JPH10237105A - Polysaccharide, its production, and cosmetic formulated therewith - Google Patents

Polysaccharide, its production, and cosmetic formulated therewith

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JPH10237105A
JPH10237105A JP9037368A JP3736897A JPH10237105A JP H10237105 A JPH10237105 A JP H10237105A JP 9037368 A JP9037368 A JP 9037368A JP 3736897 A JP3736897 A JP 3736897A JP H10237105 A JPH10237105 A JP H10237105A
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JP
Japan
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polysaccharide
acid
enterobacter
producing
component
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Pending
Application number
JP9037368A
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Japanese (ja)
Inventor
Chinatsu Hayashi
千夏 林
Kazuko Mizuno
和子 水野
Takatoshi Nomura
恭稔 野村
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NAKANIHON SENI KOGYO KYODO KUM
NAKANIHON SENI KOGYO KYODO KUMIAI
Original Assignee
NAKANIHON SENI KOGYO KYODO KUM
NAKANIHON SENI KOGYO KYODO KUMIAI
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Filing date
Publication date
Application filed by NAKANIHON SENI KOGYO KYODO KUM, NAKANIHON SENI KOGYO KYODO KUMIAI filed Critical NAKANIHON SENI KOGYO KYODO KUM
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Publication of JPH10237105A publication Critical patent/JPH10237105A/en
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain a polysaccharide having functions of low greasiness, water absorption, moisture absorption, moisture retention, thickening and emulsion stability, and a water absorption agent, moisture absorption agent, moisture retention agent, thickening agent and emulsion stabilizer that contains this polysaccharide, and a cosmetic, to which the polysaccharide is formulated. SOLUTION: This polysaccharide is constituted with D-glucose, L-fucose, D-galactose, D-mannose and D-glucuronic acid and has an average molecular weight of 12,000,000 (in pullulan equivalent) according to the gel-filtration chromatography using acetic acid, pyruvic acid and succinic acid as constitution acids. The molar ratios of the constitution polysaccharides is D-glucose/L-fucose/ D-galactose/D-mannose/D-glucuronic acid = (22-28)/(49-55)/(33-39)/1/(4-5), while the molar ratio of the constitution acids is acetic acid/pyruvic acid/succinic acid = (20-27)/(11-16):1.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は新規な多糖類及びそ
の製造方法に関する。更に詳しくは、多糖類生産菌株、
この多糖類を成分とした吸水、吸湿、保湿、増粘、乳化
安定剤及びこれを配合した化粧品に関するものである。
TECHNICAL FIELD The present invention relates to a novel polysaccharide and a method for producing the same. More specifically, polysaccharide-producing strains,
The present invention relates to a water absorption, moisture absorption, moisture retention, thickening, emulsion stabilizer containing the polysaccharide as a component and cosmetics containing the same.

【0002】[0002]

【従来の技術】消費者の自然派ブームに乗って、さまざ
まな動物や植物成分を配合した化粧品が売り出されるよ
うになった。その化粧品原料の重要な位置を占めている
のが保湿剤である。天然保湿剤にはアロエエキスなどの
ような植物由来の成分やコラーゲン加水分解物のような
動物由来の成分等が知られている。また以前より、ヒア
ルロン酸という多糖の一種が優れた保湿剤として高級化
粧品に配合されていたが、従来の鶏のトサカから抽出す
る方法以外に微生物の一種である乳酸菌を用いて生産す
る方法が確立され(特開昭64ー67196、特開平2ー103204、
特開平2ー103203、特開平2ー58502等)、化粧品原料とし
て多く利用されるようになってきた。微生物は植物や動
物に比較して増殖及び生産能力に優れ、また近年のバイ
オテクノロジーの進歩により、家畜と同様に人間により
管理できるようになった。例えば、ヒアルロン酸も微生
物による生産方法が発見されたことにより、化粧品原料
としての需要も増加した。
2. Description of the Related Art Along with the natural boom of consumers, cosmetics containing various animal and plant ingredients have been put on the market. Moisturizers occupy an important place in the cosmetic ingredients. Known natural moisturizers include plant-derived components such as aloe extract and animal-derived components such as collagen hydrolysates. In addition, a type of polysaccharide called hyaluronic acid has been used in high-end cosmetics as an excellent moisturizing agent, but a method has been established that uses lactic acid bacteria, a type of microorganism, in addition to the conventional method of extracting from chicken tosaka. (JP-A-64-67196, JP-A-2-103204,
JP-A-2-103203, JP-A-2-58502, etc.) and have been increasingly used as cosmetic raw materials. Microorganisms have better growth and production capabilities than plants and animals, and recent advances in biotechnology have made it possible for humans to manage them, as well as livestock. For example, the discovery of a method for producing hyaluronic acid by microorganisms has also increased demand for cosmetic raw materials.

【0003】[0003]

【発明が解決しようとする課題】しかし、上記植物や動
物に由来した保湿剤は色や臭いのために化粧品に多く配
合できず、そのような配合濃度では化粧品に十分な保湿
効果を付与することは期待できなかった。また従来の微
生物のつくる多くの天然成分はその存在もその効果も未
知であるものが多く、従って化粧品製造者が利用可能な
優れた保湿剤を得るための天然成分の選択幅が狭い問題
点があった。
However, the above moisturizers derived from plants and animals cannot be added to cosmetics in large quantities due to their color and odor, and such moisturizers impart sufficient moisturizing effect to cosmetics. Could not be expected. In addition, many natural ingredients produced by conventional microorganisms are unknown in their existence and their effects, and therefore, there is a problem that the choice of natural ingredients for obtaining an excellent humectant that can be used by cosmetic manufacturers is narrow. there were.

【0004】本発明の目的は、べたつき感の少ない多糖
類及びその製造方法を提供することにある。本発明の別
の目的は、べたつき感の少ない多糖類を成分とした吸
水、吸湿、保湿、増粘、乳化安定剤及びこれを配合した
化粧品を提供することにある。
An object of the present invention is to provide a polysaccharide having a low stickiness and a method for producing the same. Another object of the present invention is to provide a water-absorbing, moisture-absorbing, moisturizing, thickening, emulsifying stabilizer containing a polysaccharide having a low stickiness as a component, and a cosmetic product containing the same.

【0005】[0005]

【課題を解決するための手段】請求項1に係る発明は、
D−グルコース、L−フコース、D−ガラクトース、D
−マンノース及びD−グルクロン酸を構成糖とし、酢
酸、ピルビン酸及びコハク酸を構成有機酸とし、ゲル濾
過クロマトグラフィーで測定した平均分子量が1200
万(プルラン等量)である多糖類である。この多糖類
は、吸水、吸湿、保湿、増粘、乳化安定効果を有し、べ
たつき感が少ない特徴がある。
The invention according to claim 1 is
D-glucose, L-fucose, D-galactose, D
-Mannose and D-glucuronic acid as constituent sugars, acetic acid, pyruvic acid and succinic acid as constituent organic acids, having an average molecular weight of 1200 as measured by gel filtration chromatography.
It is a polysaccharide of 10,000 (equivalent to pullulan). This polysaccharide has water absorbing, moisture absorbing, moisturizing, thickening, emulsifying and stabilizing effects, and is characterized by a low sticky feeling.

