JPH11504002A

JPH11504002A - 診断医薬品及び治療医薬品としての使用のためのヒドロキシアルキルホスフィン化合物並びにその製造方法

Info

Publication number: JPH11504002A
Application number: JP8529421A
Authority: JP
Inventors: カッテッシュヴィーカッティー; プラーラドアールシング; ヴィースリーニヴァサレディー; ウィンエイヴォルカート; アレンアールケトリング
Original assignee: ザキュアレイターズオヴザユニヴァーシティーオヴミズーリー
Priority date: 1995-03-29
Filing date: 1996-03-07
Publication date: 1999-04-06
Also published as: US5876693A; WO1996030056A1; CA2215833A1

Abstract

(57)【要約】診断医薬品または治療医薬品としての使用のための化合物及びその製造方法は官能化されたヒドロキシアルキルホスフィンリガンド及びそのリガンドと化合された金属を含む。

Description

【発明の詳細な説明】診断医薬品及び治療医薬品としての使用のためのヒドロキシアルキルホスフィン化合物並びにその製造方法発明の背景技術分野本発明は医薬品、特に診断薬及び治療薬としての使用のための放射性医薬品に関する。更に詳しくは、本発明は診断または治療用の放射性医薬品としての使用のために外部還元剤を必要としないで金属化合物と安定な錯体を生成する単座リガンド及び多座リガンドの両方を使用する化合物及びこれらの化合物の合成方法に関する。背景技術 ^99mTcの有利な物理的性質、広範な利用可能性、及び低コストのために、この放射性核種は患者のシンチグラフィック画像形成研究のための診断放射性医薬品を製剤化するのに最も魅力的な候補であり続ける(Jurissonら，1993）。Tcの化学類似体であるReは、それらをβ放出放射性核種の中で新規な放射性医薬品の製剤化に最も魅力的にする物理的性質及び生産性を有する二つの放射性同位元素（即ち、¹⁸⁶Re 及び¹⁸⁸Re; ^186/188Re）を有する(Volkertら，1991; Troutner，19 87）。¹⁰⁵Rh は治療放射性医薬品を調製する際の使用に重要な別のβ放出放射性核種である。Tc及びReの化学的性質はしばしば同じであるので（常にではないが）、多くのリガンド系が相当する^186/188Re キレートと同じ構造特性及び物理化学的性質を有する^99mTcとキレートを生成することができる二官能キレート剤(BF CA)を合成するための基礎として使用し得る。新規な^99mTc、^186/188Re、及び¹⁰⁵Rh 放射性医薬品の設計における複雑な分子プローブの開発は患者の診断及び治療において将来の進歩を与えるであろう。多くの重要な単一光子放出コンピュータ断層撮影法(SPECT)放射性医薬品がヒト疾患の診断に特別な手段として有効に使用されるが、多くの新規な部位誘導合成誘導体（例えば、免疫誘導分子、レセプター−アビド(avid)分子、等）の加速された開発は診断用途及び治療用途の両方について更なる技術的進歩の大きな機会を与えるであろう。高度に選択的な放射能標識薬剤キャリヤーの設計に見られる多くの難点（例えば、標的部位への有効な薬剤送出、in vivo 代謝、標的組織に対し非標的組織からの放射能のクレアランスの速度、等の問題）が解消される必要がある。部位誘導分子に結合または融合された^99mTc、¹⁰⁵Rh、及び^186/188Re キレート部分の物理化学的特性は最終薬剤製品の有効性の固有の決定因子として重要な役割を果たすであろう。加えて、放射性医薬品のルーチン製剤化に扱いやすい条件で最終製品を標識する^99mTcまたは^186/188Re の能力がまた必須の考慮事項である。有効な放射性医薬品を生成するための^99mTcまたは^186/188Re による生物分子の標識は多くの攻撃誘発を与える。高いin vitro安定性及びin vivo 安定性を有する^99mTc及び／または^186/188Re 標識薬剤を製造することが必要である。最小の、または測定できないin vivo またはin vitro解離を示す^99mTcまたはReキレートを生成する幾つかの異なるリガンドフレームワークが開発されていた。これらのキレートは或る範囲の物理化学的特性を有する^99mTc-キレートの選択を放射性医薬の化学者に与えていた。しかしながら、高い放射性薬品純度(RCP)を有する高収率の^99mTc（即ち、Re）製品の生成は、通常、ルーチン医薬品調製に使用される製剤化プロセス中に多量の過剰のリガンドの存在を必要とする。不運なことに、開発されている放射能標識部位誘導合成誘導体に必要とされる高い比活性（即ち、GBq/μモルまたはCi/μモル）は、これらのキレート化系の多くの使用を排除し、こうして、わずかに二三のリガンド主鎖についての選択をひどく制限する。高い比活性(Sp．Act)の放射能標識薬剤は、予備生成された^99mTcまたは^186/18 ⁸ Re 二官能キレート(BFC)または放射性金属による後結合(post-conjugation)キレート化(この場合、錯生成部分は生物分子ターゲッティング剤に既に付加(Park er，1990)または融合(Lister-James ら，1994; Knightら，1994)されている）を使用して調製し得る。たとえ、Sp．Act の最大化が放射能標識されていない分子からの放射能標識分子の分離により達成し得るとしても、少量のキレートを必要とするキレート化系を使用することが実際に更に望ましい。ルーチンの患者看護用途にFDA 認可された^99mTc／^186/188Re 放射性医薬品として最終的に使用される製品の生成において、殆どの^99mTc-“インスタントキット”の場合のように、薬剤製品の生成のための工程の数を最小の工程、理想的には一つの工程に保つことが最も望ましい。少量のキレート剤を使用する高収率の安定な^99mTcキレートの調製に有効であることが示された二三のリガンド系の一つは、リガンドのアミド−チオールクラスである(Fritzbergら，1988，Rao ら，1992、及びChianelli ら，1994)。一般に、多座リガンドのこれらの型は、２〜３個のアミドドナー基と組み合わせて少なくとも４個のドナー原子及び１個または２個のチオールドナー基を含む。幾つかのN₂S₂またはN₃S アミド−チオールフレームワークがBFCAを合成するのに使用されており、ジアミド−ジチオール(DADS)リガンド(Fritzbergら，1988)、モノアミンモノアミド(MAMA)リガンド(Raoら，1992; Gustavson ら，1991)及びメルカプトアセチルグリシルグリシル−グリシン(MAG₃)リガンド(Chianelliら，1994 )を含む。アミド−チオールリガンドは^99mTc及び^186/188Re に有効なBFCAをつくるが、それらの物理化学的性質の範囲が制限され、ルーチン標識の条件は実用性まで低下するのに困難であることがあり、しかも外部還元剤(例えば、Sn(II))が^99m Tcまたは^186/188Re による標識中に通常存在し、これが特定のin vivo 局在化を減少または排除する部位誘導部分の不可逆の変化を生じ得る。 ^99mTc標識にまた使用されていたその他のリガンド系は、N₂S₂−アミン−チオールリガンド、プロピレンアミンオキシム(PnAO)誘導体及びヒドラジノニコチンアミド(HYNIC)系を含む。前者の二つの誘導体は中性親油性^99mTc-キレートを生成し、これらは幾つかの点で有益であるが、in vivo の高い非特異的結合及び非標的組織からの不十分なクレアランスをもたらす(Muna ら，1994; Nochら，1994 ）。HYNIC 系は^99mTcと良く特定された製品を生成しない(Abrams ら，1990a; Ab ramsら，1990b)。これらの系の全てが外部還元剤を必要として^99mTcとキレートを通常生成する。３価のホスフィンドナー基を含むリガンド主鎖が高RCP で安定な^99mTcキレート及び^186/188Re キレートを生成するのに有効であることが示されていた。ホスフィンは^99mTc（またはRe）をキレート化するだけでなく、それらはペルテクネテート及びペルレネートの両方を低酸化状態に還元することができ、それ故、外部還元剤［例えば、Sn(II)］の存在を必ずしも必要としない。ジホスフィンリガンドは^99mTc- 放射性医薬品、特に^99mTc標識心筋潅流剤として使用される放射性医薬品の開発に広範囲に使用されていた(Deutsch，1993; Nowotnik及びNunn，19 92; Kelly ら，1993)。不運なことに、これらのキレートの殆どがアルキル−ホスフィンドナー基を使用し、そのホスフィンがO₂を含む水溶液中で(酸化リン)に迅速に酸化され、薬剤の製造及び最終製品の最終のルーチン生成に厳しい条件を必要とする。これらの理由のために、アルキルホスフィンドナー基を含むリガンドは新規薬剤の設計に制限された融通性を有し、しかも部位誘導放射性医薬品を調製するのに使用するための殆どのホスフィンをベースとするBFCAを調製するための合理的な基礎を形成しない。