JPH10513167A

JPH10513167A - ヘム生成物の新規医療用途

Info

Publication number: JPH10513167A
Application number: JP8523284A
Authority: JP
Inventors: カンガサオ，マウノ; レランダー，クラウス
Original assignee: レイラスオサケユイチア
Priority date: 1995-01-30
Filing date: 1996-01-25
Publication date: 1998-12-15
Also published as: FI950389A0; WO1996023495A1; FI100454B; US5919755A; AU4489196A; EP0806951A1; CA2211445A1; FI950389A

Abstract

(57)【要約】本発明は、哺乳類細胞における突然変異誘発の防止または突然変異誘発の危険性の減少のための；哺乳類の骨髄中の芽球の比率の減少のための；および胎児性ヘモグロビンの生産の剌激のための、ヘムまたはそれの誘導体の使用に関する。

Description

【発明の詳細な説明】ヘム生成物の新規医療用途発明の分野本発明は、哺乳類細胞における突然変異誘発の予防のためのまたは突然変異誘発の危険性の減少のためのヘムまたはそれの誘導体の使用に関する。本発明は更に、哺乳類の骨髄中の芽球の比率を減少させるため、並びにその結果として白血病前状態から白血病への変換を防ぐため、白血病の病気進行を防ぐため、および哺乳類において白血病を治癒せしめるための、ヘムまたはそれの誘導体の使用に関する。加えて、本発明は、特に胎児性ヘモグロビンの生産を誘導することによる、哺乳類における異常ヘモグロビン症状態（例えばβ−サラセミアおよび鎌状赤血球貧血）の臨床症状を改善するためのヘムまたはそれの誘導体の使用に関する。発明の背景本発明の背景を明らかにするために、および特にプラスチスに関する追加の詳細を与えるためにここで利用する刊行物および他の資料は、参考として組み込まれる。ヘムは重要な内因性物質である（ヘム、プロトポルフィリンIX鉄）。ヘムには国際非専売名（ＤＣＩ）が無い。ヘムの化学状態および安定性は溶媒や他の環境条件により影響を受ける。「ヘム」という用語は本明細書中では包括的に使われる。ヘムの特定の化学状態には別の用語が使われる。ヘムのFeは第一鉄（Fe^2-）または第二鉄（Fe³⁺）状態のいずれであってもよく、そこに４つのピロール窒素が配位する。「ヘマチン」は第二鉄形態であり、アルカリ性溶液（水酸化ヘム）または中性溶液中に溶解されたヘムを指して言う。「ヘミン」は、塩化物イオンが第５位または第６位で鉄に配位している別の第二鉄形態であって、ヘムがHCl を含む水溶液中に溶解された時に存在するような形態のことを言う。ヘミンは結晶形態では非常に安定であるが、難溶性である。ヘム塩化物をアルカリ性溶液に溶かすと、クロリドがヒドロキシルに置き替わり、それは安定性が乏しく、そして特徴づけが不十分の分解生成物を容易に形成する。ヘムはタンパク質またはアミノ酸、例えばアルギニンやリジンに結合すると安定である。ヘムアルギネートはヘムとＬ−アルギニンの生成物である（１）。アルギニンはヘムの水溶性と安定性を増加させる。ヘムアルギネートは一旦血流中に注入されると、ヘムアルギネートが解離して、ヘム成分が単量体形で迅速に血漿タンパク質に結合する（１）。従って、ヘムアルギネートとしてのヘムの形成は静脈内注入用のヘムの安定性を増加させ、しかもそれの生理的効用を変えない。よって、ヘムアルギネートについて下記に記載する発見は、他のヘム製剤についても同様に有効である。現在既知である他のヘム製剤の代わりにヘムアルギネートを使うことの恩恵は、高い安定性、その結果としての一貫した効能、およびヘムの分解産物により引き起こされることが知られている悪影響が無いことである。 