JPH10327849A - 軟腐病の防除に有効な微生物農薬 - Google Patents
軟腐病の防除に有効な微生物農薬Info
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- JPH10327849A JPH10327849A JP9139518A JP13951897A JPH10327849A JP H10327849 A JPH10327849 A JP H10327849A JP 9139518 A JP9139518 A JP 9139518A JP 13951897 A JP13951897 A JP 13951897A JP H10327849 A JPH10327849 A JP H10327849A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 薬害がなく、安全な軟腐病防除用の微生物農
薬を提供する。 【解決手段】 軟腐病の病原性を欠失させたエルビニア
・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラの２種
類以上の菌株を使用することにより軟腐病を効果的に防
除する。それらの菌株が産生するバクテリオシンが互い
の菌株に対して抗菌性を示さないことが重要であり、エ
ルビニア・カロトボーラ サブスピーシスカロトボーラ
ＫＡＭ−２菌株とエルビニア・カロトボーラ サブス
ピーシスカロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌株の組
み合わせは、この条件を満たしており、好ましい。 【効果】 薬害がなく、安全な軟腐病防除用の微生物農
薬を提供するものであり、従来は防除が困難とされてき
た植物細菌病の主要な一つである軟腐病をより効果的に
防除することが可能となった。
薬を提供する。 【解決手段】 軟腐病の病原性を欠失させたエルビニア
・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラの２種
類以上の菌株を使用することにより軟腐病を効果的に防
除する。それらの菌株が産生するバクテリオシンが互い
の菌株に対して抗菌性を示さないことが重要であり、エ
ルビニア・カロトボーラ サブスピーシスカロトボーラ
ＫＡＭ−２菌株とエルビニア・カロトボーラ サブス
ピーシスカロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌株の組
み合わせは、この条件を満たしており、好ましい。 【効果】 薬害がなく、安全な軟腐病防除用の微生物農
薬を提供するものであり、従来は防除が困難とされてき
た植物細菌病の主要な一つである軟腐病をより効果的に
防除することが可能となった。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、学名エルビニア・
カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラに属する
細菌を生きたまま植物に散布して、軟腐病を防除する方
法に関するものである。
カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラに属する
細菌を生きたまま植物に散布して、軟腐病を防除する方
法に関するものである。
【０００２】
【発明が解決しようとする課題】軟腐病による病害防除
の対象とされる植物は、ハクサイ、キャベツ、セロリ、
レタス、ニンジン、ダイコン、ワサビ、ジャガイモ、タ
バコ、トマト、シクラメンなど多数があり、エルビニア
・カロトボーラ細菌により引き起こされるいわゆる軟腐
病（Ｓｏｆｔ ｒｏｔ ｄｉｓｅａｓｅ）が対象病害で
ある。
の対象とされる植物は、ハクサイ、キャベツ、セロリ、
レタス、ニンジン、ダイコン、ワサビ、ジャガイモ、タ
バコ、トマト、シクラメンなど多数があり、エルビニア
・カロトボーラ細菌により引き起こされるいわゆる軟腐
病（Ｓｏｆｔ ｒｏｔ ｄｉｓｅａｓｅ）が対象病害で
ある。
【０００３】エルビニア・カロトボーラ細菌により引き
起こされる、植物組織を軟化腐敗するいわゆる軟腐病に
対する防除方法としては、一般にストレプトマイシン等
の抗生物質製剤や、ボルドー液のような銅剤、さらにオ
キソリニック酸製剤の散布が行われている。
起こされる、植物組織を軟化腐敗するいわゆる軟腐病に
対する防除方法としては、一般にストレプトマイシン等
の抗生物質製剤や、ボルドー液のような銅剤、さらにオ
キソリニック酸製剤の散布が行われている。
【０００４】しかしながら、これらの農薬を用いた場合
にはその防除効果が満足すべきものでないうえに、病原
菌以外の有益な細菌までも死滅させてしまうことや、環
境汚染上の問題、さらに薬害の問題がある。また、抗生
物質については、それに対する抵抗性をもった細菌の出
現が問題となっている。
にはその防除効果が満足すべきものでないうえに、病原
菌以外の有益な細菌までも死滅させてしまうことや、環
境汚染上の問題、さらに薬害の問題がある。また、抗生
物質については、それに対する抵抗性をもった細菌の出