また、芳香族ホスフィンがTc及びReとの使用について報告されていたが、得られるキレートの高親油性がin vivo 用途のための BFCAとしてのそれらの潜在的な利用を最小にする。水溶液中の良好な溶解性を有するホスフィンドナー基を含み、O₂により酸化されないが、依然として^99mTcO₄ ^-または^186/188ReO₄ ^-を還元することができ、かつ／または還元されたTcもしくはReを強くキレート化することができる小さいリガンド系が、新規な放射性医薬品または新規なBFCAを製剤化するのに広範な適用可能性があるであろう。殆どのその他の二官能キレート化系は外部還元剤（例えば、Sn⁺²）の存在または低金属酸化状態（例えば、^99mTc- グルコヘプトネート）への^99mTcO₄ ^-または¹ ^86/188 ReO₄ ^-の前還元を必要とする。夫々のホスフィンＰ原子に結合された低分子の側アームを含む水溶性ホスフィン基は、リガンド設計に融通性を与え、ルーチンの^99mTc- 放射性医薬品調製に使用される条件下の^99mTcO₄ ^-（または^186/188 ReO₄ ^-）の還元剤として、またTcまたはReの還元形態の有効な錯生成剤として両方に使用し得る。本件出願人は、通気水溶液中で安定であり、かつ高度に安定な^99mTcキレート及び¹⁸⁸Re キレートを生成する官能化ヒドロキシアルキルホスフィンを含む単座ホスフィンリガンド及び一連の多座リガンドを使用する。^99mTcまたは^186/188Re を還元またはキレート化するように設計された従来技術のアルキルホスフィンをベースとするリガンドと異なって、ヒドロキシアルキルホスフィン基は水溶液に溶解された時に酸素の存在に対し感受性ではない。また、良好な酸化安定性を有するその他の水溶性ホスフィンリガンドが還元剤として使用されていたが、これらのリガンド中のホスフィンドナーＰ原子に結合された側鎖は嵩高であり、しかも放射性薬品開発においてそれらの実用性を制限する高度に荷電されたホスフィンを生じる(Pasqualine ら，1994)。殆どのその他の二官能キレート化系は^99mTcO₄ ^-（または^186/188ReO₄ ^-）を+7酸化状態から更に容易にキレート化される低酸化状態(例えば、^99mTc-GH)に還元するために外部還元剤(例えば、Sn(II)またはNaBH₄)の存在または前還元を必要とする。本発明の１個以上のヒドロキシアルキルホスフィンドナー基を含むリガンドは外部還元剤を必要としないが、そのリガンドはその他の還元剤または^99mTc- シントン(synthon)と組み合わせて使用される時に配位基として使用し得る。これらのホスフィン含有リガンドで生成された得られる^99mTc錯体及びRe錯体はヒト血清を含む水溶性中で同様に優れたin vivo 安定性を示す。発明の要約及び利点本発明によれば、診断医薬品または治療医薬品としての使用のための化合物が提供され、その化合物はリガンドとリガンドと化合された金属とを含み、そのリガンドは少なくとも一つのヒドロキシアルキルホスフィンドナー基を含み、かつその金属を還元することができ、それにより化合物の生成を促進することができる。更に、本発明は診断医薬品及び／または治療医薬品としての使用のための単座化合物の製造方法を提供し、その方法は下記の反応を含む。 M + P(A-OH)₃---→ M^R-P(A-OH)₃ M + RP ---→ M^R-RP （式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^RはＭと較べて還元された酸化状態の遷移金属であり、RPは金属の還元形態に配位するための錯生成部分を含む標識されていない放射性医薬品前駆体であり、かつＡはアルキル基である）更に、本発明は診断医薬品及び／または治療医薬品としての使用のための多座化合物の製造方法を提供し、その方法は下記の反応を含む。 M + nP(A-OH)₃--- →M^R-［P(A-OH)₃］_X M + RP ---→ M^R-RP （式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^RはＭと較べて還元された酸化状態の遷移金属であり、Ｘは１〜６であり、ｎ＝１〜６、RPは金属の還元形態に配位するための配位部分を含む標識されていない放射性医薬品前駆体であり、かつＡはアルキル基である）また、本発明はin vitro安定性及びin vivo 安定性を有する通気水溶液中で⁹⁹ ^m Tcキレートまたは^186/188Re キレートを生成するリガンドフレームワーク中にその他のドナー原子（例えば、Ｎ原子、Ｏ原子、Ｓ原子及びＰ原子）とともに少なくとも一つのヒドロキシアルキルホスフィンドナー基を含む単座リガンド及び多座リガンドを提供する。更に、本発明は診断目的並びに治療目的のための金属と化合された少なくとも一つのヒドロキシアルキルホスフィン基を含む単座リガンド及び多座リガンドを使用する措置方法を提供する。図面の簡単な説明本発明のその他の利点は添付図面と関連して考慮される時に以下の詳細な説明を参考にして良く理解されるようになるので、これらは容易に認められるであろう。図１は本発明の一つ以上のヒドロキシアルキルホスフィン基を含むリガンドの合成に関する合成スキームを示す。図２は本発明のレニウム錯体の合成に関する合成スキームを示す。図３はビスーヒドロキシメチルホスフィン含有リガンドの合成に関する合成スキームを示す。図４は図３のリガンドを使用する金属錯体の合成に関する合成スキームを示す。図５は図３のリガンドを使用する金属錯体の合成に関する合成スキームを示す。図６は６個のホスフィンドナー基を含むリガンドの合成に関する合成スキームを示す。図７は図６で生成されたリガンドの一般構造を示す。図８は化合物(5)の結晶構造を示す。図９は化合物(6)の結晶構造を示す。図10は夫々1.36分及び2.88分の^99mTcO₄及び^99mTc-3に関する保持時間を有する^99m Tc- ジヒドロキシメチレン−エチレン−ホスフィン（^99mTc-3）のHPLC分析を示すグラフであり、Ａ：混合後20分またＢはpH7 で^99mTcO₄ ^-と1mg/mLの(3)を混合した後４時間である。図11はP(CH₂OH)₃(化合物(1))の³¹P NMR スペクトルを示す。図12は(HOH₂C)₂PCH₂CH₂P(CH₂OH)₂(化合物(3))の³¹P NMR スペクトルを示す。図13は(HOH₂C)₂PCH₂CH₂P(CH₂OH)₂(化合物(4))の³¹P NMR スペクトルを示す。図14は［Re(O)₂｛P(CH₂OH₃｝］⁺(化合物(2))の³¹P NMR スペクトルを示す。図15は［Re(O)₂｛(HOH₂C)₂PCH₂CH₂P(CH₂OH)₂｝₂｝+(化合物(5))の³¹P NMR スペクトルを示し、また図16は［Re(O)₂｛(HOH₂C)₂PC₆H₄P(CH₂OH)₂｝₂｝+(化合物(6))の³¹P NMR スペクトルを示す。好ましい実施態様の詳細な説明一般に、本発明は診断医薬品または治療医薬品としての使用のための化合物を提供するが、これらの化合物はまたMRI造影剤を含むその他の医薬用途に使用し得る。本発明の新規化合物は診断及び治療の放射性医薬品として使用し得る標識された分子を提供する。これらの化合物は一つ以上のヒドロキシアルキルホスフィンドナー基への金属の配位を含む少なくとも一つのリガンドで錯生成された遷移金属を含む。即ち、本発明は高いin vitro安定性及び／またはin vivo 安定性を有する種々の遷移金属と錯体を生成する際の使用のための典型的に１〜６個のヒドロキシアルキルホスフィンドナー単位を含むホスフィンをベースとするリガンド系を提供する。本発明は通気水溶液中で高いin vivo 安定性及び／またはin vitro安定性を有する種々の遷移金属と錯体を生成する際の使用のためのヒドロキシアルキルホスフィンをベースとするリガンド系を提供する。本発明のこれらの化合物及び化合物の製造方法は一般に式： M + nP(A-OH)₃--- →M^R-［P(A-OH)₃］_X M + RP ---→ M^R-RP （式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^RはＭと較べて還元された酸化状態の遷移金属であり、Ｘは１〜６であり、ｎ＝１〜６、RPは金属の還元形態に配位するための配位部分を含む標識されていない放射性医薬品前駆体であり、かつＡはアルキル基である）を特徴とし得る。リガンドは、一般に^186/188Re、¹⁰⁵Rh、及び^99mTcを含む群からの遷移金属で錯生成される。これらの錯体は生成される1:1 以上（≧）のリガンド対金属の比を含み、得られるキレートを小さく、かつ良く特定されるようにする。これらの特定の組み合わせは、特に放射性核種の容易に利用できる化学形態による使用のために、以下に記載されるような一工程の、高収率の反応で錯体の生成を可能にする。例えば、^99mTcO₄ ^-キレート、ReO₄ ^-キレートまたは¹⁰⁵Rh-クロリドが使用し得る。