JPH11178A - ヒトエンドグリン遺伝子プロモーターおよびその使用 - Google Patents

ヒトエンドグリン遺伝子プロモーターおよびその使用

Info

Publication number
JPH11178A
JPH11178A JP10024524A JP2452498A JPH11178A JP H11178 A JPH11178 A JP H11178A JP 10024524 A JP10024524 A JP 10024524A JP 2452498 A JP2452498 A JP 2452498A JP H11178 A JPH11178 A JP H11178A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
promoter
nucleic acid
gene
acid construct
sequence
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
JP10024524A
Other languages
English (en)
Inventor
Wolff Graulich
ボルフ、グローリッヒ
Dirk Nettelbeck
ダーク、ネテルベック
Hans-Harald Sedlacek
ハンス‐ハラルト、ゼドラセック
Rolf Mueller
ロルフ、ミュラー
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hoechst AG
Original Assignee
Hoechst AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoechst AG filed Critical Hoechst AG
Publication of JPH11178A publication Critical patent/JPH11178A/ja
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)

Abstract

(57)【要約】 【課題】 遺伝子治療に用いることができる強力かつ内
皮特異的なプロモーターの提供。 【解決手段】 配列番号１のヒトエンドグリン遺伝子プ
ロモーター、その機能的部分または変異体、およびそれ
を含む核酸構築物。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の背景】発明の分野 本発明は、ヒトエンドグリン（endoglin）遺伝子のプロ
モーター、その機能的部分、および薬剤を製造するため
のその使用に関する。
【０００２】背景技術 遺伝子治療における重要な問題の１つは、細胞の中に挿
入されたエフェクター遺伝子の転写および翻訳の制御で
ある。転写のレベルにおいて、この制御はエフェクター
遺伝子のコーディング配列から上流にプロモーターまた
はエンハンサーの配列を付加することによってなされ
る。
【０００３】「プロモーター配列」は、全体的に下流の
エフェクター遺伝子の転写を活性化する調節タンパク
質、いわゆる転写因子、が結合することができる遺伝子
セグメントであるとして理解される。転写の方向にある
領域は「下流の」配列と表示されるが、反対方向におい
て配置されている配列は「上流の」配列と表示される。
「エフェクター遺伝子」は、一般に、その遺伝子産物
が、例えば、遺伝子治療の意味において所望の効果を有
する構造遺伝子であるとして理解される。
【０００４】このようなプロモーターまたはエンハンサ
ーの配列は、非細胞特異的、細胞特異的、ウイルス特異
的、代謝的に特異的または細胞周期特異的であることが
できる。これらのプロモーター配列の例および、例え
ば、種々の疾患の遺伝子治療のための、それらの使用は
下記の公報に記載されている：ＷＯ９６／０６９４０、
ＷＯ９６／０６９３８、ＷＯ９６／０６９４１およびＷ
Ｏ９６／０６９３９。さらに、これらの公報には、例え
ば、エフェクター遺伝子を細胞特異的および細胞周期特
異的に制御する目的で、これらのプロモーター配列を組
み合わせる技術および例が開示されている。
【０００５】プロモーターの選択および組み合わせに依
存して、これらのプロモーターは、これらに依存するエ
フェクター遺伝子の転写をより制限し、または緩和しお
よび／またはより強力にし、または低下させる。
【０００６】内皮細胞は遺伝子治療のために有利な標的
細胞の一例である。なぜなら、内皮細胞は循環系の中に
注入される遺伝子構築物に直接アクセス可能であり、他
方において、多数の疾患、例えば、腫瘍疾患、炎症、ア
レルギー、自己免疫疾患、器官拒絶反および循環および
凝固疾患の発生および進行において、また治癒プロセス
において直接に関係し、および／またはこれらの疾患の
部位に直接隣接するからである。
【０００７】概して、標的細胞特異的プロモーターは、
特に激しく、または大きい程度にもっぱら、関係する標
的細胞において形成されるタンパク質のための遺伝子の
プロモーターである。
【０００８】エンドグリンはＴＧＦβの非シグナル転移
レセプターである（Gougos et al.,J.Biol.Chem.265,83
61(1990)、Cheifetz,J.Biol.Chem.267,19027(1992)、Mo
renet al.,BBRC 189,356(1992) ）。それは少量で正常
の内皮上に存在するが、それは増殖する内皮上で強く発
現される（Westphal et al.,J.Invest.Derm.100,27(199
3)、Burrows et al.,Pharmac.Ther.65,155(1994)）。プ
ロモーターの強さおよび細胞特異性に関して、それ以上
の情報は入手不可能である。エンドグリン遺伝子がほぼ
４年間にわたって知られている（Bellon et al.,(199
3)）という事実にかかわらず、エンドグリンプロモータ
ーを単離することはこれまで不可能であった。
【０００９】ヒトエンドグリンのｃＤＮＡ配列はBellon
らにより記載され（Eur.J.Immunol.23,2340(1993) ）、
ネズミエンドグリンついてはGeらにより記載された（Ge