【0006】請求項2に係る発明は、請求項1に係る発
明であって、多糖類を構成する糖のモル比が、D−グル
コース:L−フコース:D−ガラクトース:D−マンノ
ース:D−グルクロン酸=(22〜28):(49〜5
5):(33〜39):1:(4〜5)であり、多糖類
を構成する有機酸のモル比が、酢酸:ピルビン酸:コハ
ク酸=(20〜27):(11〜16):1である多糖
類である。
The invention according to claim 2 is the invention according to claim 1, wherein the molar ratio of sugars constituting the polysaccharide is D-glucose: L-fucose: D-galactose: D-mannose: D- Glucuronic acid = (22-28): (49-5
5) :( 33-39): 1: (4-5), and the molar ratio of the organic acids constituting the polysaccharide is acetic acid: pyruvic acid: succinic acid = (20-27) :( 11-16) : 1 is a polysaccharide.

【0007】請求項3に係る発明は、エンテロバクター
属に属しかつ請求項1又は2記載のの多糖類を菌体外に
生産する微生物を培養し、その培養液から上記多糖類を
採取することを特徴とする多糖類の製造方法である。こ
の微生物は、発明者らが自然界より広範囲にわたって微
生物の分離を試みた結果得られたもので、請求項1又は
2記載の多糖類を生産し得る。
According to a third aspect of the present invention, there is provided a method of culturing a microorganism belonging to the genus Enterobacter and producing the polysaccharide according to the first or second aspect outside the cells, and collecting the polysaccharide from the culture solution. And a method for producing a polysaccharide. This microorganism is obtained as a result of the inventors trying to isolate the microorganism over a wider range than in nature, and can produce the polysaccharide according to claim 1 or 2.

【0008】請求項4に係る発明は、請求項3に係る多
糖類の製造方法であって、塩化ナトリウムを1〜2%含
有する培地で微生物を培養することを特徴とする多糖類
の製造方法である。これは培地の塩濃度を通常の約0.
5%より高く設定することにより、塩濃度が微生物の生
育環境を悪化させ、微生物は塩による浸透圧から自らを
保護するために、細胞の外に多糖類を多く生産すること
による。
According to a fourth aspect of the present invention, there is provided the method for producing a polysaccharide according to the third aspect, wherein the microorganism is cultured in a medium containing 1 to 2% of sodium chloride. It is. This means that the salt concentration of the medium is usually about 0.
By setting it higher than 5%, the salt concentration degrades the growth environment of the microorganism, and the microorganism produces a large amount of polysaccharide outside the cell to protect itself from osmotic pressure caused by salt.

【0009】請求項5に係る発明は、請求項3又は4に
係る発明であって、新規な多糖類を生産する微生物の属
種がエンテロバクター・クロアシエである多糖類の製造
方法である。請求項6に係る発明は、請求項5に係る発
明であって、その微生物の株名がエンテロバクター・ク
ロアシエ ECP126株又はその変異株である多糖類
の製造方法である。
The invention according to claim 5 is the invention according to claim 3 or 4, which is a method for producing a polysaccharide in which the genus of the microorganism producing the novel polysaccharide is Enterobacter cloasi. The invention according to claim 6 is the invention according to claim 5, which is a method for producing a polysaccharide, wherein the strain name of the microorganism is Enterobacter cloasie ECP126 strain or a mutant strain thereof.

【0010】請求項7に係る発明は、エンテロバクター
・クロアシエ ECP126株又はその変異株である。
請求項8に係る発明は、請求項2記載の多糖類を成分と
する吸水剤である。請求項9に係る発明は、請求項2記
載の多糖類を成分とする吸湿剤である。請求項10に係
る発明は、請求項2記載の多糖類を成分とする保湿剤で
ある。請求項11に係る発明は、請求項2記載の多糖類
を成分とする増粘剤である。請求項12に係る発明は、
請求項2記載の多糖類を成分とする乳化安定剤である。
請求項13に係る発明は、請求項8記載の吸水剤、請求
項9記載の吸湿剤、請求項10記載の保湿剤、請求項1
1記載の増粘剤又は請求項12記載の乳化安定剤を配合
した化粧品である。
[0010] The invention according to claim 7 is the Enterobacter cloasi ECP126 strain or a mutant strain thereof.
The invention according to claim 8 is a water absorbing agent comprising the polysaccharide according to claim 2 as a component. The invention according to claim 9 is a hygroscopic agent containing the polysaccharide according to claim 2 as a component. The invention according to claim 10 is a humectant comprising the polysaccharide according to claim 2 as a component. The invention according to claim 11 is a thickener comprising the polysaccharide according to claim 2 as a component. The invention according to claim 12 is
An emulsion stabilizer comprising the polysaccharide according to claim 2 as a component.
The invention according to claim 13 is the water absorbing agent according to claim 8, the moisture absorbing agent according to claim 9, the humectant according to claim 10, and the claim 1.
A cosmetic comprising the thickener according to claim 1 or the emulsion stabilizer according to claim 12.

【0011】[0011]

【発明の実施の形態】本発明の多糖類は、構成糖のモル
比が、D−グルコース:L−フコース:D−ガラクトー
ス:D−マンノース:D−グルクロン酸=(22〜2
8):(49〜55):(33〜39):1:(4〜
5)であり、構成有機酸のモル比が、酢酸:ピルビン
酸:コハク酸=(20〜27):(11〜16):1
で、ゲル濾過クロマトグラフィーで測定した平均分子量
が1200万(プルラン等量)であることが好ましい。
構成糖の定性には薄層クロマトグラフィー又は高速液体
クロマトグラフィーを用いることができる。この構成糖
の定性分析は、多糖類を2Nの硫酸で105℃、2時間
撹拌するか、又は72%の硫酸で室温、1時間撹拌した
後、4%の硫酸で、121℃、1時間酸分解し、これを
中和、脱塩、濾過したものを検体とし、中性糖、ウロン
酸及びアミノ糖を標品として行う。また構成糖の定量分
析には高速液体クロマトグラフィーを用いることができ
る。具体的には定性の場合と同様に酸分解を行い、標品
との比較によって行う。構成有機酸の定性定量には高速
液体クロマトグラフィー又は酵素法を用いることができ
る。具体的には、多糖類を1Nの塩酸で3時間酸加水分
解したのものを検体とし、各種標品との比較によって行
う。
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION The polysaccharide of the present invention has a molar ratio of constituent sugars of D-glucose: L-fucose: D-galactose: D-mannose: D-glucuronic acid = (22 to 2).
8): (49-55): (33-39): 1: (4-
5) wherein the molar ratio of the constituent organic acids is acetic acid: pyruvic acid: succinic acid = (20-27) :( 11-16): 1
The average molecular weight measured by gel filtration chromatography is preferably 12,000,000 (equivalent to pullulan).
Thin layer chromatography or high performance liquid chromatography can be used for the qualification of the constituent sugars. The qualitative analysis of the constituent sugars was carried out by stirring the polysaccharide with 2N sulfuric acid at 105 ° C. for 2 hours, or with 72% sulfuric acid at room temperature for 1 hour and then with 4% sulfuric acid at 121 ° C. for 1 hour. It is decomposed, neutralized, desalted, and filtered, and used as a sample, and neutral sugar, uronic acid and amino sugar are used as samples. High-performance liquid chromatography can be used for quantitative analysis of constituent sugars. Specifically, acid decomposition is performed in the same manner as in the case of qualitative analysis, and comparison is performed with a sample. For the qualitative determination of the constituent organic acids, high performance liquid chromatography or an enzymatic method can be used. Specifically, a sample obtained by subjecting a polysaccharide to acid hydrolysis with 1N hydrochloric acid for 3 hours is used as a sample, and comparison is performed with various standards.