ヒドロキシアルキルホスフィンリガンドのこれらの型はγ及びβ放出放射性同位元素、例えば、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁰⁹Pd、¹⁰⁵Rh、等を含む放射性同位元素を有する種々の遷移金属と、または^99mTc放射性医薬品を用いるような診断用途のために、高度に安定なキレートを生成することが測定された。更に詳しくは、本発明は夫々診断放射性医薬品または治療放射性医薬品としての使用のための単座及び多座^99mTc標識分子または^186/188Re 標識分子（キレート）の製剤化方法を提供する。この技術に使用されるリガンドは^99mTcまたは¹⁸⁶ ^/188 Re を還元し、かつ／または^99mTc、^186/188Re、もしくは¹⁰⁵Rh を配位するのに使用し得る一つ以上のヒドロキシアルキルホスフィンドナー基を含む。リガンドの一つ以上のヒドロキシアルキルホスフィン基は水溶液に可溶性であり、かつO₂による最小の酸化を示し、または有意な酸化を示さない。即ち、本発明はO₂の存在下で酸化に対し感受性ではない高いin vitro安定性及びin vivo安定性を有する錯体を高収率で^99mTcまたは^186/188Re と生成するのに使用するための小さい空気安定性かつ水溶性のホスフィンをベースとするリガンドを提供する。^99mTc反応体または^186/188Re 反応体は酸化物の形態（^99mTcO₄ ^-または^186/188 ReO₄ ^-を含む）だけでなく、金属のその他の形態であってもよい。本発明に従ってつくられたキレートは水溶液、血清及びその他の体液中で安定であることがわかった。これは、安定なキレートを生成せず、それにより放射性核種常磁性金属の局在化の調節の固有の損失を有する従来技術の薬剤の問題を解決するのに重要である。更に、本発明に従ってつくられた化合物は以下に説明されるように化学的に変性されて、局在化の特異性、放射性核種の増大された物理的半減期、改良された薬物速度論、及び正常な組織、例えば、骨髄、腎臓、G.I. 道、肝臓等に対する標的組織、例えば、腫瘍の増大された選択性を与え得る。本発明に従ってつくられた化合物は中性水溶液中で安定であるだけでなく、酸性水性媒体及び塩基性水性媒体中で安定であることがわかった。再度、これは異なるpHを有する生体の領域における化合物の局在化に関して重要であるだけでなく、経口投与の如き異なる投与経路中で安定である。本発明に従って製造されたリガンドは単座（リガンドについて一つのドナー原子）であってもよく、または多座(リガンド分子当たり一つより多いドナー原子) であってもよい。ヒドロキシアルキルホスフィン含有リガンドの一般的な型として、金属当たり ≧１個のヒドロキシアルキルホスフィン基を含む、単座ヒドロキシアルキルホスフィンリガンド、二座ビスヒドロキシアルキルホスフィンリガンド、及び多座（即ち、キレート化原子なし、または≧３の基）が挙げられる。これらのリガンドは本発明の安定な水溶性の^99mTcキレート、^186/188Re キレート、及び¹⁰⁵Rh キレートを生成するのに使用される。本発明に従って製造された単座リガンドは一般式： P(AOH)₃ （式中、Ａは-CH₂-、-C₂H₄-、またはi-もしくはn-C₃H₆-である）のリガンドである。放射性医薬製剤のための^99mTcキレートを生成するための単座ヒドロキシアルキルホスフィンリガンドそれ自体の使用に加えて、単座ヒドロキシアルキルホスフィンリガンドはまた^99mTc、^186/188Re、及び¹⁰⁵Rh をキレート化するのに使用されるその他のリガンドと連係して使用し得る。例えば、単座ホスフィンリガンドトリス（３−メトキシ−１−プロピル）ホスフィンが１，２−ビス(ジヒドロ−２，２，５，５−テトラメチル−３−フラノン−４−メチレンアミノ)エタンと連係して使用されて^99mTcを錯生成して(^99mTc -Q12)親油性陽イオン(+1)錯体を生成した。この錯体は心筋潅流放射性医薬品としての使用について評価されている(Marmionら，1994)。この錯体中で、単座ホスフィンリガンドは金属に対しトランス位置で結合される(Deutsch，1993; Mar- mionら，1994)。このホスフィンリガンドのエーテル側鎖は心筋摂取を改良するために^99mTcキレートの親油性を増大する。本発明に記載された単座ヒドロキシアルキルホスフィンリガンドは同様に使用し得るが、従来技術の単座ホスフィンリガンドとは対照的に、ヒドロキシアルキルホスフィンリガンドは腎臓による尿への改良されたクレアランスのために錯体の水溶性を増大する。本発明に従って製造された、使用される二座ヒドロキシアルキルホスフィンリガンドは下記の式： (HOA)₂P-X-P(AOH)₂ ［式中、Ａは-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆- であり、かつＸは-(C H₂)_n-(式中、ｎ＝１〜４)、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、置換芳香族（式中、Ｒは最終の^99mTcキレートまたは^186/188Re キレートの物理化学的特性（例えば、極性、電荷、等）の改良のため、またはキレートを生物選択的ターゲッティング部分（例えば、MAb、レセプター剤）に結合するための付加された側アームであり、ＲはＨ、アルキル基(C₁-C₄)、芳香族基であってもよく、かつ／または官能基、例えば、-OH、-NH₂、-COOH、-SH、及び生物分子ターゲッティング構造へのBFCAの錯生成されなかったリガンドまたは“予備生成された”^99m Tc錯体もしくは^186/188Re 錯体の結合に使用されるその他の基を含む）を含む］を特徴とする。生物分子へのキレートの結合に使用される方法は既に記載された官能基の活性化（例えば、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、CDI、等への活性化）（Meares ら，19 88; Parker，1990; Wilbur，1992）を伴う。 ^99mTc(及び^186/188Re)の生成は過剰のホスフィンリガンド、外部還元剤［例えば、Sn(II)）］による^99mTcO₄ ^-または¹⁸⁸ReO₄ ^-の還元またはトランスキレート化により行い得る。本発明の別の実施態様において、多座ヒドロキシアルキルホスフィンをベースとするリガンドは弱いドナーキレート（例えば、^99mTc(v)-グルコヘプトネート、^186/188Re(V)- シトレート、^99mTc-P(CH₂OH)₃）からのトランスキレート化、続いて外部還元剤（例えば、Sn⁺²）を用いる、または外部還元剤を用いない還元により^99mTc錯体または^186/188Re 錯体を水系中で生成するのに使用し得る。このアプローチは１以上（≧１）のヒドロキシアルキルホスフィンドナー基を含むリガンドフレームワークを使用する。一つのこのような実施態様において、多座リガンド主鎖のヒドロキシアルキルホスフィンドナー基は、その分子のホスフィン官能基が^99mTcO₄ ^-または^186/188ReO₄ ^-を還元し、その他の分子内ホスフィンまたはその他のドナー原子（例えば、Ｎ原子、Ｏ原子、Ｐ原子またはＳ原子）が還元された放射性金属と相互作用して安定なキレートを生成するように使用される。 BFCAを生成するのに使用されるヒドロキシアルキルホスフィン含有リガンドの殆どが多座（即ち、≧３のドナー原子）であり、一般に、還元された(即ち、酸化状態<+7)^99mTc、^186/188Re、及び¹⁰⁵Rh と1:1 のリガンド対金属錯体を生成する。低デンティシティ(denticity)を有するヒドロキシアルキルホスフィンリガンドは放射性医薬品の生成にまた使用し得る1:1 より大きい(>)金属対リガンド比で^99mTcキレートまたは^186/188Re キレートを生成し得る。一般に、多座ホスフィンをベースとするリガンドが本発明の好ましい実施態様である。何となれば、それらは^99mTcまたは^186/188Re と1:1 の金属対リガンド比の錯体を生成することができるからである。1:1 の金属対リガンド比の錯体を生成する能力は、良く特定された診断放射性医薬品または治療放射性医薬品の必須成分を形成する^99mTcキレートまたは^186/188Re キレートの生成を可能にする。ヒドロキシアルキルホスフィンをベースとするリガンドが有利である。何となれば、それらは中性pH範囲の通気水溶液中の^99mTcまたは^186/188Re による化合物の標識を可能にするからである。加えて、ヒドロキシアルキルホスフィンをベースとするリガンドは^99mTcO₄ ^-または^186/188ReO₄ ^-をリガンドと単に混合することにより高度に安定なキレートの生成を促進する。これは、放射性医薬品が一般に最高の放射性同位元素活性を得るためにそれらの投与の直前に調製されるので有利である。これはO₂の存在下で、外部還元剤（例えば、Sn⁺²）の不在下で広い pH範囲にわたって起こり得る。これらの性質はヒドロキシアルキルホスフィンをベースとするリガンドをヒト患者におけるルーチン使用のための新規かつ特異な^99m Tcまたは^186/188Re 商用薬剤製品の生成に特に有益かつ万能にする。ヒドロキシアルキルホスフィン基を含む多座リガンド本発明に従って使用される多座リガンドは多種の式を特徴とし得る。