現が問題となっている。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、これらの
問題を解決するために鋭意検討を行った結果、本来は軟
腐病の病原菌であるエルビニア・カロトボーラ サブス
ピーシス カロトボーラ細菌の非病原性菌株が軟腐病を
効果的に防除しうることを見出し、特許出願した（特公
平６−９２２８６号公報）。
問題を解決するために鋭意検討を行った結果、本来は軟
腐病の病原菌であるエルビニア・カロトボーラ サブス
ピーシス カロトボーラ細菌の非病原性菌株が軟腐病を
効果的に防除しうることを見出し、特許出願した（特公
平６−９２２８６号公報）。
【０００６】非病原性の軟腐病菌が軟腐病を防除する機
構は、次のように考えられる。軟腐病菌の多くの菌株
は、類縁の細菌に対して抗菌性を示す蛋白質であるバク
テリオシンを産生することが知られている。バクテリオ
シンを産生する非病原性軟腐病菌は、病原性を持つ軟腐
病菌を殺し、かつ、自身が病原性を持たない故に軟腐病
を引き起こすことはなく、軟腐病を防除することができ
る。したがって、多くの他の軟腐病菌に対して抗菌性を
示すバクテリオシンを産生し、かつ、他の多くの軟腐病
菌が産生するバクテリオシンに対して耐性である非病原
性軟腐病菌（非病原性エルビニア・カロトボーラ細菌）
が微生物農薬の候補菌株として好ましい条件を有する。
さらに、作物根圏土壌や根面や茎葉上で、他の軟腐病菌
に比較して増殖能が強い性質があればより好ましい。
構は、次のように考えられる。軟腐病菌の多くの菌株
は、類縁の細菌に対して抗菌性を示す蛋白質であるバク
テリオシンを産生することが知られている。バクテリオ
シンを産生する非病原性軟腐病菌は、病原性を持つ軟腐
病菌を殺し、かつ、自身が病原性を持たない故に軟腐病
を引き起こすことはなく、軟腐病を防除することができ
る。したがって、多くの他の軟腐病菌に対して抗菌性を
示すバクテリオシンを産生し、かつ、他の多くの軟腐病
菌が産生するバクテリオシンに対して耐性である非病原
性軟腐病菌（非病原性エルビニア・カロトボーラ細菌）
が微生物農薬の候補菌株として好ましい条件を有する。
さらに、作物根圏土壌や根面や茎葉上で、他の軟腐病菌
に比較して増殖能が強い性質があればより好ましい。
【０００７】本発明者らは、このような観点から鋭意検
討の結果、これらの性質を有する非病原性軟腐病菌とし
て非病原性エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス
カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌株を選抜し、
特許出願した（特公平６−３８７４６号公報）。これに
より、薬害がなく、環境に対して影響の少ない軟腐病防
除用の微生物農薬を提供することができるようになっ
た。
討の結果、これらの性質を有する非病原性軟腐病菌とし
て非病原性エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス
カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌株を選抜し、
特許出願した（特公平６−３８７４６号公報）。これに
より、薬害がなく、環境に対して影響の少ない軟腐病防
除用の微生物農薬を提供することができるようになっ
た。
【０００８】本発明者らは、上記の知見に基づき、さら
に鋭意検討を行い、非病原性のエルビニア・カロトボー
ラ細菌の新たな菌株を見出し、また、２種類以上の非病
原性エルビニア・カロトボーラ細菌を組み合わせて用い
ることでさらに高い防除効果を発揮することが可能とな
ることを見出し、本発明に到達した。
に鋭意検討を行い、非病原性のエルビニア・カロトボー
ラ細菌の新たな菌株を見出し、また、２種類以上の非病
原性エルビニア・カロトボーラ細菌を組み合わせて用い
ることでさらに高い防除効果を発揮することが可能とな
ることを見出し、本発明に到達した。
【０００９】すなわち、本発明は、軟腐病の病原性を欠
失させたエルビニア・カロトボーラサブスピーシス カ
ロトボーラの２種類以上の菌株を含むことを特徴とする
軟腐病の防除に有効な微生物農薬である。さらに、それ
らの菌株が産生するバクテリオシンが互いの菌株に対し
て抗菌性を示さないことを特徴とする軟腐病の防除に有
効な微生物農薬である。また、軟腐病の病原株に対して
有効な抗菌性を有する、軟腐病の病原性を欠失させたエ
ルビニア・カロトボーラ サブスピーシスカロトボーラ
ＫＡＭ−２菌株である。さらには、このエルビニア・
カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＫＡＭ
−２菌株を含む軟腐病の防除に有効な微生物農薬であ
る。また、これにさらにエルビニア・カロトボーラ サ
ブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌
株を含む軟腐病の防除に有効な微生物農薬である。
失させたエルビニア・カロトボーラサブスピーシス カ
ロトボーラの２種類以上の菌株を含むことを特徴とする
軟腐病の防除に有効な微生物農薬である。さらに、それ