【0012】本発明の分子量の測定は、ゲル濾過クロマ
トグラフィー法を用いることができる。具体的には昭和
電工製『Ionpac KS-806』をカラムとする高速液体クロ
マトグラフィー(日本分光社製)を使用し、0.5Mト
リス−酢酸(pH7.5)溶液を移動層とし、分子量既
知のプルラン(Shodex STANDARD P-82 昭和電工製)を
標準サンプルとして作成した分子量−保持時間標準曲線
を使用して測定することができる。
The molecular weight of the present invention can be measured by gel filtration chromatography. Specifically, a high-performance liquid chromatography (manufactured by JASCO Corporation) using "Ionpac KS-806" manufactured by Showa Denko as a column was used, and a 0.5M Tris-acetic acid (pH 7.5) solution was used as a moving bed, and the molecular weight was known. (Shodex STANDARD P-82 manufactured by Showa Denko KK) as a standard sample.

【0013】本発明の多糖類は次のような物性を有して
いる。 (1)性状:白色粉末 (2)溶解性:水、希酸、希アルカリ、DMSO(ジメ
チルスルホキシド)に対して可溶、メタノールやエタノ
ール等のアルコール、アセトン、酢酸エチル等には不溶
性である。
The polysaccharide of the present invention has the following physical properties. (1) Properties: white powder (2) Solubility: soluble in water, dilute acid, dilute alkali, DMSO (dimethyl sulfoxide), insoluble in alcohols such as methanol and ethanol, acetone, ethyl acetate and the like.

【0014】(3)紫外線吸収スペクトル:タンパク質
に特有な280nm及び核酸に特有な260nmに吸収
は認められない。
(3) Ultraviolet absorption spectrum: No absorption is observed at 280 nm, which is unique to proteins, and 260 nm, which is unique to nucleic acids.

【0015】(4)赤外線吸収スペクトル:図1に示す
ように、3400cmー1付近に炭水化物由来の水酸基の
吸収が、また2950cmー1付近には炭水化物由来のC
H、CH2の吸収が、更に1730cmー1及び1620
cmー1付近にウロン酸特有の吸収がそれぞれ認められ
る。
[0015] (4) Infrared absorption spectrum: as shown in Figure 1, the absorption of hydroxyl groups derived from carbohydrates in the vicinity of 3400cm-1 is also in the vicinity of 2950cm-1 carbohydrate-derived C
The absorption of H and CH 2 was further increased to 1730 cm −1 and 1620
The absorption peculiar to uronic acid is observed around cm -1 .

【0016】(5)呈色反応 フェノール硫酸法 : 陽性 m−フェニルフェノール法: 微陽性 エルソン−モルガン法: 陰性 フェノール硫酸法が陽性であることから糖の存在が、ま
たm−フェニルフェノール法が微陽性であることから僅
かにウロン酸の存在がそれぞれ認められる。またエルソ
ン−モルガン法が陰性であることからヘキソサミンが含
まれていないと判断できる。これはアミノ糖が含まれて
いないことを意味している。また塩の存在下において第
4級アンモニウム塩により沈殿を生じることからも、本
発明の多糖類はウロン酸を含む酸性多糖であると認めら
れる。
(5) Color reaction Phenol-sulfuric acid method: Positive m-Phenylphenol method: Slightly positive Elson-Morgan method: Negative Positive phenol-sulfuric acid method indicates presence of sugar, and m-phenylphenol method indicates slight The presence of uronic acid is slightly recognized from the positive results. Further, since the Elson-Morgan method is negative, it can be determined that hexosamine is not contained. This means that no amino sugar is contained. In addition, since the quaternary ammonium salt precipitates in the presence of the salt, it is recognized that the polysaccharide of the present invention is an acidic polysaccharide containing uronic acid.

【0017】(6)構成糖:本発明の多糖類を72%の
硫酸中で撹拌し抽出した後、4%の硫酸で121℃、1
時間酸加水分解し、中和、脱塩、濾過したものを試料と
して高速液体クロマトグラフ法により構成糖の定性分析
を行った。その結果、D−グルコース、L−フコース、
D−ガラクトース、D−マンノース及びD−グルクロン
酸によって得られる化合物と同一の化合物が検出され
た。また上記と同じ条件下で酸加水分解を行い、高速液
体クロマトグラフ法により構成糖の定量分析を行った。
これらの結果より、本発明の多糖類はD−グルコース、
L−フコース、D−ガラクトース、D−マンノース及び
D−グルクロン酸よりなり、その構成モル比は、D−グ
ルコース:L−フコース:D−ガラクトース:D−マン
ノース:D−グルクロン酸=(22〜28):(49〜
55):(33〜39):1:(4〜5)であることが
認められた。
(6) Constituent sugar: The polysaccharide of the present invention is stirred and extracted in 72% sulfuric acid, and then extracted with 4% sulfuric acid at 121 ° C. and 1 ° C.
The resulting sugars were subjected to acid hydrolysis for a period of time, neutralized, desalted, and filtered, and qualitative analysis of constituent sugars was performed by high performance liquid chromatography. As a result, D-glucose, L-fucose,
Compounds identical to those obtained with D-galactose, D-mannose and D-glucuronic acid were detected. Further, acid hydrolysis was performed under the same conditions as described above, and quantitative analysis of constituent sugars was performed by high performance liquid chromatography.
From these results, the polysaccharide of the present invention is D-glucose,
It consists of L-fucose, D-galactose, D-mannose and D-glucuronic acid, and the constituent molar ratio is D-glucose: L-fucose: D-galactose: D-mannose: D-glucuronic acid = (22 to 28) ): (49-
55) :( 33-39): 1: (4-5).

【0018】(7)構成有機酸:本発明の多糖類を1N
の塩酸で3時間加熱し、酸加水分解したものを試料とし
てクエン酸、コハク酸、酢酸を高速液体クロマトグラフ
法で、ピルビン酸を酵素法で定性定量分析を行った。そ
の結果、酢酸:ピルビン酸:コハク酸の3種類の有機酸
が検出され、その構成モル比は、酢酸:ピルビン酸:コ
ハク酸=(20〜27):(11〜16):1であるこ
とが認められた。
(7) Constituent organic acid: 1N polysaccharide of the present invention
The mixture was heated with hydrochloric acid for 3 hours and subjected to acid hydrolysis, and citric acid, succinic acid, and acetic acid were subjected to qualitative and quantitative analysis by high performance liquid chromatography and pyruvic acid by enzymatic method as a sample. As a result, three kinds of organic acids of acetic acid: pyruvic acid: succinic acid were detected, and their constituent molar ratios were acetic acid: pyruvic acid: succinic acid = (20-27) :( 11-16): 1. Was observed.