リガンドの一つのクラスは、ホスフィン基のみが^99mTcまたは^186/188Re に配位するためのドナー組として使用されるリガンドフレームワークを含む。その他のクラスは金属に配位するのに使用されるその他のＤＮＡ原子（例えば、Ｓ、Ｎ、Ｐ、またはＯ）または基（例えば、アミン、アミド、チオール、カルボキシルまたはヒドロキシル）とともに一つ以上のヒドロキシアルキルホスフィン基を含むリガンド主鎖を使用する。多数のホスフィン基を含むリガンド ^99mTcまたは^186/188Re を結合することができる３以上（≧３）のホスフィン基を含むリガンドの幾つかの例が考えられる。例えば、６個のホスホン官能基を含むリガンドは下記の式：［HOA)₂PY］₂-P-X-P［YP(AOH)₂］₂ ［式中、Ａ＝-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆-、かつＸは-CH₂-、-(C H₂)₂-、-(CH₂)₃-、-(CH₂)₄-、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、置換芳香族（式中、Ｒは最終の^99mTcキレートまたは^186/188Re キレートの物理化学的特性の改良のため、またはキレートを生物選択的ターゲッティング部分に結合するための付加された側アームであり、ＲはＨ、アルキル基(C₁-C₄)、芳香族基であってもよく、かつ／または官能基、例えば、-OH、-NH₂、-COOH、-SH、及び生物分子ターゲッティング構造への錯生成されなかった、または“予備生成された”^99m Tcキレートもしくは^186/188Re キレートの結合に使用し得るその他の基を含む）からなる基を含む］を特徴とし得る。結合に使用し得る方法及び基は、既に記載されたアプローチ(M eares ら，1988; Parker，1990; Wilbur，1992)、Y-CH₂、-C₂H₄-、-C₃H₆-を使用する官能基の活性化（例えば、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミド、ベンジルイソチオシアネートアルキルハライド、CDI、等への活性化）を伴う。これらのリガンドによる^99mTc（及び^186/188Re）キレートの生成はホスフィン基の一つによる^99mTcO₄ ^-または^186/188ReO₄ ^-の還元、続いてその他の分子内ホスフィン基によるキレート化により行い得る。キレート生成のこの型は、^99mTcO₄ ^- または^186/188ReO₄ ^-を還元する同リガンドが順に還元された金属を直ちに錯生成することができ、それにより外部還元剤の必要及びそれらの関連する問題を排除するという特異な状況を与える点で新規である。また、これらのリガンドによる^99m Tc及び^186/188Re 錯生成について、当業界で公知のその他の通常の方法が使用でき、トランスキレート化による、または外部還元剤（即ち、Sn(II)ジチオニト、HCI、等）を使用する、錯体生成を含む。本発明の多座リガンドの別の例は、式：［HOA)₂PY］₂-P-X-P［YP(AOH)₂］₂ ［式中、Ａは-CH₂-、-C₂H₄-、またはi-もしくはn-C₃H₆-であり、かつＸは-(CH₂)_n -（式中、ｎ＝１〜４）、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、またはＲ−芳香族（式中、ＲはＨ、C₁-C₄のアルキル基、芳香族基、-OH、-SH、 -NH₂、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDI である）であり、かつＹはCH₂-、-C₂H₄-、または-C₃H₆-である）の６座化合物である。この特別な多座化合物において、リガンドは全てホスフィンドナー基を含むことができる。また、リガンドは１個以上（≧１）のホスフィン基に代えて置換される少なくとも一つのドナー基を含むことができる。錯生成基はヒドロキシアルキルホスフィンＰ原子である２個のドナー原子及びＰ原子以外の原子である２個のドナー原子を含むことができ、式：［(HOA)₂PY］₂-K-X-K［YP(AOH)₂］₂ （式中、Ａは-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆- であり、Ｋは-N(R)- 、N(H)-、-Ag-、及びＳを含むドナー原子であり、Ｘは-CH₂-、-(CH₂)₂-、-(CH₂)₃ -、-(CH₂)₄-、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、またはR'−芳香族（式中、R'及びＲは同じであってもよく、また異なっていてもよく、Ｈ、-OH、-SH、-N H₂、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDI から選ばれる）であり、かつＹは-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆- である）を有する。また、配位基はヒドロキシアルキルホスフィンＰ原子である２個のドナー原子及び原子及びＮ原子である２個のドナー原子を含むことができ、一般式：Ｅ＝C-(NR-［X-P(AOH)₂］₂ （式中、Ｘは-CH₂-、-(CH₂)₂-、-C₃H₆-であり、Ａは-CH₂-、-(CH₂)₂-、-C₃H₆-であり、ＥはＯまたはＳであり、Ｒは同じであってもよく、また異なっていてもよく、Ｈ、-OH、-SH、-NH₂、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDI から選ばれ、かつＹは-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆- である）を有する。本発明に従ってつくられたヒドロキシアルキルホスフィンドナー基を含む化合物はまた部位特異性生物分子で化学的に修飾または結合されて組織局在化、改良された薬物速度論、及び正常な組織（これらは骨髄、腎臓、G.I.道、及び肝臓を含むが、これらに限定されない）に対する腫瘍の如き標的組織の増大された選択性を生じ得る。上記の式は特定の放射性核種とのキレート化及び特定の標的臓器における局在化についてリガンドを特別に仕上げるために非常に変更可能であると本発明を特徴づける。例えば、リガンドはタンパク質または抗体に結合でき、またモノクローナル抗体を結合するのに既に使用された側鎖を使用し得る。例えば、結合反応は反応性基、例えば、ベンジルイソチオシアネート、ブロモアセトアミド、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、開裂可能なエステル結合、及びアルデヒドを伴い得る。それ故、単一モノクローナル抗体または幾つかのモノクローナル抗体が金属−リガンド錯体に添加されて、特定の表面抗原または標的組織へのリガンド金属錯体の結合の特異性を与え得る。先に説明したように、その他の側鎖修飾がキレートを更に極性及び親水性にするように行い得る。例えば、カルボキシル基またはヒドロキシル基の如き荷電された基がホスフィン基に付加された種々のＲ基で付加し得る。荷電された基及び／または極性基を与える化合物中のこの付加的な小さい変化が、得られるキレートの親水性の特徴を増大する。これが血液及び非標的組織からの更に迅速かつ選択的クレアランスを生じるであろう。この修飾は、治療に現在使用される結合された放射能標識モノクローナル抗体の代謝後の非標的組織、例えば、血液、肝臓、腎臓、及び脾臓からの放射能の有効なクレアランスの促進に高度に望ましい。また、キレートの疎水性は、ホスフィン基に付加された側鎖のアルキル鎖長を変化することにより次第に変化し得る。例えば、ホスフィン部分のアルキル基は、例えば、メチル、エチル、及びｎ−またはｉ−プロピルで誘導体化し得る。これが望ましい。何となれば、幾つかのキレート、特に^99mTcで標識されたキレートでは、キレートの疎水性の増大が選択的組織、例えば、脳、心臓及び肺中の摂取を標的とする際に重要な役割を果たすからである。錯生成主鎖へのアルキル基の付加はキレートの脂質溶解性を増大する。得られるキレートが中性である場合、脳、心臓、または肺の造影剤が開発し得る。ホスフィン部分に付加されたＲ基のアルキル鎖長を変えることの別法は、その他の官能基、例えば、-OH、-SH、-NH₂、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDI を付加することである。アルキル側鎖に代えてエーテル置換の使用は親油性を増大するが、また血液及びその他の非標的組織からのキレートのクレアランスの速度を改良する。前記修飾の全てが本発明に従ってつくられた化合物の融通性そして更には特定の臓器ターゲッティング、投与、及び代謝について化合物を仕上げるためにこれらの化合物を修飾して化合物の結合、排除、及び吸収を変化する可能性を示す。本発明に従って製造された化合物は、放射線画像形成(radio-imaging)または癌、感染症、神経障害、心臓病、更には核医療研究所で現在評価されている種々の障害を含む疾患の治療措置のための放射性医薬品として当業界で公知の方法により利用し得る。^99mTcは全ての診断画像形成研究に使用でき、一方、¹⁰⁵Rh 及び^186/188Re は主として癌の治療のために治療上使用し得るにすぎない。