ne 13,201(1994) ）。エンドグリン遺伝子の５’−非翻
訳領域の一部分についての配列の情報は入手可能である
が、この領域の機能またはプロモーター領域については
知られていない。
【００１０】ＶＥＧＦレセプターは他の内皮細胞特異的
タンパク質である。この場合において、２つのレセプタ
ーは区別される（Plate et al.,Int.J.Cancer 59,520(1
994)）：一方において、ＶＥＧＦレセプター１（ｆｌｔ
−１）、（de Vries et al.,Science 255,989(1992) ）
は細胞質部分の中にｆｍｓ様キナーゼを含有し、そして
ＶＥＧＦレセプター２（ｆｌｋ−１、ＫＤＲ）、（Term
an et al.,BBRC 187,1579(1992) ）は細胞質部分の中に
チロシンキナーゼを含有する。双方のレセプターはほと
んどもっぱら内皮細胞上に見出される（Senger et al.,
Cancer Metast.Rev.12303(1993) ）。
【００１１】他の内皮細胞特異的レセプターのチロシン
キナーゼはｔｉｅ−１またはｔｉｅ−２（Partanen et
al.,Mol.Cell.Biol.12,1698(1992) 、Schurch und Risa
u,Development 119,957(1993) 、Dumont et al.,Oncoge
ne 7,1471(1992) ）、およびＢ６１レセプター（Ｅｃｋ
レセプター）、（Bartley et al.,Nature 368,558(199
4) 、Pandey et al.,Science 268,567(1995) 、van der
Geer et al.,Ann.Rev.Cell Biol.10,251(1994)）であ
る。
【００１２】他の内皮細胞特異的タンパク質は下記の通
りである：Ｂ６１分子、これはＢ６１レセプターのリガ
ンドを表す（Holzman et al.,J.Am.Soc.Nephrol.4,466
(1993) 、Bartley et al.,Nature 368,558(1994) ）；
エンドセリン、特にエンドセリンＢ（O'Reilly et al.,
J.Cardiovasc.Pharm.22,18(1993)、Benatti et al.,J.C
lin.Invest.91,1149(1993)、O'Reilly et al.,BBRC 19
3,834(1993)）、そのプロモーター配列はBenatti et a
l.,J.Clin.Invest.91,1149(1993)に記載される；エンド
セリン１（Yanasigawa et al.,Nature 332,411(198
8)）、そのプロモーター配列はWilson et al.,Mol.Cel
l.Biol.10,4654(1990) に記載される；エンドセリンレ
セプター、特にエンドセリンＢレセプター（Webb et a
l.,Mol.Pharmacol.47,730(1995)、Haendler et al.,J.C
ardiovasc.Pharm.20,1(1992) ）、マンノース６−リン
酸塩レセプター（Perales et al.,Eur.J.Biochem.226,2
25(1994)）、そのプロモーター配列はLudwig et al.,Ge
ne 142,311(1994)、Oshima et al.,J.Biol.Chem.263,25
53(1988)およびPohlmann et al.,PNAS USA 84,5575(198
7)に記載される；およびフォンビルブランド因子（ｖＷ
Ｆ）、そのプロモーター配列はJahroudi and Lynch,Mo
l.Cell.Biol.14,999(1994) 、Ferreira et al.,Bioche
m.J.293,641(1993) およびAird et al.,PNAS USA 92,45
67(1995)）に記載される。
【００１３】他の内皮細胞特異的タンパク質は下記の通
りである：例えば、ＩＬ−１αおよびＩＬ−１βの形態
のＩＬ−１、これらは活性化された内皮細胞により生産
され（Warner et al.,J.Immunol.139,1911(1987)）、そ
のプロモーター配列はHangenet al.,Mol.Carcinog.2,68
(1986) 、Turner et al.,J.Immunol.143,3556(1989)、F
enton et al.,J.Immunol.138,3972(1987)、Bensi et a
l.,Cell Growth Diff.1,491(1990) 、Hiscott et al.,M
ol.Cell.Biol.13,6231(1993)およびMori et al.,Blood
84,1688(1994) に記載される；ＩＬ−１レセプター、そ
のプロモーター配列はYe et al.,PNAS USA 90,2295(199
3)に記載される、血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ−１）、
内皮細胞中のＶＣＡＭ−１の発現はリポ多糖、ＴＮＦ−
α（Neish et al.,Mol.Cell.Biol.15,2558(1995)）、Ｉ
Ｌ−４（lademarco et al.,J.Clin.Invest.95,264(199
5) ）およびＩＬ−５（Marni et al.,J.Clin.Inv est.9
2,1866(1993) ）により活性化される。ＶＣＡＭ−１の
プロモーター配列はNeish etal.,Mol.Cell.Biol.15,255
8(1995)、Ahmad et al.,J.Biol.Chem.270,8976(1995)
、Neish et al.,J.Exp.Med.176,1583(1992) 、lademar
co et al.,J.Biol.Chem.267,16323(1992)、およびCybul
sky et al.,PNAS USA 88,7859(1991)に記載される。
【００１４】他の内皮細胞特異的プロモーターは下記の
通りである：合成アクチベーター配列、ここで合成アク
チベーター配列は内皮細胞において優先的または選択的
に活性である転写因子、例えば、転写因子ＧＡＴＡ−