らの菌株が産生するバクテリオシンが互いの菌株に対し
て抗菌性を示さないことを特徴とする軟腐病の防除に有
効な微生物農薬である。また、軟腐病の病原株に対して
有効な抗菌性を有する、軟腐病の病原性を欠失させたエ
ルビニア・カロトボーラ サブスピーシスカロトボーラ
ＫＡＭ−２菌株である。さらには、このエルビニア・
カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＫＡＭ
−２菌株を含む軟腐病の防除に有効な微生物農薬であ
る。また、これにさらにエルビニア・カロトボーラ サ
ブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌
株を含む軟腐病の防除に有効な微生物農薬である。
【００１０】以下、本発明を詳細に説明する。一般に軟
腐病菌は、抗菌物質であるバクテリオシンを産生するこ
とが知られている。このバクテリオシンに対する軟腐病
菌の反応は、菌株間で著しく異なっており、ある軟腐病
菌が産生するバクテリオシンがある種類の軟腐病菌に対
しては有効な抗菌性を示すが、別の種類の軟腐病菌には
有効な抗菌性を示さないという性質を持っているのが一
般的である。したがって、非病原性軟腐病菌を用いて軟
腐病を防除しようとする場合、その非病原性軟腐病菌が
より多くの種類の病原性軟腐病菌に対して抗菌性を示す
バクテリオシンを産生する、すなわち、抗菌スペクトル
のより広いバクテリオシンを産生することが軟腐病をよ
り効果的に防除するためには必要であるが、単独でその
ような理想的な性質を持つ非病原性軟腐病菌を得ること
は容易なことではない。しかしながら、非病原性軟腐病
菌が産生するバクテリオシンの抗菌スペクトルが非病原
性軟腐病菌の種類によりそれぞれ異なることに着目すれ
ば、それらを２種類あるいはそれ以上組み合わせること
によって互いの抗菌性の弱い部分をカバーし合い、それ
ぞれの種類の非病原性軟腐病菌の抗菌性が加算されるこ
とにより、より広い抗菌スペクトルが得られることが期
待できる。本発明は、以上のような考察に基づき、軟腐
病の病原性を欠失させた非病原性エルビニア・カロトボ
ーラ細菌を２種類以上組み合わせて使用することによ
り、軟腐病をより効果的に防除することができる微生物
農薬を提供するものである。
腐病菌は、抗菌物質であるバクテリオシンを産生するこ
とが知られている。このバクテリオシンに対する軟腐病
菌の反応は、菌株間で著しく異なっており、ある軟腐病
菌が産生するバクテリオシンがある種類の軟腐病菌に対
しては有効な抗菌性を示すが、別の種類の軟腐病菌には
有効な抗菌性を示さないという性質を持っているのが一
般的である。したがって、非病原性軟腐病菌を用いて軟
腐病を防除しようとする場合、その非病原性軟腐病菌が
より多くの種類の病原性軟腐病菌に対して抗菌性を示す
バクテリオシンを産生する、すなわち、抗菌スペクトル
のより広いバクテリオシンを産生することが軟腐病をよ
り効果的に防除するためには必要であるが、単独でその
ような理想的な性質を持つ非病原性軟腐病菌を得ること
は容易なことではない。しかしながら、非病原性軟腐病
菌が産生するバクテリオシンの抗菌スペクトルが非病原
性軟腐病菌の種類によりそれぞれ異なることに着目すれ
ば、それらを２種類あるいはそれ以上組み合わせること
によって互いの抗菌性の弱い部分をカバーし合い、それ
ぞれの種類の非病原性軟腐病菌の抗菌性が加算されるこ
とにより、より広い抗菌スペクトルが得られることが期
待できる。本発明は、以上のような考察に基づき、軟腐
病の病原性を欠失させた非病原性エルビニア・カロトボ
ーラ細菌を２種類以上組み合わせて使用することによ
り、軟腐病をより効果的に防除することができる微生物
農薬を提供するものである。
【００１１】次に、本発明で用いられる非病原性エルビ
ニア・カロトボーラ細菌を作成する方法について述べ
る。本発明者らは、軟腐病斑のある、または、健全な野
菜類から多数のエルビニア・カロトボーラ細菌を採取し
た。非病原性エルビニア・カロトボーラ細菌は、これら
の軟腐病菌を変異処理して、その病原性を欠失させるこ
とにより作成した。変異法としては、一般的に用いられ
る変異試剤、例えば、エチルメタンスルホニル、ニトロ
ソグアニジンなどや紫外線を用いる方法（微生物学実験
法、微生物研究法懇談会編 ２８８頁−３０６頁 講談
社 １９８２年、または、微生物遺伝学実験法、石川辰
夫編 ３頁−３２頁 共立出版 １９８２年）が知られ
ており、これらに準じて処理すればよい。
ニア・カロトボーラ細菌を作成する方法について述べ
る。本発明者らは、軟腐病斑のある、または、健全な野
菜類から多数のエルビニア・カロトボーラ細菌を採取し
た。非病原性エルビニア・カロトボーラ細菌は、これら
の軟腐病菌を変異処理して、その病原性を欠失させるこ
とにより作成した。変異法としては、一般的に用いられ
る変異試剤、例えば、エチルメタンスルホニル、ニトロ
ソグアニジンなどや紫外線を用いる方法（微生物学実験
法、微生物研究法懇談会編 ２８８頁−３０６頁 講談
社 １９８２年、または、微生物遺伝学実験法、石川辰
夫編 ３頁−３２頁 共立出版 １９８２年）が知られ
ており、これらに準じて処理すればよい。