本発明に従って製造された化合物は、個々の患者の臨床状態、投与の部位及び方法、投与の計画、並びに医療開業医に知られているその他の因子を考慮して、良好な医療慣例に従って投与、投薬される。こうして、本明細書の目的のための “有効量”は当業界で知られているようなこのような考慮事項により決められる。本発明の方法において、金属−ヒドロキシアルキルを含む化合物（錯体）は種々の方法で投与し得る。化合物は化合物として、または医薬上許される塩として投与され、単独で、または医薬上許される担体と組み合わせて投与し得る。化合物は経口投与または非経口投与（静脈内投与、腹腔内投与、鼻内投与及び皮下投与を含む）し得る。化合物の移植片がまた有益である。治療される患者は温血動物、特にヒトを含む哺乳類である。金属−ヒドロキシアルキルを含む化合物を非経口投与する場合、注射に適した医薬製剤は無菌の注射液または分散液への再生のために無菌の水溶液または分散液及び無菌粉末を含む。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール、等）、これらの好適な混合物、及び植物油を含む溶媒または分散媒体であってもよい。更に、抗菌防腐剤、酸化防止剤、キレート剤、及び緩衝剤を含む、組成物の安定性、無菌性、及び等張性を増進する種々の添加剤が添加し得る。微生物の作用の阻止は種々の抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、等により確実にし得る。多くの場合、等張剤、例えば、糖、NaCl、等を含むことが望ましいであろう。しかしながら、本発明によれば、使用されるビヒクル、希釈剤、または添加剤は化合物と適合性である必要があるであろう。無菌注射液は、本発明を実施するのに使用される化合物を、所望により種々のその他の成分を含む必要量の適当な溶媒に混入することにより調製し得る。金属−ヒドロキシアルキルを含む化合物の医薬製剤は適合性担体、例えば、種々のビヒクル、アジュバント、添加剤、及び希釈剤を含む注射製剤中で患者に投与でき、または本発明に使用される化合物は徐放性皮下移植片または標的送出系、例えば、ポリマーマトリックス、リポソーム、及び微小球体の形態で患者に非経口投与し得る。本発明における使用に適した移植片は、移植された後に徐々に溶解するペレットまたは当業者に公知の生体適合性送出モジュールの形態をとり得る。このような公知の投薬形態及びモジュールは、活性成分が数日〜数週の期間にわたって徐々に放出されるように設計される。本発明に有益な公知の移植片及びモジュールの例として、米国特許第4,487,603 号明細書（これは薬物を調節された速度で分配するための移植可能な微量注入ポンプを開示している）、米国特許第4,486,194 号明細書（これは薬物を皮膚に投与するための治療装置を開示している）、米国特許第4,447,233 号明細書（これは薬物を正確な注入速度で送出するための薬物注入ポンプを開示している）、米国特許第4,447,224 号明細書（これは連続薬剤送出のための可変流量の移植可能な注入装置を開示している）、米国特許第4,439,196 号明細書（これはマルチチャンバー区画を有する浸透圧薬剤送出系を開示している）、及び米国特許第4,47 5,196号明細書(これは浸透圧薬剤送出系を開示している)が挙げられる。これらの特許は参考として本明細書に含まれる。多くのその他のこのような移植片、送出系、及びモジュールが当業者に公知である。本発明に使用される金属−リガンド化合物の医薬製剤は患者に経口投与し得る。懸濁液、溶液、エマルション、シロップ等中の化合物を投与するような通常の方法が使用し得る。金属−リガンド化合物を経口または静脈内に送出し、生物活性を保持する既知技術が好ましい。以下は、本発明に従って生成されたリガンド及びキレートの実施例である。実施例合成されたリガンド実施例１単座アルキルホスフィンリガンド本発明に従って製造された単座ヒドロキシアルキルホスフィンリガンドは下記の式： P(AOH)₃ 単座ヒドロキシアルキルホスフィン（式中、Ａ＝-CH₂-、-(CH₂)₂-、i-及びn-C₃H₆-）を特徴とし得る。図１に示されるような、式(1)のトリヒドロキシメチルホスフィンリガンドを下記の方法により調製し、一方、その他の短鎖トリヒドロキシメチルホスフィンリガンドを、既に記載された方法(Ellisら，1992)により調製することができる。トリス（ヒドロキシメチル）ホスフィン、P(CH₂OH)₃(1)の合成式(1)のリガンドを図１のスキーム１に示された経路により合成した。無水P(C H₂OH)₄Cl（95.25g、0.400 モル）をN₂雰囲気下で乾燥トリエチルアミン(600mL) に入れた。次いで得られる混合物を１時間にわたって70℃に加熱し、室温に冷却した。トリエチルアミン塩酸塩を濾別し、濾液を回収した。トリエチルアミン溶媒を減圧で蒸留して除いて粗生成物（リガンド(1)とそのヘミアセタール付加物の混合物）を得、次いでN₂ブリードを使用してこれを減圧で３〜４時間にわたって90℃で加熱した。生成物、粘稠な油または低融点の固体を定量的収率で得、³¹ P NMR 分光分析により>95 ％の純度であることがわかった。生成物を-20 ℃の MeOH中で再結晶することにより再結晶を行った。その化合物の純度を微量分析、¹ H NMR及び³¹P NMR 分光分析により確認した。¹H NMR:4.2 ppmにある二重線、³¹ P NMR 図11に示されるように-24 ppm。リガンド(1)は³¹P NMR 分光分析により水溶液中でO₂酸化に対し安定であることがわかった。³¹P NMR スペクトル中の-24 ppm にある単一ピークがD₂O(通気) に溶解したリガンド(1)1mg で観察された。通気水溶液中の１時間及び24時間のインキュベーション後に、このピークの強さの減少が観察されず、また³¹P シグナルがそのスペクトルの48 ppm領域（即ち、酸化ホスフィン中の³¹P が共鳴する領域）に観察されず、水溶液中のO₂酸化に対するリガンド(1)の安定性を実証した。実施例２ ^99mTcO₄ ^-（0.5-5 mCi）を含む0.9 ％のNaCl水溶液(N.食塩水)0.1mlをP(CH₂OH )₃１mg/ml を含むN.食塩水0.4 mlと混合し、室温(RT)で30分間インキュベートすることによりリガンド(1)との^99mTcキレートを調製した。^99mTc生成物は電気泳動分析により親水性かつ陽イオンであることがわかった。逆相PRP-1 カラムを使用してHPLC分析を行い、勾配を使用して溶離した。溶媒Ａ＝100 ％の0.01M のリン酸ナトリウム、pH7；溶媒Ｂ＝100 ％のMeCN。勾配プロフィールは注入後(P.I. )２分間にわたって100 ％のＡ、続いてP.I.２分から７分までゼロＢから100 ％のＢまでの線形勾配、続いて更に６分間にわたって（即ち、P.I.15分まで）100 ％のＢ。二つのピークを観察した。一方は1.3分(^99mTcO₄ ^-と同じ)の保持時間であり、他方は4.8 分であった。HPLC分析及び電気泳動分析は、^99mTcキレートが単一種であり、>95 ％の収率で生成されることを示した。この^99mTcキレートは図１に示されるように37℃で24時間以上にわたって４〜11の範囲のpH及び7.4〜7 .8 の範囲のpHで水溶液中で安定であることがわかった。表１を参照して、ヒト血清中の^99mTcキレートの安定性がまた示される。錯体溶液50μl をヒト血清0.95mlに添加することにより血清研究を行った。その錯体の放射性薬品純度(RCP)を時間＝０時間、４時間、12時間、及び24時間について平均±S.D.(N=5)として表１に示す。実施例３二座ビスヒドロキシアルキルホスフィンリガンド２種のビス−ヒドロキシメチルホスフィンリガンドを下記の方法（図３に示されたようなスキーム３）により合成した。その他のビスーヒドロキシアルキルホスフィンリガンドを同様の方法により合成することができる。１，２−ビス［ビス（ヒドロキシメチル）ホスフィノ］エタンの合成 (HOH₂C)₂PCH₂CH₂P(CH₂OH)₂(3)(“HMPE”) 水性ホルムアルデヒド(0.233モル)を酸素を含まない脱イオン水25mLに入れ、2 5℃で20分間にわたって窒素ガスでパージした。K₂PtCl₄(100mg)をその溶液に添加し、パージを更に10分間続けた。１，２−ビス（ホスフィノ）エタン(5.0g、0 .053モル)を得られる溶液に滴下して添加し、攪拌を更に20分間続けた。濾過後に溶媒を減圧で除去して化合物１，２−ビス［ビス（ヒドロキシメチル）ホスフィノ］エタンをほぼ定量的な収率で無色の粘稠な油として得た。その化合物は二三日にわたって室温で放置後に固化した。分析、C₆H₁₆O₄P₂としての計算値：C， 33.65; H，7.53。実測値：C，33.72; H，7.45。¹H NMR: d 1.52(m，br，4H，CH₂ CH₂)，3.90（m，br，8H，P(CH₂OH)）。³¹P NMR: d -25.1(s)。NMR スペクトルを図12に示す。実施例４１，２−ビス［ビス（ヒドロキシメチル）ホスフィノ］ベンゼンの合成 (HOH₂C)₂PC₆H₄P(CH₂OH)₂(4)(“HMPB”) 水性ホルムアルデヒド(0.160モル)を酸素を含まない脱イオン水25mLに入れ、2 5℃で20分間にわたって窒素ガスでパージした。