２、のためのオリゴマー化結合部位から構成されてお
り、エンドセリン１遺伝子中のその結合部位は５’−Ｔ
ＴＡＴＣＴ−３’であり（Lee et al.,Biol.Chem.266,1
6188(1991)、Dorfmann etal.,J.Biol.Chem.267,1279(19
92)およびWilson et al.,Mol.Cell.Biol.10,4854(1990)
）、また、天然内皮特異的プロモーターの代替物とし
て使用することができる。脳特異的、内皮グルコース−
１−トランスポーター、ここで脳内皮細胞は脳の中への
Ｄ−グルコースの経内皮輸送を行うためにこのトランス
ポーターを非常に強く特徴的に発現する（Gerhart et a
l.,J.Neurosci.Res.22,464(1989)）。このプロモーター
配列はMurakami et al.,J.Biol.Chem.267,9300(1992)に
記載される。
【００１５】これらのプロモーターのあるもの、例え
ば、フォンビルブランド因子の遺伝子またはＶＥＧＦレ
セプター１（ｆｌｋ−１）の遺伝子のプロモーターは、
内皮細胞に対してかなり特異的であるが、比較的低い活
性を有するだけである。このような「弱い」プロモータ
ーの活性はそれらを基礎プロモーター（例えば、ＳＶ４
０）またはエンハンサーと組み合わせることによって強
めることができるが、この組み合わせは通常その後の特
異的な活性の減少を招く。
【００１６】
【発明の概要】したがって、本発明は、強力かつ内皮特
異的であるプロモーターの提供をその目的とする。
【００１７】今般、本発明者らは、エンドグリン遺伝子
プロモーターが、意外にも、これらの性質を有すること
を見出した。
【００１８】したがって、本発明は、ヒトエンドグリン
遺伝子のプロモーター、その機能的部分および変異体に
関する。このプロモーターは最大２４１５塩基対を有し
（図５〜９、配列番号１を参照）、好ましくは開始配列
を含むヌクレオチド配列１〜２３７８を包含することが
見出された。
【００１９】
【発明の具体的説明】本発明によるプロモーターを特徴
づけるために、エンドグリン遺伝子のプロモーター配
列、またはその一部分をプラスミドｐＧＬ３（Ｐｒｏｍ
ｅｇａ）中のリポーター遺伝子（例えば、酵素ルシフェ
ラーゼをコードする遺伝子）に連結し、内皮細胞（ＥＣ
Ｖ−３４細胞系）および、比較のため、子宮頸癌細胞
（ＨｅＬａ細胞系）をこの構築物で形質転換した。驚く
べきことに、エンドグリンプロモーターはｖＷＦプロモ
ーターより約８０倍強力であることが見出された。これ
は非常に驚くべきことである。なぜなら、ｖＷＦは、前
述したように、内皮特異的方法で発現され、そのためエ
ンドグリンプロモーターの強さはｖＷＦプロモーターの
それに類似することが期待されたからである。
【００２０】また、エンドグリンプロモーターは子宮頸
癌細胞より内皮細胞において約３０倍強力なプロモータ
ー活性を有することが見出された。これは驚くべきこと
である。なぜなら、ｖＷＦは、同様に内皮特異的であ
り、子宮頸癌細胞および内皮細胞において同じ活性を有
するからである。従って、本発明によるエンドグリンプ
ロモーターは、活性の強さおよび内皮特異性の双方に関
して、ｖＷＦ遺伝子プロモーターより顕著に優れた活性
を有する。
【００２１】さらに、本発明によるプロモーター配列の
一部分もまた強い内皮細胞特異的活性を示すことが見出
された。
【００２２】エンドグリン遺伝子プロモーターの５’末
端欠失構築物の内皮細胞におけるプロモーター活性を下
記に示す。活性はＳＶ４０プロモーター活性に基づく、
相対活性である。
【００２３】 ヌクレオチド配列 相対活性 ＳＶ４０プロモーター １ エンドグリンプロモーター （図５〜９、配列番号１） １−２４１５ １１．５ 部分配列： ３６−２４１５ １０．２ ４７０−２４１５ １３．０ ９４８−２４１５ １０．０ １３１０−２４１５ ２．０ １８４７−２４１５ ３．３ ２３３９−２４１５ ０．２
【００２４】したがって、「プロモーターの機能的部
分」は、プロモーター活性を有する本発明によるプロモ
ーターのすべての部分配列、特に約１〜約２３７８、約
３６〜約２３７８、約４７０〜約２３７８および約９４
８〜約２３７８の部分配列、および約３６〜約２４１
５、約４７０〜約２４１５および約９４８〜約２４１５
の部分配列、好ましくは約４７０〜約２４１５および約
４７０〜約２３７８の部分配列を意味するとして理解さ
れる。また、プロモーター活性を有する部分配列は、例
えば、約１３１０〜約２４１５および約１３１０〜約２
３７８および約１８４７〜約２４１５および約１８４７
〜約２３７８までである。
【００２５】しかしながら、本発明は配列番号１に記載
されているようなプロモーター、およびその機能的部分
に限定されず、また、プロモーター活性を有する変異体
を包含する。この変異体は、例えば、１または２以上の
塩基、好ましくは約１〜約５０、特に約１〜約２５、更
に約１〜約５塩基の欠失、付加、挿入および／または置
換を包含する。プロモーター活性は、例えば、記載され
るルシフェラーゼアッセイを使用して、容易に測定でき
る。
【００２６】本発明は、さらに、（ａ） 本発明による
プロモーターの少なくとも１つの核酸配列（成分
（ａ））および、場合によっては、（ｂ） 成分（ａ）
によりその転写が活性化される少なくとも１つのエフェ
クター遺伝子（成分（ｂ））、を含んでなる核酸構築物
に関する。
【００２７】成分（ａ）は好ましくは成分（ｂ）から上
流に位置する。
【００２８】本発明は、さらに、本発明によるヒトエン
ドグリンのプロモーター配列が他の標的細胞特異的、ウ
イルス特異的、代謝特異的または細胞周期特異的プロモ
ーター配列と、少なくとも１つのエフェクター遺伝子と
組み合わされており、プロモーター配列のこの組み合わ
せが少なくとも１つのエフェクター遺伝子の転写の活性
化を制御する、核酸構築物に関する。
【００２９】本発明による核酸構築物は好ましくはＤＮ
Ａから構成されている。用語「核酸構築物」は、核酸か
ら構成され、そして標的細胞中で転写されることができ
る人工的構造物を意味するものと理解される。それらは
好ましくはベクター、例えば、プラスミドやウイルスベ