【0019】(8)分子量:昭和電工製『Ionpac KS-80
6』をカラムとする高速液体クロマトグラフィー(日本
分光社製)を使用し、0.5Mトリス−酢酸(pH7.
5)溶液を移動層とし、分子量既知のプルランを標準サ
ンプルとして作成した分子量−保持時間標準曲線を使用
して測定した結果、平均分子量は1200万(プルラン
等量)と非常に高分子量の多糖類であることが認められ
た。
(8) Molecular weight: Ionpac KS-80 manufactured by Showa Denko
High-performance liquid chromatography (manufactured by JASCO Corporation) using 0.5 M Tris-acetic acid (pH 7.
5) As a result of measurement using a molecular weight-retention time standard curve prepared by using a solution as a moving bed and using pullulan of a known molecular weight as a standard sample, the average molecular weight was 12 million (equivalent to pullulan) and was a very high molecular weight polysaccharide. Was found.

【0020】本発明の多糖類の製造方法について説明す
る。本発明の製造方法はエンテロバクター属に属し、平
均分子量が1200万(プルラン等量)であるD−グル
コース、L−フコース、D−ガラクトース、D−マンノ
ース及びD−グルクロン酸、並びに酢酸、ピルビン酸、
コハク酸からなる多糖類を生産する微生物を用いて培養
を行い、その培養物から平均分子量が1200万(プル
ラン等量)であるD−グルコース、L−フコース、D−
ガラクトース、D−マンノース及びD−グルクロン酸、
並びに酢酸、ピルビン酸及びコハク酸からなる多糖類を
抽出することを特徴としている。本発明の製造方法にお
ける好ましい微生物として、エンテロバクター・クロア
シエが使用され、更に好ましくはエンテロバクター・ク
ロアシエECP126株が使用される。
The method for producing the polysaccharide of the present invention will be described. The production method of the present invention belongs to the genus Enterobacter and has an average molecular weight of 12,000,000 (equivalent to pullulan), D-glucose, L-fucose, D-galactose, D-mannose and D-glucuronic acid, and acetic acid and pyruvic acid. ,
Culture is performed using a microorganism that produces a polysaccharide composed of succinic acid, and D-glucose, L-fucose, and D-glucose having an average molecular weight of 12 million (equivalent to pullulan) are obtained from the culture.
Galactose, D-mannose and D-glucuronic acid,
And extracting a polysaccharide consisting of acetic acid, pyruvic acid and succinic acid. As a preferable microorganism in the production method of the present invention, Enterobacter cloasier is used, and more preferably, Enterobacter cloasiea ECP126 strain is used.

【0021】エンテロバクター・クロアシエECP12
6株は本発明の多糖類を生産する能力があり、茨城県つ
くば市の土壌より、本発明者らによって純粋分離された
ものである。次にこの菌株菌学的性質について述べる。
Enterobacter cloasier ECP12
Six strains have the ability to produce the polysaccharide of the present invention and have been purely isolated by the present inventors from soil in Tsukuba City, Ibaraki Prefecture. Next, the bacteriological properties of this strain will be described.

【0022】 A.形態的性質 1)細胞の形、大きさ 0.60〜1.0μm×1.2〜3.0μmの桿菌 2)運動性 有り 3)胞子 形成されない 4)グラム染色 陰性 B.生理的性質 1)硝酸塩の還元 + 2)脱窒反応 + 3)MRテスト − 4)VPテスト + 5)インドールの生成 − 6)硫化水素の生成 − 7)デンプンの加水分解 − 8)クエン酸の利用 + 9)蛍光色素の生成 − 10)オキシダーゼ − 11)カタラーゼ + 12)ウレアーゼ − 13)Glucoseからのガス生成 + 14)3%NaClでの生育 + 15)42℃での生育 + 16)フェニルアラニンデアミナーゼ − 17)OFテスト F 18)リジンデカルボキシラーゼ − 19)ゼラチンの液化 − 20)Tween 80の加水分解 − 21)エクスリンの加水分解 + 22)アルギニンデハイドラーゼ + 23)オルニチンデカルボキシラーゼ + 24)糖類からの酸の生成 L−アラビノース + D−アラビノース − D−キシロース + フルクトース + マンノース + D−マンニトール + グルコース + D−ソルビトール + ラクトース + イヌリン − マルトース + デキストリン + シュークロース + ガラクトース + ラフィノース + 以上の菌学的性質から『バージーズ・マニュアル・オブ
・システマティック・バクテリオロジー第1版(BERGEY,
S MANUAL of Systematic Bacteriology Volume1)』よ
り、エンテロバクター・クロアシエと菌学的性質が一致
し、この菌株はエンテロバクター・クロアシエに属する
と見なされた。従って本菌株をエンテロバクター・クロ
アシエ ECP126株と命名し、通産省工業技術院生
命工学工業技術研究所に寄託した。この研究所におい
て、受託番号「FERM P−16035」で受託され
ている。なおこの変異株は紫外線、X線などの放射線又
はN−メチル−N’−ニトロ−N−ニトロソグアジニン
やエチルメタンスルホン酸等の化学的突然変異誘発物質
による誘発方法により、発生させることができる。
A. Morphological properties 1) Shape and size of cells, bacilli 0.60-1.0 μm × 1.2-3.0 μm 2) Motility present 3) No spores formed 4) Gram stain negative B. Physiological properties 1) Reduction of nitrate + 2) Denitrification reaction + 3) MR test-4) VP test + 5) Formation of indole-6) Formation of hydrogen sulfide-7) Starch hydrolysis-8) Citric acid Utilization + 9) Production of fluorescent dye -10) Oxidase -11) Catalase + 12) Urease -13) Gas production from Glucose + 14) Growth in 3% NaCl + 15) Growth at 42 ° C + 16) Phenylalanine deaminase -17) OF test F 18) Lysine decarboxylase-19) Liquefaction of gelatin-20) Hydrolysis of Tween 80-21) Hydrolysis of exulin + 22) Arginine dehydrase + 23) Ornithine decarboxylase + 24) From saccharides L-arabinose + D-arabinose-D-xylose + fructose + man Sourse + D-mannitol + glucose + D-sorbitol + lactose + inulin-maltose + dextrin + sucrose + galactose + raffinose + BERGEY ,
S MANUAL of Systematic Bacteriology Volume 1) ”, the mycological properties were consistent with those of Enterobacter cloasis, and this strain was considered to belong to Enterobacter cloasis. Therefore, this strain was named Enterobacter cloasier ECP126 strain and deposited with the Institute of Biotechnology and Industrial Technology, Ministry of International Trade and Industry. In this institute, it has been deposited under the accession number "FERM P-16035". This mutant can be generated by irradiation with ultraviolet rays, X-rays or the like, or by a chemical mutagen such as N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine or ethyl methanesulfonic acid. .