K₂PtCl₄(100mg)をその溶液に添加し、パージを更に10分間続けた。１，２−ビス（ホスフィノ）ベンゼン(5.0g 、0.035モル)を得られる溶液に滴下して添加し、攪拌を更に20分間続けた。濾過後に溶媒を減圧で除去して化合物１，２−ビス［ビス（ヒドロキシメチル）ホスフィノ］ベンゼンをほぼ定量的な収率で無色の粘稠な油として得た。その化合物は二三日にわたって室温で放置後に固化した。分析、C₁₀H₁₆O₄P₂としての計算値：C，45.81; H，6.15。実測値：C，45.67; H，6.25。 ¹H NMR: d 1.61(m，br，4 H，CH₂CH₂)，4.20（m，br，8H，P(CH₂OH)）。³¹P NMR: d -31.2(s)。NMR スペクトルを図13に示す。化合物(3)及び化合物(4)の両方は³¹P NMR 分光分析により水溶液中でO₂酸化に対し安定であることがわかった。³¹P NMR スペクトル中の-25.1 ppm または-31. 2 ppm にある単一ピークが夫々化合物(3)及び(4)について観察された。通気水溶液中の10-³M の化合物(2)または(3)の１時間及び24時間のインキュベーション後に、このピークの強さの減少は検出されず、また³¹P シグナルがスペクトルの40 -50 ppm 領域（そこで、自然に酸化されたホスフィンオキサイドが観察される）で観察されなかった。実施例５ ^99mTcO₄ ^-（0.5-5 mCi）を含むN.食塩水0.1ml を１mg/ml の化合物(3)または(4 )を含むN.食塩水0.4 mlと単に混合することにより化合物(3)及び(4)の^99mTcキレートを調製し、室温で１時間インキュベートした。生成物を電気泳動及びHPLCにより分析した。既に記載され、図10に示された勾配溶離系を使用して、HPLC分析を逆相(PRP-1カラム)クロマトグラフィーにより行った。化合物(3)及び(4)の両方で生成された^99mTcキレートは単一陽イオン種であることがわかった。これらの^99mTc-3の保持時間は8.49分であり、^99mTc-4は8.43分である。HPLC分析は、これらの生成物の収率が≧95％であったことを示す（表３）。化合物(3)及び(4)の両方との^99mTcキレートはpH7.4-7.8 で37℃で24時間以上にわたってヒト血清中で安定であることがわかった（表３）。 ^99mTcO₄ ^-を１mg/ml の化合物(3)または(4)の存在下でSn(II)で還元する場合、同じ生成物（HPLC及び電気泳動により分析されるように）が生成される。Sn(II) を還元剤として使用して、^99mTcキレートが５分未満で>95 ％の収率で生成される。実施例６レニウムによる錯体の生成 P(CH₂OH)₃とのRe錯体を図２に示されたようにしてスキーム２に示された方法によりつくった。［Re(O)₂｛P(CH₂OH)₃｝₄］⁺（2）の合成 2.0 ミリモルのP(CH₂OH)₃の水溶液(20mL)を25℃で絶えず攪拌しながらジクロロメタン(20 mL)中のレニウム前駆体Re(O)₂I(PPh₃)₂(1.0ミリモル)に滴下して添加した。攪拌を２時間続け、水層を有機層から分離した。その水溶液を減圧で約５mLに濃縮し、室温で徐々に蒸発させて黄色に着色した錯体(2)を90％の収率で得た。分析、C₁₂H₃₆O₁₄P₄ReI としての計算値：C，17.13; H，4.31。実測値：C ，17.43; H，4.46。¹H NMR: d 4.30(m，P(CH₂OH))。³¹P NMR: 27.7(s)NMR スペクトルを図14に示す。レニウム錯体の生成の例化合物(3)及び(4)で生成されたレニウム錯体を合成し、特性決定した。実施例７［Re(O)₂｛(HOH₂C)₂PCH₂CH₂P(CH₂OH)₂｝₂］⁺（5）の合成リガンドHMPE(3)の水溶液(2.０ミリモルの20mL)を25℃で絶えず攪拌しながらまた水(20 mL)中のレニウム前駆体［Re(O)₂(C₅H₆N)₄］Cl（1.0ミリモル）に滴下して添加した。攪拌を30分間続け、次いでその溶液を減圧で約５mLに濃縮し、室温で徐々に蒸発させて結晶性錯体(5)を図４のスキーム４に記載されたようにして85％の収率で得た。錯体(5)の結晶構造を図８に示す。分析、C₁₂H₃₂O₁₀P₄ReI としての計算値：C，18.64; H，4.17。実測値：C，18.6 8; H，4.21。¹H NMR: δ2.28(m，8H，CH₂CH₂)，4.40（m，16H，P(CH₂OH)）。³¹P NMR: δ29.8（s）。NMR スペクトルを図15に示す。また、上記錯体を、図３のスキーム３に示されたようにして、水性媒体中で室温で30分間攪拌することによりジクロロメタン中の［Re(O)₂I(PPh₃)₂］及びリガンド(3)（1:2ミリモル）の反応により合成することができる。実施例８［Re(O)₂｛(HOH₂C)₂PC₆H₄P(CH₂OH)₂｝₂］⁺（6）の合成リガンドHMPB(4)の水溶液(2.0ミリモルの20mL)を25℃で絶えず攪拌しながらジクロロメタン(20 mL)中のレニウム前駆体Re(O)₂I(PPh₃)₂（1.０ミリモル）に滴下して添加した。攪拌を30分間続け、水層を有機層から分離した。その水溶液を減圧で約５mLに濃縮し、室温で徐々に蒸発させて結晶性錯体(6)を85％の収率で得た（図５に示されたスキーム５）。錯体(5)の結晶構造を図９に示す。分析、C₂₀ H₃₂O₁₀P₄ReI としての計算値：C，27.63; H，3.71。実測値：C，27.73; H，3 .76。NMR:δ4.20（m，16H，P(CH₂OH)）7.8（m，8H，C₆H₄）。³¹P NMR: δ24.2 （s）。NMR スペクトルを図16に示す。また、上記錯体を、２時間還流することにより水溶液中の［Re(0)₂(C₅H₆N)₄］C lとリガンド４(1:2ミリモル)の反応により合成することができる。これらのデータは、リガンド(3)及び(4)とのRe錯体がトランス−ジオキソコアーとして存在するRe(V)を有し、かつ夫々のRe- キレートがスキーム４及び５（図４及び５を参照のこと）に従って結合された二つの(3)または(4)リガンドを有することを実証する。ReO₂(3)₂及びReO₂(3)₂を逆相HPLCにより分析した場合、これらの化合物は夫々8.45分及び8.50分の保持時間を示した。これらの保持時間は夫々リガンド(3)及び(4)との^99mTc錯体と同じであるので、^99mTc錯体はRe- 錯体の両方と同じ構造を指定し得る。リガンド(3)及び(4)のレニウム錯体の構造の最終配座をＸ線結晶分析により測定した。実施例９６個のホスフィン基を含むリガンドの生成図６のスキーム７を参照して、^99mTcを本発明に従って高収率でキレート化する６個のホスフィン基を含むリガンドの合成が示される。化合物(11)及び(12)を一般に図７に示されたスキーム７に示された経路により合成し、¹H及び³¹P NMR 分光分析により特性決定した。図６に示された化合物(12)をメタノール中のホルムアルデヒドによる化合物(1 1)の還元により調製した。リガンド化合物(12)を³¹P 及び¹H NMR分光分析により特性決定した。^99mTcO₄ ^-（0.5-2 mCi）を含むN.食塩水100 μl を図４に示されたようにして１mg/ml の化合物(5)を含むN.食塩水溶液400 μl に添加した。室温で５分間インキュベートした後、一つのストリップを展開するためのアセトン及び第二ストリップ用の溶離剤としての0.9 ％のNaCl水溶液を使用する２ストリップペーパークロマトグラフィー方法を使用して、錯体収率は>95 ％であることがわかった。HPLC分析は4.3 分の保持時間を示した。これらの結果は、化合物(1 2)が^99mTcO₄ ^-を迅速に還元することができ（外部還元剤の不在で）、かつ^99mTc キレートを高収率で迅速に生成することができることを実証する。この^99mTcキレートは表１〜３に示されるように24時間以上にわたってN.食塩水中、またヒト血清中で安定であることが示された。実施例10 一つ以上のヒドロキシアルキルホスフィン基及びその他の錯生成原子を含むリガンド ^99mTcまたは^186/188Re と安定な錯体を生成する３個以上の原子または基を含むリガンドの幾つかの例を合成することができる。例えば、２個のヒドロキシアルキルホスフィンドナー基及び２個のその他のドナー原子を含むリガンドは下記の式：［(HOA)₂PY］₂K-X-K［YP(AOH)₂］₂ （式中、Ａ＝-CH₂-、-(CH₂)₂-、i-またはn-C₃H₆、Ｋは^99mTc、^186/188Re、及び¹ ⁰⁵ Rh と錯生成するのに使用されるドナー原子または基を含み、-N(R)-、-NH-、- S-、及びAgからなる群から選ばれ、Ｙ＝-CH₂-、-(CH₂)₂-、i-またはn-C₃H₆、Ｘは-CH₂-、-(CH₂)₂-、-(CH₂)₃-、 -(CH₂)₄-、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂−、-CHRCH₂CH₂-、側アームＲ’を含む置換芳香族（式中、Ｒ及びＲ’は同じであってもよく、または異なっていてもよく、Ｈ及び／または官能基、例えば、-OH、-NH₂、-COOH、-SH、及び生物分子ターゲッティング構造への錯生成されなかった、または“予備生成された”^99mTcキレートもしくは^186/188Re キレートの結合に使用し得るその他の基を含む側鎖であってもよい）を特徴とし得る。