クターのような非ウイルスベクターに挿入される。非ウ
イルスベクターおよびウイルスベクターの製造は当業者
にとって周知の事項であろう。
【００３０】本発明は、また、本発明による核酸構築物
を有する細胞に関する。
【００３１】一般に、エフェクター遺伝子の選択は遺伝
子構築物で治療すべき疾患に依存する。
【００３２】腫瘍疾患、白血病、自己免疫疾患、アレル
ギー、関節炎、炎症、臓器拒絶、移植片／宿主反応、血
液凝固系疾患、心臓血管疾患、貧血、感染またはＣＮＳ
損傷の治療のためのエフェクター遺伝子の例は、下記公
報に記載されている：ＷＯ９６／０６９４０、ＷＯ９６
／０６９３８、ＷＯ９６／０６９４１およびＷＯ９６／
０６９３９。
【００３３】例えば、本発明による制限断片は、サイト
カイン、ケモカイン、成長因子、サイトカインレセプタ
ー、ケモカインレセプターまたは成長因子レセプター、
およびさらには、サイトカインアンタゴニスト、細胞性
塞栓、細胞障害または細胞消滅誘発タンパク質、抗体ま
たは抗体断片、血管形成インヒビター、凝固因子、凝固
インヒビター、繊維素溶解タンパク質、薬剤前駆体を切
断しこれにより薬剤を形成する酵素、血液循環に対する
作用を有するタンパク質、または免疫反応を引き起こす
感染病原体の抗原をコードする。
【００３４】本発明による核酸構築物は、さらに、プロ
モーター配列または内部のリボソームエントリー部位
（ｉｎｔｅｒｎａｌ ｒｉｂｏｓｏｍａｌ ｅｎｔｒｙ
ｓｉｔｅｓ：ＩＲＥＳ）を経由して互いに結合された
２またはそれ以上の同一であるか、または異なるエフェ
クター遺伝子を含んでなることができる。これらの例は
前述の公報に記載されている。
【００３５】本発明による核酸構築物は、例えば、内皮
細胞特異的にのみ、または内皮細胞特異的かつ代謝特異
的に、内皮細胞特異的かつ細胞周期特異的に、および／
または内皮細胞特異的かつウイルス特異的に、遺伝子を
発現させるために使用することができ、遺伝子は好まし
くは薬理学的に活性な化合物または薬剤の不活性の前駆
体を切断し、これにより活性な薬剤を形成する酵素をコ
ードする遺伝子である。
【００３６】前述の疾患を治療する薬剤を製造するため
に本発明による核酸構築物を使用することが好ましく、
薬剤の製造は一般に核酸構築物を適当なベクター中にク
ローニングすることを含む。このベクターは、例えば、
患者に投与される。本発明によるプロモーターおよび核
酸構築物の他の用途への適用も当業者により理解される
であろう。
【００３７】
【実施例】下記の実施例により本発明を説明するが、本
発明はこれらに限定されるものではない。
【００３８】実施例 プロモーターファインダー（ＰｒｏｍｏｔｅｒＦｉｎｄ
ｅｒTM）ＤＮＡウォーキング（Ｗａｌｋｉｎｇ）キット
（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）をプロモーターのクローニングに
使用した。このキットを使用して、記載された配列の
５’に位置する約２．４キロ塩基対の断片を、２回のＰ
ＣＲ実験において、ヒトエンドグリンｃＤＮＡの５’−
非翻訳領域から２つの遺伝子特異的プライマーを用いて
増幅した。
【００３９】Ｅ１：ＧＣＴＧＧＧＣＴＧＧＡＧＴＴＧＣ
ＴＧＴＣＣＧＡＡＧＧＡＴＧ（配列番号２） Ｅ２：ＡＡＴＧＧＡＴＧＧＣＡＧＴＧＡＣＡＧＣＡＧＣ
ＡＧＴＣＣＴＧ（配列番号３） このためのＰＣＲ条件は下記の通りであった： １．ＰＣＲ： プライマーＥ１、９４℃
において２５秒、２５秒×９４℃、６３℃において２０
秒、６８℃において４分、３９サイクル、６８℃におい
て４分。 ２．ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ： プライマーＥ２、９４℃
において２５秒、９４℃において２５秒、６１℃におい
て２０秒、６８℃において４分、２６サイクル、６８℃
において４分。 ポリメラーゼ： ＥｘｐａｎｄTM Long t
emplate PCR system（Boehringer Mannheim ）
【００４０】ＰＣＲ断片をＱＩＡａｑｕｉｃｋTMスピン
カラム（Ｑｉａｇｅｎ）に通して精製し、ＴＡクローニ
ングベクター（Ｏｒｉｇｉｎａｌ ＴＡ Ｃｌｏｎｉｎ
ｇTMキット）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））の中に挿入し
た。この構築物ｐＣＲ２．１Ｅｎｄｏ（図１ａ参照）を
配列決定し、クローニングされた領域をヒトエンドグリ
ン遺伝子の２４１５塩基対の５’領域として特定した
（配列番号１、図５〜９参照）。
【００４１】このベクターからクローニングされた領域
をルシフェラーゼリポーターベクター、すなわち、ｐＧ
Ｌ３（Ｐｒｏｍｅｇａ）の中にクローニングし、ＨｅＬ
ａおよびＥＣＶ３０４細胞系において、構築物ｐＧＬ３
Ｅｎｄｏ（図１ｂ参照）として、そのプロモーター活性
について試験した。
【００４２】細胞をＤＥＡＥ／デキストラン法（Sompay
rac et al.,PNAS 78,7575(1981) を採用した）による
か、またはリポオフェクトアミン（ＬｉｏｆｅｃｔＡＭ
ＩＮＥTM）（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ）を使用してトランス
フェクションした。ｐＧＬ３Ｅｎｄｏ構築物と同様に、
ＳＶ４０基礎プロモーターを標準としてトランスフェク
ションした；ｆｌｋ−１−（ＶＥＧＦ）（−２２５／開
始ＡＴＧ）プロモーターおよびまたフォンビルブランド
因子 （ｖＷＦ）（−４８７／＋２４７）プロモーター
（ＳＶ４０を含むか、または含まない）を、また、トラ
ンスフェクションした。この後者のＳＶ４０エンハンサ
ーを含有するｖＷＦプロモーター構築物は、その活性が
野生型プロモーターのそれよりも著しく高いが、その選
択性が減少するものの壊滅しないことにおいて独特であ
る。すべての構築物をｐＧＬ３の中にクローニングし、
そしてルシフェラーゼアッセイを下記の文献に記載され
ているように実施した：Herber et al.,Oncogene 9,129
5(1994);Lucibello et al.,EMBO J.14,132(1995)。
【００４３】ＥＣＶ３０４細胞におけるプロモーターの