【0023】本発明の製造方法において、前記微生物を
培養するための培地としては、エンテロバクター属に属
する微生物が生育でき、本発明の多糖類を生産する炭素
源、窒素源、無機塩類及び微量元素を適量含有するもの
であれば特に制限されない。炭素源としては、グルコー
ス、フラクトース、ガラクトース、シュークロース等の
糖やマンニトールなどの糖アルコール或は糖蜜や廃糖蜜
が利用される。またグリセロールやグルコン酸、コハク
酸、クエン酸などの有機酸を補助炭素源として用いても
生産効果が向上する。窒素源としては硝酸塩、アンモニ
ウム塩等の化合物やペプトンやトリプトン、酵母エキ
ス、コーンスティープリカー、アミノ酸などの天然物が
利用される。無機塩類としては、例えばリン酸塩、マグ
ネシウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、硫酸塩等が挙
げられ、無機塩培地はこれらを組み合わせて用いる。特
に、塩化ナトリウム濃度を1〜2%とすることにより、
多糖類の生産は著しく向上する。固体培地の場合は寒天
を用いる。
In the production method of the present invention, as a medium for culturing the microorganism, a carbon source, a nitrogen source, an inorganic salt and a trace element capable of growing a microorganism belonging to the genus Enterobacter and producing the polysaccharide of the present invention. Is not particularly limited as long as it contains an appropriate amount of As the carbon source, sugars such as glucose, fructose, galactose and sucrose, sugar alcohols such as mannitol, molasses and molasses are used. The production effect is also improved by using an organic acid such as glycerol, gluconic acid, succinic acid or citric acid as an auxiliary carbon source. As the nitrogen source, compounds such as nitrates and ammonium salts, and natural products such as peptone, tryptone, yeast extract, corn steep liquor, and amino acids are used. Examples of the inorganic salts include phosphates, magnesium salts, potassium salts, calcium salts, sulfates, and the like, and the inorganic salt medium is used in combination. In particular, by setting the sodium chloride concentration to 1 to 2%,
Polysaccharide production is significantly improved. In the case of a solid medium, use agar.

【0024】本発明の多糖類を多く生産させるために
は、通気を良好にする必要があり、従って振とう培養或
は通気撹拌培養が好ましい。培養時のpHは微生物が生
育し、かつ多糖類を生産する範囲であれば制限されない
が、中性から弱酸性の方が生産性は向上するため、通常
は5から8の範囲のpHが好ましい。培養温度について
は微生物が生育し、かつ多糖類を生産する範囲であれば
制限されないが、25℃から30℃の範囲が多糖類の生
産には良好である。培養期間は培養のpHや温度により
変化するが、通常2日から7日が適切である。
In order to produce a large amount of the polysaccharide of the present invention, it is necessary to improve the aeration. Therefore, shaking culture or aeration-agitation culture is preferable. The pH at the time of culturing is not limited as long as the microorganism grows and produces polysaccharides. However, the pH is preferably in the range of 5 to 8 because the productivity is improved when neutral to weakly acidic. . The culture temperature is not limited as long as the microorganism grows and produces a polysaccharide, but the range of 25 ° C. to 30 ° C. is favorable for the production of the polysaccharide. The cultivation period varies depending on the pH and temperature of the cultivation, but usually 2 to 7 days is appropriate.

【0025】上記製造方法で得られた培養液から本発明
の多糖類を抽出する方法としては、従来より公知の方法
を用いることができる。例えば、培養液をそのまま、或
は高温で殺菌した後で、遠心分離により菌体を除去し、
これをそのまま、或は濃縮してから、2〜3倍量のエタ
ノール、イソプロパノール、或はアセトン等を加え、沈
殿を生じさせる。この沈殿物を再度、水或は1〜15%
塩化ナトリウム溶液に溶解させた後で、アルコール等に
よる沈殿を何度も繰り返すか、水で透析を行い、噴霧乾
燥機や凍結乾燥機等を用いて乾燥させることにより、本
発明の多糖類を得る。これ以外にも限外濾過法も利用す
ることができる。更に精製するためには、イオン交換、
ゲル濾過等の各種クロマトグラフィーや4級アンモニウ
ム塩による沈殿や塩析などを用いることができる。
As a method for extracting the polysaccharide of the present invention from the culture solution obtained by the above production method, a conventionally known method can be used. For example, as it is, or after sterilizing at a high temperature, the cells are removed by centrifugation,
This is concentrated as it is or after adding a 2-3 times amount of ethanol, isopropanol, acetone or the like to cause precipitation. This precipitate is reconstituted with water or 1-15%
After dissolving in a sodium chloride solution, precipitation with alcohol or the like is repeated many times, or dialysis is performed with water, and the polysaccharide of the present invention is obtained by drying using a spray drier or a freeze drier. . Besides this, an ultrafiltration method can also be used. For further purification, ion exchange,
Various types of chromatography such as gel filtration, precipitation with quaternary ammonium salts, salting out, and the like can be used.

【0026】本発明の多糖類は、吸水、吸湿、保湿、増
粘、乳化安定などの性能を有しており、化粧品をはじ
め、さまざまな産業分野で利用可能である。特に平均分
子量は約1200万(プルラン等量)と大きく、このこ
とがべたつかない、さっぱりとした触感を呈するものと
考えられる。
The polysaccharide of the present invention has properties such as water absorption, moisture absorption, moisture retention, thickening, and emulsion stability, and can be used in various industrial fields including cosmetics. In particular, the average molecular weight is as large as about 12 million (equivalent to pullulan), which is considered to give a non-sticky and refreshing feel.

【0027】本発明の化粧品は、液体、ゲル状、クリー
ム状などいろいろな形態を有する。この化粧品には本発
明の多糖類が吸水、吸湿、保湿、増粘、乳化安定などの
目的で用いられていることが必要である。例示すれば、
石鹸、洗顔料、ボディーソープ、クレンジング、化粧
水、乳液、ボディーローション、クリーム、ハンドクリ
ーム、美容液、化粧液、パック等の皮膚用化粧品、ファ
ンデーション、口紅等のその他の化粧品、シャンプー、
リンス、トリートメント、ヘアクリーム、ヘアーローシ
ョン等の毛髪用化粧品等が挙げられる。ただし、アルコ
ール濃度が50%より高い場合は多糖類が沈殿するた
め、その濃度以下で用いることが必要である。 本発明
の化粧品には、本発明の多糖類以外にも、通常の化粧品
で用いられている化粧基材を多糖類の機能を損なわない
範囲で配合することが可能である。このような化粧基材
としては油剤、ゲル剤、界面活性剤、低級アルコール、
多価アルコール、香料、色素、顔料、酸化防止剤、紫外
線散乱剤、保湿剤、天然エキス、精製水、美容成分等が
あげられる。
The cosmetic of the present invention has various forms such as liquid, gel, cream and the like. In the cosmetics, it is necessary that the polysaccharide of the present invention is used for the purpose of water absorption, moisture absorption, moisture retention, thickening, emulsion stability and the like. For example,
Other cosmetics such as soap, facial cleanser, body soap, cleansing, lotion, milky lotion, body lotion, cream, hand cream, serum, cosmetic liquid, packs, and other cosmetics such as foundation, lipstick, shampoo,
Cosmetics for hair such as rinse, treatment, hair cream, hair lotion and the like can be mentioned. However, if the alcohol concentration is higher than 50%, the polysaccharide precipitates, so it is necessary to use the alcohol at a concentration lower than that. In addition to the polysaccharide of the present invention, a cosmetic base material used in ordinary cosmetics can be added to the cosmetic of the present invention as long as the function of the polysaccharide is not impaired. Such cosmetic bases include oils, gels, surfactants, lower alcohols,
Examples include polyhydric alcohols, fragrances, pigments, pigments, antioxidants, ultraviolet scattering agents, humectants, natural extracts, purified water, cosmetic ingredients, and the like.