結合に使用し得る方法及び基は、既に記載されたアプローチ(M armionら，1994; Mearesら，1988; Parker，1990)を使用する官能基の活性化（例えば、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、CDI、等への活性化）を伴う。実施例11 ２個のヒドロキシアルキルホスフィン基及びその他のドナー原子または基を含む多座リガンドの第二の例は下記の式： E=C-(NR-［X-P(AOH)₂］₂ （式中、Ｘ＝-CH₂-、(CH₂)₂、-C₃H₆-、かつＡ＝-CH₂-、(CH₂)₂、-C₃H₆-かつＥ＝ＯまたはＳ．Ｒは同じであってもよく、または異なっていてもよく、Ｈを含むことができる）を特徴とし得る。本発明の化合物の実用性の例がまた示された。注射（静脈内注射）後２分及び30分で麻酔されたラット（50 mg/KGのNa- ペントバルビタールで腹腔内で麻酔されたSDラット）中の^99mTc-P(CH₂OH)₃の生体分布（表２）は、クレアランスの経路が主として腎臓による尿へのものであり、若干のクレアランスが肝臓による腸への排泄によるものであることを示した。^99m TcO₄ ^-を生成するキレートのin vivo 解離の証拠は明らかではない。何となれば、胃中に見られる^99mTc活性の量が最小であったからである（表２）。これらのデータは、単座ヒドロキシアルキルホスフィンが優れたin vitro（pH4-11）安定性及びin vivo 安定性を有する一種以上の^99mTcキレートを生成し得るという証拠を与える。更に、^99mTcキレートが^99mTcO₄ ^-を食塩水中でP(CH₂OH)₃と単に混合することにより生成されたという事実は、このホスフィンリガンドが⁹⁹ ^m Tcをペルテクネテート中の+7酸化状態から低酸化状態（これは過剰に存在するその他のP(CH₂OH)₃分子と錯生成し得る）に還元することができるという証拠である。麻酔されたラット中の化合物(3)及び(4)との^99mTcキレートの生体分布（表４及び５）は、これらのキレートが主として腎臓により尿に排出し、若干の摂取及びクレアランスが肝臓によるものであることを実証する。^99mTcO₄ ^-を生成するキレートのin vivo 解離の証拠は明らかではない。何となれば、胃中に見られる活性の量が最小であるからである（表４及び５）。これらのデータは、化合物(3) 及び(4)の両方との^99mTcキレートが優れたin vitro安定性及びin vivo 安定性を有するという証拠を与える。更に、これらのキレートが^99mTcO₄ ^-を通気食塩水中で化合物(2)または化合物(3)と単に混合することにより生成されたという事実は、これらのヒドロキシアルキルホスフィン基が^99mTcをペルテクネテート中の+7 酸化状態から低Tc酸化状態（これは溶液中に過剰に存在するその他の化合物(3) 及び(4)リガンドをキレート化し得る）に還元することができることを証明する。この出願中、種々の刊行物が引用または番号により参考にされる。番号により参考にされた刊行物に関する充分な引用が以下にリストされる。本発明が関係する技術水準を更に充分に記載するために、これらの刊行物のそのままの開示がこの出願への参考として本明細書に含まれる。本発明が例示様式で記載され、また使用された技術用語は限定ではなく説明の用語の性質であることが意図されていることが理解されるべきである。明らかに、本発明の多くの改良及び変化が上記教示に鑑みて可能である。それ故、請求の範囲内で、本発明は詳しく記載された以外に実施し得ることが理解されるべきである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 51/00 ＡＤＹＡ６１Ｋ 43/00 ＡＢＮ (72)発明者レディーヴィースリーニヴァサアメリカ合衆国ミズーリー州 65203 コロンビアサウスプロヴィデンス 3001 アパートメント 30エイ (72)発明者ヴォルカートウィンエイアメリカ合衆国ミズーリー州 65202 コロンビアガーデンドライヴ 2203 (72)発明者ケトリングアレンアールアメリカ合衆国ミズーリー州 65203 コロンビアルートエヌ 12150

Claims

【特許請求の範囲】１．診断医薬品または治療医薬品としての使用のための化合物であって、前記化合物が金属−リガンド錯体を生成するために金属に結合された少なくとも一つのヒドロキシアルキルホスフィンドナー基を含むリガンドを含むことを特徴とする化合物。２．前記リガンドが遷移金属と錯生成される請求の範囲第１項に記載の化合物。３．前記金属がγ放出性放射性同位元素及びβ放出性放射性同位元素を含む群から選ばれた金属放射性同位元素であり、前記化合物が酸素を含む水溶液、血清及びその他の体液中で安定である請求の範囲第１項に記載の化合物。４．前記金属放射性同位元素が¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁰⁵Rh、及び^99mTcを含む群から選ばれた放射性核種であり、前記化合物が酸素を含む水溶液、血清及びその他の体液中で安定である請求の範囲第３項に記載の化合物。５．前記化合物が式：Ｍ^R−［P(A-OH)₃］_x （式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^RはＭと較べて還元された酸化状態の遷移金属であり、Ｘは１〜６であり、かつＡはアルキル基である）の化合物である請求の範囲第１項に記載の化合物。６．前記リガンドが式： P(AOH)₃ （式中、Ａは-CH₂-、-C₂H₄-、またはi-もしくはn-C₃H₆-である）の単座である請求の範囲第１項に記載の化合物。７．前記金属−リガンド錯体と化合されたドナーヒドロキシアルキルホスフィン基と同じリガンドにその他のドナー原子または基を含む請求の範囲第１項に記載の化合物。８．前記ドナー基が前記金属に配位するためのＮ原子、Ｓ原子、Ｏ原子、またはＰ原子を含む請求の範囲第７項に記載の化合物。９．前記キレート基が前記金属に配位するためのアミン、アミド、チオール、カルボキシル、及びヒドロキシルを更に含む請求の範囲第７項に記載の化合物。 10．リガンド対金属の比が1:1以上である請求の範囲第１項に記載の化合物。 11．前記リガンドが式： (HOA)2P-X-P(AOH)2 ［式中、Ａは-CH₂-、-C₂H₄-、またはi-もしくはn-C₃H₆-であり、かつＸは-(CH₂ )_n-(式中、ｎ＝１〜４)、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、またはＲ’− 芳香族（式中、Ｒ’はＨ、C₁-C₄のアルキル基、芳香族基、-OH、-SH、-NH₂、-CO OH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDIである）である］の二座である請求の範囲第１項に記載の化合物。 12．前記リガンドが式： [HOA)₂PY］₂-P-X-P ［YP(AOH)₂］₂ ［式中、Ａは-CH₂-、-C₂H₄-、またはi-もしくはn-C₃H₆-であり、かつＸは-(CH₂ )_n-(式中、ｎ＝１〜４)、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、またはＲ−芳香族（式中、ＲはＨ、C₁-C₄のアルキル基、芳香族基、-OH、-NH₂、-SH、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDIである）であり、かつＹはC₂-、-C₂H₄-、または-C₃H₆-である］の６座である請求の範囲第１項に記載の化合物。 13．ドナー原子の全てがＰ原子である請求の範囲第12項に記載の化合物。 14．少なくとも一つのドナー基がヒドロキシアルキルホスフィンである請求の範囲第12項に記載の化合物。 15．二つのドナー原子がヒドロキシアルキルホスフィンＰ原子であり、かつ二つのドナー原子がＰ原子以外の原子であり、前記化合物が式：［(HOA)₂PY］₂-K-X-K［YP(AOH)₂］₂ （式中、Ａは-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆-であり、Ｋは-N(R)- 、N(H)-、-Ag-、及びSからなる群から選ばれたドナー原子または基を含み、Ｙは -CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆-であり、Ｘは-CH₂-、-(CH₂)₂-、-(C H₂)₃-、-(CH₂)₄-、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、またはR'−芳香族（式中、R'及びＲは同じであってもよく、また異なっていてもよく、Ｈ、 -OH、-SH、-NH₂、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDI から選ばれる）である）を有する請求の範囲第14項に記載の化合物。 