【００１２】ところで、エルビニア・カロトボーラ細菌
の病原性の発現の主たる要因は、この細菌により分泌さ
れるペクチナーゼ、特にペクチン酸リアーゼであるとさ
れている（後藤正夫著 新植物細菌病学 １６６頁 ソ
フトサイエンス社 １９８１年）。そこで、非病原性エ
ルビニア・カロトボーラ細菌のスクリーニングは、ペク
チナーゼ分泌能の低下した菌株を拾い出し、ハクサイ切
片を用いた病原性試験により行なった。病原性試験は、
ハクサイの葉切片に傷を付け、高濃度の検定菌液を塗布
し、水分存在下、２８℃の恒温槽に２４時間静置した後
にその病斑長を測定することにより行なった。
の病原性の発現の主たる要因は、この細菌により分泌さ
れるペクチナーゼ、特にペクチン酸リアーゼであるとさ
れている（後藤正夫著 新植物細菌病学 １６６頁 ソ
フトサイエンス社 １９８１年）。そこで、非病原性エ
ルビニア・カロトボーラ細菌のスクリーニングは、ペク
チナーゼ分泌能の低下した菌株を拾い出し、ハクサイ切
片を用いた病原性試験により行なった。病原性試験は、
ハクサイの葉切片に傷を付け、高濃度の検定菌液を塗布
し、水分存在下、２８℃の恒温槽に２４時間静置した後
にその病斑長を測定することにより行なった。
【００１３】このようにして得られた非病原性エルビニ
ア・カロトボーラ細菌を病原株と混合して傷を付けたハ
クサイ切片に接種したところ、非病原性エルビニア・カ
ロトボーラ細菌の中から病原株の増殖を抑制して病斑を
生じさせないか、または、病斑形成速度を大幅に低下さ
せる菌株が得られた。
ア・カロトボーラ細菌を病原株と混合して傷を付けたハ
クサイ切片に接種したところ、非病原性エルビニア・カ
ロトボーラ細菌の中から病原株の増殖を抑制して病斑を
生じさせないか、または、病斑形成速度を大幅に低下さ
せる菌株が得られた。
【００１４】これらの軟腐病防除効果の高い菌株は、以
下の如く、工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託さ
れ、以下の寄託番号が付与されている。 エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ６Ｍ１４ ＦＥＲＭ Ｐ−１０９９８ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ６Ｍ１６ ＦＥＲＭ Ｐ−１０９９９ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ１０Ｍ２ ＦＥＲＭ Ｐ−１１０００ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ１１Ｍ５ ＦＥＲＭ Ｐ−１１００１ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３ ＦＥＲＭ ＢＰ−４３２８ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＫＡＭ−２ ＦＥＲＭ Ｐ−１６２３６ 本発明は、前述のようにこれらの、あるいは、これら以
外の同様にして作成された非病原性エルビニア・カロト
ボーラ細菌の２種類以上を組み合わせて用いる軟腐病防
除用の微生物農薬である。その組み合わせを決定する際
には、併用する非病原性エルビニア・カロトボーラ細菌
間には互いへの抗菌性がないことが重要である。すなわ
ち、それぞれの種類の非病原性エルビニア・カロトボー
ラ細菌が産生するバクテリオシンが、併用する他の種類
の非病原性エルビニア・カロトボーラ細菌に対して抗菌
性を示さないことが重要である。たとえば、上記のエル
ビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ
ＣＧＥ６Ｍ１４菌株、エルビニア・カロトボーラ サ
ブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ６Ｍ１６菌株、エ
ルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボー
ラ ＣＧＥ１０Ｍ２菌株、エルビニア・カロトボーラ
サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ１１Ｍ５菌株、
エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボ
ーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌株、エルビニア・カロト
ボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＫＡＭ−２菌
株を併用する場合、これらの菌株の産生するバクテリオ
シンに対してこれらの菌株は互いに耐性であり、抗菌性
を示さず、これらのいずれを組み合わせることも可能で
ある。これらのうちの２種類の組み合わせはもちろんの
こと、３種類以上の組み合わせももちろん可能である。
また、互いに抗菌性を示さなければ、これら以外の非病
原性エルビニア・カロトボーラ細菌をさらに組み合わせ
ることも可能であり、より多数の菌株を組み合わせるこ