Leiras）はフィンランドで開発され、急性ポルフィリン発作の治療用にヨーロッパの数カ国で現在販売されている。以前、ヘマチンは一般に旧式のヒト血液から研究室または病院の薬局で調製されていた。ヘムアルブミン製剤はドイツで開発された。ヘマチンの使用（研究室で調製されたヘマチンかまたはパンヘマじめとする悪影響によりしばしば困難である（２，３，４）。ヘムアルギネートはそれらの影響をめったに生じないので、より寛容性量のヒトアルブミンと共に再構成されれば大きく減少する（５）。しかしながら、これは相当な費用と、ヒト血液に由来するタンパク質生成物の投与の潜在的危険性を追加する。ヘムおよびそれの誘導体は特許刊行物においても報告されている。フィンランド国特許公報FI 68970は、ヘムアルギネートおよびヘムリジネートの調製方法並びにポルフィリン症の治療における前記化合物の使用を開示している。米国特許第5,233,034 号は、ヘミンの精製方法並びに新規ヘミン誘導体、即ちヘミンとＤＭＩの１：３−付加物およびそれの調製に関する。フィンランド特許出願第8411 99号はアルブミンを使ったヘマチンの安定化方法に関する。ヨーロッパ特許第337598号は、ＨＩＶにより引き起こされる病気の治療へのヘミンを含む様々な金属ポルフィリンの使用を開示している。WO 92/02242 は、AI DSのようなレトロウイルス感染症の治療のためのヘムおよびヘムアルギネートを含む金属ポルフィリンの使用を記載している。突然変異誘発および発癌ほとんどの癌は遺伝子変異により発生する。よって、特定の癌細胞はしばしばそれらのＤＮＡ配列に共通の異常を有すると示すことが可能である。これはまだ遺伝子変異が癌の原因作用の不可欠な第一段階であることを証明するものではない。より根拠のしっかりした主張は、癌を引き起こすことが知られている剤の大部分が遺伝子変異を引き起こし、また逆に遺伝子変異を引き起こす剤が癌を引き起こすというものである。この発癌（癌の発生）と突然変異誘発（遺伝子変異の発生）の間の相関関係は、化学的発癌物質、電離線およびウイルスについて明らかである（６）。造血細胞における突然変異誘発は、未熟な造血細胞（芽球）のクローン増殖を引き起こし、その結果白血病前状態（骨髄形成異常症候群のような）および白血病を引き起こし得る（７）。よってヘムの抗変異原性作用および骨髄形成異常症候群の骨髄中の芽球の比率を減少させるヘムの能力は相互に関連し、同様な作用形態をとるかもしれない。骨髄形成異常症候群およびそれらの治療方法骨髄形成異常症候群（ＭＤＳ）は、貧血症状、白血球減少および血小板減少を引き起こす無力で且つ形成異常の造血により特徴付けられる、後天性多官能性幹細胞疾患の幾分不均一な群である。骨髄始原細胞は骨髄中の阻害因子によるものでない成長阻害を示す。ＭＤＳの進行中に、細胞遺伝学的分析により示されるように骨髄の機能不全が進行し、そして前駆細胞の分化がますます損なわれるようになる。臨床過程は、安定した中程度の症状の障害から明白な急性白血病に急速に進行するものまで多様である。出血と再発性感染は罹病率と死亡率の最大原因である。骨髄形成異常は、何ら認識できる原因をもたない原発的であるか、または電離線、アルキル化剤または他の有機溶剤への暴露に対する二次的である場合がある（７）。デュッセルドルフ地区からの資料では、ＭＤＳ患者の約５％がこの疾患の二次型を有していた（８）。 1982年にＦＡＢグループはＭＤＳについての臨床学的分類方法を提案し（９）、それが一般に採用されている（表１）。幾つかの研究はＦＡＢ分類法が予後有意性も有することを示した（表１）（10）。特に生存期間の中央値は、骨髄中の芽球の比率により影響を受ける。ＭＤＳについて提案された治療様式は非常に多様であり、それらとしては協力的方法、コルチコステロイド、同化ステロイド、分化促進剤、生物応答変更剤、造血増殖因子、ヘムアルギネート、低線量化学療法、強化療法、および骨髄移植を伴った高線量化学療法が挙げられる（12）。