因子発現の調節)、J．Clin．Invest．87:2216(1991) １３８．Fox RI，Saito I．Sjogren' syndrome: immunologic and neuroendoc rin e mechanism(シェーグレン症候群：免疫および神経内分泌メカニズム)、Lacrima l Gland，Tear Film and Dry Eye Syndromes: Basic Science and Clinical Rel evance(涙腺、涙液膜および乾燥眼症候群：基礎科学および臨床との関連性)、Ad v．Exp．Med．Biol．(1993) １３９．Shull MM，Ormsby I，Kier AB，Pawloeski S，Diebold RJ，Yin M，A llen R，Sidman C，Oroetzel G，Calvin D，Annunziata N，Doetschman T．Targ eted disruption of the mouse transforming growth factor-β1 gene results in multifocal inflammatory disease(マウス形質転換増殖因子β１遺伝子の標的破壊は多病巣性炎症異疾患をもたらす)、Nature 359:693(1992) １４０．Turner M，Chantry D，Katsikis，Berger A，Brennan FM，Feldmann M．Induction of the interleukin 1 receptor antagonist protein by transfo rming growth factor-β（形質転換増殖因子−βによるインターロイキン１レセプター拮抗蛋白の誘発）、Eur．J．Immunol．21:1635(1991)

Claims

【特許請求の範囲】１．治療的有効量のＴＧＦ−βを医薬的に許容できる担体物質中に含む治療薬を提供し、さらに当該治療薬を乾性角結膜炎（ＫＣＳ）に罹患している患者の目の眼球表面または極めて近傍に局所的に投与することを含む、当該ＫＣＳを治療する方法。２．当該投与工程において、当該治療薬が目の眼球表面に適用される請求の範囲第１項の方法。３．当該投与工程において、当該治療薬が眼球表面近傍の目の領域に適用される請求の範囲第１項の方法。４．当該投与工程において、当該治療薬が注射によって局所的に適用される請求の範囲第３項の方法。５．乾性角結膜炎（ＫＳＣ）の治療に際して以下の工程を含む眼のアンドロゲン療法の有効性を検出する方法：アンドロゲンの治療的有効量または、局所適用でアンドロゲンの効能をもちエストロゲンの効能をもたないアンドロゲン類似体の治療的有効量を含み、当該アンドロゲンまたはアンドロゲン類似体が医薬的に許容可能な物質中に存在する治療薬を提供することを含む眼のアンドロゲン療法を施された患者を提供し、患者の目の眼球表面または極めて近傍に当該治療薬を局所的に投与し、さらに、当該眼のアンドロゲン療法の効能を表示するものとして、当該患者の涙液中のＴＧＦ−βのレベルの上昇程度を経過時間にしたがって検出する。６．当該投与工程において、当該治療薬が目の眼球表面に適用される請求の範囲第５項の方法。７．当該投与工程において、当該治療薬が眼球表面の近傍の目の領域に適用される請求の範囲第５項の方法。８．当該検出工程において、当該患者の涙液中のＴＧＦ−β１のレベルの上昇程度が経過時間にしたがって検出される請求の範囲第５項の方法。