【0028】[0028]

【実施例】次に本発明の実施例を詳しく説明するが、本
発明はこの実施例に限定されるものではない。 <実施例1>5リットルジャーファーメンターに表1に
示す組成の培地を2リットル入れ、オートクレーブによ
り、121℃で20分間滅菌後、前培養しておいたエン
テロバクター・クロアシエ ECP126株を1%移植
し、撹拌を500rpm、通気量を0.25vvm、p
Hを1NのNaOH又は1NのHClで6.5に調整し
ながら28℃で5日間通気撹拌培養を行った。
Next, embodiments of the present invention will be described in detail, but the present invention is not limited to these embodiments. <Example 1> 2 liters of a medium having the composition shown in Table 1 was placed in a 5 liter jar fermenter, sterilized in an autoclave at 121 ° C for 20 minutes, and 1% of the E. coli Enterobacter cloasier ECP126 strain which had been precultured was transplanted. Then, stirring was performed at 500 rpm, aeration amount was set at 0.25 vvm, p
While adjusting H to 6.5 with 1N NaOH or 1N HCl, aeration and stirring culture was performed at 28 ° C. for 5 days.

【0029】[0029]

【表1】 [Table 1]

【0030】得られた培養物を水で2〜4倍に希釈し、
遠心分離により菌体を除去した。得られた培養上精分を
濃縮機にて初期の培養物量以下に濃縮し、2〜3倍量の
アルコールを添加して沈殿物を回収した。この沈殿物を
10%の塩化ナトリウム水溶液に溶解させて再度2〜3
倍量のアルコールを添加し、沈殿物を回収した。この操
作を数回繰り返し、得られた白色の沈殿物を蒸留水に溶
解させて、透析を行い塩などを除去した後、凍結乾燥し
て白色の精製した多糖類を得た。
The obtained culture was diluted 2 to 4 times with water,
The cells were removed by centrifugation. The obtained culture supernatant was concentrated by a concentrator to a volume equal to or less than the initial culture volume, and a 2- to 3-fold amount of alcohol was added to collect a precipitate. This precipitate is dissolved in a 10% aqueous sodium chloride solution and again
Double volumes of alcohol were added and the precipitate was collected. This operation was repeated several times, and the obtained white precipitate was dissolved in distilled water, dialyzed to remove salts and the like, and then freeze-dried to obtain a white purified polysaccharide.

【0031】<性能の評価試験> (a) 吸水能試験 給水能力の測定にはティーバッグテスト法を用いた。即
ち、不織布で20ml程度の容積を有する容器を作り、
この容器に実施例1により得られた試料、及びヒアルロ
ン酸ナトリウム(紀文社製)及びカルボキシメチルセル
ロースの比較対照用の試料をそれぞれ約100mg入れ
た。次いで蒸留水に3時間浸した後、1時間静置を行い
余分な水を切った。これらの試料を恒量測定済みの秤量
用ビーカーに入れ吸水後の重量(吸水量+試料量)を正
確に測定した。この後、105℃で約2時間乾燥を行
い、水分を完全に蒸発させてから試料の正確な重量を測
定した。このようにして試料の各重量を測定した後、次
式により試料(乾燥)1g当たりの吸水量(g)を計算
した。 吸水量(g/g)=(吸水後の重量(g)−吸水前の重量(g))
/乾燥試料重量(g) その結果を表2に示す。
<Performance Evaluation Test> (a) Water Absorption Capacity Test A tea bag test method was used to measure the water supply capacity. That is, a container having a volume of about 20 ml is made of non-woven fabric,
About 100 mg of each of the sample obtained in Example 1 and a comparative sample of sodium hyaluronate (manufactured by Kibunsha) and carboxymethylcellulose were placed in this container. Next, after immersing in distilled water for 3 hours, the mixture was allowed to stand for 1 hour to remove excess water. These samples were placed in a weighing beaker having a constant weight measurement, and the weight after water absorption (water absorption amount + sample amount) was accurately measured. Thereafter, the sample was dried at 105 ° C. for about 2 hours to completely evaporate the water, and then the exact weight of the sample was measured. After each weight of the sample was measured in this way, the amount of water absorption (g) per 1 g of the sample (dry) was calculated by the following equation. Water absorption (g / g) = (weight after water absorption (g)-weight before water absorption (g))
/ Dry sample weight (g) The results are shown in Table 2.

【0032】[0032]

【表2】 [Table 2]

【0033】上記の結果から、実施例1で得られた多糖
類の試料はヒアルロン酸ナトリウムの1.7倍、カルボ
キシメチルセルロースの2.5倍という高い吸水力を持
つことが明らかとなった。
From the above results, it was clarified that the polysaccharide sample obtained in Example 1 had a high water absorbing power 1.7 times that of sodium hyaluronate and 2.5 times that of carboxymethyl cellulose.

【0034】(b) 保湿能試験 保湿能の評価にはデシケータ法を用いた。即ち、実施例
1で得られた試料、及びヒアルロン酸ナトリウム(紀文
社製)、グリセリン及びD−ソルビトールの比較対照用
の試料を五酸化リンを含む真空デシケーター中で一晩乾
燥し、恒量化した秤量ビンに各々100mgずつ正確に
計り取った。その後、これらの試料を20℃、相対湿度
68%に調整したデシケーター中に蓋を開けて入れ、一
定時間毎に重量を測定した。3日後、20℃、相対湿度
20%に調整したデシケーターにこれらの試料を移して
2日間重量を測定した。各測定量に基づいて次式により
吸湿量を求め、保湿能を評価した。 吸湿量(g/g)=(試料測定重量(g)−乾燥試料重量(g))
/乾燥試料重量(g) その結果を図2に示す。図2の結果から明らかなよう
に、実施例1で得られた多糖類の試料は一般に高級保湿
剤として用いられているヒアルロン酸ナトリウムと同程
度の保湿能を示した。またグリセリンは相対湿度の変化
に伴い保湿率が急激に変化したが、この多糖類はヒアル
ロン酸ナトリウムと同様に保湿能が湿度の変化によって
影響を受けにくいということが示唆された。
(B) Moisturizing ability test The desiccator method was used for evaluating the moisturizing ability. That is, the sample obtained in Example 1 and a sample for comparison of sodium hyaluronate (manufactured by Kibunsha), glycerin and D-sorbitol were dried overnight in a vacuum desiccator containing phosphorus pentoxide to be constant weight. 100 mg each was accurately weighed into a weighing bottle. Thereafter, these samples were placed in a desiccator adjusted to 20 ° C. and a relative humidity of 68% with the lid opened, and the weight was measured at regular intervals. Three days later, these samples were transferred to a desiccator adjusted to 20 ° C. and a relative humidity of 20%, and weighed for 2 days. Based on each measured amount, the amount of moisture absorption was determined by the following formula, and the moisture retention was evaluated. Moisture absorption (g / g) = (Sample weight (g)-Dry sample weight (g))
/ Dry sample weight (g) The results are shown in FIG. As is clear from the results of FIG. 2, the sample of the polysaccharide obtained in Example 1 showed the same level of moisturizing ability as sodium hyaluronate, which is generally used as a high-grade humectant. Glycerin also showed a rapid change in moisture retention with changes in relative humidity, suggesting that this polysaccharide, like sodium hyaluronate, is less likely to be affected by moisture changes in moisture retention.