骨髄形成異常症候群におけるヘムアルギネートの効能ヘムアルギネートは２つの独立した研究者グループにより骨髄形成異常症候群の治療に使われている。 Volin 他（13，14）は、サブグループＲＡ，ＲＡＲＳ，ＲＡＥＢまたはＲＡＥＢｔの骨髄形成異常症候群を有する26人の患者に、ほとんどの場合初めに連続４日間とその後８〜12週間に渡り週１回、２〜３mgヘミン／kgの用量でヘムアルギネートを投与した。患者のうち６人が治療中に血球減少の改善を示し、そのうち３人が正常なまたは正常に近い血球数を有するという長期持続性の（＞11，＞12 および25か月）良好な応答を示した。 Timonen およびKauma（15）は、サブタイプＲＡ，ＲＡＲＳまたはＲＡＥＢの骨髄形成異常症候群を有する14人の患者を、２週間間隔をあけた連続４日間の６回の処置において３mgヘミン／kgの用量で治療した。３人の患者がヘモグロビン値および／または血小板数に長期持続性の（５，26，および＞41か月）改善を示した。異常ヘモグロビン症ヘモグロビンの各分子は４つのポリペプチド（グロビン）鎖と４つのヘム分子とから成る。グロビン鎖には、２＋２の組み合わせでヘモグロビン分子を構成する４種類の異なる型がある（α，β，δおよびγ）。成人では、ヘモグロビン分子の主な型はＨｂ−Ａ₁（α₂，β₂）とＨｂ−Ａ₂（α₂，δ₂）である。胎児期の間と生後１年間の間は胎児性ヘモグロビン型Ｈｂ−Ｆ（α₂，γ₂）も存在する。ヘモグロビンの構造における病的な遺伝性異常は一般名で異常ヘモグロビン症と呼称される（16）。 100 種類以上の異常ヘモグロビンが知られており、その各々は１つの型のポリペプチド鎖を冒す突然変異によって生成される。鎌状赤血球貧血では、例えばグロビン鎖中の１個のアミノ酸残基が変更される（glu₆→val₆）ような形でβ−グロビン遺伝子が変異を受けている。しかしながら、この小さな変化がヘモグロビンと赤血球の機能に影響を及ぼし、溶血性貧血を伴う重症の病気を引き起こす（ 16）。サラセミアはα鎖、β鎖またはβとγ鎖の生産が大幅に減少されているかまたは欠けている貧血の一種である。サラセミアの重症度はサブタイプと異常遺伝子がどこに存在するかに依存し、それによりヘテロ接合体またはホモ接合体が発現する。β−サラセミアは例えばしばしば重症の小球性貧血として現れる（16）。 β−サラセミア患者（例えば鎌状赤血球貧血、β−サラセミア）におけるＨｂ −Ｆの増加は、その病気の臨床的症状を改善することができる。鎌状赤血球貧血では、ＨｂＦ含有細胞が低濃度の鎌状ヘモグロビン（Ｈｂ−Ｓ）を有するだけでなく、Ｈｂ−Ｆが直接Ｈｂ−Ｓの重合を阻害し、かくして細胞内重合体を形成しそして鎌状赤血球化を受ける該細胞の性質が低いことの原因となる。β−サラセミアでは、増加されたγ鎖が、α鎖に対するβ鎖の欠損を部分的に補うであろう。最近、幾つかの薬理物質、例えばヒドロキシ尿素および５−アザシチジンが異常ヘモグロビン症患者においてＨｂ−Ｆ合成を刺激するために使われている（17 ，18，19，20）。発明の要約本発明は、哺乳類細胞、特に哺乳類造血細胞での、突然変異誘発の予防または突然変異誘発の危険性の減少に有用である医薬組成物の調製のためのヘムまたはそれの誘導体の使用に関する。本発明は更に、哺乳類の骨髄中の芽球の比率を減少させるのに有用な医薬組成物の調製のためのヘムまたはそれの誘導体の使用に関する。本発明の一面によれば前記医薬組成物は、より悪性のＭＤＳサブタイプ（ＲＡＥＢ，ＲＡＥＢ−ｔ）へのまたは白血病への病気の進行を遅らせるかまたは防止するために骨髄形成異常症候群の治療に使われる。本発明の別の面によれば、前記医薬組成物は、より悪性形態へのまたは白血病への病気の進行を遅らせるかまたは防止するために他の白血病前の病気または状態の治療に使われる。