ルシフェラーゼ活性の違い（図２）は、エンドグリン遺
伝子の５’領域のクローニングされた断片がプロモータ
ー活性を有することを証明する。この活性は、他の典型
的な内皮細胞特異的プロモーターのそれと比較すると
き、非常に高い。それはｆｌｋ−１のそれよりも４倍高
く、そしてｖＷＦプロモーターのそれよりも８倍高い。
ｐＧＬ３Ｅｎｄｏ構築物の活性は、ｖＷＦプロモーター
をＳＶ４０エンハンサー配列で増強したときでさえより
高い。これらのデータは、クローニングされた領域がヒ
トエンドグリン遺伝子のプロモーターであることを確証
する。
【００４４】図３は、ＥＣＶ３０４細胞におけるエンド
グリンプロモーターの活性を、ＨｅＬａ子宮頸癌細胞系
と比較したものである。ＳＶ４０基礎プロモーターを標
準化とするとき、ＥＣＶ３０４細胞における活性はＨｅ
Ｌａ細胞における活性より約２９倍高い。このように、
クローニングされたプロモーターは内皮細胞において活
性であるばかりでなく、これらの細胞について選択的で
ある。
【００４５】図４は、エンドグリンプロモーター上の転
写因子の推定上の結合部位を示したものである。いくつ
かの強力な相同性潜在的結合部位は、プロモーターの選
択性および活性に関係づけることができ、いくつかの保
存されたＮＦ−ＫＢ結合部位を含み、保存されたＡｌｕ
配列と記載されたｃＤＮＡとの間の領域の中に位置す
る。
【００４６】
【配列表】
配列番号１ 配列の長さ：２４１５ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類： DNA (genomic) 配列の特徴 特徴を表す記号：exon 存在位置：1..2415 配列 CGGGGGTTCC TCCTCTGTAA AGTGGAGGTA TAACGGTACC CACCTCCTGG GGTGGCTGTG 60 AGGATTCAGA GCTGATAAGG TGAACGCCTA GGGCGGGCCC TGGTGCAGAG AGAGCGCTCA 120 GCTCCTAGGG CTGGATTAAC TGTCCCTGGG GCACAGATCT CGGTCTGGGG CCTGTGGAAA 180 CCTCAGAGCC ACCCCTGAAC CCCCACCGAG CCACCCTTTG CCTCGCAGTG CCCATGGCCT 240 CGTCTCCGAG GTTACAGGAA AAGGCAGAGG AGATGCCCTT CTCAGGGTGG CCCTCTGGGA 300 GAGGACACTC TCCCTTGACC TCAAAGCCAC GCTTGGCTGC AAACTGGCCA GGCAGCCACA 360 AGGCTGGGCA AGCAGAACGA TCCCTAATCC CCACCCAAAG AGCCACACCG ACCCTCCCAG 420 CCGCTGTGAC AGCTCCTGCA GAGACAAACA CACGGCCTAC TCTTGTCACC CGGGCCGGCC 480 AATAAGCACG GAGAGGCAAG GCCTCAGACC CTGGACAGAC ATCCTCCCTC CAGAGGCACC 540 AGGGCCTCAG CCTTCTCCTC CCTCCCTGGG CCTCAATTTC TCCACCTGTG ACCCAGGGCA 600 GGTGGATCCA GGGAGAAGAA CCTTCTGGCT CCATCTCACC ATGGGTCCTG CCAGCACACA 660 CAAAGATTTG GCCTCTCAAA GCCTAGCTCT GCCAGCGTCC TTCTGCTCAA GAACTCTCCA 720 TGACTCCCAG TGGCCCTAAG GACAAAGTCC TGGCATTTGA GGCCCTCCCA ATGCAGGGCC 780 AGACTCTGCC TCTCCAGCTT CCTGTCCCCA CCACACCCCT GCTGGTCTCA CGGTGGTCCG 840 ACTGTTTCCT GCTTCTGTGC CTTTGCTTAG TCTGGCACCC CTGCCTGGCA TGCTTTCCTC 900 ACCCCTTCTT CTCCCCAATC CCAACTCACC CAGTCTTTCA AAGGGCAGGC CTAAATACCA 960 GGCCCTCCAG GTGGCCCAGG ATTCCTTCTC TGAGCTTTCA TGGGCCTGGC CCTGGGTGCT 1020 ACCTGTGAGT AGTCCCACGG TGGGTACATA GTAGGTGCGC TTACTGTTCG CAGAATGAAC 1080 ATGGGACAGT TTGGGGACTG TCACCCAGCT CAGGGAGCAC TGATGGGGAA GCATCTCCTG 1140 TATGTCCCAG GGCTCAGTGC TGTAGTGTCC TGACCCTCAG AAATCTCATA ATGGCTTGGT 1200 CAGGAAGGCA TCGTGCCCCA CTTTGCAAAC AGGGGGTGCT GAGAATTGAG GGGCCTTGTC 1260 CAAGGTCTCA TGGCTAGGAG CAAGCAGAAT CGGATTTGAA CCCAGGGCCA CGTGACTTCA 1320 GAAGTGCCAT TAAAGTCCCC ATAATTCGGA GCTGTCTTCT TTTTTTTTTT CTTTCTTTTT 1380 TTTGAGACCG AGCCTCACTC TGTCACCTAG GCCAGGAGTG CAGTGGTCTG ATCTCAGCTC 1440 ACTGCAACCT CCGCCTCCTA GGTTCAAGTG ATTCTCTAGC CTCAGCCTCC CAAGTAGCTG 1500 GGACTACAGG CGCACGTCAT CATGCCCAGC TAACTTTTGT ATTTTTAGTA GAGATGGGTT 1560 TTCACCATGT TGGTCAGGCT GGTCTCGAAC TCCTGACCTC AAGTGATCCG TCTGCCTCGG 1620 CCTCTCAAAG TGCTGGGATT ATAGGCTTGA GCCACTACAC TCGGCCTGGA GCTGTGTTTT 1680 GTCGGTGAAG GATTTTCCAC