16．二つのドナー原子がヒドロキシアルキルホスフィンＰ原子であり、かつ二つのドナー原子が原子であり、Ｎ原子であり、前記化合物が式：Ｅ＝C-(NR-［X-P(AOH)₂］₂ （式中、Ｘは-CH₂-、-(CH₂)₂-、-C₃H₆-であり、Ａは-CH₂-、-(CH₂)₂-、-C₃H₆- であり、ＥはＯまたはＳであり、Ｒは同じであってもよく、また異なっていてもよく、Ｈ、-OH、-SH、-NH₂、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDIから選ばれ、かつＹは-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆-である）を有する請求の範囲第15項に記載の化合物。 17．放射線画像形成方法であって、前記方法が金属−リガンド錯体を生成するために金属に結合された少なくとも一つのヒドロキシアルキルホスフィンドナー基を含むリガンドを含む有効量の化合物を投与する工程、及びその化合物の存在について検出する工程を含むことを特徴とする放射線画像形成方法。 18．前記リガンドが遷移金属と錯生成される請求の範囲第17項に記載の方法。 19．前記金属がγ放出性放射性同位元素及びβ放出性放射性同位元素を含む群から選ばれた金属放射性同位元素であり、前記化合物が酸素を含む水溶液、血清及びその他の体液中で安定である請求の範囲第17項に記載の方法。 20．前記金属放射性同位元素が¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁰⁵Rh、及び^99mTcを含む群から選ばれた放射性核種であり、前記化合物が酸素を含む水溶液、血清及びその他の体液中で安定である請求の範囲第19項に記載の方法。 21．前記化合物が式：Ｍ^R−［P(A-OH)₃］_x （式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^RはＭと較べて還元された酸化状態の遷移金属であり、Ｘは１〜６であり、かつＡはアルキル基である）の化合物である請求の範囲第17項に記載の方法。 22．前記リガンドが式： P(AOH)₃ （式中、Ａは-CH₂-、-C₂H₄-、またはi-もしくはn-C₃H₆-である）の単座である請求の範囲第17項に記載の方法。 23．前記金属−リガンド錯体と化合されたキレート基を含む請求の範囲第17項に記載の方法。 24．前記ドナー基が前記金属に配位するためのＮ原子、Ｓ原子、Ｏ原子、Ag原子、またはＰ原子を含む請求の範囲第23項に記載の方法。 25．前記キレート基が前記金属に配位するためのアミン、アミド、チオール、カルボキシル、及びヒドロキシルを更に含む請求の範囲第23項に記載の方法。 26．金属対リガンドの比が1:1以上である請求の範囲第17項に記載の方法。 27．前記リガンドが式： (HOA)₂P-X-P(AOH)₂ ［式中、Ａは-CH₂-、-C₂H₄-、またはi-もしくはn-C₃H₆-であり、かつＸは-(CH₂ )n-(式中、ｎ＝１〜４)、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、またはＲ’− 芳香族（式中、Ｒ’はＨ、C1-C4のアルキル基、芳香族基、-OH、-SH、-NH₂、-CO OH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDIである）である］の二座である請求の範囲第17項に記載の方法。 28．前記リガンドが式：［HOA)₂PY］₂-P-X-P［YP(AOH)₂］₂ ［式中、Ａは-CH₂-、-C₂H₄-、またはi-もしくはn-C₃H₆-であり、かつＸは-(CH₂ )_n-(式中、ｎ＝１〜４)、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、またはＲ−芳香族（式中、ＲはＨ、C₁-C₄のアルキル基、芳香族基、-OH、-SH、-NH₂、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDI である）であり、かつＹはC₂-、-C₂H₄- 、または-C₃H₆-である］の６座である請求の範囲第17項に記載の方法。 29．ドナー原子の全てがヒドロキシアルキルホスフィン基である請求の範囲第17 項に記載の方法。 30．少なくとも一つのドナー基がヒドロキシアルキルホスフィン基である請求の範囲第17項に記載の方法。 31．二つのドナー原子がヒドロキシアルキルホスフィンＰ原子であり、かつ二つのドナー原子がＰ原子以外の原子であり、前記化合物が式：［(HOA)₂PY］₂-K-X-K［YP(AOH)₂］₂ （式中、Ａは-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆-であり、Ｋは-N(R)- 、N(H)-、-Ag-、及びＳから実質的になる群から選ばれ、Ｘは-CH₂-、-(CH₂)₂-、 -(CH₂)₃-、-(CH₂)₄-、-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、-CHRCH₂CH₂-、またはR'−芳香族（式中、R'及びＲは同じであってもよく、また異なっていてもよく、Ｈ、-OH、- SH、-NH₂、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDI から選ばれる）であり、かつＹは-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆-である）を有する請求の範囲第30項に記載の方法。 32．二つのドナー原子がヒドロキシアルキルホスフィンＰ原子であり、かつ二つのドナー原子が原子であり、Ｎ原子であり、前記化合物が式：Ｅ＝C-(NR-［X-P(AOH)₂］₂ （式中、Ｘは-CH₂-、-(CH₂)₂-、-C₃H₆-であり、Ａは-CH₂-、-(CH₂)₂-、-C₃H₆- であり、ＥはＯまたはＳであり、Ｒは同じであってもよく、また異なっていてもよく、Ｈ、-OH、-SH、-NH₂、-COOH、活性化されたエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハライド、またはCDI から選ばれ、かつＹは-CH₂-、-(CH₂)₂-、またはi-もしくはn-C₃H₆-である）を有する請求の範囲第31項に記載の方法。 33．単座リガンド−金属錯体の製造方法であって、前記方法が下記の反応： M + P(A-OH)₃---→ M^R-P(A-OH)₃ M + RP ---→ M^R-RP （式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^RはＭと較べて還元された酸化状態の遷移金属であり、RPは金属の還元形態をキレート化するためのキレート部分を含む標識されていない放射性医薬品前駆体であり、かつＡはアルキル基である）を含む製造方法。 34．遷移金属がγ放出性放射性同位元素及びβ放出性放射性同位元素を含む群から選ばれた金属放射性同位元素であり、前記化合物が酸素を含む水溶液、血清及びその他の体液中で安定である請求の範囲第33項に記載の方法。 35．金属放射性同位元素が¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁰⁹Pd、¹⁰⁵Rh、及び^99mTcを含む群から選ばれた放射性核種であり、前記化合物が酸素を含む水溶液、血清及びその他の体液中で安定である請求の範囲第33項に記載の方法。 36．アルキル基が-CH₂、C₂H₄、及びn-またはi-C₃H₆を含む請求の範囲第33項に記載の方法。 37．タンパク質または抗体を錯体に結合する工程を更に含む請求の範囲第33項に記載の方法。 38．多座リガンド−金属錯体の製造方法であって、前記方法が下記の反応： M + nP(A-OH)₃--- →M^R-［P(A-OH)₃］_x M + RP ---→ M^R-RP （式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^RはＭと較べて還元された酸化状態の遷移金属であり、Ｘ及びｎ＝１〜６、RPは金属の還元形態をキレート化するためのキレート部分を含む標識されていない放射性医薬品前駆体であり、かつＡはアルキル基である）を含む製造方法。 39．遷移金属がγ放出性放射性同位元素及びβ放出性放射性同位元素を含む群から選ばれた金属放射性同位元素であり、前記化合物が酸素を含む水溶液、血清及びその他の体液中で安定である請求の範囲第38項に記載の方法。 40．金属放射性同位元素が¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁰⁵Rh、及び^99mTcを含む群から選ばれた放射性核種であり、前記化合物が酸素を含む水溶液、血清及びその他の体液中で安定である請求の範囲第39項に記載の方法。 41．アルキル基が-CH₂、C₂H₄、及びn-またはi-C₃H₆を含む請求の範囲第38項に記載の方法。 42．タンパク質または抗体を錯体に結合する工程を更に含む請求の範囲第38項に記載の方法。