とにより、より広い抗菌スペクトルが得られることが期
待される。
下の如く、工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託さ
れ、以下の寄託番号が付与されている。 エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ６Ｍ１４ ＦＥＲＭ Ｐ−１０９９８ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ６Ｍ１６ ＦＥＲＭ Ｐ−１０９９９ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ１０Ｍ２ ＦＥＲＭ Ｐ−１１０００ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ１１Ｍ５ ＦＥＲＭ Ｐ−１１００１ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３ ＦＥＲＭ ＢＰ−４３２８ エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＫＡＭ−２ ＦＥＲＭ Ｐ−１６２３６ 本発明は、前述のようにこれらの、あるいは、これら以
外の同様にして作成された非病原性エルビニア・カロト
ボーラ細菌の２種類以上を組み合わせて用いる軟腐病防
除用の微生物農薬である。その組み合わせを決定する際
には、併用する非病原性エルビニア・カロトボーラ細菌
間には互いへの抗菌性がないことが重要である。すなわ
ち、それぞれの種類の非病原性エルビニア・カロトボー
ラ細菌が産生するバクテリオシンが、併用する他の種類
の非病原性エルビニア・カロトボーラ細菌に対して抗菌
性を示さないことが重要である。たとえば、上記のエル
ビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ
ＣＧＥ６Ｍ１４菌株、エルビニア・カロトボーラ サ
ブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ６Ｍ１６菌株、エ
ルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボー
ラ ＣＧＥ１０Ｍ２菌株、エルビニア・カロトボーラ
サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ１１Ｍ５菌株、
エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボ
ーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌株、エルビニア・カロト
ボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＫＡＭ−２菌
株を併用する場合、これらの菌株の産生するバクテリオ
シンに対してこれらの菌株は互いに耐性であり、抗菌性
を示さず、これらのいずれを組み合わせることも可能で
ある。これらのうちの２種類の組み合わせはもちろんの
こと、３種類以上の組み合わせももちろん可能である。
また、互いに抗菌性を示さなければ、これら以外の非病
原性エルビニア・カロトボーラ細菌をさらに組み合わせ
ることも可能であり、より多数の菌株を組み合わせるこ
とにより、より広い抗菌スペクトルが得られることが期
待される。
【００１５】上記の菌株の組み合わせのうち、エルビニ
ア・カロトボーラ サブスピーシスカロトボーラ ＣＧ
Ｅ２３４Ｍ４０３菌株とエルビニア・カロトボーラ サ
ブスピーシス カロトボーラ ＫＡＭ−２菌株を併用し
た場合、両菌株の産生するバクテリオシンに対して両菌
株は相互に完全に耐性であり、抗菌性を全く示さず、こ
の組み合わせは特に好ましい。この場合において、エル
ビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ
ＫＡＭ−２菌株は、エルビニア・カロトボーラ サブ
スピーシス カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌株
がその産生するバクテリオシンでは抗菌することができ
ない軟腐病菌に対しても抗菌性を有する新しい非病原性
軟腐病菌であり、両菌株を併用することにより両菌株の
抗菌スペクトルが加算されて拡大され、より広い抗菌ス
ペクトルが得られるため、エルビニア・カロトボーラ
サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３
菌株を単独で使用するよりも軟腐病への防除効果が改良
された微生物農薬が得られる。ここで示す非病原性軟腐
病菌であるエルビニア・カロトボーラ サブスピーシス
カロトボーラ ＫＡＭ−２は、上記のように新しい非
病原性軟腐病菌であり、その親株は、エルビニア・カロ
トボーラ サブスピーシス カロトボーラ２Ｔ−２であ
る。エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロ
トボーラ２Ｔ−２の細菌学的な性質を以下に示す。
ア・カロトボーラ サブスピーシスカロトボーラ ＣＧ
