JPH10500574A - 赤血球凝集素のアシル化/パルミチル化を抑制する抗ウイルス剤を用いるインフルエンザウイルス感染の治療 - Google Patents
赤血球凝集素のアシル化/パルミチル化を抑制する抗ウイルス剤を用いるインフルエンザウイルス感染の治療Info
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Abstract
Description
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- 【特許請求の範囲】 1.インフルエンザウイルス赤血球凝集素のパルミチル化および感染性ウイルス の生産を抑制する化合物を同定するためのアッセイであって、 (a)被験物質の存在下で、赤血球凝集素の細胞質ドメインに対応するアミノ 酸配列を含むタンパク質またはペプチド基質をパルミテートおよびパルミテート トランスフェラーゼと反応させ、そして (b)パルミテートが該タンパク質またはペプチド基質に取り込まれるか否か を検出する、 ことを含んでなり、その際、被験物質のパルミチル化抑制能が、被験物質の不 在下で該タンパク質またはペプチド基質に取り込まれたパルミテートの量と比べ て、該タンパク質またはペプチド基質へのパルミテート取り込みの低下により示 される、上記アッセイ。 2.前記のタンパク質またはペプチド基質がプロセシングされていない赤血球凝 集素タンパク質からなる、請求項1に記載のアッセイ。 3.前記のタンパク質またはペプチド基質がプロセシングされていない赤血球凝 集素の細胞質ドメインを含む部分からなる、請求項1に記載のアッセイ。 4.パルミテートがシグナル発生化合物により標識される、請求項1に記載のア ッセイ。 5.シグナル発生化合物が放射性標識、蛍光体、酵素または比色シグナル発生化 合物である、請求項4に記載のアッセイ。 6.パルミテートトランスフェラーゼが細胞から精製されたものである、請求項 1に記載のアッセイ。 7.パルミテートトランスフェラーゼがパルミテートトランスフェラーゼを発現 する細胞の抽出物に含まれるものである、請求項1に記載のアッセイ。 8.パルミテートトランスフェラーゼが前記細胞の細胞質ゾル画分に含まれるも のである、請求項7に記載のアッセイ。 9.膜脂質を含む、請求項1に記載のアッセイ。 10.前記反応を液相中で行って反応生成物を形成させ、反応完了時に該生成物を 反応混合物から分離する、請求項1に記載のアッセイ。 11.反応生成物が固相表面に固定される、請求項10に記載のアッセイ。 12.反応生成物が前記のタンパク質またはペプチド基質に特異的な固定化抗体に より捕捉される、請求項11に記載のアッセイ。 13.反応前に前記のタンパク質またはペプチド基質を固定させて、前記反応を固 −液相中で行う、請求項1に記載のアッセイ。 14.インフルエンザウイルス赤血球凝集素のパルミチル化および感染性ウイルス の生産を抑制する化合物を同定するためのアッセイであって、 (a)赤血球凝集素をパルミチル化し得るインフルエンザウイルス感染細胞に パルミテートおよび被験物質を加え、そして (b)該感染細胞から回収されたインフルエンザウイルス赤血球凝集素にパル ミテートが取り込まれるか否かを検出する、 ことを含んでなり、その際、被験物質のパルミチル化抑制能が、被験物質の不 在下で該赤血球凝集素に取り込まれたパルミテートの量と比べて、該赤血球凝集 素へのパルミテート取り込みの低下により示される、上記アッセイ。 15.インフルエンザウイルス赤血球凝集素のパルミチル化およびインフルエンザ ウイルスの形成を抑制する化合物を同定するためのアッセイであって、 (a)赤血球凝集素をパルミチル化する能力があり、かつ赤血球凝集素の細胞 質ドメインに対応するアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを発現する 遺伝子工学的に操作された宿主細胞に、パルミテートおよび被験物質を加え、そ して (b)該細胞から回収された該タンパク質またはペプチド基質にパルミテート が取り込まれるか否かを検出する、 ことを含んでなり、その際、被験物質のパルミチル化抑制能が、被験物質の不 在下で該タンパク質またはペプチド基質に取り込まれたパルミテートの量と比べ て、該タンパク質またはペプチド基質へのパルミテート取り込みの低下により示 される、上記アッセイ。 16.パルミテートがシグナル発生化合物により標識される、請求項14または15に 記載のアッセイ。 17.シグナル発生化合物が放射性標識、蛍光体、酵素または比色シグナル発生化 合物である、請求項16に記載のアッセイ。 18.前記細胞から回収された前記基質が固相表面に固定される、請求項14または 15に記載のアッセイ。 19.前記基質が赤血球凝集素、前記タンパク質または前記ペプチド基質に特異的 な固定化抗体により捕捉される、請求項18に記載のアッセイ。 20.インフルエンザウイルスに感染した個体に、治療上有効な量の、赤血球凝集 素のパルミチル化を抑制する物質を投与することを含んでなる、インフルエンザ ウイルス感染の治療方法。 21.インフルエンザウイルス赤血球凝集素のパルミチル化および感染性ウイルス の生産を抑制する化合物を同定するためのアッセイであって、 (a)赤血球凝集素をパルミチル化し得るインフルエンザウイルス感染細胞に パルミテートの前駆物質および被験物質を加え、そして (b)該感染細胞から回収されたインフルエンザウイルス赤血球凝集素にパル ミテートの前駆物質が取り込まれるか否かを検出する、 ことを含んでなり、その際、被験物質のパルミチル化抑制能が、被験物質の不 在下で該赤血球凝集素に取り込まれたパルミテート前駆物質の量と比べて、該赤 血球凝集素へのパルミテート前駆物質の取り込みの低下により示される、上記ア ッセイ。 22.インフルエンザウイルス赤血球凝集素のパルミチル化および感染性ウイルス の形成を抑制する化合物を同定するためのアッセイであって、 (a)赤血球凝集素をパルミチル化する能力があり、かつ赤血球凝集素の細胞 質ドメインに対応するアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを発現する 遺伝子工学的に操作された宿主細胞に、パルミテートの前駆物質および被験物質 を加え、そして (b)該細胞から回収された該タンパク質またはペプチド基質にパルミテート の前駆物質が取り込まれるか否かを検出する、 ことを含んでなり、その際、被験物質のパルミチル化抑制能が、被験物質の不 在下で該タンパク質またはペプチド基質に取り込まれたパルミテート前駆物質 の量と比べて、該タンパク質またはペプチド基質へのパルミテート前駆物質の取 り込みの低下により示される、上記アッセイ。 23.パルミテートの前駆物質がシグナル発生化合物により標識される、請求項21 または22に記載のアッセイ。 24.シグナル発生化合物が放射性標識、蛍光体、酵素または比色シグナル発生化 合物である、請求項23に記載のアッセイ。 25.前記細胞から回収された前記基質が固相表面に固定される、請求項21または 22に記載のアッセイ。 26.前記基質が赤血球凝集素、前記タンパク質または前記ペプチド基質に特異的 な固定化抗体により捕捉される、請求項25に記載のアッセイ。
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