更に別の面によれば、前記医薬組成物は、病気の進行を遅らせるかまたは防止するためあるいは病気を白血病前状態または非白血病状態へ転換させるために白血病の治療に使われる。本発明はその上、哺乳類赤血球系細胞において胎児性ヘモグロビン（Ｈｂ−Ｆ）の生産を誘導しそしてこれによりまたは他の機構により異常ヘモグロビン症の臨床的症状（特に鎌状赤血球貧血およびβ−サラセミア）の改善をもたらすのに有用な医薬組成物の調製のためのヘムまたはそれの誘導体の使用に関する。本発明の医薬製剤は、ヘム異化作用阻害剤、細胞増殖抑制剤、レンチノイドまたは他の分化誘導剤、サイトカイン、生物学的増殖因子、胎児性ヘモグロビンの生産を誘導することが知られている剤などを更に含有することができ、あるいはそれらの剤を含有する別の医薬製剤と併用することができる。ヘム異化作用阻害剤は例えばプロトポルフィリン錫もしくは亜鉛、またはメソポルフィリン錫もしくは亜鉛であることができる。「ヘムまたはそれの誘導体」は、ヘム、ヘマチン、ヘミン、ヘムのアミノ酸付加塩およびヘムアルブミン（アルブミンに可逆的に結合したヘム）、並びにヘムの生化学的前駆体、例えばプロトポルフィリンIX、前記前駆体のアミノ酸付加塩およびアルブミンとそれらの前駆体との可逆的複合体を包含する。特に好ましい誘導体はヘムアルギネートとヘムリジネートである。図面の簡単な説明図１は、培養したヒト赤血球前駆体による全ヘモグロビン生産に対するヘムアルギネートの効果を示す。指摘した濃度のヘムアルギネートの存在下で第II相において増殖させた細胞を13日目に収穫し、それらのヘモグロビンを定量した。図２は、培養したヒト赤血球前駆体による胎児性ヘモグロビン（Ｈｂ−Ｆ）生産に対するヘムアルギネート濃度の効果を示す。指摘した濃度のヘムアルギネートの存在下で第II相において増殖させた細胞を13日目に収穫し、それらのヘモグロビンをクロマトグラフィーにかけそして定量した。図３は、培養したヒト赤血球前駆体による胎児性ヘモグロビン（Ｈｂ−Ｆ）生産に対するヘムアルギネート（100 μＭ）の存在下または非存在下でのヒドロキシ尿素（25〜200 μＭ）の効果を示す。０日目からヘムアルギネートの存在下または非存在下でそして５日目から指摘した濃度のヒドロキシ尿素を使って第II相において増殖させた細胞を13日目に収穫し、それらのヘモグロビンをクロマトグラフィーにかけそして定量した。図４は、培養したヒト赤血球前駆体による細胞増殖に対するヘムアルギネート（100 μＭ）の存在下または非存在下でのヒドロキシ尿素（25〜200 μＭ）の効果を示す。０日目からヘムアルギネートの存在下または非存在下でそして５日目から指摘した濃度のヒドロキシ尿素を使って第II相において増殖させた細胞を13 日目に収穫し、それらのヘモグロビンをクロマトグラフィーにかけそして定量した。発明の詳細な説明ヘム製剤（ヘムアルギネート）がマウスにおいて生体内で（マウス小核試験）突然変異誘発の発生を減少させることができるということを発見した（表２）。マウスでは、36mg／kgの高用量で抗変異原性効果が証明された。しかしながら、ヒトでは、活性用量レベルはずっと低い（10倍も低い）。これは、齧歯類（ラットでのＡＵＣ 64μｇ／ml／時）よりもヒト（ＡＵＣ 998μｇ／ml／時）の方が排泄速度が遅いためである。両ＡＵＣ値は、３mg／kgの静注量を投与した後に観察された（21およびKangasaho,未発表情報）。よって、ヘム製剤は細胞増殖抑制剤および／または放射線療法のような既知の変異原性療法で治療した患者において突然変異誘発の発生を減少させるために使うことができる。加えて、ヘム製剤は偶然にまたは環境上もしくは職業上の事情によって変異原性薬品または放射線に暴露された人において突然変異誘発の防止または変異原性発現の防止に用いることができる。ヘム製剤（ヘムアルギネート）が骨髄形成異常症候群（ＭＤＳ）を有する患者の骨髄中の芽球の比率を減らすことができることも発見した。ヘムアルギネートは血球数を増加させることによりＭＤＳ患者の一部で臨床的に有効であることが知られている。