Ｅ２３４Ｍ４０３菌株とエルビニア・カロトボーラ サ
ブスピーシス カロトボーラ ＫＡＭ−２菌株を併用し
た場合、両菌株の産生するバクテリオシンに対して両菌
株は相互に完全に耐性であり、抗菌性を全く示さず、こ
の組み合わせは特に好ましい。この場合において、エル
ビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ
ＫＡＭ−２菌株は、エルビニア・カロトボーラ サブ
スピーシス カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３菌株
がその産生するバクテリオシンでは抗菌することができ
ない軟腐病菌に対しても抗菌性を有する新しい非病原性
軟腐病菌であり、両菌株を併用することにより両菌株の
抗菌スペクトルが加算されて拡大され、より広い抗菌ス
ペクトルが得られるため、エルビニア・カロトボーラ
サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ２３４Ｍ４０３
菌株を単独で使用するよりも軟腐病への防除効果が改良
された微生物農薬が得られる。ここで示す非病原性軟腐
病菌であるエルビニア・カロトボーラ サブスピーシス
カロトボーラ ＫＡＭ−２は、上記のように新しい非
病原性軟腐病菌であり、その親株は、エルビニア・カロ
トボーラ サブスピーシス カロトボーラ２Ｔ−２であ
る。エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロ
トボーラ２Ｔ−２の細菌学的な性質を以下に示す。
【００１６】
【表１】 本発明は、このエルビニア・カロトボーラ サブスピー
シス カロトボーラ２Ｔ−２菌株を変異処理して得られ
た病原性欠失株の中から軟腐病菌に対して作物上で増殖
のよい菌株としてエルビニア・カロトボーラ サブスピ
ーシス カロトボーラ ＫＡＭ−２菌株を選抜し、これ
と１種類もしくは２種類以上の非病原性エルビニア・カ
ロトボーラ細菌を混合し、軟腐病防除用の微生物農薬と
して用いるものである。この変異処理した後に得られた
エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボ
ーラ ＫＡＭ−２菌株の細菌学的な性質を以下に示す。
シス カロトボーラ２Ｔ−２菌株を変異処理して得られ
た病原性欠失株の中から軟腐病菌に対して作物上で増殖
のよい菌株としてエルビニア・カロトボーラ サブスピ
ーシス カロトボーラ ＫＡＭ−２菌株を選抜し、これ
と１種類もしくは２種類以上の非病原性エルビニア・カ
ロトボーラ細菌を混合し、軟腐病防除用の微生物農薬と
して用いるものである。この変異処理した後に得られた
エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボ
ーラ ＫＡＭ−２菌株の細菌学的な性質を以下に示す。
【００１７】
【表２】 次に、本発明の微生物農薬の製造方法を例示する。
【００１８】まず、使用される２種類以上の非病原性エ
ルビニア・カロトボーラ細菌をそれぞれ適当な培地で培
養する。ここで使用する培地は、菌が増殖するものであ
れば特に限定されるものではなく、通常使用されている
培地を使用すればよい。培養して菌を増殖させた後、遠
心分離器により遠心分離して集菌を行ない、培地成分は
取り除く。
ルビニア・カロトボーラ細菌をそれぞれ適当な培地で培
養する。ここで使用する培地は、菌が増殖するものであ
れば特に限定されるものではなく、通常使用されている
培地を使用すればよい。培養して菌を増殖させた後、遠
心分離器により遠心分離して集菌を行ない、培地成分は
取り除く。
【００１９】ついで湿菌体をアルミナ、シリカゲル、モ
レキュラーシーブ、パーライト、活性炭、砂または赤土
などの無機物やサッカロース、グルコース、フルクトー
ス、ソルビトールなどの１種類または２種類以上からな
る糖類溶液、あるいはまた、グルタミン酸ナトリウム、
リン酸ナトリウム緩衝液などからなる固定化剤中に入
れ、攪拌懸濁させ、凍結乾燥する。
レキュラーシーブ、パーライト、活性炭、砂または赤土
などの無機物やサッカロース、グルコース、フルクトー
ス、ソルビトールなどの１種類または２種類以上からな
る糖類溶液、あるいはまた、グルタミン酸ナトリウム、
リン酸ナトリウム緩衝液などからなる固定化剤中に入
れ、攪拌懸濁させ、凍結乾燥する。
【００２０】このようにして得られた乾燥菌体は、必要
に応じて希釈剤、補助剤などを添加、混合し、製剤化す
る。この際の剤型は、粉剤、粒剤、水和剤、懸濁液など
の通常使用されている剤型とすればよく、目的などに応
じて適宜選定すればよい。
に応じて希釈剤、補助剤などを添加、混合し、製剤化す
る。この際の剤型は、粉剤、粒剤、水和剤、懸濁液など
の通常使用されている剤型とすればよく、目的などに応
じて適宜選定すればよい。
【００２１】
【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態を実施
例により具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に
限定されるものではない。