CCATGAAGGG GTCAGACGTG AAGCGTGTGG CCCTGGGCAG 1740 CTCCTCTGAG CCCAGAGACG CCAGCCCTAG CCGCCTTGCT GTGCCACTTT GGGACTTCCC 1800 TCCCTAGCCT GAGCTTCAGT TTTCCTGCCT GTTAGGCAGC CCCATGTCAA CTGCACTTAG 1860 TAGGCCGGGT TTGATGCCCG ACAAGACGTG AAGTGGTGGA GGTGGGCAGG ATCCCAGCGC 1920 TACCATCTTC TTGAACCAGT GATCTCAACA CATCGGATTT CTGTTTCCTC ATCTGCAAAA 1980 TGGGATCAGT GAGCTCAGGT GGGTCACAAA TTCTACAGGA ACTACTTTAG CCAAGCCCGG 2040 CCCCCTGAAA GTTCCCCTCG GTGGGCAGTT AGGGTGATTG TTTTCATCTG TGGGGCTCCC 2100 TGATGCGTCC CACCCACCAG CCTTGGAGAG GGTGGGATGG GAGGGTGGGG TGCTTGGGGA 2160 GACAAGCCTA GAGCCTGGGC CCTCCCACCC CACTGCCTCC CCCCATCCCA GGGCCCCCCA 2220 CCCAGTGACA AAGCCCGTGG CACTTCCTCT ACCCGGTTGG CAGGCGGCCT GGCCCAGCCC 2280 CTTCTCTAAG GAAGCGCATT TCCTGCCTCC CTGGGCCGGC CGGGCTGGAT GAGCCGGGAG 2340 CTCCCTGCTG CCGGTCATAC CACAGCCTTC ATCTGCGCCC TGGGGCCAGG ACTGCTGCTG 2400 TCACTGCCAT CCATT 2415
【００４７】配列番号２ 配列の長さ：２９ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：一本鎖 配列の種類： DNA (genomic) 配列の特徴 特徴を表す記号：exon 存在位置：1..29 配列 GCTGGGCTGG AGTTGCTGTC CGAAGGATG 29
【００４８】配列番号３ 配列の長さ：２９ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：一本鎖 配列の種類： DNA (genomic) 配列の特徴 特徴を表す記号：exon 存在位置：1..29 配列 AATGGATGGC AGTGACAGCA GCAGTCCTG 29
【図面の簡単な説明】
【図１】ヒトエンドグリンプロモーターのクローニン
グ。Ａ：ＰＣＲにより調製されたヒトエンドグリンプロ
モーターの断片をベクターｐＣＲ２．１（Ｉｎｖｉｔｒ
ｏｇｅｎ）のＴＡクローニング部位の中に結合した。
Ｂ：ヒトエンドグリンプロモーターを含有する断片を構
築物ｐＣＲ２．１Ｅｎｄｏから酵素ＭｌｕＩおよびＸｈ
ｏＩで切除し、ルシフェラーゼリポーターベクターｐＧ
Ｌ３（Ｐｒｏｍｅｇａ）の中にクローニングした。
【図２】異なる内皮細胞特異的プロモーターのルシフェ
ラーゼ活性。すべてのプロモーターをｐＧＬ３の中にク
ローニングし、そしてすべての値をＳＶ４０基礎プロモ
ーターについて標準化した。ＳＶ４０：エンハンサーを
含まないＳＶ４０基礎プロモーター。ｐＧＬ３Ｅｎｄ
ｏ：エンドグリンプロモーター（図１Ｂ参照）。ｖＷＦ
＋ＳＶ４０エンハンサー：上流のＳＶ４０エンハンサー
で増強されたフォンビルブランド因子のプロモーター。
ｆｌｋ−１：ＶＥＧＦレセプターｆｌｋ−１のプロモー
ター（−２２４／開始ＡＴＧ）。ｖＷＦ：追加のエンハ
ンサーを含まないフォンビルブランド因子のプロモータ
ー（−４８７＋２４７）。
【図３】内皮細胞および非内皮細胞におけるヒトエンド
グリンプロモーターのルシフェラーゼ活性。構築物は図
２における構築物と同一である。ＳＶ４０基礎プロモー
ターについて標準化し、内皮細胞系ＥＣＶ３０４におけ
るエンドグリンプロモーターの活性をＨｅＬａ子宮頸癌
細胞系におけるその活性と比較した。このアッセイにお
いて、ＥＣＶ３０４細胞における活性はＨｅＬａ細胞に
おけるよりほぼ２９倍高い。
【図４】エンドグリンプロモーター上の転写因子の推定
上の結合部位。Ａｌｕ配列とｃＤＮＡの開始との間の領
域のみが示されている。すべての開始部位はプラス
（＋）鎖上に位置する。
【図５】ヒトエンドグリンプロモーター配列を示した図
である。塩基対１は５’末端に位置する配列領域に相当
する。高度に保存されたＡｌｕ配列は塩基対１３６０−
１６６６の領域に位置するが、筋ネズミ（Ｍ．ｍｕｓｃ
ｕｌｕｓ）ｃＤＮＡとの相同性は３’領域において塩基
対２３００から始まり、ヒト（Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓ）ｃ
ＤＮＡ部分（５’−非翻訳領域）は塩基対２３７９から
始まる。
【図６】ヒトエンドグリンプロモーター配列を示す。図
５の続きである。
【図７】ヒトエンドグリンプロモーター配列を示す。図
６の続きである。
【図８】ヒトエンドグリンプロモーター配列を示す。図
７の続きである。
【図９】ヒトエンドグリンプロモーター配列を示す。図
８の続きである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 48/00 ＡＡＢ Ａ６１Ｋ 48/00 ＡＢＥ ＡＢＡ ＡＢＦ ＡＢＥ ＡＢＮ ＡＢＦ ＡＣＢ ＡＢＮ ＡＣＣ ＡＣＢ ＡＤＷ ＡＣＣ Ｃ０７Ｋ 14/705 ＡＤＷ Ｃ１２Ｎ 5/00 Ｂ Ｃ０７Ｋ 14/705 Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＤＶ (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｒ 1:91） (72)発明者 ハンス‐ハラルト、ゼドラセック ドイツ連邦共和国マールブルク、ゾーネン ハンク、３ (72)発明者 ロルフ、ミュラー ドイツ連邦共和国マールブルク、ポイティ ールシュトラーセ、８