しかしながら、ヘム療法の使用はＭＤＳ患者における他の造血増殖因子の使用と同様に、芽球の比率を増加させることによって白血病への病気進行の危険性を高めるだろうと思われていた（13，14，15）。驚くべきことに、臨床試験においてヘムアルギネートが何人かのＭＤＳ患者の骨髄中の芽球（芽球＋骨髄芽球）の比率を減少させることができることに気付いた（表３）。この発見は、骨髄中の芽球の比率が患者の予想生存期間に強く関係し（表１）、そしてＭＤＳの本来の経過が比較的静止したものから侵略的に進行性のもの（すなわち自然回復が見込まれないもの）まで異なるために臨床的に重要である（14）。発表された研究によれば、ＭＤＳ進行は４／26人の患者（13）および４／14人の患者（15）に認められ、これは患者において標準であると考えられる。後者の研究では（15）、１／14人の患者に芽球の減少が報告されたが、これは時たまの現象であると考えられる。本明細書中に与えられるデータでは、５／21人の患者（表３）に明白な減少が認められ、小程度の減少が12／21人、効果なしが１／21人、そしてわずかな増加が３／21人であった（表４）。よって、全体としては17／21人の患者に幾らかの減少が認められた。しかしながら、臨床的に有意なヘムの骨髄芽球減少活性は患者の一区分（subpopuration）に限定されると思われる。よって、患者の一区分における骨髄中の芽球の比率を減少させることによるヘム製剤での治療は、ＭＤＳの「軽度の」サブタイプから「より悪性の」サブタイプ（ＲＡＥＢ，ＲＡＥＢ−ｔ）へのおよび更に白血病への変換を防止することができる。骨髄中の芽球の比率の増加は白血病の進展の最重要要因であるため、ヘム製剤はＭＤＳ以外の他の白血病前状態にも有効であり得る。患者の一人は、ヘムアルギネートでの治療開始前は骨髄中の芽球（芽球＋骨髄芽球）の比率が30％であったが、治療後はそれが10％に減少した。骨髄中の芽球の比率30％はＭＤＳ（ＲＡＥＢ−ｔ）と急性白血病との限界値である（表１）ため、ヘム製剤での治療はＭＤＳのような白血病前疾患においてだけでなく白血病においても効果的である（病気進行を遅延または防止するか、あるいは白血病を白血病前または非白血病状態へ逆変換する）と考えることができる。ヘムアルギネートは、異常ヘモグロビン症（β−サラセミア、鎌状赤血球貧血）患者からの赤血球前駆細胞におけるグロビン鎖発現に作用することができることも発見した。ヘムアルギネートはそれらの細胞により生産される全ヘモグロビン量を増加させ（図１）且つ胎児性ヘモグロビンの比率を増加させる（図２）。特に驚くべきことは、胎児性ヘモグロビンの比率に対するヘムアルギネートの効果がヒドロキシ尿素の存在によって非常に強く増強されたことである（図３）。胎児性ヘモグロビン生産を誘導する単独でのまたはヒドロキシ尿素（または他の剤）と組み合わせたヘムアルギネートの能力は臨床的に相当重要なものである。異常ヘモグロビン症（β−サラセミアや鎌状赤血球病のような）を有する患者における胎児性ヘモグロビンの増加は、そのような病気の臨床的症状を改善することができる。ヘム製剤に加えて他の療法も併用してヘムの治療効果を増大させることができる。そのような併用療法は、例えば、ヘム異化作用の阻害剤（プロトポルフィリン錫または亜鉛、メソポルフィリン錫または亜鉛など）または細胞増殖抑制剤（特に低用量での）等、レチノイドまたは他の分化誘導因子、サイトカイン、生物学的増殖因子など、更に異常ヘモグロビン症の場合にはヒドロキシ尿素または胎児性ヘモグロビンの生産を誘導することが知られている他の薬理物質であることができる。方法 1. マウス小核アッセイ染色体異常が引き起こされている有糸分裂細胞では、染色体の無動原体断片が細胞分裂の後期になっても分離しない。終期の後、それらの断片は娘細胞の核に含まれず、よってそれらの細胞の細胞質中に単一または多数の小核（ハウエル− ジョリー体）を形成するだろう。