例により具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に
限定されるものではない。
【００２２】
【実施例】実験例１ ２Ｔ−２菌株のバクテリオシン抗菌性及び感受性 軟腐病菌３１６菌株に対する２Ｔ−２菌株の産生するバ
クテリオシンの抗菌性を調べた。寒天培地に２Ｔ−２菌
株を爪楊枝で植菌し、１夜２８℃の恒温槽で培養した
後、紫外線を４５秒間５０ｃｍの高さから照射し、その
後４時間恒温槽に置いた。寒天プレートを逆さにし、ク
ロロホルムを２、３滴たらして殺菌した後、０．７％の
軟寒天に指示菌を混合し、寒天培地に流し込んだ。２８
℃の恒温槽で１日培養した後、２Ｔ−２菌株の廻りに指
示菌が生えていない場合に、抗菌性ありとし、生えた場
合には抗菌性なしと判定した。次に寒天培地に軟腐病菌
を植菌し、指示菌を２Ｔ−２菌株として同様の実験をお
こなった。２Ｔ−２菌株単独、２Ｔ−２菌株と２３４Ｍ
４０３菌株との混合の場合の軟腐病菌３１６株へのバク
テリオシン抗菌性及び感受性を表３に示す。参考例とし
て、２３４Ｍ４０３菌株単独の例も示す。
クテリオシンの抗菌性を調べた。寒天培地に２Ｔ−２菌
株を爪楊枝で植菌し、１夜２８℃の恒温槽で培養した
後、紫外線を４５秒間５０ｃｍの高さから照射し、その
後４時間恒温槽に置いた。寒天プレートを逆さにし、ク
ロロホルムを２、３滴たらして殺菌した後、０．７％の
軟寒天に指示菌を混合し、寒天培地に流し込んだ。２８
℃の恒温槽で１日培養した後、２Ｔ−２菌株の廻りに指
示菌が生えていない場合に、抗菌性ありとし、生えた場
合には抗菌性なしと判定した。次に寒天培地に軟腐病菌
を植菌し、指示菌を２Ｔ−２菌株として同様の実験をお
こなった。２Ｔ−２菌株単独、２Ｔ−２菌株と２３４Ｍ
４０３菌株との混合の場合の軟腐病菌３１６株へのバク
テリオシン抗菌性及び感受性を表３に示す。参考例とし
て、２３４Ｍ４０３菌株単独の例も示す。
【００２３】
【表３】 実験例２ 非病原性菌株の作出 エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボ
ーラ ２Ｔ−２菌株を８０２培地中、対数増殖中期まで
３０℃で培養した。培養液２ｍｌに最小培地２ｍｌを加
え、さらに２％のエチルメタンスルホニルを加え、８０
分間培養した。菌体を遠心分離させ、８０２培地で１回
洗浄した後、５ｍｌの新たな８０２培地を加え、１夜振
盪培養を続けた。０．１ｍｌの培養液を５ｍｌのＰＧ培
地に添加し、ペニシリンＧＫ塩（最終濃度２８０ｕ／ｍ
ｌ）と共に３０℃で６０ｈｒ培養した。希釈後、８０２
培地プレートに塗布し、１夜培養した。ついでＹＧＰプ
レートに植菌し、さらに１夜培養を続けた後、プレート
に１０％塩化カルシウム溶液を添加し、ペクチナーゼの
ハローが小さいかもしくはほとんどないコロニーを選抜
し、エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロ
トボーラ ２Ｔ−２菌株よりその変異株であるエルビニ
ア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ Ｋ
ＡＭ−２菌株が得られた。
ーラ ２Ｔ−２菌株を８０２培地中、対数増殖中期まで
３０℃で培養した。培養液２ｍｌに最小培地２ｍｌを加
え、さらに２％のエチルメタンスルホニルを加え、８０
分間培養した。菌体を遠心分離させ、８０２培地で１回
洗浄した後、５ｍｌの新たな８０２培地を加え、１夜振
盪培養を続けた。０．１ｍｌの培養液を５ｍｌのＰＧ培
地に添加し、ペニシリンＧＫ塩（最終濃度２８０ｕ／ｍ
ｌ）と共に３０℃で６０ｈｒ培養した。希釈後、８０２
培地プレートに塗布し、１夜培養した。ついでＹＧＰプ
レートに植菌し、さらに１夜培養を続けた後、プレート
に１０％塩化カルシウム溶液を添加し、ペクチナーゼの
ハローが小さいかもしくはほとんどないコロニーを選抜
し、エルビニア・カロトボーラ サブスピーシス カロ
トボーラ ２Ｔ−２菌株よりその変異株であるエルビニ
ア・カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ Ｋ
ＡＭ−２菌株が得られた。
【００２４】実施例１ ＫＡＭ−２菌株と２３４Ｍ４０３菌株間の抗菌性 実験例１と同様の方法により、ＫＡＭ−２菌株と２３４
Ｍ４０３菌株間の抗菌性及び感受性を検定した。両菌と
もに生産するバクテリオシンの互いへの抗菌性は認めら
れなかった。
Ｍ４０３菌株間の抗菌性及び感受性を検定した。両菌と
もに生産するバクテリオシンの互いへの抗菌性は認めら
れなかった。
【００２５】実施例２ ハクサイ軟腐病防除試験 ハクサイ品種は、松島交配新六号を用いた。生物防除剤
については、播種５０日目に、１０8ｃｆｕ／ｍｌの菌
懸濁液を１０アールあたり２００リッターの割合で茎葉
部に散布した。対照農薬にはジチアノン−銅剤（８００
倍希釈）を用い、生物防除剤と同量を、播種５０日及び
その前後７日の合計３回散布した。調査は、播種後８０
日目に行った。表４に結果を示す。
については、播種５０日目に、１０8ｃｆｕ／ｍｌの菌
懸濁液を１０アールあたり２００リッターの割合で茎葉
部に散布した。対照農薬にはジチアノン−銅剤（８００