Claims (13)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】配列番号１の配列またはその機能的部分も
    しくは変異体を含んでなる、ヒトエンドグリン遺伝子プ
    ロモーター。
  2. 【請求項２】機能的部分が約１〜約２３７８、約３６〜
    約２３７８、約４７０〜約２３７８、約９４８〜約２３
    ７８、約１３１０〜約２３７８、約１８４７〜約２３７
    ８、約３６〜約２４１５、約４７０〜約２４１５、約９
    ４８〜約２４１５、約１３１０〜約２４１５、または約
    １８４７〜約２４１５の配列を含んでなる、請求項１に
    記載のプロモーター。
  3. 【請求項３】請求項１または２に記載のヒトエンドグリ
    ン遺伝子の少なくとも１つのプロモーター配列を含んで
    なる核酸構築物。
  4. 【請求項４】前記ヒトエンドグリン遺伝子プロモーター
    配列（成分（ａ））によりその転写が活性化されるエフ
    ェクター遺伝子（成分（ｂ））をさらに含む、請求項３
    に記載の核酸構築物。
  5. 【請求項５】前記ヒトエンドグリンプロモーター配列が
    前記エフェクター遺伝子から上流に配置されている、請
    求項４に記載の核酸構築物。
  6. 【請求項６】前記ヒトエンドグリンプロモーター配列
    が、ウイルス特異的活性化配列、代謝特異的活性化配
    列、細胞特異的活性化配列、および細胞周期特異的活性
    化配列から成る群から選択される少なくとも１つの追加
    の活性化配列と組み合わされた、請求項３〜５のいずれ
    か一項に記載の核酸構築物。
  7. 【請求項７】前記核酸がＤＮＡである、請求項３〜６の
    いずれか一項に記載の核酸構築物。
  8. 【請求項８】ベクターの中に挿入された、請求項３〜７
    のいずれか一項に記載の核酸構築物。
  9. 【請求項９】前記ベクターがプラスミドベクターまたは
    ウイルスベクターである、請求項８に記載の核酸構築
    物。
  10. 【請求項１０】前記エフェクター遺伝子が活性化合物を
    コードする遺伝子であり、前記活性化合物がサイトカイ
    ン、ケモカイン、成長因子、サイトカインレセプター、
    ケモカインレセプター、成長因子レセプター、およびサ
    イトカインアンタゴニスト、抗増殖または細胞増殖抑制
    または細胞消滅作用を有するタンパク質、抗体、抗体断
    片、血管形成インヒビター、凝固因子、凝固インヒビタ
    ー、繊維素溶解タンパク質、薬剤前駆体を切断しそれに
    より薬剤を形成する酵素、血液循環に対する作用を有す
    るタンパク質、および免疫反応を引き起こす感染病原体
    の抗原から成る群より選択される、請求項４〜９のいず
    れか一項に記載の核酸構築物。
  11. 【請求項１１】プロモーター配列または内部のリボソー
    ムエントリー部位（ＩＲＥＳ）を介して連結されたいく
    つかのエフェクター遺伝子を含んでなる、請求項３〜１
    ０のいずれか一項に記載の核酸構築物。
  12. 【請求項１２】請求項３〜１１のいずれか一項に記載の
    核酸構築物を有する細胞。
  13. 【請求項１３】腫瘍疾患、白血病、自己免疫疾患、アレ
    ルギー、関節炎、炎症、臓器拒絶、移植片／宿主反応、
    血液凝固疾患、心臓血管疾患、貧血、感染およびＣＮＳ
    損傷から成る群より選択される疾患を治療する薬剤を製
    造するための、請求項３〜１０のいずれか一項に記載の
    核酸構築物、または請求項１２に記載の細胞の使用。
JP10024524A 1997-02-06 1998-02-05 ヒトエンドグリン遺伝子プロモーターおよびその使用 Withdrawn JPH11178A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19704301.1 1997-02-06
DE19704301A DE19704301C1 (de) 1997-02-06 1997-02-06 Der Promotor des humanen Endoglingens und seine Verwendung für die Gentherapie