小核は様々な細胞に見られるが、赤血球では小核が容易に検出されることからこの細胞型を試験用に選択する。最後の有糸分裂が終わってから数時間後に、赤芽球はそれらの核を排出する。幼生の赤血球はリボ核酸の存在のためにギムザで青色に染まるが、リボ核酸は次第に消失するために成熟赤血球はギムザでピンク色に染まる。青色に染まる幼生細胞は多染性赤血球として知られ、この細胞型では小核が容易に検出される。試験動物は試験中22〜24グラムの体重を有しそして約40日齢であるスイス起源の特殊な病原体不含有ＣＤ−１多産マウスであった。このマウスを４日間環境順応させ、その後で食塩溶液（賦形剤対照）または36mgヘミン／kg体重の用量のヘムアルギネート溶液のいずれかを使って10ml／kg体重の容量を静注により投与した。投与の24，48および72時間後に５匹の雄と５匹の雌のマウスを頸部脱臼により犠牲にした。一滴の子ウシ血清を含むスライド上に直接骨髄スミアを作製した。このスミアをメタノールで固定し、風乾し、そして10％ギムザ溶液中で10分間染色した。染色したスミアを光学顕微鏡により検査し（コード下で）、動物１匹あたり多染性赤血球1000個あたりの有小核細胞の発生率を調べた。 2. 骨髄形成異常患者の骨髄中の芽球の比率臨床実験において、骨髄形成異常症候群を有する患者を３mgヘミン／kgの用量でのヘムアルギネートの静脈内注入により治療した。注入はまず連続４日間行い、その後週１回11週間に渡り行った。従って各患者に計15回の注入を行った。ヘムアルギネート注入の開始前と最後の注入の１週間後に各患者から骨髄試料を収集した。骨髄試料中の芽球と骨髄芽球の比率を、標準的血液学実験方法を使って測定した。骨髄形成異常症候群の分類において使われる「芽球」の定義は芽球と骨髄芽球の両者を包含する（９）。 3. 試験管内での胎児性ヘモグロビンの生産の誘導正常な提供者および鎌状赤血球貧血患者またはβ−サラセミア患者のいずれかから得た末梢血単核細胞を、Ficoll-Hypaque勾配上での遠心分離により単離し、そして10％のウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１μｇ/mlのシクロスポリンＡおよび563 7膀胱癌細胞系の培養物から収集した10％の順化培地が補足されたアルファ最少必須培地中に５×10⁶細胞／mlの密度で接種した。培養物を多湿下で空気中５％C O₂の雰囲気下で＋37℃にてインキュベーションした。この第Ｉ相培養での７日間のインキュベーション後、非付着細胞を収得し、洗浄し、そしてアルファ培地、30％ＦＣＳ、１％脱イオン化ウシ血清アルブミン、１×10^-5Ｍのβ−メルカプトエタノール、1.5 mMグルタミン、１×10^-6Ｍのデキサメタゾン、および１Ｕ／mlのヒト組換えエリスロポイエチンから成る新鮮な培地中で再び培養した。ベンジジン−HCl 法を使うことによってヘモグロビン含有細胞を決定した。胎児性ヘモグロビン（Ｈｂ−Ｆ）生産に対するヘムアルギネートの効果は、１Ｕ／mlのエリスロポイエチンと様々な濃度のヘムアルギネートの存在下で上述の液体細胞培養の第II相においてヒト赤血球前駆体を増殖させることにより測定した。０日目に100 μＭのヘムアルギネートを添加しそして５日目に様々な濃度のヒドロキシ尿素を添加することによりヘムアルギネートとヒドロキシ尿素の併用効果を調べた。13日目に細胞を収穫し、溶解させ、そしてカチオン交換HPLCによりそれらの全ヘモグロビンおよびＨｂ−Ｆ含量を分析した。結果結果を表２、表３および表４並びに添付の図１〜図４に与える。本発明の目的上、ヘムまたはそれの誘導体は様々な経路により投与することができる。適当な投与形態としては、非経口注射剤およびインプラント、例えば静脈内、筋肉内、皮内および皮下注射剤；経口製剤並びに坐剤が挙げられる。