【0035】(c) 乳化安定性試験 実施例1で得られた試料、及び比較対照用の試料である
カラギーナンとヒアルロン酸ナトリウムの1%水溶液を
各々ホモミキサーで10,000rpmで撹拌しながら
等量のオリーブオイルを徐々に加え、すべて加え終わっ
た後、更に5分間撹拌して静置した。乳化直後では、実
施例1で得られた試料及び比較対照用のカラギーナン、
ヒアルロン酸ともに白色のクリーム状の乳化液であっ
た。しかし、カラギーナンの場合、2時間静置後で水層
の出現が認められ、120時間静置後では、水層が全液
高の約1/3に達した。また、ヒアルロン酸は170時
間静置後に水層の出現が認められた。一方、実施例1で
得られた試料の場合、170時間静置しても全く層分離
は認められなかった。従って、実施例1で得られた多糖
類は、オリーブオイルに対して、比較対照用のカラギー
ナン、ヒアルロン酸よりも優れた乳化安定性を有してい
ることが判明した。
(C) Emulsion stability test Equal amounts of the sample obtained in Example 1 and a 1% aqueous solution of carrageenan and sodium hyaluronate, which are samples for comparison, were stirred with a homomixer at 10,000 rpm. Olive oil was gradually added, and after all the addition was completed, the mixture was further stirred for 5 minutes and allowed to stand. Immediately after emulsification, the sample obtained in Example 1 and carrageenan for comparison,
Both hyaluronic acids were white cream emulsions. However, in the case of carrageenan, the appearance of an aqueous layer was observed after standing for 2 hours, and after standing for 120 hours, the aqueous layer reached about 1/3 of the total liquid height. In addition, the appearance of an aqueous layer of hyaluronic acid was observed after standing for 170 hours. On the other hand, in the case of the sample obtained in Example 1, no layer separation was observed even after standing for 170 hours. Therefore, it was found that the polysaccharide obtained in Example 1 had better emulsion stability to olive oil than carrageenan and hyaluronic acid for comparison.

【0036】(d) pHと粘度の関係確認試験 実施例1で得られた試料をゲル状態の0.5%水溶液と
して水溶液のpHを各々2,4,5,6,7,8,9,
10,12に調整した。粘度はB型粘度計を用い、測定
温度25℃、ローターNo.11、12rpmの条件で
測定した。その結果を図3に示す。図3から明らかなよ
うに、水溶液はpH5〜10において非常に高い粘度安
定性を示した。
(D) Test for confirming the relationship between pH and viscosity The sample obtained in Example 1 was used as a 0.5% aqueous solution in a gel state, and the pH of the aqueous solution was adjusted to 2, 4, 5, 6, 7, 8, 9, and 9, respectively.
It was adjusted to 10,12. The viscosity was measured using a B-type viscometer at a measurement temperature of 25 ° C. The measurement was performed under the conditions of 11, 12 rpm. The result is shown in FIG. As is clear from FIG. 3, the aqueous solution showed very high viscosity stability at pH 5-10.

【0037】(e) 温度と粘度の関係確認試験 実施例1で得られた試料をゲル状態の0.5%水溶液と
して水溶液の温度を各々10,20,40,60,80
℃に調整した。粘度はB型粘度計を用い、ローターN
o.11、12rpmの条件で測定した。その結果を図
4に示す。図4から明らかなように、温度の上昇ととも
に水溶液の粘度は低下した。
(E) Test for Confirming Relationship between Temperature and Viscosity The sample obtained in Example 1 was used as a 0.5% aqueous solution in a gel state, and the temperatures of the aqueous solutions were adjusted to 10, 20, 40, 60, and 80, respectively.
Adjusted to ° C. The viscosity was measured using a B-type viscometer.
o. The measurement was performed under the conditions of 11, 12 rpm. FIG. 4 shows the results. As is clear from FIG. 4, the viscosity of the aqueous solution decreased with increasing temperature.

【0038】(f) 塩濃度と粘度の関係確認試験 実施例1で得られた試料をゲル状態の0.5%水溶液と
した後、塩化ナトリウム及び塩化カルシウムの2種類の
塩をそれぞれ加え、各塩濃度を0,0.05,0.1,
0.25,0.5,1.0%の6段階に調整した。塩濃
度の異なる水溶液の粘度をB型粘度計を用い、測定温度
25℃、ローターNo.11、12rpmの条件で測定
した。その結果を図5に示す。図5から明らかなよう
に、ナトリウム塩、カルシウム塩を水溶液に添加するこ
とによって水溶液の粘度が急激に低下した。ナトリウム
塩は添加量が増加しても粘度の低下はほぼ一定であった
が、カルシウム塩は添加濃度が増加すると若干粘度の回
復が見られた。
(F) Test for Confirming Relationship between Salt Concentration and Viscosity The sample obtained in Example 1 was converted into a 0.5% aqueous solution in a gel state, and then two kinds of salts of sodium chloride and calcium chloride were added. Salt concentration of 0,0.05,0.1,
The adjustment was made in six steps of 0.25, 0.5 and 1.0%. The viscosity of aqueous solutions having different salt concentrations was measured using a B-type viscometer at a measurement temperature of 25 ° C. The measurement was performed under the conditions of 11, 12 rpm. The result is shown in FIG. As is clear from FIG. 5, the viscosity of the aqueous solution sharply decreased by adding the sodium salt and the calcium salt to the aqueous solution. The decrease in viscosity of the sodium salt was almost constant even when the amount of the sodium salt was increased, but the viscosity of the calcium salt slightly recovered as the concentration of the sodium salt was increased.

【0039】(g) 実施例1で得られた多糖類を用いた化
粧水の評価試験 実施例1で得られた多糖類の試料を表3に示す組成の化
粧水に0.5%添加し、ジェル状にしたものと無添加の
ものを用い、モニタリングを行った。
(G) Evaluation Test of Lotion Using Polysaccharide Obtained in Example 1 A 0.5% sample of the polysaccharide obtained in Example 1 was added to a lotion having the composition shown in Table 3. The gel was used for monitoring, and the gel was used for monitoring.