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPH11178A true JPH11178A (ja) 1999-01-06

Family

ID=7819364

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP10024524A Withdrawn JPH11178A (ja) 1997-02-06 1998-02-05 ヒトエンドグリン遺伝子プロモーターおよびその使用

Country Status (15)

Country Link
US (1) US6103527A (ja)
EP (1) EP0857781A3 (ja)
JP (1) JPH11178A (ja)
KR (1) KR19980071084A (ja)
CN (1) CN1196784C (ja)
AR (1) AR011110A1 (ja)
AU (1) AU736724B2 (ja)
BR (1) BR9800563A (ja)
CA (1) CA2222981A1 (ja)
CZ (1) CZ289227B6 (ja)
DE (1) DE19704301C1 (ja)
HU (1) HUP9800247A3 (ja)
PL (1) PL324688A1 (ja)
RU (1) RU2230115C2 (ja)
TR (1) TR199800168A2 (ja)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19704301C1 (de) * 1997-02-06 1998-03-26 Hoechst Ag Der Promotor des humanen Endoglingens und seine Verwendung für die Gentherapie
HUP9900956A2 (hu) 1998-04-09 2002-04-29 Aventis Pharma Deutschland Gmbh. Egyláncú, több antigéntkötőhely kialakítására képes molekulák, előállításuk és alkalmazásuk
WO2000060068A1 (fr) 1999-04-02 2000-10-12 Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc. Sequences de bases d'expression genique utilisees a des fins therapeutiques et medicaments utilises en therapie genique
NZ584848A (en) 2007-09-28 2012-09-28 Intrexon Corp Therapeutic gene-switch constructs and bioreactors for the expression of biotherapeutic molecules, and uses thereof
EP2310507A4 (en) 2008-07-08 2013-03-20 David Gladstone Inst METHODS AND COMPOSITIONS FOR MODULATING ANGIOGENESIS
US20150359862A1 (en) 2013-01-30 2015-12-17 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Compositions and Methods for Treating Complications Associated with Diabetes

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5466596A (en) * 1992-08-25 1995-11-14 Mount Sinai Hospital Corporation Tissue specific transcriptional regulatory element
GB9506466D0 (en) * 1994-08-26 1995-05-17 Prolifix Ltd Cell cycle regulated repressor and dna element
DE19704301C1 (de) * 1997-02-06 1998-03-26 Hoechst Ag Der Promotor des humanen Endoglingens und seine Verwendung für die Gentherapie

Also Published As

Publication number Publication date
CN1203948A (zh) 1999-01-06
BR9800563A (pt) 1999-06-29
TR199800168A2 (xx) 1998-08-21
DE19704301C1 (de) 1998-03-26
CZ289227B6 (cs) 2001-12-12
EP0857781A3 (de) 2001-05-16
CZ33298A3 (cs) 1998-08-12
RU2230115C2 (ru) 2004-06-10
AU736724B2 (en) 2001-08-02
KR19980071084A (ko) 1998-10-26
CN1196784C (zh) 2005-04-13
HUP9800247A3 (en) 2002-11-28
MX9800981A (es) 1998-08-30
AU5293198A (en) 1998-08-13
HUP9800247A2 (hu) 1998-10-28
US6103527A (en) 2000-08-15
PL324688A1 (en) 1998-08-17
EP0857781A2 (de) 1998-08-12
HU9800247D0 (en) 1998-03-30
CA2222981A1 (en) 1998-08-06
AR011110A1 (es) 2000-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7928073B2 (en) Purified polypeptides having IL-13 receptor activity
AU760224B2 (en) Isolated nucleic acid molecules which encode T cell inducible factors (TIFs), the proteins encoded, and uses thereof
Celada et al. Repression of major histocompatibility complex IA expression by glucocorticoids: the glucocorticoid receptor inhibits the DNA binding of the X box DNA binding protein.
JPH11509088A (ja) 血管内皮増殖因子受容体をコードする遺伝子の転写調節
JP2010029207A (ja) ＨＭＧ蛋白質（ｈｉｇｈｍｏｂｉｌｉｔｙｇｒｏｕｐｐｒｏｔｅｉｎ）遺伝子の核酸配列およびそれらの使用
Ranganathan et al. Cloning of murine tissue factor and regulation of gene expression by transforming growth factor type beta 1.
JP2002505582A (ja) Ｌａｇ−３スプライス変異体
US6323329B1 (en) Nucleic acid sequences of genes encoding high mobility group proteins
US6200751B1 (en) Endothelial specific expression regulated by EPCR control elements
JP2002513578A (ja) 単一ストレスによる目的の遺伝子の持続された活性化を達成するための分子調節回路
JPH11178A (ja) ヒトエンドグリン遺伝子プロモーターおよびその使用
EP1108436B1 (en) Pharmaceutical compositions for the prevention and treatment of atherosclerosis and restenosis after ptca
JPH11318455A (ja) ヒト癌退縮抗原タンパク質
Syin et al. Rabbit C-reactive protein. Biosynthesis and characterization of cDNA clones.
Hehlgans et al. Activation of transcription by binding of NF-E1 (YY1) to a newly identified element in the first exon of the human DR alpha gene.
EP2264059A1 (en) Polypeptides, cDNAs encoding the same and utilization thereof
EP1652924A2 (en) Polypeptide, cDNA encoding the same and use thereof
MXPA98000981A (en) Promoter of human endoglin gene and his
JP2001527555A (ja) 血管形成に作用を与える組織因子
JP3391484B2 (ja) ヒト・エンドセリン−２遺伝子のプロモーター活性を有する領域を含有するｄｎａ
JP2005312304A (ja) 新規インターフェロン制御因子活性化ポリペプチド及びそれをコードする核酸
US20120027764A1 (en) Novel polypeptide, cdna encoding the same, and use thereof
US20030008356A1 (en) Novel polypeptide, a cDNA encoding the same, and use of it
JP2000116383A (ja) ヒト癌退縮抗原タンパク質
JPH1099081A (ja) ヒト高親和性ＩｇＥ受容体（ＦｃεＲＩ）α鎖遺伝子の転写調節を行うＤＮＡ

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20050113

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20050113

A761 Written withdrawal of application

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A761

Effective date: 20050324