ヘムまたはそれの誘導体の必要量は治療すべき特定の症状、症状の重さ、治療期間、投与経路、並びに使われる特定のヘム化合物、特定の医薬組成物または付随療法の特定の組合せによって異なるだろう。ヘム触媒阻害剤の可能な使用（医薬組成物の部分としてまたは付随使用として）は、ヘムまたはそれの誘導体の好ましい用量を減少させる。静脈内投与には、ヘムまたはそれの誘導体の好ましい日用量はヘミン当量として計算すると0.1 〜15mg／kgの範囲である。他の投与経路では（p.o.，s.c.，i.p.，i.m.）、好ましい日用量はヘムまたはそれの誘導体の各々の特定の医薬組成物に依存して異なるだろう。しかしながら、好ましい日用量はヘミン当量として計算すると0.1 〜15mg／kgの全身１日放出量（「生物学的利用量」）を生じるものであろう。本発明の方法を様々な態様（そのうちの幾つかだけが本明細書中に開示される）の形で含めることができると認識されるだろう。他の態様が存在し且つそれは本発明の精神から逸脱しないことは当業者にとって明白であろう。よって、記載される態様は例示的であって、限定的であると解釈すべきでない。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ )，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．哺乳類細胞、特に哺乳類造血細胞における突然変異誘発の防止または突然変異誘発の危険性の減少に有用な医薬組成物の調製のためのヘムまたはそれの誘導体の使用。２．前記医薬組成物が、変異原性化学物質または放射線への哺乳類の療法的暴露に関連して使うつもりのものである、請求項１に記載の使用。３．前記医薬組成物が、変異原性化学物質、放射線またはウイルスへの哺乳類の業務上または環境上の暴露に関連して使うつもりのものである、請求項１に記載の使用。４．哺乳類の骨髄中の芽球の比率の減少に有用な医薬組成物の調製のためのヘムまたはそれの誘導体の使用。５．前記医薬組成物が、より悪性のＭＤＳサブタイプ（ＲＡＥＢ，ＲＡＥＢ− ｔ）への病気の進行を遅らせるかまたは防止するために骨髄形成異常症候群の治療に使うつもりのものである、請求項４に記載の使用。６．前記医薬組成物が、より悪性のＭＤＳサブタイプ（ＲＡＥＢ，ＲＡＥＢ− ｔ）への病気の進行を遅らせるかまたは防止するために別の白血病前の疾患または状態の治療に使うつもりのものである、請求項４に記載の使用。７．前記医薬組成物が、病気進行を遅らせるかもしくは防止するためにまたは病気を白血病前もしくは非白血病状態に変換するために白血病の治療に使うつもりのものである、請求項４に記載の使用。８．胎児性ヘモグロビンの生産の刺激に有用な医薬組成物の調製のためのヘムまたはそれの誘導体の使用。９．前記医薬組成物が、異常ヘモグロビン症、特に鎌状赤血球貧血およびβ−サラセミアの臨床的症状を改善するために使うつもりのものである、請求項８に記載の使用。 10．前記ヘム誘導体がアルブミンに可逆的に結合したヘムまたはヘムのアミノ酸付加塩である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用。 11．前記ヘム誘導体がヘムアルギネートである、請求項10に記載の使用。 12．(1)前記医薬組成物が、ヘム異化作用阻害剤、細胞増殖抑制剤、レチノイドまたは他の分化誘導因子、サイトカイン、生物学的増殖因子、胎児性ヘモグロビンの生産を誘導することが知られている他の剤などを更に含有し、または (2)前記医薬組成物が、ヘム異化作用阻害剤、細胞増殖抑制剤、レチノイドまたは他の分化誘導因子、サイトカイン、生物学的増殖因子、胎児性ヘモグロビンの生産を誘導することが知られている他の剤などを含有する別の医薬組成物と併用するつもりのものである、請求項１〜11のいずれか一項に記載の使用。 13．前記ヘム異化作用阻害剤がプロトポルフィリン錫もしくは亜鉛、またはメソポルフィリン錫もしくは亜鉛である、請求項12に記載の使用。