【0040】[0040]

【表3】 [Table 3]

【0041】その結果、無添加の化粧水に比べて実施例
1で得られた多糖類を添加したものは、ジェル状である
ため扱いやすく、伸びもよく、べたつきがなく肌がすべ
すべしたという意見が多く得られた。またしっとり感も
あるという意見から保湿性の高さが示された。
As a result, the opinion that the product containing the polysaccharide obtained in Example 1 was easy to handle because it was in the form of a gel, had good stretchability, had no stickiness, and had a smooth skin, as compared with the non-added lotion. Many were obtained. In addition, the opinion that there is a moist feeling showed the high moisturizing property.

【0042】[0042]

【発明の効果】以上述べたように、本発明によれば、吸
水、吸湿、保湿、増粘、乳化安定の各性能に優れ、べた
つき感が少なく、肌のすべすべ感やしっとり感のある多
糖類が得られる。このため、この多糖類を成分として含
ませれば、べたつき感の少ない吸水剤、吸湿剤、保湿
剤、増粘剤又は乳化安定剤が得られる。これらの吸水剤
等を化粧品に配合すれば、べたつき感が少なく、肌のす
べすべ感やしっとり感のある優れた化粧品が得られる。
As described above, according to the present invention, polysaccharides that are excellent in water absorption, moisture absorption, moisture retention, thickening, and emulsification stability, have a low stickiness, and have a smooth and moist feeling on the skin. Is obtained. Therefore, when this polysaccharide is contained as a component, a water absorbing agent, a hygroscopic agent, a humectant, a thickener or an emulsion stabilizer having less sticky feeling can be obtained. When these water absorbing agents and the like are blended into cosmetics, excellent cosmetics with less sticky feeling and smooth and moist feeling on the skin can be obtained.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図1】本発明の多糖類の赤外吸収スペクトルを示す
図。
FIG. 1 shows an infrared absorption spectrum of the polysaccharide of the present invention.

【図2】実施例1で得られた多糖類の吸湿及び保湿能力
を示す図。
FIG. 2 is a graph showing the ability of the polysaccharide obtained in Example 1 to absorb and retain moisture.

【図3】実施例1で得られた多糖類の粘度に及ぼすpH
の影響を示す図。
FIG. 3 shows the effect of pH on the viscosity of the polysaccharide obtained in Example 1.
FIG.

【図4】実施例1で得られた多糖類の粘度に及ぼす温度
の影響を示す図。
FIG. 4 is a graph showing the effect of temperature on the viscosity of the polysaccharide obtained in Example 1.

【図5】実施例1で得られた多糖類の粘度に及ぼすナト
リウム塩及びカルシウム塩の濃度の影響を示す図。
FIG. 5 is a graph showing the effect of the concentration of sodium salt and calcium salt on the viscosity of the polysaccharide obtained in Example 1.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 FI B01F 17/56 B01F 17/56 C09K 3/00 C09K 3/00 C12P 19/04 C12P 19/04 C //(C12P 19/04 C12R 1:01) ────────────────────────────────────────────────── ─── Continued on the front page (51) Int.Cl. 6 Identification symbol FI B01F 17/56 B01F 17/56 C09K 3/00 C09K 3/00 C12P 19/04 C12P 19/04 C // (C12P 19/04 C12R 1:01)

Claims (13)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 D−グルコース、L−フコース、D−ガ
ラクトース、D−マンノース及びD−グルクロン酸を構
成糖とし、酢酸、ピルビン酸及びコハク酸を構成有機酸
とし、ゲル濾過クロマトグラフィーで測定した平均分子
量が1200万(プルラン等量)である多糖類。
1. D-glucose, L-fucose, D-galactose, D-mannose and D-glucuronic acid are used as constituent sugars, and acetic acid, pyruvic acid and succinic acid are used as constituent organic acids and measured by gel filtration chromatography. A polysaccharide having an average molecular weight of 12 million (equivalent to pullulan).
【請求項2】 構成糖のモル比が、D−グルコース:L
−フコース:D−ガラクトース:D−マンノース:D−
グルクロン酸=(22〜28):(49〜55):(3
3〜39):1:(4〜5)であり、構成有機酸のモル
比が、酢酸:ピルビン酸:コハク酸=(20〜27):
(11〜16):1である請求項1記載の多糖類。
2. The molar ratio of constituent sugars is D-glucose: L.
-Fucose: D-galactose: D-mannose: D-
Glucuronic acid = (22-28) :( 49-55) :( 3
3-39): 1: (4-5), and the molar ratio of the constituent organic acids is acetic acid: pyruvic acid: succinic acid = (20-27):
2. The polysaccharide according to claim 1, wherein (11-16): 1.
【請求項3】 エンテロパクター属に属しかつ請求項1
又は2記載の多糖類を菌体外に生産する微生物を培養
し、その培養液から前記多糖類を採取することを特徴と
する多糖類の製造方法。
3. The method according to claim 1, wherein the genus belongs to the genus Enterobacter.
Or a method for producing a polysaccharide, which comprises culturing a microorganism producing the polysaccharide according to 2 outside the cells, and collecting the polysaccharide from the culture solution.
【請求項4】 塩化ナトリウムを1〜2%含有する培地
で微生物を培養する請求項3記載の多糖類の製造方法。
4. The method for producing a polysaccharide according to claim 3, wherein the microorganism is cultured in a medium containing 1 to 2% of sodium chloride.
【請求項5】 微生物がエンテロバクター・クロアシエ
である請求項3又は4記載の多糖類の製造方法。
5. The method for producing a polysaccharide according to claim 3, wherein the microorganism is Enterobacter cloasis.
【請求項6】 エンテロバクター・クロアシエがエンテ
ロバクター・クロアシエ ECP126株又はその変異
株である請求項5記載の多糖類の製造方法。
6. The method for producing a polysaccharide according to claim 5, wherein the Enterobacter cloasis is Enterobacter cloasis ECP126 strain or a mutant thereof.
【請求項7】 エンテロバクター・クロアシエ ECP
126株又はその変異株。
7. Enterobacter cloasier ECP
126 strains or mutants thereof.
【請求項8】 請求項2記載の多糖類を成分とする吸水
剤。
8. A water absorbing agent comprising the polysaccharide according to claim 2 as a component.
【請求項9】 請求項2記載の多糖類を成分とする吸湿
剤。
9. A hygroscopic agent comprising the polysaccharide according to claim 2 as a component.
【請求項10】 請求項2記載の多糖類を成分とする保
湿剤。
10. A humectant comprising the polysaccharide according to claim 2 as a component.
【請求項11】 請求項2記載の多糖類を成分とする増
粘剤。
11. A thickener comprising the polysaccharide according to claim 2 as a component.
【請求項12】 請求項2記載の多糖類を成分とする乳
化安定剤。
12. An emulsion stabilizer comprising the polysaccharide according to claim 2 as a component.
【請求項13】 請求項8記載の吸水剤、請求項9記載
の吸湿剤、請求項10記載の保湿剤、請求項11記載の
増粘剤又は請求項12記載の乳化安定剤を配合した化粧
品。
13. A cosmetic comprising the water absorbing agent according to claim 8, the hygroscopic agent according to claim 9, the humectant according to claim 10, the thickener according to claim 11, or the emulsion stabilizer according to claim 12. .
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