倍希釈）を用い、生物防除剤と同量を、播種５０日及び
その前後７日の合計３回散布した。調査は、播種後８０
日目に行った。表４に結果を示す。
【００２６】
【表４】
【００２７】
【数１】 指数 ０：発病なし １０：外葉の下部にわずかに病徴が認められる ５０：一見して病徴が認められるが、草勢はなお盛ん
で、直ちに欠損するとは思われない ８０：病徴著しく、病勢進行してまもなく容易に欠損す
る １００：病徴によって腐敗欠損した（出荷不可能）
で、直ちに欠損するとは思われない ８０：病徴著しく、病勢進行してまもなく容易に欠損す
る １００：病徴によって腐敗欠損した（出荷不可能）
【００２８】
【数２】
【００２９】
【発明の効果】本発明により、従来防除が困難とされて
きた植物細菌病の主要な一つである軟腐病をより効果的
に防除することが可能となった。本発明では生きた細菌
を、いわゆる生物防除策として用いる方法であり、しか
も薬害がなく、安全な軟腐病防除用の微生物農薬を提供
するものである。
きた植物細菌病の主要な一つである軟腐病をより効果的
に防除することが可能となった。本発明では生きた細菌
を、いわゆる生物防除策として用いる方法であり、しか
も薬害がなく、安全な軟腐病防除用の微生物農薬を提供
するものである。
Claims (5)
- 【請求項１】軟腐病の病原性を欠失させたエルビニア・
カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラの２種類
以上の菌株を含むことを特徴とする軟腐病の防除に有効
な微生物農薬。 - 【請求項２】それぞれの菌株が産生するバクテリオシン
が互いの菌株に対して抗菌性を示さないことを特徴とす
る請求項１記載の軟腐病の防除に有効な微生物農薬。 - 【請求項３】軟腐病の病原株に対して有効な抗菌性を有
する、軟腐病の病原性を欠失させたエルビニア・カロト
ボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＫＡＭ−２菌
株。 - 【請求項４】エルビニア・カロトボーラ サブスピーシ
ス カロトボーラ ＫＡＭ−２菌株を含むことを特徴と
する請求項１または請求項２記載の軟腐病の防除に有効
な微生物農薬。 - 【請求項５】エルビニア・カロトボーラ サブスピーシ
ス カロトボーラ ＫＡＭ−２菌株およびエルビニア・
カロトボーラ サブスピーシス カロトボーラ ＣＧＥ
２３４Ｍ４０３菌株を含むことを特徴とする請求項１ま
たは請求項２記載の軟腐病の防除に有効な微生物農薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9139518A JPH10327849A (ja) | 1997-05-29 | 1997-05-29 | 軟腐病の防除に有効な微生物農薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9139518A JPH10327849A (ja) | 1997-05-29 | 1997-05-29 | 軟腐病の防除に有効な微生物農薬 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10327849A true JPH10327849A (ja) | 1998-12-15 |
Family
ID=15247168
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9139518A Pending JPH10327849A (ja) | 1997-05-29 | 1997-05-29 | 軟腐病の防除に有効な微生物農薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10327849A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101006084B1 (ko) | 2008-09-22 | 2011-01-07 | 대한민국 | 카로신 ｄ 및 이를 생산하여 분비하는 펙토박테리움 카로토보룸 ｐｃｃ２１-ｍ１５ |
| JP2012232959A (ja) * | 2011-05-09 | 2012-11-29 | Central Glass Co Ltd | アブラナ科植物病害の防除剤及び防除方法 |
-
1997
- 1997-05-29 JP JP9139518A patent/JPH10327849A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101006084B1 (ko) | 2008-09-22 | 2011-01-07 | 대한민국 | 카로신 ｄ 및 이를 생산하여 분비하는 펙토박테리움 카로토보룸 ｐｃｃ２１-ｍ１５ |
| JP2012232959A (ja) * | 2011-05-09 | 2012-11-29 | Central Glass Co Ltd | アブラナ科植物病害の防除剤及び防除方法 |
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